METODOS E PROCESSOS

INSTRUMENTAIS EM FARMACIA

Introduo

Definio: a anlise instrumental a

parte da qumica analtica que trata de
mtodos para a determinao da
composio qumica de amostras.
Qumica Analtica Quantitativa
Qumica Analtica Qualitativa

Introduo

Mtodo qualitativo: fornece informaes

sobre a identidade das espcies
atmicas ou moleculares da matria.
Mtodo
quantitativo:
fornece
informaes numricas, tais como as
quantidades relativas de um ou mais
componentes

Anlise quantitativa

Mtodo: A escolha do tipo de mtodo

que ir empregar dever visar:o tipo de
elemento a ser determinado (alguns
mtodos se destinam a alguns
elementos), tipo de amostra, custo,
limite de deteco do mtodo e outros
parmetros a serem considerados.

Classificao dos mtodos

analticos: instrumentais

Medidas de propriedades fsicas do

analito.
Condutividade
Potencial de eletrodo
Emisso ou absoro de luz
Razo massa/carga e fluorescncia

Mtodos Instrumentais

Espectroscopia de emisso,
fluorescncia , fosforescncia e
luminescncia.
Turbidimetria
Refratometria
Potenciometria
Condutimetria
Gravimetria

Instrumentos para anlise

Um instrumento para anlise qumica

converte a informao armazenada nas
caractersticas fsicas ou qumicas do
analito em um tipo de informao que
pode ser manipulada e interpretada
pelo homem.
um dispositivo de comunicao entre
o sistema de estudo e o investigador.

Instrumentos para anlise

Para se obter a informao desejada do

analito necessrio fornecer um
estmulo.

ESTIMULO
Fonte de energia

SISTEMA EM ESTUDO
Sistema em estudo

RESPOSTA
Informao analtica

Seleo de mtodo analtico

1)Que exatido necessria? (Tempo)

2)Qual a quantidade de amostra disponvel?
(sensibilidade)
3)Qual a concentrao do analito? (Intervalo de
concentraes)
4)Que
componentes
da
amostra
causaro
interferncia? (seletividade)
5)Quais so as propriedades fsicas e qumicas da
amostra? ( gasosa, lquida, etc.)
6)Quantas amostras sero analisadas?
(Economia)

Caractersticas a serem
consideradas na escolha do
mtodo

Velocidade
Facilidade e convenincia
Habilidade requerida do operador
Custo e disponibilidade do equipamento
Custo por amostra

Caractersticas de Eficincia
dos Instrumentos

Preciso: o grau de concordncia

mtua entre os dados que foram
obtidos do mesmo modo. A preciso
fornece uma medida do erro de um
anlise. calculada atravs do desvio
padro relativo, coeficiente de variao
e varincia.

Caractersticas de Eficincia
dos Instrumentos

Tendncia: Fornece uma medida do

erro sistemtico. A determinao da
tendncia envolve a anlise de um ou
mais materiais-padro de concentrao
conhecida.
Tendncia: - Xv

: a mdia da populao para a concentrao de um analito em uma

amostra que tem uma concentrao verdadeira igual a

Xv

Caractersticas de Eficincia
dos Instrumentos

Sensibilidade: a sensibilidade de um
instrumento uma medida de sua
habilidade
em
discriminar
entre
pequenas diferenas na concentrao
de um analito.

Caractersticas de Eficincia
dos Instrumentos

Limite de Deteco: a concentrao

([ ]) ou massa mnima de um analito
que pode ser detectada em um nvel
conhecido confivel.
Faixa Dinmica: faixa que se estende
da menor [ ] nas quais as medidas
quantitativas so realizadas at a [ ] na
qual as concentraes se afastam da
linearidade.

Caractersticas de Eficincia
dos Instrumentos

Seletividade: refere-se ao grau que o

mtodo est livre de interferncia de
outras espcies contidas na matriz da
amostra.
Nenhum
mtodo
est
totalmente livre de interferncia de
outros analitos, porm estes efeitos
devem ser minimizados.

Calibrao de mtodos
instrumentais

Todos os mtodos analticos requerem

calibrao.
A calibrao um processo que
relaciona o sinal analtico medido com a
concentrao do analito.
Os tipos mais comuns de calibrao
so: Curvas de Calibrao, Mtodo de
Adio de Padro e Mtodo do Padro
Interno.

ESPECTROFOTOMETRIA

Ondas Eletromagnticas

E=hc/l

Regio/Comprimento de onda
Regio

Comprimento de onda

Ultravioleta distante

100-200 nm

Ultravioleta

200-380 nm

Visvel

380-700 nm

Infravermelho

700-3000 nm

Infravermelho

3,0-15 um

Infravermelho

15-300 um

Mtodos Espectrofotomtricos
Um conjunto de tcnicas relacionadas com a
interao da radiao eletromagntica e a
matria. Existem vrios tipos de mtodos
baseados em interaes atmicas:
Absoro ( FAAS GFAAS)
Emisso (Fotometria de Chama (ICP-AES)
Fluorescncia (XRF

Mtodos Espectrofotomtricos
Dois tipos de interaes so exploradas como
base dos mtodos que devero ser tratados a
seguir:
Absoro a luz absorvida por um tomo, on
ou molcula indo para um estado energtico
mais elevado.
Emisso a emisso de um fton peloatmo,
on ou molcula, retornando para um estado
energtico mais baixo (inclui a fluorescncia)

Introduo
UV VIS: cobre a regio de comprimento de onda de 100 800 nm.
Baseia-se: na energia de excitao necessria para a transio de
eltrons entre orbitais moleculares.

Quando dois tomos formam uma molcula, seus orbitais moleculares

combinam-se dando lugar a novos orbitais moleculares que alojaro os
eltrons.

A espectroscopia de absoro UV-VIS envolve a absoro de luz UV/VIS

por uma molcula promovendo o espao de um eltron desde um orbital
molecular fundamental a um orbital excitado.

Absoro da radiao ultravioleta ou visvel

excitao dos eltrons.
transies eletrnicas.
Transies eletrnicas

promoo dos eltrons

de valncia do estado de baixa energia (estado

fundamental) para estados de mais alta energia
(estado excitado).

Natureza das Transies eletrnicas

Os eltrons de valncia podem , geralmente, ser encontrados
em um dos seguintes tipos de orbitais :
orbitais ligantes simples ,

orbitais ligantes (duplas e triplas ligaes)

orbitais no-ligantes (par isolado de eltrons)
Orbitais ligantes tendem a ter uma energia menor que os
orbitais ligantes, os quais, por sua vez, tm energia menor
que os orbitais no-ligantes.
Quando a radiao eletromagntica de comprimento de onda
correto absorvida, uma transio ocorre destes orbitais para
um orbital vazio, usualmente um orbital anti-ligante * ou *

Transies Eletrnicas
> *
> *
> *
> *

Estados
Excitados

Estados
Fundamentais

Tipos de transio

Espectro UV tpico

Os mximos de absoro devem-se a presena de cromforos na

molcula. (Neste exemplo temos duas absores em 190 e 270 nm)

Cromforo
tomo que absorve
radiao.

Auxocromos
tomo que no absorve radiao.
Modifica alguma caracterstica da
absoro do cromforo.

Cromforos simples na Espectroscopia UV

De acordo com as transies eletrnicas anteriores temos
os seguintes cromforos simples:
Eltrons
implicados

Ligaes

transio

max (nm)

Eltrons

C-C, C-H

->*

150

-O-

n->*

185

-N-

n->*

195

-S-

n->*

195

C=O

n->*

290

C=O

n->*

190

C=C

->*

190

Eltrons n

Eltrons

Para lquidos ou slidos transparentes

O espectro de absoro: obtido atravs do monitoramento
da intensidade da radiao incidente (I0) e transmitida (I).
Para caracterizar as absores devemos lembrar a lei de
Lambert-Beer:
Lei de Beer:
A intensidade de luz absorvida mede-se pelo porcentagem da luz
incidente que atravessa a amostra

% Transmitncia = (I / I0) * 100%

I = intensidade de luz transmitida

I0 = intensidade de luz incidente

Para lquidos ou slidos transparentes

A absoro funo do nmero de molculas que absorvem (concentrao).
Absorbncia = -log(I / I0) = e.c.l

Esta relao se conhece como Ley de Beer-Lambert e permite corrigir a

dependncia da concentrao e outros fatores operacionais ao comparar
distintos compostos:
Onde:
e = absorvidade molar
c = concentrao molar da espcie que absorve
l = espessura da amostra atravessada pelo feixe de luz (habitualmente 1 cm)

Espectroscopia ptica
Consiste na interao de radiao (na faixa do UV, Vis e IR)
com a matria (slido, lquido ou gs).
Esta interao pode ocorrer via absoro, espalhamento,
emisso ou reflexo da luz incidente.

IR

IT

Io
IE
Io: Intensidade Incidente
IR: Intensidade Refletida
IT: Intensidade Transmitida
IE: Intensidade Espalhada

Amostra

Io=IT+IR+IE+IA
Intensidade

Absorvida

Esquema de um
Espectrofotmetro

Elementos bsicos:
Fontes de luz: laseres e lmpadas

Elemento dispersor: grade de difrao ou prisma

Detector: fotodiodo, fotomultiplicadora, CCD
Amostra: slido, lquido ou gs.

Laser

Monocromadores

Para muitos mtodos espectroscpicos

necessrio, ou desejvel, ter a capacidade de
variar o comprimento de onda continuamente
ao longo de uma faixa considervel.Esse
processo chamado varrer um espectro.
Os monocromadores so projetados para
varredura espectral.
So usados para radiao UV, visvel e IV.

Monocromadores:
Componentes

Fenda de entrada: fornece uma imagem ptica

retangular;
Lente colimadora (espelho): produz um feixe paralelo
de radiao;
Prisma ou Rede Reflectora: dispersa a radiao e
seus comprimentos de onda;
Elemento de foco: reforma a imagem da fenda de
entrada e a focaliza sobre uma superfcie plana,
chamada plano focal.
Fenda de sada: situada no plano focal, isola a banda
espectral desejada.
Alm disso, possui janelas de entrada e sada, que
tm funo de proteger os componentes da poeira e
dos gases corrosivos dos laboratrios.

Monocromador de Prisma

Prismas podem ser usados para

dispersar a radiao UV, visvel e IV.
Os
materiais
usados
para
sua
construo diferem, entretanto, para
cada regio de comprimento de onda
(ex: vidro, quartzo, slica fundida, KBr,
etc).

O Elemento Dispersivo:Monocromador

sena + senb = mDl

b
a

Poder de resoluo da
rede:
l/Dl=mN

Tipos de Prisma

Prisma de Cornu : quando o material

o quartzo cristalino, o prisma formado
pela juno de dois prismas de
30,sendo um fabricado com quartzo
destrgiro e outro com quartzo
levgiro. Desta forma o quartzo
opticamente ativo no polariza a
radiao emitida.

Tipos de Prisma

Prisma de Littrow : um prisma de 30,

espelhado na parte de baixo. A refrao
neste tipo de prisma feita duas vezes
na mesma interface, de modo que suas
caractersticas de desempenho so
similares s dos prismas de 60.

Monocromador de rede

A disperso da radiao UV, visvel e IV

pode
ser
provocada
pelo
direcionamento
de
um
feixe
policromtico atravs de uma rede de
reflexo.
As redes replicadas que so usadas na
maioria dos monocromadores so feitas
partir de rede-mestre.

Fontes de luz
Lmpadas: Espectro contnuo
Emisso de
Corpo Negro
Lei de Planck

Recipiente das amostras

As clulas ou cubetas que contm as amostras

devem ser feitas de material transparente radiao
na regio espectral de interesse.
Na regio UV devem ser usados quartzo ou slica
fundida; ambas as substncias so transparentes
tambm na regio visvel e at 3um, na regio
Infravermelho.
Vidros de silicato podem ser usados na regio entre
350 e 2000nm.
Recipientes de plstico tambm tm aplicao na
regio visvel.

Tipos de Amostras:
1) Slidos
Eg > 5eV

Eg < 1eV

Eg entre ~1eV
e
5eV

BC
BC
Eg

BC
Eg

Eg

BV

BV

BV

Isolante

Metal

E=hc/l

Semicondutor

tomo de Bohr

Absoro e Emisso

Faixas de Energias da
Espectroscopia ptica
Nveis
Eletrnicos
~1eV
UV-VIS

Nveis Vibracionais
~10 - 100meV
IR

Nveis Rotacionais
< 10 meV

TCNICA DE ABSORO E REFLETNCIA

IT

Absorbncia (A): A=logIo/IT

IO

R=IR/Io

Refletncia R: =IR/Io
Transmitncia (T): T=IT/Io
Lei de Beer: IT(l)=Io(l)e-a(l)L
a=A/(Llog(e))

IR

Histria

Obrigado a Todos !!!!

Prof. Luiz F. Moreia