Qumica Medicinal

um ramo da Farmacologia.

, etimologicamente,
Farmacologia

Sentido prospectivo: A Qumica Medicinal o planeamento e produo de compostos que podem ser usados na Medicina para a preveno, tratamento e cura de doenas humanas e animais. Sentido retrospectivo: Inclui o estudo de alguns frmacos j existentes, das suas propriedades biolgicas, e das correlaes estrutura-actividade.

Quimica Medicinal

Farmacologia Molecular e Celular Farmacologia Clinica

Farmacologia Sistemica

a descoberta, desenvolvimento, identificao e interpretao do modo de actuao dos compostos biologicamente activos, a nvel molecular. Tudo o que bioactivo (compostos ambientais e metabolitos) so objectos de estudo desta rea. tambm a sntese de produtos metablicos destes frmacos e compostos relacionados.

Ambito de aco
3. Desenvolvimento 1. Descoberta Identificao e produo de novos compostos activos (sintese quimica, recursos naturais, componentes endogenos do proprio corpo, ou processos biotecnologicos) - Compostosguia. 2. Optimizao Optimizao da via sintetica para produo em larga escala e modificao Envolve a modificao sintetica do composto-guia com o objectivo de das propriedades farmacocineticas e aumentar a potencia e selectividade (um farmaceuticas da substancia activa para a anti-histaminico que nao provoque sono tornar adequada a utilizao quimica (melhor absoro, maior e.g.,) e diminuir a toxicidade. Optimizar as hidrosolubilidade, ou possibilidade de interacoes estruturais e a capacidade de actuar no alvo correcto. libertao controlada). Possibilidade de eliminao de alguns efeitos secundarios.

Farmacforo seco do medicamento que confere actividade biolgica molcula. Farmacodinmica optimizao de interaces entre elementos estruturaisFarmacocintica distribuio do medicamento ao longo da via de transporte e actuao. 1. Farmacologia Celular e Molecular identificao da aco farmacolgica de um frmaco a nvel celular e molecular. O primeiro objectivo reside na identificao dos nveis celulares de aco: Membrana celular muito rica em potenciais alvos (receptores); Citosol sistemas enzimticos e membranas dos organelos com transportadores inicos;

Ncleo onde actuam as hormonas esteroides, os frmacos anticancergenos e a terapia gentica. O segundo objectivo elucidar a sequncia precisa de eventos bioqumicos e biofsicos que resultam numa interaco frmaco-alvo. Estes estudos so feitos in vitro, sem experimentao animal.

2. Farmacologia Sistmica analisa os efeitos de substncias biologicamente activas em sistemas integrados (cardiovascular, sseo, SNC, gastrointestinal, pulmonar, etc.,). As experiencias so feitas em animais e em rgos. Os testes clnicos devem ser feitos em duas espcies diferentes, para termos confiana nos resultados. Por exemplo, o Tamoxifen um frmaco que impede a ligao de estrognio, sendo um antagonista. usado no tratamento do cancro da mama. um hepatocarcinogenico em ratos, mas no em ratinhos de laboratrio, por uma questo de diferenas no metabolismo. No rato, o frmaco liga-se ao DNA, induzindo mutaes. 3. Farmacologia Clinica anlise dos efeitos de um candidato a novo frmaco nos seres humanos. So feitos testes sob a responsabilidade de um grupo mdico e de um comit de tica (para aprovao ou no). Fase I Voluntrios saudveis. Serve para estimar o nvel de dosagem e o grau de tolerncia ao frmaco (dose ranging) e iniciar estudos metablicos em seres humanos. Fase II, III e IV Apos determinao do dose ranging, inicia-se o estudo dos efeitos benficos nos pacientes, dos efeitos secundrios (variaes associadas ao sexo, idade, etc.), e a comparao do frmaco com frmacos de referncia e indicaes teraputicas.

Inicialmente, a Qumica Medicinal lidava com modificaes ad hoc de pequenas molculas. Actualmente estuda interaces entre substncias activas e seus alvos moleculares. O acesso a molculas mais sofisticadas facilitado devido ao progresso da sntese orgnica (estereoselectividade, cromatografia, etc.) e identificao estrutural (NMR, Raio-X, etc.). A Biologia Molecular e a Engenharia Gentica contriburam para o conhecimento dos alvos moleculares (estrutura tridimensional e localizao do centro activo). O desenho de novas substncias est relacionado com os resultados obtidos pelo estudo dos modelos de ligandoreceptor. Objectivos: Descoberta de novos candidatos a frmacos construo de ligaes carbono-carbono para criar molculas mais complexas e produo de enantiomeros correctos (e.g., no caso da talidomida, um dos enantiomeros eliminava os enjoos da gravidez e o outro causava malformaes nos fetos).

Os testes clnicos tm duas verses: o medicamento a ser testado e um placebo, de forma a analisar os verdadeiros efeitos fisiolgicos do frmaco. O efeito placebo esta associado a um efeito psicossomtico da toma do frmaco. A descoberta de plantas uteis era determinada pela oportunidade e pela observao, uma combinao de eventos utilizada actualmente em Qumica Medicinal. Os antigos rituais serviam para intensificar o efeito placebo. Eram extractos de plantas, como o opio (analgsico), a folha de coca (estimulante), casca de chinchona (antipirtico e antimalarico) e ipecuanha (antipirtico e usado no tratamento da desinteria). A Qumica surgiu enquanto cincia no seculo XIX, tanto a nvel de procedimentos experimentais como de teoria cientfica. Surgiram os processos de isolamento e purificao (cristalizao, destilao, etc), processos sintticos, identificao estrutural (desenvolvimento de mtodos de analise) e anlogos sintticos. Estes avanos permitiram o estudo de ervas tradicionais e poes utilizadas na Medicina, de um ponto de vista cientfico. Foi reconhecido que os antigos remdios eram misturas de diferentes compostos, e ento os qumicos comearam a separar os diversos componentes no sentido de descobrir se apenas um dos componentes era responsvel pela actividade medicinal principio activo.

Principio activo (API active pharmaceutical ingrediente)

o composto responsvel pelo efeito biolgico de uma planta ou extracto. Por exemplo, a morfina o princpio activo do opio, a cocana o princpio activo da folha de coca e o quinino o princpio activo da casca de chinchona. Muitos destes compostos revelaram-se aminas, e consequentemente, de caracter bsico. Como resultado, foram denominados de alcaloides. Todos os alcaloides possuem azoto. Eram colocados em cido, protonados, tornavam-se solveis em gua, logo eram facilmente separados. Contudo, como a composio estrutural era ainda difcil de entender, a estrutura molecular destes compostos permaneceu desconhecida. Os compostos foram testados e depressa perceberam que o principio activo tinha mais actividade que a poo em si. Surgiu assim o reconhecimento do potencial comercial destes produtos.

Anlise estrutural
No seculo XIX era possvel determinar o peso molecular e a frmula, revelando o tipo de tomos e o rcio. No entanto, no era fcil entender como estes tomos se ligavam; no existia cristalografia de raio-X nem espectroscopia. Com o tempo, entendeu-se que certos grupos funcionais actuavam em reaces caractersticas (por exemplo, a presena de um lcool ou fenol podia ser testado por esterificao, enquanto a presena de um grupo amina era verificada pela dissoluo do composto em acido hidrocloridrico. No entanto, a nica maneira de identificar a estrutura completa era atravs de reaces que degradassem a molcula em molculas mais pequenas e passiveis de identificao.

Frmacos semissintticos
Com o isolamento de princpios activos, foram sintetizados vrios anlogos, alguns dos quais tinham actividade biolgica, e podiam ser usados em Medicina. So sintetizados a partir de reaces qumicas naturais. Um destes exemplos a diacetilmorfina (herona), que foi sintetizada a partir da morfina.

Frmacos sintticos
Os primeiros frmacos sintticos foram os anestsicos. Eram compostos qumicos simples, como o clorofrmio, que hoje se sabe ser carcinognico. O clorofrmio uma molcula lipofilica, acumulando-se nos tecidos gordos. As grandes nuvens el ectronicas desta molcula podem ser deformadas, criando interaces Van der Waals. Os anestsicos so insolveis em gua e tem um caracter hidrofbico. Foi a primeira vez que se compreendeu que as propriedades fsicas de uma molcula podem influenciar um determinado efeito farmacolgico. A seringa hipodrmica surgiu em meados do seculo XIX, e era usada para injectar frmacos directamente na corrente sangunea. Teve importantes consequncias em certos frmacos, como por exemplo a morfina, que ate a altura era negligenciada por ter fraca actividade oral. Em contraste, provou ser um anestsico eficaz quando injectado. Alguns frmacos no so tao bem absorvidos por outras vias. Surgiram os primeiros problemas com os efeitos secundrios dos frmacos. Ate ao seculo XIX no se faziam testes clnicos porque no havia conscincia dos possveis efeitos negativos. Se a curto prazo os efeitos eram os esperados, o composto era rapidamente comercializado. A herona e a cocana so exemplos de frmacos rapidamente introduzidos na Medicina e cujos efeitos a longo prazo s foram reconhecidos atravs de alguma experiencia. S mais tarde se conheceram os efeitos do vcio que provocava. ADME(T) Absorption, Distribution, Metabolism, Excretion, (Toxicity)

Quimioterapia
No incio do seculo XX, compreendeu-se que muitas doenas eram causadas por microrganismos; no entanto, at altura no existiam frmacos para combate-los. Foi quando Paul Ehrlich props o princpio da quimioterapia, que postula que poderiam ser desenvolvidos venenos selectivamente txicos a microrganismos e no a seres humanos, provando-se assim frmacos eficazes. Foi a primeira aplicao do princpio da Teoria da Bala Magica, em que frmacos so desenhados para actuarem em clulas especficas. Ehrlich investigou estruturas baseadas em arsnico, que fossem menos toxicas que o prprio arsnico, e desenvolveu o Salvarsan, que se mostrou eficaz no tratamento da sfilis e lhe valeu o Premio Nobel. Demonstrou tambm que a dose administrada que determina se um frmaco actua como tal, ou como veneno. Ehrlich definiu o que ento conhecido como janela teraputica: o range de concentrao que pode ser utilizada. Os frmacos sintticos que surgiram no seculo XX designam-se por barbiturados (sedativos) e anestsicos locais (anlogos da cocana).

A procana foi o mais importante, e transformou-se no anestsico local preferido dos dentistas e foi o ponto de partida para o uso de compostos mais simples derivados de compostos naturais complexos, mantendo a estrutura responsvel pela funo do composto (originando farmacforos).

Compostos endgenos
Foram isolados compostos qumicos naturalmente produzidos pelo corpo humano. Foram

purificados para testes a actividade biolgica. Tal revelou a importncia de hormonas, neurotransmissores e vitaminas. Ate ao final do seculo XIX, os frmacos podiam ser adquiridos sem prescrio. A herona podia ser adquirida em qualquer mercearia. Contudo, os srios efeitos aditivos resultantes da toma deste tipo de compostos levaram a implementao de regulamentos, restringindo a disponibilidade e uso de substancia aditivas. Surgiu assim em 1906 na America o Pure Food and Drugs Act, que levou a implementao de rtulos na comida e farmacos. Ainda assim, ainda no existiam regulamentos para a forma como os frmacos deviam ser testados para segurana.

Sulfanilamidas
Apesar da introduo do Salvarsan, no existiam frmacos para tratamento das infeces bacterianas. O primeiro grupo de frmacos efectivamente uteis contra os microrganismos foram as sulfanamidas. So compostos sintticos, desenvolvidos apos a descoberta de que um composto sinttico chamado Pentosil tinha actividade antimicrobiana. Rapidamente se descobriu que o Pentosil no tinha actividade antibacteriana, mas que era a converso em sulfanilamida no interior do corpo que era o composto activo. A partir dai, surgiram vrios derivados da sulfanamida, como a sulfapiridina. Foi o primeiro frmaco a ser eficaz contra a pneumonia.

As sulfanamidas bloqueiam a sntese de cido flico nas clulas bacterianas, inibindo as vias metablicas que utilizam este composto. As bactrias deixam de crescer e de se reproduzir, permitindo a actuao do sistema imunitrio. So agentes bacteriostticos. No so txicas para o ser humano porque no sintetizamos este composto; adquirimo-lo atravs da alimentao.

Penicilinas A penicilina foi a verdadeira revoluo na terapia antimicrobiana. Foi purificada e foi desenvolvido um mtodo de produo deste composto em larga escala. Mais tarde descobriram que a actividade da penicilina variava de acordo com as condies utilizadas para produzi-la. No so toxicas para os seres humanos porque as clulas no possuem parede celular.

Em 1930, varias hormonas esteroides foram isoladas e purificadas, como o estradiol, a testosterona, a progesterona, e algumas vitaminas como a riboflavina, a biotina, o cido flico, etc. Surgiu a pilula contraceptiva, atravs do conhecimento do funcionamento dos ciclos hormonais. Foram desenvolvidas novas reaces qumicas e o conhecimento da estereoqumica e da reactividade dos elementos aumentou. Surgiu a cristalografia de raio-X para identificar estruturas qumicas (o ergosterol e a penicilina, por exemplo). Ate ento, a nica regulamentao imposta aos frmacos era a sua rotulao. Em 1937 ocorreu a Elixir of Sulfanamide Tragedy. Um comerciante americano usou etilenoglicol (solvente toxico - anticongelante) para dissolver a sulfanamida, sendo o produto colocado no mercado sem testes prvios. Varias crianas morreram, levando a criao da Food, Drug and Cosmetic Act, que impos a realizao de testes de segurana aos frmacos, antes de serem comercializados. 7

Contudo, nada requeria um teste de eficcia ao frmaco, logo, no se realizavam testes clnicos.

Conceitos gerais de aco de frmacos em enzimas e receptores

Os frmacos tm efeitos especficos de acordo com o local do corpo onde reagem. Todas as clulas do corpo humano esto rodeadas pela membrana celular, que rodeia o citoplasma. A membrana tem no exterior fosfatidilcolina e no interior fosfatidilinositol, fosfatidiletanolamina e fosfatidilserina. As duas membranas de fosfolpidos tm caudas hidrofbicas no interior e cabeas polares no exterior. E uma estrutura estvel, dado que as cabeas hidrofilicas interagem com o meio aquoso dentro e fora da clula e as caudas hidrofbicas maximizam as interaces Van der Waals umas com as outras, mantendo-se fora de contacto com o meio aquoso. Existem varias protenas na bicamada fosfolipdica, umas a superfcie da membrana e outras atravessando a membrana. As pores proteicas no interior da membrana tem um grande numero de aminocidos hidrofbicos, enquanto que as protenas da superfcie membranar possuem maioritariamente aminocidos hidrofilicos, e podem ter cadeias de carbohidratos (glicoprotenas). Os frmacos tm 3 principais alvos: os lpidos, as protenas (glicoprotenas) e os cidos nucleicos. Os frmacos que interagem com lpidos so geralmente pequenas molculas que degradam a estrutura lipdica da membrana celular. Os anestticos interagem com os lpidos, de forma a manipularem as propriedades da membrana. A anfotericina usada para tratar o pe de atleta. Interage com a membrana celular dos fungos criando buracos, levando a sada de organelos da clula e consequente morte celular. Metade da molcula e hidrofilica e a outra metade e hidrofbica.

Sistemas de classificao
Origem do farmaco: Podem ter origem Modo de accao: mineral (substancias inorganicas), Podem tratar a causa hormonas animais ou ou a doenca, podem compensar a podem ter origem vegetal. Podem ser de deficiencia de uma origem sintetica, dada substancia, ou produtos de aliviar sintomas. fermentacao e de engenharia genetica. Natureza da doenca: Classificacao fisiologica, de acordo com o local do corpo onde actuam. Estrutura quimica: Importante na investigacao farmaceutica.

Podem ser classificados de acordo com uma classificao pratica: Agentes que actuam no sistema nervoso central frmacos psicotrpicos e neurolgicos; Agentes farmacodinmicos afectam os processos dinmicos do corpo como por exemplo o domnio cardiovascular; Agentes quimioterapeuticos incluam inicialmente meios de tratamento de doenas infecciosas. Agentes que actuam em doenas metablicas ou em funes endcrinas frmacos anti-inflamatorios, antidiabticos e hormonas esteroides.

A aco dos frmacos e as enzimas

As enzimas so catalisadores. Sem elas, as reaces do corpo seriam lentas e ineficazes. Um catalisador reduz a energia de activao ajudando a estabilizar o estado de transio. As enzimas so constitudas por subunidades de aminocidos ligadas atravs de ligaes peptdicas.

O centro activo de uma enzima uma estrutura tridimensional. Tem de estar localizado na superfcie da enzima ou perto, para que o substrato ligue. Os resduos de aminocidos perto uns dos outros no centro activo, podem estar extremamente afastados na estrutura primria. Estes aminocidos desempenham um papel fundamental na funo enzimtica. Podem servir para a ligao do substrato ao centro activo ou pode ter actividade cataltica, estando envolvido na reaco. As forcas que ligam os substratos ao centro activo so as mesmas que actuam nas estruturas terciarias das enzimas: forcas inicas, pontes de hidrognio e ligaes Van der Waals. Apesar das forcas inicas terem um papel minoritrio nas estruturas terciarias, tem um papel crucial na ligao do substrato ao centro activo. Olhando para a estrutura do acido pirvico, podemos prever 3 tipos de interaco: uma interaco inica entre o grupo carboxilato, uma ponte de hidrognio envolvendo o oxignio, e uma ligao Van der Waals envolvendo o grupo metil. Se estes postulados estiverem correctos, quer dizer que existem aminocidos no centro activo para participarem nestas ligaes (por exemplo um resduo de lisina, serina, fenilalanina). Inibicao competitiva (reversvel) Se a ligao do substrato ao centro activo for demasiado forte, o substrato pode no se libertar novamente, impedindo a aceitao de mais substrato. As interaces entre substrato e enzima tm de ser balanceadas, mantendo o substrato ligado ao centro activo, mas permitindo a libertao do produto. Este fenmeno pode ser usado na Qumica Medicinal para inibir determinada enzima. Pode ser desenhada uma molcula semelhante ao substrato natural, que ligue ao centro activo, mas cuja ligao estabelecida seja extremamente forte. Pode no causar nenhuma reaco, mas impedir o acesso do substrato natural e parar a reaco enzimtica. Os inibidores competitivos podem ser atenuados com o aumento da concentrao do substrato natural (usado no tratamento de envenenamento com anticongelante). O etilenoglicol age como substrato, mas se aumentarmos a concentrao do substrato natural, h competio e no h reaco. O cido oxlico toxico no vai ser formado e o etilenoglicol vai ser excretado.

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Inibicao no competitiva (irreversvel) Os inibidores irreversveis mais eficazes so os que reagem com os aminocidos do centro activo e se ligam covalentemente. Os aminocidos como a serina e a cistena possuem resduos nucleofilicos que costumam existir frequentemente no centro activo, estando envolvidos nas reaces enzimticas. Ao desenhar um frmaco electrofilico que caiba no centro activo, e possvel alquilar estes grupos e liga-los permanentemente ao centro activo. Os gases de nervos so inibidores irreversveis das enzimas dos mamferos. Inibidores reversveis no-competitivos (alostrico) Existem inibidores enzimticos que no possuem similaridade estrutural com o substrato natural. Aumentando a concentrao do ligando natural, no tem efeito na inibio. Estes inibidores ligam-se a um local diferente do centro activo. Ao ligarem nesse local, induzem uma alterao conformacional na enzima, que pode esconder o centro activo impedindo a sua reaco com o substrato. O inibidor liga-se de forma no covalente, havendo possibilidade de se libertar deste local. Estes locais de ligao so importantes no controlo enzimtico. O produto final liga-se neste local porque depois de sofrer tantas transformaes deixa de ser reconhecido pelo centro activo, que por si s no seria muito eficiente no controlo enzimtico. As enzimas catalisam reaces porque providenciam ligaes, catalise acido/base e grupos nucleofilicos. No sentido de maximizar a forca destas ligaes, a enzima teria de alterar a sua forma para que os resduos de aminocidos envolvidos se movessem de forma a ficarem mais prximos do

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substrato. O substrato tambm sofre alteraes conformacionais. A catlise acido-base providenciada pela histidina. A histidina uma base fraca. Pode actuar como banco de protes: pode doar ou aceitar protes. Isto importante porque os centros activos so geralmente hidrofbicos, havendo uma baixa concentrao de gua e protes. A serina e a cistena tm resduos nucleofilicos, que reagem com o substrato formando intermedirios, que usam menos energia nas reaces. Um grupo alcolico como a serina no um bom nuclefilo. Normalmente h sempre um resduo de histidina prximo para catalisar a reaco. A presena de um resduo nucleofilico significa que a gua no necessria nos estdios iniciais do mecanismo. A gua um nuclefilo fraco, podendo ter dificuldades em ligar-se a um centro activo hidrofbico.

Neurotransmissores
Regra geral, cada nervo liberta apenas um tipo de neurotransmissor, e o receptor que se encontra na clula-alvo especfico para o neurotransmissor. Contudo, tal no significa que a clula-alvo tenha apenas um tipo de receptor. Tambm podem ter receptores a espera de receber mensagens de mensageiros qumicos, como hormonas. As hormonas e os neurotransmissores podem ser distinguidos pela via pela qual so transportados e pela qual so libertados, mas a forma de aco ao atingir a clula-alvo igual. Ambos interagem com um receptor e a mensagem recebida. Quando so libertados demasiados mensageiros, a clula-alvo pode ficar saturada. Quando so libertados poucos, a clula pode tornar-se preguiosa. aqui que os frmacos podem actuar como mensageiros substitutos, ou bloqueando o acesso dos mensageiros naturais aos receptores. Os frmacos com funo semelhante a do ligando so chamados de agonistas e os frmacos que desligam a funo do mensageiro ou a fazem atingir nveis residuais so os antagonistas.

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Receptores
Um receptor uma molcula proteica integrada na membrana plasmtica, com parte da estrutura na face exterior da membrana. Possui um binding-site, com a forma correcta para aceitar o mensageiro. anlogo ao centro activo de uma enzima. Quando a molcula se liga ao binding-site, o receptor recebe a mensagem. Este mensageiro no despoleta reaco qumica; liga-se, passa a mensagem e liberta-se. A mensagem recebida atravs da alterao conformacional do receptor. Esta alterao afecta outros componentes membranares e leva ao efeito biolgico. Os principais componentes envolvidos so os canais inicos e as enzimas ligadas a membrana.

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Alguns neurotransmissores operam controlando os canais inicos. A barreira hidrofbica membranar dificulta a passagem de molculas ou ies polares. No entanto, h protenas membranares que permitem a passagem de molculas polares, como aminocidos. Os ies so transportados por estruturas proteicas denominadas canais inicos. Esta estrutura atravessa a membrana celular e consiste num complexo proteico feito de vrias subunidades. O complexo oco por dentro e esta alinhado com aminocidos polares para fornecer caracter hidrofilico ao poro. Os ies podem atravessar a membrana bifosfolipidica movendo-se atravs destes canais. Existe um controlo para estes transportes. Funciona como lock-gate, e esta associado a mensagem recebida de um neurotransmissor, ou hormona. Um mecanismo possvel que o prprio receptor funcione como lock-gate, que sela o canal inico. Quando um mensageiro se liga ao receptor, a alterao de forma resultante pode activar o lock-gate, permitindo a passagem do iao. Quando o binding-site recebe o mensageiro, moldado na forma correcta para o encaixe perfeito. O funcionamento dos canais inicos permite explicar o porque do diminuto numero de molculas de neurotransmissor libertadas por um nervo ser capaz de causar um grande efeito biolgico. Abrindo alguns canais inicos, milhares de ies so mobilizados por cada 14

molcula neurotransmissora envolvida. O mecanismo das enzimas ligadas a membrana a segunda possvel explicao sobre a passagem da mensagem dos neurotransmissores a clula. O receptor proteico encontra-se na faca externa da membrana, mas esta associado com uma protena ou enzima situada na superfcie interna da membrana. Quando o receptor liga a um neurotransmissor, muda a sua forma e forca a enzima a mudar de forma tambm. Uma alterao tamanha pode revelar o centro activo da enzima, e iniciar uma nova reaco no interior da clula. Alternativamente, a enzima ligada a membrana pode estar a funcionar normalmente, e a alterao de forma esconde o centro activo e para a reaco. Os neurotransmissores ligam e desligam as enzimas ligadas a membrana. Independentemente do mecanismo envolvido, o resultado o mesmo: uma alterao na conformao do receptor leva a activao ou inactivao da enzima. Como as enzimas catalisam a actividade de um grande nmero de molculas, h uma amplificao da mensagem original, sendo apenas necessrio um pequeno nmero de neurotransmissores. Os mecanismos pelos quais os neurotransmissores passam a informao envolvem alterao conformacional e no reaco qumica. Estas mudanas de conformao vo sim levar possivelmente a reaces qumicas envolvendo enzimas.

Alterao conformacional do receptor

O mensageiro e o receptor sofram alteraes conformacionais no sentido de maximizar forcas de ligao (hidrognio, inicas, Van der Waals). Na ligao enzima-substrato, h um balanco na ligao receptor/mensageiro. As forcas de ligao devem ser fortes o suficiente para provocar alterao conformacional no receptor, mas no tao fortes que o mensageiro no se consiga dissociar.

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O neurotransmissor tem um anel aromtico que pode interagir com o local de ligao hidrofbico das ligaes Van der Waals, um grupo alcolico que pode interagir por ligao de hidrognio, e um nitrognio carregado positivamente que pode estabelecer ligaes inicas. O receptor hipottico esta posicionado na membrana celular tal que esta a selar um canal inico e contem 3 reas de ligao. Se o bindingsite tiver grupos de ligao complementares com os grupos acima descritos, o frmaco pode ligarse fortemente ao binding-site. A molcula mensageira liga-se ao binding-site correctamente em 2 dos 3 possveis locais de ligao. O terceiro local de ligao (inico) no se encontra numa posio apropriada. No se encontra suficientemente prximo para criar uma ligao

forte. O receptor e assim forcado a sofrer uma alterao conformacional para consegui a melhor interaco possvel. O grupo carboxilado fica mais prximo do nitrognio com carga positiva na molcula mensageira e, como resultado, o lock-gate aberto e assim permanece ate a molcula mensageira se libertar do binding-site, permitindo ao receptor regressar a conformao original.

Desenhar agonistas
Podemos desenhar frmacos, no sentido de mimetizar os neurotransmissores. Assumindo que sabemos que grupos de ligao se encontram presentes no receptor e onde se encontram, podemos desenhar frmacos que interajam com o receptor. O frmaco deve ter os correctos grupos de ligao, correctamente posicionados, e deve ter o tamanho preciso para o bindingsite.

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Todas estas estruturas parecem diferentes, mas todas tm os grupos de ligao necessrios para interagir com o receptor. Todas so potenciais agonistas.

Estas estruturas no tem alguns grupos de ligao, sendo expectvel possurem fraca actividade, de acordo com as fracas ligaes que iro estabelecer. Nem todos os 3 tipos de ligaes so necessrias? A segunda estrutura parece poder ser eficaz apesar de no possuir um grupo de ligao de hidrognio. Deve existir um balanco entre as forcas de ligao do receptor e neurotransmissor. As forcas devem ser suficientemente fortes para ligar o neurotransmissor eficazmente tal que o receptor mude a conformao. Contudo no devem ser demasiado fortes seno o neurotransmissor no se desligava e o receptor no conseguiria regressar a conformao original. Um neurotransmissor necessita de todos os tipos de interaco para se ligar eficazmente. A falta de apenas uma pode resultar numa forte diminuio de actividade. Uma molcula como esta tem obviamente os locais de ligao na posio errada. A imagem espelhada da molcula tambm no serviria; esta molcula uma imagem espelhada no sobreponvel, e portanto no da para ligar ao receptor.

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Compostos que possuem imagens espelhadas no sobreponveis so designados quirais ou assimtricos. S existem duas diferenas detectaveis entre enantiomeros de compostos quirais. Giram em direces opostas face a luz polarizada plana e interagem de maneira diferente com outros compostos quirais, como enzimas. Os agentes farmacuticos so usualmente sintetizados a partir de compostos aquirais, simtricos. Estes reagentes so incapazes de distinguir entre imagens espelhadas de um composto quiral. Como resultado, os frmacos quirais so sintetizadas como uma mistura de ambos os enantiomeros. O enantiomero errado vai ser incuo ou pode interagir com outros receptores, produzindo efeitos secundrios. A importncia da posio dos grupos de ligao levou ao desenho de frmacos baseados no farmacoforo importante da molcula mensageira. Esta estrutura tem um grupo meta-metil no anel aromtico e uma longa cadeia de alquil com tomos de azoto. Considerando apenas o tamanho, podemos concluir que a molcula incapaz de se ligar ao receptor. O grupo meta-metil actuaria como tampo e no permitiria a entrada no binding-site. A longa cadeia de alquil demasiado longa para o espao disponvel.

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Desenhar antagonistas
Existem varias estratgias, mas em teoria, poderamos desenhar um frmaco que tivesse a forma certa para ligar ao receptor, mas que no conseguisse produzir alterao conformacional do receptor.

Este composto liga-se perfeitamente ao binding-site, e como resultado no causa nenhuma alterao conformacional. No h efeito biolgico e o binding-site esta bloqueado para o neurotransmissor natural. Nesta situao, o antagonista compete com o agonista pelo receptor, mas a ligao do antagonista mais forte. A forma terica de muitos receptores foi descoberta atravs da sntese de um grande nmero de compostos. A cristalografia de raio-X abriu novos horizontes para uma representao mais precisa das protenas e dos respectivos binding-sites.

Antagonistas alostricos
O antagonista pode ligar a um local do receptor que no o binding-site. Este fenmeno pode afectar a forma do receptor tal que o neurotransmissor no se consiga ligar ao binding-site (este e destorcido e no reconhece o neurotransmissor natural). uma forma de antagonismo nocompetitivo.

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Efeito sombrinha O receptor possui resduos de aminocidos, todos capazes de interagirem com molculas. H com certeza mais reas alm do binding-site capazes de ligaes inicas, Van der Waals e de hidrognio. Estas reas podem no ser usadas pelo neurotransmissor natural, mas sim por outras molculas. Se algumas molculas se ligarem, bloqueiam o acesso do neurotransmissor ao binding-site, obtruindo o local, e funcionando como antagonistas. uma forma de antagonismo competitivo porque o binding-site directamente afectado. Muitos antagonistas so capazes de se ligar ao binding-site e as reas vizinhas. A ligao vai ser muito mais forte que a do agonista. Os antagonistas so usados no isolamento e identificao de receptores (uso de grupo electrofilico funciona como marcador molecular).

Agonistas parciais
Alguns frmacos no podem ser definidos como agonistas puros ou antagonistas puros. Estes compostos ligam-se ao receptor e bloqueiam o acesso do neurotransmissor, sendo neste sentido antagonistas. Contudo, tambm activam fracamente o receptor, sendo recebida uma parte do sinal. Um agonista parcial pode ser assim uma molcula que encaixa quase na perfeio no binding-site, tanto que a ligao resulta apenas numa pequena distoro do receptor, permitindo uma abertura parcial do canal inico. Uma explicao alternativa e que a molcula em questo pode ser capaz de se ligar ao receptor de duas maneiras diferentes, usando diferentes grupos de ligao. Um mtodo de ligao activaria o receptor enquanto o outro mtodo o bloquearia. O balanco de agonismo vs. antagonismo dependeria ento das propores relativas de molculas ligadas por cada mtodo.

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Alguns frmacos ligam-se de maneira relativamente forte ao receptor, activam-no, e subsequentemente bloqueiam o receptor. Ento, actuam primeiro como agonistas e depois como antagonistas. No se entende bem este mecanismo. Uma teoria defende que os receptores apenas podem permanecer activos por um curto perodo de tempo. Assim que o tempo acaba, ocorre uma alterao da estrutura tridimensional que desliga o receptor, apesar do bindingsite estar ocupado. Esta estrutura terciaria alterada mantida enquanto o binding-site estiver ocupado. Quando o frmaco se desliga, o receptor retorna a sua conformao original. 21

pensado que os melhores agonistas se ligam rapidamente ao receptor, passam a mensagem e dissociam rapidamente. Quanto aos antagonistas, so de ligao e dissociao lenta.

Tolerncia e dependncia
Foi descoberto que se privarmos a clula-alvo de um certo neurotransmissor, esta produz mais receptores. A clula adquire assim maior sensibilidade. Este processo pode explicar os fenmenos de tolerncia e dependncia. No caso da tolerncia, nveis altos de um frmaco so necessrios para obter a mesma resposta biolgica, o que requer aumento da dose. Se a toma do frmaco parasse, todos os receptores estariam disponveis. Haveria assim um excesso de receptores, equivalente a receber uma overdose de frmaco. Os efeitos biolgicos resultantes podem explicar os efeitos sentidos quando se para de tomar o frmaco. Estes efeitos continuariam ate ao nmero de receptores voltar ao nvel normal.

Receptores Os receptores so protenas cruciais para o processo de comunicao corporal. Recebem mensagens de mensageiros qumicos como hormonas ou neurotransmissores. A maioria dos receptores encontra-se inserida na membrana celular, atravessando-a, existindo assim regies intracelulares e extracelulares. Na regio extracelular, encontra-se o bindingsite, onde se inserem os mensageiros qumicos atravs de interaces intermoleculares, de forma anloga a ligao de substratos a protenas enzimticas. No entanto, ao 22

contrrio das enzimas, no ocorre reaco. O mensageiro liga-se, mas como se trata de um processo de equilbrio, pode dissociar-se inalterado, permitindo ao receptor regressar a sua forma original. A mensagem entregue sem haver entrada na clula. O estudo da forma como os receptores interagem com os frmacos a Farmacodinmica. Os mensageiros qumicos podem ser neurotransmissores ou hormonas. Os neurotransmissores so libertados das terminaes nervosas e so cruciais na comunicao entre o nervo e as clulas. So usualmente molculas pequenas, como a acetilcolina, noradrenalina, dopamina e serotonina.

As hormonas so libertadas por glndulas e clulas que entram na corrente sangunea. Como tem um grande percurso a percorrer, no so rapidamente desactivadas. O mecanismo pelo qual se liga uma hormona ou um neurotransmissor igual. O binding-site de um receptor corresponde ao centro activo de uma enzima, mas no catalisa nenhuma reaco qumica e o mensageiro libertado inalterado. Os vrios receptores mostram selectividade para um mensageiro qumico porque tem binding-sites de diferente forma, estrutura e composio a nvel de aminocidos. Contudo, receptores que interagem com o mesmo tipo de mensageiro qumico podem no ser iguais, o que permite desenhar mais facilmente frmacos mais selectivos. Efeitos secundrios so usualmente causados quando um medicamento se liga a mais que um tipo de receptor. Assim, temos de desenhar frmacos o mais selectivos possveis para cada receptor. Por exemplo, o receptor da serotonina o alvo de alguns antidepressivos. Contudo, h efeitos secundrios quando estes frmacos interagem com receptores para a histamina ou acetilcolina.

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O mecanismo pelo qual um receptor recebe um sinal designa-se transduo de sinal. Existem trs famlias de receptores membranares: Ligand-gated ion channels Nesta famlia, o receptor faz parte de um canal inico. Os canais inicos so complexos proteicos que atravessam a membrana celular e formam um tnel. Permite o fluxo de ies e h canais especficos para alguns tipos inicos. Sem estes canais, os ies no atravessariam a membrana, e as reaces enzimticas dependentes da concentrao de ies no aconteceriam. Os canais inicos encontram-se geralmente fechados e so apenas abertos quando recebem informao nesse sentido. aqui que actua o

receptor, controlando a abertura do canal. A alterao da forma do canal inico provoca um efeito domino, que ocorre em todo o canal. Como o receptor faz parte do canal inico, os efeitos do fluxo inico so sentidos rapidamente pela clula. Este tipo de transmisso utilizado quando necessitamos de uma passagem de informao rpida. G-protein-coupled receptors O receptor recebe o sinal o transmite-o a clula atravs de uma protena-G. Este receptor atravessa a membrana, com o binding-site na face externa da membrana. Existe um segundo binding-site na poro intracelular do receptor, que especifico para a protena-G. Este binding-site esta fechado quando o receptor no activado. A protena-G tem trs subunidades. Tem um local de ligao para um nucletido chamado guanosina difosfato (GDP). Neste estado, a protena-G inerte. A forma como a c l u l a recebe a mensagem tem vrios passos: 1. Um mensageiro liga-se ao receptor e induz alterao conformacional. Esta alterao conformacional abre o bindingsite da protena-G; 24

2. A protena-G liga-se ao seu binding-site e a interaco entre o receptor e a protena-G resulta numa mudana de conformao da prpria protena-G; 3. O binding-site para o GDP alterado, favorecendo a guanina trifosfato (GTP) ao invs de GDP. Como resultado, GDP desliga-se da protena-G e liga-se GTP; 4. A interaco entre a protena-G e o GTP causa nova alterao de conformao da protena-G. A estrutura destabilizada e a subunidade onde esta ligado o GTP dissocia-se. As duas subunidades restantes abandonam o receptor. O receptor pode agora ligar outra protena-G. O mensageiro pode despoletar a fragmentao de varias protenas-G. A subunidade que tem o GTP ligado pode agora actuar como molcula sinalizadora. A GTP, ao ligar-se agora a enzima adenilato ciclase, converte ATP a cAMP, num processo de amplificao da molcula. cAMP vai agora funcionar como mensageiro secundario, activando ou inactivando diversas enzimas.

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Tyrosine kinase-linked receptor Pode ser visto como dois em um: receptor e enzima. O receptor atravessa a membrana celular e tem uma regio intracelular e extracelular. A regio extracelular actua como receptor e te m um binding-site. A regio intracelular age como uma enzima tyrosine kinase e tem um centro activo. Esta enzima fosforila os resduos de tirosina nos s u b s t r a t o s d a p r otena. usado ATP como grupo fosfato, que desfosforilado em ADP. Os mensageiros que activam este receptor incluem hormonas como a insulina, factores de crescimento e citoquinas. Por exemplo, o receptor epidermal growth factor (EGF-R), e assim chamado porque o mensageiro qumico e a hormona epidermal growth factor. Esta protena pode actuar como um ligando bivalente. Ou seja, uma molcula pode ligar-se a dois receptores separados , resultando na dimerizao do receptor. Ambos os receptores mudam a conformao e aberto um centro activo da kinase em ambos. A enzima kinase de cada metade do dmero vai ento catalizar a fosforilao dos resduos de tirosina. Cada enzima fosforila os resduos de tirosina do parceiro. H a activacao de uma cascata enzimtica.

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H um grupo de receptores intracelulares que interagem com mensageiros qumicos como os esteroides, hormonas da tiroide e retinoides. Os mensageiros tm de ser suficientemente hidrofbicos para atravessar a membrana. O receptor do estrognio (ER) um exemplo, e existe no citoplasma complexado com outra protena. Quando a hormona entra na clula liga-se ao complexo receptor-proteina e leva a sua dissociao. O complexo receptorligando entra no ncleo e liga-se a DNA especifico, originando protenas.

Protenas transportadoras As protenas transportadoras encontram-se livres na membrana celular. Tem uma superfcie externa de aminocidos hidrofbicos, que podem interagir com os cidos gordos da membrana por interaces Van der Waals. No centro, possuem uma cavidade hidrofilica que pode acomodar molculas polares. Estas protenas transportam molculas polares, libertando-as no interior da clula. Estas protenas podem apresentar especificidade. Sem estas protenas, as molculas polares no conseguiriam atravessar a membrana e a sntese proteica e de cidos nucleicos cessaria, levando a morte celular. Estas protenas so tambm importantes no transporte de neurotransmissores como norepinefrina e dopamina de volta para o interior dos nervos. Alguns frmacos impedem as protenas de transportarem os seus ligandos naturais, por vezes competindo com estes pela protena transportadora. 27

O frmaco anexado ao ligando natural, como por exemplo uma base dos cidos nucleicos. O ligando reconhecido pela protena transportadora e o frmaco contrabandeado para dentro da clula. A mostarda de uracilo um anticancergeno que transportado para o interior das clulas desta maneira. O uracilo reconhecido pela protena, e a poro mostarda reage com o DNA e impede-o de funcionar. Alguns frmacos so tao semelhantes ao ligando natural que so aceites pelas protenas transportadoras.

Protenas estruturais
No so importantes alvos de frmacos. Uma excepo a tubulina, que pode polimerizar e formar microtbulos. Os microtbulos so importantes para a integridade e mobilidade celular. So tambm importantes no processo de diviso celular, ao formarem o fuso acromtico. H frmacos que causam a despolimerizao dos microtbulos, sendo usados nos tratamentos de artrite, reduzindo a mobilidade dos neutrfilos, impedindo-os de entrar nas articulaes. Estes frmacos impedem a diviso celular, podendo ser uteis no tratamento do cancro. Vincristine um anticancergeno que inibe a polimerizao e o taxol impede a despolarizao.

cidos nucleicos
So alvos de diversos frmacos, incluindo vrios antimicrobianos e anticancergenos. Intercalantes ligam-se ao DNA, inserindo-se a si prprios entre os pares de bases. Distorcem a dupla hlice e bloqueiam a replicao. Frmacos que ajam assim so bons antimicrobianos e antitumorais. Para se conseguir intercalar, o frmaco deve ser plano e ter as dimenses correctas. Tem de ser hidrofbico, para que haja interaces intermoleculares favorveis entre o frmaco e as bases na posio superior e inferior. Os anis aromticos ou heteroaromticos como o 28

antimicrobiano Proflavina, obedecem a estes requisitos. O sistema de trs anis tem o tamanho correcto e interage com os cidos nucleicos por interaces Van der Waals. A Proflavina possui tambm dois grupos amina ionizados que formam ligaes inicas com os grupos fosfato do esqueleto do DNA, fortalecendo a ligao. Alguns intercalantes encontram-se em espaos vazios da dupla hlice. Agentes alquilantes contem um grupo funcional electrofilico, como um iodeto de alquil. A reaco deste com um grupo nucleofilico do DNA resultam numa reaco de substituio nucleofilica onde o nuclefilo remove o iodeto e forma ligao covalente com o frmaco. Se existirem dois grupos electrofilicos no frmaco, a reaco ocorre duas vezes, resultando numa ligao cruzada dentro de uma cadeia ou entre cadeias. De qualquer forma, uma ligao cruzada ira afectar as funes normais do DNA. A mostarda de uracilo age desta maneira.

Cortadores de cadeia alguns frmacos reagem com o DNA para cortar a cadeia. Este agente anti-tumoral liga-se a um espao vazio do DNA e corta a cadeia produzindo espcies reactivas.

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Terapia antisense frmacos que ligam ao mRNA. H sntese de oligonucleotidos que contem pares de bases complementares a um segmento do mRNA alvo. Assim que ligado, impede a traduo do mRNA, e bloqueia a sntese proteica. Se a protena um receptor ou enzima, menor a quantidade sintetizada e a actividade associada a protena reduzida. Tem o mesmo efeito que o uso de um inibidor enzimtico ou um antagonista de um receptor. Para melhor actividade, tero de ser desenhados esqueletos de DNA mais estveis, para no estar sujeito a hidrolise fcil.

Inibio do rRna o rRNA alvo de agentes antibacterianos importantes como o cloranfenicol, eritromicina ou tetraciclinas. Impedem a biossntese de protenas.

Lpidos
Compostos que rompem a membrana plasmtica podem ter efeitos devastadores. Vrios antibacterianos e antifngicos constroem estruturas na membrana formando um tnel atravs dos quais conseguem passar ies e pequenas molculas polares de forma descontrolada. Outros compostos antifngicos so cclicos com um centro polar e fazem complexos com os ies e carrega-los atravs da membrana. A maioria destes compostos so ineficazes porque tambm afectam clulas animais e microbianas. A polimixina B mostra selectividade contra as clulas bacterianas.

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Os lpidos transportadores no so grandes alvos de frmacos. Contudo, a vancomicina e um antibacteriano importante que actua em lpidos transportadores. um glicopeptido que inibe a construo de paredes celulares bacterianas, sendo usado contra estirpes de bactrias resistentes a penicilina. O alvo especifico deste frmaco um transportador responsvel pela construo de blocos para a sntese da parede celular. Cada bloco consiste num dissacrido construdo no citoplasma. A vancomicina impede a libertao deste bloco do lpido transportador.

Carbohidratos
Os carbohidratos que existem na superfcie da membrana celular so as glicoprotenas. So essenciais no reconhecimento e comunicao celular. So tambm importantes em processos de adeso. Podem ser potenciais alvos de frmacos para o tratamento de doenas como o cancro, as doenas auto-imunes, artrite, etc. Os carbohidratos presentes na superfcie celular das clulas cancergenas so estruturalmente diferentes, actuando como antignios. Seria uma hiptese plausvel criar anticorpos monoclonais que iriam reconhecer e ligar-se aos 31

carbohidratos. As protenas na superfcie de vrus e bactrias reconhecem tambm certos carbohidratos das clulas hospedeiras. Se este processo de reconhecimento fosse inibido, poderiam surgir novas terapias antivirais e antibacterianas.

Interaces frmaco-receptor
A ocupao de um receptor por um frmaco pode ou no resultar na activao do receptor. Ligao e activao so dois passos distintos na gerao de respostas mediadas por receptor, no caso de agonistas. Se um frmaco se liga ao receptor sem causar activao e impede o agonista de se ligar considerado um antagonista. A tendncia de um frmaco se ligar aos receptores definida pela sua afinidade, e a tendncia para que, uma vez ligado, active o receptor, a eficcia. Frmacos potentes tm geralmente uma grade afinidade para os receptores e ocupam uma grande proporo de receptores mesmo em baixas concentraes. Os agonistas tambm apresentam grande eficcia, enquanto os antagonistas tem eficcia 0. A ligao de frmacos a receptores pode ser medida directamente atravs do uso de molculas radioactivas. O ligando radioactivo deve apenas ser capaz de se ligar com alta afinidade e especificidade. Os receptores tendem a aumentar de numero quando a hormona ou neurotransmissor esta escassa e a decrescer o numero quando o mensageiro qumico esta em excesso. Este e um processo adaptativo, resultando de um toma continuada.

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Curvas de concentrao-efeito de
Permitem estimar a resposta mxima que um frmaco pode produzir, e a concentrao ou dose necessria para produzir 50% da resposta mxima, parmetros uteis para comparar a potncia de frmacos diferentes que produzem efeitos qualitativamente semelhantes.

Com um antagonista ligado, nunca haver resposta, dai o resultado ser sempre uma recta, sem aumento da resposta. No caso de um antagonista competitivo, este compete com o agonista para o binding-site do receptor. A uma dada concentrao de agonista, a taxa de ocupao vai ser reduzida pela presena do antagonista. Aumentando a concentrao do agonista, pode repor a taxa de ocupao do agonista. A afinidade alterada, mas a eficcia mantem-se. Um antagonista nocompetitivo mostra afinidades iguais mas eficcias diferentes. No compete para o binding-site, mas para um segundo local de ligao presente no receptor.

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Os agonistas totais produzem resposta maxima (100%), e os agonistas parciais produzem uma resposta menor, mesmo a 100% de ocupao.

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Existe activao constitutiva, nos quais ocorre activao mesmo quando no existe presena de ligando, devido a mutaes que podem ocorrer no receptor em certos estados de doena, por exemplo. Os agonistas inversos so ligandos que reduzem a activao constitutiva. So frmacos com eficcia negativa.

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Alguns agonistas totais conseguem ter eficcia mxima mesmo com uma taxa de 1% de ocupao de receptores.

Antagonismo qumico quando duas substancias se combinam em soluo. Como resultado, o efeito do composto activo perdido. Antagonismo farmacocintico quando o antagonista reduz a concentrao do composto activo no seu local de aco.

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