BEATRIZ VAZ MORGADO ESTEVES MOURATO

CONTROLO DE QUALIDADE
DE FORMAS FARMACUTICAS
ESTREIS

Universidade Lusfona de Humanidades e Tecnologias

Faculdade de Cincias e Tecnologias da Sade

Orientadora: Prof.. Doutora Catarina Pinto Reis

Lisboa, 2013

BEATRIZ VAZ MORGADO ESTEVES MOURATO

CONTROLO DE QUALIDADE
DE FORMAS FARMACUTICAS
ESTREIS

Dissertao de Mestrado Integrado em Cincias

Farmacuticas, apresentada na Universidade
Lusfona de Humanidades e Tecnologias para
obteno de grau Mestre.

Orientadora: Prof.. Doutora Catarina Pinto Reis

Universidade Lusfona de Humanidades e Tecnologias

Faculdade de Cincias e Tecnologias da Sade

Lisboa, 2013

ii

AGRADECIMENTOS

Prof.. Doutora Catarina Pinto Reis, minha orientadora, pela pacincia,

disponibilidade, orientao e um grande apoio em todo o desenvolvimento da
dissertao.

Aos meus pais, pelo apoio incondicional, fora e motivao que me tm dado
desde sempre.

minha restante famlia, pelo apoio e compreenso em todos os momentos.

Aos meus amigos que, de uma forma ou de outra, me apoiaram e incentivaram

a lutar sempre.

RESUMO

Com o avano da tecnologia cada vez mais acessvel, torna-se imprescindvel

acompanhar este mesmo desenvolvimento e adot-lo para a obteno de um melhor
produto.
Sendo as formas farmacuticas estreis alvo de uma rigorosa avaliao dos
seus requisitos, uma grande vantagem conhecer quais as orientaes atuais para o
fabrico destes produtos. Uma vez que estamos na era da aldeia global,
inquestionvel a necessidade de conhecer documentos de outros pases, isto porque
na indstria farmacutica, tal como em muitas outras, h o objetivo de expandir a
comercializao de produtos para outros pases, continentes, mas h que ter em
ateno que para esses pases os requisitos de qualidade desses produtos podem
no ser iguais aos do nosso pas. Ao conhecer e aplicar os principais e mais rgidos
controlos e normas, certo que todos os outros sero cumpridos. Como principais
documentos que regulam e orientam o processo de fabrico destes produtos existem as
Good Manufacturing Practices,

as normas da

Internactional Standardization

Organization e as Farmacopeias de vrios pases.

Na indstria farmacutica, principalmente no fabrico das formas farmacuticas
estreis, h controlo no s do processo de fabrico e produto final, como tambm de
todo o ambiente e intervenientes que envolvem a produo.
Dentro das formas farmacuticas em estudo encontram-se as de uso oftlmico,
de aplicao nasal, de aplicao auricular e de uso parenteral. Todas estas tm o
principal requisito de ser estreis, variando nos outros parmetros, como tonicidade e
pH de acordo com a localizao da administrao. Os ensaios realizados tanto em In
Process Control como no produto final, esto presentes nas Farmacopeias, que sero
discutidos e comparados entre si.

ii

ABSTRACT

With the advance of technology, and it is becoming more accessible, it is

essential to control this development and even adopt some strategies for getting a
better product.
Sterile dosage forms are subject of a rigorous assessment of their
requirements, it is a great advantage to know which are the current guidelines for the
manufacture of these products. Since we are in the era of the "global village", there is
an unquestionable need to know documents from other countries, because in the
pharmaceutical industry, as in many others, there is the goal of expanding the
marketing of products to other countries, even continents, but it must be have in mind
that for these countries the quality requirements of these products may not be the
same for other country. By knowing and implementing the main and more strict controls
and standards, it is certain that all others will be achieved. The main documents and
guidelines for the process of manufacturing these products are the Good
Manufacturing Practices, the guidelines of International Standardization Organization
and the Pharmacopoeias of several countries.
In the pharmaceutical industry, especially in the manufacture of sterile dosage
forms, it is not only the control of the manufacturing process and the final product that
is made, it is as well the entire environment and operators involved in the production.
Within the pharmaceutical forms under consideration are the ones in the use of
ophthalmic, nasal, auricular and parenteral administrations. All of these products must
be sterile, varying the other parameters, such as tonicity and pH according to the local
of administration. All tests performed, both in In Process Control and the final product,
are present in Pharmacopoeias, which will be herein discussed and compared.

iii

NDICE
1

INTRODUO .................................................................................................................... 1
1.1

Normas e Diretrizes.................................................................................................... 2

1.2

Formas Farmacuticas Estreis e No-Estreis ................................................... 3

1.2.1

Estril versus Esterilizado ................................................................................. 3

1.2.2

Esterilizao ........................................................................................................ 4

TCNICA ASSPTICA ...................................................................................................... 5

2.1

Controlo do nmero de partculas............................................................................ 7

2.2

Controlo microbiolgico ........................................................................................... 10

2.3

Validao do Processo de Fabrico ........................................................................ 10

2.4

Cmaras de Fluxo Laminar ..................................................................................... 12

2.5

Preparao Assptica e Fabrico Industrial ........................................................... 17

2.5.1

Tecnologia de Isoladores ................................................................................ 18

2.5.2

Tecnologia de sopragem/enchimento/vedao ou Blow-fill-seal .............. 19

2.5.3

Produtos submetidos a esterilizao final .................................................... 20

2.6

Espao fsico ............................................................................................................. 20

2.7

Pessoal....................................................................................................................... 22

2.8

Vesturio .................................................................................................................... 22

2.9

Mtodos de Controlo Ambiental ............................................................................. 23

CONTROLO DE QUALIDADE E ESTUDO COMPARATIVO DOS SEUS ENSAIOS

25
3.1

Teste para deteo de Endotoxinas - Pirognios ............................................... 25

3.1.1

Teste LAL........................................................................................................... 25

3.1.2

Teste de Determinao da Temperatura em Coelho.................................. 26

3.2

Contaminao de partculas: partculas no visveis .......................................... 27

3.2.1

Ensaio de Contagem de Partculas por Interceo da Luz........................ 28

3.2.2

Ensaio de Contagem de Partculas por Microscopia tica........................ 28

3.3

Contaminao de partculas: partculas visveis ................................................. 29

3.4

Teste de Tonicidade................................................................................................. 30

3.5

Determinao de pH ................................................................................................ 31

3.6

Volume Extravel ....................................................................................................... 31

3.7

Teste de esterilidade ................................................................................................ 32

3.7.1

Mtodo Standard .............................................................................................. 32

3.7.2

Mtodos Rpidos .............................................................................................. 34

iv

AS FORMAS FARMACUTICAS ESTREIS ............................................................. 36

4.1

Formas farmacuticas de uso oftlmico ............................................................... 36

4.2

Forma farmacutica de aplicao nasal ............................................................... 37

4.3

Forma farmacutica de aplicao auricular ......................................................... 38

4.4

Formas farmacuticas de uso parenteral ............................................................. 39

4.4.1

gua para Injetveis ........................................................................................ 40

4.4.2

Preparaes para irrigao ............................................................................. 41

PREPARAES CITOTXICAS E NUTRIES PARENTRICAS ...................... 41

5.1

Preparaes Citotxicas.......................................................................................... 43

5.2

Nutrio Parentrica ................................................................................................ 43

6 COMPARAO DOS ENSAIOS REQUERIDOS SEGUNDO A FP, USP E PH.

EUR. ........................................................................................................................................... 45

6.1.1

Formas Farmacuticas de uso oftlmico ...................................................... 45

6.1.2

Formas farmacuticas de aplicao nasal ................................................... 45

6.1.3

Formas farmacuticas de aplicao auricular ............................................. 46

6.1.4

Formas farmacuticas de uso parenteral ..................................................... 46

CONCLUSO ................................................................................................................... 47

BIBLIOGRAFIA ......................................................................................................................... 49
ANEXOS .................................................................................................................................... 54
Anexo A - Propriedades do vesturio nas Salas Limpas. .............................................. 54
Anexo B - Propriedades da gua para Injetveis, segundo a Farmacopeia
Portuguesa. ........................................................................................................................... 57
Anexo C - Preparao assptica nos Servios Farmacuticos Hospitalares. ............ 58

NDICE DE FIGURAS E TABELAS

FIGURA 1 - DISPOSIO DAS VRIAS CLASSES DE SALAS LIMPAS. ...................................... 7
FIGURA 2 - CFL HORIZONTAL. ........................................................................................................... 13
FIGURA 3 - CFL VERTICAL. ................................................................................................................ 13
FIGURA 4 - CFL SB CLASSE I. ........................................................................................................... 14
FIGURA 5 - CFL SB CLASSE II A1 E A2. .......................................................................................... 14
FIGURA 6 - CFL SB CLASSE II B1. .................................................................................................... 15
FIGURA 7 - CFL SB CLASSE II B2. .................................................................................................... 16
FIGURA 8 - CFL SB CLASSE III. ......................................................................................................... 16
FIGURA 9 - DIAGRAMA DE FLUXO DE MATERIAIS ATRAVS DO DEPARTAMENTO DE
PRODUO ADAPTADO DE LACHMAN, L., H. LIEBERMAN, AND J. KANIG. ................ 18
FIGURA 10 - EXEMPLO DA ESTRUTURA DE UM ISOLADOR. .................................................... 19
FIGURA 11 - ETAPAS NO BLOW-FILL-SEAL. .................................................................................. 19
TM
FIGURA 12 - EQUIPAMENTO DE DETEO E CONTAGEM DE PARTCULAS, MFI
TECHNOLOGY. .............................................................................................................................. 28
FIGURA 13 - RETCULO CIRCULAR. ................................................................................................ 29
FIGURA 14 ESQUEMATIZAO DO APARELHO PARA DETERMINAO DE
PARTCULAS VISVEIS. ............................................................................................................... 29
FIGURA 15 - EXEMPLO DE APARELHO PARA DETERMINAO DE PARTCULAS
VISVEIS. ........................................................................................................................................ 30
FIGURA 16 - PROTEO DE CALADO. ......................................................................................... 54
FIGURA 17 - LUVA DE NITRILO. ......................................................................................................... 54
FIGURA 18 - ILUSTRAO DO MODELO DA BATA. ..................................................................... 54
FIGURA 19 - TOUCA. ............................................................................................................................. 55
FIGURA 20 - TOUCA /CAPUZ DE PROTEO NAS REAS DE MAIOR RISCO. ..................... 55
FIGURA 21 - MSCARA FFP2. ............................................................................................................ 55
FIGURA 22 - MSCARA FFP3, COM VLVULA PARA CONFERIR MAIOR CONFORTO AO
OPERADOR. ................................................................................................................................... 55
FIGURA 23 - MSCARA COM VISEIRA INTEGRADA. .................................................................... 56
FIGURA 24 -VISEIRA. ............................................................................................................................ 56
FIGURA 25 - PROTEO OCULAR. ................................................................................................... 56
FIGURA 26 - "FATO-MACACO" ESTRIL. ......................................................................................... 56
FIGURA 27 - COMPARAO DE RTULOS DE MEDICAMENTOS CITOTXICOS. ............. 59
FIGURA 28 - FILTRO RETENTOR DE AEROSSIS. ...................................................................... 60

TABELA 1 - CLASSIFICAES DAS SALAS LIMPAS. ..................................................................... 6

TABELA 2 - EXEMPLOS DE OPERAES PARA PRODUTOS COM ESTERILIZAO
TERMINAL. ........................................................................................................................................ 6
TABELA 3 - EXEMPLOS DE OPERAES PARA PREPARAES ASSPTICAS. ................... 6
TABELA 4 - REQUISITOS QUANTO AO NMERO DE PARTCULAS EM SUSPENSO NO
AR, SEGUNDO A ISO 14644-1. ..................................................................................................... 8
TABELA 5 - REQUISITOS QUANTO AO NMERO DE PARTCULAS EM SUSPENSO NO
AR, SEGUNDO AS WHO GMP, EM 2003. ................................................................................... 8
TABELA 6 - REQUISITOS QUANTO AO NMERO DE PARTCULAS EM SUSPENSO NO
AR, SEGUNDO A EU GMP, EM 2008. .......................................................................................... 8
TABELA 7 - FREQUNCIA DA REALIZAO DOS TESTES QUE DEMONSTREM A
CONCORDNCIA COM AS CONCENTRAES LIMITES DE PARTCULAS. .................... 9
TABELA 8 - LIMITES RECOMENDADOS DE CONTAMINAO MICROBIANA. ....................... 10

vi

TABELA 9 - REQUISITOS APLICVEIS CONFORME DIMENSO DE LOTE. ........................... 11

TABELA 10 - COMPARAO DOS VRIOS TIPOS DE CFL DE ACORDO COM AS NORMAS
DOS E.U.A. E EUROPEIA. ........................................................................................................... 13
TABELA 11 - CONDIES DE VESTURIO EXIGIDAS PARA CADA CLASSE DE SALA
LIMPA. .............................................................................................................................................. 23
TABELA 12 - TCNICAS UTILIZADAS NA AVALIAO MICROBIOLGICA. ............................ 24
TABELA 13 - TCNICAS UTILIZADAS NA AVALIAO DE PARTCULAS. .............................. 24
TABELA 14 - REQUISITOS PARA A SATISFAO NO ENSAIO DE DETERMINAO DA
TEMPERATURA DOS COELHOS. ............................................................................................. 26
TABELA 15 - REQUISITOS PARA A SATISFAO DO ENSAIO DE CONTAGEM DE
PARTCULAS POR INTERCEPO DA LUZ. .......................................................................... 28
TABELA 16 - REQUISITOS PARA A SATISFAO DO ENSAIO DE CONTAGEM DE
PARTCULAS POR MICROSCOPIA TICA. ............................................................................. 29
TABELA 17 - NMERO DE RECIPIENTES A UTILIZAR NO ENSAIO DE ACORDO COM O
VOLUME DE SOLUO. .............................................................................................................. 31
TABELA 18 - NMERO MNIMO DE UNIDADES A UTILIZAR NO ENSAIO CONFORME
DIMENSO DO LOTE. .................................................................................................................. 33
TABELA 19 - QUANTIDADE MNIMA A UTILIZAR NO ENSAIO CONFORME QUANTIDADE
DE PREPARAO. ........................................................................................................................ 33
TABELA 20 - REQUISITOS PARA O ENSAIO DE ESTERILIDADE. ............................................. 34
TABELA 21 - TESTE PARA COLRIOS E SOLUES DE LAVAGEM. ........................................ 45
TABELA 22 - TESTES PARA PS....................................................................................................... 45
TABELA 23 - TESTES PARA FORMULAES SEMISSLIDAS. ................................................. 45
TABELA 24 - TESTES PARA IMPLANTES OFTLMICOS.............................................................. 45
TABELA 25 - TESTES PARA GOTAS E SPRAY. .............................................................................. 45
TABELA 26 - TESTES PARA PS....................................................................................................... 45
TABELA 27 - TESTES PARA FORMULAES SEMISSLIDAS .................................................. 45
TABELA 28 - TESTES PARA SOLUES DE LAVAGEM. ............................................................. 45
TABELA 29 - TESTES PARA GOTAS E SPRAY. .............................................................................. 46
TABELA 30 - TESTES PARA PS....................................................................................................... 46
TABELA 31 - TESTES PARA FORMULAES SEMISSLIDAS. ................................................. 46
TABELA 32 - TESTES PARA SOLUES DE LAVAGEM. ............................................................. 46
TABELA 33 - TESTES PARA INJEES. .......................................................................................... 46
TABELA 34 - TESTES PARA PS PARA INJEES. ..................................................................... 46
TABELA 35 - TESTES PARA INFUSES. .......................................................................................... 46
TABELA 36 - TESTES PARA SOLUES DE IRRIGAO. .......................................................... 46

vii

INTRODUO
Ao longo dos anos, o controlo de qualidade de um medicamento tem assumido

vises distintas no que respeita aos critrios de aceitao dos resultados obtidos. Mais
recentemente, na dcada de 60, o controlo da execuo do processo de fabrico era
realizado somente no produto final com pouco pessoal competente, com objetivo de
uma reduo de custos, e uma enorme tolerncia no que toca a existncia de
pequenos defeitos. Mas, foi na dcada de 90 que se comeou a valorizar mais a
interveno durante o processo de fabrico, o chamado IPC ou In Process Control, que
assegura um controlo de todo o processo, por parte de todos os que nele intervm,
com a finalidade de prevenir erros na execuo, zero defeitos no produto final e,
assim, a mxima qualidade do produto.[1]
O conceito de qualidade tem-se desenvolvido ao longo do tempo de modo a
satisfazer as necessidades requeridas com a evoluo da humanidade. No campo da
tecnologia farmacutica, o rigor tem sido o fator impulsionador da evoluo da
qualidade, como podemos ver com as tcnicas utilizadas no controlo das formas
farmacuticas usadas em uso teraputico e de diagnstico. a qualidade que vai
proporcionar um aumento da eficcia, diminuio da ocorrncia de efeitos secundrios
indesejveis e aumento da confiana do consumidor no produto.
No campo das formas farmacuticas estreis, o controlo de qualidade tem uma
importncia acrescida pois o estatuto de estril est relacionado com o facto de a
administrao do medicamento ser feita por uma via onde existem poucas ou
nenhumas defesas, como acontece com a administrao de preparaes IV. Com o
conhecimento atual, tenta-se cada vez mais impedir a entrada de microrganismos e
pirognios no corpo humano. Por isso, quando se pensa em preparaes
medicamentosas que tenham de passar por entradas nas quais no existem defesas,
como o pH do estmago por exemplo, existe uma preocupao acrescida pois h uma
exposio maior infeo. Quando o objetivo atingir de imediato a circulao
sangunea, a utilizao de uma preparao IV a escolha mas requer requisitos
especiais tais como esterilidade, isotonicidade em relao ao sangue, ajuste de pH,
entre outros parmetros, pois no h linhas de defesas at ao vaso sanguneo que
impea a entrada de bactrias ou vrus que venham a provocar alguma patologia ou
at mesmo a morte. Tambm a respeito de preparaes IV, no tolerada a presena
de partculas, pois estas podem causar inclusive provocar embolismos. Por estes e
outros motivos mencionados ao longo do trabalho, estas preparaes de uso

parenteral, de uso oftlmico, de aplicao nasal e auricular requerem o estatuto de

formas farmacuticas estreis.

1.1

Normas e Diretrizes

A Indstria Farmacutica uma indstria altamente regulamentada, em que

todas as atividades tm de obedecer a normas internacionalmente estabelecidas para
que os seus medicamentos possam ser comercializados.
Com o objetivo de regulamentar, informar e uniformizar todos os procedimentos
e tcnicas que intervenham no processo de produo de medicamentos, surgiram as
normas e diretrizes, em constante atualizao. Servem de guias para que se
adaptem procedimentos que conduzam obteno de um produto final seguro, eficaz
e de qualidade. So nestas normas e diretrizes que se encontram, por exemplo,
requisitos para a construo de infraestruturas adequadas realizao da Tcnica
Assptica, requisitos necessrios para o seu controlo ambiental, regras a cumprir por
parte das pessoas que contactam com os produtos no seu processo de fabrico, e
tambm menciona os mtodos de controlo e preveno de contaminantes que
suscetibilizem o produto de ficar com qualidade inferior.
Em Portugal, atravs do Infarmed, Autoridade Nacional do Medicamento e
Produtos de Sade I.P., tem-se como uma das principais referncias na produo de
produtos estreis a GMP Guidelines - EudraLex Volume 4 ou EU GMP. Este
documento contm as regras que regem os medicamentos estreis na Unio
Europeia, atravs de orientaes para a interpretao dos princpios e diretrizes das
Boas Prticas de Fabrico (BPF) de medicamentos para uso humano e veterinrio. As
Boas Prticas de Fabrico so um conjunto de diretrizes que servem de garantia de
qualidade do medicamento pois assim so fabricados em conformidade e controlados
em relao aos padres de qualidade solicitados pelo uso intencional do
medicamento.
Tambm em Portugal, atravs do Instituto Portugus da Qualidade,
importante seguir as International Organization for Standardization (ISO), normas
internacionais estabelecidas por um conjunto de pases, uma vez que tambm
Portugal contribuiu para a implementao dessas mesmas normas.
Ao todo so aplicveis os seguintes documentos na indstria farmacutica:
o

Farmacopeia Portuguesa;

Boas Prticas de Fabrico;

2

ISO - International Organization for Standardization;

Farmacopeia Americana (USP);

Farmacopeia Europeia;

Outra Farmacopeia de outro Estado Membro da UE, caso

necessrio.

Todos eles tm como principal finalidade a garantia de obteno de um produto

de qualidade, eficaz e seguro. No entanto, para alguns fatores podem mudar
ligeiramente os seus parmetros de aceitao, como o caso das WHO GMP, um
documento relativo s Boas Prticas de Fabrico escrito pela Organizao Mundial de
Sade, face s EU GMP.
No desenvolvimento desta monografia iro ser comparados alguns aspetos
presentes nestes documentos.

1.2

Formas Farmacuticas Estreis e No-Estreis

So formas farmacuticas estreis, preparaes isentas de microrganismos ou

pirognios. Estes produtos tm a particularidade de serem administrados por vias
atravs das quais h menos barreiras de defesas e, portanto, requerem iseno total
de presena de contaminantes viveis e no viveis.

1.2.1

Estril versus Esterilizado

A esterilidade a ausncia de microrganismos vivos. A realizao de ensaios

no suficiente para garantir a esterilidade de um produto e a garantia da esterilidade

passa igualmente pela aplicao de processos de produo convenientemente
validados. Um produto diz-se estar esterilizado quando passa por um processo de
esterilizao no qual se atingiram as condies necessrias para a sua finalidade e
reprodutibilidade, sendo os indicadores biolgicos uma garantia da obteno das
condies ideais do mtodo de esterilizao. Um produto diz-se ser estril quando a
preparao passa por todo o controlo de qualidade com resultados satisfatrios sua
finalidade e uso, preenchendo todos os requisitos. um termo relativo onde a
probabilidade de crescimento de formas viveis de 10-6. [1-3]. Quando este ltimo
facto alcanado, designa-se por Sterile Assurance Level.

1.2.2

Esterilizao
Na indstria farmacutica, nomeadamente, na rea de Investigao e

Desenvolvimento de novos frmacos, quando se chega fase de encontrar a melhor

forma farmacutica para um dado frmaco, caso seja necessrio mant-lo em meio
estril, a grande dvida recai sobre a escolha do melhor mtodo de esterilizao.
Dentro da vasta escolha de tipos de esterilizao, no so todos os frmacos que
conseguem manter a sua estabilidade aps serem submetidos a certas tcnicas de
esterilizao, sendo um exemplo, o caso das protenas e enzimas que no podem ser
sujeitos s temperaturas elevadas presentes em alguns tipos de esterilizao, pois
desnaturam limitando ou mesmo eliminando a sua atividade. No caso de uma
preparao lquida, no geral, esta pode ser submetida a processos em autoclave ou
filtrao em Tcnica Assptica, mas caso seja um produto biolgico, como por
exemplo o Interfero, no pode ser submetido a uma esterilizao final sendo a nica
escolha a filtrao em Tcnica Assptica.[4-6]
De modo a garantir a ausncia de microrganismos, pirognios, partculas de
tamanho correto e adequar as caractersticas fsico-qumicas da forma farmacutica
estril, realiza-se o Controlo de Qualidade como explicado ao longo desta
monografia. No entanto, a melhor maneira de se obter um produto de excelncia est
na preveno da contaminao e no controlo rigoroso do processo de fabrico,
aplicando o melhor mtodo de esterilizao na altura do processo mais conveniente.
Quando se escolhe o melhor mtodo de esterilizao tem-se como principal
preocupao garantir a segurana e efetividade posterior do produto. Apesar disto,
tm-se em conta os efeitos econmicos da utilizao desse mtodo.[2]
Como mtodos de esterilizao existem os de natureza qumica, como a
utilizao de gases ou lquidos como o formaldedo, xido de etileno ou ozono; e de
natureza fsica, como por exemplo, a utilizao de calor seco ou hmido, radiaes
ionizantes ou no e a filtrao por membrana porosa.

TCNICA ASSPTICA
Segundo a Farmacopeia Portuguesa VIII, a Preparao Assptica tem como

objetivo manter a esterilidade de um produto obtido a partir de componentes

previamente esterilizados. Baseia-se na realizao de processos em condies e
instalaes concebidas para impedir a contaminao microbiana da prpria mistura
assptica

dos

componentes

da

frmula,

seguida

do

enchimento

do

acondicionamento asspticos.
Assim, como j anteriormente referido, a produo de estreis deve obedecer
s Boas Prticas de Fabrico, tambm designadas por GMP, Good Manufacturing
Practice, a fim de garantir a obteno de um produto de qualidade, caso contrrio,
aparecero problemas que necessitam de inspeo para averiguar a causa do
problema, com perda de tempo e recursos evitveis. [7]
De modo a garantir que a tcnica se realiza em meio assptico, h vrios
fatores cruciais que necessitam de especial ateno, tais como:

Meio ambiente;

Pessoal interveniente;

reas crticas ou de trabalho e seu material;

Esterilizao dos recipientes/fechos e operaes de transferncia de produtos;

Durao mxima do armazenamento antes da embalagem final.

Dentro do processo de fabrico de produtos estreis existem dois caminhos

possveis conforme os requisitos da formulao: um, quando possvel submeter o
produto a uma esterilizao no final do processo; e outro, quando no h possibilidade
de uma esterilizao final, onde se exige que os processos de produo sejam
conduzidos assepticamente em algumas ou todas as etapas.[8]
Para se conseguir realizar tcnicas e processos num meio ambiente assptico
necessrio ter espaos onde a concentrao de partculas viveis e no-viveis seja
controlada, e que a sua organizao e estrutura permitam minimizar a introduo,
desenvolvimento e reteno destas mesmas partculas, que so as chamadas Salas
Limpas. Estes espaos tm a temperatura, humidade e presso controladas e,
juntamente com outros fatores descritos ao longo do trabalho, vo permitir a realizao
da Tcnica Assptica.[9]
De acordo com as tcnicas realizadas, assim se classificam as Salas Limpas
ou reas da produo, havendo classes de A a D, consoante os critrios e parmetros
exigidos em cada classe. Existem outras classificaes relacionadas entre si,
conforme exemplificado na seguinte tabela.[9, 10]
5

Tabela 1 - Classificaes das Salas Limpas.

WHO/GMP

E.U.A.

ISO 14644

100

ISO 5

100

ISO 5

10 000

ISO 7

100 000

ISO 8

As tabelas seguintes apresentam exemplos de operaes a realizar nas

diversas classes, conforme o tipo de produto, onde as salas de classe A tm as
operaes de maior risco de contaminao e por isso tm maiores restries no seu
controlo.
Tabela 2 - Exemplos de operaes para produtos com esterilizao terminal.[8]
Classe

Exemplos de operaes para produtos com esterilizao terminal.

Enchimento de produtos (excecionalmente em risco)

Preparao de solues (excecionalmente em risco) e enchimento de produtos

Preparao de solues e de componentes para enchimento posterior

Tabela 3 - Exemplos de operaes para preparaes asspticas.[8]

Classe

Exemplos de operaes para preparaes asspticas.

Preparao e enchimento asspticos

Preparao de solues para filtrao

Manuseamento de componentes aps lavagem

Assim, como em cada classe temos processos em que h um maior ou menor

risco de contaminao, assim vo haver parmetros para avaliar se essas salas esto
de acordo com a classe/processo pretendido. Avaliam-se ento: nmero de partculas
em suspenso e qualidade microbiolgica.
So nas reas de Classe A que se realizam as operaes de maior risco para a
preparao e por esta razo que nestas salas existem as Cmaras de Fluxo
Laminar. Estas cmaras promovem um fluxo de ar unidirecional com velocidade
estipulada, que no deve ser inferior a 0,4m/s segundo a norma dos E.U.A. ou 0,7m/s
segundo a norma Europeia.[11]
Relativamente distribuio das salas no espao, as salas de Classe B so as
que circundam as de Classe A e, consequentemente, esto rodeadas por salas de
6

Classe C e D onde o risco diminui quanto mais afastadas das salas de classe A, como
possvel verificar no mapa mostrado na Figura 1.

Figura 1 - Disposio das vrias classes de Salas Limpas.[12]

2.1

Controlo do nmero de partculas

As partculas presentes no ar de entrada so retidos por filtros HEPA e

partculas nas Salas Limpas so removidos por fluxo de ar laminar. Os filtros HEPA
so capazes de reter, pelo menos, 99,97% de partculas com dimetro superior a 0,3
m. A integridade destes filtros HEPA tem de ser regularmente verificada.[13, 14]
Como foi referido anteriormente existem vrias classificaes de Salas Limpas,
que apesar de semelhantes nos seus objetivos mostram requisitos mnimos variveis.
Segundo a ISO 14644-1[9], permite os seguintes requisitos quanto ao nmero de
partculas em suspenso no ar:

Tabela 4 - Requisitos quanto ao nmero de partculas em suspenso no ar, segundo a ISO 14644-1.
3

Nmero de
classificao
ISO (N)

Limite de concentrao mxima (partculas/m de ar) para partculas de igual ou

tamanho superior que o especificado.
0,1 m

0,2 m

0,3 m

0,5 m

1 m

5 m

ISO Classe 1
ISO Classe 2
ISO Classe 3
ISO Classe 4
ISO Classe 5
ISO Classe 6
ISO Classe 7
ISO Classe 8
ISO Classe 9

10
100
1 000
10 000
100 000
1 000 000

2
24
237
2 370
23 700
237 000

10
102
1 020
10 200
102 000

4
35
352
3 520
35 200
352 000
3 520 000
35 200 000

8
83
832
8 320
83 200
832 000
8 320 000

29
293
2 930
29 300
293 000

J segundo as EU GMP e WHO GMP, o nmero mximo de partculas em

suspenso, permitidas para cada classe de Sala Limpa, apresenta-se mais restrita
com diminuio do nmero aceitvel de partculas, como demonstrado nas seguintes
tabelas.[8]

Tabela 5 - Requisitos quanto ao nmero de partculas em suspenso no ar, segundo as WHO GMP, em
2003.
Em repouso

Em operao

Nmero mximo permitido de partculas/m

Classe

igual ou

superior a
0,5 m

5 m

0,5 m

5 m

3500

3500

3 500

350 000

2 000

350 000

2 000

3 500 000

20 000

3 500 000

20 000

no definido

no definido

Tabela 6 - Requisitos quanto ao nmero de partculas em suspenso no ar, segundo a EU GMP, em

2008.
Em repouso

Em operao

Nmero mximo permitido de partculas/m

Classe

igual ou

superior a
0,5 m

5 m

0,5 m

5 m

3500

20

3520

20

3 520

29

352 000

2 900

352 000

2 900

3 520 000

29 000

3 520 000

29 000

no definido

no definido

Nestas ltimas tabelas, h a distino da quantidade de partculas em

repouso e em operao, sendo que o estado em repouso aquele em que a
instalao est aberta e em funcionamento, com equipamento produtivo completo,
mas sem pessoal operacional presente, e portanto tendencialmente com menor
nmero de partculas avaliado aps um curto perodo de limpeza de 15-20 minutos
num estado sem pessoal operacional, aps concluso das operaes. J o estado em
operao aquele em que a instalao est a funcionar no modo operacional
definido, com o nmero de pessoas especificado a trabalhar nesta rea, o que vai
proporcionar um possvel aumento de partculas em suspenso. No entanto, as
condies das partculas para a classe A em operao indicadas na tabela devem
ser mantidas na zona imediatamente circundante do produto, quando este ou o
recipiente aberto esto expostos ao ambiente, demonstrando ser um desafio devido
produo de partculas ou gotculas pelo prprio produto.[8]
Segundo as BPF, de modo a se atingir as condies desejadas para as classes
de ar B, C e D, os requisitos da qualidade do ar devem estar relacionadas com as
dimenses da sala e com o equipamento e pessoal presentes na mesma e o sistema
de ar deve dispor de filtros terminais apropriados, como HEPA, para as classes A, B e
C.[8]
De modo a monitorizar a eficcia da proteo contra o aparecimento de
partculas, existem sistemas de monitorizao que consistem em contadores de
partculas independentes. Estes so constitudos por uma rede de pontos de
amostragem sequencial acedidos pelo coletor ligado a um nico contador partcula ou
uma combinao de dois. O sistema escolhido deve ser apropriado para o tamanho de
partcula considerado. A seleo do sistema de monitorizao deve ter em conta o
risco apresentado pelos materiais utilizados na operao de produo, por exemplo,
os que envolvem organismos vivos ou radiofrmacos.[8]
A periodicidade da avaliao da contaminao de partculas [15] est
relacionada com o tipo de Sala Limpa, como est descrito na tabela seguinte.
Tabela 7 - Frequncia da realizao dos testes que demonstrem a concordncia com as concentraes
limites de partculas.[15]
Classificao
Intervalo de tempo mximo
Mtodo utilizado no teste
ISO Classe 5
6 meses
Anexo B na ISO 14644-1:1999
> ISO Classe 5
12 meses
Anexo B na ISO 14644-1:1999
Nota: O teste de contagem de partculas ser realizado normalmente no estado operacional, mas poder
tambm ser realizado no estado em repouso de acordo com a classificao ISO.

2.2

Controlo microbiolgico
No caso de operaes utilizando a Tcnica Assptica, a monitorizao deve

ser frequente, recorrendo a mtodos como placas de sedimentao, amostragem

volumtrica do ar e das superfcies, por exemplo, recorrendo a esfregaos e placas de
contacto. Os mtodos de amostragem utilizados na operao no devem interferir com
a proteo da zona. Os resultados da monitorizao devem ser considerados na
anlise da documentao dos lotes relativos ao Controlo de Qualidade, para libertao
do produto acabado nas condies desejadas. As superfcies e o pessoal devem ser
monitorizados aps operaes crticas.
igualmente necessria monitorizao microbiolgica adicional para alm das
operaes de produo, por exemplo, aps validao, limpeza e higienizao dos
sistemas.
Seguem-se os limites recomendados de contaminao microbiana, de acordo
com o processo utilizado na verificao, segundo a EU GMP e igualmente para as
WHO GMP.
Tabela 8 - Limites recomendados de contaminao microbiana.[8]
Tcnica Utilizada

Classe

Amostra de ar
3

(UFC/m )

2.3

Placas de

Placa de

sedimentao

contacto

=90mm

=55mm

(UFC/4h)

(UFC/placa)

Impresso de
luva, 5 dedos
(UFC/luva)

<1

<1

<1

<1

10

100

50

25

200

100

50

Validao do Processo de Fabrico

A validao do processo de fabrico inclui verificaes adequadas sobre o

conjunto dos parmetros referidos e o prprio processo sujeito a verificaes
regulares por simulao com meios de crescimento microbiano, para bactrias e
fungos, que so incubados e examinados com vista deteo de uma eventual
contaminao microbiana do ar, operador, cmara e/ou material. A validao do
10

processamento assptico deve incluir um teste de simulao utilizando um meio

nutritivo (media filling), onde a escolha recai com base na forma farmacutica do
produto e na transparncia, concentrao e adequao para esterilizao do meio
nutritivo. Este teste deve reproduzir, tanto quanto possvel, o processo de fabrico
assptico habitual e incluir todos os passos de fabrico crticos posteriores. Deve
igualmente considerar diversas intervenes que costumam ocorrer durante a
produo normal bem como situaes particulares e de grande severidade. Os testes
de simulao do processo devem ser efetuados como validao inicial, com trs testes
satisfatrios consecutivos por turno, e repetidos em intervalos definidos e aps
qualquer

alterao

significativa

do

sistema

Aquecimento,

Ventilao

Ar

Condicionado (AVAC), do equipamento, do processo e do nmero de turnos. De forma

geral, os testes de simulao devem ser repetidos duas vezes por ano por turno e
processo.[8]
O nmero de recipientes utilizado nas operaes de media filling deve ser
suficiente para permitir uma avaliao vlida e, em lotes reduzidos, deve ser pelo
menos igual ao tamanho do lote do produto. O objetivo deve ser um crescimento zero,
sendo aplicveis os seguintes requisitos conforme a dimenso do lote.
Tabela 9 - Requisitos aplicveis conforme dimenso de lote.[8]
Enchimento inferior a
5 000 unidades

No devem ser detetadas quaisquer unidades contaminadas.

a) Uma unidade contaminada d origem a uma investigao e eventual

Enchimento de 5 000 a
10 000 unidades

repetio do processo;
b) Duas unidades contaminadas so consideradas motivo de revalidao,
aps a investigao.

Enchimento superior a
10 000 unidades

a) Uma unidade contaminada d origem a uma investigao;

b) Duas unidades contaminadas so consideradas motivo de revalidao,
aps a investigao.

Alm disso, os produtos esterilizados por filtrao ou preparados em condies

asspticas so submetidos ao ensaio de esterilidade atravs de uma amostra de
dimenso apropriada antes da libertao do lote.
No fabrico de formulaes estreis h especial ateno ao meio envolvente da
produo em si, com requisitos especiais sendo o principal objetivo minimizar o risco
de contaminao por partculas viveis e no-viveis. Para isto necessria a
formao do pessoal interveniente de modo a ser possvel seguir as tcnicas e

11

processos de preparao/produo estabelecidos, incluindo no s a prpria produo

como tambm a limpeza, manuteno e armazenamento dos produtos envolvidos.

2.4

Cmaras de Fluxo Laminar

Sendo as Cmaras de Fluxo Laminar, CFL, um dos equipamentos mais

importantes na manipulao de produtos estreis farmacuticos, considerado um

dos principais meios preventivos de contaminao no s do produto mas tambm do
operador e meio ambiente. Nestas cmaras so manipulados produtos citotxicos,
preparaes de nutrio parentricas, colrios ou preparaes intraoculares por
exemplo, que requerem ausncia total de partculas e existncia de esterilidade, e
para tal, a cmara proporciona o melhor meio para a sua manipulao.
Existem vrias classificaes para as CFL, existindo uma segundo a normativa
Europeia EN 12469 e uma americana relativa s cmaras de segurana biolgica,
NSF standard 49. A normativa dos E.U.A. tambm tem importncia em Portugal pelo
facto de muitas cmaras utilizadas no nosso pas terem origem norte-americana.
Ambas as normativas especificam trs classes de cmaras de segurana biolgica I, II
e III com definies muito semelhantes, sendo a maior diferena na classe II em que a
normativa americana subdivide a classe em vrios tipos.

Assim, as CFL classificam-se em:

CFL Horizontal

CFL Vertical

CFL de Segurana Biolgica (CFL SB)

Norma E.U.A. NSF standard 49

Classe I
Classe II (Tipo A1, A2, B1, B2 e B3)
Classe III

Norma Europeia EN 12469

Classe I
Classe II
Classe III

12

Tabela 10 - Comparao dos vrios tipos de CFL de acordo com as normas dos E.U.A. e Europeia.[11]
Classe de
Tipo CFL

Tipo de Proteo

Exausto

risco
biolgico

Recirculao
Operador

Produto

Ambiente

Sala

Exterior

Horizontais

No

Sim

No

No

Verticais

No

Sim

No

No

SB classe I

1-3

Sim

No

Sim

No

A1

1-3

Sim

Sim

Sim

70%

A2

1-3

Sim

Sim

Sim

70%

B1

1-3

Sim

Sim

Sim

30%

B2

1-3

Sim

Sim

Sim

No

B3

1-3

Sim

Sim

Sim

70%

SB classe III

Sim

Sim

Sim

No

Ambas possveis

SB Classe II

As CFL horizontais e verticais no so Cmaras de Segurana Biolgica e

caracterizam-se pela projeo de fluxo de ar filtrado por filtros HEPA. A sua utilizao
direcionada ao meio hospitalar, mais propriamente, aos Servios Farmacuticos,
para a manipulao de produtos estreis no-txicos e sem propriedades antignicas,
como por exemplo, o caso da nutrio parentrica.

Figura 2 - CFL Horizontal.[11]

Figura 3 - CFL Vertical. [11]

13

As

CFL

de

Segurana

Biolgica

Classe

proporcionam proteo do operador e do ambiente e no do

produto em manipulao, e por isso so preferidas as CFL
SB de classe II que protegem tambm o produto. Estas
cmaras conferem uma proteo do operador atravs de
uma corrente de ar que atravessa a abertura de
manipulao, do exterior para o interior da cmara, como
demonstra a Figura 4, a uma velocidade mnima de 0,4m/s
Figura 4 - CFL SB Classe I. [11]

(norma E.U.A.) ou 0,7-1 m/s (norma Europeia), sendo o ar

expelido da cmara atravs de um filtro HEPA, obtendo-se

consequentemente a proteo do ambiente. [11]

Relativamente s CFL SB classe II, como

j foi referido anteriormente, segundo a norma
americana existem quatro tipos: A1, A2, B1, B2 e
B3.
No tipo CFL SB classe II A1 e A2 existe um
ventilador interno que aspira o ar ambiente que
passa pela grelha anterior, de modo a manter um
fluxo de ar com velocidade mnima de 0,38 m/s
para as A1 e 0,5 m/s para as A2, na abertura de
trabalho da cmara. Esse ar, antes de chegar

Figura 5 - CFL SB classe II A1 e A2.

[11]

rea de trabalho passa por um filtro HEPA e dirigido de cima para baixo em direo
rea de trabalho, resultando num fluxo compreendido entre 0,25-0,5 m/s, isento de
partculas minimizando assim a contaminao cruzada. No entanto, uns centmetros
acima da rea de trabalho, o fluxo de ar divide-se, sendo uma parte aspirada pela
grelha anterior e outra pela grelha posterior, como demonstrado na Figura 5. O ar
ento conduzido atravs do pleno posterior para o espao situado entre os filtros
HEPA de sada e de alimentao, de modo a que 30% seja expelido e 70%
recirculado. Este mecanismo possvel devido diferena de tamanho de filtros e
pelo efeito de um registo modulador. Nestas cmaras como difcil conduzir a
exausto para o exterior, uma vez que compromete a dinmica interna da cmara,
prefervel selecionar uma cmara classe II B sempre que haja necessidade de
exausto exterior.[11]
14

Uma outra diferena entre as CFL SB classe II A1 e A2 relativa

possibilidade de manipulao de qumicos txicos volteis e radionucldeos, onde s
possvel nas A2 aquando da presena de nveis reduzidos ou vestgios. As CFL SB
classe II A2 e as B3 so muito semelhantes, havendo at fabricantes que produzem
cmaras que podem funcionar como tipo A2 ou B3, sendo designadas de A/B3. Como
pode ser visto na Tabela 10, as B3 diferem por serem construdas de modo a poderem
evacuar o ar de extrao para o exterior, sem prejuzo da dinmica interna da cmara,
isto porque tm uma velocidade superior de entrada do ar na abertura de trabalho (0,5
em vez de 0,4 m/s) e por terem os plenos que reduzem o ar contaminado, rodeados
por outros plenos com presso negativa. Com este mecanismo, qualquer fuga de ar
contaminado ir ser feita para o interior da cmara e no para o exterior.[11]

Nas CFL SB classe II B1, os ventiladores de admisso aspiram ar ambiente e

30% do ar recirculado do interior da cmara, atravs de um filtro HEPA situado logo
abaixo da bancada de trabalho, a uma velocidade mnima de 0,5 m/s. Aps filtrado, o
ar enviado para a parte superior da cmara,
efetuando depois um trajeto descendente at
rea de trabalho, onde poder constar um filtro
HEPA para remoo de eventuais partculas
geradas pelo ventilador. Os restantes 70% de ar
recirculado so aspirados pela grelha posterior e
enviados para o exterior atravs de um filtro HEPA
de sada, percorrendo um circuito independente.
Estas CFL esto ligadas ao exterior atravs de uma

Figura 6 - CFL SB classe II B1. [11]

conduta de exausto que tem o ventilador de sada

na extremidade terminal, levando a uma presso negativa. recomendado que o
ventilador seja alimentado por um circuito de emergncia, para evitar que pare de
funcionar.[11]

As CFL SB classe B2 permitem a manipulao tanto de substncias slidas e

aerossis como tambm de produtos que emitam gases e vapores. So cmaras de
exausto total. Por isso, estas cmaras tm uma manuteno mais cara pois podem
consumir mais de 30 m3 de ar condicionado por minuto. Tm a particularidade de no
permitir a recirculao de ar interno. Contm um ventilador de admisso que aspira o
ar ambiente na parte superior da cmara e atravs de um filtro HEPA que esse ar
entra sob a forma laminar no interior da cmara, rea de trabalho. De seguida, o

15

sistema de extrao aspira esse ar pelas grelhas

anterior e posterior, inclusive a quantidade de ar
ambiente da grelha anterior para criar um movimento
de ar do exterior para o interior, com velocidade
mnima de 0,5 m/s. No entanto, todo o ar admitido
passa por um filtro HEPA e/ou outros filtros como os
de carvo ativado, por exemplo. O ar de extrao
deve ser evacuado por uma conduta construda para
esse

efeito,

com

ventilador

de

extrao

na

extremidade externa, isto porque em caso de falha

Figura 7 - CFL SB classe II B2.

[11]

deste ventilador, este ir provocar uma presso

positiva no interior da cmara, levando assim sada de ar contaminado da cmara
para a sala. Para evitar a ocorrncia desta falha, pretende-se que este tipo de CFL
tenha um Sistema de Monitorizao da Presso na Conduta de Sada, que possa
desligar o ventilador de admisso sempre que essa presso ultrapassar um valor prdefinido, de modo a compensar o efeito.[11]

Por fim, as CFL SB classe III constituem

a mxima proteo do operador e ambiente.
So concebidas para a manipulao de
microrganismos classificados no nvel de risco
biolgico 4, ou seja, microrganismos que
causam doenas graves no ser humano, sendo
suscetvel de apresentar um elevado nvel de
propagao e para o qual no existem, em
regra, meios eficazes de profilaxia ou de

Figura 8 - CFL SB classe III. [11]

tratamento.[16] Estas cmaras tambm se

caracterizam por serem estanques aos gases, com uma janela fixa onde a introduo
e extrao dos produtos se faz por uma cmara com dupla porta, em que cada porta
s pode ser aberta se a outra estiver fechada. Relativamente ventilao da cmara,
esta faz-se por circuito exterior cmara, sendo o ar que entra filtrado por um filtro
HEPA e o ar evacuado filtrado por dois filtros HEPA montados em srie. Como o
operador no tem acesso direto ao interior da cmara, a manipulao faz-se atravs
de luvas de borracha fixas frente da cmara, sendo estanques aos gases. Uma outra
grande diferena desta cmara em relao s restantes o facto de poder ser feita

16

medida e pode incorporar no seu interior prateleiras, frigorficos ou centrfugas, por

exemplo.[11]

2.5

Preparao Assptica e Fabrico Industrial

Tal como acontece para as restantes formas farmacuticas, os produtos

farmacuticos estreis tm um processo rigorosamente controlado, que vai desde a

combinao dos compostos da frmula pretendida at colocao do produto em
embalagem e rotulagem. No entanto, o que as distingue dos outros produtos que os
estreis tm um controlo mais exigente e restrito no que toca ao ambiente envolvente
produo, levando a um controlo no s do ambiente fsico mas tambm do pessoal
interveniente. Por muito que um processo esteja perfeitamente elaborado, se no tiver
pessoal qualificado ou um meio envolvente de acordo com os requisitos e
equipamentos adequados, no se poder obter um produto de qualidade. por isso
essencial documentar todos os passos do processo de produo e as condies
necessrias.[17]
Em lotes de grande dimenso, deve-se prestar ateno obteno e
manuteno da homogeneidade das formas farmacuticas produzidas, e por isso
importante ter um bom planeamento de todos os passos do processo para que se
possam manter os valores de qualidade pretendidos. Por exemplo, a ordem de mistura
dos compostos quando se fazem lotes grandes, pode levar logo obteno de um
produto de risco e m qualidade, devido a problemas fsicos em distribuir um
composto para ajuste de pH num grande tanque de soluo.[17]
No incio do processo de produo, tal como se pode observar pela Figura 9,
os compostos, componentes dos recipientes e equipamento de fabrico so levados do
armazm at rea de produo. O equipamento necessita de esterilizao e
despirogenizao antes de ser montado no local, mas numa produo industrial este
equipamento sofre este processo na origem, e submetido a verificaes peridicas
uma vez que no o mudam de lugar.[17]
Aps a lavagem, os componentes devem ser manipulados num ambiente de,
pelo menos, classe D, e no caso das matrias-primas e componentes esterilizados,
deve ocorrer num ambiente de classe A com uma envolvente de classe B, salvo se
forem posteriormente sujeitos a esterilizao ou filtrao.[8] Exemplos de esterilizao
de componentes so os recipientes de vidro esterilizados por calor seco e as tampas
de borracha por calor hmido.[10, 17]

17

A preparao de solues que iro ser filtradas durante o processo deve

ocorrer num ambiente de classe C; a preparao de materiais e produtos no filtrados
deve ocorrer num ambiente de classe A com uma envolvente de classe B.[8]

Figura 9 - Diagrama de fluxo de materiais atravs do departamento de produo adaptado de Lachman,

L., H. Lieberman, and J. Kanig.[17]

O manuseamento e enchimento de produtos preparados assepticamente

devem ocorrer num ambiente de classe A, Sala Limpa ou rea assptica, com uma
zona envolvente de classe B. Aqui, todos os equipamentos e materiais utilizados
devem ser estreis, mantendo assim os requisitos de esterilidade da rea envolvente
ao produto.[8, 17]
Antes da concluso da rolhagem, a transferncia de recipientes parcialmente
fechados, usados na liofilizao, deve ocorrer num ambiente de classe A, com uma
envolvente de classe B, ou em tabuleiros de transferncia hermticos, num ambiente
de classe B. Segue-se a selagem, tambm em classe A, mas quando for colocado na
embalagem j numa rea limpa que no necessita de responder aos requisitos da
rea de classe A. Os produtos embalados so guardados no armazm de quarentena
at que todos os registos dos controlos de qualidade em processo e produto tenham
sido avaliados e correspondam aos parmetros exigidos, sendo o produto
posteriormente libertado para distribuio.[17]

2.5.1

Tecnologia de Isoladores
Os Isoladores tm como objetivo minimizar a principal causa de contaminao

do produto, a interveno humana, em reas de processamento, o que pode resultar

numa diminuio significativa do risco de contaminao microbiolgica dos produtos
fabricados assepticamente a partir do ambiente que rodeia o processo de produo. O
ambiente que rodeia um isolador ter de ser de classe D ou superior.[8]

18

O Isolador e o ambiente devem estar preparados para promover uma qualidade

do ar necessria para o funcionamento daquela zona, sendo o ambiente interior
estril, esterilizado com vapor de perxido de hidrognio, por exemplo, e o fluxo de ar
unidirecional. Os Isoladores so construdos de materiais diferentes, de fcil limpeza e
manuteno. Os dispositivos de transportes podem variar entre ter uma ou duas
portas, destinadas a selar o sistema que incorpora mtodos de esterilizao.[18]
O transporte de materiais para o interior e exterior do Isolador constitui um risco
de contaminao, uma vez que no seu interior se realiza manipulao de alto risco.[8]

Figura 10 - Exemplo da estrutura de um Isolador.[19]

2.5.2

Tecnologia de sopragem/enchimento/vedao ou Blow-fill-seal

Esta tecnologia consiste em mquinas

especficas,

nas

quais,

numa

operao

contnua h formao dos contentores a partir

de granulado termoplstico, enchimento e
fecho. O equipamento utilizado na produo
assptica composto por um chuveiro de ar de
classe A e est integrado num ambiente classe
C ou superior, desde que seja usado vesturio
das categorias A/B.[8, 20]
Devido a esta tecnologia especial, deve-se prestar especial ateno conceo e
qualificao

do

equipamento,

validao

reprodutibilidade da limpeza e da esterilizao

in loco, ao ambiente circundante da Sala Limpa
19

Figura 11 - Etapas no Blow-fill-seal.[17]

em que se encontra o equipamento, formao e ao vesturio do operador, s

intervenes na zona crtica do equipamento, incluindo qualquer montagem assptica
antes de se dar incio ao enchimento.[8]

2.5.3

Produtos submetidos a esterilizao final

Quando o produto em questo submetido a esterilizao final, a sua

preparao deve processar-se, no mnimo, num ambiente de classe D, de modo a
originar baixo risco de contaminao microbiana e por partculas, apropriado para
filtrao e esterilizao.[8]
Caso o produto apresente um risco elevado ou invulgar de contaminao
microbiana, por exemplo quando o produto favorece o crescimento de flora microbiana
ou tem de aguardar um perodo prolongado antes da esterilizao ou no
processado maioritariamente em recipientes fechados, a preparao deve ocorrer num
ambiente de classe C. O enchimento destes produtos deve ocorrer, no mnimo, num
ambiente de classe C.[8]
J se o caso for de risco de contaminao ambiental, o enchimento deve
ocorrer numa zona de classe A com um ambiente circundante de, pelo menos, classe
C.[8]
A preparao e enchimento de pomadas, cremes, suspenses e emulses
deve ocorrer geralmente num ambiente de classe C, antes da esterilizao terminar.
No entanto, caso o produto seja exposto e no for posteriormente filtrado, a
preparao e enchimento devem ocorrer num ambiente de classe A, com uma
envolvente de classe B.[8]

2.6

Espao fsico

Nas reas limpas, todas as superfcies expostas devem ser lisas,

impermeveis e intactas, no devem existir recantos inacessveis limpeza e os
rebordos salientes. Prateleiras, armrios e equipamento auxiliar devem ser reduzidos
ao mnimo de modo a diminuir a contaminao ou acumulao de partculas ou de
microrganismos e permitir a aplicao repetida de agentes de limpeza e de
desinfetantes, se for caso disso. Em relao s portas, so preferveis as portas de
correr, evitando assim recantos inacessveis.

20

A limpeza dever ser feita por pessoal que tenha tido formao para esta
tarefa, tendo um horrio especfico. Os procedimentos de limpeza e tcnicas especiais
sero definidos para minimizar o risco de acidentes inevitveis ou falhas de sistemas
que criam contaminao, que coloquem as Salas Limpas, produtos, processos ou
pessoas em risco.[8, 21]
Os tetos falsos devem ser vedados para impedir a contaminao do espao
superior. Os tubos e condutas e outros sistemas de abastecimento devem ser
instalados de forma a no criar recantos, aberturas e superfcies permeveis difceis
de limpar.[8]
A zona de eliminao de substncias deve ser proibida nas reas de classes
A/B utilizadas no fabrico assptico. Noutras reas, devem ser colocados interruptores
de ar entre a mquina ou drenos. Por exemplo, os drenos no pavimento das Salas
Limpas de classes inferiores devem ser equipados com redes protetoras ou vlvulas
hidrulicas para impedir o refluxo.[8]
Os vestirios devem ser concebidos com entradas pressurizadas e utilizados
como barreira fsica das diversas fases de mudana de vesturio, minimizando, deste
modo, a contaminao microbiana e por partculas do vesturio protetor. Devem ser
eficazmente limpos com ar filtrado. No estado em repouso, a etapa final do vestirio
deve ser da mesma classe da rea a que d acesso. Por vezes, desejvel a
utilizao de vestirios separados para a entrada e sada das reas limpas. Regra
geral, s deve haver instalaes para lavar as mos na primeira etapa dos
vestirios.[8]
As duas portas pressurizadas no devem abrir simultaneamente. Deve ser
acionado um sistema de bloqueio ou um sistema de aviso visual e/ou sonoro a fim de
impedir a abertura de mais do que uma porta de cada vez.[8]
O abastecimento do ar filtrado deve manter uma presso positiva e um fluxo de
ar em relao s reas circundantes de classe inferior em todas as condies
operacionais e limpar eficazmente a rea. As salas adjacentes de classe diferente
devem ter uma presso diferencial de 10 - 15 pascais (valor de referncia). Deve
prestar-se particular ateno proteo da zona de risco mais elevado, ou seja, o
ambiente imediato a que esto expostos o produto e os componentes limpos que
entram em contacto com o produto. Em certas operaes, poder ser necessrio
proceder descontaminao das instalaes e ao tratamento do ar expelido da rea
limpa. Deve tambm existir um sistema de alerta para indicar falhas no abastecimento
de ar. Devem existir manmetros entre as reas em que estas diferenas so
significativas. As diferenas de presso devem ser registadas regularmente ou
documentadas.[8]
21

2.7

Pessoal
Apesar de o processo industrial de medicamentos estar muito automatizado, o

papel do pessoal que intervm no processo de extrema importncia. Todo o pessoal

deve receber formao relativa no s das suas tarefas em particular como tambm
acerca do ambiente do seu local de trabalho. necessrio formar sobre a Tcnica
Assptica, como manter a higiene e limpeza necessrias para cada rea de trabalho,
elementos bsicos de microbiologia, saber comunicar quaisquer condies que
possam provocar a propagao de um nmero ou tipos anormais de contaminantes,
conhecer o procedimento sobre troca de roupa e lavagem de modo a minimizar a
contaminao do vesturio da rea limpa ou o transporte de contaminantes para as
reas limpas e como atuar em caso de emergncia. Tambm importante que os
funcionrios estejam de boa sade, realizem exames mdicos peridicos e relatem
qualquer desenvolvimento de sintoma que seja sinal de infeo.[8]
Em todas as reas de produo nas reas limpas, deve estar presente apenas
o nmero mnimo de pessoas necessrias. [22]

2.8

Vesturio
O vesturio e respetiva qualidade devem ser apropriados para o processo e a

classe da rea de trabalho. Deve ser limpo, resistente ao atrito e dispersar o mnimo
de partculas, como o caso do algodo.[5, 21] Este facto de extrema importncia
pois a primeira linha de controlo de libertao de contaminantes, partculas viveis e
no-viveis do exterior.
No equipamento do pessoal deve constar, principalmente, uma bata, calas,
touca, botas, luvas e culos, sendo de evitar a presena de botes e pregas, pois
podem alojar partculas constituindo uma fonte de contaminao.[5]
Quando o vesturio se destina a ser novamente usado, este dever ser
submetido a 3 processos diferentes de limpeza: desinfeo, ciclos de gua quente e
esterilizao, para que se possa garantir o estado pretendido quando for novamente
utilizado numa Sala Limpa. Nestes processos tambm so efetuados testes de
esterilidade para comprovar que a limpeza foi realizada com sucesso e no h perigo
de contaminao por parte do vesturio.[21]
Descreve-se seguidamente o vesturio exigido para cada classe de Sala
Limpa.

22

Tabela 11 - Condies de vesturio exigidas para cada classe de Sala Limpa.[8]

Classe D

O cabelo e, se for caso disso, a barba devem ser cobertos. Deve-se usar um
fato protetor e sapatos ou protetores de sapatos adequados. Devem tomar-se medidas adequadas para evitar qualquer contaminao proveniente do
exterior da rea limpa.

Classe C

O cabelo e, se for caso disso, a barba e o bigode devem ser cobertos. Deve
usar-se um fato completo ou de duas peas com calas, apertado nos pulsos
e com gola alta e sapatos ou protetores de sapatos adequados. Estes fatos
no devem disseminar praticamente quaisquer fibras ou partculas.

Classe A/B

O cabelo deve ser totalmente encerrado numa touca e, se for caso disso, a
barba e o bigode; a touca deve ser introduzida dentro da gola do fato; deve
usar-se mscara facial para impedir o derrame de gotculas. Devem-se usar
luvas de borracha ou plstico, esterilizadas e sem p, e calado esterilizado
ou desinfetado. As calas devem ser introduzidas dentro do calado e as
mangas do vesturio dentro das luvas. O vesturio protetor no deve
disseminar praticamente quaisquer fibras ou partculas e reter as partculas
lanadas pelo corpo.

O vesturio exterior no deve entrar nos vestirios de acesso s salas da

classe B e C. Deve ser fornecido a cada operador das reas da classe A/B, vesturio
protetor limpo e estril (esterilizado ou adequadamente higienizado) para cada sesso
de trabalho. Durante as operaes, as luvas devem ser regularmente desinfetadas e
juntamente com as mscaras, estas devem ser mudadas, pelo menos, em cada nova
sesso de trabalho.[8]
desejvel a existncia de lavandarias separadas para este tipo de vesturio,
de modo a garantir o tratamento adequado do vesturio no danificando as fibras e
diminuindo assim o risco de emisso de partculas.
Os elementos mais importantes no vesturio esto descritos no Anexo A.

2.9

Mtodos de Controlo Ambiental

Com a finalidade de controlar e verificar o cumprimento das exigncias, realiza-se o Controlo Ambiental, o qual depende da rea envolvida e do tipo de produto a
preparar. Como anteriormente j foi referido, existem vrios tipos de salas, ou reas,
cada um com os seus requisitos no que respeita ao nmero de partculas e
contaminao microbiolgica. Com esse objetivo realizam-se os seguintes testes:
23

Avaliao Biolgica

Avaliao de Partculas

Exposio de Placas de Petri

Colheita atravs de fenda
Colheita atravs de centrifugao
Colheita atravs de uma srie de
tamizes
Colheita por impacto num lquido
Filtrao atravs de membrana

Filtrao atravs de membrana

Contador de partculas por difraco da
luz em ngulo recto
Contador de partculas por difraco da
luz

Tabela 12 - Tcnicas utilizadas na avaliao

microbiolgica.[17]

Tabela 13 - Tcnicas utilizadas na avaliao de

partculas. [17]

Apesar da realizao destes testes, existe tambm o Controlo do Trfego de

Pessoal, o principal agente de contaminao, e Controlo do Ar.
Relativamente ao Controlo de Trfego, este comea logo na organizao dos
espaos na indstria. H uma disposio das salas de modo a que, por exemplo, as
Salas Limpas, ou de Classe A, tenham acesso atravs de uma antecmara, sendo que
para se poder entrar nestas salas, tem que estar autorizado para tal e seguir
procedimentos rgidos em relao ao vesturio e higiene, e no permitida a sada e
reentrada sem que se realizem novamente os procedimentos de vesturio e higiene.
[17]
No Controlo do Ar, h a preocupao de que este tanto se adeqe no s aos
processos que estejam a ser realizados no local como tambm ao pessoal
interveniente. Em qualquer rea ocupada por pessoal, o ar deve ser renovado em
intervalos frequentes, sendo que o ar exterior fresco ou reciclado deve ser primeiro
filtrado para remover partculas grosseiras e podem existir filtros em srie constando
filtros HEPA no final da srie. No caso das reas limpas, o ar limpo e assptico flui
com maior volume e velocidade de fluxo, produzindo assim uma presso positiva
nestas reas, evitando a entrada de ar sujo atravs das aberturas ou portas
temporariamente abertas.[17]

24

CONTROLO DE QUALIDADE E ESTUDO COMPARATIVO DOS SEUS

ENSAIOS

Uma vez finalizado o processo de produo e ao longo de produo, realiza-se

a comprovao da qualidade do produto. Estes ensaios so de extrema importncia
pois pertencem ao passo importante antes da libertao dos lotes produzidos para
futura comercializao.

3.1

Teste para deteo de Endotoxinas - Pirognios

As bactrias Gram-negativas so as responsveis pela libertao de

endotoxinas, sendo algumas delas de atividade pirognica mais elevada, e portanto
pretende-se que o medicamento seja isento destes contaminantes, uma vez que
prejudicam a sade do indivduo.[3] De natureza lipopolissacridica, estas endotoxinas
so potentes iniciadores de resposta inflamatria que atravs de recetores toll-like 4 e
CD4, levam libertao de citocinas responsveis pelo aumento da temperatura
corporal.[23, 24]
Para deteo destas endotoxinas existe o mtodo in vivo, onde se mede a
variao da temperatura ou variao leucocitria nos coelhos e/ou ces aps
administrao IV da soluo amostra, uma vez que a sua sensibilidade semelhante
dos humanos [25, 26]; e, finalmente, os mtodos in vitro, onde se utilizam um lisado de
amebcitos de lmulo, ou mtodo LAL, para a determinao por Gelificao,
Turbidimetria e Colorimetria.[27]

3.1.1

Teste LAL
Quando na Farmacopeia no est mencionado qual o ensaio de endotoxinas

especfico, o Ensaio de Gelificao o mtodo de referncia. o mais simples e que

despende de menor tempo dos 3 mtodos que utilizam LAL, dado o facto de
apresentar um resultado positivo ou negativo caso ocorra gelificao ou no, visvel a
olho nu. J o mtodo de Turbidimetria e Colorimetria so mtodos quantitativos,
obtendo-se assim uma concentrao de endotoxinas/pirognios. No entanto, apesar
de estes dois ltimos mtodos necessitarem de mais materiais e instrumentos so
fceis de automatizar para o controlo de rotina de um grande nmero de amostras.[3]

25

O limite de sensibilidade para o teste de endotoxinas a ser utilizado calculado

atravs da expresso K/M, onde M a dose mxima administrada a um adulto, com
peso mdio de 70Kg, por Kg por hora. O valor de K o valor mximo permitido de
endotoxinas numa preparao farmacutica, sendo 5,0 EU/kg para as preparaes de
uso parenteral e 0,2 EU/kg para as preparaes para administrao intraraquideana.[3]

3.1.2

Teste de Determinao da Temperatura em Coelho

Como mtodo in vivo h a Determinao da Temperatura em Coelhos, cujo

ensaio muito semelhante na Farmacopeia Portuguesa (FP), Americana (USP),

Britnica (BP), Europeia (EP) e Japonesa (JP).[3, 28-31]
Neste ensaio, escolhem-se coelhos adultos saudveis com um peso de 1,5 Kg,
que no tenham sido submetidos a uma pesquisa negativa de pirognios durante os 3
dias precedentes, ou que no tenham sido utilizados nas 3 semanas precedentes
numa pesquisa positiva de pirognios. H medio da temperatura antes, durante 30
min, e aps a administrao da soluo amostra pela veia marginal da orelha, durante
90 min.[3] A soluo-amostra satisfaz o ensaio de acordo com a tabela seguinte.
Tabela 14 - Requisitos para a satisfao no Ensaio de Determinao da temperatura dos coelhos. [3, 2831]

Farmacopeia

FP, BP, Ph. Eur.

USP

JP

N. de coelhos no
grupo

Satisfaz teste se a
diferena de
temperatura menor
que (C)

No-satisfaz teste se
a diferena de
temperatura maior
que (C)

3
6
9
12
3
8

1,15
2,80
4,45
6.60
---3,30

3
6
9

1,30
3,00
5,00

2,65
4,30
5,95
6,60
O aumento de
temperatura de cada
coelho no deve ser
superior a 0,6C
2,50
4,20
5,00

No caso de ocorrer infeo bacteriana, h libertao de pirognios que ativam

mecanismos de defesa que se traduzem pelo aumento rpido do nmero de leuccitos
em circulao, nomeadamente os neutrfilos, com o intuito de combater a infeo de
forma o mais rapidamente possvel. A atuao dos leuccitos traduz-se pela produo
de pirognios endgenos, denominados de citocinas, que tal como os pirognios
26

exgenos podem desencadear a febre, sendo este um mecanismo de proteo do

organismo.[32, 33]

3.2

Contaminao de partculas: partculas no visveis

Uma das fases mais importantes no Ciclo de vida do medicamento a

formulao do prprio medicamento mas tambm a escolha do recipiente ou
embalagem primria. O fabrico dos materiais dos recipientes tem vindo a sofrer
alteraes ao longo dos tempos, sempre com novidades que permitem uma maior
estabilidade do produto armazenado.
No controlo da contaminao por partculas no visveis, o constituinte mais
predominantemente encontrado o Silicone, com origem nas ampolas de vidro por
exemplo. Tal como a composio qumica das partculas, a dimenso tambm de
grande importncia pois num estudo foram encontradas partculas de tamanho
compreendido entre 5-50 m, tamanho superior ao dimetro dos capilares, ou seja 812 m, que levam sua obstruo.[34, 35]
Para a determinao da contaminao por partculas existem 2 mtodos: o
Ensaio de Contagem de Partculas por Interceo da Luz (mtodo 1) e o Ensaio de
Contagem de Partculas por Microscopia tica (mtodo 2). Tanto um mtodo como
outro apresentam procedimentos iguais nas FP, USP, BP, Ph. Eur. e JP.[36-38]
Para a determinao de partculas no visveis nas preparaes injetveis e
nas preparaes para perfuso utiliza-se de preferncia o Ensaio de Contagem de
Partculas por Interceo da Luz. Em determinadas preparaes, pode ser necessrio
realizar Ensaios de Contagem de Partculas por Interceo da Luz em primeiro lugar e
s depois por Microscopia tica para se poder concluir quanto conformidade dos
resultados obtidos.[3] Mas quando o mtodo 1 no aplicvel, por exemplo no caso
das preparaes pouco lmpidas ou muito viscosas, como o caso das emulses, das
solues coloidais e das preparaes de lipossomas, o ensaio realiza-se com recurso
ao mtodo 2. Do mesmo modo, um ensaio de Contagem de Partculas por Microscopia
tica pode igualmente ser exigido no caso de produtos que formem bolhas de ar ou de
gs quando passam atravs do detetor. Se a viscosidade da preparao tal que o
exame por um ou outro dos mtodos impossvel, pode-se efetuar uma diluio
quantitativa com um diluente apropriado de modo a reduzir a viscosidade para o grau
julgado necessrio para permitir o ensaio.[3] Em ambos os ensaios, o procedimento
efetua-se em condies que limitem a contaminao por partculas, de preferncia
numa CFL.[3]
27

3.2.1

Ensaio de Contagem de Partculas por Interceo da Luz

Neste ensaio utilizado um aparelho baseado no princpio da interceo de um

raio luminoso que vai permitir a determinao automtica do tamanho das partculas e
a distribuio de tamanhos. Para isso, o aparelho calibrado com substncias de
referncia que consistem em disperses de partculas esfricas, de tamanho
conhecido e compreendido entre 10 e 25 m, em gua isenta de partculas. A
realizao deste ensaio exige condies que limitem a contaminao por partculas,
por isso aconselhvel ser feito numa CFL. [3]

Figura 12 - Equipamento de deteo e contagem de partculas, MFI

Technology.[39]

TM

A amostra satisfaz o ensaio quando cumpre os seguintes requisitos, que so

iguais para FP, USP, BP, Ph. Eur. e JP:
Tabela 15 - Requisitos para a satisfao do Ensaio de Contagem de Partculas por Intercepo da Luz.[3,
28-31]
Volume da soluo

Pequeno volume (100 mL)

Grande volume (>100 mL)

3.2.2

Tamanho de partcula 10

Tamanho de partcula 25

3000 por recipiente

300 por recipiente

12 por mL

2 por mL

Ensaio de Contagem de Partculas por Microscopia tica

Para este ensaio utilizado um microscpio binocular, um dispositivo de

filtrao e uma membrana capaz de reter possveis contaminaes por partculas. O

microscpio constitudo por um micrmetro ocular calibrado, que consiste num
retculo circular que compreende um grande crculo, ou campo de viso do retculo,
dividido em quartos por linhas cruzadas, crculos de referncia negros e transparentes
de dimetro de 10 e de 25 m com um aumento de 100 e uma escala linear graduada
28

de 10 em 10 m e calibrado com um
micrmetro de objetiva.

So necessrios

tambm dois iluminadores, um iluminador

episcpico

para

fundo

claro,

interno

do

microscpio, e um iluminador auxiliar externo

regulvel,

ajustvel

para

iluminao

oblqua

refletida

permitir

uma

segundo

um

ngulo de 10-20. O dispositivo de filtrao

est destinado a reter a contaminao por

Figura 13 - Retculo circular. [2]

partculas, constitudo por um suporte de filtro

de vidro ou de outro material conveniente, uma fonte de vcuo e uma membrana
adequada. A membrana filtrante, de dimenses apropriadas, de cor negra ou
cinzenta escura e coberta ou no com uma grelha, sendo o tamanho dos poros
inferior ou igual a 1,0 m. [3] Tal como o ensaio anterior, a realizao deste ensaio
exige condies que limitem a contaminao por partculas, por isso aconselhvel
ser feito numa CFL. [3]
A amostra satisfaz quando cumpre os seguintes requisitos que so iguais para
FP, USP, BP, Ph. Eur. e JP:

Tabela 16 - Requisitos para a satisfao do Ensaio de Contagem de Partculas por Microscopia tica.[3,
28-31]
Volume da soluo

Tamanho de partcula 10 m

Tamanho de partcula 25 m

6000 por recipiente

600 por recipiente

25 por mL

3 por mL

Pequeno volume (100 mL)

Grande volume (>100 mL)

3.3

Contaminao de partculas: partculas visveis

Neste ensaio analisa-se a contaminao

por

partculas

constituda

por

nas

preparaes

partculas

Injetveis

estranhas,

no

dissolvidas e mveis, alm das bolhas de gs, e

que se encontram involuntariamente dentro destas
solues.
Para este ensaio utiliza-se um aparelho,
como

demonstrado

na

Figura

14

e
29

15,

Figura 14 Esquematizao do aparelho

para determinao de partculas
visveis.[2]

constitudo por um painel preto bao, um painel branco antirreflexo e uma rampa com
fonte de iluminao ajustvel.
Para a deteo de partculas, retiram-se os rtulos dos recipientes, lavam-se e
seca-se o exterior do recipiente. Agita-se suavemente e inverte-se cada recipiente com
precauo, evitando a formao de bolhas de ar e observa-se o interior do recipiente
durante cerca de 5 segundos contra o painel branco. Repete-se de seguida o mesmo
procedimento contra o painel preto. Caso haja a presena de qualquer partcula,
regista-se.[2]

Figura 15 - Exemplo de aparelho para determinao de partculas visveis.

[40]

3.4

Teste de Tonicidade

A determinao da tonicidade utiliza a medio do abaixamento crioscpio,

presso de vapor e presso osmtica. O abaixamento crioscpio e a presso de vapor
so mtodos rpidos e que necessitam de pouca quantidade de amostra, mas tm a
desvantagem de serem mtodos indiretos dependentes de fatores termodinmicos e
solubilidade. A presso osmtica sobre os glbulos vermelhos no muito aceite uma
vez que o comportamento dos glbulos vermelhos pode variar consoante a sua
resistncia. No entanto para todos os mtodos, a temperatura ambiente vai influenciar
nos resultados obtidos. Tambm existem mtodos diretos, como a osmometria de
membrana desenvolvida em laboratrio, semipermevel, onde se mede a presso do
lquido aps se atingir o equilbrio do fluxo atravs da membrana, mas tem a limitao
de requerer grandes quantidades de amostra.[5, 41-43]

30

3.5

Determinao de pH

O pH um parmetro essencial no s no controlo do produto, na previso da

estabilidade ao longo do tempo, mas tambm um indicador do processo de fabrico,
indiretamente, que demonstra uniformidade do produto.[44, 45]
Este ensaio pode ser realizado com papis indicadores, pouco rigorosos,
colorimetria ou atravs de tcnicas potenciomtricas, mtodo mais rigoroso.[3, 5, 31]

3.6

Volume Extravel

O ensaio do Volume Extravel destinado s preparaes injetveis unidose

como ampolas, cartuchos ou seringas pr-cheias. Estes medicamentos esto
acondicionados em recipientes que contm uma quantidade de preparao suficiente
para permitir a administrao da dose nominal indicada no rtulo, sendo o volume final
ligeiramente superior ao volume nominal. O excedente depende das caractersticas do
produto e no uma quantidade capaz de apresentar risco se o contedo for
administrado na sua totalidade.[3]
No caso das suspenses e as emulses so agitadas antes da retirada do
contedo para a determinao da massa volmica. As preparaes oleosas ou
viscosas podem ser aquecidas, se necessrio, segundo as indicaes indicadas no
rtulo e vigorosamente agitadas imediatamente antes da retirada do contedo;
posteriormente, este arrefecido a 25C antes da determinao do volume.[3]
Para a realizao do ensaio, utiliza-se o nmero de amostras conforme o seu
volume, como est descrito na Tabela 17. Retira-se, ento, todo o volume contido no
recipiente para uma proveta, e no caso de volumes mais pequenos faz-se com auxlio
de seringa. A amostra satisfaz o ensaio caso o volume obtido no seja inferior ao
volume nominal. O procedimento e critrios de satisfao do ensaio so iguais para as
Farmacopeias Americana, Britnica, Japonesa e Europeia.[3, 28-31, 36-38]

Tabela 17 - Nmero de recipientes a utilizar no ensaio de acordo com o volume de soluo.[3, 28-31]
Volume de soluo

N. de recipientes usados para o teste

10 mL

3 10 mL

< 3 mL

31

3.7

Teste de esterilidade

Todos os produtos designados estreis tero essencialmente de satisfazer este

ensaio, cuja principal finalidade deste garantir que se est presente de um produto
isento de microrganismos viveis, cuja probabilidade de sobrevivncia seja de 10-6.
So submetidos a este teste os produtos e materiais sujeitos a um processo de
esterilizao previamente validado, tal como o processo de fabrico.[17, 46]

3.7.1

Mtodo Standard
O mtodo standard o que est presente nas Farmacopeias, com

procedimento igual para vrios pases, e realiza-se num ambiente onde o risco de
contaminao seja o mnimo possvel, ou seja, nas CFL presentes em Salas Limpas.
Desta forma no s possvel tanto o despiste de uma contaminao por parte da
matria-prima, recipientes, equipamentos, instrumentos, como tambm do processo
de produo e o ambiente envolvente. Neste procedimento existem 2 mtodos
distintos: tcnica de filtrao atravs de membrana ou sementeira direta do meio
nutritivo com a amostra.[3, 28-31, 36]
A tcnica da filtrao atravs de membrana utilizada sempre que a natureza
do produto o permita, ou seja, quando so preparaes aquosas filtrveis, alcolicas
ou oleosas, preparaes solveis em solventes aquosos ou oleosos ou miscveis com
esses solventes desde que no exeram efeito antimicrobiano nas condies do
ensaio, de modo a evitar falsos negativos. Segundo este mtodo, faz-se passar a
amostra do produto por um filtro de membrana estril, do tipo polimrico, de
porosidade igual a 0,2 m. Esta porosidade vai permitir a reteno de bactrias no
filtro, que posteriormente lavado e inoculado num meio segundo a Tabela 20. Esta
tcnica permite analisar maiores quantidades de volumes.[3, 46]
No mtodo de sementeira direta do meio nutritivo com a amostra, h
inoculao direta do produto a analisar, conforme a Tabela 20.[3]
Quando existe na amostra um agente com propriedades antimicrobianas,
efetua-se o ensaio aps ter-se inativado o agente antimicrobiano por meio de uma
substncia adequada, como um agente complexante que o faa precipitar seguida de
filtrao para remoo, ou por alterao do pH timo ou por diluio numa quantidade
suficiente do meio de cultura. Ambos os mtodos so baseados na inoculao,
membrana ou amostra e isolamento dos microrganismos.[3, 5, 46]

32

Relativamente quantidade de amostras a ser submetida ao ensaio, esta

depende da dimenso do lote, como referido nas seguintes tabelas.
Tabela 18 - Nmero mnimo de unidades a utilizar no ensaio conforme dimenso do lote.[3]
N. de unidades por lote

N. mnimo de unidades a examinar por meio,

salvo exceo justificada e autorizada

Preparaes parentricas
100

10%, mas no menos de 4

> 100 e 500

10

> 500

2%, mas no mais de 20

Preparaes oftlmicas e outras preparaes de uso

no-injetvel
200

5%, mas no menos de 2

> 200

10

Se o produto for acondicionado em recipientes unitrios,

aplica-se o esquema de amostragem das preparaes
parentricas
Produtos slidos a granel
4

Todos os recipientes

> 4 e 50

20%, mas no menos de 4

> 50

2%, mas no menos de 10

Antibiticos a granel acondicionados em oficina (mais de 5 g)

(Se o contedo de um s recipiente suficiente para semear os dois meios, esta coluna indica o nmero de
recipientes a utilizar para o conjunto dos dois meios)

As quantidades mnimas utilizadas no ensaio esto j definidas e esto

mencionadas na tabela seguinte.
Tabela 19 - Quantidade mnima a utilizar no ensaio conforme quantidade de preparao.[3]
Quantidade de cada recipiente da preparao

Quantidade mnima a ser utilizada em cada meio de

cultura

Para lquidos
Menos de 1 mL

Contedo total do recipiente

1 mL 40 mL

Metade do contedo do recipiente

40 mL 100 mL

20 mL

Mais de 100 mL

10% do contedo do recipiente a obter pelo menos 20

mL

Lquidos antibiticos

1 mL

Outras preparaes solveis em gua ou em miristato de

Todo o contedo de cada recipiente de modo a obter

isopropilo

pelo menos 200 mg

Preparaes insolveis, cremes e pomadas a converter

Todo o contedo de cada recipiente de modo a obter

em suspenso ou emulso

pelo menos 200 mg

Slidos
< 50 mg

Contedo total do recipiente

50 mg 300 mg

Metade do contedo do recipiente

300 5 g

150 mg

> 5g

500 mg

33

Segundo a Farmacopeia, no s portuguesa, como tambm a USP, BP, Ph.

Eur. ou JP por exemplo, os meios de cultura onde vo ser inoculados a amostra ou a
membrana de filtrao, tm de permitir a deteo no s de bactrias como tambm
de fungos, fazendo ensaios distintos. Como est indicado na Tabela 20, o meio de
cultura escolhido antecipadamente para deteo de bactrias ou fungos, permite
detetar um tipo de microrganismo, e a sua incubao tem temperatura e durao em
dias especficas. [3, 46] Na prtica do controlo de qualidade dos produtos estreis, o
ensaio para deteo de bactrias realiza-se ao mesmo tempo que o ensaio para
deteo de fungos, diversificando o meio de inoculao como j foi referido e a
amostra satisfaz o ensaio do teste de esterilidade quando no apresenta crescimento
microbiano ao fim de 14 dias.
Tabela 20 - Requisitos para o Ensaio de Esterilidade.[3, 28-31]
Meio de cultura

Microrganismo em teste

Tioglicolato

Incubao
Temp. (C)

Durao (dias)

Tipo de microrganismo

Bacillus subtilis

30-35

3 dias

Anaerbio

Staphylococcus aureus

30-35

3 dias

Anaerbio

Pseudomonas aeruginosa

30-35

3 dias

Anaerbio

Tioglicolato

Bacterides vulgates

30-35

3 dias

Anaerbio

alternativo

Clostridium sporogenes

30-35

3 dias

Anaerbio

Hidrolisado de

Aspergillus niger

20-25

5 dias

Aerbio

casena e de soja

Candida albicans

20-25

5 dias

Aerbio

3.7.2

Mtodos Rpidos
Apesar do mtodo standard, descrito na Farmacopeia, existem outros tipos de

testes que se tm demonstrado mais rpidos na deteo de eventuais contaminaes,

mais sensveis e mais precisos. Porm, no so muito utilizados a nvel da indstria,
uma vez que exigem maiores custos e pessoal qualificado para os realizar. So
exemplo de mtodos rpidos[4, 46], os seguintes mtodos:

34

Sistema de crescimento
direto
Aplicao das amostras nas
membranas prprias,
colocadas em meio de cultura
e incubadas;
Obteno de imagem
utilizando um detector CCD,
Charge Couple Device, que ao
fazer emitir um feixe de luz
sobre a amostra, cria uma
imagem onde se detetam as
colnias.

Mtodo de contagem
direta das colnias
viveis
Amostra filtrada e
corada;
Contagem das clulas
microbianas atravs de
microscopia de
epifluorescncia;
Mtodo incapaz de
testar vrias amostras
em simultneo.

Mtodo ATPbioluminescncia

Tcnica Colorimtrica
Monitorizao da produo de
CO2 pelos microrganismos;
Presena de microrganismos
detetada pelo aumento da sua
libertao de CO2, ficando a
colorao do sensor mais
ntida, sinal de contaminao;
Deteo imediata a "olho n";
Suporta temperatura dos 1030C.

Reaco entre um complexo

enzimtico luciferase-luciferina
com o ATP libertado pelos
microrganismos, na presena
de oxignio, resultando da
produo de luz;
Utiliza-se um luminmetro para
detectar e quantificar a luz
emitida, proporcional
biomassa das amostras.

Citometria de fluxo

Tecnologia de PCR

Identificao gentica

Utilizao da colorao
"chemochrome B";
Contagem atravs de
instrumento de
deteo a laser;
Aplicaes: Contagem
de indicadores
biolgicos.

Tm como base a
informao gentica,
ADN;
Amplificao de
sequncias especficas
de ADN e,
consequente,
identificao do
microrganismo;
Aplicao: controlo da
gua.

Diferenciao qumica
e estrutural das
membranas e paredes
de bactrias Gram- e
Gram+;
Maior garantia de
reprodutibilidade face
aos mtodos
bioqumicos.

35

4
4.1

AS FORMAS FARMACUTICAS ESTREIS

Formas farmacuticas de uso oftlmico
As preparaes oftlmicas so estreis e apirognicas, destinadas a tratar

afees do globo ocular ou como adjuvantes no diagnstico. Nestas preparaes

esto enquadradas formas lquidas, semisslidas e slidas, que podem conter um ou
mais princpios ativos que tm como condies fundamentais a esterilidade, isotonia,
apirogenia e ausncia de partculas.[47] Estas formulaes tm aplicao na plpebra,
conjuntiva e crnea.[5] Dentro deste grupo inserem-se os colrios, geles, cremes,
pomadas de uso oftlmico e implantes oftlmicos. Podendo-se classificar os colrios
como aquosos, oleosos, gasosos e secos, sendo mais usualmente como gotas.[48]
Estas ltimas so instiladas no saco conjuntival sendo rapidamente eliminadas pelas
lgrimas, diminuindo tempo de contacto, o que obriga a um maior nmero de
administraes para garantir a concentrao ideal no local. Uma alternativa aos
colrios seria a pomada oftlmica, quando possvel, uma vez que se mantm no local
durante mais tempo, ou o uso de implantes oftlmicos, colocados no saco conjuntival
para libertao controlada do frmaco, havendo uma dose sempre ajustada.[5, 47, 49,
50]
Durante o seu processo de produo indispensvel um controlo de qualidade
em IPC com o objetivo de detetar o mais precocemente a possvel existncia de
partculas, microrganismos, pirognios, monitorizar valores de pH e tonicidade,
tamanho de partcula no caso das suspenses, limpidez da soluo e integridade da
embalagem, por exemplo.[3]
Relativamente tonicidade das preparaes oftlmicas, estas deveriam ser
isotnicas. A zona ocular tolera bem cloreto de sdio (NaCl) a 0,9% que corresponde a
300 mOsmol/L mas caso seja 0,5% ou NaCl a 2%, tambm h boa tolerncia. No
entanto, tem de haver precauo quando hipertnica ou osmolaridade seja superior
de 300 mOsmol/L, isto porque a integridade do olho e produo de lgrima podem
ficar afetadas, levando mesmo morte celular quando for aplicada uma soluo
hipertnica sobre um olho seco que produza pouca lgrima, sendo esta tambm a
razo da advertncia relativa ao uso de conservantes, tipo BAK ou cloreto de
benzalcnio, nas preparaes oftlmicas.[47, 51] Estas preparaes, para alm das
propriedades j mencionadas, contm mais aspetos de grande importncia na sua
formulao como seja o pH. Uma vez que estes medicamentos tm ao local e como
h presena da lgrima como meio de proteo, estas formas farmacuticas tm de se
manter estveis, juntamente com a composio da lgrima. Por isso, desejvel que
36

o pH destas formas farmacuticas seja prximo do pH lacrimal, ou seja, prximo da

neutralidade. No entanto, h formulaes que no so estveis a pH 7, havendo
tolerncia ocular quando o pH da formulao fica ligeiramente mais cido, evitando
irritabilidade ocular por parte do princpio ativo instvel quando em soluo de pH
neutro.[47, 52] No caso do princpio ativo da formulao conter atividade
antimicrobiana, as preparaes oftlmicas so dispensadas em sistema multidose que
incluem um agente conservante. Aps a sua abertura, estes produtos tm uma
validade aproximada de 30 dias.[3]

4.2

Forma farmacutica de aplicao nasal

Quando se fala de aplicao nasal, o destino do medicamento a mucosa

nasal, por ao tpica, exercendo maioritariamente uma ao descongestionante, seja
por intermdio de princpios ativos ou de gua do mar.
Antigamente formuladas com veculos oleosos, hoje preferida a soluo
aquosa na produo de um medicamento para esta aplicao, pois veio-se a verificar
que as solues oleosas podiam originar pneumonias lipdicas por haver partculas
que chegavam at aos pulmes. No entanto, a preparao das solues aquosas
requer ateno em vrios aspetos, uma vez que a sua m preparao pode causar
danos na mucosa nasal, chegando mesmo a ser irreversveis.[5] A formulao destas
preparaes deve ter em conta a escolha dos princpios ativos. As suas doses e os
seus veculos no podero impedir a atividade normal dos clios nem modificar a
viscosidade prpria do muco, conferindo sempre uma perfeita compatibilidade com a
fisiologia normal da mucosa nasal.[5] Uma substncia bastante importante nestas
preparaes o NaCl. Este composto isotonizante quando est presente numa
concentrao de 0,9% e a uma temperatura entre 25-30C, permite que os clios da
mucosa nasal permaneam ativos. Esta formulao isotnica com a mucosa nasal.
No entanto, quando aumenta a sua concentrao para 4-4,5%, esta formulao j
impede o movimento ciliar, o qual restaurado aps lavagem com gua destilada e
soro fisiolgico. O mesmo acontece quando temos a situao oposta, uma soluo
hipotnica de NaCl, ou seja, em concentrao perto de 0,2-0,3%, h paragem do
movimento ciliar, mas se este contacto se mantiver por tempo suficiente, a mucosa
nasal poder ficar lesada irreversivelmente.[5] Assim, pretende-se que estas formas
farmacuticas obedeam aos seguintes requisitos:

37

pH situado entre 6,5-8,3, uma vez que o pH da secreo nasal esta compreendido
entre 6,4 e 6,8 e tem tendncia a alcalinizar no caso de constipaes, rinites e
sinusites;

Possuam uma determinada capacidade tampo;

Isotonicidade relativa ao muco;

No modificar a viscosidade normal dos clios nasais;

Ser compatvel com a atividade ciliar e o muco produzido;

Possuir longa estabilidade;

Conter agentes antimicrobianos em quantidades suficientes que impeam o

crescimento de microrganismos;

Ser estril (ou semi-estril), uma vez que aplicada na mucosa que no se
encontra ntegra.

4.3

Forma farmacutica de aplicao auricular

A administrao auricular tem como objetivo a ao local do medicamento,

onde a absoro sistmica no tem revelado grande aplicao. Embora seja habitual a
instilao de gotas no canal auditivo externo, com a inteno de aliviar a dor, por
exemplo, estas formulaes tm demonstrado algumas limitaes, nomeadamente,
quando a integridade da membrana timpnica no esteja devidamente assegurada. A
escolha dos medicamentos que podem ser utilizados no tratamento de afees do
ouvido mdio ou do ouvido externo est dependente no s dos aspetos etiolgicos,
como do carcter temporal da situao clnica.[5, 53] Na zona auricular predominam 2
tipo de patologias: a acumulao excessiva de cermen e as infees. Para a
acumulao de cermen, utilizam-se solues para a sua remoo como, por
exemplo, gua aquecida temperatura corporal e, quando necessrio, por estar duro
e compactado, pode ser previamente amolecido. O bicarbonato de sdio, tambm
eficaz, pode causar secura do canal auditivo. [53-55]
Em relao s infees auriculares, apesar na zona auricular ter uma flora
prpria de Micrococcus aureus, Micrococcus albus e Corynebacteria spp, entre outros,
podem aparecer bacilos Pseudomonas aeruginosa que se desenvolvem quando o
ouvido est mais sensvel, proporcionando um ambiente favorvel ao seu
desenvolvimento e aparecimento de infeo, e da a importncia da esterilidade nestas
preparaes.[53]

38

Tal como nas preparaes anteriores, as auriculares tambm tm obedecer a

certos

requisitos.

Pretende-se

que

as

preparaes

auriculares

tenham,

essencialmente, um pH compreendido entre 5-7,8, podendo ser ligeiramente cidas e

devero ser estreis, uma vez que a zona auricular pode no se encontrar ntegra.[53]

4.4

Formas farmacuticas de uso parenteral

As formulaes com via de administrao parenteral (IV, IM, SC, entre outras)

so das que apresentam maior rigor na sua produo. Estas formulaes devero ser
produtos estreis, apirognicos, isotnicos e com pH prximo do pH sanguneo,
aproximadamente 7, isentos de partculas, exceo das suspenses onde h
controlo do tamanho de partcula, cujo controlo de qualidade recai na verificao da
sua perfeita tolerncia para os tecidos e inocuidade total para o organismo.[5]
Dentro destas preparaes existem as lquidas (solues, emulses ou
suspenses) ou slidas, que contm um ou mais princpios ativos. Quando se fala de
solues aquosas tem-se como objetivos a isotonicidade, pH prximo da neutralidade
e serem apirognicas e j no caso de solues oleosas pretende-se que sejam
preparadas com leos isentos de acidez, nunca excluindo a esterilidade de ambas. A
importncia do pH reca tambm na manuteno da estabilidade do produto.[5, 44, 45]
As formas mais usualmente utilizadas so as injees, prontas a administrar ou
com necessidade de diluio, ps para reconstituio no momento de administrao e
implantes. Mas, antes da sua administrao, alguns medicamentos so apresentados
sob forma concentrada lquida que necessita de diluio e quando se apresenta sob
forma de p liofilizado necessita de reconstituio com um solvente adequado, sendo
que no final se podem obter preparaes definitivas, quando a estabilidade se mantm
durante mais tempo, ou extemporneas como o caso de muitos liofilizados
hidrolizveis, em que a sua administrao tem de ocorrer ao fim de muito pouco tempo
aps reconstituio.[5]
No entanto, tambm dentro deste grupo, existem as vacinas, o sangue e
produtos derivados do sangue, solues de dilise e frmacos radioativos que
necessitam de especial ateno na sua recolha/produo, uma vez que as suas
propriedades assim o requerem.
No processo de formulao destes produtos, quando se pretende adicionar
excipientes como solventes (soro ou soro glicosilado), solues tampo, tensioativos,
ou solues para manter a forma isotnica, estabilizadores ou conservantes, tem que
se ter em ateno que a quantidade deve ser a mnima possvel para que os
39

excipientes tenham efeito e no causem efeitos adversos como, por exemplo, afetar a
estabilidade, biodisponibilidade, segurana, eficcia dos princpios ativos ou,
eventualmente, causar toxicidade ou irritao local.
Uma escolha para as solues aquosas o uso de gua para Injetveis. As
caractersticas desta gua so apresentadas no Anexo B. Este solvente muitas
vezes utilizado na reconstituio de medicamentos liofilizados ou concentrados antes
da sua administrao.[56-58]

4.4.1

gua para Injetveis

O veculo preferencialmente utilizado para administrar injetveis a gua para

Injetveis, uma vez que a soluo aquosa a formulao ideal.[17, 58]

Esta gua estril, isenta de pirognios e a sua qualidade controlada ao
longo de todo o processo de produo. Outros requisitos, tambm importantes, da
gua para Injetveis so referidos no Anexo B.[3, 58]
No fabrico a granel para produo do medicamento final, a gua para
Injetveis obtida a partir da gua para consumo humano, que purificada atravs da
tcnica de destilao ou osmose inversa. Durante a produo e a conservao so
tomadas medidas apropriadas para garantir que o nmero total de microrganismos
aerbios viveis convenientemente controlado e monitorizado. So estabelecidos
limites de alerta e de interveno de modo a detetar qualquer evoluo indesejvel.[3]
Em condies normais, considerado como sinal para interveno apropriada um
nmero de microrganismos aerbios viveis totais de 10 microrganismos/100 mL. Este
limite determinado utilizando meio gelosado, por filtrao de membrana de, no
mnimo, 200 mL de gua para preparaes injetveis a granel e incubando a 30-35C
durante 5 dias. No caso das preparaes injetveis serem objeto de um tratamento
assptico, pode ser necessrio aplicar limites mais restritos.[3, 59]
Na produo de gua Esterilizada para preparaes injetveis em monodoses,
esta repartida por recipientes apropriados e, de seguida, fechados e esterilizados
pelo meio de calor, em condies tais que satisfaa o ensaio das Endotoxinas
bacterianas da Farmacopeia, sendo isenta de qualquer aditivo.
Os recipientes contm uma quantidade de gua suficiente para permitir a
obteno do volume nominal.[3]

40

4.4.2

Preparaes para irrigao

Apesar de no serem de administrao injetvel, tambm so consideradas

como formas farmacuticas estreis. So mais utilizadas em meio hospitalar,
destinadas a serem usadas em cirurgias, por exemplo, para irrigao de cavidades,
cicatrizes e superfcies. Como h possibilidade de contacto direto com vasos
sanguneos, tambm estes produtos devero cumprir os requisitos das preparaes
de uso parenteral. Estes produtos so estreis, isentos de pirognios e partculas, e de
grande volume onde h dissoluo de um ou mais princpios ativos, sendo exemplos
solues de NaCl a 0,9% e de Lactato de Ringer.[36]

PREPARAES CITOTXICAS E NUTRIES PARENTRICAS

As Preparaes Citotxicas e as Nutries Parentricas tm especial ateno

uma vez que no s tm interesse a nvel industrial como tambm nos Servios
Farmacuticos existentes nos Hospitais. Ambas so formas farmacuticas lquidas, de
administrao IV, equiparadas s preparaes de uso parenteral, como j foi
anteriormente descrito. No caso destas preparaes, desde a produo industrial dos
medicamentos at manipulao, a Tcnica Assptica requisito essencial de forma
que no final se obtm um produto final estril, apirognico, ausente de partculas, com
pH prximo da neutralidade, garantindo-se tambm a estabilidade e compatibilidade
de todos os constituintes prescritos nas doses corretas. Para todas as preparaes,
devem ser feitos registos de todas as operaes efetuadas, sejam estas realizadas
assepticamente ou no, assim como o tempo de preparao, qual o operador, o
nmero de lote dos produtos e a data de preparao. So igualmente necessrios
ensaios de validao dos mtodos utilizados e devero ser efetuados testes
ambientais que compreendam no s o ar, como tambm as superfcies e o operador.
[60, 61]
No caso destas preparaes, nos Servios Farmacuticos tem de haver trs
espaos diferenciados: uma rea de ambiente controlado ou Sala Limpa, uma rea de
trabalho e uma rea de armazm.[61]
A rea de ambiente controlado, ou Sala limpa, a rea onde h maior risco
para o produto manipulado. Tem acesso limitado e controlado, separado das outras
reas de modo a haver o menor risco de contaminao quer do pessoal quer do
41

material. Entre esta rea e as restantes encontra-se uma antecmara destinada

organizao e preparao do material, e higienizao do material e pessoal, que vai
entrar para a Sala Limpa, havendo aqui j necessidade de proteo do calado com
protetores adequados e utilizao de bata branca ou vesturio limpo do hospital.[60]
Nesta antecmara preparam-se os chamados tabuleiros, feitos de material fcil de
limpar e desinfetar, onde se coloca a prescrio juntamente com os rtulos onde esto
descritos os constituintes e os respetivos volumes, os prprios constituintes, os
reservatrios finais (bolsas, bombas infusoras ou seringas), as seringas para extrao
de volumes, de capacidade no inferior medio do volume indicado, os sistemas,
no caso de citotxicos, que so o meio de ligao da preparao ao doente, sendo
que podem ter ou no um filtro, com uma membrana de porosidade inferior a 0,22 m,
utilizado no caso dos medicamentos derivados dos Taxanos, por exemplo, e nunca no
caso da existncia de produtos biolgicos como os Anticorpos Monoclonais. Este
material tratado com lcool 70 e transferido para a Sala Limpa atravs de uma
janela denominada transfer com dupla porta.[62]
Os pontos principais do procedimento da Tcnica Assptica em meio hospitalar
encontram-se no Anexo C.
A Sala Limpa dotada de uma CFL Horizontal, no caso das nutries
parentricas, ou uma CFL SB classe II tipo B, no caso dos citotxicos.
Tanto a antecmara e a Sala Limpa tm de cumprir requisitos rigorosos para a
sua limpeza e controlo do AVAC.[60]
Em ambos os casos, entram no mximo duas pessoas para a manipulao,
com vesturio limpo do hospital, proteo do calado, touca e mscara cirrgica.
Mas antes da entrada para a manipulao da preparao, tem de haver uma
organizao do trabalho que se vai realizar na Sala Limpa, na rea de Trabalho.
aqui que se fazem os registos e programaes das prescries, se validam estas de
acordo com a bibliografia especfica, se elaboram os mapas de produo onde
constam os constituintes, doses e volumes, tudo com auxlio de meios informticos
sempre que possvel de modo a poupar tempo e recursos.[61]
No entanto na rea de Armazm onde se guardam os medicamentos e
materiais necessrios a esta produo, sendo que os medicamentos citotxicos se
encontram separados dos restantes. [61]

42

5.1

Preparaes Citotxicas

Entendem-se por preparaes citotxicas, formas farmacuticas lquidas

estreis com propriedades citotxicas ou citostticas com administrao IV, SC ou
intravesical, por exemplo. Devem-se garantir as condies para minimizar o risco de
exposio

estes

medicamentos,

por

meio

de

gerao

de aerossis

derramamentos. Podem causar irritao da pele, olhos e mucosas por contato direto,
devido atividade vesicante, de ulcerao e necrose dos tecidos. Por isso, devem
existir Manuais de Procedimentos para a preparao e manipulao, conhecidos pelo
pessoal interveniente nestes processos, de modo a realizar as tcnicas conforme o
estipulado, as suas funes e as suas responsabilidades. Tambm devero conhecer
os riscos e precaues relativos ao manuseamento destes medicamentos e utilizao
do material de proteo. Outro manual fundamental nesta rea de produo o
Manual de Procedimentos em caso de Derrame, juntamente com o Kit de Primeiros
Socorros especficos para este tipo de medicamentos.[61] Na manipulao de
medicamentos citotxicos exige-se tanto a proteo do produto como do operador e
do ambiente e para isso so referidos alguns procedimentos relativos s condies
necessrias a uma boa manipulao destas preparaes no Anexo D.
Por motivos de segurana, as mulheres grvidas ou que estejam a amamentar
devem evitar a manipulao de citotxicos.

5.2

Nutrio Parentrica

Relativamente s nutries parentricas, so preparaes farmacuticas

estreis que tm o objetivo de fornecer a alimentao, nutrientes, necessrios ao
doente por um perodo de 24 h, quando impossvel a alimentao por via oral ou
entrica. Existem dois tipos gerais: as Bolsas Standard produzidas a nvel industrial e
as Personalizadas de acordo com uma prescrio mdica detalhada com os vrios
constituintes, preparada nos Servios Farmacuticos Hospitalares. No entanto, h
patologias/estados particulares da sade do doente que condicionam a utilizao das
Nutries Parentricas, tais como: idade, existncia de patologia que induza
imunodeficincia, presena de infeo, entre outros.[61, 63, 64]
As Bolsas Standard so mais utilizadas em adultos fazendo-se referncia
quantidade de azoto, osmolaridade e volume total da bolsa, sendo estes fatores que
vo influenciar, por exemplo, se a via de administrao vai ser perifrica ou central.
So bolsas com dois compartimentos, ou bolsas binrias, ou trs compartimentos, ou
43

bolsas ternrias, ou seja, tm um compartimento para a glicose, outro para os

aminocidos e podero eventualmente ter um compartimento para os lpidos. Esta
organizao tem o objetivo de aumentar o prazo de validade/estabilidade da nutrio
parentrica. Comparando as bolsas binrias e ternrias, apesar de ser mais fcil a
deteo de partculas nas bolsas binrias, uma vez que no tm o aspeto leitoso
conferido pela presena de lpidos, constata-se que so as bolsas ternrias as mais
utilizadas por serem mais completas e apresentarem menor custo.[65] Em ambas as
bolsas, h uma posterior adio, pouco tempo antes de administrao ao doente, com
oligoelementos e vitaminas hidrossolveis, uma vez que proporcionam uma
estabilidade de 24 h preparao.
J as Bolsas Personalizadas so mais utilizadas para a unidade de
neonatologia, isto porque as propores dos vrios constituintes so muito variadas e
para o mesmo doente podem haver mudanas mnimas mas importantes de um dia
para o outro. Assim era dispendioso e demorado a produo a nvel industrial suportar
a produo individualizada destas bolsas, no havendo vantagens nem para a
indstria nem para o doente.
Como todas as preparaes, as Nutries parentricas tambm podero
originar complicaes, umas sem causa conhecida aparente e outras quando h erros
tanto na produo, administrao ou at mesmo na prpria prescrio. Entre as
complicaes mais graves esto: embolia pulmonar [61, 65]; alteraes metablicas
ou eletrolticas, flebite [66]; infeo [61, 63]; finalmente, complicaes relacionadas
com ausncia/excesso de algum componente, ou perda de estabilidade durante o
perodo de conservao.

44

6 COMPARAO DOS ENSAIOS REQUERIDOS SEGUNDO A

FP, USP E PH. EUR.
Comparao dos ensaios e requisitos presentes nas Farmacopeia Portuguesa,
Americana e Europeia, segundo as formas farmacuticas. [3, 29, 31, 36-38]
6.1.1

Formas Farmacuticas de uso oftlmico

Tabela 21 - Teste para Colrios e Solues

de lavagem.
Testes
Esterilidade
Tamanho de
partcula
Isotonicidade
Volume extravel
pH

FP

USP

Ph. Eur.

Tabela 22 - Testes para Ps.

Testes
FP USP Ph. Eur.

Esterilidade

Isotonicidade

pH (aps
reconstituio)
FP, USP, Ph. Eur. - Aps reconstituio, seguem
os ensaios para os Colrios.

Tabela 23 - Testes para Formulaes

semisslidas.
Testes
Esterilidade
Tamanho de
partcula
Isotonicidade

6.1.2

FP

USP

Ph. Eur.

Tabela 24 - Testes para Implantes

oftlmicos.
Testes
Esterilidade
Isotonicidade

FP

USP

Ph. Eur.

Formas farmacuticas de aplicao nasal

Tabela 25 - Testes para Gotas e Spray.
Tabela 26 - Testes para Ps.
Testes
Esterilidade
Isotonicidade
Tamanho de
partcula
pH

FP

USP

Ph. Eur.

Testes
Esterilidade
Isotonicidade
Tamanho de
partcula

Tabela 27 - Testes para Formulaes Semisslidas

Testes
Esterilidade
Isotonicidade

FP

USP

Ph. Eur.

45

FP

USP

Ph. Eur.

Tabela 28 - Testes para Solues de

lavagem.
Testes
Esterilidade
Isotonicidade
Volume extravel
pH

FP

USP

Ph. Eur.

6.1.3

Formas farmacuticas de aplicao auricular

Tabela 29 - Testes para Gotas e Spray.

Tabela 30 - Testes para Ps.
Testes
Esterilidade
Isotonicidade
Tamanho de
partcula
pH

FP

USP

Ph. Eur.

Testes
Esterilidade
Isotonicidade

6.1.4

FP

USP
X

USP

Ph. Eur.

Tabela 32 - Testes para Solues de lavagem.

Tabela 31 - Testes para Formulaes

semisslidas.
Testes
Esterilidade
Isotonicidade

FP

Testes
Esterilidade
Isotonicidade
Volume extravel
pH

Ph. Eur.

FP

USP

Ph. Eur.

Formas farmacuticas de uso parenteral

Tabela 33 - Testes para Injees.

Teste
Esterilidade
Isotonicidade
Tamanho de
partculas
Volume extravel
Endotoxinas
bacterianas
Pirognios
pH

Tabela 34 - Testes para Ps para injees.

FP

USP

Ph. Eur.

Teste
Esterilidade
Tamanho de
partculas
Endotoxinas
bacterianas
Pirognios

USP

Ph. Eur.

FP, USP, Ph. Eur. - Aps reconstituio, seguem os ensaios para as

Injees.

Tabela 35 - Testes para Infuses.

Teste
Esterilidade
Isotonicidade
Tamanho de
partculas
Volume extravel
Endotoxinas
bacterianas
Pirognios
pH

FP

Tabela 36 - Testes para Solues de irrigao.

FP

USP

Ph. Eur.

Teste
Esterilidade
Isotonicidade
Pirognios
Endotoxinas
bacterianas
Volume extravel
Tamanho de
partculas
pH

46

FP

USP

Ph. Eur.

CONCLUSO

O fabrico de medicamentos designados estreis altamente e rigorosamente

regulamentado, sempre em constante avaliao e adaptao. Com a evoluo das
tecnologias tem sido cada vez mais fcil proporcionar as melhores condies para a
realizao dos vrios passos no processo de fabrico, como o caso dos Isoladores.
Este equipamento permite um menor contacto da principal fonte de contaminao do
produto e ambiente envolvente, o pessoal, e assim so menores as probabilidades de
erros e contaminaes que acrescem os custos e tempo, diminuindo a rentabilidade
do produto. O pessoal interveniente no processo deve ser instrudo para melhor
compreender e facilmente seguir os procedimentos como aqueles relativos ao
vesturio e higiene. Mas tambm necessrio a existncia de instalaes fsicas que
facilitem a manuteno e controlo do ambiente envolvente, tendo especial ateno s
vrias zonas da indstria designadas por Salas Limpas que, conforme as tarefas ali
realizadas, devem cumprir requisitos especficos de qualidade de ar, procedimentos de
instalao de equipamentos como, por exemplo, a sua esterilizao. Nas reas de
maior risco de contaminao, ou de classe A, existem as CFL destinadas
manipulao de produtos com possvel escolha de proteo do produto, operador, e
ambiente ou os trs fatores em simultneo, atravs do controlo de vrias
condicionantes como o circuito de ar.
Apesar de se utilizarem muitos produtos j finalizados, nos Servios
Farmacuticos hospitalares que se obtm, em alguns casos, o produto final a ser
administrado ao doente. Neste caso, a manipulao feita em Salas Limpas de classe
A, seguindo as regras de vesturio e higienizao, dentro de CFL para proporcionar
um ambiente assptico e evitar contaminaes. Normalmente so manipuladas
preparaes extemporneas de nutrio parentricas personalizadas ou preparaes
citotxicas, destinadas administrao imediata, uma vez que no rentvel
economicamente para a indstria produzir medicamentos com doses ajustadas
individuais e com validade de horas. Tambm nestes casos se fazem ensaios de
controlo de qualidade, principalmente, os testes de esterilidade, com inoculao de
uma alquota da preparao em placa de petri, para deteo de bactrias e outra de
fungos.
Os principais ensaios de controlo de qualidade destas formas farmacuticas
encontram-se descritos nas Farmacopeias, estando tambm neste documentos os
ensaios a realizar para cada uma delas. Para cada requisito, esterilidade, pesquisa de
47

pirognios, entre outros, podem existir mais do que um mtodo, o que uma
vantagem uma vez que se pode escolher segundo os equipamentos existentes, por
exemplo, ou rentabilidade de tempo. Como foi possvel analisar, tanto os
procedimentos como critrios de aceitao de resultados so idnticos, diferenciando
no teste da Determinao da Temperatura dos Coelhos, na Pesquisa de Pirognios,
onde os critrios variavam segundo as Farmacopeias de vrios pases. Com o evoluir
das tecnologias, desenvolveram-se novos mtodos mais sensveis e rpidos que
tornam o processo de controlo de qualidade mais rentvel a nvel industrial.
Esto inseridos no grupo de formas farmacuticas estreis os produtos de uso
oftlmico, de aplicao nasal, de aplicao auricular e de uso parenteral. Alguns deles
como os de aplicao nasal e auricular requerem esterilidade no por estarem em
contato direto com vasos sanguneos mas pelo facto da sua zona de aplicao no se
encontrar ntegra, e portanto no se pretende prejudicar o estado de sade do doente.
Os produtos de uso oftlmico requerem iseno total de partculas, apirognicos e
esterilidade. E o mesmo se passa com as preparaes de uso parenteral.
Todo o processo envolvente ao fabrico de medicamentos, sejam eles estreis
ou no, deve ser realizado segundo os procedimentos controlados para obteno do
melhor

produto,

avaliando

frequentemente esses

mesmos

procedimentos e

comprovando todo o processo e o produto final atravs dos ensaios de controlo de

qualidade, pode-se garantir que se est num bom caminho para a libertao de um
medicamento de qualidade, seguro e eficaz.

48

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ANEXOS
Anexo A - Propriedades do vesturio nas Salas Limpas.

Protetores de calado [67]

Cobrir todo o p;
Impermeveis;
Repelentes de lquido;
Colocados antes de entrar na cmara e no
final colocados em contentor prprio para
incinerao.
Figura 16 - Proteo de calado.[67]

Luvas [8, 68]

Protege a parte do corpo que mais prxima
est da rea crtica;
Materiais: Ltex, vinil, poliuretano ou nitrilo;
Pode-se usar um segundo par de luvas para
melhor conforto e proteo;
Sem p.
Figura 17 - Luva de nitrilo.[68]

Bata [69]
Estril;
Em tecido no tecido, polipropileno com
polietileno

laminado

que

confere

impermeabilidade;
Costuras a corte e coze, punhos em malha e
atilhos na nuca e cintura.

Figura 18 - Ilustrao do modelo da bata. [69]

54

Touca [70, 71]

Protege contra a contaminao por queda de
algum cabelo;
Existem

vrios

modelos,

diferenciando

consoante a rea de trabalho do operador.

Nas zonas de menor risco utilizam-se as
toucas idnticas s da Figura 19, e nas de

Figura 19 - Touca.[70]

maior risco a proteo prolonga-se pelo

pescoo, como mostrado na Figura 20;
A touca/capuz estril.

Figura 20 - Touca /capuz de proteo nas reas de

maior risco.[71]

Mscara [72, 73]

Mscara de filtro de partculas segundo a
norma EN149;
Compostas por diferentes no-tecidos em
camadas;
A camada de filtrao composta por
diferentes elementos de forma a conferir a
eficincia

Figura 21 - Mscara FFP2.[72]

diferentes

de

filtrao

definida para

classificaes

de

as

mscaras:

FFP1, FFP2 e FFP3;

Quanto maior o nmero FFP, ou Fator de
Proteo Fixo, menor o nmero de partculas
que deixa passar. Por isso, recomenda-se o
uso de um maior FFP durante a realizao de
procedimentos de maior risco.

Figura 22 - Mscara FFP3, com vlvula para

conferir maior conforto ao operador.[72]

55

Proteo facial [74, 75]

Opo

de

mscara

com

viseira,

como

demonstra a Figura 23. Tem capacidade de

impedir a passagem de lquidos, mas permite
a passagem de ar e a respirao sem perder o
Figura 23 - Mscara com viseira integrada.[74]

poder

de

filtrao,

conferindo

tambm

proteo ocular;
Outra opo est representada na Figura 24,
uma viseira anti-riscos e anti-embaciamento,
que confere proteo facial total.

Figura 24 -Viseira.[75]

Proteo ocular [76]

Podem

ser

graduados

usados
e

com

sobre

culos

semi-mscaras

respiratrias;

Possibilidade de esterilizao por calor

hmido em autoclave.

Figura 25 - Proteo ocular.[76]

Roupa limpa esterilizada na indstria

Fato-macaco[77]

Estril;

Tecido Clean-Tough;

Possibilidade de ter colarinho ou capuz

incorporado.

Figura 26 - "Fato-macaco" estril.[77]

56

Anexo B - Propriedades da gua para Injetveis, segundo a Farmacopeia

Portuguesa.

Composto

A granel

Carbono Orgnico Total

Mximo 0,5 mg/L

Condutividade

Aspeto
Nitratos
Alumnio

Monodoses

--Mximo:
-1
25 Scm , para recipientes de volume
1,3 S.cm-1, a 25C
nominal igual ou inferior a 10 mL;
-1
5 Scm , para recipientes de volume
nominal superior a 10 mL.
Lquido lmpido e incolor
Mximo 0,2 ppm
Mximo 10 ppb

Metais pesados

Mximo 0,1 ppm

Endotoxinas

Mximo 0,25 U.I./mL

pH
Cloretos

---

Prximo da neutralidade 7
Mximo 0,5 ppm,

Amnio

---

Mximo 0,2 ppm.

---

Mximo 4 mg (0,004 por cento), para

recipientes de volume nominal igual ou
inferior a 10 mL
Mximo 3 mg (0,003 por cento), para
recipientes de
volume nominal superior a 10 mL.

Resduo por evaporao:

Esterilidade

Isenta de microrganismos. Satisfaz teste de esterilidade.

57

Anexo C - Preparao assptica nos Servios Farmacuticos Hospitalares.

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.

11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.

25.
26.
27.

No usar brincos, maquilhagem, relgio ou

outros acessrios que no sejam necessrios
manipulao.

Colocao de vesturio limpo adequado.

Colocao dos vrios materiais necessrios em
tabuleiros limpos.
Colocao de touca e mscara.
Lavagem das mos com sabo e de seguida com
anti-sptico.
Entrada na Sala Limpa.
Colocao da bata.
Lavagem das mos com anti-sptico.
Colocao de luvas.
Abertura da embalagem das compressas, dentro
da CFL sem que a embalagem toque na cmara.
Limpeza da bancada, laterais, grelha e tecto da
cmara com as compressas e lcool 70, com
movimentos de cima para baixo e de dentro para
fora.
Colocao do campo.
Colocao dos princpios ativos aps passagem
por lcool a 70, por ordem de adio.
Colocao dos spikes abertos na cmara.
Colocao das seringas adequadas a cada
volume.
Colocao de agulhas para os recipientes que
no possuem adaptao para spike.
Colocao das placas de Petri.
Colocao das bolsas (embalagem primria) e
sua identificao.
Reconstituio e/ou diluio dos medicamentos
que necessitem.
Adio dos constituintes da preparao por
ordem definida.
Inocular uma alquota da preparao em placa de
Petri.
Fecho da preparao.
Colocao da preparao em tabuleiro para sair
para a antecmara.
Colocao de material cortante em contentor
prprio (amarelo) e restante no "Lixo Comum".
Limpeza da CFL com auxlio de compressas e
lcool 70 com movimentos de cima para baixo e
de dentro para fora.
Sada do operador juntamente com a preparao,
mas a CFL continua ligada (24 h/dia).
Embalamento secundrio, etiquetagem, e
rotulagem adequada.
Transporte da preparao para o Servio para
ser administrada.

Material:

Princpios ativos
Seringas
Agulhas
Spikes Azuis NP vermelho CTX
Bolsas
Seringa preta (intravesical) tambm
destinada para embalar os lpidos
Tampas vermelhas para as seringas
Placas de Petri
Campos
Luvas (pelo menos 2 pares)
Compressas esterilizadas
bata

A CFL tem de estar ligada, pelo menos, 30min

antes da realizao da preparao.

Spikes azuis utilizados na manipulao de

nutrio parentrica (permite refluxo)
Spikes vermelhos - utilizados na manipulao
citotxicos (no permite refluxo)

2x placas de Petri

58

1 meio para deteo de bactrias

1 meio para deteo de fungos

Anexo D - Condies necessrias para uma boa manipulao de citotxicos.

Tem de haver dupla validao ou mais, em caso de

necessidade. A recolha dos medicamentos do armrio
tem de ser cuidadosa para evitar trocas de princpios
ativos. Por exemplo, a Figura 27 apresenta dois
exemplos de princpios ativos distintos e com uma
embalagem muito idntica.

Figura 27 - Comparao de rtulos de medicamentos citotxicos.

[78]

Preparao realizada em CFL SB de Classe II tipo B em ambiente controlado, que

dever estar ligada 24h/dia, como preveno de aparecimento de aerossis em
circulao seguida de deposio na bancada da cmara quando se liga/desliga.

Presena de um pano estril absorvente com cobertura de plstico, como campo onde
se realiza a manipulao, substitudo em caso de derrame e sempre no final de cada
sesso de trabalho.

Adequar a tcnica de modo a manter a esterilidade do medicamento e prevenir a

formao de contaminantes.

O operador/pessoal interveniente deve ter conhecimento e experincia das tcnicas de

manipulao, condies e clculos de doses.

Todos os medicamentos a ser manipulados, para uma dada preparao devem estar
por cima do pano absorvente na CFL, juntamente com um contentor especial para
recolha de seringas, vials, ampolas e material que esteja em contacto com os
medicamentos.

As seringas e equipamento de infuso/sistemas devem ter conexes Luer-Lock

seguras.

As seringas devem ter capacidade para o volume pretendido, para que o mbolo no
se separe da seringa ou coloque o operador, ambiente e preparao em risco.

As ampolas devem ser abertas com auxlio de uma compressa de gaze esterilizada e
assim evitar disperses de partculas de medicamento.

Deve evitar-se a presena de presso positiva ou negativa nos vials, pois pode
provocar expulso de medicamento ou at mesmo da seringa. Pode-se contornar a
59

presso

positiva

adicionando

um

volume

de

ar,

correspondente ao do vial, seringa compensando essa

presso.

Utilizao de spike vermelho estril com filtro de 0,22 m,

que evita a formao de aerossis e refluxo.

Figura 28 - Filtro retentor de aerossis.[79]

Uma vez finalizada a preparao, identifica-se com o seu rtulo, protegida da luz com
papel de alumnio quando necessitar; coloca-se etiqueta de frio, quando necessrio e,
finalmente, assinalar que se trata de uma preparao citotxica.

Deve-se assegurar novamente que a embalagem primria est bem fechada, sem que
haja probabilidade de derramar sendo colocada dentro de um saco prprio; a
embalagem secundria, tem um fecho que impede a passagem de possvel
extravasamento da preparao para o exterior, e tem etiqueta que informe a presena
de um medicamento citotxico. [80]

Aps a finalizao do trabalho, todo o vesturio utilizado dever ser colocado num
saco plstico de cor vermelha de acordo com o Despacho n. 242/96, de 13 de
Agosto, com a indicao de material contaminado, destinado incinerao
temperatura de 1000C.[81]

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