Colgio Tcnico Rosa Mariyn

Camila Alves, Gabriela Gomes e Relma Santos

Espectrofotometria

Mogi das Cruzes

2015

Espectrofotometria
Introduo:

LEI DE LAMBERT

Lambert (1870) observou a relao entre a transmisso de luz e a espessura da

camada do meio absorvente. Quando um feixe de luz monocromtica, atravessava
um meio transparente homogneo, cada camada deste meio absorvia igual a frao
de luz que atravessava, independentemente da intensidade da luz que incidia. A
partir desta concluso foi enunciada a seguinte lei: " A intensidade da luz emitida
decresce exponencialmente medida que a espessura do meio absorvente
aumenta aritmeticamente ".

LEI DE BEER

Beer em 1852 observou a relao existente entre a transmisso e a concentrao do

meio onde passa o feixe de luz. Uma certa soluo absorve a luz proporcionalmente
concentrao molecular do soluto que nela encontra, isto , " A intensidade de um
feixe de luz monocromtico decresce exponencialmente medida que a
concentrao da substncia absorvente aumenta aritmeticamente ".

LEI DE LAMBERT-BEER

As leis de Lambert-Beer so o fundamento da espectrofotometria. Elas so tratadas

simultaneamente, processo no qual a quantidade de luz absorvida ou transmitida por
uma determinada soluo depende da concentrao do soluto e da espessura da
soluo.

Utilizao:
A espectrofotometria amplamente utilizada para anlise quantitativa em vrias
reas como qumica, fsica, biologia, bioqumica, engenharia de materiais e produtos
qumicos, aplicaes clnicas, aplicaes industriais, entre outras. Qualquer
aplicao que envolva substncias qumicas ou materiais pode usar esta tcnica e,
consequentemente, o espectrofotmetro.21

Em bioqumica: usado para determinar reaes catalisadas por enzimas.

Em aplicaes clnicas: utilizado para examinar o sangue ou tecidos

para diagnstico clnico.

Em biologia: usado na realizao do teste MTT. E em biologia molecular

utilizado para quantificar o DNA e determinar sua pureza depois de extrado.

Em medicina: utilizado na anlise cintica de diferentes enzimas

sanguneas e na dosagem da fosfatagem alcalina.

Inovaes:
Os instrumentos agora so pequenos, e podem ser transportados, mesmo para
medidas de campo. Com a crescente tecnologia em filtragem computacional e
manipulao de resultados, agora as amostras em soluo podem ser medidas com
preciso (a gua produz uma banda larga de absorbncia na faixa de interesse, o
que daria um espectro ilegvel sem esse tratamento computacional). Algumas
mquinas at mesmo diro automaticamente que substncia est sendo analisada a
partir de milhares de espectros de referncia armazenados na memria. Medindo-se
a uma freqncia especfica ao longo do tempo, mudanas no carter ou na

quantidade de uma ligao em particular podem ser medidas, isso especialmente

til na medida do grau de polimerizao na manufatura de polmeros. As mquinas
modernas podem tirar medidas na faixa de interesse freqentemente, como 32
vezes por segundo. Isso pode ser feito enquanto se fazem medidas simultneas
com outras tcnicas. Isso faz com que as observaes de reaes qumicas sejam
processadas mais rapidamente, de forma mais precisa e mais exata.

Espectrofotometro
Existem duas classes de espectrofotmetros: o de feixe simples e o de duplo feixe.
O espectrofotmetro de feixe simples foi o primeiro tipo de espectrofotmetro
inventado, em 1940. Essa classe do instrumento consiste em que toda a radiao
fornecida pela fonte de emisso atravesse a amostra, ou seja, a intensidade relativa
de luz medida antes e depois da amostra de teste ser inserida. Assim, para a
realizao das medidas basta colocar a amostra no compartimento adequado,
previamente determinado pelo fabricante, e fazer com que a radiao passe por
essa amostra. Esse tipo de equipamento tem um custo acessvel, j que formado
por um sistema no muito complexo.

Mais tarde, por volta de 1985, o espectrofotmetro de duplo feixe foi inventado.
Nesse tipo de instrumento, a luz dividida em dois feixes antes de atingir a amostra.
Deve-se ter o cuidado para no confundir um feixe que j sai duplicado da fonte de
radiao com um feixe que duplicado somente aps atravessar o monocromador.
No caso do espectrofotmetro de duplo feixe, a fonte de luz emite somente um feixe,
que chega ao prisma ou rede de difrao, como no espectrofotmetro de feixe
simples, e somente depois de passar pelo monocromador que o feixe dividido
em dois. Um dos caminhos do feixe utilizado para a referncia e o outro para a
amostra. Isto bem vantajoso, pois a leitura de referncia e a leitura da amostra
podem ser feitas ao mesmo tempo, comparando a intensidade de luz entre os dois
trajetos. Embora as medies de comparao de instrumentos de feixe duplo sejam
mais fceis e mais estveis, os instrumentos de feixe nico podem ter um alcance
dinmico maior e so opticamente mais simples e mais compactos.

Concluso

Concluiu-se que medida que aumenta a concentrao de uma soluo

aumenta sua absorbncia, como descrito na lei de Lambert-Beer e que atravs de
processos fsicos, realizados pelo aparelho de espectrofotometria, podemos analisar
as propriedades das solues, por exemplo, a concentrao. E com a utilizao de

clculos juntamente com os resultados obtidos pela aparelhagem, possvel definir

a concentrao de solues de concentrao desconhecida.

Bibliografia:
www.infoescola.com/
https://pt.wikipedia.org/