1.

Definio do meio de cultura

O material nutriente preparado no laboratrio para o crescimento de microrganismos
denominado meio de cultura (Case, et all, 2005).
Cultura uma populao de microrganismos cultivados em um meio de cultura. Meios de
cultura so substncias utilizadas para fornecer nutrientes para o crescimento e
multiplicao de microrganismos (Chan, et all, 1997).
2. Elementos qumicos e componentes do meio de cultura
Para crescer, todos os organismos necessitam de uma variedade de elementos qumicos
como nutrientes. Estes elementos so necessrios tanto para sntese como para as funes
normais dos compostos celulares. Eles existem na natureza em uma grande variedade de
compostos, que so inorgnicos ou orgnicos (Chan, et all, 1997).
Os elementos qumicos principais para o crescimento das clulas incluem Carbono,
Nitrognio, Hidrognio, Oxignio, Enxofre e Fosforo (Chan, et all, 1997).
2.1 Carbono
O carbono um dos elementos qumicos mais importantes necessrios para o crescimento
microbiano. Todos os organismos requerem o carbono em alguma forma. O carbono forma
o esqueleto das trs maiores classes de nutrientes orgnicos: carbohidratos, lipdios e
protenas. Tais compostos fornecem energia para o crescimento da clula que servem como
unidade bsica do material celular.
Aqueles microrganismos que utilizam compostos orgnicos como sua principal fonte de
carbono so chamados heterotrficos. Os heterotrficos obtm tais molculas orgnicas
absorvendo-as a partir do meio, ou ingerindo organismos autotrficos ou outros
heterotrficos.
2.2 Nitrognio
Todos os organismos tambm necessitam do nitrognio em alguma forma. O elemento
uma parte essencial dos aminocidos que juntos formam as protenas. As bactrias so
particularmente versteis na utilizao do nitrognio.
3.3 Hidrognio, Oxignio, Enxofre e Fsforo
O hidrognio e o oxignio fazem parte de muitos compostos orgnicos. O enxofre
necessrio para a biossntese dos aminocidos cistena, cistina e metionina. O fosforo
essencial para a sntese de cidos nucleicos e adenosina trifosfato (ATP), um composto que
extremamente importante para o armazenamento e a transferncia de energia.
Outros nutrientes essenciais so o oxignio, hidrognio, nitrognio, enxofre, magnsio,
fosforo, considerados macronutrientes, isto , nutrientes que so exigidos em quantidades
relativamente elevadas e que desempenham papis fundamentais na estrutura e
metabolismo da clula. Os micronutrientes ou elementos mnimos, exigidos em menores

quantidades mas funcionalmente muito importantes incluem o mangans, cobalto, cobre,

molibdnio e zinco (Ferreira & Sousa, 1998).
3. Classificao Nutricional dos Moo
Os organismos que utilizam compostos qumicos para obter energia so chamados
quimiotrficos; aqueles que dependem primariamente da energia radiante (luz) so
denominados fototrficos. Pela combinao desses termos com aqueles relacionados s
principais fontes de carbono, os seguintes grupos emergem:

Quimioautotficos aqueles organismos que utilizam substncias qumicas

(inorgnicas) como fontes de energia e dixido de carbono como principal fonte de
carbono.
Quimioheterotrficos aqueles que utilizam substncias qumicas (orgnicas) como
fontes de energia e os compostos orgnicos como fonte principal do carbono.
Fotoautotroficos aqueles que utilizam a luz como fonte de energia e dioxido de
carbono como principal fonte carbono;
Fotoheterotrficos aqueles que utilizam a lluz como fonte de energia e
comopostos orgnicos como principal fonte de carbono.

4. Classificao de Meios de cultura

Os meios de cultura podem ser classificados quanto ao estado fsico, composio qumica e
objectivos funcionais.
4.1 Quanto ao estado fsico podem ser lquido, solido e semi-solido.
4.1.1 Lquido - sem agentes solidificantes, apresentando-se como um caldo, utilizados
para ativao das culturas, repiques de microrganismos, provas bioqumicas,
dentre outros.
4.1.2 Slido - quando contm agentes solidificantes, principalmente gar (cerca de 1 a
2,0 %).
4.1.3 Semi-Slido - quando a quantidade de gar e ou gelatina de 0,075 a 0,5 %,
dando uma consistncia intermediria, de modo a permitir o crescimento de
microrganismos em tenses variadas de oxignio ou a verificao da motilidade
e tambm para conservao de culturas.
4.2 Quanto a composio qumica podem ser quimicamente definidos e quimicamente
complexos
4.2.1 Quimicamente definidos quando a sua composio qumica conhecida. Para
o crescimento de um microrganismo quimiolitoautrfico, meio definido deve
conter ies amnio ou nitrato. Para um quimiorganoheterotrfico, um meio
definido deve conter carbono orgnico que servir como fonte de carbono e
energia.
4.2.2 Quimicamente complexos quando a sua composio qumica exacta no se
conhece. So feitos com nutrientes, tais como extracto de levedura, extracto de
carne, extractos de plantas, peptona (protenas parcialmente hidrolisadas por
protases), leite, extracto de solo, etc. todos estes preparados so substncias

qumicas complexas, contendo acares, aminocidos, vitaminas e sais. So

usados em rotina laboratorial, permitindo o crescimento de uma gama de
microrganismos, incluindo aqueles cujos factores de crescimento no so
perfeitamente conhecidos.
4.3 Quanto aos objetivos funcionais pode ser meios de pr-enriquecimento,
enriquecimento, diferenciais, seletivos, meios de triagem, identificao, dosagem,
contagem e estocagem ou manuteno.
4.3.1 Meios de pr-enriquecimento - so aqueles que permitem a dessensibilizao
de microrganismos injuriados, i.e., para amostras que sofreram algum tipo de
tratamento (trmico ou qumico). Ex. gua peptonada, caldo lactosado
(isolamento de salmonelas de leite em p).
4.3.2 Meios de Enriquecimento - quando proporcionam nutrientes adequados ao
crescimento de microrganismos presentes usualmente em baixos nmeros ou de
crescimento lento, bem como microrganismos exigentes e fastidiosos. Esses
meios tm a propriedade de estimular o crescimento de determinados
microrganismos, mas existem alguns que tambm podem inibir o crescimento
de outros. Ex. Caldo Tetrationato e Selenito-Cistina para cultivo de Salmonelas
(lquidos), Caldo Tioglicolato para Clostridium perfringens.
4.3.3 Diferenciais - quando contm substncias que permitem estabelecer diferenas
entre microrganismos muito parecidos, tais como meio de Teague ou Eosina
Azul de Metileno (diferencial para coliformes), gar MacConkey para a
diferenciao de enterobactrias, gar sangue, agar Baird-Parker para
isolamento e diferenciao de cocos Gram positivos (slidos).
4.3.4 Seletivos - os que contm substncias que inibem o desenvolvimento de
determinados grupos de microrganismos, permitindo o crescimento de outros.
Exemplo: meios com telurito de potssio (para isolamento de Corynebacterium
diphtheriae), gar Salmonella-Shigella (SS) e gar MacConkey, meios com sais
biliares e verde brilhante para isolamento seletivo de Salmonella, meios com
7,5% de cloreto de sdio, meio Baird-Parker, para isolamento
de Staphylococcus aureus, meios com antibiticos para isolamento de diversos
microrganismos (TSC, SFP, , meio de Blaser, meio de Skirrow, etc.). A maioria
deles tambm diferencial, permitindo diferenciar as colnias (slidos) dos
microrganismos.
4.3.5 Meios de triagem - meios que avaliam determinadas atividades metablicas
permitindo caracterizao e identificao perfunctria ou presuntiva de muitos
microrganismos (gar trplice acar e ferro, meio Instituto Adolfo Lutz, uria,
etc.)
4.3.6 Identificao - prestam-se para a realizao de provas bioqumicas e
verificao de funes fisiolgicas de organismos submetidos a identificao
(meios Oxidao/Fermentao, gar Citrato, Caldo nitrato, meio semi-slido,
caldo triptofano, meio de Sulfito Indol Motilidade, etc.
4.3.7 Dosagem - empregados nas determinaes de vitaminas, antibiticos e
aminocidos;

4.3.8

Contagem - empregados para a determinao quantitativa da populao

microbiana (Agar de Contagem em Placas, TSC, Agar Batata Dextrose, gar
Baird-Parker, etc.)
4.3.9 Estocagem ou manuteno - utilizados para conservao de microrganismos
no laboratrio, i.e. garantem a viabilidade de microrganismos (gar Sabouraud,
Meios com leite, gar suco de tomate, gar sangue, gar Simples, meio
semisslido, etc.)
4.3.10 Simples aqueles que permitem o crescimento bacteriano, sem satisfazer,
contudo nenhuma exigncia em especial.
5. Tipos de meios de cultura
Os tipos de meios de cultura usados para o cultivo de microrganismos so:
Agar Nutriente:
Manitol salt Agar:
Agar sangue:
Agar batata:
Agar McConkey:

6.

7. Importncia dos meios de cultura

O crescimento dos microrganismos nos diferentes meios de cultura utilizados fornece as

primeiras informaes para a sua identificao. E importante conhecer o potencial de
crescimento de cada meio de cultura e adequar ao perfil bacteriano esperado pra cada
matria.
Alguns procedimentos so essenciais na hora de preparao de cada meio de cultura
para a obteno de melhores resultados e evitar contaminaes, como nos diferentes
casos: quando distribuir o meio antes de autoclavar, os tubos no precisam estar
esterilizados; quando distribuir o meio apos a autoclavacao, os tubos, fracos, placas,
pipetas e vidrarias ou materiais auxiliares obrigatoriamente devem ser estreis e os
meios devem ser autoclavados com as tampas semi-abertas, para que a esterilizao
seja por igual em todo o contedo dos tubos- tampas fechadas no permitem a
entrada de vapor.