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Formao de plos
radiculares em
Arabidopsis
Diferenciao
celular nos
tecidos
radiculares
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Raiz e
pice radicular
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Raiz
Estudo da diferenciao celular formao dos
plos radiculares

Como que as clulas adquirem a sua identidade em
tecidos que contm clulas com diferentes destinos de
desenvolvimento?
Plos
radiculares
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Uma clula epidrmica que contacta com 2
clulas corticais especifica um plo radicular
Uma clula epidrmica que s contacta com
uma clula cortical no especifica um plo
radicular.
O Pelo radicular
determinado pela
posio da clula e no
pela sua linhagem.

Estudo de Mutantes


Gene TTG (TRANSPARENT TESTA
GLABRA1) e WER (WEREWOLF)
necessrios para o desenvolvimento de
atricoblastos.

R like - desenvolvimento de
atricoblastos, compensa a perda da
funo TTG.

GL2 (GLABRA) necessrio para
impedir o desenvolvimento de plos
radiculares

CPC (CAPRICE) promove o
desenvolvimento de tricoblastos (plos
radiculares)

Funo antagonista de CPC
com TTG1 e WER
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Root hair production in wild-type and cell specification mutants.
(A) Wild-type.
(B) An example of an ectopic hair mutant (wer).
(C) An example of a reduced hair mutant (cpc).
Bar = 500 m for all images.
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GLABRA2 s funciona nos estados finais do
desenvolvimento de atricoblastos
contudo, a sua expresso detecta-se mesmo nas
filas de atricoblastos da zona de diviso da raiz.

Promotor GL2::GUS

expresso em clulas epidrmicas (atricoblastos)
no alinhamento radial de clulas corticais.
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GL2::GFP reporter fusion

Embrio no estado
Torpedo
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Modelo
As protena WER e CPC, so
ambos protenas MYB, que
competem para interagir com
a protena bHLH codificada
pelo homlogo de R.

WER-R - activador de
transcrio

O complexo CPC-R inactivo
(no tem um domnio
activador de transcrio)

O padro de pelos radiculares
determinado pelo equilbrio
na actividade de WER e de
CPC; WER domina nas filas de
atricoblastos e CPC domina
nas filas de tricoblastos.
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Efeito do etileno no desenvolvimento de pelos
radiculares
Um dos sinais envolvidos pode ser o etileno.
Razes tratadas com etileno ou com o seu precursor ACC formam plos nos
tricoblastos e nos atricoblastos. Do mesmo modo mutantes ctr1 (constitutive triple
response) que tm uma resposta constitutivamente activa ao etileno, formam plos
em excesso.

Resultados mais recentes mostram que
Protenas CPC passam dos
atricoblastos para os tricoblastos onde
reprimem GL2.


Passagem do CPC via
plasmodsmios
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Model for the specification of the root hair and non-hair cell types in the Arabidopsis
root epidermis. The proposed accumulation and interaction of cell fate regulators is
shown within root epidermal cells destined to be root hair cells (in the H position) or
non-hair cells (in the N position). In this model, the default fate for an epidermal cell
is a root hair cell. Arrows indicated positive control, and blunted lines indicated
negative regulation.
Intercellular regulatory network in root epidermal cell differentiation in Arabidopsis. (a) Schematic representation of a
transverse section showing the cellular organization in the Arabidopsis root. Hair cells always arise from the cells that are
positioned between underlying cortex cells. (b) Simplified model of mutual movement of CPC or GL3/EGL3 defining the
intercellular regulatory circuit. CPC protein moves from a hairless cell to a hair cell, then represses GL2 expression or
activates GL3/EGL3 expression. In contrast to CPC, GL3/EGL3 moves from a hair cell to a hairless cell, specifies hairless cell
identity through the activation of GL2 expression, and activates CPC expression. CPC, GL3, and EGL3 have auto-inhibitory
activity on their own transcription. PD, plasmodesmata (Curr Op. 2005)
Em Arabidopsis o gene ortlogo de R so 2, o GLABRA3 (GL3) e o ENHANCER DE GL3 (EGL3)
?
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Resumindo:

5 genes envolvidos na determinao de atricoblastos
TTG
WER
GL3 e EGL3
GL2
pois mutaes nestes genes induzem uma produo
excessiva de plos

3 genes envolvidos na determinao do plo tricoblasto
CPC
TRY (homlogo de CPC)
ETC (Enhancer de CPC e TRY)
pois mutaes nestes genes induzem uma produo
excessiva de clulas sem plos

HIPTESE
(B) Proposed interactions during root epidermal
patterning.
WER and TTG are assumed to interact with a GL3-like
bHLH protein.
TRY has been omitted for clarity.
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(A) No estado embrionrio, existe
uma mutua inibio, todas as clulas
expressam WER e GL2,
E possuem CPC para inibir as clulas
vizinhas de expressarem estes genes.
Um gene tipo bHLH tambm
expresso, provavelmente.







(B) Raiz em crescimento. Informao
das clulas mais interiores leva a uma
alterao a nvel da expresso de
WER, ou por inibio da expresso
Hair , ou pela activao de WER nas
clulas N.
Isto mediado por CPC.
Complexo WER/TTG/bHLH quando em elevada quantidade, inibe a formao
do plo, pois induz a expresso do Complexo CPC/TRY que se move, e de GL2
que reprime a formao do plo posio N (NON HAIR)

Quando CPC se move e reprime o complexo WER/TTG/bHLH este em baixa
quantidade, no induz GL2 FORMA-SE o PLO posio H (HAIR)

No entanto, no momento da diferenciao tem que haver mais algum
mecanismo responsvel pelo destino H vs N, se no h sempre um
equilbrio
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SCRAMBLE SCM - receptor tipo cnase
Este receptor influencia a expresso gnica
levando as clulas epidrmicas da raiz a
adoptar o destino plo radicular na posio
H ou sem plo radicular na posio N.

Aps a informao posicional (pontos
vermelhos) actuarem no receptor, este actua
influenciando o desenvolvimento H vs N
seta controlo positivo
Trao controlo negativo - represso

Complexo WER/TTG/GL3 elevado No plo
Complexo CPC/TRY elevado - Plo

Nas plantas, existem dois tipos celulares que produzem um crescimento
apical, os PLOS RADICULARES e os TUBOS POLNICOS, ambos
possuem um mecanismo regulador da polaridade, complicado e ainda pouco
esclarecido.

- Existe um papel importante do citoesqueleto na reorganizao do trfego
de vesculas, dependente de um gradiente de clcio localizado no pice.
- Este gradiente, por sua vez, mantido por espcies reactivas de oxignio,
produzidas por uma NAPH oxidase ROOT HAIR DEFECTIVE.
-A sinalizao feita por fosfolpidos (fosfoinositis fosfato) outro factor
importante tambm para o crescimento dos tubos polnicos.
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Crescimento apical dos
pelos radiculares
PIP5K3
Enzima chave
para a produo
de fosfoinositol
fosfato 5-cnase
PIP5K3::GUS
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Localizao de PIP5K3-YFP nos plos radiculares
PIP5K3
Regulador do crescimento dos plos radiculares
Envolvido na localizao do fosfatidilinositol
(4,5)difosfato, no pice dos plos radiculares em
crescimento.

FUTURO:
Estudar as interaces entre estas molculas e outros
factores de sinalizao que se sabe estarem envolvidos na
morfognese celular.
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Formao de razes
laterais
Controlo gentico do incio de
formao de razes laterais

Importncia vital para a
absoro de gua
Origem de razes laterais, quando as clulas fundadoras do periciclo, nos plos
opostos ao xilema, se dividem anticlinalmente para formar uma camada
primordial (I). Seguem-se divises periclinais e anticlinais para formar um
primrdio (II), que cresce (III-VII) e eventualmente emerge (VIII).
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Estado 0 - mximo de auxina nas clulas
de periciclo que se vo dividir (devido ao
transporte de auxina dependente de PIN).
No estado seguinte, o mximo de auxina
est confinado s clulas centrais das duas
camadas de iniciais da raiz lateral.
Nos estados seguintes estabelece-se um
gradiente de auxina com o mximo nas
iniciais da columela, com um padro
semelhante ao da raiz primria.
Em gnom
R5
PIN1 no assume a localizao
bipolar, picos de auxina conduzem a uma
proliferao homognea do periciclo.

Auxina mxima vista
por DR5::GUS.
A acumulao regular
de auxina nos plos
de protoxilema,
determina as clulas
adjacentes do
periciclo a tornarem-
se clulas
fundadoras.
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A auxina pois necessria para a formao de razes laterais.

Mas s um nmero de clulas de periciclo na direco do protoxilema se
tornam fundadoras, apesar de todas poderem responder ao nveis elevados
de auxina.
Parece que devido a uma resposta oscilatria auxina, que ocorre a
intervalos de cerca de 15h.
Este espaamento tambm influenciado por respostas trpicas que
respondem a estmulos mecnicos.
AUX1 (AUXIN RESISTANT1), o primeiro gene a ser expresso em resposta s
auxinas, assim como PIN1.
AUX1::GUS