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Imunologia Básica
Imunologia Básica
O SISTEMA IMUNOLGICO
Neste captulo ser feita uma reviso sobre o sistema imunolgico
dos animais vertebrados visando fundamentar os aspectos
biolgicos necessrios ao desenvolvimento e formalizao da
engenharia imunolgica como um novo paradigma de computao.
A nfase dada a uma viso sistmica da imunologia, tentando
apresentar uma perspectiva de processamento de informao, como
arquitetura, mecanismos e princpios imunolgicos incorporados.
Particular ateno ser dada ao princpio da seleo clonal e aos
mecanismos de maturao de afinidade, alm da teoria da rede
imunolgica.
Mente e sade . . . O homem o nico ser
vivo capaz de ser seu prprio agente
agressor, atravs de seus pensamentos,
angstias e inseguranas diante da vida
L. V. Bonamin
2.1.
Introduo
informaes dos agentes infecciosos e disponibiliz-las para uso futuro em casos de novas
infeces pelos mesmos agentes ou agentes similares.
Este captulo visa introduzir no apenas aqueles conceitos do sistema imunolgico
utilizados no desenvolvimento da engenharia imunolgica, mas tambm apresentar uma
viso genrica dos principais elementos e processos envolvidos em uma resposta imune, de
forma que o leitor adquira subsdios para compreender outras abordagens de sistemas
imunolgicos artificiais.
O captulo inicia com um breve histrico da pesquisa em imunologia, seguido de uma viso
geral dos princpios e mecanismos de defesa do sistema imune, enfatizando o sistema
adaptativo. O captulo concludo com um estudo sobre a teoria da rede imunolgica.
2.2.
A imunologia uma cincia relativamente nova. Sua origem atribuda Edward Jenner,
que descobriu, h aproximadamente 200 anos, em 1796, que a vacnia (ou cowpox), induzia
proteo contra a varola, uma doena freqentemente fatal. Jenner batizou seu processo de
vacinao, uma expresso ainda utilizada para descrever a inoculao de indivduos sos,
com amostras atenuadas ou mortas de agentes causadores de doenas, objetivando a
proteo futura contra a enfermidade (Janeway et al., 2000).
Quando Jenner introduziu a vacinao, ele nada sabia sobre os agentes infecciosos que
causam as doenas. No sculo XIX, Robert Koch provou que as doenas infecciosas eram
causadas por microorganismos patognicos, cada qual responsvel por uma determinada
enfermidade ou patologia. Atualmente, existem quatro grandes categorias de
microorganismos causadores de doena ou patgenos: os vrus, as bactrias, os fungos e os
parasitas.
As descobertas de Koch e outros pesquisadores do sculo XIX possibilitaram o
desenvolvimento da imunologia, estendendo a vacinao para outras doenas. Por volta de
1880, Louis Pasteur projetou com sucesso uma vacina contra a clera aviria e desenvolveu
uma vacina anti-rbica tambm bem sucedida na inoculao de uma criana mordida por
um co raivoso. Tantos triunfos prticos resultaram na busca pelos mecanismos de proteo
imunolgica.
Pasteur, embora bem sucedido no desenvolvimento de vacinas, possua muito pouco
conhecimento sobre os mecanismos envolvidos no processo de imunizao. Ele sugeriu que
organismos na vacina eram capazes de remover nutrientes essenciais do corpo e, assim,
evitar o crescimento e proliferao dos agentes causadores de doena. Aproximadamente
dez anos mais tarde, em 1890, Emil von Behring e Shibasaburo Kitasato demonstraram que
a proteo induzida pelos processos de vacinao no se devia a remoo de nutrientes, mas
estavam associadas ao surgimento de fatores de proteo no soro dos indivduos vacinados.
Estas substncias foram denominadas de anticorpos, as quais se ligavam especificamente e
eram capazes de neutralizar os agentes infecciosos. Emil von Behring recebeu, em 1901, o
primeiro prmio Nobel em medicina pelo seu trabalho sobre a produo de anticorpos
(Tizard, 1995).
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Dessa forma, ele contribuiu para resolver um importante dilema da imunologia: Como,
partindo de um genoma finito, possvel sintetizar uma diversidade de receptores capaz de
reconhecer uma variedade praticamente infinita de agentes patognicos?. Este trabalho
garantiu mais um prmio Nobel para a imunologia no ano de 1987.
Nos ltimos anos, grande parte dos estudos em imunologia tem se concentrado nos
problemas da apoptose celular, apresentao de antgenos, citocinas, regulao e
maturao da resposta imune, memria imunolgica, doenas auto-imunes, vacinas de
DNA e sinalizao intra- e intercelular.
Dentre os principais desafios da imunologia para o sculo XXI, Abbas & Janeway (2000)
destacam o aumento da compreenso dos mecanismos de controle da resposta imune
adaptativa, de forma que seja possvel convert-la de um estado agressivo para um estado
benigno em situaes como resposta a alrgenos, antgenos prprios (doenas auto-imunes)
e tecidos transplantados. Alm disso, um aumento na eficcia das respostas a certos vrus
como do HIV, malria, tuberculose e a alguns tumores tambm poderia ser alcanado
atravs da manipulao da resposta imune adaptativa.
A Tabela 2.1 resume as principais tendncias e seus respectivos pesquisadores no campo da
imunologia at o incio dos anos 90.
Tabela 2.1.
Tendncias
Aplicao
Descrio
Perodo
Pioneiros
Noes
Jenner E
1796-1870 Koch R
Imunizao
Patologia
Pasteur L
1870-1890 Metchnikoff E
Imunizao
Fagocitose
Anticorpos
Receptores celulares
Bordet J
1910-1930 Landsteiner K
Breinl & Haurowitz
1930-1950 Pauling L
Mecanismos
(Sistema)
1950-1980 Burnet J & Talmage
Jerne N
Especificidade/Complemento
Haptenos/Tipos sangneos
Sntese de anticorpos
Instrucionismo
Molecular
Estrutura e diversidade de
receptores de antgenos
1980-1990 Tonegawa S
Seleo clonal
Rede e interao celular
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2.3.
Imunidade
Inata
Granulcitos
Neutrfilos
Figura 2.1.
Eosinfilos
Macrfagos
Basfilos
Adaptativa
Linfcitos
Clula B
Clula T
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Neutrfilo
Figura 2.2.
Eosinfilo
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Basfilo
Os linfcitos que medeiam uma resposta imune adaptativa so responsveis por reconhecer
e eliminar os agentes patognicos, proporcionando a imunidade duradoura, a qual pode
ocorrer aps a exposio a uma doena ou vacinao. A grande maioria dos linfcitos
encontra-se em estado inativo, e possuiro atividade quando houver algum tipo de interao
com um estmulo antignico, necessrio para a ativao e proliferao linfocitria. Existem
dois tipos principais de linfcitos: linfcitos B (ou clulas B) e linfcitos T (ou clulas T),
como ilustrado na Figura 2.1. As clulas B e T expressam, em suas superfcies, receptores
de antgeno altamente especficos para um dado determinante antignico (Seo 2.7).
Enquanto a resposta imune adaptativa resulta na imunidade contra a re-infeco ao mesmo
agente infectante, a resposta imune inata permanece constante ao longo da vida de um
indivduo, independente da exposio ao antgeno (Scroferneker & Pohlmann, 1998). Esta
uma importante diferena entre a resposta adaptativa e a resposta inata. Em conjunto, os
sistemas inato e adaptativo contribuem para uma defesa notavelmente eficaz, garantindo
que, embora passemos nossas vidas cercados por germes potencialmente patognicos,
apresentemos resistncia s enfermidades. Devido grande importncia do sistema imune
adaptativo, ele ser estudado em maiores detalhes na Seo 2.6.
2.4.
Nosso corpo protegido por uma grande variedade de clulas e molculas que operam em
harmonia, sendo que o alvo principal de uma resposta imunolgica o antgeno (Ag). A
Figura 2.3 apresenta um esquema simplificado dos principais mecanismos de
reconhecimento e ativao do sistema imunolgico.
Clulas apresentadoras de antgeno (APCs) especializadas, como macrfagos, circulam
pelo corpo ingerindo e digerindo os patgenos encontrados, fragmentando-os em peptdeos
antignicos (Nossal, 1993) (I). Partes destes peptdeos se ligam a molculas do complexo de
histocompatibilidade principal (MHC major histocompatibility complex) e so
apresentados na superfcie celular (II) sob a forma de um complexo MHC/peptdeo (Seo
2.7.2). As clulas T possuem receptores de superfcie (Figura 2.6(b)) que tm a funo de
reconhecer diferentes complexos MHC/peptdeo (III). Uma vez ativados pelo
reconhecimento MHC/peptdeo, as clulas T se dividem e secretam linfocinas (sinais
qumicos) que mobilizam outros componentes do sistema imunolgico (IV). Diferente dos
receptores das clulas T, entretanto, os receptores das clulas B so capazes de reconhecer
partes livres solveis dos antgenos, sem as molculas do MHC (V). As clulas B, que
tambm possuem molculas receptoras de especificidade nica em suas superfcies,
respondem a estes sinais.
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Protena de MHC
Patgeno
(I)
APC
Peptdeo
( II )
Clula T ( III )
(V)
Clula B
( IV )
Clula T ativa
Linfocinas
( VI )
Clula B ativa
(plasmcito)
( VII )
Figura 2.3.
2.5.
Os tecidos e rgos que compem o sistema imunolgico esto distribudos por todo o
nosso corpo. So conhecidos como rgos linfides, uma vez que esto relacionados com a
produo, crescimento e desenvolvimento dos linfcitos. Nos rgos linfides, os linfcitos
interagem com diversos tipos de clulas, seja durante seu processo de maturao, seja
durante o incio de uma resposta imune adaptativa. Os rgos linfides podem ser divididos
em primrios (ou centrais), responsveis pela produo e maturao de linfcitos, e
secundrios (ou perifricos) nos quais os linfcitos encontram os estmulos antignicos,
iniciando as respostas adaptativas.
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rgos linfides
primrios
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rgos linfides
secundrios
Amgdalas e
adenides
Timo
Bao
Placas de Peyer
Apndice
Medula ssea
Linfonodos
Vasos linfticos
Figura 2.4.
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Patgenos
Pele
Barreiras
bioqumicas
Fagcito
Resposta
imune
inata
Linfcitos
Resposta
imune
adaptativa
Figura 2.5.
Vasos linfticos: rede de canais que transporta a linfa para o sangue e rgos
linfides. Os vasos aferentes drenam o lquido dos tecidos e carregam as clulas
portadoras dos antgenos dos locais de infeco para os rgos linfticos
(linfonodos). Nos linfonodos, as clulas apresentam o antgeno aos linfcitos que
esto recirculando, os quais elas ajudam a ativar. Uma vez que estes linfcitos
especficos passaram por um processo de proliferao e diferenciao, eles deixam
os linfonodos como clulas efetoras atravs dos vasos linfticos eferentes.
Barreiras fsicas: a pele funciona como uma espcie de escudo protetor contra os
invasores, sejam estes malficos ou no. O sistema respiratrio tambm ajuda na
manuteno dos antgenos distantes. Seus mecanismos de defesa incluem a
apreenso de pequenas partculas nos plos e mucosas nasais e a remoo de
elementos via tosse e espirros. A pele e as membranas que fazem parte do sistema
respiratrio e digestivo tambm contm macrfagos e anticorpos;
Barreiras bioqumicas: fluidos como a saliva, o suor e as lgrimas contm enzimas
como a lisozima. Os cidos estomacais eliminam grande parte dos microorganismos
ingeridos junto com a comida e a gua. O pH e a temperatura corporais podem
apresentar condies de vida desfavorveis para alguns microorganismos invasores;
Sistema imune inato: a primeira linha de defesa contra muitos microorganismos
comuns. Ele formado por clulas fagocitrias, como os macrfagos e os
neutrfilos (Figura 2.1), alm de fatores solveis como o complemento e algumas
enzimas. As clulas do sistema imune inato desempenham um papel crucial na
iniciao e posterior direcionamento das respostas imunes adaptativas,
principalmente devido ao fato de que as respostas adaptativas demoram um certo
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perodo de tempo (da ordem de dias) para exercer seus efeitos. Portanto, a resposta
inata apresenta um papel muito importante no controle das infeces durante esse
tempo;
2.6.
Sistema imune adaptativo: Devido grande importncia deste sistema, ele ser
discutido separadamente a seguir.
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tipo de anticorpo ligado membrana e atuando como receptor de antgeno. Aps a ligao
do anticorpo de superfcie ao antgeno, a clula ativada para proliferar e produzir uma
numerosa prole, conhecida como clone. Essas clulas secretam anticorpos com uma
especificidade idntica do receptor de superfcie. Este princpio recebeu o nome de teoria
da seleo clonal, e constitui a parte central da imunidade adaptativa. Suas implicaes
para o processo de aprendizagem e memria imunolgica so muitas, razo pela qual a
seleo clonal ser estudada separadamente na Seo 2.8.
2.7.
Reconhecimento de Padres
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BCR ou Anticorpo
Clula B
Figura 2.6.
(a)
(b)
Linfcito B. (a) Clula B com destaque para a molcula de anticorpo em sua
superfcie (Seo 2.7.1). (b) A poro de um antgeno que reconhecida por um
anticorpo chamada eptopo. Enquanto os anticorpos so monoespecficos, os
antgenos podem apresentar vrios eptopos distintos.
Existem duas grandes classes de molculas de MHC (Germain, 1994, 1995), chamados de
MHC classe I (MHC-I) e MHC classe II (MHC-II). As molculas de classe I so
encontradas em todas as clulas, enquanto as molculas de classe II so encontradas em um
conjunto de clulas chamadas clulas apresentadoras de antgeno (APC), como por
exemplo as clulas B, os macrfagos e as clulas dendrticas (Banchereau & Steinman,
1998). As clulas T citotxicas reconhecem antgenos ligados a molculas de MHC-I,
permitindo a deteco de clulas infectadas por vrus. As clulas T auxiliares interagem
com antgenos ligados ao MHC-II. As clulas apresentadoras de antgeno capturam uma
protena antignica do ambiente e a processam (ingesto e digesto) de forma a cort-la em
pequenos fragmentos chamados peptdeos. Alguns destes peptdeos ou fragmentos
peptdicos ligam-se a uma molcula de MHC-II e o complexo MHC/peptdeo
transportado para a superfcie da APC, onde ele pode interagir com uma clula T auxiliar
(TH). Este processo est ilustrado na Figura 2.7.
TCR
Protena de MHC-II
Patgeno
APC
Peptdeo
Clula T
Clula TH
Complexo MHC/peptdeo
(a)
Figura 2.7.
(b)
Linfcito T. (a) Clula T com destaque para o TCR (Seo 2.7.2). (b) O receptor de
clula T (TCR) se liga ao complexo formado por uma molcula de MHC prprio
mais um peptdeo antignico.
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2.7.1.
Regies de ligao ao
antgeno
VH
VH
VL
VL
CH
Fab
CH
CL
CL
CH
Fab
CH
Fc
Figura 2.8.
Engenharia Imunolgica
...
...
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...
Rearranjo gnico
V
D J
DNA rearranjado
Transcrio
V
D J
RNA
Splicing
V
D J
mRNA
Translao
Cadeia pesada da imunoglobulina
Figura 2.9.
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2.7.2.
Existem quatro cadeias polipeptdicas que podem formar dois tipos de TCR, cada qual
contendo duas destas quatro cadeias. Duas cadeias polipeptdicas esto ligadas por uma
ponte dissulfdrica, numa estrutura semelhante a um fragmento Fab de imunoglobulina,
como ilustrado na Figura 2.10. A diversidade da regio-V de um TCR gerada de forma
similar diversidade das molculas de imunoglobulina, porm com algumas caractersticas
distintas (Tizard, 1995).
As quatro cadeias polipeptdicas de um TCR esto codificadas por quatro bibliotecas
distintas de genes (, , e ) que se assemelham aos segmentos gnicos que codificam as
cadeias leve e pesada de uma molcula de imunoglobulina. Todas as quatro bibliotecas
contm segmentos gnicos V, J e C, e as bibliotecas e tambm contm segmentos D.
Outra diferena das bibliotecas gnicas das molculas de imunoglobulina que cada
biblioteca gnica do TCR apresenta dois genes de regio-C. Nas bibliotecas / estes dois
genes da regio-C so funcionalmente e estruturalmente diferentes, de forma que um
codifica a regio constante (C) e outro codifica a regio constante (C). Todas as
clulas TH e TK rearranjam e expressam genes e , enquanto uma pequena subpopulao
utiliza genes e (Tizard, 1995).
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Regio-V
Regio-C
Clula T
Figura 2.10. Um TCR formado por duas das quatro cadeias polipeptdicas , , e , sendo que
cada cadeia contm uma poro semelhante ao domnio constante e uma poro
semelhante ao domnio varivel da molcula de imunoglobulina.
2.8.
Uma vez que cada clula apresenta um padro (forma) distinto de receptor antignico, o
nmero de linfcitos que pode se ligar a um determinado antgeno restrito. A fim de
produzir clulas efetoras especficas em quantidade suficiente para combater uma infeco,
um linfcito ativado deve se proliferar antes que sua prole se diferencie em clulas efetoras.
O princpio (ou teoria) da seleo (ou expanso) clonal est associado s caractersticas
bsicas de uma resposta imune adaptativa a um estmulo antignico. Ele estabelece que
apenas aquela clula capaz de reconhecer um determinado estmulo antignico ir se
proliferar, sendo, portanto, selecionada em detrimento das outras.
Quando um animal exposto a um antgeno, uma subpopulao de linfcitos (clulas B)
responde atravs da produo de anticorpos. Cada clula secreta um nico tipo de
anticorpo, que relativamente especfico para o antgeno. Atravs da ligao do antgeno
com o receptor da clula B e, dado um segundo sinal (ou sinal co-estimulatrio) de clulas
acessrias como a clula TH, um antgeno estimula a clula B a se proliferar (dividir) e
transformar-se em uma clula terminal capaz de secretar anticorpos em altas taxas. Estas
clulas so chamadas de plasmcitos.
As clulas B, alm de se proliferar e diferenciar em plasmcitos, tambm podem se
diferenciar em clulas B de memria, caracterizadas por longos perodos de vida. As
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Deleo clonal
(seleo negativa)
Antgeno prprio
M
Proliferao
Anticorpo
Clulas de memria
Seleo
Diferenciao
Plasmcitos
Antgenos estranhos
Antgeno prprio
Deleo clonal
(seleo negativa)
Figura 2.11. Esquema do princpio da seleo clonal. Os formatos distintos dos receptores
celulares (anticorpos) correspondem a representaes pictricas distintas. Durante o
processo de gerao do repertrio linfocitrio, algumas clulas so portadoras de
receptores que se ligam a antgenos prprios sendo, portanto, eliminadas
precocemente no desenvolvimento, antes que sejam capazes de responder,
assegurando uma tolerncia aos antgenos prprios. Quando o antgeno interage com
o receptor num linfcito maduro, tal clula ativada e comea a se dividir. Originase um clone de prognie idntica, que ir se diferenciar em clulas efetoras
(plasmcitos) e de memria.
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2.8.1.
Para que o sistema imunolgico seja capaz de proteger nosso organismo, o reconhecimento
antignico no suficiente: tambm preciso que haja recursos suficientes para montar
uma resposta imunolgica efetiva contra os agentes patognicos. Como em situaes presapredador tpicas, o tamanho da subpopulao de linfcitos, ou seja, o tamanho do clone
especfico para o antgeno, em relao ao tamanho da populao de antgenos, crucial na
determinao do resultado da infeco. A aprendizagem imunolgica envolve o aumento
do tamanho da populao e afinidade Ag-Ab (antgeno-anticorpo) de linfcitos que
reconheceram determinado antgeno. Como o nmero total de linfcitos do sistema
imunolgico regulado, um aumento no tamanho de alguns clones especficos resulta na
reduo do tamanho de outros clones. Entretanto, o nmero total de linfcitos no
permanece absolutamente constante. Se o sistema imunolgico aprendesse apenas pelo
crescimento populacional de alguns clones especficos, ele deveria esquecer alguns
antgenos aprendidos previamente, aumentar o tamanho global do sistema ou
constantemente reduzir a quantidade de clulas geradas aleatoriamente e responsveis pela
introduo e manuteno da diversidade populacional (Perelson & Weisbuch, 1997).
Durante a evoluo do sistema imunolgico, um organismo encontra um dado antgeno
repetidas vezes. Uma resposta imune adaptativa exposio inicial de um dado antgeno
composta por um conjunto pequeno de clones de clulas B, cada um produzindo anticorpos
de diferentes especificidades (afinidades). A eficincia da resposta adaptativa a encontros
secundrios poderia ser consideravelmente aumentada atravs do armazenamento de clulas
produtoras de anticorpos com alta afinidade quele antgeno, denominadas de clulas de
memria, de forma que se tenha um grande clone inicial nos encontros subsequentes (Ada
& Nossal, 1987). Ao invs de partir do comeo toda vez que um dado estmulo
antignico apresentado, essa estratgia garante que a velocidade e eficcia da resposta
imunolgica se aperfeioe aps cada infeco (Perelson et al., 1978, Farmer et al., 1986).
Este esquema caracterstico de uma estratgia de aprendizagem por reforo (Sutton &
Barto, 1998), onde o sistema est continuamente melhorando a capacidade de executar sua
tarefa (Seo 4.2.1.2.3).
Para ilustrar a resposta (memria) imunolgica, considere que um antgeno Ag1
introduzido em um animal em um tempo 0. Poucos anticorpos especficos a Ag1 estaro
26
presentes no soro e, aps uma fase de latncia, os anticorpos contra o antgeno Ag1
comeam a aumentar em concentrao e afinidade at um certo nvel e, assim que a
infeco eliminada sua concentrao comea a cair (resposta primria). Quando outro
antgeno Ag2 (diferente de Ag1) introduzido, o mesmo padro de resposta apresentado,
mas para um tipo de anticorpo de especificidade distinta daquela apresentada pelos
anticorpos que reconheceram Ag1, demonstrando a especificidade da resposta imune
adaptativa. Por outro lado, uma caracterstica importante da memria imunolgica sua
associatividade: clulas B adaptadas a um certo tipo de antgeno Ag1 apresentam uma
resposta secundria mais rpida e eficiente no somente a Ag1, mas tambm a um antgeno
estruturalmente relacionado como, por exemplo, Ag1. Este fenmeno chamado de reao
imunolgica cruzada, ou resposta reativa cruzada (cross-reactive response)
(Hoffmann, 1986; Ada & Nossal, 1987; Sprent, 1994; Smith et al., 1997; Hodgkin, 1998;
Mason, 1998). Esta memria associativa chamada de capacidade de generalizao, ou
simplesmente generalizao, na literatura de redes neurais artificiais (Haykin, 1999). A
Figura 2.12 ilustra as respostas primria, secundria e reativa cruzada.
Comparando-se a resposta primria com a secundria, esta ltima caracterizada por uma
fase de latncia menor, e uma maior e mais prolongada taxa de produo de anticorpos.
Alm disso, uma dose de antgenos substancialmente menor do que a requerida para iniciar
uma resposta primria pode desencadear uma resposta secundria.
Concentrao de
Anticorpos
Resposta Reativa
Cruzada
Resposta Secundria
Resposta Primria
Latncia
Latncia
Resposta
a Ag1
Latncia
Resposta
a Ag1
...
...
Antgeno Ag1
Antgenos
Ag1, Ag2
...
Resposta a
Ag1
Resposta
a Ag2
...
Antgeno
Ag1
Tempo
Figura 2.12. Resposta imunolgica primria, secundria e reativa cruzada. Depois que um
antgeno Ag1 visto uma vez (resposta primria), encontros subsequentes com o
mesmo antgeno, ou um antgeno similar Ag1 (reao cruzada), provocar uma
resposta mais rpida e eficiente (resposta secundria), no apenas a Ag1, mas
tambm a Ag1. As respostas primrias a antgenos distintos (Ag1 e Ag2) so similares.
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2.8.2.
Maturao de Afinidade
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Mutaes pontuais;
Pequenas delees; e
Troca no recproca de sequncias, seguindo uma converso gentica.
Mutaes aleatrias so introduzidas nos genes da regio-V durante a expanso clonal dos
linfcitos B e ocasionalmente uma dessas mudanas ir provocar um aumento da afinidade
do anticorpo ao estmulo antignico que o selecionou. Estes descendentes com alta
afinidade antignica so ento selecionados para fazerem parte do conjunto de memria.
No somente um mecanismo de mutao utilizado para diversificar o repertrio de
anticorpos, mas tambm algum mecanismo deve existir tal que clulas B raras com
receptores mutantes de alta afinidade sejam selecionadas e predominem nas respostas
futuras. Devido natureza aleatria do processo de mutao somtica, uma grande parcela
dos genes mutantes torna-se no funcional, ou desenvolve receptores auto-reativos (Storb,
1998). Estas clulas com receptores de baixa afinidade, ou as clulas auto-reativas, devem
ser eficientemente eliminadas (ou tornarem-se anrgicas) de forma que elas no contribuam
significativamente para o conjunto de memria (Berek & Ziegner, 1993; Adams, 1996;
Nussensweig, 1998; George & Gray, 1999).
A forma com que as clulas B contendo receptores de baixa afinidade, ou auto-reativos, so
eliminadas ainda no muito bem compreendida, mas provavelmente ocorre apoptose no
centro germinativo (Coutinho, 1989; Nossal, 1992). A apoptose um processo de morte
celular programada, onde uma cascata de eventos intracelulares resultam na condensao e
fragmentao do DNA, morte e fagocitose dos resduos celulares (McConkey et al., 1990;
Cohen, 1993; Schwartz & Banchereau, 1996).
A anlise do desenvolvimento do repertrio de anticorpos expresso pelas clulas B nos
centros germinativos demonstra claramente o papel que a mutao seguida de seleo
exerce na maturao da resposta imunolgica. Ambos os processos so vitais na maturao
da resposta imune. O aumento da afinidade dos anticorpos da resposta primria para a
secundria, e assim sucessivamente, demonstra que a maturao da resposta imunolgica
um processo contnuo, como ilustrado na Figura 2.13.
Existem trs aspectos essenciais de uma resposta imune adaptativa: diversidade suficiente
para combater um universo antignico, distino prprio/no-prprio, e memria
imunolgica. Na teoria da seleo clonal originalmente proposta por Burnet (1959), a
memria seria fornecida pela expanso do tamanho de um determinado clone especfico ao
estmulo antignico, e a mutao aleatria seguida de seleo permitiria o aumento da
afinidade deste clone. Alm disso, clulas auto-reativas seriam deletadas durante seu
desenvolvimento. Resultados recentes sugerem que o sistema imunolgico pratica no
somente a seleo clonal de linfcitos, mas tambm uma seleo molecular de receptores
(Nussenzweig, 1998). Ao invs da deleo clonal esperada de todas as clulas auto-reativas,
ocasionalmente alguns linfcitos B sofrem uma edio de receptores: estas clulas B
deletam seus receptores auto-reativos e desenvolvem receptores completamente novos
atravs da recombinao gentica dos elementos componentes das bibliotecas V(D)J.
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Afinidade (log)
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1a
2a
3a
Resposta
Figura 2.13. Esboo do processo de maturao de afinidade durante sucessivas respostas imunes
adaptativas.
Embora a edio e seleo de receptores no faam parte do modelo proposto por Burnet, a
teoria de seleo clonal pode certamente acomodar a edio de receptores caso a seleo de
receptores ocorra antes da seleo celular. Qualquer clone com alta afinidade desenvolvido
por hipermutao somtica ou edio de receptores seria preferencialmente expandido, mas
algumas clulas de baixa afinidade tambm poderiam fazer parte do repertrio mantendo,
assim, a diversidade populacional.
George & Gray (1999) defenderam a existncia do mecanismo de edio de receptores
durante a maturao de afinidade como uma estratgia capaz de permitir que um receptor
saia de uma regio de timo local em uma superfcie de afinidade. A Figura 2.14 ilustra
esta idia considerando todas as possveis regies de ligao ao antgeno no eixo x, onde as
regies adjacentes esto mais prximas entre si. A afinidade antgeno-anticorpo (Ag-Ab)
mostrada no eixo y. Se um dado anticorpo Ab1 selecionado durante uma resposta
primria, ento pequenas mutaes seguidas de seleo permitem que o sistema
imunolgico explore regies locais em torno de Ab1 tomando pequenos passos na direo
de um anticorpo com maior afinidade, levando um timo local Ab1*. Como os mutantes
de baixa afinidade so descartados, os anticorpos no podem descer a montanha. A edio
de receptores permite que um anticorpo execute grandes passos atravs da superfcie,
caindo em posies onde a afinidade pode ser inferior anterior (Ab2). Entretanto,
ocasionalmente o salto resultar em um anticorpo numa posio da montanha onde a regio
de escalada mais promissora (Ab3). Partindo deste ponto, mutaes somticas seguidas de
seleo permitem a determinao do timo global das regies de ligao, Ab3*.
Em resumo, pequenas mutaes so teis para a explorao local do espao de regies de
ligao, enquanto a edio de receptores permite que a resposta imunolgica saia de timos
locais insatisfatrios. Assim, os dois processos executam funes complementares no
processo de maturao de afinidade. Somando-se aos mecanismos de mutao somtica e
edio de receptores, uma frao de novas clulas constantemente gerada pela medula
ssea e adicionada ao repertrio de linfcitos, mantendo a diversidade populacional.
30
Ab3*
Afinidade
Ab1*
Ab2*
Ab1
Ab2
Ab3
2.8.2.1.
2.9.
Distino Prprio/No-Prprio
Para cada um dos dois tipos principais de linfcitos, B e T, possvel considerar trs
classes de repertrios celulares (Jerne, 1974; Coutinho et al., 1984; de Boer &
Perelson, 1991; Perelson & Weisbuch, 1997; Storb, 1998):
Engenharia Imunolgica
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32
Antgenos
no-prprios
Antgeno
prprio
Seleo Clonal
Ignorncia Clonal
Clula
inalterada
Seleo
Deleo
clonal
Negativa
Anergia
OU Edio de receptores
Clulas de memria
Plasmcitos
2.9.1.
Seleo Positiva
A seleo positiva dos linfcitos B e T tem como objetivo principal selecionar aqueles
linfcitos capazes de operar como clulas imunocompetentes, ou seja, atuar em uma
resposta imune adaptativa. Para isso, preciso que os linfcitos sejam capazes de
reconhecer os seus ligantes (von Boehmer, 1994).
2.9.1.1.
Engenharia Imunolgica
33
A seleo positiva das clulas B maduras envolve o resgate da morte celular. Como
resultado do reconhecimento e ligao ao antgeno, e auxlio da clula TH, os linfcitos B
em proliferao sofrem hipermutaes. Aquelas clulas filhas mutantes que se ligam mais
eficientemente ao antgeno so selecionadas para expanso e, portanto, resgatadas da morte
celular.
Comparando-se com as clulas T, a seleo positiva das clulas B maduras se assemelha a
seleo positiva das clulas T imaturas. No caso das clulas T imaturas, elas so resgatadas
da morte celular devido ao reconhecimento de uma molcula de MHC-prprio, enquanto as
clulas B maduras so resgatadas da morte celular devido ao reconhecimento de um
antgeno no-prprio.
2.9.2.
Seleo Negativa
34
formado. A seleo tmica resulta da interao das clulas T imaturas (timcitos) com os
ligantes MHC-prprio em clulas APCs dentro do timo, resultando na morte (deleo
clonal) daquelas clulas T que forem auto-reativas. O tempo e a extenso deste processo de
deleo depende da afinidade da ligao do TCR ao antgeno prprio. Clulas T que se
ligam aos antgenos prprios com alta afinidade so deletadas precocemente e de forma
mais efetiva do que aquelas que se ligam com baixas afinidades.
A seleo tmica no perfeita, e algumas clulas T auto-reativas podem escapar para a
periferia como clulas imunocompetentes, causando o risco de uma doena auto-imune. O
sinal para a ativao de uma clula T requer mais do que a simples ligao do complexo
MHC/peptdeo ao TCR: vrios processos adjuntos, como a ligao de molculas de adeso,
so necessrios para a ativao celular. Na ausncia de atividade co-estimulatria, a unio
do TCR ao complexo MHC/peptdeo pode levar inativao (anergia) deste linfcito. O
sistema imune inato responsvel pela liberao de uma grande quantidade de sinais coestimulatrios para a resposta imune adaptativa.
2.9.2.2.
Produo de
anticorpos
A tolerncia promovida pelas clulas T seria insuficiente para a proteo contra doenas
auto-imunes. Clulas B imaturas dentro da medula ssea tambm so sensveis a uma
induo de tolerncia por seleo negativa, caso elas encontrem um antgeno na ausncia
dos sinais co-estimulatrios liberados principalmente pelas clulas T. Da mesma forma que
as clulas T, linfcitos B auto-reativos tambm podem escapar da seleo negativa
centralizada. Neste caso, a ativao ou tolerncia da clula B ser resultado da quantidade,
avidez, tempo e de quais sinais co-estimulatrios estaro presentes. Uma ligao brusca e
repentina (caracterstica de antgenos estranhos) do receptor ao antgeno geralmente induz
uma resposta clonal, enquanto uma estimulao constante e relativamente fraca leva
inibio e posterior apoptose (Schwartz & Banchereau, 1996). Este mecanismo de
tolerncia perifrica serve tanto para as clulas B quanto para as clulas T e est ilustrado
na Figura 2.16.
Muito baixa
Muito alta
Dose antignica
Tolerncia
Moderada
Figura 2.16. Altas e baixas doses antignicas induzem tolerncia, enquanto uma dose moderada
resulta em uma produo de anticorpos (adaptado de Tizard, 1995).
Leandro Nunes de Castro
Engenharia Imunolgica
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Supress o
Resposta negativa
Paratopo
Ag
1
2
Idiotopo
Anticorpo
Ativa o
Resposta positiva
(a)
(b)
Figura 2.17. Teoria da rede imunolgica. (a) Molcula de anticorpo destacando o paratopo e
idiotopo. (b) Respostas positiva e negativa resultantes da interao de um paratopo
com um idiotopo ou um eptopo.
Engenharia Imunolgica
37
p1
Imagem interna
i1
Reconhecimento
p3
i3
i1
Conjunto anti-idiotpico
px
Conjunto no-especfico
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