Ciências Biomédicas

Universidade da Beira Interior

UBI

Coloração Celular
Neurofisiologia
2010/2011

Grupo 5:
Alexandra Soares 24016
Elisabete Costa 23460
Paulo Machado 21598
Raquel Fernandes 22771
• As estruturas celulares apresentam um fraco
contraste óptico.

Observação muito difícil

SOLUÇÃO: Coloração Celular.

• Alguns componentes celulares têm a capacidade de

absorver certos corantes, enquanto que outros não.
• Destacar algumas estruturas celulares por contraste
com as restantes.
 Corantes Naturais Ácidos

• Carmim; Básicos •Extraídos de animais ou

• hematoxilina; plantas.
• Orceína; Neutros
Corantes
Orgânicos
( mais usados)

Corantes Artificiais Ácidos

• Sintetizados em laboratório a
• Eosina; Básicos partir de derivados da anilina;
• azul de metileno;
• Fucsina; • Específicos para a coloração
Neutros de determinadas estruturas
• vermelho neutro;
• verde iodo. celulares.
 Os corantes ligam-se aos tecidos devido à presença de radicais aniónicos ou
catiónicos nas moléculas do corante, que reagem com os radicais de carga oposta
presentes nos componentes celulares, através de interacções electrostáticas.

•radicais fosfato dos ácidos nucléicos

Corantes básicos ( DNA e RNA );
interagem com os •radicais fosfato e carboxila dos
componentes
celulares ácidos proteoglicanos;
•carboxilas presentes nos polissacarídeos
(carga eléctrica
ácidos (ácido hialurônico);
negativa)
•proteínas ácidas.

Corantes básicos
interagem com os
componentes
celulares básicos •proteínas ricas em aminoácidos básicos.
(carga eléctrica
positiva)

Quaisquer dos componentes dos tecidos ou órgãos que reajam com um corante básico
são chamados basófilos, que significa ter afinidade por bases. As estruturas que reagem
com um corante ácido são chamadas acidófilas, que significa ter afinidade por ácidos.
 COLORAÇÃO DE HEMATOXILINA E EOSINA
• Coloração permanente;
• Principal técnica de coloração de tecidos em histologia;

• Este tipo de coloração permite diferenciar:

→ partes basófilas (pela hematoxilina);
→ partes eosinófilas (pela eosina)

Hematoxilina tem atracção pelas substâncias ácidas dos tecidos, como as proteínas
(ricas em radicais amina), como os núcleos e o retículo endoplasmático rugoso e
ácidos nucleicos.

Eosina, sendo acidófila, apresenta coloração predominante pelo citoplasma, fibras

de colagénio e outras estruturas compostas de substâncias com carácter básico.

NOTA: Quando utilizado o corante ácido eosina nos cortes de tecidos, as substâncias
coradas são muitas vezes referidas também como eosinófilas em alternância com o termo
acidófilo.
 Cerebelo: NÚCLEO
1-camada granulosa;
2-células de purkinje;
3-camada molecular. CITOPLASMA

• Coloração de cortes de tecidos por hematoxilina

evidenciará com uma cor azul as estruturas
celulares. (NÚCLEO)

• A coloração pela eosina evidenciará com uma cor

rósea as estruturas celulares. (CITOPLASMA)
 COLORAÇÃO E MONTAGEM:

•Desparafinização
•Re-hidratação
•Coloração
•Diferenciação
•Desidratação
•Clarificação
•Montagem
 Ciências Biomédicas
Universidade da Beira Interior
UBI

Coloração Celular
Neurofisiologia
2010/2011

Alexandra Soares 24016

Elisabete Costa 23460
Paulo Machado 21598
Raquel Fernandes 22771
Antes do processo de coloração, na fase da impregnação ocorre a
substituição do xilol pela parafina.

1.DESPARAFINAÇÃO:
• Xilol

2.RE-HIDRATAÇÃO:
• Etanol absoluto
• Etanol 95%
• Etanol 70%
• Água

3.COLORAÇÃO e DIFERENCIAÇÃO:
• Hematoxilina
• Água
• Diferenciador (etanol + HCl)
• Água
• Etanol 70%
• Eosina
4.DESIDRATAÇÃO:
• Etanol 70%
• Etanol 95%
• Etanol 100%

5.CLARIFICAÇÃO:
• Xilol

6.MONTAGEM:
• Colocar 1-2 gotas de meio de montagem sobre a fatia;
• Colocar a lamela sobre o meio de montagem, exercendo uma ligeira pressão sobre ela;
• Deixar secar.
 CORPÚSCULOS DE NISSL:

• São acumulações basófilas, que se encontram no citoplasma

de algumas células nervosas.

• Os corpúsculos de Nissl são constituídos por retículo

endoplasmático rugoso e encontram-se no pericário e na
primeira porção das dendrites, não é possível encontrá-los
nos axónios .

• Têm uma grande afinidade com os

corantes básicos, o que leva à obtenção
de uma coloração intensa permitindo um
bom estudo histológico.
Franz Nissl, neurólogo alemão
(1860-1919)
 COLORAÇÃO DE NISSL

Coloração selectiva
desenvolvida por Nissl
baseia-se na coloração por
anilina usada para marcar
grânulos extra nucleares de
RNA.

Corpúsculos de Nissl
Este tipo de coloração Núcleo
Pericário
permite visualizar: Prolongamentos
Diferença entre coloração H&E e coloração de Nissl:
THE END