Você está na página 1de 20

O vidro em laboratrio - No apresenta porosidade - Evita aderncia de sujeira - inerte a inmeros reagentes - No contamina a amostra - Pode ser transparente

e ou mbar para solues fotossensveis - Estabilidade da forma - Vida til longa - Pode ser aquecido Vidraria de preciso: possui graduao e no pode ser aquecida. Ex.: pipeta, proveta graduada, bureta, etc. Vidraria de semi-preciso: apresenta somente o volume aproximado: Becker, erlenmeyer Vidraria de no-preciso: no apresenta nenhum tipo de escala: balo de fundo chato, vidro de relgio, etc Tubo de ensaio: usado em reaes bioqumicas Estante para tubos de ensaio: suporte de tubos de ensaio Tubo cnico: armazenamento e mistura de material em centrifugao Eppendorf: Armazenamento de materiais Becker: preparo e aquecimento de solues Erlenmeyer: titulaes e aquecimento de liquidos Balo de fundo chato: usado para aquecimento e armazenamento de liquidos Balo de fundo redondo: Aquecimento de liquidos e reaes de desprendimento de gases Balo de destilao: Usado em destilaes, possui sada lateral para condensao de vapores. Condensador: utilizado para condensar gases ou vapores na destilao Kitassato: usado para filtrao vcuo Funil de bunchner: usado em conjunto com o kitassato nas filtraes a vcuo Balo volumtrico: usado para preparar e diluir solues Funil de separao: utilizado para separao de liquidos imiscveis Funil: utilizado para transferncia de liquidos e filtraes Proveta: medio de liquidos Bureta: usada para medidas precisas de liquidos Bico de bunsen: utilizado para aquecimento em laboratrio Pipeta graduada: Medio e transferncia rigorosa de liquidos Pipeta volumtrica: medio e transferncia de volumes exatos Pipeta de Sahli: utilizada nos exames de hemoglobina Frasco reagente: armazenamento de solues Camara de neubauer: contagem de clulas e/ou sedimentos Cadinho: Aquecimento e fuso de slidos altas temperaturas Dessecador: Com uma substancia chamada dessecante, utilizado para guardar substncias em ambientes com baixo teor de umidade.

Soluo uma mistura homogenea de duas ou mais substancias

Soluto, a soluo que est dispersa na soluo. Ex.: NaCl Solvente a substancia que possibilita a dissoluo do soluto. Ex.: H2O s vezes torna-se dificil a distino entre soluto e solvente. Ex.: agua e alcool. O soluto a substancia em menor quantidade e o solvente a substancia predominante. Concentrao comum a quantidade em gramas de soluto existente em 100mL de soluo. Ex.: Soluo Fisiologica 0,9% (0,9g de NaCl em 100mL de H2O). Concentrao comum = sempre em g/L Concentrao (c) = massa (m) Volume (L) A densidade de um material permite relacionar a sua massa com o volume ocupado por ele. A densidade da H2O 1, portanto as densidades so sempre medidas pela H2O. Para leitura da densidade utilizamos o refratmetro. O densimetro permite determinar a densidade de um liquido, em gramas por centimetro cubico. Densidade = massa (g) a unidade de medida sempre g/cm3 3 Volume (cm ) Dois tomos diferentes formam uma molcula ons com carga positiva so chamados ctions Na+ ons com carga negativa so chamados nions ClOs ons opostos se atraem formando uma molcula de NaCl Massa molar o valor da massa de um elemento seguido da unidade de grama que corresponde massa de 1 mol do elemento. H=1g C=12g N=14g O=16g Calcule 0,4 mol de NaCl 1 mol de NaCl -------- 58,5g 0,4mol -------x 1mol.x = 0,4mol . 58,5 X = 0,4 mol . 58,5 = 1 mol a unidade

x = 0,4 . 58,5 1

x= 23,4g NaCl

Molaridade ou concentrao molar a quantidade de matria do soluto (em mol) em razo ao volume da soluo (em litros) = mol/L Quanto maior a concentrao de [H+]hidrognio, mais acido o pH Quanto maior a concentrao de [OH-] Hidroxido, mais base o pH O pH neutro igual a 7 onde a concentrao de [H+] igual a concentrao de [OH-] Diluir acrescentar solvente em um reagente ou amostra para alcanar a concentrao desejada.

Bioquimica a cincia que estuda os processos qumicos que ocorrem nos organismos vivos. Biofisica a cincia que aplica as teorias e mtodos da fsica para resolver questes de biologia.

Os mtodos biofsicos para determinao de substancias orgnicas so: - Eletroforese: dosagem de protena, lipdeos e hemoglobina; - Fotocolorimetria: Determinao de concentrao de solues; - Cromatografia: Separao e identificao de substancias. Metabolismo o conjunto de transformaes que as substancias qumicas sofrem no interior dos organismos vivo. a soma do anabolismo e do catabolismo. Anabolismo - O anabolismo ou metabolismo construtivo o conjunto de reaes que implicam a construo de molculas a partir de outras, acarretando o crescimento, regenerao e manuteno de tecidos e rgos. Para que uma reao anablica ocorra, indispensvel a presena de substratos necessrios e, principalmente, energia. Alguns exemplos de anabolismo so a sntese de protenas a partir de aminocidos dentro do tecido muscular e a formao de estoques de glicognio atravs de molculas de glicose. Catabolismo - Parte do metabolismo que se refere assimilao ou processamento da matria orgnica adquirida pelos seres vivos para fins de obteno de energia. O que eu como ser transformado em energia. Substancias organicas so aquelas substancias quimicas que possuem na sua estrutura o Carbono (C) e Hidrogenio (H), podendo estar presenta ainda oxigenio, nitrogenio, fosforo, etc. Ex.: Glicose, frutose, colesterol e proteina. Moleculas organicas naturais so moleculas sintetizadas pelos seres vivos, estudadas pela bioquimica Moleculas organicas artificiais so substancias que o homem produz, como o plastico. Substancias inorganicas so as substancias da natureza que no possuem o carbono ligado a hidrogenio. So elas: - ons: Na+, Cl-, K+ - Sais minerais: NaCl, CaCO3 - cidos: H2SO4, HCl - Bases: KOH, NaOH Carboidratos: Na sua composio quimica so poliidroxialdeidos ou poliidroxicetonas, ou substancias que liberem esses compostos por hidrolise (reao qumica de quebra de uma molcula devido a gua).
A sua forma tem a seguinte relao 1:2:1 para C:H:O Glicose (C6H12O6) Frutose (C6H12O6)

Na glicose temos duas ligaes aldedo C=OH e na frutose 2 ligaes cetona C=O

As menores estruturas de carboidratos vo de 3 a 7 atomos de carbono, sendo os mais comuns com 6 atomos (nos monossacarideos).

As funes do carboidrato so: Gerar ATP (Trifosfato de adenosina) que armazena energia proveniente da respirao celular e da fotossntese, para consumo imediato responsavel por - Produo de energia - Reserva energetica (Glicogenio) - Material de sustentao celular Existem 3 classes de carboidratos: Monossacarideos: compostos slidos, sem cor, vristalinos e soluveis em agua. A maior parte dos monossacarideos tem sabor doce. Ex.: Glicose, Frutose (frutas) e galactose (leite). Oligossacarideos: So os dissacarideos mais comuns na natureza formados pela unio de 2 a 10 monossacarideos. A ligao entre sacarideos para formao de um dissacarideo chamada de ligao glicositica. Dissacari deo Sacarose Lactose Maltose Formados pelos monossacarideos Glicose + frutose Glicose + galactose Glicose + glicose Fonte Cana/beterraba Leite Cereais

Polissacarideos So polimeros de alto peso molecular, com mais de 10 monossacarideos ligados entre si. Podem ser homopolissacarideos (mais de 10 monossacarideos apenas de glicose, por exemplo) ou heteropolissacarideos (possui 2 ou mais tipos de monossacarideos com mais de 10 ligaes entre eles). A digesto dos carboidratos ocorre atraves da hidrolise das ligaes glicosilicas (reao qumica de quebra de uma molcula de glicose pela a gua). DIGESTO DOS CARBOIDRATOS A digesto dos carboidratos ocorre pela hidrolise de ligaes glicosilicas (reao qumica de quebra de uma molcula de glicose pela gua). O carboidrato s absorvido na
forma de monossacardeo, da a importncia da quebra dos polissacardeos atravs da mastigao, onde a amilase salivar comea a quebrar os amidos. No estomago no h nenhum tipo de enzima que quebre os carboidratos, o pH do estomago (8,0) faz com que a amilase salivar para suas funes. Essa etapa chamada de desnaturao (paralisa a enzima). No intestino encontramos as enzimas responsveis pela quebra dos dissacardeos: sacarase (quebra de sacardeos glicose +frutose), lactase (glicose+galactose) e a maltase (glicose+glicose). O dissacardeos so absorvidos mais rapidamente que os polissacardeos.

Quando nos referimos a absoro de glicose, significa que os monossacardeos esto deixando o intestino para o sistema linftico, a fim de essa glicose seja filtrada antes de ser direcionada corrente sangunea. O pico de glicose (tempo de absoro da glicose) ocorre entre 30 a 60 minutos. METABOLISMO DOS CARBOIDRATOS Todos os monossacardeos absorvidos passam pelo fgado (onde so transformados em glicose). Depois de 1 a 2 horas no existem mais frutose nem galactose no sangue pois os mesmos j se foram metabolizados pelo fgado e transformados em glicose. A produo de energia realizada por meio da glicose, dentro das clulas do organismo, da a importncia da glicose estar presente no sangue a fim de que o mesmo a envie para todas as clulas do corpo humano. Quando aumenta o nvel de glicose no sangue, as ilhotas de Langerhans, no pncreas, tambm inicia a produo de insulina (hormnio a base de protena). A insulina tem como funo permitir a passagem da glicose do sangue para dentro da clula. Dentro da clula a glicose sofre a ao de uma enzima, que muda sua estrutura, tornando-se glicose ativada, impedindo que ela volta para a corrente sangunea, passando a se chamar 6(p). A 2 fase da glicose na clula o piruvato, que pode ser divido em 3 mecanismos: Piruvato anaerbico: Por falta de O2, aumenta a concentrao de lactato, gerando apenas 2 ATPs. O organismo para gerar mais energia transforma esse lactato em novo piruvato, s que dessa vez, aerbico. Piruvato aerbico: Mecanismo ideal onde o piruvato no vira lactato. Durante a rspirao celular o organismo produz a coenzima A, que oxidada produz H2O, rendendo 38 ATPs em apenas 1 molcula de glicose. Excesso de Glicose medida que a glicose aumenta, deve-se aumentar tambm a produo de insulina, o excesso de glicose armazenado no fgado e nos msculos. Nesses rgos a glicose armazenada na forma de glicognio (polissacardeo). O msculo guarda glicognio para uso prprio se houver necessidade. O fgado devolve glicose para todo o organismo por meio do sangue. A glicose consumida em excesso armazenada em forma de gordura por todo o organismo. O aumento de insulina o responsvel pelo armazenamento de gordura. Quando sentimos fome, os nveis de glicose comeam a cair (da mesma forma que os nveis de insulina). Quando a glicose e a insulina caem, aumenta o nvel de glucagon (hormnio produzido pelas ilhotas de langerhans do pncreas). O glucagon estimula a quebra de glicose que retorna ao sangue forando tambem a produo de insula e consequentemente a reduo do prprio glucagon. O glucagon retirado do glicognio presente no fgado e no na gordura acumiulada. Caso no haja alimentao nesse primeiro momento de fome, aps algumas horas a fome retorna com maior intensidade, como o glucagon j foi praticamente todo utilizado do glicognio, mobilizado ento os lipdios (da reserva de gordura) para a gerao de energia. DIABETES MELLITUS A principal caracterstica do diabetes a hiperglicemia. Estima-se que 220 milhoes de pessoas no mundo sejam portadores de diabetes. 8% da populao brasileira sofre desse mal. O diabetes aparece como a 6 causa mais frequente de internao hospitalar. A hiperglicemia pode ser causada por: - Deficincia de insulina ou a ausncia dela; - Deficincia da ao insulnica a nvel celular (quando mesmo produzida, a insulina no funciona bem); - Diabetes do tipo I (ou insulino-dependentes) ou diabetes juvenil; - Diabetes do tipo II (ou no insulino-dependentes);

- Tipos especficos de doenas pancreticas, sndromes metablicas e consumo excessivo de corticoides; - Diabetes gestacional. Diabetes do tipo I ou insulino-dependente Geralmente acomete pessoas com menos de 30 anos. mais comum em crianas em relao do tipo II. mais grave que a diabetes do tipo II. Doena auto-imune (o sistema imune ataca as ilhotas de Langerhans). A doena bem mais agressiva que a do tipo II. Para desenvolver as doenas auto-imunes necessria uma pr-disposio gentica. Antes de a doena aparecer, geralmente ocorre estresse fsico e/ou emocional. Para regular a dosagem de insulina obrigatria a aplicao da mesma. O tratamento ideal seria com bomba de infuso de insulina que aplicaria o hormnio automaticamente de acordo com a necessidade do organismo.

Diabetes do tipo II Tipo de diabetes mais comum, est relacionado com nossa vida moderna (m alimentao, sedentarismo, estresse, sobrepeso) e pr-disposio gentica. Geralmente aparece aps os 30 anos de idade, se no tratada, haver necessidade de tratamento com insulina. Embora haja produo de insulina, a mesma no consegue ser bem distribuda no organismo. Tipos especficos (raros) doenas que desencadeiam o diabetes: - Doena do pncreas (pancreatite), onde o pncreas ao consegue produzir insulina devido sua infeco; - Sindromes metablicas, quando h dificuldade na absoro da glicose ou na produo de insulina - Uso excessivo de corticoides A cortisona estimula a liberao de glicose no sangue. Todo paciente diabtico ao ser indicado o uso de corticoide, deve ficar sob constante observao. SINTOMAS DO DIABETES Aumento de apetite: como a glicose necessria para entrar na clula (o que no acontece no diabetes) o organismo entende que no houve alimentao, mandando mensagem para o SNC ingerir glicose. Sede intensa, aumento no volume de urina, desidratao e sudorese intensa: normalmente no se perde glicose na urina. A reabsoro de glicose acontece durante o limiar renal (limite dos rins absorver glicose no sangue), cujo o ndice de 160 180mg/dL de glicose no sangue. Caso o paciente ultrapasse esse limiar, o organismo deixa de reabsorver essa glicose, deixando a mesma na urina. Para formar a urina rica em glicose necessrio mais gua, resultando em sede intensa e aumento no volume de urina. O volume de gua que o diabtico ingere nunca suficiente, e como o paciente urina muito, ocorre a desidratao. O metabolismo aumenta para tentar resolver a reduo da glicemia, ocasionando a sudorese (como o paciente precisa de mais gua, necessrio perder ao Maximo a gua que tem para poder ingerir mais ainda). Perda de peso, ocasionada pela perda de lipdios no metabolismo. Cansao, sonolncia, demora de cicatrizao, infeces nos ps, pele e aparelho urogenital: o baixo acumulo de energia gera cansao e sonolncia, a falta de energia tambm afeta as clulas que, sem energia, demoram a cicatrizar. As infeces so relacionadas deficincia do sistema imunolgico (imuno-deprimido). Viso embaada: o aumento da glicose no sangue lesiona os capilares do olho.

COMPLICAES TARDIAS DO DIABETES Quanto maior o controle da doena, menor ser a chance de desenvolver complicaes tardias. Tais complicaes so mais comuns em pessoas que fumam: - Vista embaada - Catarata - Retinopatia (Inflamao da retina) - Nefropatia diabtica - Neuropatia diabtica - Impotncia sexual - Aterosclerose (entupimento das artrias) - Falta de suprimento sanguneo

DIABETES GESTACIONAL Consiste em uma alterao do metabolismo que se caracteriza pela ocorrncia de hiperglicemia, induzida pela gravidez, portanto quando a gravidez termina, o distrbio se encerra. Ocorre em 4% das gestantes, aps a 24 semana de gestao. Os hormnios da gestante podem destruir a insulina, gerando aumento da glicemia. As mulheres com maior tendncia so as obesas e com sobre-peso, e mulheres acima dos 30 anos com antecedentes familiares de portadores de diabetes. O exame (CURVA GLICEMICA) deve ser realizado entre a 24 e 28 semana de gestao. A placenta produz lactogenio placentrio, hormnio com tendncia a aumentar a glicemia. Consequncias da Diabetes Gestacional (em pacientes que no se cuidam): - Aborto espontneo - Morte fetal - Policitemia (aumento de eritrcitos) - Ictericia (aumento da concentrao de bilirrubina) - Sindrome de dificuldade respiratria - Hipoglicemia - Neonato acima de 4kg O maior problema das mes diabticas que elas no podem tomar medicao via oral, portanto ela obrigada a manter dieta a fim de no ocorrer nenhuma consequncia grave. O aumento da insulina retarda o desenvolvimento do pulmo do bebe, gerando nele dificuldades respiratrias. O aumento da insulina tambm provoca ligeiro aumento dos rgos, aumentando o peso da criana. Durante a gestao o bebe se acostuma a receber muita glicose e insulina. Ao nascer, a glicose passa a entrar em quantidades menores e a insulina em numero maior, gerando hipoglicemia no mesmo. EXAMES PARA VERIFICAO DO DIABETES - Glicemia Srica Independente de horrio ou jejum referencia 70 a 125mg/dL - Glicemia em jejum - Glicemia ps-brandial

- Hemoglobina glicada - Prova oral de tolerncia glicose (curva glicmica) - Automonitoramento da glicemia (glicosimetro) - Pesquisa de glicose na urina (presena da glicose) - Pesquisa de corpos cetnicos na urina - Glicosria (concentrao da glicose presente na urina)

GLICEMIA EM JEJUM Exame de rotina com jejum entre 8 e 12 horas, jamais ultrapassar 16 horas de jejum. O valor de referencia de 70 a 99 mg/dL. Estando o resultado entre 100 125mg/dL, o paciente dever repeti-lo num intervalo de 15 dias, caso o resultado do segundo exame apresente valores normais pode ser que na realizao do primeiro exame o paciente poderia apresentar algum tipo de infeco (algumas infeces podem aumentar a glicemia no sangue). Se o resultado se repetir (entre 100 e 125 mg/dL), significa que o paciente intolerante glicose (ou pr-diabetico), superior a 125mg/dL, o paciente j considerado diabtico.

DOSAGEM DE GLICOSE (ESPECTOFOTOMETRO)


- A fase pr-analitica, ou preparo, aquele que antecede o exame - A reao linear at 500mg/dL, acima desse valor deve ser feita diluio da amostra com soluo fisiolgica; - O valor de referencia geralmente est em 70 a 99mg/dL; - A amostra dever ser realizada em soro ou plasma fluoretado (tubo com tampa cinza), com jejum de 8 a 12 hrs, jamais ultrapassar 16hrs de jejum; - Nas amostras de sangue com anticoagulante (tampa cinza) a concentrao da glicose permanece estavel por at 8 hrs.; - O soro estavel por at 2 hrs., por esse motivo comum utilizar soro (tampa vermelha) nas avaliaes de urgencia; - No plasma ou soro separados das clulas, a glicose permanece estvel por 3 dias entre 2 e 8oC.

O espectofotometro deve ser ligado com 15 minutos de antecedencia s analises. Tubo branco (apenas reagente) responsavel por zerar o espectofotometro. Tubo padro (padro + reagente) determina o fator Tubo amostra ou desconhecido (amostra + reagente) onde depositada a amostra do paciente (soro ou plasma). Homogeneizar e incubar no banho-maria por 10 minutos 37oC. Ler as absorbancias em 505nm, acertando o zero com o branco. A cor estvel por 30 minutos.

Devemos realizar sempre 3 padres, a fim de encontrar um valor exato e diminuir as diferenas para determinar qual abosrbancia padro utilizar O culculo para dosagem de glicose o seguinte Fator = concentrao padro Absorbancia padro Gli = Fator x absorbancia da amostra Na aula pratica realizada em laboratrio utilizamos o kit da maraca Labtest cujo padro era de 100mg/dL . No tubo branco foi colocado 2mL de reagente de cor No tubo padro foi colocado 2mL de reagente de cor + 20L de padro No tubo amostra foi colocado 2mL de reagente de cor + 20L de soro

Aps 10 minutos em banho-maria chegou-se s seguintes absorbancias: Absorbancia Padro 1 0,316 2 0,325 3 0,341 4 0,324 Mdia = 0,326 Fator = concentrao padro Absorbancia padro = 100mg/dL = 0,326 Fator = 306,75 306,75 x 0,374 306,75 x 0,342 = = Absorbancia da amostra 1 0,374 2 0,342

Amostra 1 - Gli = Fator x absorbancia da amostra = 114,72mg/dL Amostra 2 - Gli = Fator x absorbancia da amostra = 104,91mg/dL

As amostras demonstram que o paciente apresenta intolerancia glicose. TUBOS DE COLETA DE SANGUE Tampa Roxa Anticoagulante (EDTA), preserva bem as clulas, muito utilizado em hemograma, utiliza o sangue total (plasma e elementos figurados (plaquetas, hemcias e leuccitos)). Tampa Cinza Anticoagulante (Fluoreto de sdio), impede a degradao da glicose, utiliza a parte liquida do sangue (plasma) Tampa Azul Anticoagulante (Citrato), seqestra o clcio do material biolgico, utilizado em coagulograma, utilizando o plasma. Tampa Verde Anticoagulante (Heparina), utilizados em exames bioqumicos e testes toxicolgicos, utilizando o plasma.

Ao homogeneizar o tubo com anticoagulante, o sangue jamais se coagular. Aps a separao por sedimentao, o sangue se separa em elementos figurados(hemcias, leuccitos e plaquetas) e plasma (parte liquida). Tampa Vermelha - Para se obter o soro (se refere ao plasma sanguneo no qual os fatores de coagulao (como a fibrina) foram removidos naturalmente. O soro sanguneo obtido atravs da coagulao do sangue. Significa que o soro sanguneo no possui os fatores de coagulao do sangue total, que foram consumidos pela coagulao das hemcias. Normalmente utilizados para testes sorolgicos e pesquisa de anticorpos).

HEMOGLOBINA GLICADA (OU GLICOSILADA)


Mostra como se comportou a glicemia do paciente nos ultimos 3 meses, em casos normais, a tempo mdio de vida de um glbulo vermelho de cerca 120 dias. Durante este perodo, a hemoglobina presente dentro dos glbulos vermelhos fica exposta a certos elementos como a glucose plasmtica. Desta forma e dependendo da concentrao de glucose plasmtica, a glucose vai reagir com a hemoglobina de forma espontnea e no enzimtica, formando-se assim a hemoglobina glicada. A tcnica utilizada para a dosagem da hemoglobina glicada separa a hemoglobina glicada na hemoglobina normal. Tcnica utilizada: Micromatografia em coluna (Labtest) Principio: A resina de troca ionica carregada negativamente. Este exibe afinidade por moleculas de carga positiva. Na realidade o processo consiste na separao das hemoglobinas, filtrando somente a glicada, as demais hemoglobinas ficam retidas na resina. Reagentes necessarios: - Tampo Hb (pH = 6,7); - Hemolisante; - Colunas para cromatografia Amostra: Sangue total (EDTA), estavel por 5 dias entre 2 e 8oC. Interferncias: Amostras lipmica(ricas em triglicerideos) ou ictricas interferem na dosagem, fornecendo resultados falsamente elevados. Procedimento 1 Preparo do hemolosado (ruptura de hemacias da amostra): - colocar em um tubo de ensaio 400L de hemolisante e adicionar 100L da amostra;

- agitar fortemente por 20 segundos e esperar por 5 minutos; - Se a hemlise for incompleta (a hemlise completa deixa o sangue vermelho translucido), centrifugar e usar o sobrenadante ( o que fica por cima da soluo, a parte menos densa); - Assegure-se que o hemolisado, tampo e as colunas estejam na mesma temperatura; Procedimento 2 Preparo da coluna: - A presena de bolhas de ar na resina interfere na drenagem do tampo; - Retirar a tampa superior da coluna, introduzir o basto fazendo movimentos girattios descendentes e ascendentes para ressuspender a resina; - Remover imediatamente a tampa inferior, colocar a coluna em um tubo de ensaio e esperar que todo o liquido penetre na resina; - A coluna est pronta; - Medir a temperatura do liquido que drenou. Procedimento 3 Cromatografia: - Adicionar 50L do hemolisado sobre a resina, no a suspendendo para no formar bolhas de ar; - Esperar que todo hemolisado penetre na resina; - Transferir a coluna para um tubo de ensaio limpo e seco, marcado tubo Hb-G. - Colocar 3,5mL de tampo, lentamente, na coluna; - A eluio (separao) termina quando o tampo penetra na resina; - Desprezar a coluna.

Procedimento 4 Colorimetria: - Em um tubo de ensaio (marcado Hb-total), pipetar 7mL de gua destilada, adicionar 20L do hemolisado e misturar; - Determinar, no espectofotometro (que dever ser zerado com agua destilada), as absorbancias do tubo Hb-G e Hb-total em 415nm; - A cor estavel por 4 horas. A reao linear da Hb Glicada de at 30% alem dos valores de referencia que de 5,3 a 8,0%. A Hb-G do diabetico em tratamento deve ser >7%. A cromatografia deve ser realizada numa temperatura em torno de 22oC , caso a temperatura seja abaixo ou acima dos 22oC, dever ser utilizado fator de correo de temperatura constante na bula. O calculo para a Hb-G : Hb-G = Abs. Hb-G x 20 Abs. Hb-total

As Absorbncias encontradas foram : Hb-G = 0,248 Hb-total = 0,560 Aplicando-se a formula: Hb-G = 0,248 x 20 8,86 0,560 21 C)
o

Hb-G = 0,443 x 20

Hb-G

Hb-G = 8,86

x 1,03 (correo da temperatura em lab. Que estava em

Hb-G = 9,1% ( Hb-G apresenta somente uma casa aps a virgula enquanto o valor da glicose sempre inteiro) Para fazer a relao porcentagem Hb-G com concentrao de glicose (mg/dL), utilizamos a tabela abaixo

Teremos o seguinte resultado: Media de glicose = 28,7 x (A1C) 46,7 Media de glicose = 28,7 x 9,1 46,7 Media de glicose ~= 215mg/dL

GLICEMIA PS-BRANDIAL (EXAME DE ROTINA) Glicemia basal onde a determinao da concentrao da glicose feita aps 2 horas de uma refeio que contenha, no mnimo, 50g de carboidratos. Duas horas aps essa refeio, a glicemia deve ser de at 120mg/dL. necessria 2 coletas no mesmo dia. Inicialmente realizada glicemia em jejum, aps a coleta informado ao paciente que ele precisa retornar 2 horas aps uma refeio, o ideal que essa refeio seja o almoo, pois a quantidade de carboidratos maior . PROVA ORAL DE TOLERANCIA A GLICOSE (CURVA GLICEMICA) - NUNCA, JAMAIS REALIZAR ESSE TESTE EM DIABETICOS - Utilizado para diagnostico de diabetes tipo II e gestacional; - Nos 3 dias anteriores ao exame, o paciente deve fazer uma dieta que contenha, no mnimo 150g de carboidratos/dia; - Antes da curva glicmica, deve ser realizada a glicemia em jejum (podendo ser realizada no aparelho de dextro), se os valores da glicemia em jejum foram inferiores a 120mg/dL, dar continuidade curva glicmica, acima desse valor, a curva glicmica dever ser suspensa; - Esse teste consiste em efetuar dosagens glicmicas em intervalos de tempo, aps administrao de glicose por via oral; - As dosagens de glicose a serem administradas so: 75g para adultos; 100g para gestantes; Em crianas, a dosagem de 1,75g por quilo/peso, at o Maximo de 75 g.

- Geralmente, a quantidade de glicose utilizada de 2 a 3 dedos de dextrose, acrescentar gua e misturar bem; - O paciente deve beber a mistura em, no Maximo, 5 minutos. Se o paciente vomitar, o exame dever ser remarcado; - 30 minutos depois, colher a primeira amostra do paciente, as coletas devero ser efetuadas a cada 30 minutos at o final da curva (2 horas). A ingesto de gua permitida. CURVA NORMAL Mg/dL 160 120 80

30

60

90

120

150

180

Tempo (min.)

Pico de absoro da glicose, 30 a 60 minutos. O individuo normal vai atingir durante o pico de absoro, no Maximo 160mg/dL de glicose. Ao mesmo tempo aumenta o nvel de insulina, impedindo que a glicose ultrapasse 160mg/dL. Aps 2 horas, o ndice de glicemia est em torno de 120mg/dL e cairo gradativamente.

CURVA GLICOSE) mg/dL 180 160 120 110

ALTA

PR DIABETICO (PROVAVEL

INTOLERANCIA

30

60

90

120

150

180

Tempo (min.)

O paciente pr-diabetico ultrapassa 160mg/dL no pico de absoro da glicose. A insulina no acompanha a sobrecarga de glicose. O paciente no conseguiu produzir insulina na mesma velocidade que a glicose, indicando que o pncreas pode ter dificuldade na produo de insulina. CURVA DIABETICA (COMO ELA SERIA, CASO EXISTISSE) mg/dL

200 180

30

60

90

120

150

180

Tempo (min.)

O ndice glicmico do paciente diabtico j alto (200mg/dL), e como o paciente no produz insulina, a curva no reduz, se mantm estvel, no mesmo patamar. CURVA BAIXA (HIPOGLICEMICO) Mg/dL 160 120 80 70

30 60 90 120 150 180 Tempo (min.) Hipoglicmicos so pacientes que produzem grande quantidade de insulina, o limite da glicose normalmente de 70mg/dL. Ao se alimentar, a insulina aumenta bem mais que a glicose que geralmente no ultrapassa 120mg/dL. Logo aps, o ndice glicmico cai para abaixo de 70mg/dL. Os hipoglicemicos so pacientes que produzem grande quantidade de insulina ou diabticos (principalmente aqueles que utilizam insulina). A principal caracterstica dos hipoglicemicos a diminuio da concentrao de glicose srica (valores abaixo de 70mg/dL). Os valores se tornam crticos se inferiores a 60mg/dL. O intervalo para aparecimento de sintomas em hipoglicemicos de apenas 10mg/dL abaixo do limite, ou seja, quando a glicose atinge 60mg/dL o hipoglicemico comea a apresentar alguns sintomas, enquanto que no diabtico os valores para surgimento de alguns sintomas podem comear a aparecer quando a glicose estiver entre 160 a a80mg/dL. Os sintomas mais comuns nos hipoglicemicos so: dores de cabea, sudorese, tremor, sonolncia, aumento do apetite, viso embaada, pele mais fria, formigamento na boca e lngua, dificuldade na fala, confuso mental, convulses, desmaio, coma e evoluo para bito.

PERFIL LIPIDICO (LIPIDOGRAMA)


Lipidios so compostos orgnicos pouco solveis em gua, mas que dissolvem facilmente em solventes orgnicos, so componentes ideais das estruturas biolgicas. O colesterol s est presente na gordura de origem animal, cada grama de lipdio apresenta 9Kcal. FUNES DOS LIPDIOS - Podem ser utilizados como fonte de energia. A principal fonte de energia o carboidrato, mas na ausncia dele o organismo metaboliza os lipdios a fim de produzir energia; - Reserva energtica (armazenamento da gordura corporal); - Constituinte estrutural da membrana. As membranas de todas as clulas constituda por uma bi-camada de lipdios e protenas; - Isolante trmico. Pessoas com maior acumulo de gordura sentem menos frio; - Proteo contra choques mecnicos. - Precursores de hormnios como a testosterona e o estrgeno; - Absoro de vitaminas lipossolveis(vitaminas que precisam de gordura para serem absorvidas) ADEK. OS LIPDIOS SO DIVIDIDOS EM: cidos graxos: cidos que so produzidos quando as gorduras so quebradas. So altamente solveis em gua, e podem ser usados como energia pelas clulas. So classificados em monoinsaturados, poliinsaturados, ou saturados; Triglicerideos: So as formas de armazenamento energtico, constituindo depsitos no tecido adiposo. Quando preciso, utilizado na formao de energia. Fosfolipidios: Atuam na formao de bicamadas, que so as estruturas bsicas das membranas. Colesterol: o precursor dos hormnios esteroides, dos cidos biliares e da vitamina D. Lipoproteinas: responsveis pelo transporte de lipdios no sangue.

DIGESTO DOS LIPIDIOS Ao contrario dos carboidratos, na boca no h quebra de lipdios, somente mastigao. No estomago tambm no h digesto dos lipdios. No intestino, os lipdios entram em contato com a bile e a lpase pancretica, dando inicio a sua digesto.

A lpase pancretica uma enzima produzida no pncreas que tem como funo quebrar os lipdios (geralmente os triglicerdeos), os reduzindo a cidos graxos + glicerol. Aps a quebra desses lipdios, os cidos graxos se separam entre os que esto ligados com O2 e os que esto sozinhos. Todos os cidos ligados com o O2 so chamados de polares (solveis em gua), e os demais so chamados apolares (insolveis em gua) . A bile ento reorganiza essa estruturas centralizando as gorduras polares e deixando expostas as gorduras polares, formando uma estrutura que chamamos de Micela, a partir da a Micela metabolizada e lanada na circulao linftica. Os lipdios diferentes so reorganizados em lipdio humano na mucosa intestinal, esse lipdio lanado no sangue na forma de lipoprotenas (todas as lipoprotenas tem a mesma estrutura da micela), portanto as lipoprotenas so solveis em gua, e tm como funo transportar os lipdios. LIPOPROTEINAS QM (Quilomicrons) Sua composio de 98% de lipdios(principalmente triglicerdeos) e 2% de protena. Tem como funo transportar e distribuir pelo organismo a gordura da dieta, principalmente os triglicerdeos. a primeira lipoprotena a ser absorvida aps a alimentao, num individuo normal permanece por at 2 horas na circulao sangunea. O quilomicron apenas a primeira lipoprotena a ser formada para dar origem s demais, portanto ela no diagnosticada no organismo sadio, apenas em indivduos doentes, cujo soro fica lipemico (turvo). So sintetizadas na mucosa intestinal. VLDL Possui a mesma estrutura do QM aps passar pelo fgado, mudando principalmente na sua composio. um complexo grande. Sintetizado no fgado. Sua composio de 90% de lipdios(principalmente triglicerdeos) e 10% de proteinas. A principal funo do VLDL transportar lipdios para os outros tecidos, principalmente o tecido adiposo. O VLDL permanece o tempo todo no organismo, mesmo em jejum. Aps a distribuio dos lipdios o VLDL (anteriormente Quilomicron) passa a se chamar LDL. LDL formado no plasma pelo catabolismo do VLDL. Sua composio de 75% de lipdios ( Principalmente o COLESTEROL) e 25% de protenas. Cerca de metade do LDL circulante absorvido pelo fgado ( a fim de evitar que o mesmo circule no sangue e se acumule nas artrias) e o restante vai para os tecido extra hepticos. HDL um colesterol isolado, independente das demais lipoprotenas, feito sozinho. sintetizado no fgado e no intestino, liberado no plasma.

Sua principal funo absorver o HDL liberado dos tecidos extra hepticos e os levar para o fgado. Dispidemias (Niveis anormais de lipoprotenas no sangue) As Hiperlipemias (Niveis muito acima do normal) podem ser primrias (origem gentica) ou secundrias (Diabetes, sndrome nefrtica, hipotiroidismo, dieta, tabagismo e sedentarismo). As hipolipemias (Niveis muito abaixo do normal) esto relacionadas a m absoro intestinal, hipertiroidismo e/ou fatores alimentares. HIPERCOLESTEROLEMIA Aumento do colesterol total, principalmente o LDL. Hipercolesterolemia polignica: a forma mais comum, o colesterol varia entre 240 e 350mg/dL. Esta associado com a dieta e a genotipagem suscetvel. Hipercolesterolemia familiar: uma desordem autossmica dominante que produz elevaes do colesterol total e do LDL. ATEROSCLEROSE uma doena inflamatria, crnica, de origem multifatorial que ocorre em resposta agresso endotelial(clulas que revestem as paredes dos vasos), acometendo a ntima do vaso. A leso aterosclertica caracterizada pelo acumulo de lipdios, proliferao celular e fibrose na intima do vaso que provocam o estreitamento do lmen do vaso. Geralmente acumula o LDL. A aterosclerose pode ocasionar doenas como esquemias, tromboses, Infarto agudo do miocrdio, AVC e insuficincia renal crnica. Os fatores de risca da aterosclerose so: - Tabagismo; - Hipertenso arterial (> 140/90 mmHg); - Hipercolesterolemia (LDL < 160mg/dL); - HDL reduzido (<40mg/dL); - Diabetes melito; - Hipertrigliceridemia (>200mg/dL); - Obesidade; - Sedentarismo; - Idade (>45 anos nos homens e >55 anos nas mulheres); - Histrico familiar precoce em parentes de primeiro grau (<45 anos nos homens e <55 anos nas mulheres).

TRIGLICERDEOS So sintetizados no fgado e no intestino. Os quilomicrons e VLDL sofrem rpida metabolizao pela ao da lpase lipoproteica (LPL). O acumulo de quilomicrons e/ou VLDL resulta em hipertrigliceridemia.

DOSAGEM DE COLESTEROL TOTAL LIQUIFORM

Mtodo: colorimtrico de ponto final Reagentes: Reagente I (armazenar entre 2oC a 8oC) Padro 200mg/dL (Padro da marca Labtest) Observao: No utilizar o reagente I, quando sua absorbncia, medida contra a gua em 500m, for igual ou maior que 0,300 ou quando mostrar-se turvo ou com sinais de contaminao, caso o reagente fique completamente rosa, dever ser descartado. Amostra: Soro, estvel por 7 dias entre 2 e 8oC , e 6 meses a -20oC. Homogeneizar bem as amostras antes de iniciar a dosagem. No utilizar amostras fortemente hemolisadas Anticoagulantes como: citrato, EDTA e oxalato, produzem resultados falsamente diminudos. O jejum deve ser de 12 a 14 horas, abster-se de lcool durante as 72 horas que antecedem a coleta do sangue, no se deve realizar atividade fsica nas 24 horas anteriores ao exame. Linearidade: A reao linear at 500mg/dL

- Homogeneizar o soro, o padro e o tubo branco, e incubar no banho Maria por 10 minutos numa temperatura de 37oC - Zerar o aparelho com o tubo branco, determinar as absorbncias do padro e da amostra em 500nm. - A cor estvel por 60 minutos.

Valores de referencia do COLESTEROL TOTAL Desejvel <200 Limiar elevado 200-239 Elevado >240 Clculos: Fator = concentrao padro Absorbancia padro Col = Fator x absorbncia da amostra COLESTEROL (FRAES) VLDL+LDL+HDL Geralmente nos pedidos, vm solicitado apenas Colesterol total + fraes, mesmo assim devemos realizar a dosagem de triglicerdeos a fim de que possa ser calculado o valor do LDL.

Nos resultados de Triglicerdeos superiores a 400mg/dL, no realizamos as fraes do colesterol, pois o sangue fica muito turvo, impedindo sua leitura no espectofotometro. TRIGLICERIDEOS O jejum deve ser de 12 a 14 horas, abster-se de lcool durante as 72 horas que antecedem a coleta do sangue, no se deve realizar atividade fsica nas 24 horas anteriores ao exame. Amostra: soro ou plasma heparinizado, sem hemlise e separado dentro de 3 horas aps a coleta. Valores de referencia

VLDL Para calcularmos o valor do VLDL, devemos, aps realizada a dosagem de triglicerdeos, o seguinte calculo: VLDL = Triglicerideos 5 Os valores de referencia do VLDL so:

HDL A concentrao de HDL realizada por meio de teste laboratorial Os valores de referencia so:

LDL Para chegarmos aos valores do LDL necessrio os resultados do Colesterol total, HDL e VLDL, onde: LDL = CT (HDL+VLDL)