1 - INTRODUO

A oftalmologia constitui um importante ramo da Medicina Veterinria, sendo freqente a ocorrncia de afeces oculares nas espcies domsticas. A lcera de crnea uma das doenas oculares mais diagnosticadas em oftalmologia veterinria levando freqentemente perda da viso (NASSISE, 1985). O diagnstico acurado e precoce da doena ocular permite estabelecer tratamento adequado, o que torna melhor seu prognstico. exigida rpida interveno a fim de evitar complicaes graves e preservar a viso. A reconstituio da superfcie ocular tem sido um desafio em oftalmologia. O processo de cicatrizao corneana se d diferentemente, de acordo com a extenso e a causa da injria (REZENDE et al., 2007) e muitas tentativas teraputicas tm sido feitas ao longo dos anos para reparar a crnea a fim de manter a sua estrutura e, se possvel, a sua transparncia e funo. A ceratoplastia um dos mtodos cirrgicos mais utilizados para a reconstruo da crnea. Apesar de ser o material ideal (Qual material?????) para o transplante, sua disponibilidade no vasta. A investigao de novos materiais que sirvam na reconstruo da superfcie ocular tem sido extensa (BARROS, 2000). A terapia medicamentosa recomendada isolada ou concomitante a procedimentos cirrgicos em ulceraes superficiais e profundas com objetivo de suporte mecnico e trmino da destruio corneana (SEVERIN, 1976; SLATTER & HAKANSON, 1998). Vrios so os tratamentos sugeridos para auxiliar o processo de cicatrizao, abreviando o tempo de desepitelizao. O oznio, gs natural da atmosfera terrestre, a variedade do oxignio que contm trs tomos obtidos atravs de uma reao endotrmica. A camada estratosfera sede de 90% de todo o oznio do planeta. Tem caractersticas oxidantes, sendo um gs instvel, com meia vida curta. Ao sofrer decomposio transforma-se em O2, ou combina com outros elementos por oxidao-reduo, formando compostos inorgnicos e gua (VALACCHI, FORTINO & BOCCI, 2005).

O oznio apresenta propriedades antiinflamatrias, antisspticas, moduladora do estresse oxidativo, de melhoramento da circulao perifrica e de oxigenao celular. aproximadamente dez vezes mais solvel que o oxignio, o mesmo ocorre com sua capacidade de difuso e penetrao tecidual. O propsito deste trabalho consiste em avaliar, a ao antiinflamatria, antimicrobiana, o perodo de reparao cicatricial da crnea e os aspectos organizacionais do epitlio e estroma por meio de exames macroscpicos, histolgicos, observao e medio da reparao cicatricial da crnea de coelhos aps ceratectomia superficial em coelhos.

2 - REVISO DE LITERATURA

2.1 - Crnea A crnea a parte anterior, transparente, protetora do olho dos vertebrados. Fica localizada na regio polar anterior do globo ocular. Juntamente com o cristalino, possui a funo de focar a luz atravs da pupila para a retina, como se fosse uma lente fixa (SISSON & GROSSMAN, 1981). Devido sua localizao externa e exposta, a crnea est freqentemente sujeita a traumatismos ou processos lesivos como laceraes, perfuraes e ulceraes (BRAGA et al, 2004). Como continuao da esclera, ela se apresenta como uma estrutura translcida, decorrente da ausncia de vasos sanguneos e pigmentos (GELATT, 2000). Anatomicamente dividida em cinco camadas: epitlio corneal, membrana limitante externa, substncia prpria, membrana limitante interna e lmina endotelial. (SISSON & GROSSMAN, 1981). O epitlio corneal possui de cinco a vinte lminas de clulas, podendo apresentar espaos linfticos entre as clulas da camada posterior. A sensibilidade corneana tambm est ligada a esse local, onde as terminaes nervosas livres se encontram (SISSON & GROSSMAN, 1981). A membrana limitante externa, tambm chamada de membrana de Bowman, considerada uma parte da substncia prpria, por estarem intimamente ligadas. constituda por lamelas fibrilares, que so pequenas e entrelaadas para produzirem uma firme coeso. A membrana limitante interna, tambm conhecida por membrana de Descemet, homognea, razoavelmente espessa e vtrea (SISSON & GROSSMAN, 1981). A lmina endotelial tem clulas aplainadas, com o ncleo paralelo membrana limitante interna e esto em contato direto com o humor aquoso, presente na cmara anterior do olho (SISSON & GROSSMAN, 1981). Devido s terminaes nervosas livres no epitlio da crnea qualquer trauma muito sintomtico causando dor, sensao corporal estranha e embassamento visual (BENELLI, 1997). As leses superficiais atingem o epitlio podendo chegar membrana basal e sua cicatrizao pode durar de 48 a 72 horas quando atingem somente

o epitlio. Atingindo o estroma, leva semanas para reposio, pois requer fibroblastos locais e vascularizao ocasional. Quando a membrana de Descemet afetada, a regenerao depender do endotlio, sendo progressiva e limitada a animais mais jovens. O endotlio, quando afetado, tambm tem a regenerao restringida a animais jovens, apresentando comumente um quadro complicado e progressivo (GELATT, 2000). Se a desepitelizao for superficial, de pequena extenso, no havendo quadro infeccioso, o processo de cicatrizao deve ocorrer em at 24 horas. A cicatrizao ocorre atravs da restituio direta das camadas epiteliais corneanas ou atravs do crescimento epitelial conjuntival (conjuntivalizao) com neovascularizao e defeitos epiteliais corneanos persistentes ou recorrentes (MONTEIRO et al., 2000). Aps a injria corneana, essencial que ocorra a eliminao de miofibroblastos, a fim de manter a transparncia necessria s funes da crnea. Os miofibroblastos corneanos apresentam o fator de necrose tumoral em sua membrana, que fundamental na apoptose, levando a uma opacidade corneana (HE & BAZAN, 2006). Foi demonstrado por CHANDRASEKHER et al. (2002) que a crnea desencadeia a sntese da enzima Fosfolipase aps sofrer injuria. No epitlio da crnea a produo dessa enzima favorece o influxo intracelular de Ca +2 e a ativao de enzimas responsveis pela reorganizao da matriz extracelular (CHANDRASEKHER et al., 2002). Concomitantemente podem proteger, ao lado de outros fatores de crescimento, os ceratcitos da apoptose (REZENDE et al., 2007). 2.2 Ulcera de crnea A perda de uma ou mais camadas superficiais do epitlio corneano denominada eroso. Quando o processo culmina na perda ntegra do epitlio corneano e parte do estroma, denominase ulcerao (BERNIS, EURIDES, BERNIS FILHO, 1989; WHITLEY,1991). As ceratites so processos inflamatrios da crnea classificadas, em decorrncia da sua etiologia, em: infecciosas, alrgicas, traumticas, idiopticas e secundrias a doenas sistmicas. Relativamente profundidade

da leso, dividem-se em: superficiais, intersticiais ou profundas, podendo, ainda, serem ulcerativas ou no (SLATTER, 1990). No existe um nico tipo de tratamento eficaz para os vrios tipos de lceras de crnea. Algumas so susceptveis ao tratamento clnico, mas um grande nmero requer o tratamento cirrgico, a fim de manter-se a integridade visual do paciente (PEIFFER, GELLAT, GWIN, 1977). Os sinais clnicos mais comuns nas ceratites so: perda de transparncia da crnea, dor, fotofobia, blefaroespasmo e lacrimejamento. Nos casos crnicos ocorrem, ainda, vascularizao e pigmentao da crnea (SLATTER, 1990). Deve-se tentar estabelecer a causa da enfermidade, para que se possa iniciar a terapia adequada, visando eliminar o fator desencadeante, prevenir a progresso da doena e promover a cicatrizao. O tratamento pode ser clnico, envolvendo o uso de antibiticos, inibidores da colagenase, antiinflamatrios e imunossupressores. As ceratites ulcerativas extensas ou as profundas exigem interveno cirrgica, com a realizao de recobrimentos ou a aplicao de enxertos (BERNIS, 1988). 2.3 Oznio O oznio, de frmula qumica O3, uma forma alotrpica do oxignio. Foi descoberto no sculo XIX por cientistas europeus enquanto faziam experincias com arcos eltricos em diferentes gases, como o oxignio e o prprio ar (SUNNEN, 2001; PEREIRA, RIBEIRO & CARVALHO, 2003). O oznio medicinal atinge no mximo 5% do total da mistura, sendo obtido atravs do oxignio puro para evitar a presena de subprodutos txicos de outros gases (TRAVAGLI, ZANARDI & BOCCI, 2006). A molcula apresenta ao fungicida, viricida e bactericida alm de ser oxidante e desinfetante, podendo ser usada no tratamento de diversas enfermidades (SUNNEN, 2001). Segundo Scrollavezza et al. (1997), o oznio pode destruir todos os patgenos do organismo, tais como, vrus, bactrias e fungos (leveduras), agindo tambm contra suas toxinas. Seu mecanismo de ao antimicrobiano ocorre por lise da membrana dos agentes aps oxidao (LAKE et al., 2004).

Outras qualidades so atribudas ao oznio, tais como: estmulo produo de citoquinas, sntese de anticorpos, ativao de linfcitos T, melhora da oxigenao e do metabolismo celular por meio de vasodilatao e do aumento da resposta enzimtica antioxidativa (LAKE et al., 2004). A molcula apresenta maior capacidade de difuso e penetrao tecidual que o oxignio. Quando entra em contato com um tecido biologicamente ativo, reage com numerosas biomolculas que juntas formam sistemas de tamponamento anti-oxidante (TRAVAGLI, ZANARDI & BOCCI, 2006). As vias de aplicao podem deflagrar efeitos locais, regionais e/ou sistmicos. A via tpica pode ser utilizada com a exposio simples da rea alvo, aplicada ou umedecida com gua, soro fisiolgico ou leo pr-ionizado, com ou no acoplamento a sistemas de suco (VALACCHI, FORTINO & BOCCI, 2005). 3 MATERIAIS E MTODOS 3.1 OBTENO DOS ANIMAIS 3.2 CERATOPLASTIA 3.3 TRATAMENTO PS OPERATRIO 3.3.1 ANTIBITICO 3.3.2 PREPARO DA GUA OZONIZADA Cerca de 250 ml de gua destilada deionizada e previamente refrigerada sero acondicionados em garrafas de lavagem de gs e ozonizadas partir de gerador de oznio com capacidade para produo de 0,014 g/O 3/hora ou 0,00023 g/O3/minuto, alimentado por ampola de oxignio com 99,5% de pureza, com presso de 200 Kgf/cm 2 e fluxo de 1 litro/minuto durante 5 minutos. Aps ozonizao a gua ser mantida em caixas isotrmicas e levada imediatamente at os animais, sendo aplicada na superfcie das crneas atravs de seringas hipodrmicas descartveis com capacidade para 20 mililitros, sendo utilizado contedo de uma seringa para cada olho de cada animal. 3.3.3 PREPARO DO LEO OZONIZADO

Cerca de 250 ml de leo de girassol sero acondicionados em proveta contendo difusor de gases conectada a gerador de oznio com capacidade para produo de 0,014 g/O3/hora ou 0,00023 g/O3/minuto, alimentado por ampola de oxignio com 99,5% de pureza, com presso de 200 Kgf/cm 2 e fluxo de 1 litro/minuto e recebero aporte da mistura oxignio oznio durante 5 minutos.