DISCIPLINA: BIOLOGIA DE VEGETAIS INFERIORES 1 BACHARELADO
ATUALIDADES 6 - PROF GRCIA OIAMA DOLABELA BICALHO ABRIL 2010
GODBICALHO UNIMONTES 1 BACHAREL/2010 BIOLOGIA DE VEGETAIS INFERIORES
BIOLOGIA MOLECULAR - FISH E PCR
HIBRIDIZAO IN SITU FLUORESCENTE FISH NA IDENTIFICAO DE MICRORGANISMOS
A aplicao da BIOLOGIA MOLECULAR, principalmente pelas tcnicas de Hibridizao in situ Fluorescente - FISH (Fluorescence in situ Hibridization), acopladas ou no ao uso do confocal scanning laser microscopes, tm permitido, nos ltimos anos, uma melhor percepo, por exemplo, da comunidade microbiolgica que compe os reatores biolgicos de tratamento de esgotos.
Na sntese protica, no interior das clulas, a informao gentica encontra-se armazenada nas seqncias nucleotdicas que compem as molculas do DNA genmico. Esta informao inicialmente transcrita para uma seqncia de bases chamada de RNA mensageiro (RNAm), sob a ao da enzima RNA polimerase, sendo posteriormente traduzida numa seqncia de aminocidos que constituem uma protena. As estruturas no interior da clula onde se processa a traduo e sntese de protenas so os ribossomos, os quais so constitudos de protenas e outras molculas de RNA denominados de RNA ribossomal (RNAr) (Lechner et al., 1994).
O ribossomo constitudo por duas subunidades ribossomais e cada uma destas integra molculas de RNAr de diferentes tamanhos que podem ser definidos pelas suas propriedades de sedimentao, designadas de unidades de Sveldberg (S).
Em ribossomos de clulas procariontes so encontradas as molculas RNAr 5S e RNAr 23S que constituem a subunidade grande (LSU) e as molculas RNAr 16S que constituem a subunidade pequena (SSU).
O RNA sintetizado a partir da cpia de regies especficas e bem delimitadas do DNA. Os genes ribossomais do DNA possuem a informao gentica que codifica a sntese de diferentes molculas de RNAr. Devido importncia celular da traduo do RNAm em protenas ou ribossomos, provvel que a forma com que esse mecanismo acontea tenha surgido uma nica vez na evoluo (sem sofrer alteraes). Dessa forma, grande parte das seqncias de bases das unidades RNAr 5S, 16S e 23S podem ser consideradas conservadas, assim como os genes que as codificam (Abreu, 2004). Segundo Woese (1987), a seqncia de gene DNAr 16S pode ser utilizada como molcula relgio para o estudo da forma como os procariontes tm evoludo ao longo do tempo.
Atualmente o RNAr e os seus genes correspondentes (DNAr) so utilizados como marcas biolgicas da evoluo, devido as seguintes razes (Olsen et al., 1986):
1. O RNAr est presente no processo de sntese proteica e tem a mesma funo em todos os organismos;
2. A estrutura do RNAr conservada sendo relativamente baixa a taxa de mutao durante a evoluo quando comparado a outros genes;
3. Os RNAr e seus genes so facilmente acessveis pelas tcnicas de PCR Polymerase Chain Reaction - e sequenciao;
4. As molculas RNAr 16S e RNAr 23S contm suficiente informao permitindo comparaes significativas e satisfatrias; UNIMONTES UNIVERSIDADE ESTADUAL DE MONTES CLAROS DISCIPLINA: BIOLOGIA DE VEGETAIS INFERIORES 1 BACHARELADO ATUALIDADES 6 - PROF GRCIA OIAMA DOLABELA BICALHO ABRIL 2010
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5. Acredita-se no ocorrer transferncia de genes de RNAr entre organismos; relaes entre RNAr refletem relaes de evoluo.
BIBLIOGRAFIA
ABREU, A. A. V. Identificao de bactrias filamentosas em processos de lamas activadas atravs da tcnica de Hibridizao in situ Fluorescncia (FISH). Dissertao. Departamento de Engenharia Biolgica, Universidade do Minho, Portugal, 2004. 142p.
LECHNER, M., TELHADA, M. Expresso dos genes. Transcrio. In: AZEVEDO, C. Biologia Celular. Ed. Lidel Edies Tcnicas, 1994. pp 159-172.
OLSEN, G. J.; LANE D. J.; GIOVANNONI, S. J.; STAHL, D. A. Microbial ecology and evolution: A ribosomal RNA approach. 1986, Ann. Rev. Microbial. 40: 337-365.
Tese apresentada ao Programa de Ps-Graduao em Engenharia Ambiental da UFSC, junho, 2005.
WOESE, C. R. Bacterial evolution. Microbiol, 1987. Rev. 51: 221-271. CUIDE DA UNIMONTES