UNIVERSIDADE FEDERAL DO ESPRITO SANTO

CENTRO UNIVERSITRIO NORTE DO ESPRITO SANTO

Departamento de Cincias Naturais
Curso de QUMICA- Licenciatura

Relatrio n1: Propriedades cido-base de

aminocidos

Bianca M. Carletto
Ctia P. Barcellos
Ryan Thairyk S.de Jesus
Prof Carolina Fortes Rigos

So Mateus, 20 de maro de 2015

1. RESUMO
O presente relatrio trata-se das propriedades cido-base de aminocidos
que por possurem um grupo amino e um grupo carboxlico na molcula
confere aos aminocidos um carter anfotrico em solues aquosas,
comportando-se como eletrlitos fracos, esses grupos ionizveis conferem aos
aminocidos a capacidade de atuarem como um sistema tampo. O
experimento tem como objetivo, construir os grficos deste aminocido a partir
dos dados obtidos na titulao para comparar o perfil das curvas e
correlacion-las com o pKa; Identificar os grupos tamponantes de um
aminocido glicina e os valores de pH onde eles ostentam a maior capacidade
tamponante.

2. INTRODUO
Os aminocidos so as unidades fundamentais das protenas. A ligao em
sequncia de 20 aminocidos constitui as protenas. Todos os 20 aminocidos
comuns so -aminocidos. Eles possuem um grupo carboxila e um grupo
amino ligado ao mesmo tomo de carbono (o carbono ).Eles diferem uns dos
outros nas suas cadeias laterais, ou grupos R, que variam em estrutura
tamanho e carga eltrica e que influenciam a solubilidade dos aminocidos em
agua.

Figura 1: estrutura geral de um aminocido (fonte: site qumico e coisas afins)

Para todos os aminocidos comuns, exceto a glicina, o carbono esta

ligado a quatro diferentes grupos: um grupo carboxlico, um grupo amino, um
grupo R, e um tomo de hidrognio. O tomo de carbono , , portanto um
centro quiral. Por causa do arranjo tetradrico dos orbitais de ligao em volta

do tomo de carbono. Eles so agrupados em cinco classes principais

baseadas nas propriedades do seu grupo R, sua polaridade ou tendncia de
reagir com a agua em pH biolgico. A polaridade dos grupos R varia
gradativamente, desde os no polares e hidrofbicos at os altamente polares
e hidroflicos.
O conhecimento das propriedades cido-base dos aminocidos
importante para a compreenso das tcnicas utilizadas na determinao da
composio e sequncia de protenas e para o estudo das propriedades
qumicas e biolgicas destes compostos.
De acordo com o comportamento cido-base dos aminocidos, denota-se
que eles podem agir como cidos e bases, portanto recebem a denominao
de anfteros. Quando um aminocido dissolvido em gua, ele existe na
soluo como um on dipolar. Podendo agir tanto como cido, doando prtons

Ou como uma base, recebendo prtons:

Efetuam-se titulaes potenciomtricas de solues aquosas destes

compostos com solues titulantes de cido ou de bases fortes, ou seja, a
titulao cido-base consiste na adio ou remoo gradual de prtons com a
finalidade de estudar tal comportamento
A titulao cido-base envolve a adio ou remoo gradual de prtons.
Em pH muito baixo, a espcie inica predominante da glicina a forma
totalmente protonada. No ponto mdio da primeira etapa da titulao, onde o
grupo da glicina perde seu prtons, as concentraes equimolares das
espcies doadora de prtons e receptora de prtons esto presentes. No ponto
mdio de qualquer titulao, um ponto de inflexo alcanado, onde o pH
igual ao pK do grupo protonado, sendo titulado. Para glicina, o pH no ponto

mdio de 2,34. O pK uma medida da tendncia de um grupo oferecer um

prton, a medida que a titulao prossegue, um outro ponto importante
alcanado em pH5,94. Aqui h outro ponto de inflexo, no qual a remoo do
primeiro prton foi essencialmente completada e a remoo do segundo
apenas comeou.
O segundo estagio da titulao corresponde a remoo de um prton do
grupo- da glicina. O pH no ponto mdio desse estagio 9,60. A titulao
essencialmente completada em um pH de cerca de 12, em cujo ponto a forma
predominante da glicina.
Os aminocidos podem se titulados potenciometricamente, apresentando
curvas de titulao caractersticas, de acordo com os grupos ionizveis
presentes

em

sua

estrutura.

equipamento

utilizado

em

mtodos

potenciometricos simples e de baixo custo, incluindo um eletrodo indicador,

um eletrodo de referencia, que pode ser eletrodos de calomelano ou de pratacloreto de prata e um dispositivo para medir o potencial. A determinao de
ons ou molculas atravs de potencimetria direta rpida e simples,
necessitando somente da comparao entre o potencial desenvolvido por um
eletrodo imerso na soluo da amostra e o potencial desenvolvido pelo prprio
eletrodo imerso em uma ou mais solues padro do analito.
O eletrodo de vidro uma ferramenta reconhecidamente verstil para a
medida de pH sob diferentes condies. Diversos eletrodos de vidro esto
disponveis para aplicaes especiais. Exemplos so os pequenos eletrodos
utilizados para determinar o pH em uma gota de soluo. Geralmente um
eletrodo de prata-cloreto de prata empregado como um eletrodo de
referencia.

3. Procedimento Experimental
Realizou-se primeiramente uma calibrao do pHmetro, uma limpeza do
eletrodo com gua destilada. Inicialmente pipetou-se 10 ml de uma soluo de
glicina a 0,1 mol/l para um bquer de 100 ml, inseriu-se o pHmetro nesta
soluo, e adicionou-se agua destilada ao bquer o suficiente para cobrir o
bulbo do eletrodo de vidro. Anotou-se o valor do PH inicial. Montou-se os
materiais para realizao da titulao. Na bureta adicionou-se soluo de
NaOH padronizada, e abaixo da bureta instalou-se um agitador magntico.
Fez-se a titulao da soluo da glicina sobre agitao. Desligando-o a cada

medida de pH realizada. Registrou-se a variao do pH de acordo com a

adio de base. Repetiu-se o mesmo procedimento utilizando como titulante
soluo padro de HCl.

4. Resultados e Discusso
4.1-Titulao potenciomtrica da Glicina: Titulao com NaOH
A titulao potenciomtrica do aminocido Glicina se deu da seguinte forma,
inicialmente mediu-se o pH da soluo de glicina antes de qualquer adio do
titulante. Em seguida, conforme se adicionava a soluo de NaOH o pH era
medido, ao perceber que no ocorria variao no pH

adicionava-se uma

quantidade de gotas maior de titulante.

Realizou-se esse processo at o valor de pH de aproximadamente 9,5. O
procedimento foi realizado em duplicata, segue abaixo os valores de pH obtido
no decorrer do experimento.
Tabela 1: Valores de pH, pOH e equivalente de OH na soluo de Glicina 0,1
mol/L, quantidade de gotas adicionadas do titulante na soluo.
Soluo 1
Gotas de NaOH 0,1 mol/L
0
2
1
1
1
1
1
1
2
2
1
2
2
5
5
10
10
10
10
10

pH
6,65
7,69
7,85
7,98
8,09
8,28
8,34
8,36
8,53
8,55
8,56
8,7
8,84
8,98
9,09
9,2
9,34
9,47
9,49
9,61

Equivalente [OH-]
0
8,78E-5
1,32E-4
1,76E-4
2,2E-4
2,63E-4
3,07E-4
3,51E-4
4,39E-4
5,27E-4
5,71E-4
6,59E-4
7,46E-4
9,6E-4
0,00118
0,00162
0,00206
0,0025
0,00294
0,00338

Soluo 2
pH
6,65
7,66
7,96
8,10
8,11
8,28
8,34
8,35
8,52
8,62
8,64
8,71
8,76
8,91
9,00
9,18
9,31
9,32
9,50
9,54

Equivalente [OH-]
0
8,78E-5
1,32E-4
1,76E-4
2,2E-4
2,63E-4
3,07E-4
3,51E-4
4,39E-4
5,27E-4
5,71E-4
6,59E-4
7,46E-4
9,6E-4
0,00118
0,00162
0,00206
0,0025
0,00294
0,00338

4.2-Titulao potenciomtrica da Glicina: Titulao com HCl

Realizou-se o mesmo procedimento, porm utilizando HCl como titulante.
A titulao se processou at a obteno do valor de pH de aproximadamente
2,5 o procedimento foi realizado em duplicata. Segue abaixo os valores de pH
obtido e a concentrao de H equivalente.

Tabela 2:Valores de pH, pOH e equivalente de OH na soluo de Glicina 0,1 mol/L,

quantidade de gotas adicionadas do titulante na soluo.

Soluo 1
Gotas de HCl 0,1 mol/L
0
2
2
1
1
1
1
1
1
2
2
2
5
5
5
10
10
10
10

pH
6,35
3,99
3,91
3,78
3,7
3,63
3,58
3,56
3,44
3,40
3,36
3,30
3,15
3,05
2,97
2,84
2,75
2,64
2,54

Equivalente [H+]
0
9,78E-5
1,96E-4
2,45E-4
2,9E-4
3,4E-4
3,91E-4
4,4E-4
4,89E-4
5,87E-4
6,85E-4
7,82E-4
0,00103
0,00127
0,00152
0,002
0,00249
0,00298
0,00347

Soluo 2
pH
6,15
4,29
3,36
3,75
3,68
3,62
3,58
3,52
3,51
3,40
3,34
3,28
3,14
3,05
2,98
2,84
2,74
2,65
2,57

Equivalente [H+]
0
9,78E-5
1,96E-4
2,45E-4
2,9E-4
3,4E-4
3,91E-4
4,4E-4
4,89E-4
5,87E-4
6,85E-4
7,82E-4
0,00103
0,00127
0,00152
0,002
0,00249
0,00298
0,00347

Com os valores de pH e das concentraes equivalentes de OH e H provenientes da

base e do cido, montou-se a curva de titulao da glicina.

Figura 2:Curva de titulao para a Glicina 0,1M obtida experimentalmente

A titulao envolve a adio ou remoo gradual de prtons. A forma diprtica

da glicina indica que h dois grupos ionizveis, o grupo carboxil e o grupo
amino. Em pH baixo a espcie de glicina est protonada.
No grfico h duas regies em que o aumento de pH se torna lento, nesses
pontos ocorre o tampo. A primeira regio corresponde ao pK1, nesse ponto
esto presentes quantidades equimolares da espcie doadora de prton +H3NCH2-COOH e da espcie aceptora

H3N-CH2-COO- , esse equilbrio que

caracteriza o tampo. De acordo com o grfico o pH nessa regio de

aproximadamente 2,5 logo o pK1 correspondente ao valor de pH.
A segunda regio referente ao pK 2, nesse ponto ocorre a remoo do
segundo prton do grupo amino da glicina, as espcies presentes nessa regio

de tamponamento so +H3N-CH2-COO- e H2N- CH2- COO- . Observa-se pelo

grfico que o pH para essa regio de aproximadamente 9,2 portanto o pK2
ser o mesmo valor.
H outro ponto importante no grfico, que corresponde ao ponto inflexo entre
os dois estgios na curva. Nesse ponto a remoo do primeiro prton da glicina
est completa e se inicia a remoo do segundo prton. A glicina est em sua
forma dipolar, ou seja, completamente ionizada, porm sem carga eltrica
lquida. O valor de pH nessa regio chamado ponto isoeltrico, e pode ser
calculado utilizando os valores de pk1 e pK2 encontrados experimentalmente.
pI = 1 (pK1+pK2)
2
pI = 5,85

Os valores de pk1, pK2 e pI da glicina terico de 2,34; 9,60 e 5,97. Observase que houve uma variao dos valores obtidos experimentalmente. Porm
pode-se considerar o resultado regular, visto que valor terico do ponto
isoeltrico prximo do valor obtido experimentalmente. Deve se considerar
tambm que os erros obtidos em relao aos valores tericos esto
relacionados a erros do operador, a variao do modo de diluio do cido/
base adicionado soluo, mesmo sendo estes adicionados mantendo um
padro. Assim calculou-se o erro relativo do procedimento pela equao
descrita abaixo, considerando os valores tericos para pK 1, pK2 e pI.

Errorelativo=

( valor medido )(valor terico)

100
valor terico

Para o pK1, o erro relativo foi de:

Erro relativo=

( 2,5 )(2,34)
100 =6,84
2,34

Erro relativo ( p K 2 ) =

Erro relativo ( p I )=

( 9,2 )( 9,6 )
100 =4,17
9,6

(5,85 )( 5, 9 7 )
100 =2 , 01
5,97

Nota-se que os erros relativos s medidas de pK 1, pK2 e pI, so relativamente

pequenos, o resultado negativo nos valores dos erros relativos do pK 2 e pI
referem-se sobre um erro abaixo do valor considerado teoricamente,
analogamente o valor positivo do pK 1, demonstra um erro acima do valor
considerado terico. Deste modo a pratica se mostrou satisfatria.

Figura 3: Curva de titulao da Glicina (Fonte: Livro Lehninger Prncipios de Bioqumica.)

Como o experimento foi realizado em duplicata obteve-se um segundo grfico.

Figura 4: Curva de titulao para a Glicina 0,1M obtida experimentalmente

A mesma anlise feita para a curva acima. H duas regies em que ocorre o
tampo, que nada mais que o pontos referentes ao pK1 e pK2. O valor de
pk1 de aproximadamente 2,7 e o de pK2 8,0. Sendo assim, o valor do ponto
isoeltrico :

pI = 1 (pK1+pK2)
2
pI = 5,35

Os resultados obtidos para a curva de titulao acima se desvirtuaram do valor

terico. Pode-se atribuir essa pequena diferena devido a algum erro do
operador durante o procedimento.

5. CONCLUSO
Atravs da pratica experimental pode-se observar a capacidade que os
aminocidos possuem de atuarem como um sistema tampo. Essa
caracterstica de extrema importncia, pois o estado de protonao de uma
molcula afeta a sua atividade biolgica. Exemplo disto o estado de
protonao de diversas cadeias laterais de aminocidos que constituem
enzimas: por vezes, basta um aminocido no possuir um prton para uma
enzima inteira no funcionar3.
Apesar dos valores de pK obtidos experimentalmente no apresentarem o
mesmo valor do terico, o resultado foi de certa forma satisfatrio. O mtodo de
titulao potenciomtrica demonstrou ser um mtodo efetivo para obteno dos
valores de pH, o que possibilitou traar a curva de titulao da glicina.

6.BIBLIOGRAFIA:
1- LEHNINGER, A.L.; NELSON, D.L.; COX, M.M. Princpios de Bioqumica.
4. ed. So Paulo: Sarvier, 2000. 839p.

2- SKOOG, D. A.; HOLLER, F. J.; NIEMAN, T. A., Princpios de Anlise

Instrumental, 6 ed., Bookman: So Paulo, 2002.
3- Bioqumica/pH, pKa e solues tampo.
http://pt.wikibooks.org/wiki/Bioqu%C3%ADmica/pH,_pKa_e_solu
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