Material

Solução-padrão de proteínas: albumina de soro bovino 5mg/mL

Reativo de biureto
Leite bovino
Água destilada
Ácido clorídrico
Tubo de ensaio
Pipetas de 1ml/10ml
Pipeta de 10ml
Pipeta de 1ml/100ml
Becker de 250ml/50ml
Espectrofotômetro
Filtro
Método

Primeiramente separamos os seis tubos de ensaio ,para a realização da aula,

enumerando-os, e em cada um pipetamos as soluções solicitados no roteiro. Sendo na
seguinte ordem:
• no primeiro tubo, que é o tubo branco, 1ml de água destilada, e 5 da solução do
reagente do biureto;
• no segundo 0,2ml da solução-padrão de proteína a 5mg/mL, 0,8 de água
destilada e 5ml do reagente de biureto;
• no terceiro tubo 0,4 da solução-padrão da proteína, 0,6ml de água destilada e
5ml do reagente de biureto;
• no quarto tubo 0,6 da solução padrão de proteína a 5mg/ml, 0,4 de água
destilada e 5ml de reagente de biureto;
• no quinto tubo 0,8 da solução-padrão de proteína a 5mg/ml, 0,2mlde água
destilada e 5ml de reagente de biureto;
• no sexto tubo 1ml da solução-padrão de proteína a 5mg/ml, nada de água
destilada e 5ml do reagente de biureto.
Após pipetarmos as soluções nos tubos, deixamos em repouso por 10 minutos.
Enquanto esperávamos o tempo de descanso, calculávamos a absorbância das soluções,
e em seguida, fazíamos a leitura no espectrofotômetro. ‘Logo, utilizamos outros dois
tubos de ensaio para o PF (proteínas do filtrado) e PT (proteínas totais). No tubo do PF,
foi transferido 10ml de leite bovino para um copo de béquer de 50ml, adicionando 10ml
de água destilada morna. Com o auxilio da pipeta de 2ml, acrescentamos o ácido
clorídrico a 2%, de gota em gota até a coagulação do leite (não lembro o valor do
ácido). Aguardamos a separação do precipitado do sobrenadante no filtro. Já no tubo PT
diluímos 0,5ml de leite bovino com 9,5ml de água destilada.’ (comentar o erro cometido
em aula, citando os cálculos corrigidos)
Cálculos

Cálculo da absorbância dos tubos 2 a 6

Tubo 2. C1 x V1 = C2 x V2
5 x 0,2 = C2 x 1
C2 = 1/1
C2 = 1

Tubo 3. C1 x V1 = C2 x V2
5 x 0,4 = C2 x 1
C2 = 2/1
C2 = 2

Tubo 4. C1 x V1 = C2 x V2
5 x 0,6 = C2 x 1
C2 = 3/1
C2 = 3

Tubo 5. C1 x V1 = C2 x V2
5 x 0,8 = C2 x 1
C2 = 4/1
C2 = 4

Tubo 6. C1 x V1 = C2 x V2
5 x 1 = C2 x 1
C2 = 5/1
C2 = 5

Resultados no espectrofotômetro:
Tubos 1 2 3 4 5 6
0 0,059 0,137 0,170 0,202 0,239

Tubos 1 2 PT PF
0 2,136 0,011 3,010