12/04/2013

Centro Universitrio Estadual da Zona Oeste Coordenao de Tecnologia de Produo de Frmacos e Farmcia

Espectroscopia de Ultravioleta Em um contexto histrico, a introduo da anlise por espectroscopia de ultravioleta durante os anos de 1930 foi um marco importante na qumica analtica. Os grandes ganhos de tempo e a habilidade para trabalhar com muito menores amostras de materiais demonstraram o poder de anlise da espectroscopia para os qumicos orgnicos para a elucidao estrutural de compostos. A espectroscopia de UV raramente usada como a principal tcnica de anlise de um composto atualmente. Sua utilizao comumente restrita a reas especficas como corantes, que tem importante absoro nesta faixa 2 do espectro eletromagntico.

Disciplina: Anlise Orgnica Ultravioleta Alessandro Kappel Jordo

Espectroscopia de Ultravioleta Absoro de radiao eletromagntica do ultravioleta visvel A absoro de radiao eletromagntica na regio de UVvisvel transfere a quantidade exata de energia para causar transies nos nveis energticos eletrnicos das ligaes g de uma molcula e resulta em excitao de eltrons do estado fundamental para o estado excitado. Quanto mais alta energia, mais curto o comprimento de onda, mais luz necessria para excitar ligaes do que ligaes como h uma grande diferena de energia entre os orbitais ligantes e antiligantes comparados com os orbitais ligantes e antiligantes.
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Espectroscopia de Ultravioleta Absoro de radiao eletromagntica do ultravioleta visvel

Espectroscopia de Ultravioleta Absoro de radiao eletromagntica do ultravioleta visvel Na nomenclatura espectroscpica as caractersticas estruturais de uma molcula responsvel pela absoro de luz no UV so atribudos aos cromforos. Molculas absorvem radiao UV na regio abaixo de 150 nm. A anlise da espectroscopia de UV-vis padro realizada em uma soluo diluda da amostra e referenciada a uma amostra de solvente puro. Nesta situao, com o solvente presente em excesso, uma parte do pico de absoro da ligao ir colidir 5

Espectroscopia de Ultravioleta Absoro de radiao eletromagntica do ultravioleta visvel A anlise da espectroscopia de UV-vis padro realizada em uma soluo diluda da amostra e referenciada a uma amostra de solvente puro. Nesta situao, com o solvente presente em excesso, p , uma p parte do p pico de absoro da ligao ir coincidir com a faixa medida do espectrmetro de UV. A absoro final do solvente pode estender-se cerca de 240 nm, dependendo do solvente. Certamente qualquer pico observado abaixo de 220 nm deve ser considerado com ateno.
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Espectroscopia de Ultravioleta Faixas de transparncias teis na regio de 180-250 nm para solventes comuns na espectroscopia de UV-visvel

Espectroscopia de Ultravioleta Deve ser levado em considerao que o vidro (usado para as medies) opaco a comprimentos de onda abaixo de 300 nm. A anlise de UV realizada em tubos de quartzo especiais (cubetas) que so transparentes at 170 nm, mas espectros visveis podem ser obtidos usando cubetas de plstico ou vidro.

Espectroscopia de Ultravioleta Eltrons em ligaes e pares de eltrons no compartilhados requerem menos energia que eltrons ligantes para excitao de seus orbitais antiligantes e absorver a comprimentos de onda mais altos. Uma dupla ligao isolada absorve radiao UV cerca de pares de eltrons no compartilhados p so 190 nm e p excitados por comprimentos de onda entre 185-195 nm. A tabela a seguir mostra os cromforos fundamentais importantes e os tipos de transio eletrnica que eles sofrem.

Espectroscopia de Ultravioleta Cromforos e suas transies eletrnicas

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Espectroscopia de Ultravioleta Quando dois orbitais so combinados para formar um dieno conjugado os eltrons tornan-se deslocalizados fornecendo uma estrutura hbrida de ressonncia. a brecha de energia entre o orbital molecular ocupado de mais alta energia (HOMO Highest Occupied Molecular Orbital) ) deste hbrido de ressonncia e o orbital molecular desocupado de menor energia (LUMO Lowest Unoccupied Molecular Orbital) muito menor que no alceno isolado. Consequentemente, a excitao ocorre com uma comprimento de onda maior de radiao eletromagntica.
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Espectroscopia de Ultravioleta Considerando a figura a seguir os orbitais moleculares para um alceno e um dieno conjugado permitem observar que a conjugao leva a uma diminuio de energia entre os orbitais HOMO-LUMO comparados ao sistema isolado.

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Espectroscopia de Ultravioleta A incluso de ligaes adicionais e estendo o grau de conjugao progressivamente estreita a diferena de energia entre HOMO e LUMO. Como resultado, o comprimento de onda da radiao requerida para excitao torna-se maior quando o grau de conjugao j g aumenta. Sistemas conjugados como polienos atribudos como cromforos fornecem absores diagnsticas na regio de UV-visvel do espectro eletromagntico. As absores diagnsticas resultam de transies * e n n* em sistemas conjugados.
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Espectroscopia de Ultravioleta Sistemas aromticos e heteroaromticos so comumente exemplos de sistemas conjugados e tais estruturas so particularmente cromforos utis. Os eltrons no-ligantes de heterotomos tais como nitrognio, oxignio e enxofre podem tornar-se envolvidos em ressonncia e estender a conjugao j g a estes sistemas. Um auxocromo qualquer grupo, tais como OR, NR2, NO2, ou CO2R, que capaz de estender o cromforo bsico. Este efeito sinergstico devido a habilidade de tais substituintes sofrerem deslocalizao de ressonncia envolvendo o sistema polieno e logo reduzir a diferena de energia HOMO-LUMO. 14

Espectroscopia de Ultravioleta O espectro abaixo mostra como aumentando a conjugao em uma srie de estruturas relatadas fornece o aumento no comprimento de onda de absoro mxima (max).

Espectroscopia de Ultravioleta Efeito do solvente na Espectroscopia de UV O solvente no qual o espectro de UV medido pode ter um efeito na posio max. Durante a excitao eletrnica, os tomos no se , mas eltrons incluindo os do solvente p podem movem, se reorganizar. Muitas transies levam a estados excitados que so mais polarizados que o estado fundamental. Se o solvente polar, o estado excitado pode ser mais prontamente estabilizado pelas interaes dipolo-dipolo que o estado fundamental.
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Espectroscopia de Ultravioleta Efeito do solvente na Espectroscopia de UV A diferena de energia reduzida HOMO-LUMO significa que a excitao ocorre mais prontamente que em solventes apolares, resultando em um deslocamento de 10-50 nnm a comprimentos de onda maiores (mais baixa g ) em etanol comparada p com hexano. energia) Tais deslocamentos so referidos a deslocamentos batocrmicos ou deslocamento para o vermelho pois o max move-se em direo ao vermelho no final do espectro Deslocamento batocrmico: o deslocamento de uma absoro para um maior devido a efeitos de substituio ou de solvente. 17

Espectroscopia de Ultravioleta Efeito do solvente na Espectroscopia de UV Efeito batocrmico nos espectros de UV da 4-nitroanilina obtidos em hexano e etanol.

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Espectroscopia de Ultravioleta Efeito do solvente na Espectroscopia de UV Excees so aquelas absores devido a transio n n* de grupos carbonila quando o estado de transio pode fazer ligaes de hidrognio com solventes mais prontamente que o estado excitado. Excitao eletrnica por isso requer mais energia que mais energia em solventes com ligao de hidrognio comparados com solventes apolares e, neste caso, o comprimento de onda da luz absorvida mostra um deslocamento de cerca de 15 nm para comprimentos de onda mais curtos.
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Espectroscopia de Ultravioleta Efeito do solvente na Espectroscopia de UV Este deslocamento hipsocrmico ou deslocamento para o azul uma consequncia da transio requerendo mais alta radiao de energia eletromagntica em um solvente mais polar. Deslocamento hipsocrmico: o deslocamento de uma absoro para um menor devido a efeitos de substituio ou de solvente.

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Espectroscopia de Ultravioleta Obteno e interpretao de um espectro de UV Espectroscopia de UV fornece duas importantes informaes. Uma a posio de absoro (max nm). Isto fornece informao na energia (E) da excitao eletrnica do cromforo responsvel pela absoro. O segundo d valor l a absortividade b ti id d molar l (). ) Este E t valor, l que uma constante para uma molcula em um dado comprimento de onda, uma medida da facilidade da transio causada pela absoro da radiao. Se uma transio eletrnica particular requerer uma certa energia de radiao incidente pode acontecer prontamente e depois a luz ser absorvida fortemente e o 22 valor de ser alto.

Espectroscopia de Ultravioleta Obteno e interpretao de um espectro de UV Se a transio no ocorrer prontamente o valor de ser baixo. Tais transies eletrnicas so definidas como permitidas e proibidas (no permitidas, como melhor definio fortemente desfavorvel) e pode ser predita de simetria do estado nos estados de correlao fundamental e estado excitado da molcula. Por exemplo, transies * e * so permitidas. Transies n n* so proibidas. Processos permitidos tem valores de maiores que 103 e os ditos no permitidos menores que 100.
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Espectroscopia de Ultravioleta Obteno e interpretao de um espectro de UV Substituintes que aumentam a intensidade da absoro do cromforo bsico so atribudos ao efeito hipercrmico e aqueles que diminuem a intensidade de absoro tem uma efeito hipocrmico. claro que, a comparao entre os valores de para diferentes compostos vlida somente se as anlises so realizadas com solues de mesma concentrao molar, aumentando a quantidade de amostra presente naturalmente aumentar a habilidade da soluo em absorver radiao incidente.
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Espectroscopia de Ultravioleta Obteno e interpretao de um espectro de UV A relao entre a absortividade molar, , e a concentrao do cromforo (em mol L-1) expressada pela Lei de Lambert-Beer:

Espectroscopia de Ultravioleta Obteno e interpretao de um espectro de UV A derivao desta relao assume que todas as molculas contribuem para a absoro do feixe incidente e que molculas no absorventes esto na sombra de outras. Para os tipos de concentrao muito diludas p p de UV-vis uma afirmativa usadas em espectroscopia vlida.

A equao frequentemente arranjada como: = A / cl

I0 = Intensidade da luz incidente I = Intensidade da luz transmitida = Absortividade molar c = Concentrao em mol L-1 l = Comprimento do caminho ptico atravs da amostra em cm

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Espectroscopia de Ultravioleta O instrumento Espectrmetros de UV operam no princpio de duplo feixe, com um feixe passando atravs da amostra e o outro passando atravs de uma clula de referncia. O espectrmetro tem duas lmpadas, uma emitindo luz na (UV) ) e a outra na faixa de 330-700 nm faixa de 200-300 nm ( (visvel). A luz emitida pela primeira fonte passa atravs de um monocromador, que divide a luz em seus componentes de comprimentos de onda da mesma forma que um prisma. Esta luz depois dividida pelos espelhos pticos curvos em dois feixes de intensidade igual, um dos quais passa atravs da amostra, o outro atravs da referncia contendo solvente puro.
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Espectroscopia de Ultravioleta O instrumento Cada feixe depois focalizado em um detector que mede a proporo de intensidades de dois feixes e a diferena automaticamente convertida e plotada como a absorbncia. Instrumentos geralmente tem uma escala cheia de defleco para A = 2, que significa que a proporo mais forte de I0 / I que o instrumento pode tolerar 100.

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Espectroscopia de Ultravioleta O instrumento

Espectroscopia de Ultravioleta Obtendo o espectro O espectro de UV de um composto gravado como uma soluo diluda em uma cubeta de quartzo (vidro opaco para UV abaixo de 300 nm). A amostra colocada no feixe de anlise e a cubeta contendo solvente puro colocada no feixe de referncia. O espectrmetro grava a diferena de intensidades da radiao que passa atravs de cada cubeta a fim de fornecer uma medida da luz absorvida pela substncia dissolvida sob anlise.
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Espectroscopia de Ultravioleta Obtendo o espectro A substncia deve ser solvel no solvente. Frequentemente pode ser necessrio gravar espectros em uma faixa de diferentes concentraes a fim de trazer picos dentro da faixa medida do vrias intensidades de p espectrmetro.

Espectroscopia de Ultravioleta Aparncia do espectro Devido a presena de vrias espcies associadas e solvatadas, espectros de UV-vis gravados em soluo so geralmente pobremente resolvidas e consistem de uma ou mais lombadas, as vezes com algumas estruturas finas p definidas precariamente.

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Espectroscopia de Ultravioleta Interpretao do espectro de UV A figura abaixo mostra o espectro tpico de uma soluo de 4-nitroanilina obtido em etanol.

Espectroscopia de Ultravioleta Interpretao do espectro de UV Primeiramente, determine o max e o valor de do espectro. max 227 nm, A = 1,55; max 375 nm, A = 1,75 Massa molecular da 4-nitroanilina = 138 g Concentrao molar da soluo = 1.12 x 10-4 mol L-1 = A / cl 227 = 1,55 / 1,12 x 10-4 = 13.890 375 = 1,75 / 1,12 x 10-4 = 15.680 Logo estes resultados como max (EtOH) 227 ( 13.890), 375 ( 15.680) 34

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Espectroscopia de Ultravioleta Derivados do benzeno O benzeno apresenta trs absores mximas no hexano a 184 ( 60.000), 203,5 ( 7.400) e 254 ( 204) nm. O maior pico chamado de banda K. A ltima, absoro no permitida chamada de banda B e mostra a estrutura fina de nveis de energia g vibracionais do devido a excitao benzeno. Substituindo o anel benznico com substituintes conjugados (ex.: CO2H ou CH=CO2H) ou grupos doadores de eltrons (ex.: NR2, OR) estende o cromforo e resulta em um deslocamento batocrmico dos picos.
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Espectroscopia de Ultravioleta Derivados do benzeno

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Espectroscopia de Ultravioleta Derivados do benzeno Duas situaes especiais ocorrem com hidroxibenzenos (fenis) e aminobenzenos (anilinas) que tem comportamentos caractersticos no tratamento com base e cido respectivamente.

Espectroscopia de Ultravioleta Derivados do benzeno Adicionando base a um fenol ocorre um deslocamento batocrmico pois o par de eltrons no compartilhado do oxignio torna-se mais disponvel para deslocalizao no ncleo aromtico. Espectro de UV do 2,4diclorofenol. Note o aumento do max (Efeito batocrmico) e absortividade (Efeito hipercrmico) no espectro da amostra alcalina

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Espectroscopia de Ultravioleta Derivados do benzeno Adicionando cido a uma amina ocorre um deslocamento hipsocrmico pois o par de eltrons no compartilhado do nitrognio protonado e no fica mais disponvel para deslocalizao no ncleo aromtico. Espectro de UV da anilina. Note a diminuio do max (Efeito hipsocrmico) e absortividade (Efeito hipocrmico) no espectro da amostra acidificada.
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Espectroscopia de Ultravioleta Derivados do benzeno Quando substituintes doadores de eltrons, tais como NH2, OH, OR, ou grupos retiradores de eltrons como NO2, COR, CO2R esto presentes no anel em uma relao 1,4 para cada, um deslocamento batocrmico muito pronunciado e um efeito hipercrmico p p notado na banda de absoro principal.

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Espectroscopia de Ultravioleta Derivados do benzeno Este efeito ocasionado pela extenso do cromforo pela deslocalizao da ressonncia atravs do anel aromtico. Entretanto, quando substituintes complementares esto 1,2 ou 1,3 um em relao ao outro, p embora o este efeito batocrmico no aprecivel deslocamento hipercrmico permanea.

Espectroscopia de Ultravioleta Derivados do benzeno Similarmente com substituintes no complementares h pequeno efeito batocrmico quando os grupos tem uma relao 1,4.

NO2 O2N
max

NO2 260 13.000 210,5 6.200

OH

HO 225 5.100

OH

(nm)

268,5 7.800

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Espectroscopia de Ultravioleta Exerccios 1) O espectro de UV de acetona (0,05 mol L-1 em cicloexanona, clula de 1 cm) apresenta max a 279 nm com uma absorbncia de 0,74. Qual a absortividade molar da acetona neste comprimento de onda? uma transio permitida ou no p p permitida? Q Que transio est causando esta absoro? 2) But-3-en-2-ona exibe mxima absoro de UV a 213 e 320 nm. Por que h dois mximos e qual deveria ser o valor de maior? Exerccios

Espectroscopia de Ultravioleta

3) Um composto lquido de frmula molecular C5H8 tem um max a 220 nm. Sugira possveis estruturas para o composto. 4) Diga os valores de max para os compostos a seguir usando a tabela de valores dada.

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Espectroscopia de Ultravioleta Exerccios 5) Usando as tabelas fornecidas correlacione os derivados de esterides abaixo aos seguintes valores max em hexano: 240 nm, 289 nm, 355 nm. Exerccios

Espectroscopia de Ultravioleta

6) Calcule a absortividade molar para os compostos abaixo nos comprimentos de onda mximo obtidos em caminho ptico de 1 cm.

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