Relatrio de Microbiologia

So Loureno da Mata, 27 de maro de 2015

Relatrio de Microbiologia

Este presente relatrio foi elaborado pelos

alunos: Angela Holanda, Brienni, David
Manoel, Gabriely Moreira, Halvaiza, e
Natlia Edna, da disciplina de
microbiologia dos alimentos, ministrada
pela professora Aurenice Vaz, do curso
tcnico em alimentos.

Introduo:

A autoclave um aparelho muito utilizado em laboratrios de pesquisas e

hospitais para a esterilizao de materiais. O processo de autoclavagem consiste em
manter o material contaminado em contato com um vapor de gua em temperatura
elevada, por um perodo de tempo suficiente para matar todos os microrganismos.
A autoclave formada por um cilindro metlico resistente, vertical ou horizontal, onde
geralmente fica a resistncia que aquecer a gua. Possui uma tampa que apresenta
parafusos e permite fech-la hermeticamente. Em cima da tampa esto a vlvulas de
segurana e de ar; apresenta tambm uma chave de comando para controlar temperatura
e um registro indicador de temperatura e presso.

Objetivo:

Analisar alimentos, e verificar a quantidade de bactrias presentes nesse

alimento. Utilizando tipos de diluio diferentes, utilizando o meio PCA para a anlise
de mesfilos aerbios.

Materiais, utenslios e equipamentos utilizados:

Placa de petri
Becker
Esptula
Balana
Agua destilada
Meio de cultura
Cadinho
Basto de vidro
Proveta
autoclave

Etapas da anlise:

1- Pesagem/volumetria
2- Diluio
3- Autoclavagem

Experimento:
Nosso experimento no dia 20/03/2015 foi para aprendermos para que serve o
autoclave e como manuse-lo.

Primeiramente, a professora dra. Aurenice Vaz nos falou sobre os meio de cutura
existentes, aqueles no qual j fizemos experimento para analisa-los, e eles podem ser:

Slido
agr
semi-slido
Lquido caldo nutritivo

E:
Padro: PCA/PDA Seletivos: microrganismos seletivos BP
Enriquecimento: melhoramento da bacterias
Depois, fomos ao modo de preparo: Lemos o rotulo e vimos que utilizado 40g
do BPL agr (salmonela except e salmonella serotype encontrada em urina, leite e
outros materiais), para 1000 ml (1L) de gua destilada, mas nos foi pedido que utilizasse
apenas 250 ml de agua destilada. Ento fizemos uma regra de trs simples e achamos a
quantidade de substncia utilizada para a formao do nosso meio de cultura.
1000 40
250 x
Ento, achamos 10g para cada 250 ml de agua destilada. Pegamos o BLP,
abrimos a tampa, colocamos o cadinho na balana, taramos e com a esptula fomos
acrescentando a substancia at chegar ao peso ideal para nosso experimento. Colocamos
a agua destilada na proveta para medirmos a sua quantidade, depois a colocamos dentro
do Becker e acrescentamos os 10g de BPL; misturamos e colocamos em 4 recipientes.
Aps a preparao do meio de cultura, iremos coloca-los no autoclave, a uma
temperatura de 121 C e a presso de 1 atm., por 15 minutos, j que o meio de cuktura
foi em vitro e no necessita do tempo mximo para a descontaminao. Mas antes de
colocar nosso meio de cultura no autoclave, devemos:
1. Abrir a tampa e colocar gua at cobrir o descanso do cesto;
2. Introduzir o material a descontaminar/esterilizar;
3. Para evitar contaminao cruzada, o material a ser esterilizado deve ser operado
separadamente do material a ser descontaminado;
4. Fechar a tampa, apertando bem por igual as travas diagonais;

5. Abrir a vlvula de remoo de ar e ligar a chave comutadora no calor mximo;

6. Deixar expulsar todo o ar de seu interior. Fechar a vlvula de escape de ar aps
persistir a sada de um fluxo de vapor fluente.
7. Atingida a presso de trabalho, girar a chave comutadora para o calor mdio.
Iniciar a contagem do tempo.
8. Terminado o tempo, desligar a chave comutadora, abrir a vlvula de remoo de
ar e quando manmetro estiver em zero, abrir a tampa e retirar o material.
9. Tratando-se de frascos fechados, deixar esfriar normalmente sem abrir a vlvula
de remoo de ar, para evitar a quebra dos frascos. Abri-la com o manmetro em
zero.
10. Para regular a vlvula de segurana, deslocar o contra peso para frente ou para
trs, de maneira a estabilizar a presso desejada at o limite de 1,5 atm.
11. Para esterilizao de material a temperatura preconizada recomendada 121C por
15 minutos. Para descontaminao de material a temperatura mantida a 121C por
30 minutos.
12. Substituir a gua do tambor sempre que necessrio.
Passado o tempo, abrimos o autoclave, retiramos o cesto com os recipientes como os
meios de cultura, pegamos o meio de cultura e os colocamos nas placas de petri.
Esperamos esfriar e as guardamos na geladeira para uma possvel contagem de colnias.

Concluso:

Anexos:

Resistncia

vlvula de ar

registro da temperatura e presso

cesto e tampa

chave de comando

Referncias:

FRANCO, Bernadete D. Gombossy de Melo. LANDGRAF, Mariza.

Microbiologia dos alimentos. Editora: Atheneu

http://www.pontociencia.org.br/experimentos-interna.php?experimento=353