UNIVERSIDADE FEDERAL DO VALE DO SO FRANCISCO - UNIVASF

CURSO DE MEDICINA VETERINRIA

DISCIPLINA DE DOENAS INFECTO-CONTAGIOSAS
PROFESSOR MATEUS MATIUZZI DA COSTA

PARTE I
DOENAS BACTERIANAS

PETROLINA, AGOSTO DE 2011.

SUMRIO

Colheita e remessa de materiais para exame bacteriolgico................................

Diagnstico molecular de enfermidades bacterianas...........................................
Garrotilho.............................................................................................................
Infeco por Rhodococcus equi em potros..........................................................
Colibacilose e Doena do Edema.........................................................................
Erisipela................................................................................................................
Doenas respiratrias dos sunos.........................................................................
Rinite Atrfica......................................................................................................
Pneumonia Enzotica...........................................................................................
Pleuropneumonia suna........................................................................................
Carbnculo Hemtico..........................................................................................
Clostridioses........................................................................................................
Botulismo............................................................................................................
Ttano.................................................................................................................
Carbnculo sintomtico, Edema maligno e Gangrena Gasosa...........................
Hemoglobinria bacilar.......................................................................................
Enterotoxemia.......................................................................................................
Cerato conjuntivite infeccciosa dos bovinos........................................................
Oftalmia contagiosa dos ovinos...........................................................................
Foot Rot................................................................................................................
Leptospirose..........................................................................................................
Tuberculose...........................................................................................................
Brucelose...............................................................................................................
Enfermidades do Trato Reprodutivo de Ovinos...................................................

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Matsite..................................................................................................................

COLHEITA E REMESSA DE MATERIAL PARA EXAME

BACTERIOLGICO
Agueda Castagna de Vargas
Mateus Matiuzzi da Costa

INTRODUO

Para o diagnstico de doenas bacterianas, os exames laboratoriais so muito

importante, para identificao dos agentes etiolgicos, confirmao do diagntico e
orientao do melhor agente antimicrobiano para terapia. O exame bacteriolgico inicia
bem antes da colheita de qualquer amostra para anlise laboratorial. De centenas de
microrganismos que tm sido identificados como causa ou coadjuvantes de doenas nos
animais, provavelmente 90% podem ser excludos com alto grau de confiana
simplesmente com base na espcie do hospedeiro envolvido, sinais clnicos, ou leses e sob
quais circunstncias encontrada (localizao geogrfica, poca do ano, idade do animal,
sistema de criao). O conhecimento do laboratorista com referncia a estes aspectos
essencial, no somente porque freqentemente questionado, a respeito disto bem antes
dos testes laboratoriais estarem com o resultado definitivo disponvel, mas tambm para a
utilizao racional do laboratrio de diagnstico. Logo a elaborao de um histrico preciso
muito importante para orientao dos laboatoristas.
O exame bacteriolgico importante para confirmar um diagnstico, estabelecer
prognstico e selecionar tratamento eficaz. O alcance desses objetivos no depende
somente da exatido e mincia com que so efetuados os exames, mas principalmente de
devida colheita de amostras, evitando contaminao secundria. Um aspecto muito
importante que o clnico deve ter em mente a melhor hora para coleta das amostras, a fim
de maximizar o cultivo laboratorial.

Colheita das
amostras

Remessa para o
laboratrio

Cultivo e
Isolamento

Testes
moleulares

Testes de
sensibilidade
Resultados

Figura 1. Fluxo das amostras remetidas para exame bacteriolgico

TCNICA

As consideraes a seguir so importantes e aplicveis a maioria das amostras a

serem colhidas:

1- Materiais Necessrios: Antes da coleta de amostras o organizao de todo material

utilizado muito importante. No caso de visitas as propriedades rurais muito importante
verificar se estes esto em condies e quantidade necessria, antes da sada para colheita.
Abaixo so listados os materiais necessrio a uma coleta de amostras ao exame
bacteriolgico.

Tabela 1. Materiais necessrios para coleta de amostras para exame bacteriolgico a partir
de necropsia.

Materiais
Avental
Luvas descartveis
Tesoura ponta larga, tesoura ponta fina
Cabo de bisturi
Lmina bisturi
Pina dente de rato
Faca
Fio de algodo
Seringas descartveis de 3ml e 5ml
Alcool de cozinha e soluo de etanol 70%
Lamparina
Sacos plsticos
Swabs
Meio de transporte
Frascos estereis
Caneta, folha de papel para anotaes
Fitas e etiquetas
Caixa de isopor
Gelo reciclvel
Frasco contendo formol

2 - Condies da amostra - A amostra deve ser colhida sob condies estreis, ou ao

menos evitando contaminaes o mximo possvel. Para isto, a coleta do material deve ter

prioridade evitando a manipulao excessiva dos tecidos e fluidos a serem coletados. O uso
de swab para colheita de materiais fistulaos no indicado, pois existe uma grande
probabilidade de contaminao com bactrias da pele. O uso de recipientes e aparelhagem
estreis para colheita fundamental para preveno da contaminao. A colheita acontecer
na fase aguda da doena em animais vivos ou necropsiados logo aps a morte. Esta deve
ser realizada preferencialmente antes do inicio da terapia antimicrobiana, sendo adequado
em alguns casos, manter animais sentinelas livres da alimentao com antimicrobianos, por
48hs.

3- Quantidade de amostra -

A amostra deve ser de tamanho adequado. Os swabs

freqentemente no contm amostra suficiente e representativa do material. Sua utilizao

se restringe quelas situaes onde no possvel se obter volume ou massa coletvel. Para
o estudo microbiolgico de amostras vale o ditado ("se pouco bom, mais melhor").
Deve sempre ter se e mente que vdevemos coletar o mximo de tecido afetado possvel.
Gerlamente, vinte a cinqenta mililitros de fludos e 30 a 100 gramas de tecido so medidas
adequadas, que cobriro as necessidades do laboratrio.

4 - Embalagem - A amostra deve ser individualizada e contida em frasco resistente no

quebrvel

ou adequadamente protegido contra quebradura, ou em sacos plsticos,

previamente identificados.

5 - Conservao - A amostra deve estar protegida contra deteriorao aps a colheita.

Deve-se prevenir ou minimizar danos pela dessecao, oxidao, aquecimento e atividade
enzimtica da prpria bactria ou das clulas e fludos com os quais est em contato. O
procedimento mais importante para minimizar estes danos o rpido processamento das
amostras. Quando isto no for possvel deve proceder-se a refrigerao em trnsito. A
colocao de gelo reciclvel supre esta necessidade. Devemos ressaltar que quando do uso
de gelo no reciclvel importante fecha-lo hermeticamente, para que no derretimento no
orcorra o comprometimento da amostra.

A remessa de swabs deve ser feita em meio de transporte (Stuart, Amies) - so tubos
com meio semi-slido, o qual no permite crescimento mas provem umidade, pH
fisiolgico estvel e baixo potencial de oxido-reduo, prolongando a viabilidade dos
microrganismos em trnsito (ver anexo). Sistemas especiais de transporte so disponveis
para colheita de amostras para culturas anaerbicas. Os swabs de dacron, alginato de clcio
e rayon so os mais apropriados para a colheita do material. Os swabs de fibra de algodo
apresentam efeito nocivo a amostra por apresentarem substncias inibidoras. A sua
utilizao tem sido recomendada se antes do processo de autoclavao forem embebidos
por 5 minutos em soluo de Srensen 0,067M, pH = 7,5. O uso de hastes comerciais no
recomendado, devido possuirem substncias antimicrobianas, geralmente deridaso do
formol.
Amostras para cultivo de bactrias anaerbicas ou microaerfilas, deve-se tomar
cuidados na remessa da amostra. Para tal, devem ser utilizados meios de transporte
especiais. O laboratorista tambm deve ser informado desta suspeita, por que os mesmos
devem ser cultivados sob condies atmosfricas especiais.

6 - Acondicionamento - A amostra ser remetida em caixa isotrmica com tampa

devidamente vedada com fita adesiva. No caso em que as amostras forem enviadas pelo
correio e transportadoras importate avisar o laboratrio do envio via telefone ou correio
eletrnico. Alm disto, importante manter o nmero do protocolo da amostra.

7 - Identificao - Toda a amostra deve ser acompanhada por um documento escrito

contendo informaes identificando o material, a criao de onde origina-se a amostra,
bem como histrico completo do caso, com a suspeita clnica e exames requisitados.
Abreviaes devem ser evitadas sempre que possvel. Alm disto deve possuir o nome
completo, endereo do destinatrio, telefone e e-mail para contatos futuros.

COLHEITA DE AMOSTRAS CLNICAS ESPECFICAS

A) OLHOS: As amostras nos casos de onjuntivite devem ser colhidas com swab,
diretamente das leses oculares, ou do saco conjuntival. A puno com seringa utilizando
agulhas finas (25 ou 27g) podem ser indicadas nos casos de leses profundas. As amostras
devem ser remetidos rapidamente ao laborattio. O uso de meios de transporte muito
importante. A conjuntiva possui uma flora prrpia que pode em alguns casos interfeir nos
resultados.

B) FEZES - "Swab" ou contedo diretamente do reto, colocando em frasco estril. Em

necropsia colher poro de intestino ligando-o com fio de algodo.

C) ABCESSOS - Remet-los inteiros (fechados), puncion-los em seringa (vedando a

extremidade e remetendo-a) ou em frascos estreis. O transporte deve ser realizado
rapidamente a fim de facilitar o isolamento de bactrias anaerbicas.

D) LAVADO PREPUCIAL - Deve ser realizado com soluo salina tamponada fosfatada
- PBS (+ ou - 100 ml) pH = 7,2 , introduzir no prepcio, fazer massagem e colher com
pipeta estril. Um tcnica muito utilizada e o aspirado prepucial, onde se conecta uma
bainha de inseminao a uma seringa de 5ml e aspirar a mucosa do prepucio coletando
amostras que podem ser metidas na prpria bainha, fechada hermticamente ou em frascos
estreis.

E) OSSO LONGO - Metacarpiano ou metatarsiano (canela) - desarticulado, inteiro e livre

de pele, msculos e tendes. Deve ser colhido em enfermidades septicmicas, associado a
outro material nunca isolado.

F) URINA - Colher em frasco esterilizado com tampa de borracha. Deve se colher nas
primeiras horas da manh para facilitar a concentrao do material, obteno resultaos
significativos. Quando possvel atravs de sonda, ou citocentese, sendo a ltima importante
para evitar a ontaminao por bactrias do tratao genitourinrio. A cistocentese muito

utilizada para pequenos animais, contudo no recomendada em animais com alteraes

nervosas, distrbios da coagulao e piometras.

G) LQUIDO SINOVIAL OU HIGROMAS - Colher em seringas esterilizadas enviandoas ou passar para frasco esterilizado.

H) SANGUE - Fazer desinfeco do local e com agulha e seringa estreis colher da veia,
transferindo para frasco estril com anticoagulante (SPS). Em animal morto puncionar
diretamente do corao. Para estudo bacteriolgico deve ser colhido 3 amostras em torno de
10 ml num intervalo de 24 horas.

L) LEITE - O bere e mo do ordenhador devem estar limpos. Fazer desinfeco da

extremidade do teto com algodo embebido em lcool. Desprezar os primeiros jatos de leite
e colher em frasco esterilizado. Identificar quartos colhidos

e de preferncia

individualizados. Colher em torno de 10 ml.

M) SWAB UTERINO (CERVICAL) - Desinfetar a vulva e com auxlio de um espculo,

colher o material do colo uterino com "swab". Enviar em meio de transporte, sendo
possvel fazer coleta intrauterina (swab prprio) para colher material de stios profundos
(ACCU-MED.CORPORATION). Fora os swabs prprios a coleta de materiais no
indicada devido a grande probabilidade de contaminao. O mais inicado nestes casos a
coleta cirurgica ou com espculos vaginais esterilizados.

N) FRAGMENTOS DE RGOS - Retirar fragmentos com cpsula de mais ou menos 7

cm de com primento por 5 cm de largura (30 a 100 gramas).

O) TRATO RESPIRATRIO INFERIOR: A nica maneira de se obter amostras no

contaminadas do trato respiratrio inferior antes da morte do animal so o aspirado e lavado
traqueais. O aspirado utiliza sondas especficas enquanto que o lavado trasntraqueal, ocorre
a introduo de um cateter fino atravs de um orficio feito entre dois anis traqueais.

Solues de Ringer com lactato so intiladas (2-5ml) e aps o inicio de um paroxismo de

tosse o fluido deve ser aspirado e remetido ao laboratrio resfriado.

P) ORELHAS: As secrees devem ser colhidas com auxilio de swab e transportado para
o laboratrio resfriado e em meio de transporte.

Q) PELE: As bactrias comensais so grandes conatminantesdas leses e podem dificultar

em muito o isolamento e caracaterizao bacteriana. Pstulas podem ter seu contedo
aspirado atravs de agulhas finas. Um aspeto importante sempre desinfetar dequadamente
a pele antes da coleta de amostras que pode ser realizada com lcool iodado 1% e lavagem
com etanol 70%. Amostras de ferimentos e queimaduras profundas devem ser colhidas o
mais profuno possvel atravs de agulha fina. A instilao de soluo salina ou Ringer com
lactato podem ser indicados, para aumentar o volume a ser colhido.

SOLUES IMPORTANTES

1. MEIO DE TRANSPORTE STUART MODIFICADO

gar

0,3 g

Glicerofosfato de sdio

1,0 g

Tioglicolato de sdio

0,1 g

Cloreto de clcio

0,01 g

gua destilada

100,0 ml

pH = 7,2
Distribuir em tubos e autoclavar 120C por 15 minutos.

2. ALCOOL IODADO

3. ALCOOL 70%

10

BIBLIOGRAFIA

CARTER, G. R. & COLE, J. R. Diagnostic Procedures in Veterinary Bacteriology and

Mycology. 5 ed. California, Academic Press Inc.; 1990. 620p.

FERREIRA, F.M. Antibioticoterapia em pequenos animais. So Paulo: cone Editora,

1997. 214p.

GARCIA - TINAJERO, R. & CORDOBA-PONCE, R. Manual Ilustrado para

Laboratrio de Bacteriologia Y Mycology. IICA. 1988. 316p.

ENFERMIDADES BACTERIANAS DOS ANIMAIS DOMSTICOS COM

RESPECTIVOS MATERIAIS A SEREM ENVIADOS PARA DIAGNSTICO
1. ACTINOBACILOSE

Colher ndulos, contedo purulento ou linfondos atingidos.

2. BOTULISMO

Alimento suspeito, vmito, fezes, fgado, contedo estomacal e

intestinal, soro sangneo coletado no incio dos sinais clnicos.

3. BRUCELOSE

Soro, feto, contedo estomacal do feto, placenta, smen.

4. CARBNCULO

Osso longo, esfregao de sangue , bao, fgado, linfondos adjacentes a

HEMTICO

rea atingida.

5. CAR. SINTOMTICO

Osso longo, clap de fgado, poro de tecido alterado, fgado.

E GANGRENA GASOSA

11

6. CAMPILOBACTE-

Smen, secreo vaginal (colhido durante o estro) ou abomaso, fgado

RIOSE

e pulmo fetal , raspado e lavado prepucial que deve chegar ao

laboratrio no mximo 6 hs aps a colheita (ver meios e instrues em
anexo).

7. CERATOCONJUNTI- Swab embebido na lgrima (saco conjuntival) do olho atingido, na fase

VITE

de lacrimejamento. Remeter em meio de transporte (no mximo 48 hs

aps a colheita).

8. DIARRIA

Fezes, swab retal, linfondio mesentrico, fgado, intestino delgado e

grosso. (verificar poro mais atingida).

9. ENCEFALITES E

Colher um hemisfrio cerebral, lquor.

MENINGITES
10. ENDOMETRITE

Swab uterino

11. ENTEROTOXEMIA

Contedo do intestino delgado, lquido de ascite, fgado, rim.

12. EPIDERMITE

Swab das leses, crostas e fragmentos de pele.

EXSUDATIVA
13. ERISIPELA

Tonsilas, bao, rins, fgado, leses cutneas, articulaes e sangue.

14. FOOT ROT

Tecido recentemente invadido pela bactria. Dar preferncia a animais

que no tenham sido tratados.

15. HEMOGLOBINRIA Osso longo, fgado, sangue.

BACILAR
16. LEPTOSPIROSE

Crebro, fgado, rim, placenta, urina, soro.

17. MASTITE

Leite (5 a 10 ml)

12

18.

Fezes, poro terminal do intestino delgado (prximo a vlvula leo-

PARATUBERCULOSE

cecal).

19. RINITE ATRFICA

Swab nasal, fragmento dos cornetos.

20. TUBERCULOSE

Linfondos caseosos, fragmento de rgos afetados.

ANEXOS
QUADRO DE REFERNCIA DE MICRORGANISMOS ENCONTRADOS EM
AMOSTRAS DE DIFERENTES STIOS NOS ANIMAIS DOMSTICOS

TIPO DE AMOSTRA

MICRORGANISMO PROVVEL

MORFOLOGIA
(GRAM)

Swab Nasal

Swab de Ouvido

Staphylococcus sp.

coco (+)

Streptococcus sp.

coco (+)

Pasteurella sp.

bacilo (-)

Haemophylus sp.

bacilo (+)

Corynebacterium sp.

bacilo (+)

Bordetella sp.

bacilo (-)

E. coli

bacilo (-)

Mycoplasma sp.

FP (Giemsa)

Staphylococcus sp.

coco (+)

Streptococcus sp.

coco (+)

proteus sp.

bacilo (-)

Pseudomonas sp.

bacilo (-)

Klebsiella sp.

bacilo (-)

Corynebacterium sp.

bacilo (+)

13

Swab e Lquido Sinovial

Staphy. e Streptococcus sp.

E. coli
Erisipelothrix sp.
Actinobacillus sp.
Haemophylus sp.
Mycoplasma sp.
Salmonella sp.
Actinobacillus sp.

bacilo (-)

Clostridium sp.

bacilo (+)

Bacteroides sp.

BP (-)

Actinomyces sp.

BP(+)

Corynebacterium sp.

bacilo (+)

Staphy. e Streptococcus sp.

coco (+)

Pseudomonas sp.

bacilo (-)

Dermatophilus congolensis

bacilo (+)

Brucella sp.

coco-bacilo (-)

Leptospira sp

E (Giemsa)

E. coli

bacilo (-)

Corynebacterium sp.

bacilo (+)

Klebsiella sp.

bacilo (-)

Contedo Purulento,

Staphy., Strep. sp.

coco (+)

Lquidos Pleurais e

Corynebacterium sp.

bacilo (+)

Peritoniais

Pasteurella sp.

bacilo (-)

Actinobacillus sp.

bacilo (-)

Actinomyces sp.

BP (+)

Haemophilus sp.

bacilo (-)

Pseudomonas sp.

bacilo (-)

Bacteroides sp.

BP (-)

Clostridium sp.

bacilo (+)

Pele e Msculos

Rim

14

Lquido Cerebro-espinhal

Pulmo

Fgado

Urina

TIPO DE AMOSTRA

Listeria sp.

bacilo (+)

Achromobacter sp.

coco-bacilo (-)

Haemophilus sp.

bacilo (-)

Staphy., Strep. sp.

coco (+)

E. coli

bacilo (-)

Mycoplasma sp.

FP (Giemsa)

Mycobacterium sp.

bacilo (+)

Diplococcus sp.

diplococo (+)

Bacteroides sp.

BP (-)

Mycoplasma sp.

FP (Giemsa)

Haemophilus sp.

bacilo (-)

Pasteurella sp.

bacilo (-)

Actinomyces pyogenes

bacilo (+)

Salmonella sp.

bacilo (-)

Bordetella bronchiseptica

bacilo (-)

Bacteroides sp.

BP (+)

Corynebacterium sp.

bacilo (+)

Clostridium sp.

bacilo (+)

Achromobacter sp.

coco-bacilo (-)

Salmonella sp.

bacilo (-)

E. coli

bacilo (-)

Leptospira sp.

E (Giemsa)

Staphy., Strep. sp.

coco (+)

Corynebacterium sp.

bacilo (+)

Actinobacillus sp.

bacilo (-)

MICRORGANISMO PROVVEL

MORFOLOGIA
(GRAM)

15

Leite

Exsudato Ocular

Sangue

Material Fecal

Staphy., Strept. sp.

coco (+)

E. coli

bacilo (-)

Klebsiella sp.

bacilo (-)

Pseudomonas sp.

bacilo (-)

Brucella sp.

coco-bacilo (-)

Mycobacterium sp.

bacilo (+)

Mycoplasma sp.

FP (Giemsa)

Haemophilus sp.

bacilo (-)

Moraxella sp.

coco-bacilo (-)

Neisseria sp.

diplococo (-)

Mycoplasma sp.

FP (Giemsa)

B. anthracis sp.

bacilo (+)

Pasteurella sp.

bacilo (-)

Yersinia sp.

bacilo (-)

Coxiella sp.

BP (-)

Clostridium sp.

bacilo (+)

Streptococcus sp.

coco (+)

Salmonella sp.

bacilo (-)

Erysipelothrix sp.

bacilo (+)

E. coli

bacilo (-)

Salmonella sp.

bacilo (-)

Enterococcus sp.

coco (+)

E. coli

bacilo (-)

Klebsiella sp.

bacilo (-)

Proteus sp.

bacilo (-)

Mycobacterium sp.

bacilo (+)

Vibrio sp.

BC (-)

Alcaligenes sp.

bacilo (-)

16

Trato Genital e Fetos

Brucella sp.

coco-bacilo (-)

Leptospira sp.

E (Giemsa)

Salmonella sp.

bacilo (-)

Campylobacter sp.

E (Campo escuro)

E. coli

bacilo (-)

Listeria sp.

bacilo (+)

Corynebacterium sp.

bacilo (+)

Staphy., Strept. Sp.

coco (+)

FONTE: GARCIA TINAJERO & CORDOBA (1988)

MORFOLOGIA (Abreviaturas):

(+)

= gram positivo

(-)

= gram negativo

BP

= bacilo pleomrfico

FP

= Formas pleomrficas

= Espirilo

BC

= bacilo curvo

DIAGNSTICO MOLECULAR DE ENFERMIDADES INFECCIOSAS

Tendo em vista os avanos obtidos na biologia molecular, muitas tcnicas vm

sendo aplicadas para precisa classificao e diagnstico das enfermidades bacterianas dos
seres humanos e animais. Estas tcnicas apresentam diversas vantagens, entre elas a grande
sensibilidade, preciso e especificidade, no necessitar da viabilidade do organismo para
sua caracterizao, bem como automao, praticidade e facilidade de execuo. Entretanto
estas tcnicas podem apresentar um alto custo, principalmente quanto poucas amostras so
analisadas, uma vez que necessitam de reagentes importados, de equipamentos especficos
e mo-de-obra especializada. A maior utilizao destas tcnicas tem possibilitado uma
17

reduo considervel no custo dos exames. A tabela 1 relaciona as tcnicas clssicas

(classificao morfolgica, bioqumica e tintorial), quanto as suas vantagens e
desvantagens.

Tabela 1. Vantagens e desvantagens das tcnicas fenotipicas e moleculares

utilizadas no laboratrio de microbiologia.

Mtodos fenotpicos

Vantagens

Desvantagens

Simplicidade

Subjetividade na

Baixo custo

interpretao dos resultados

Fcil padronizao

Necessidade da viabilidade

Grande utilizao

do microrganismo
As vezes baixa
reprodutibilidade
Demora

Mtodos moleculares

Sensibilidade e preciso

Custo

Facilidade de execuo

Necessidade

Automao

treinado

Rapidez

Algumas vezes limitado

de

pessoal

TCNICAS BASEADAS NO ESTUDO DOS CIDOS NUCLICOS

PCR E SUAS VARIAES

POLIMERASE CHAIN REACTION-PCR

(REO EM CADEIA DA POLIMERASE)

18

INTRODUO
A reao em cadeia da polimerase (PCR) um mtodo para amplificao in vitro
de segmentos de DNA. Este mtodo considerado excelente para caracterizao de cidos
nuclicos, especialmente no que diz respeito a sua sensibilidade e especificidade. Sendo
que pelo PCR, podem ser amplificados fragmentos de cido nuclicos, a partir de
picogramas do DNA molde presente nas amostras. O nmero de aplicaes para o PCR
parece infinito, sendo que entre elas podemos citar clonagem e seqnciamento de DNA e
cDNA genmicos, mutagnese in vitro, anlise de fingerprinting, medicina forense,
testes para deteco de agentes infecciosos, diagnstico de doenas gentica perinatais,
anlise de variaes nas seqncias genticas allicas, anlises na estrutura da transcritos de
RNA.

TCNICA

Esta tcnica baseada num processo cclico que mimetiza a replicao do DNA,
uma vez que o nmero de molculas de DNA duplica aps cada ciclo. Logo aps x ciclos
teramos 2x molculas de DNA. Ou seja, aps 30 ciclos seriam obtidos milhes de
molculas de DNA amplificado, o que justifica a sensibilidade da tcnica.

As fases do Ciclo da PCR

Desnaturao: A desnaturao ocorre a altas temperaturas (rupturas da pontes de H),

sendo que as duas fitas devem ficar separadas at que a temperatura seja reduzida.
Geralmente esta temperatura pode ser de 91-97C. um dos fatores limitantes da temperatura
de desnaturao, do nmero de ciclos e o tempo de execuo do PCR a meia vida da
DNA polimerase (enzima que realiza a duplicao do DNA). A meia vida da Taq

19

polimerase de 30 minutos a 95C, o que explica a realizao de 30 ciclos. Geralmente o

tempo de desnaturao varia de 15s (temperaturas elevadas, ex.: 96C) a 1 minuto (94-95C)

Annealing / Associao dos primers: Nesta fase os primers (oligonucleotdeos sintticos),

sintetizados para serem complementares as regies franqueadoras do fragmento a ser
amplificado, sendo que os dois primers devem ter os stios 3voltados para si e no devem
ser complementares um ao outro (formao de primer-dimer). Devido o excesso de primers
colocados em presena do DNA, a formao de um complexo primer-template favorecida
em relao a reassociao das fitas de DNA desnaturadas. A unio dos primers ao DNA
molde ocorre quando a temperatura baixa. A temperatura adequada para o annelaing
depende diretamente do tamanho e constituio dos primers (TM). Geralmente a
temperatura de annealing varia de 55-65C, sendo que o tempo nunca deve exceder 90 seg.,
pois pode haver hibridizaes inespecficas.

Extenso: amplificao dos segmentos de DNA realizado por uma polimerase 5-3para
replicao do complexo primer-template, sendo que o primer incorporado ao produto de
amplificao. A amplificao destes complexos d origem a dois tipos de molculas.. A
temperatura de extenso e de melhor atividade da enzima de 72C, sendo que o tempo
pode variar de 30 seg 3 minutos, entretanto fragmentos maiores podem requerer um
tempo maior (3Kb).

OBS.:
* Como dito anteriormente o nmero de ciclos normalmente utilizado em PCR so de 30,
sendo que esta varivel depende da quantidade inicial de DNA presente na amostra.
Entretanto um nmero maior de ciclos pode no ser interessante, uma vez que existe um
efeito plateau onde a amplificao do DNA cessa (meia vida da enzima e esgotamento dos
constituintes da reao-mix);
* As diferentes temperaturas e tempo necessrios para cada ciclo so obtidos com uma
mquina denominada termociclador.

20

Constituintes do mix da PCR

Template: a molcula de cido nuclico molde utilizado para amplificao com os

primers. Existem muitos mtodos para preparao do DNA para PCR, sendo que em alguns
casos at DNA com um certo grau de degradao pode ser utilizado, principalmente para
amplificao de fragmentos de tamanho menor. Um grande nmero de substncias
encontradas na amostra (DNA) podem reduzir a eficincia do PCR, como uria, SDS,
acetato de sdio, EDTA, fenol, etanol, hemoglobina entre outros. Geralmente 100ng de
DNA genmico so suficientes para amplificao por PCR.

Primers: Oligonucleotdeos sintticos que variam de 18-30nt, que so projetados para

serem complementares as extremidades do fragmento de DNA a ser amplificado. Os
primers podem ser especficos para determinada regio do DNA ou serem universais.
Primers universais contm seqncias que so extremamente comuns a um grande nmero
de espcies. Como exemplo tem-se os primers universais para bactria. Em casos onde no
se sabe a seqncia total do stio a ser amplificado, devem ser utilizados primers
degenerados que so construdos a partir da seqncia de protena (cdigo gentico).
Entretanto alguns nucleotdeos no so precisamente estimados, devido degenerao
prrpia do cdigo gentico.
Ex.: HisPheProPhe=CAYTTYCCNTTY, onde Y=pirimidinas, N=qualquer base
A temperatura de anelamento e a concentrao de Mg presente no tampo so muito
importantes para a correta associao dos primers com a seqncia de interesse e desta
forma para especificidade do PCR

DNTPs: So os nucleotdeos (dATP, dCTP, dGTP e dTTP) que servem de substrato para
duplicao das seqncias de DNA, sendo utilizados numa mistura. Em alguns casos estes
nucleotdeos podem ser marcados com compostos radioativos ou flourognicos para o
sequenciamento de regies do DNA.

21

Enzima: Inicialmente o PCR utilizava o fragmento Klenow da DNA pol I de E.coli,

entretanto este fragmento era instvel a temperatura e devia ser reposta aps cada etapa de
desnaturao (em cada um dos 30 ciclos!), constituindo num processo laborioso. Porm, o
isolamento e clonagem de DNA polimerases de organismos termoflicos, que crescem a
elevadas temperaturas (algumas prximas a 100C), permitiu avanos significativos a
tcnica de PCR. A enzima mais utilizada para o PCR a DNA polimerase (Taq DNA
polimerase) de Thermus aquaticus, uma alga que cresce em poos vulcnicos. Entretanto
esta enzima conhecida por inserir erros (substituies) na sequncia de DNA amplificada,
uma vez que esta no apresenta atividade de proofreading 3-5 e exonuclease. Por esta
razo enzimas com maior preciso se tornam adequadas para amplificao de fragmentos
grandes (devido a problemas com a processividade) e onde seja necessria uma grande
fidelidade com a seqncia alvo.

Tampo de enzima: tampo recomendado para a DNA polimerase, sendo que este
geralmente contm. Deve sempre ser diludo em gua Milli-Q visando obteno de uma
concnetrao dos sais adequadas, sendo:

10-50mM Tris-Cl, pH 8,3

50mM de KCl
1,5mM ou mais de MgCl2
As concentraes de magnsio podem variar de acordo com o grau de especifidade
requeridos pelo teste, quanto maiores as concentraes deste on maior a especificidade do
PCR.

Verificao dos produtos amplificados: Realizada em gel de agarose, corado com

brometo de etdeo e visualizados sob luz UV.

Cuidados na realizao do PCR:

22

CONTAMINAO!!!!!!!!!!!!!!!!

*Sempre preparar a mix num local onde no exista manipulao com cidos nuclicos
*Utilizar tips novos
*Utilizar luvas
*Evitar maipulao exagerada
*Utilizar pipetas livres de contaminaes
*Acrescentar o template num local diferente daquele onde se prepara a mix

VARIAES DA PCR

PCR multiplex

Nesta tcnica utilizam-se mais de um par de primers, sendo obtidas mais de um

resultado ao mesmo tempo, poupando tempo e reagentes. Pode ser utilizado para identificar
dois genes de um mesmo organismo, ou dois microrganismos diferentes presentes numa
amostra. Um problema associado a esta tcnica a competio entre os primers para
amplificao de suas seqncias alvo, a formao de primers-dimers e a temperatura de
annealing que deve ser a mesma para os dois conjuntos.

PCR Nested

Nesta tcnica o DNA inicialmente amplificado com um para de primers e em

seguida este produto de amplificao utilizado como template (molde) para um novo PCR
empregando primers construdos para regio interna a amplificada inicialmente. Uma
variao da tcnica o PCR semi nested, onde apenas um primer e desenhado para regio
interna do produto amplificado na primeira reao, sendo o utilizado um dos primers
utilizados inicialmente para completar o para, ou seja, amplificada uma extremidade. Esta

23

tcnica utilizada para melhorara tanto a sensibilidade como especificidade, porm o

problema de contaminao maior, bem como a interferncia dos constituintes da primeira
reao na segunda (excesso de primers, DNTP, produtos abortados, impurezas..).

RT-PCR

PCR empregado para verificar a expresso de genes e montar bancos de cDNA.

Neste mtodo ocorre inicialmente a sntese de uma fita de DNA molde a partir de uma fita
de RNA, utilizando a enzima transcriptase reversa (retrovrus). Inicialmente gera-se uma
molcula hbrida DNA-RNA, contudo a fita de RNA removida pela adio de RNAses
(RNAse H) e a molcula de DNA serve de molde para o ensaio de PCR convencional.
OBS.: RNA no serve como molde para amplificao por PCR.

ELETROFORESE EM AGAROSE (DNA)

A eletroforese em gel de agarose (polmero que se forma quando hidratado fundido
e colocado em temperatura ambiente) permite a separao de fragmentos de DNA atravs
de uma rede de poros, que permitem a rpida passagem dos fragmentos pequenos de DNA
enquanto retarda os fragmentos maiores. Est separao s possvel devido a carga
eltrica negativa caracterstica do DNA. Quando as molculas de DNA so colocadas num
campo eltrico estas tendem a migrar do plo negativo para o positivo, permitindo desta
forma a separao no gel de agarose. Num gel de agarose O DNA detectvel pela adio
de brometo de etdeo o qual um agent intercalante que se coloca entre as fitas de DNA.
Quando o brometo de etdeo colocado sobre luz ultravioleta este emite uma fluorescncia
laranja, visvel a olho n.
As amostras devem ser aplicadas no gel com um tampo de amostra que contm
compstos de alta densidade (glicerol, xilol e azul de bromotimol), que permitem a descida
do DNA para os poos formados no gel.para assegurar a correta migrao do DNA estes
devem ser colocados numa cmara contendo um tampo (TBE ou TAE), sendo que a

24

velocidae de migrao do DNA no gel est diretamente relacionado com a concentrao de

agarose e voltagem presente no campo eltrico.

Tabela 2. Resoluo dos gis de DNA

Matriz
poliacrilamida

agarose

Pulse-field

Espectro de separao

Obs.

20

5- 100pb

15

20-150pb

60-400pb

Sequenciamento de DNA

0,2-1,5Kb

PCR

1,5

0,3-3Kb

PCR

1,0

0,5-5Kb

0,8

1-71Kb

DNA GENMICO

0,4

5-30Kb

Mega plasmdeos

>5000Kb

CHEF

SOUTHERN E NORTHERN BOT

Esta tcnica tem como prncipio a complementaridade do DNA e do RNA, bem

como a desnaturao e renaturao de suas fitas. Entre os inmeros fragmentos presentes
amostra de DNA genmico, digerido com enzimas de restrio fica impossvel identificar
genes especficos, contudo se fragmentos especficos do gene de estudo forem marcados,
estes podem procurar seqncias complementares neste DNA total da bactria e se ligar,
indicando em que fragmento de restrio o gene se encontra. Alm disto esta tcnica pode
ser usada para verificar identidade de produtos amplificados (por PCR) ou de misturas de
RNAs, ou seja se dois produtos de PCR ou molculas de RNA so iguais ou
complementares estes devem hibridizar.
Nesta tcnica o DNA ou RNA extremamente puro e em alta quantidade deve ser
aplicado num gel de agarose para que todos os fragmentos a serem estudados (DNA total
bacteriano digerido com enzimas, fragmentos de PCR) possam ser separados. Em seguida

25

as molculas de DNA so imobilizadas em membranas de hibridizao, a fim de facilitar a

manipulao. Estas membranas podem ser de nylon ou nitrocelulose e so carregadas
positivamente, o que permite que o DNA ligue-se a elas na mesma posio que ocupavam
no gel anteriormente. Para transferncia pode ser utilizada corrente eltrica ou gradiente de
sais e lcalis. Em seguida, o DNA deve ser desnaturado pelo aumento da temperatura e a
sonda (gene conhecido ou produto de PCR conhecido) marcada, com material radioativo ou
peroxidase so acrescentadas, sendo esta mistura incubada. Depois de um perodo de
incubao (que pode ser de horas a dias), renaturao e lavagens para remover a sonda no
ligada, a membrana colocada sobre um filme de raio X para que ocorra a sensibilizao
do mesmo. Se esta ocorrer, ou seja, se verificarmos bandas presentes no filme isto indica
que a sonda ficou presa ao DNA ou RNA estudados, estes so complementares. Estas
tcnicas so utilizadas para aumentar a sensibilidade dos mtodos de diagnstico para
bactrias. Para que as molculas de RNA hibridizam, qualquer impedimento espacial deve
ser removido (pareamentos intra molcula), pela adio de um agente desnaturante, como
exemplo a formamida.

2.Comparao da sensibilidade de tcnicas de deteco de microrganismos

Mtodo

Sensibilidade em nmero de clulas

Colorao com brometo de etdeo

108

Sondas radiomarcadas

106

Sondas maracadas com enzimas

104

PCR

10

ANLISE DO DNA POR RESTRIO COM ENDONUCLEASES

Endonucleases: so enzimas que tem a capacidade de clivar o DNA e stios

especficos de modo altamente preciso. Estas enzimas normalmente reconhecem seqncias
ditas palindrmicas, ou seja que podem ser lidas da mesmas forma em ambas as fitas de

26

DNA, tanto no sentido 5-3, como no 3-5 ( Ex.: SOCORRAM ME SUBI NO ONIBUS
EM MARROCOS). As endonucleases so produzidas geralmente para degradar DNA
exgeno (bacterifagos), logo so inefetivas contra o DNA da prpria bactria. As
endonucleases podem tanto clivar o DNA em nucleotdeos na mesma posio gerando
extremidades blunch ou cegas, ou clivarem as fitas de DNA nuleotdeos em posies
diferentes no palndromo (extremidades coesivas).
As endonucleases recebem o nome das bactrias onde foram encontradas, senod que
alguns exemplos podem ser vistos na tabela 3

Tabela 3. Principais endonucleases utilizadas em biologia molecular

Enzima

Organismo

Sitio no DNA 5-3

AluI

Arhobacter luteus

AG/CT
TC/GA

BamHI

Bacillus amyloliquefaciens

G/GATCC
CCTAG/G

BglII

Bacillus globigii

A/GATCT
TATAG/A

EcoRI

Escherichia coli

G/AATTC
CTTAA/G

HaeIII

Haemophillus aegyptius

GG/CC
CC/GG

Hind III

Haemophillus influenzae Rd

A/AGCTT
TTCGA/A

KpnI

Klebsiella pneumoniae

C/CATGG
GGTAC/C

PstI

Providencia stuartti

CTGC/C
G/ACGC

SmaI

Serratia marcensces

CCC/GGG
GGG/CCC

27

TCNICAS BASEADAS NO ESTUDO DAS PROTENAS

Estas tcnicas tambm exigem a viabilidade da bactria, uma vez que uma protena s ser
expressa em quantidades detectveis se a bactria estiver viva e fazendo a sua expresso
(traduzindo a protena de interesse). Alm disto, muitas destas tcnicas utilizam anticorpos
para detectar determinadas protenas logo exigindo que estas sejam capazes de induzir uma
resposta imune especfica (resposta contra uma protena em especial sem respostas
cruzadas). Estes anticorpos podem ser obtidos de diferentes maneiras

Hiperimunizao: Por esta tcnica cobaios so inoculados sucessivamente com a protena

de interesse fazendo com que este animal produza grande quantidades de anticorpos. Para
obtermos estes anticorpos devemos sangrar o animal e purificar o soro que estar rico em
anticorpos.

Ac Monoclonais: Para obteno de anticorpos monoclonais,

linfcitos B (clulas

produtoras de ac) so fusionadas a clulas carcinognicas (com alto potencial de

multiplicao e sobrevivncia). Com isto teremos uma clula capaz de produzir anticorpos
e sobreviver in vitro e in vivo. Os anticorpos podem ser obtidos de duas formas: ou
inoculando estas clulas em cobaios (lquido asctico) e inoculando a protena de interesse
ou em placas de cultivo celular (sobrenadante).

ELETROFORESE PARA PROTENAS SDS-PAGE (POLIACRILAMIDE GEL OF

ELECTROPHORESIS)

A eletroforese de protenas uma tcnica muito utilizada para determinar a presena

de determinadas protenas bacterianas como enzimas, protenas de superfcie e toxinas. As
protenas podem ser obtidas pela lise simples da bactria, por processos fsicos e qumicos,
entretanto muitas vezes protocolos elaborados para purificao destas podem ser
necessrios. Entretanto, um aspecto comum para todas as protenas que estas devem estar
desnaturadas, o que obtido pela fervura com mercaptoetanol e que estas devem ter suas

28

cargas positivas neutralizadas (para que todas possam ter a mesma orientao de corrida no
gel). Para isto utilizado o SDS, o qual um poderoso detergente aninico (agrega radicais
negativos e neutraliza positivos), entretanto este tambm induz a desnaturao protica.
As amostras de protena ento migram, sendo que os poros formados pela
acrilamida separam as protenas pelo seu peso molecular. A acrilamida um polmero que
se forma aps a mistura de TEMED e persulfato de amnio. Para deteco das protenas
so usados corantes contendo cido tricloroactico, Comassie Blue ou prata (somente para
protenas com resduos de lisina, cistena e metionina).

Eletroforese bidimensional: analisas as diferenas na massa e potencial isoleltrico das

protenas, produzindo maiores informaes a respeito das mesmas.

Gel de atividade: para muitas enzimas se torna necessrio a determinao de sua atividade
in vitro, para isto pode-se usar o gel de acrilamida, entretanto sem SDS, uma vez que este
induz a desnaturao protica com conseqente perda de atividade. Em seguida ensaios
enzimticos podem ser realizados sobre o gel, acrescentando-se o substrato para a enzima e
medindo o produto final formado.

WESTERN BLOT OU IMUNOBLOT

Esta tcnica se assemelha em muito com a tcnica de southern blot uma tcnica
muito sensvel para deteco de uma determinada protena. Nesta tcnica os gis de
poliacrilamida so utilizados para separar misturas de protenas. Em seguida estas so
transferidas por potencial eltrico para membranas de nylon (membranas de Nc ligam-se
muito mal a protenas). Em seguida, anticorpos primrios (produzidos de modo descrito
acima) so incubados com a membrana e se a protena de interesse estiver presente estes se
fixaro. Se estes anticorpos estiverem marcados radioativamente, ou com preroxidase estes
produziro uma impresso no filme de raio X, indicando a presena da protena de estudo.

29

Porm se este anticorpo no estiver marcado, anticorpos secundrios marcados devem ser
utilizados.

ELISA (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY)

Esta tcnica apresenta uma grande aplicao nos mais diferentes campos da
biologia. Entre as muitas vantagens desta metodologia podemos citar a simplicidade,
praticidade, rapidez, sensibilidade e especificidade, segurana e custo. Porm equipamentos
especficos so necessrios para leitura dos resultados. O principio da tcnica est na
habilidade de anticorpos se ligarem a protenas. Estes anticorpos conhecidos so ligados a
enzimas que em presena de certos substratos levam ao desenvolvimento de cor que pode
ser detectada de modo muito preciso em espectrofotmetros (leitores de ELISA). Podem
detectar tanto as bactrias como os anticorpos especficos para as protenas bacterianas.

Os passos bsicos de em ELISA so descritos abaixo:

1. ligao passiva de protenas ou anticorpos ao plstico

2. Lavagem para remover excessos
3. Adio da amostra (contendo ac ou protenas)
4. Uso de protenas inertes (molico) para reduzir respostas inespecficas
5. Nova lavagem
6. adio de um anticorpo ou anti-anticorpo maracado com uma enzima
7. Uso de protenas inertes (molico) para reduzir respostas inespecficas
8. Nova lavagem
9. Adio de um substrato e incubao
10. parada na catlise
11. medida da cor por espectrofotometria

30

ESTUDOS DE HIBRIDIZAO IN SITU

Utiliza sondas (DNA ou RNA) ou anticorpos para deteco de cidos nuclicos ou

protenas especificas de bactria diretamente nos tecidos do hospedeiro. Estas tcnicas
s so realizveis em amostras de cortes histolgicos, ou seja, oriundo de necropsias ou
bipsias.

Streptococcus equi equi (GARROTILHO, STRANGLES)

Etiologia

O garrotilho, tambm conhecido como Strangles (do ingls enforcar) uma enfermidade
respiratria aguda dos eqinos, caracterizada pela inflamao mucopurulenta das bolsas
guturais e linfadenite com formao de abscessos, especialmente nos linfonodos
submandibulares e retrofarngeos. Esta bactria traz um grande prejuzos aos criatrios
eqinos do mundo, a ponto de em 2000 iniciar-se o projeto genoma de S. equi equi,
concludo em 2001, que possibilitou o acesso gratuito a 99% das seqncias de DNA
obtidas e ao estudo de possveis candidatos para o desenvolvimento de vacinas contra a
bactria.

Patogenia

A infeco geralmente inicia pela inalao ou ocasionalmente por inalao. Aps adentrar
no trato respiratrio superior esta alcana rapidamente os linfonodos da cabea. Neste local
a bactria replica e atrai inmeras clulas de defesa, como macrfagos e neutrfilos. A
inflamao evolui para formao de pus, o qual drenado atravs de sinus. Estes processo
geralmente envolve duas a trs semanas onde so observados sinais de depresso, perda de
apetite, febre, descarga nasal mucopurulenta e dispnia. A formao e ruptura dos
abscessos em outros rgos so denominados garrotilho bastardo e pode levar a morte do
animal acometido (10% dos casos). Outra complicao observada a prpura hemorrgica
31

(petquias e edema generalizado, com complicaes articulares e olhos associada a

formao de imunocomplexos entre anticorpos e a proteina M-like do S. equi equi. Entre
os fatores implicados na virulncia do S. equi eui podemos citar:

- Adesinas: As adesinas de S. equi equi so muitos importantes para que a bactria possa
colonizar e se nutrir nos mais diferentes tecidos animais. Os principais receptores
encontrados nos tecidos so a fibronetina e o fibrinognio.
- Cpsula: Cepas acapsuladas produzidas no laboratrio foram capazes de aderir e persistir
nas bolsas guturais, entretanto no conseguiram reproduzir a s alteraes patologias.
- Protena Associada ao Hialuronato (HAP): uma protena de 53kDa associada a sntese
da cpsula, sendo, que anticorpos contra esta protena, tem reduzido consideravelmente a
formao de cpsula e a patogenicidade bacteriana. Em virtude disto diversos estudos vem
sedo desenvolvidos para a utilizao desta na confeco de vacinas de subunidades.
-Proteina M: So protenas que ligam o fibrinognio e possuem a capacidade de inibir a
fagocitose. Esta protena foi grandemente associada a patogenicidade bacteriana, contudo
recentemente sua propriedade subespcie especifica tem demonstrado um grande potencial
na taxonomia bacteriana, bem como bactrias que possuem um deleo (protena truncada)
na regio amino-ternimal tem indicado a perda da patogenicidade pelo isolado e a sua
presnea como um portador. A atividade antifagocitria desta protena parece estar
associada a dois fatores: inibio na deposio do C3b e ligao ao fibrinognio, que inibe
a fagoitose.
- SOD: Ainda esta sendo estudada, embora o S. equi equi possua uma Mn-SOD.

Epidemiologia

A enfermidade afeta eqinos de todas as idades, contudo comum em animais com

menos de dois anos de idade. Os animais infectados adquirem imunidade, embora possam
adoecer novamente. A gua transmite a imunidade passiva ao potro por at 3 meses.

32

A transmisso ocorre pelo contato direto entre animais doentes e sadios. Tratadores
tambm podem ser indicados como transmissores, assim como gua, cama, estbulos,
utenslios e insetos. O S. equi equi pode permanecer vivel por vrias semanas ou meses.
Vinte por cento dos animais infectados albergam a bactria durante a recuperao. O
estresse, transporte excesso de trabalho e infeces virais aumentam a susceptibilidade dos
animais e precipitam, surtos.

Sinais Clnicos

Os animais apresentam febre (41C), anorexia, depresso e corrimento nasal

mucopurulento e bilateral. O animal pode apresentar tambm tosse, devido a compresso da
laringe ou faringe. O animal apresenta a cabea baixa e conjuntivite purulenta pode ser
observada. O infarto dos linfonodos ocorre rapidamente com comprometimento dos
linfonodos regionais, em especial o retofarngeo e submandibular. Estes encontram-se na
maioria das vezes edemaciados e doloridos, inicialmente firmes tornando-se com a
evoluo do abscesso amolecidos. Em 10 dias pode ocorrer a ruptura dos abscesso, com
elimincao degrandes qauntidades de pus amarelado de consistncia amarelada . a ruptura
interna dos abscesso pode levar a formao de abscessos no fgado,

rins, SNC e

articulaes.

Patologia

AS leses observadas so inespecficas e caracterizam-se por rinite, faringite e laringite

aguda. Nos linfonodos se observa grande quantidade de pus.

Diagnstico

O diagnstico baseia-se, principalmente nos achados clnicos e na demonstrao da

bactria em esfregaos de exsudato nasal ou pus. O RX dos linfonodos pode confirmar o
diagnstico. Com tudo esta s e definitiva pelo isolamento bacteriano. O S. equi equi pode

33

ser isolado em AS a partir de swabs colhidos e enviados em leite molico estril.

caractersticos para identificao a formao de gama hemlise (total). A hemlise
associada a patogenicidade bacteriana.
O garrotilho pode ser confundido em sua fases

iniciais com outras infeces

viricas, como a influenza eqina e com outras infeces piognicas, como a pneumonia por
S. equi zooepidemicus. Neste caso a diferenciao torna-se complicada pela similaridade
entre as duas subespcies.
Vrios mtodos para o diagnstico molecular da enfermidade vem sendo
pesquisados. Um PCR baseado na protena M-like detectou 90% dos carreadores, enquanto
que a cultura sozinha detectou apenas 60%. Contudo a PCR s obteve resultados
conclusivos, quando amostras repetidas foram colhidas, indicando a necessidade de outros
mtodos de diagnstico. Recentemente tcnica de PCR para deteco de amostras de S.
equi equi em carreadores (com deleo da protena M) e o sequenciamento de DNA para
diferenciao das duas subespcies esto em desenvolvimento no pas.

Tratamento

O tratamento da enfermidade indicado no caso de complicaes respiratrias e

febre, sendo indicado por no mnimo 7 dias.

O uso dos antibiticos no incio da

enfermidade est associado a reduo na formao dos abscessos. O S. equi equi sensvel
a penicilinas e sulfas, sendo resistentes a estreptomiinas, tetraciclinas e gentamicina.
Contudo o uso de antibiticos pode ser ineficaz, principalmente devio a fraca irrigao dos
abscessos impedindo a entrada das drogas.
O uso do calor tambm pode ser indicada para amolecimento e

facilitar a

drenagem. Aps a drenagem o tratamento com iodo importante para evitar infeces
secundrias.

34

Controle e Profilaxia

Em surtos de garrotilho se torna importante o isolamento dos animais de no mnimo

4-5 semanas, bem como a quarentena dos animais que entram na propriedade. Animais
convalescentes podem manter a bactria por mais de seis semanas nas bolsas guturais.
Cuidados devem ser tomados com material que entrar em contato com os animais doentes,
como cordas, baldes e seringas. Os estbulos devem ser limpos e as camas queimadas.

Infeco por Rhodococcus equi em potros

Etiologia

R. equi um cocobailo gram positivo, previamente classificado com

Corynebacterium equi. Esta bactria apresentam colnias mucides, coalescentes e branco
acinzentadas.

Algumas colnias apresentam a colorao Salmon. Esta bactria um

patgeno oportunista que ocasiona um broncopneumonia piogranulomatosa, enterite

ulcerativa e linfadenite mesentria em potros com menos de trs meses de idade. Bovinos,
caprinos, sunos e at o homem podem ser infectados. Nos seres humanos esta bactria
acomete hospedeiros imunossuprimidos, como aidticos, transplantados e doentes crnicos.
Um tero das infeces humanas acontecem sem o contato com eqinos. Isto pode ser
explicado pelo carter telrio da bactria, sobrevivendo no solo de parques e praas nas
grandes cidades.
A principal fonte de contaminao dos potros pela bactria so as fezes de animais
doentes, ricos em amostras virulentas. A contaminao do solo acontece com disseminao
da bactria pelo vento, indicando alta na prevalncia nos meses de vero. O potro se
contamina, principalmente pela inalao ou ingesto.

Patogenia

35

Aps a infeco esta bactria intracelular fagocitada pelos macrfagos levando ao

desenvolvimento de uma leso piogranulomatosa. A base da patogenicidade bacteriana est
associada em sua habilidade em persistir a morte intracelular nos macrfagos. Esta
encontra-se associada a inibio da juno fagolisossomal, que ocorre pela presena da
protena associada a virulncia (VAP). Esta protena, na verdade uma famlia de protenas
(VAP A-G) codificada por genes num operon localizado num megaplasmdeo de 8590Kb. Este plasmdeo encontrado numa nica cpia por clula bacteriana e a sua perda
natural (cura) est associada na perda da patogenicidade dos isolados para os eqinos.
Contudo ensaions em camundongos imunossuprimidos e em achados clnicos humanos
indicam que para homem isolados sem o plasmdeo de virulncia podem ainda ser
patognicos.
Entre os demais fatores de virulncia podemos citar o fator equi (colesterol
oxidase), resposvel pela penetrao da bactria nos tecidos, o cido miclico da parede
celular e antgenos capsulares. Contudo seu papel na patogenicidade controverso, pois
tantos isolados virulentos, como apatognicos os possuem. A SOD foi recentemente
descrita em R. equi, sendo relacionada a sobrevivncia a morte intracelular em macrfagos
e com o disparo da expresso dos genes vap.

Epidemiologia

O perodo de maior riso para os potros vai dos 2-6 meses de idade, perodo que
coincide com a baixa na imunidade materna e ausncia de um sistema imune (humoral e
celular) eficientes.A enfermidade endmica e a maioria dos haras apresenta a bactria,
contudo a ocorrncia dos surtos grandemente associada a presena de bactrias virulentas
no solo, ou seja diretamente proporcional ao nmero de casos clnicos, uma vez que estes
eliminam a bactria em suas fezes. As taxas de morbidade variam de 5-17%. Taxas de
mortalidade acima de 80% podem ser observadas, especialmente onde o controle e
tratamento no sejam corretamente aplicados. Estudos apontam que o R. equi responsvel

36

pela mortalidade de 3% dos potros ao redor do mundo. Trabalham apontam que o puro
sangue rabe uma raa bastante predisposta a infeco por R. equi.

Sinais Clnicos

A doena associada a formao de abscessos pulmonares mltiplos, com febre

(41C), tosse, descarga nasal bilateral, depresso, taquipinia. A doena progride at
septicemia e morte por asfixia. Nos potros com infeco crnica pode ser observada
diarria resultante da invaso bactria do clon. A evoluo da enfermidade pode ser
acompanhada pela elevao do fibrinognio e do nmero de leuccitos. A enfermidade em
eqinos adultos rara e geralmente associada a imunossupresso. R. equi pode estar
associado a aborto, infertilidade e mastites em fmeas eqinas.

Patologia

As leses macroscpicas observadas so broncopneumonia supurativa, com extensa

abscedao e linfadenite associada. No intestino pode ser observada a linfadenite
mesentrica, principalmente nas placas de Peyer. No microscpio, pode ser observado o
severo infiltrado de clulas fagocticas em especial clulas gigantes multinucleadas. A
degenerao dos macrfagos compatvel com o grau de dano ao parnquima pulmonar,
bem como a ao suicida dos neutrfilos. A necrose caseosa pode ser observada em
infeces crnicas, contudo a supurativa freqentemente encontrada.

Diagnstico

O diagnstico precoce fundamental para o controle e reduo das perdas

associadas a enfermidade. Torna-se importante diferenciar a infeco por R. equi daquelas
ocasionadas por outros patgenos respiratrios como o S. equi zooepidemicus. A idade do
surgimento dos sinais clnicos pode ser fundamental.

37

O diagnstico definitivo somente ser obtido aps a confirmao da bactria em

esfregaos traqueobronquiais. Contudo o isolamento do R. equi pode demorar at 48hs em
AS. Para apressar este diagnstico varias metodologias vem sendo empregadas como o
ELISA, sem bons resultados e a PCR com resultados promissores em lavados traqueo
bronquiais e sangue. Esta tnica apresneta a grande vantagem de produzir resultados
rpidos e precisos.
O monitoramento clnico dos potros (auscultao e temperatura) importante para
o estabelecimento de um diagnstico e terapias precoces. A radiografia torcica pode
ajudar na confirmao dos resultados.
O teste de IDGA baseado no fator equi tem sido muito til no diagnstico da
infeco, contudo estas provas esto sujeitas a falhas.

Tratamento e Controle

O tratamento da pneumonia por R. equi realizada pela associao de eritromicina e

rinfampicina, contudo estas drogas podem apresentar inmeros problemas, como o
desenvolvimento de resistncia bacteriana e reaes alrgicas nos potros. Outras drogas
como a josamicina vem sendo estudadas. Os efeitos colaterais observados ao usoa da droga
so anorexia clica e bruxismo. As doses dos mediamentos utilizaos na terapia da infeo
por R. equi so descritos na tabela abaixo.
A terapia de apoio muito importante, comofluidoterapia e nebulizao. Potros com
dificuldade respiratria podem ser submetidos a oxigenioterapia. O uso do plasma
hiperimune em potros com deficincia na ingesto de colostro (bancos) e co os primeiros
sinais clnicos pode ser fundamental. Os anticorpos facilitam a eliminao do R. equi pela
opsonizao. O uso de vacinas, inclusive de DNA, para profilaxia da infeco por R. equi
muito controversa.
Outras medidas de controle incluindo reduo na poeira, aguamento dos passeios,
remoo da fezes, isolamento dos potros e pario no pasto so muito indicadas.

38

COLIBACILOSE E DOENA DO EDEMA (Escherichia coli)

Etiologia
Escherichia coli um cocobacilo gram negativo possuidor de flagelos peritriquios.
Culturas bacterianas puras podem ser obtidas aps um dia de incubao, devido seu
reduzido intervalo entre geraes. O gnero Escherichia constitudo de um grande
nmero de espcies, contudo somente a E. coli um patgeno significativo para os animais.
Esta bactria faz parte da flora normal do trato gastrointestinal, sendo seu habitat natural o
clon. Os microrganismos se estabelecem no intestino logo aps o nascimento, atravs da
contaminao oral por bactrias originadas da me ou do meio ambiente. A maior parte das
cepas de E.coli constituintes da microflora intestinal no so patognicas. E. coli
patognicas so um pequeno grupo presente em animais adultos. Estas bactrias podem ser
transmitidas por via oral para os animais jovens, podendo ocasionar diarrias e septicemia
em vrias espcies domsticas, como leites, terneiros, potros, cordeiros e cezinhos. A E.
coli tambm pode estar envolvida como oportunista em inmeras enfermidades do trato
urinrio e pneumonias.

Patogenia
A susceptibilidade de animais jovens s infeces por E. coli parece estar
relacionada com a presena de receptores para certos tipos de fimbrias (K88-F4, K99-F5,
F41, 987P-F6). O decrscimo nestes receptores est diretamente relacionado com a
diminuio na ocorrncia da enfermidade em terneiros, leites e cordeiros. A Escherichia
coli um importante patgeno para bovinos e sunos confinados, sendo que este organismo
pode causar colibacilose entrica e septicmica nestes animais, alm da doena doedema
em sunos. A colibacilose entrica ocorre com maior freqncia em animais mantidos de
forma intensiva, sendo raramente observada em animais criados extensivamente
Tendo em vista o carter oportunista da bactria, a colibacilose neonatal ocorre pela
ingesto de bactrias de origem ambiental, ausncia das defesas naturais, como flora
normal dos intestinos e barreira gstrica, presena de receptores para pili nos recm

39

nascidos e alta susceptibilidade as enterotoxinas produzidas por E.coli. Associados a estes

fatores, a inadequada ingesto de colostro pelos leites considerada como um dos
principais fatores predisponentes. Nestes casos, a bactria tende a ocasionar doena nos
animais recm nascidos.
Por outro lado, o estresse e a reduo nos nveis de anticorpos recebidos
passivamente desempenham um importante papel na infeco por ETEC em sunos
desmamados. O estresse provocado pelo desmame induz a uma elevao do pH gstrico,
provocando reduo na atividade bactericida do estmago. A diarria ps desmame
associada elevao no nmero de E.coli hemolticas presentes no trato intestinal, em
relao s no hemolticas. Este aumento ocorre devido m absoro, provocada pela
troca na dieta alimentar, que cria o ambiente ideal para multiplicao de E. coli hemoltica.

Fatores de Virulncia bacteriana

Antgenos capsulares (K) so muito importantes para estes microrganismos, uma vez que
protegem a clula bacteriana do ataque de partculas do complemento, bem como da
fagocitose por clulas de defesa do hospedeiro. Existem no mnimo 80 antgenos K
distintos. Os dois componentes de superfcie de Escherichia coli, que constituem a base da
classificao sorolgica so os antgenos O (sorogrupo) e os antgenos H (sorotipo). Os
antgenos O so lipopolissacardeos (LPS) da parede celular, sendo muito importantes
como fatores de virulncia. Alm de possuir um efeito txico (lipdio A), o comprimento da
cadeia de LPS responsvel pelo retardamento do ataque do complexo de membrana do
complemento. Existem aproximadamente 165 antgenos O sorologicamente diferentes.
Quase todas as amostras de E.coli so mveis, devido presena de flagelos peritrquios
(antgenos H, de Hauch, flagelo em alemo). Existem no mnimo cinqenta antgenos
flagelares distintos.

Enterotoxinas: so protenas plasmdio-codificadas, que ocorrem como toxinas

termolbeis (LT) e toxinas termoestveis (ST). A toxina termolbil a maior e mais

40

imunognica das protenas, apresentando uma relao de 75% de identidade, na seqncia

de aminocidos, com a toxina da clera esta pode ser divida em dois tipos A e B.. A
molcula da LT divida em 1 subunidade A e cinco subunidades B. A ao desta toxina
baseia-se na estimulao da enzima adenilciclase em entercitos. A subunidade B um
multmero, que se liga a receptores (gangliosdeo GM1), permitindo translocao da
unidade A atravs da membrana celular. Esta, aps ativao, induz a enzima adenilciclase a
uma superproduo de AMP cclico. O AMPc estimula a abertura de canais para cloro nas
clulas crpticas e o bloqueio na absoro de cloreto de sdio nas clulas apicais. Por
osmolaridade, ocorre a perda de gua e eletrlitos para a luz intestinal. Estes eventos levam
diarria, hipovolemia, acidose metablica e hiperkalemia.
A enterotoxina termoestvel (ST) apresenta um peso molecular menor que a LT,
entretanto, provoca um efeito biolgico semelhante. Existem dois subtipos de toxinas ST:
STa e STb. A STa afeta o sistema guanidilciclase, levando produo de GMPc e bloqueio
da absoro de cloreto de sdio. Segundo GYLES & THOEN (1993), existem evidncias
de que a guanidilciclase o prprio receptor para STa . A STb a enterotoxina mais
comumente identificada em sunos, entretanto sabe-se que a presena somente da STb no
suficiente para o desenvolvimento de infeco em sunos neonatos. A toxina STb ainda no
tem seu papel na patogenicidade bacteriana bem definido

Verotoxinas (VT) ou Shiga-Like Toxinas (SLT) receberam estes nomes, devido sua
toxicidade para clulas Vero (rim de macaco verde) e por sua semelhana com a toxina
produzida por Shigella dysenteriae. As verotoxinas so codificadas em uma ilha de
patogenicidade denominada LEE (Locus Enterocite Effacement), contendo outros genes de
interesse como o eae (intimina) associadas com a doena do edema em sunos, colite e
diarria hemorrgica em terneiros e Sndrome Hemoltica Urmica (E.coli O157H:7) em
humanos. Uma caracterstica comum destas enfermidades o dano vascular provocado
pelas toxinas. No intestino, as verotoxinas so produzidas, absorvidas e vo se depositar no
endotlio vascular de diferentes rgos, levando ao desenvolvimento de edema, hemorragia
e trombose.

41

Hemolisinas: tambm so consideradas como fatores de virulncia de E.coli e podem ser

classificadas como alfa ou beta de acordo com o padro de hemlise observada no gar
Sangue. A toxina beta ligada as clulas e pouco se conhece a respeito de seu papel na
virulncia bacteriana. A toxina alfa produzida pela maioria das cepas virulentas de E.coli
e a perda dos genes para esta hemolisina promovem alteraes significativas na
patogenicidade dos isolados. Pesquisas tm demonstrado que as hemolisinas apresentam
um importante papel em septicemias ocasionadas por E.coli, aumentando os nveis de ferro
disponvel no hospedeiro, alm do efeito txico sobre os mais diferentes tipos celulares.

Protenas ligadoras de ferro (siderforos): So encontrados em cepas de E.coli

associadas a bacteremia em terneiros, cordeiros e humanos. Para multiplicar dentro do
hospedeiro, o microrganismo necessita adquirir o pouco ferro disponvel, uma vez que este
necessrio para sua multiplicao. Logo, os siderforos so muito importantes para
determinar a invasividade bacteriana.

Fatores citotxicos necrotizantes (CNF): Ocasionam a destruio da membrana celular

dos entercitos. Existem dois tipos de CNF: CNF1 e CNF2. O CNF1 tem sido encontrado
num grande nmero de isolados envolvidos com infeces do trato urinrio. Estudos
recentes comprovaram que E.coli produtoras de CNF2 fazem parte da flora intestinal
normal de bovinos.

Patotipos ou Virotipos de E.coli

As caractersticas de ataque da bactria clula hospedeira, produo de toxinas e

capacidade de invaso so utilizadas para classificao dos virotipos de E. coli. Existem
cinco virotipos descritos: E.coli enterotoxignica (ETEC), enteroagregativa (EaggEC),
enteropatognica (EPEC), enterohemorrgica (EHEC) e enteroinvasiva (EIEC). E.coli
enterotoxigncias (ETEC) tm a capacidade de aderir a mucosa intestinal do hospedeiro e
produzir alteraes pela elaborao de importantes toxinas, que ocasionam a diarria.
EaggEC so o virotipo mais recente e so associadas com diarria persistente em crianas.

42

Essas bactrias ligam-se as clulas do intestino formando agregados e produzindo ST e

hemolisinas.
Ao contrrio de ETEC e EaggEC, E.coli enteropatognicas (EPEC) produzem
alteraes considerveis sobre a ultra estrutura dos entercitos. Em tecidos infectados por
EPEC podem ser visualizados microvilos enlongados, onde no se observam bactrias e
microvilos atrofiados, onde a E.coli est ligada. Este fenmeno denominado attachingeffacing e resulta na formao de um pedestal onde o microrganismo encontra-se
aderido. Estudos demonstram que um bacteriofago introduziu a toxina SLT em isolados de
EPEC tornando-as E.coli enterohemorrgicas (EHEC) foram recentemente reconhecidas,
sendo responsabilizadas por diversos surtos de uma doena fatal (Sndrome Hemoltica
Urmica) envolvendo crianas em vrios pases desenvolvidos como EUA e Canad. Este
grupo constitudo predominantemente por E.coli O157H:7. Alm disto, bactrias
pertencentes a este grupo ocasionam a doena do edema em sunos, sendo associada a
presena da fimbria F18.
Na colibacilose neonatal as ETEC so o principal virotipo envolvido, podendo
ocasionar elevados ndices de morbidade e mortalidade nos rebanhos acometidos. A E.coli
enterotoxignica utiliza dois fatores de virulncia para o desenvolvimento da enfermidade.
Primeiramente, a capacidade de aderir e colonizar as vilosidades intestinais conferidas pelas
fimbrias . Os principais tipos de fimbrias encontradas em E.coli isoladas de terneiros so a
K99 (F5) e F41, enquanto que nos sunos encontramos a K88 (F4), e 987P (F6). A presena
de receptores para estas adesinas explicam a maior susceptibilidade de animais com menos
de um ms de vida. Com o crescimento estes receptores so perdidos, diminuindo a
prevalncia da enfermidade. Recentemente, animais geneticamente modificados para no
expressar receptores para E.coli foram descritos. O segundo fator de virulncia utilizado
pelas ETEC para infeco so as enterotoxinas. Estas exotoxinas alteram o funcionamento
intestinal, levando diarria, acidose e desidratao.

43

Tabela 1. Principais patotipos de E.coli

Patotipo

Fimbria

Toxina

Leso attaching Enfermidade

Effacing

ETEC

K88, K99, 987P ST, LT

no

Diarria

EPEC

F41

sim

Diarria,

absoro
EHEC

F41

SLT

sim

Doena

do

Edema, SHU
EIEC

No

No

no

Septicemias

SLT - like

no

Humanos

determinada
EaggEC/d

No deterinada

Epidemiologia

A ocorrncia de diarria depende da interao entre o patgeno, seu hospedeiro e o

meio ambiente. Somente a presena de E.coli virulenta pode levar ao desenvolvimento de
enfermidade, desde que as condies de imunidade dos animais (ingesto de colostro IgA)
e as condies higinicos sanitrias (pobres) sejam favorveis. A temperatura ambiental
um importante fator a ser considerado, uma vez que temperaturas menores que 25C
tendem a diminuir significativamente os movimentos persitlticos facilitando a colonizao
bacteriana. A transmisso da E.coli ocorre pela rota oro-fecal.
Na doena do edema as taxas de morbidade e mortalidade so baixa e alta,
respectivamente. As epidemias surgem e desaparecem rapidamente (cerca de 15-18 dias).

Sinais Clnicos

Os sinais clnicos da diarria neonatal tendem a variar de acordo com o status imune
dos animais e a virulncia dos isolados. Nos casos de maior severidade, so observadas a
desidratao intensa, acidose metablica e morte. Muitas vezes animais jovens podem
44

morrer sem manifestar diarria. A diarria neonatal ocorre entre 2-3 horas e pode ser desde
inaparente at limpida e aquosa. A colorao das fezes pode estar alterada. Cerca de 3040% do peso corporal pode ser perdido. A musculatura abdominal est flcida e o animal
apresenta severa depresso. Nestes casos o animal tende a morrer. Nos animais mais
velhos (at o desmame e ps desame) os mesmos sinais clnicos so observados, porm
com menor intensidade.
A doena do edema geralmente afeta leites dos sete aos dez dias de vida. A doena
tpica caracteriza-se por disfunes no sistema nervoso central, como perda da
coordenao, que evolui em questo de horas para paralisia total. Ocorrem tambm
tremores musculares e convulses. Edema leve nos tecidos pode ser observado e a morte
dos animais ocorre geralmente dentro de 1-3 dias.

Achados patolgicos

Poucos achados so caractersticos da diarria ocasionada por E.coli nos animais,

como desidratao, dilatao do estmago e intestino delgado. A microscopia eletrnica de
varredura pode ser udada para demonstrar a bactria aderida as vilosidades intestinais. Na
doena do edema, ao contrrio apresenta alguns sinais caractersticos como edema
subcutneo, hidrpericrdio, edema pulmonar, efuso serosa e fibrinosa nas cavidades. AS
leses microscpicas refletem o edema tecidual e o forte dano vascular em diferentes
rgos como SNC, estmago, intestinos, rins e tonsilas.

Diagnstico

O diagnstico bacteriolgico a partir de amostras de intestino delgado e fezes dos

animais realizado pela cultura e isolamento bacterianos. Este muito importante para
realizao do diagnstico diferencial. Aps a confirmao pelas caractersticas
morfolgicas (Bacilo gram negativo) e bioqumicas (oxidase negativa, fermentao da
glicose, lactose e sacarose em TSI e indol positivo) os isolados de E.coli podem ser
45

submetidos a biotipificao, atravs de PCR multiplex para deteco de genes codificando

fimbrias e toxinas. Somente o isolamento de E.coli de amostras fecais pode ser
inconclusivo, uma vez que cepas no patognicas fazem parte da microflora intestinal. O
PCR apresenta-se como uma tcnica de maior sensibilidade, quando comparado com as
tcnicas convencionais de biotipificao para Escherichia coli, uma vez que antgenos
fimbriais podem no ser expressos em cultura, induzindo a resultados falso negativos. A
biotipificao de isolados de E. coli tambm pode ser realizada por soroaglutinao, ELISA
e imunofluorescncia.

Tratamento e controle

Para tratamento da diarria dos terneiros utiliza-se a reposio de lquidos e

eletrlitos perdidos pelos animais durante a diarria, bem como o uso de antibioticoterapia.
A maior importncia dos antimicrobianos na terapia da colibacilose evitar o
desenvolvimento de septicemias. Um aspecto importante da infeco por E.coli verificar
que a resistncia mltipla aos antimicrobianos pode ser facilmente adquirida.

46

TABELA 2 Perfil de sensibilidade aos antimicrobianos de E. coli isoladas de bovinos

%
ANTIMICROBIANO

SENSVEL

INTERMEDIRIO RESISTENTE

Eritromicina

1,88

98,11

Penicilina

1,96

98,03

Sulfonamida

43,39

1,88

54,71

Tetraciclina

37,25

3,92

58,82

Tilmicos

11,32

88,67

Florfenicol

41,50

39,62

18,86

Ampicilina

64,15

1,88

33,96

Ceftiofur

84,90

3,77

11,32

Enrofloxacin

92,30

1,92

5,76

Neomicina

63,79

1,72

34,48

Espectinomicina

62,06

6,89

31,03

A resistncia de E.coli isoladas no trato intestinal de bovinos e sunos criados de

forma intensiva reflete a exposio destes animais s drogas antimicrobianas, o que leva a
seleo de clones resistentes. Como exemplo, temos o caso da tetraciclina, que aps sua
descoberta em 1940 foi utilizada indiscriminadamente na produo animal. Este uso
abusivo levou a ndices de resistncia que variam de 80-90% em animais confinados. A
maior sensibilidade de E.coli pode ser observada para fluoroquinolonas, cefalosporinas de
terceira gerao, carbadox, gentamicina, sulfa-trimetropin e nitrofurantonas. A escolha de
um antimicrobiano para tratamento de infeces por E.coli deve sempre considerar os
resultados obtidos no antibiograma, uma vez que existem grandes variaes na
sensibilidade de isolados provenientes de diferentes regies. A resistncia mltipla aos
antimicrobianos um processo importante em E.coli. Este ocorre pela troca de plasmdeos
codificando gens para resistncia aos antimicrobianos entre bactrias entricas.
A correo das medidas de manejo e das condies nutricionais e de higiene dos
rebanhos so fundamentais para controle da enfermidade. Tais procedimentos visam a

47

reduo da exposio aos agentes infecciosos e melhora das condies do animal,

principalmente no que diz respeito adequada ingesto de colostro pelos terneiros.
Nos sunos, o tratamento da colibaciolose em sunos envolve reposio de fludos,
antimicrobianoterapia e controle da temperatura do animal (30-34C). O uso de
antimicrobianos para o tratamento da colibacilose entrica controverso, sendo que este
deve levar em conta os resultados obtidos na cultura e antibiograma. Geralmente os agentes
antimicrobianos utilizados no combate a infeco por E.coli em sunos so o sulfazotrim,
colistina e kanamicina. A administrao destas drogas na alimentao de sunos para
controle e profilaxia de enfermidades bacterianas conhecida. Porm, estas prticas esto
associadas presena de resduos de antimicrobianos nos produtos de origem animal e
seleo de bactrias resistentes, trazendo srios riscos sade pblica. Alm disto
condies estressantes tem sido relacionadas a seleo de bactrias resistentes.
A vacinao das porcas antes do parto tem sido de grande utilidade no controle da
colibacilose. Neste caso, o colostro de fmeas vacinadas contm quantidade suficiente de
imunoglobulinas para proteo dos filhotes. Alm disto, o colostro contm fatores no
especficos como lactoferrina e transferrina, que auxiliam na preveno das enfermidades
ocasionadas por E. coli em sunos. Estas substncias apresentam efeito bacteriosttico,
devido sua grande capacidade de ligao ao ferro, desprovendo os microrganismos deste
metal necessrio ao crescimento e multiplicao de E.coli.
O tratamento da doena do edema em sunos no conside, sendo que diversos
estudos vem sendo desenvolvidos para imunizao os animais, utilizando toxides, toxinas
modificadas geneticamente e fmbrias. Recentemente trabalhos tem apontado que a
imunizao das porcas, seguida de duas doses de vacinas nos leites podem ser eficientes

48

Tabela 3- Perfil de sensibilidade aos antimicrobianos- estudo canadense.

Antimicrobiano

Sensibilidade

Amicacina

100

Enrofloxacin

100

Ampicilina

46

Gentamicina

63

Neomicina

56

Sulfazotrin

71

Tetracilina

ERISIPELA (RUIVA, Erysipelothrix rhusopathie)

Etiologia

A erisipela ou ruiva uma enfermidade causada pela bactria Erysipelothrix

rhusiopathie, manifestada por uma septicemia aguda ou subaguda e leses crnicas
proliferativas. A doena possui distribuio mundial, e de grande importncia econmica
principalmente na forma crnica. O agente tambm causa poliartrites em ovelhas, morte
em perus. Em humanos, causa leso local da pele, geralmente em pessoas que manejam
com animais, materiais, ou produtos de animais contaminados. Nos humanos a erisipela
uma infeco causada por Streptococcus.
Erysipelothrix rhusiopathiae so bacilos gram positivos, acapsulados, anaerbicos
facultativos, curtos, finos e s vezes levemente curvados (0,2-0,4 m de largura e 0,8-2,5
m de comprimento). O organismo imvel, no produz esporos, so catalase negativos,
hemolticos e cresce em temperaturas 4-37C. Em culturas em gar nutrientes, feitas
diretamente de tecidos em caso de infeco aguda, as colnias aparecem de formas lisas, e
o organismo como bastonetes delgados, curtos, retos ou levemente curvos e isolados ou em

49

cadeias. As formaes paliadas so comuns. J em culturas mais velhas ou isoladas de

leses crnicas as colnias se apresentam de forma rugosa e onde predominam a forma
filamentosa do bacilo. Em meio gar TSI produzem cido sulfdrico (WOOD, 1992).
O agente sobrevive 4 a 5 dias na gua e vrios dias no solo, em condies
favorveis. Persiste em fezes de sunos entre 1 a 6 meses, em temperatura abaixo de 12C.
Resiste ao fenol 0.2%, mas destrudo pela maioria dos desinfetantes comuns e ao calor
(10 minutos a 56C).

Epidemiologia

O reservatrio mais importante do Erysipelothrix rhusiopathiae o suno, mas a

bactria tambm tem sido isolada em mamferos, ave e peixes. Bovinos, ovinos, eqinos,
galinhas, perus, ces e gatos podem se infectar. A fonte de infeco mais importante o
suno portador. Estima-se que 30-50% dos sunos saudveis possuem o E. rhusiopathiae
nas amgdalas ou outros tecidos linfides. Estes portadores podem eliminar o organismo em
suas fezes ou secrees oronasais, tornando-se uma importante fonte de infeco. Sunos
afetados com E. rhusiopathiae na forma aguda, eliminam abundantemente o agente nas
fezes, urina, saliva e secrees nasais. O solo, cama, alimentos e a gua so contaminados,
e podem servir como um meio indireto de transmisso. Alm disso, contaminao das
guas pode transportar o organismo para outras criaes.
Uma grande variedade de mamferos e aves silvestres so carreadores do E.
rhusiopathiae (WALKER, 1988). Os animais selvagens, particularmente os roedores
comumente encontrados em criaes de sunos, so considerados como importantes fontes
de transmisso. O agente da erisipela tambm tem sido isolado de diversos animais
domsticos (bovinos, eqinos, ovinos, caninos e felinos), proporcionando reservatrios
adicionais na produo de sunos.
A transmisso por vrias espcies de mosquitos e carrapatos tambm tem sido
demonstrada, mas a importncia destes no tem sido estabelecida. Sunos com menos de 3
meses ou mais de 3 anos de idade so geralmente menos predispostos erisipela. Isto

50

provavelmente se deva imunidade passiva nos animais jovens, e a imunidade ativa nos
animais mais velhos conseqente das vrias infeces subclnicas. Doenas infecciosas prexistentes, infeces parasitrias, aflatoxicose, estresse e fatores ambientais tem sido
descritos como fatores prediponentes para a ocorrncia da erisipela
Patogenia

Sunos de todas as idades so susceptveis, mas os leites novos so mais resistentes

por adquirirem imunidade atravs do colostro. So comuns as observaes de leses
cutneas generalizadas na ocasio do abate. Representam uma agudizao da doena
desencadeada pelo transporte ao frigorfico, ou resultam do agrupamento de animais de
diversas origens no perodo que antecede o abate lactao. A infeco natural se processa
mais freqentemente pela ingesto de alimentos ou gua contaminados. Parece provvel
que a penetrao no organismo ocorra atravs das amgdalas ou tecido linfide ao longo do
aparelho digestivo. A infeco pode ocorrer tambm atravs de ferimentos de pele. Um
resumo da patologia da E. rhusiopathiae descrito por GYLES et al. (1993) na Figura 1.
Animais portadores
Ambiente contaminado
Ingesto do organismo

Entrada no intestino
delgado
Aderncia no epitlio

Penetrao no intestino
Dano Vascular
Artrite

Dano Vascular

Endocardite

Trombose

Leses de pele

Febre

51

Figura 1. Patogenia da bactria E. rhusiopathiae

O E. rhusiopathiae no parece produzir toxinas. Vrios autores sugerem que a

neuraminidase seja um fator na patogenia deste organismo. A neuraminidase atua sobre o
cido silico, que um mucopolissacardeo da superfcie das clulas, e que tem a funo de
impedir que uma clula se ligue s outras por um mecanismo de repulso. Com a destruio
deste componente as hemaceas se aglutinam no endotlio, levando a trombose.
Na forma aguda ou subaguda a erisipela comea com uma bacteremia que ocorre 24
horas aps a exposio, e que rapidamente resulta em sinais clnicos de infeco
generalizada (septicemia). Aproximadamente 36 horas aps a exposio comeam as
alteraes dos capilares e vnulas. Observa-se tumefao do endotlio, com aderncia de
moncitos parede vascular e evidncia de trombose hialina disseminada. Esse processo de
coagulopatia generalizada progride em 4 dias para trombose fibrinosa nos tecidos
perivasculares. Em casos altamente agudos, a hemlise comumente observada. Necrose
isqumica de tecidos perivasculares ocorre em conseqncia do comprometimento da
microcirculao. Somente a leso cutnea tambm pode ser observada, quando da infeco
por cepas menos virulentas.
A erisipela na forma crnica afeta primariamente as articulaes e comea com uma
sinovite aguda que pode ocorrer em 4-10 dias aps a exposio. Dentro de 3 meses ocorre
exsudao fibrinosa e proliferao, desenvolvendo at uma fibrose severa e destruio da
cartilagem articular em 5-8 meses. Estas alteraes parecem ser devido deposio de
fibrina durante a fase vascular. Uma outra manifestao da erisipela crnica a ocorrncia
de endocardite cujas leses valvulares comeam, provavelmente, com a inflamao
vascular e infartos de miocrdio.

Sinais clnicos

Forma aguda
Aps perodo de incubao que oscila entre 1 a 7 dias, observa-se febre alta (at
42C), prostao, anorexia, fezes firmes e secas, conjuntivite e andar cambaleante,

52

geralmente os animais permanecem deitados pois, sentem muita dor ao caminhar. Podem
ocorrer mortes nos lotes afetados. Leses cutneas em forma de eritema, urticria, ou
lembrando contornos em losango tornam-se visveis a partir do segundo ou terceiro dia de
infeco. So reas salientes na pelo com colorao prpura-escura, facilmente visveis em
animais de pelagem clara. Na fase aguda fatal, freqentemente ocorre coloraes escuras e
desaparecem 4 a 7 dias, ou dar origem a reas de necrose que persistem por vrias semanas,
devido infeco secundria. Leitoas que contraem a infeco durante a gestao podem
abortar.

Forma crnica
A forma crnica pode ser uma conseqncia da erisipela aguda ou subaguda e
caracterizada pr sinais de artrite e insuficincia cardaca. Os animais apresentam
engrossamento das articulaes e dos membros locomotores, com escasso contedo lquido
sanguinolento turvo no interior da cpsula articular, podendo evoluir para fibrose.
A proliferao de tecido granular nas vlvulas cardacas causa endocardite vagetativa, com
insuficincia cardaca.
Infeco no homem

A erisipela uma zoonose ocupacional, mdicos veterinrios e tratadores podem se

contaminar. Nestes casos, os sinais mais caractersticos so de febre intensa e alteraes na
pele, denominadas ersipelides. Manifestaes sistmicas e graves esto associadas a
alteraes

cardacas (endocardites). Um aspecto interessante que a infeco em

indivduos sem contato direto com animais tambm ocorre. A adoo de medidas de
higiene parece ser fundamental para preveno da doena.

Achados patolgicos

Nas infeces agudas so encontradas alm das leses de pele (hemostase cutnea),
aumento e congesto dos ndulos linfticos, petquias no epicardio e endocardio, gastrite
catarral a hemorrgica, fgado congesto, infartos renais e do bao. O exame histopatolgico

53

revela danos (tumefao aos capilares e vnulas, com infiltrao perivascular por clulas
linfides e fibroblastos. Leses purulentas no so caractersticas de erisipela.
Na forma crnica, observa-se animais com uma ou mais articulaes aumentadas, a
cpsula articular se encontra espessada com tecido conjuntivo fibroso. A cavidade articular
contm uma quantidade excessiva de lquido sinovial serosanguinolento. A membrana
sinovial apresenta graus variados de hiperemia e proliferao. A endocardite vegetativa
consiste de crescimento granular proliferativo nas vlvulas cardacas. A leso microscpica
tpica uma pronunciada hiperplasia da ntima sinovial e tecido conjuntivo subintimal, com
vascularizao e acmulo de clulas linfides e macrfagos. Observa-se uma progressiva
deposio e organizao de fibrina. O crescimento vegetativo nas vlvulas cardacas
composto de tecido de granulao e massas superimpostas de fibrina

Diagnstico

A infeco por E. rhusiopathiae em sunos deve ser diferenciada de outras

infeces, entre as quais as causadas pelo vrus da peste suna clssica, Salmonella chllerae
suis e Streptococcus sp. Os dois primeiros, pelos sintomas septicmicos e o ltimo, por
estar envolvido em artrites e endocardites. Leses cutneas com outras etiologias tambm
devem ser consideradas.
O diagnstico precoce da enfermidade difcil devido ao tamanho diminuto da s colnias e
a presena de contaminaes. O isolamento pode ser utilizado o corao, pulmes, fgado,
bao, rins e articulaes. Caso a doena tenha persistido por muitos dias, deve ser enviado
somente as articulaes e fludos articulares, sendo importante coletar tecido e lquido de
vrias articulaes, porque a bactria pode estar presente em pequeno nmero e em reas
limitadas.
A identificao por imunofluorescncia direta tem sido relatada, embora parea no
ter boa sensibilidade e especificidade para o diagnstico. Nenhum teste sorolgico tem se
mostrado til para o diagnstico de retina, mas pode ser utilizada na identificao de
infeco crnica, os mais utilizados so soroaglutinao, aglutinao em crescimento e

54

ELISA. Uma tcnica de PCR foi descrita com sucesso desde que utilize meio seletivo de
enriquecimento TSB contendo brometo de etdeo ou azida sdica.

Tratamento

O tratamento de escolha feito com penicilina (50.000 UI/Kg de peso vivo), o

Erysipelothrix rhusiopathie altamente sensvel a essa droga, quando iniciado na fase
aguda a resposta pode aparecer nas primeiras 24-36 horas. Outras drogas utilizadas so as
tetraciclinas, lincomicina e tilosina. No caso de erisipela crnica no h tratamento. A
injeo de penicilinas durante 3 a 5 dias nos animais doentes, tem sido eficiente no
tratamento das formas agudas.
Erysipelothrix rhusiopathiae sensvel a penicilina, cefalosporina, clindamicina.
Recentemente esta bactria adquiriu resistncia a eritromicina, oxitetraciclina e
dihidrostreptomicina. Um aspecto importante a lembrar que a bactria naturalmente
resistente a vancomicina e o tratamento emprico com esta droga pode levar a morte dos
animais.

Preveno e controle

praticamente impossvel erradicar a erisipela suna, em funo da capacidade de

sobrevivncia da bactria no ambiente, e da variedade de espcies animais que podem ser
infectados, alm de estar presente em sunos portadores sadios. A eliminao de portadores,
manejo sanitrio adequado, higiene, nutrio, boas instalaes, eliminao de sunos
cronicamente afetados e o uso de um programa de vacinao tem sido efetivos na
preveno da erisipela suna. Tambm deve-se dar grande importncia ao adquirir animais
de reposio, tendo o cuidado para que estes sejam livres do agente. Casos de artrite e
endocardites no respondem bem ao tratamento, devem ser adotadas medidas higinicas e
desinfeco de instalaes. desinfetantes fenlicos ou cresis so recomendados, por
apresentarem boa ao residual e atividade na presena de matria orgnica.

55

A imunizao a doena pode ser feita atravs de vacinas vivas, atenuadas ou lisadas,
administradas parentalmente ou por via oral. No Brasil as vacinas disponveis consistem de
crescimentos bacterianos inativados (bacterinas) com hidrxido de alumnio como
adjuvante, os programas de vacinao existente hoje no mercado para erisipela, so
eficientes apenas para forma aguda da doena, para combater a forma crnica torna-se
necessrio um grau de imunizao mais elevado, o que pode ser conseguido atravs de um
programa de vacinao (Tabela 1). Vacina recombinante utilizando lactobacilos como vetor
para protenas de virulncia de E. rusiopathiae para imunizao oral dos sunos vem sendo
estudada.

Tabela 1. Programa de vacinao para erisipela suna.

ERISIPELA
1. dose aos 70 dias de gestao

Leitoas de reposio

2. dose aos 90 dias de gestao

1. dose aos 80 dias de gestao

Porcas

2. dose aos 100 dias de gestao

na poca de seleo, aplicar duas doses,

Machos

com intervalos de 21 dias. A partir da,

revacinar anualmente.
1. dose aos 21 dias de idade

Leites

2. dose aos 42 dias de idade

Fonte: BARCELLOS et al., 1996.

DOENAS RESPIRATRIAS DE SUNOS

J antiga a preocupao de mdicos veterinrios envolvidos na produo de sunos

com o impacto econmico e a multiplicidade causal das enfermidades respiratrias dos
sunos. Estas perdas decorrem desde alteraes no parnquima pulmonar e tecidos

56

adjacentes, levando a condenao da carcaa ou de parte dela, bem como pelo estresse
respiratrio e reduo no ganho de peso pelos animais. Estudos revelaram que as perdas
decorrentes da pneumonia e rinite atrfica associadas podem aumentar em cinco dias a
terminao dos animais. Todas as granjas possuem leites portadores de algum patgeno
potencial, sendo estes classificados como primrios, quando inoculados isoladamente
levam a alteraes (M. hyopneumoniae, Actinobacillus pleuropneumoniae e Bordetella
bronchispetica) e secundrios, quando necessitam de fatores ou infeces prdisponentes
(P. multocida, H. parasuis, Streptococcus suis, M. hyorinis, Arcanobacterium pyogenes). A
tabela abaixo reporta o ndice de leses relacionadas a rinite atrfica, pleuropneumonia e
pneumonia enzotica em diversos pases.

Tabela 1. Percentual de leses de RA, PL, e PE em diversos pases na dcada de 90.

Pas

RA

PE

PL

USA

69

69

Sucia

10,05

7,68

Suia

29,9

23,6

Itlia

33,7

53,5

Brasil

78,10

75,70

7,05

Fonte adaptado de KICH e PONTES (2001)

Estima-se que as pneumonias sejam responsveis pela perda de 2,4 sunos com peso mdio
de 95Kg para cada 100 animais abatidos no sul do pas. A tabela 2 indica a freqncia da
rinite atrfica e pneumonia enzotica na regio sul do pas.

57

Tabela 2. Prevalncia da RA e PE na regio sul do Brasil.

Estado

Rebanhos analisados

RA

PE

RS

42

81,39%

76,87%

SC

56

80,76%

69%

PR

89

71,15%

81,14%

Brasil

245

78,14%

75,7%

Fonte: Adaptado KICH e PONTES (2001)

A enumerao dos espirros e da tosse como uma forma de classificar o rebanho quanto a
ocorrncia de rinite atrfica e pneumonias pode ser um importante aliado no controle destas
enfermidades. Em 1999, Mors e colaboradores conduziram um experimento e obtiveram
atravs da anlise estatstica uma formula para classificao dos rebanhos segundo a
presena da rinite atrfica. As contagens de espirros e tosse foram realizadas aos 30, 60 e
90 dias, sendo realizadas 3 contagens de 2 minutos cada, com intervalos de 1 a 2 minutos.

Tabela 3. Exemplo para contagem do nmero de tosse e espirro em um lote de sunos

Sinal Clnico

Mdia

Total de animais

Tosse

10

8,67

150

5,78

Espirro

12

9,33

150

6,22

Aplicando-se o percentual obtido a formula dada, obtem-se um escorre, que possui maior
confiabilidade quanto maior sua proximidade do abate dos animais. O ideal 30 dias aps a
instalao dos animais na terminao:

IP = 0,35 + (0,11 x %-5,78) = 0,98

IRA= 0,36 + (0,065 x %-6,22) = 0,76

58

ndice de Pneumonia (IP)

1= granjas de baixa ocorrncia IP menor que 0,55
2= granjas de ocorrncia moderada IP entre 0,55 e 0,90
3= granjas com alta ocorrncia de pneumonias maior que 0,90

* Este ndice menos especfico, sendo recomendado para IP maiores que 0,55 o
diagnstico etiolgico.

ndice de Rinite Atrfica (IRA)

1= granjas de baixa ocorrncia IRA menor que 0,50
2= granjas de ocorrncia moderada IRA entre 0,50 e 0,84
3= granjas de ocorrncia alta IRA maior que 0,84

PRINCIPAIS ENFERMIDADES RESPIRATRIAS BACTERIANAS DOS SUNOS

1. RINITE ATRFICA

Etiologia

A enfermidade uma doena respiratria aguda dos sunos, caracterizada pela

atrofia das conchas nasais. Esta enfermidade esta associada a graves perdas produtivas
principalmente pela predisposio de outras pneumonias, em animais com leses severas.
Os agentes etiolgicos da rinite atrfica so as bactrias gram negativas Pasteurella
multocida e Bordetella bronchispetica.Estas bactrias habitam a membrana mucosa dos
animais. Alm disto a Pasterurella multocida pode ocasionar importante pneumonia, no
estgio final da pneumonia enzotica.

59

Patogenia

Estas bactrias produzem um potente toxina necrotizante (TDN) e esto associadas

ao desenvolvimento da enfermidade. Estas aderem fortemente ao epitlio respiratrio. Os
danos ocasionados somente pela B. bronchispetica so reversveis, contudo tornam-se
graves quando associados a P. multocida TDN+. A destruio total das conchas nasais pode
ocorrer em duas semanas. Cinco sorotipos diferentes de P. multocida so descritos (A, B,
D, E, F), especialmente as do tipo D esto envolvidas em surtos de rinite atrfica. Entre os
fatores de virulncia descritos para B. bronchiseptica podemos citar neuraminidases e
produo de uma adelinatociclase capaz de inibir a escada rolante mucociliar.

Epidemiologia

A rinite atrfica no transmitida facilmente entre os rebanhos, exigindo a

proximidade dos animais. Os leites jovens contaminam-se a partir de suas mes. Surtos da
enfermidade esto associados a introduo de animais infectados no rebanho, sendo este
muitas vezes um portador. A proteo com anticorpos de origem materna esta associada a
inibio na infeco por B. bronchispetica.
Falhas no manejo a infeco por B. bronchispetica ocorre j na primeira semana de
vida, enquanto que naqueles onde as tcnicas de criao so bem executadas esta ocorre
aps 3 a 4 semanas. A infeco por P. multocida ocorre geralmente de 3 a cinco semanas
de vida.
Entre os principais fatores de risco associados ao desenvolvimento da enfermidade
podemos citar: nmero excessivo de primiparas, alimentao, presena de outras infeces,
alojamento dos animais (volume de ar menor que 3m cbicos, oscilao de temperatura de
6C, lotao maior que 500animais), manejo do rebanho.

60

Sinais Clnicos

So observados nos animais doentes espirros e a formao de placas escuras nos

cantos internos dos olhos, corrimento nasal mucopurulento e encurtamento e/ou desvio
lateral do focinho. Animais com infeco severa apresentam atraso no desenvolvimento. O
diagnstico clnico facilmente realizado em animais em torno de cinco semanas de vida.

Diagnstico e achados patolgicos

O diagnstico patolgico muito importante, em leites com 5 a 10 semanas, ou de

animais remetidos ao frigorfico. aconselhvel o exame de 20 animais, provenientes de
vrias leitegadas. As conchas nasais devem ser observadas aps corte transversal do
focinho, entre o primeiro e o segundo pr-molares. Baseado no grau das leses 0 (normal),
1 (leve alterao), 2 (moderada) e 3 (grave ou completa) se classificam os rebanhos. Esta
classificao realizada no frigorfico com intervalos mensais ou bimestrais, por um
intervalo de 6 meses a um ano. Com a definio do quadro a anlise pode ser reduzida. No
clculo do analisam 16 animais sendo que se obtivermos 4 animais com cada ndice,
devemos aplicar a frmula :
(4x0=0) + (4x1=4) + (4x2=8) + (4x3= 12) = 24

24/16 = 1,5, este quociente deve ser comparado aos ndices da tabela:
ndice de RA

Classificao dos rebanhos

0 a 0,30

Livre

0,31 a 0,45

Levemente afetados

0,46 a 3,0

Moderada ou severa

O diagnstico laboratorial da rinite atrfica pode ser realizado pela colheita de

amostras de swab de cavidade nasal ou de bipsia de tonsilas, principalmente de animais
jovens. A cultura em AS, MC e realizao de teste de antibiograma so de grande utilidade.

61

Vrias tcnicas de PCR vm sendo desenvolvidas para caracterizar e genotipificar amostras

de P. multocida.

Tratamento e controle

O controle da rinite atrfica envolve a vacinao ou tratamento de porcas gestantes e suas

leitegadas. Estes procedimentos devem ser acompanhadas de medidas que melhorem o
conforto e ambiente dos animais. As vacinas utilizadas atualmente so preparadas com
bacterianas mistas tentando a incorporao do toxide de P.multocida s bacterinas. A
vacinao deve seguir os critrios descritos pelos fabricantes. O uso de vacinas
recombinantes encontra-se em estudo.
O uso de antimcrobianos nos surtos podem ser aplicados nas fmeas no final da
gestao e nos leites lactantes, com fornecimento na rao aps o desmame. muito
importante o resultado dos testes de antibiograma.

PNEUMONIA MICOPLSMICA DOS SUNOS (PNEUMONIA ENZOTICA)

Etiologia

A pneumonia enzotica tem como agente etiolgico o M. hyopneumoniae. Esta

enfermidade geralmente no fatal e crnica resultando em reduo no ganho de peso,
aumento da converso alimentar e predisposio a infeces bacterianas. A indstria
suinicola americana perde cerca de 300 milhes de dlares ano devido a esta enfermidade.
O M. hyopneumoniae reside na traqueia, bronquio e bronquiolos dos animais.

Patogenia

Aps a infeco o M. hyopneumoniae coloniza o trato respiratrio atravs de suas

protenas externas, que contm uma adesina de 97kDa denominada P97, a qual possui

62

receptores na clula hospedeira. A cpsula um importante fator de patogenicidade em

micoplasma.

Epidemiologia

A doena apresenta alta morbidade, porm baixa mortalidade. , sendo

que a transmisso ocorre a partir de animais portadores atravs do contato
direto e de secrees contaminadas. A ocorrncia de surtos de pneumonia
micoplsmica em granjas SPF tem alertado para a disseminao do agente via
o vento. Toma-se que uma distncia de 4Km seria suficiente para barrar a
transmisso. A qualidade na oferta do ar, espao mnimo para os animais,
status imunitrio so muito importantes. Estima-se uma perda de 37,4g/dia
para cada 10% de tecido pulmonar hepatizado. A doena grandemente
observada em animais com 2 semanas, contudo animais at as seis semanas
podem ser afetados.
Sinais Clnicos

Os principais sinais clnicos observados so os mesmos de qualquer pneumonia. Tosse seca

ou com catarro. A tosse pode ser observada em animais em repouso, bem como somente
aps o movimento. A febre pode ser observada.

Diagnstico

Alm dos sinais clnicos importante a confirmao sorolgica (ELISA) ou atravs

do isolamento bacteriano em lavados transtraqueais. Contudo este pode ser bem
complicado e as amostras devem ser remetidas imediatamente ao laboratrio. As amostras
ideais so obtidas pela necrpsia (fragmentos de tecido pulmonar). O isolamento bacteriano

63

 realizado em meio de Friis. A identificao se faz pela observao de colnias com

aspecto de ovo frito.
Para facilitar o diagnstico vrias tcnicas de PCR, baseados no rDNA 16S vem
sendo desenvolvidas para o diagnstico in vivo a partir de lavados brnquio alveolares.

Tratamento e controle

O tratamento com antimicrobianos pode ser utilizado, contudo resultados

significativos podem ser obtidos com a vacinao dos animais. Vrias vacinas vm sendo
estudadas, sendo diversas de subunidades (projeto genoma).

PLEUROPNEUMONIA SUNA

Etiologia

A pleuropneumonia suna (PPS) uma das doenas bacterianas mais importantes do

trato respiratrio, ocorrendo na maioria dos pases suinocultores, onde ocasiona prejuzos
aos sistemas de produo. A importncia da PPS decorre do fato de que a enfermidade pode
tanto apresentar manifestaes clnicas severas, como se tornar crnica e subclnica na
maioria dos rebanhos, causando prejuzos, devido morte dos animais enfermos, a reduo
na produtividade e o aumento nos custos com medicao e vacinao. O primeiro surto
desta doena foi descrito na Inglaterra (1961) e em seguida nos EUA (1963) e Argentina
(1964). No Brasil, a PPS foi diagnosticada pela primeira vez em 1981. A partir da vrios
surtos foram observados no Sul do pas, onde a suinocultura praticada de forma intensiva.
O Actinobacillus pleuropneumoniae (App) o agente etiolgico da pleuropneumonia suna.
Esta bactria gram negativa, capsulada e com morfologia de cocobacilo. Baseado na
exigncia de NAD (Nicotinamida Adenina Dinucleotdeo) para a sua multiplicao, esta
espcie pode ser divida em dois grupos: o bitipo 1, NAD dependente e o bitipo 2, que

64

no necessita do NAD para sua multiplicao. Tanto em estudos de campo, como em

infeces experimentais o bitipo 2 se mostrou menos virulento que o bitipo 1.

Patogenia

Vrios fatores so associados virulncia de App entre eles a cpsula, os

lipopolissacardeos, as protenas externas de membrana, as protenas de ligao a
transferrina, as proteases, as toxinas Apx, e as adesinas.
As Apx produzidas por estas bactrias pertencem a uma famlia de toxinas
geneticamente relacionadas, as quais so denominadas RTX (Repeat Toxins) sendo tambm
produzidas por uma variedade de bactrias gram-negativas. Segundo FREY (1995) dados
epidemiolgicos indicam que as exotoxinas produzidas por A. pleuropneumoniae esto
assciadas com a patogenicidade da bactria. Existem muitas indicaes relacionando a
funo das toxinas na evaso do sistema de defesa do hospedeiro, pela morte de
macrfagos e neutrfilos. Alm disto, a produo excessiva de radicais livres de oxignio
pode danificar os tecidos adjacentes e promover grande injria e destruio tecidual.
A. pleuropneumoniae produz diferentes RTX (Apx), que apresentam efeitos
citotxicos e hemolticos distintos. Todos os sorotipos de A. pleuropneumoniae variam
quanto secreo de uma ou duas das toxinas ApxI, II e III. A tabela abaixo apresenta a
distribuio das toxinas nos diferentes sorotipos de App.

Sorotipo

ApxI

ApxII

ApxIII

ApxIV

1,5,9,11

sim

sim

No

Sim

2,3,4,6,8

no

sim

Sim

Sim

7,12

no

sim

No

Sim

10

sim

no

No

Sim

A toxina ApxI uma protena de 105 KDa que apresenta forte efeito hemoltico e
citotxico, sendo secretada pelos sorotipos 1, 5, 9, 10 e 11, que so considerados como de
maior virulnica. A toxina ApxII tambm apresenta 105 KDa e possui uma atividade

65

hemoltica fraca e moderada citotoxicidade, sendo detectada em todos os sorotipos com

exceo do sorotipo 10. A toxina ApXIII no apresenta efeito hemoltico, entretanto
altamente citotxica, sendo encontrada nos sorotipos 2, 3, 4, 6 e . A sinergia no incremento
de hemlise observada entre as toxinas apxI e II e as toxinas de Staphylococcus aureus
denominado de efeito CAMP (Christie-Aktins-Munch-Peterson), que corriqueiramente
utilizado no diagnstico bacteriolgico.
Recentemente, um quarto tipo de toxina RTX foi descoberta, sendo denominada
Apx IV. Esta toxina expressa somente in vivo estando presente em todos os isolados de
App, demonstrando seu grande potencial para o diagnstico da PPS e a caracterizao deste
patgeno. As toxinas Apx induzem uma forte reao imunolgica em sunos infectados e
so usadas como antgenos em vacinas de subunidades, com o intuito de induzir imunidade
protetora.
A sorotipagem uma das ferramentas mais importantes em estudos epidemiolgicos
e programas de controle. Esta principalmente baseada nas diferenas sorolgicas de
lipopolissacardeos e polissacardeos capsulares, permitindo a discriminao destas
bactrias em quatorze sorotipos distintos. Destes, doze sorotipos de A.pleuropneumoniae
foram classificados no bitipo 1, enquanto que outros dois sorotipos no bitipo 2.
Recentemente, o sorotipo 15 de App foi proposto para isolados australianos que se
distinguem consideravelmente dos demais .

Observaes a campo indicaram que os

sorotipos 1, 5, 9, 10 e 11 so os mais virulentos, sendo estes geralmente envolvidos em

surtos severos com alto nvel de leses pulmonares e mortalidade. Os outros sorotipos, em
especial o sorotipo 3 possuem menor virulncia, mas tambm so encontrados ocasionando
enfermidade em diversos pases . No Brasil, os sorotipos 3, 5 e 7 so considerados de
grande ocorrncia e importncia, principalmente, para os criatrios sunos do sul do Brasil.

Epidemiologia

A principal rota de disseminao da enfermidade a aergena. As bactrias so

transmitidas principalmente pelo contato direto entre os animais durante os surtos e pela
introduo de portadores em populaes sem histrico prvio da infeco, que portanto so

66

muito susceptveis, pois apresentam imunidade reduzida. Trabalhos recentes comprovaram

o papel importante dos aerossis e do movimento do ar na disseminao de A.
pleuropneumoniae em distncias superiores a 2,5m.
Na fase aguda da doena, tanto a morbidade, quanto mortalidade variam, mas so
geralmente altas. A mortalidade pode ser influenciada pelo grau de virulncia de cada
isolado, pela presena de infeces concomitantes com outros patgenos respiratrios e por
caractersticas ambientais particulares. Entretanto, ao contrrio de outros patgenos
respiratrios de sunos, as infeces prvias por outras bactrias e vrus no so
determinantes para o desenvolvimento da pleuropneumonia (patgeno primrio).
Esta doena vem sendo associada com at 20% de reduo no desenvolvimento
corpreo. Segundo STRAW et alii (1989) a pleuropneumonia ocasiona, em mdia, uma
reduo no ganho de peso dirio de 34% e uma reduo de 26% na eficincia alimentar.
Alm disso, ocasionalmente, de 10 a 20% das carcaas dos animais provenientes de
rebanhos infectados so totalmente condenadas no frigorfico. A mortalidade pode ser de
10 a 20% durante os surtos, porm usualmente menor que 1% em rebanhos com infeco
crnica

Sinais Clnicos

A PPS caracterizada por pneumonia necrtica hemorrgica e pleurite fibrinosa. Os

sinais clnicos variam de acordo com a idade dos animais, o estado de imunidade,
condies ambientais e o grau de exposio ao agente infeccioso. Na forma superaguda da
doena ocorre febre, apatia, diarria e vmito, bem como em alguns casos, podem ocorrer
falncias circulatria e cardaca. Com o desenvolvimento da enfermidade, o animal pode
tornar-se ciantico e na fase terminal observada dispnia intensa, podendo a morte ocorrer
de 24 a 36 horas aps o aparecimento dos sinais clnicos. Na forma aguda, so observados
elevao discreta da temperatura e o avermelhamento da pele, bem como a recusa da
ingesto de gua e alimento e a relutncia ao exerccio. Sinais clnicos respiratrios
severos, como dispnia e tosse, so evidentes. A forma subaguda e a crnica desenvolvemse logo aps o desaparecimento dos sinais agudos, sendo observada pouca ou nenhuma

67

febre e a tosse pode ocorrer de forma intermitente com intensidade varivel. O apetite pode
estar reduzido, o que pode contribuir para a diminuio do ganho de peso, sendo que os
animais enfermos so identificados pela sua relutncia ao movimento.

Diagnstico e sorotipificao de App

O diagnstico presuntivo da pleuropneumonia pode ser realizado atravs dos

achados de necropsia, como pleurisia, pneumonia exsudativa e necrose. Entretanto, o
diagnstico definitivo requer o isolamento do agente e sorotipificao, bem como a
diferenciao de outros patgenos presentes no trato respiratrio como Mycoplasma
hyopneumoniae,

Haemophillus

parasuis,

Pasteurella

multocida

Bordetella

bronchiseptica. As tcnicas tradicionais para o diagnstico da infeco por A.

pleuropneumoniae envolvem a cultura bacteriana e testes imunolgicos, como ELISA e
fixao do complemento (SCHALLER et alii, 2001).
A. pleuropneumoniae normalmente isolado dos tecidos e secrees em meio de
gar sangue suplementado com 5% de sangue ovino utilizando uma semeadura
perpendicular de S. aureus, que supre o NAD necessrio para o crescimento do bitipo 1 de
App. Aps incubao por 24 horas, pequenas colnias podem ser observadas com
caractersticas de satelitismo a semeadura de S. aureus. O gar chocolate tambm pode ser
utilizado no isolamento bacteriano, entretanto este meio apresenta menor poder de
diferenciao.
Atravs da sorotipificao podem ser obtidos dados relativos a virulncia dos
sorotipos presentes no rebanho. A sorotipificao de App pode ser realizada diretamente
pelas tcnicas de aglutinao em ltex, hemaglutinao indireta e testes de difuso em gel,
ou indiretamente atravs da anlise do perfil de toxinas Apx presente nos isolados.
Entretanto, muitos problemas so observados, como reaes cruzadas, presena de
amostras auto-aglutinantes e principalmente ocorrncia de amostras no sorotipifcveis.
Diversos testes de ELISA foram desenvolvidos para o diagnstico da
pleuropneumonia suna. Estes so baseados em antgenos extrados com EDTA, extrato

68

salino fervido, polissacardeos capsulares e lipolissacardeos de cadeia longa. KICH (1996),

realizou um estudo a campo no estado de Santa Catarina, onde comparou a cultura
bacteriana com os resultados obtidos por ELISA descrito por Machado (1996) em animais
oriundos de rebanhos com ou sem histrico da infeco por App. Este trabalho comprovou
que o teste de ELISA eficiente para a diferenciao de rebanhos e indivduos infectados
por App, entretanto esta metodologia no pode ser associada aos resultados obtidos na
cultura da bactria.
A tcnica de PCR para o genes da cpsula e toxinas Apx vem sendo padronizados tendo em
vista a dificuldade no isolamento e caracterizao bacteriana. Todos os sorotipos de A.
pleuropneumoniae possuem o gene apxIVA. Este gene no foi encontrado em nenhuma das
espcies correlatas pertencentes famlia Pasteurellaceae, o que comprova a sua
especificidade.

Tratamento e Controle

O controle da pleuropneumonia suna realizada pela combinao do tratamento

dos animais, vacinao e tcnicas de manejo adequadas. O uso de desinfetantes tambm
importante. Todas estas medidas devem ser associadas ao diagnstico no frigorfico e
laboratorial a fim de definir os melhores esquemas de profilaxia.

Antmicrobianos utilizados para tratamento de pneumonias agudas

A. pleuropneumoniae
Antmicrobiano

Dosagem

Via

Freq.

Durao

danofloxacin

1,25mg/kg

IM

ceftiofur

1mg/kg

IM

24

flumequine

15-30mg/kg

VO

12

Oxitetraciclina

5-22mg/Kg

IM

24

4-7

Sulfa-

5-15mg/kg

IM

24

trimetropin

69

B. bronchiseptica

Antmicrobiano

Dosagem

Via

Freq.

Durao

Oxitetraciclina

20mg/kg

IM

72

Sulfatiazol

125mg/kg

VO

No mais 7

Tilosina

10mg/kg

IM

3-5

M.hyopneumoniae + P. multocida

Antmicrobiano

Dosagem

Via

Freq.

Durao

danofloxacin

1,25mg/kg

IM

Espiramicina

25-50mg/kg

IM

24

3-5

Lincomicina

10-30mg/kg

IM

12-24

10

Oxitetraciclina

5-22mg/Kg

IM

24

4-7

Tiamulin

15mg/kg

IM

Antimicrobianos para tratamentos de pneumonias subclnicas

pleuropneumoniae
Antmicrobiano

gua (g/l)

Rao

Durao

Remoo

Clortetraciclina

0,5

400-1000ppm

5-7

21

Oxitetraciclina

0,5-07

400-1000ppm

5-14

21

70

B.bronchispetica + P. multocida

Antmicrobiano

gua (g/l)

Rao

Durao

Remoo

Tilosina (fosf.)

NA

250-400ppm

Clortetraciclina

0,5

400-1000ppm

5-7

21

Oxitetraciclina

0,5-07

400-1000ppm

5-14

21

M.hyopneumoniae+P.multocida

Antmicrobiano

gua (g/l)

Rao

Durao

Remoo

Clortetraciclina

0,5

400-1000ppm

5-7

21

Lincomicina

0,22-0,33

400

21

Tiamulin

0,12-0,25

200-240

5-10

Espiramicina

NA

250-1000

5-10

Oxitetraciclina

0,5-07

400-1000ppm

5-14

21

CARBNCULO HEMTICO (ANTHRAX, Bacillus anthracis)

Etiologia

O agente etiolgico da enfermidade o B. anthracis, um bacilo gram positivo,

aerbico, capsulado, esporulado e no hemoltico. A forma vegetativa da bactria muito
sensvel sendo destruda rapidamente pela pasteurizao, uso de desinfetantes comuns e
putrefao das carcaas. Contudo, os esporos formados quando da abertura das carcaas e
exposio da bactria ao oxignio so resistentes a maioria dos agentes externos, como

71

salga dos couros, tratamento trmico padro e uso de desinfetantes. Podem persistir no
meio ambiente por perodos superiores a 60 anos, desde que em condies favorveis.
Sobrevivem muito bem em solos alcalinos ricos em matria orgnica, em especial com alto
teor de umidade e temperaturas elevadas.
Entre os fatores de patogenicidade da bactria podemos citar a cpsula e a toxina
protica. Ambas so codificadas em plasmdeos (px02 e px01, respectivamente). A toxina
produzida em trs formas:
- Protetor de antgeno: Tem por funo permitir a entrada das demais toxinas na clulaalvo, para isto deve ser clivada por protenas da superfcie das clulas como a calmodulina.
Esta toxina interage com receptores celulares.
- Fator de edema: uma adelinato ciclase, que quando ativa capaz de produzir AMPc na
clulas do hospedeiro. Leva a perda de gua e eletrlitos pela clula.
- Fator letal: Toxina mais importante. Possui natureza enzimtica e atua sobre as
mitocndrias. Levam a alterao nas mitocndrias induzindo a morte da clula por
apoptose.

Toxinas

DL50

Edema %

Letal + Edema

5.105

40

Letal

107

Edema

+ de 10

20

Epidemiologia

Esta enfermidade acomete naturalmente todos os animais de sangue quente, contudo

os ruminantes so bem mais sensveis, seguidos pelos equinos. Sunos e o homem ocupam
posio intermediria, sendo que os carnvoros so extremamente resistentes. A morbidade
varivel de acordo com a demografia, contaminao do terreno e sua constituio. O
reservatrio da bactria o solo, sendo classificada como uma enfermidade telrica. A
presena de solo rico em hmus, frteis e principalmente de clima quente e chuvoso levam

72

a propagao da enfermidade, gerando o que se chamam de campos malditos. Com a

decomposio da matria orgnica o solo incorpora muito N, fundamental a vegetao da
bactria, a qual seguida pela formao de novos esporos extremamente resistentes,
mantendo o solo contaminado por anos. Entretanto, solos pobres e arenosos dificultam o
surgimento da enfermidade, sendo os surtos associados a introduo de animais
contaminados.
A principal forma de infeco se d pela via oral, uma vez que o solo e a gua so
muito contaminados em especial quando da presena de pequenos ferimentos na mucosa
oral dos animais. O consumo de raes contaminadas tambm importante. A transmisso
por via respiratria tambm deve ser sempre considerada. No existem transmissores,
contudo pode haver vetores mecnicos, como insetos hematfagos.
As principais zonas enzoticas esto localizadas nos trpicos ou subtrpicos. No
Brasil, a enfermidade ocorre trs reas distintas: A zona da campanha ou fronteira do Rio
Grande do Sul, onde as terras so predominantemente baixas e alagadas. O vale do
Parnaba, nos estados do RJ e MG e o nordeste brasileiro, principalmente nos arredores de
Recife.
No oeste de SC, em 1984 foi descrito um surto em sunos, onde dos 450 animais, 95
morreram. A fonte do surto foi provavelmente devido ao consumo de rao contaminada.

Sinais Clnicos

O perodo de incubao da enfermidade geralmente de uma a duas semanas. Em

bovinos, pode ocorrer a forma superaguda, onde o animal esta bem e cai, tendo convulses
e a morte em questo de horas. A forma prevalente a aguda que mata de 24 a 72 horas,
podendo se prolongar por at 10 dias. Manifestam-se por febre, respirao e pulso
acelerado, anorexia, queda, convulses e morte. Imediatamente antes ou aps a morte
podem ocorrer hemorragias por todos os orifcios naturais. O edema tambm observado,
contudo maior em animais, onde a bactria leva bastante tempo para matar, contudo, isto
raro.

73

Em pequenos ruminantes, o carbnculo sempre superagudo, fulminante,

ocorrendo a morte em questo de horas. Os principais sinais clnicos so andar inseguro,
intranqilidade, tremores, dispnia e hemorragias.
Nos eqinos, os sinais so caracterizados por clicas e grande reas de edema
localizadas no baixo ventre, membros e genitlias. A morte pode ocorrer pela reao local
(edema) na garganta do animal.
Os sunos, embora relativamente resistentes, podem adquirir a infeco,
preferencialmente por via digestiva, estando a reao localizada a garganta e aos intestinos.
Alguns animais possuem diarria e desinteria, sendo estes sinais os mais frequentemente
observados. A recuperao de 50% dos animais demonstrando sinais clnicos normal bem
como a infeco sem o desenvolvimento de enfermidade.
Os carnvoros apresentam principalmente edemas na face cabea e pescoo. A
gastroenterite aguda tambm pode ser observada.
No homem, duas formas clnicas so observadas, dependendo principalmente das
vias de infeco. A pstula maligna caracterizada por leses inflamatrias, ulcerativas,
localizadas, quentes e dolorosas, com forte edema subcutneo. As leses podem se
complicar e com o tempo levar a septicemia. Um estado de choque precede a morte, que
ocorre em torno de 10 a 20% dos casos. A infeco respiratria leva ao carbnculo
pulmonar, onde so observados edema pulmonar, pneumonia hemorrgica, septicemia e
meningites. Os ndices de mortalidade nestes casos podem atingir 100%.

Achados de necropsia

Um animal morto pelo anthrax no deve ser submetido a necropsia, por que os
bacilos podem esporular e contaminar o meio ambiente, bem como o responsvel pela
necropsia.
O rigor mortis rapidamente se estabelece e prontamente resolvido, sendo comum a
descrio de ausncia de rigor mortis. Pode ocorrer a eliminao de um fludo
sanguinolento pela boca narinas e anus. O timpanismo marcante e a deteriorao da

74

carcaa tambm. O sangue se apresenta escuro e no coagulado. Hemorragias podem ser

observadas no trato digestivo e lceras podem ser visualizadas nas placas de Peyer.
O bao apresenta-se edemaciados, bem como o fgado, rins e linfonodos. A anlise
microscpica, principalmente do bao indicar sinais de septicemia, como disteno dos
tecidos, presena de leuccitos e cadeias de bacilos, que podem ser observadas tambm nos
vasos sanguneos.

Diagnstico

A necropsia no deveria ser realizada, contudo o diagnstico baseado somente nos

achados clnicos e post mortem pode ser difcil, especialmente em regies onde a
ocorrncia da enfermidade inesperada. Da mesma forma em outras espcies animais, que
no os ruminantes os sinais clnicos no claros, sendo geralmente realizada a necropsia. O
material a ser colhido so amostras de sangue perifrico e swabs, porm estas devem ser
remetidas em frascos lacrados. No histrico deve estar bem clara a suspeita de B. anthracis.
No laboratrio, o exame microscpico do sangue revelar a presena de bacilos. A
cpsula ser demonstrada pela colorao de Loeffer. A cultura bacteriana em aerobiose e a
inoculao em camundongos so confirmatrias. sempre interessante a diferenciao da
bactria do B. cereus, um contaminante sem importncia clnica. As caractersticas so
apresentadas abaixo:

Caracterstica

B. cereus

B. anthracis

hemlise

sim

Fraca ou ausente

Sensibilidade a penicilina

no

Sim

Liquefao da gelatina

rpida

Lenta

Cpsula

sim

No

a sim

No

Patogenicidade
camundongos

75

O diagnstico diferencial do carbnculo hemtico deve ser realizado de outras

enfermidades causadoras de morte sbita, como: clostridioses, timpanismo, picada de cobra
descarga eltrica, anaplasmose, ingesto de samambaia. Nos eqinos a anemia infeciosa
eqina, clica e intoxicaes. Em sunos a PSC, a PSA e o edema maligno devem ser
considerados.

Controle e profilaxia

O controle da enfermidade muito importante pela sua implicao na sade pblica

e prejuzos a criao de animais. A quarentena de propriedades infectadas deve ser
realizada proibindo-se o tansporte de animais, bem como de seus subprodutos, como carne
e leite. As caraas infetadas no devem ser abertas e sim incineradas ou enterradas (a pelo
menos 2m de profundidade, coberta de cal virgem). Cama e solo superficial tambm devem
ter o mesmo tratamento. A desinfeco de instalaes com formalina (5-105) so eficientes,
bem como o uso de cidos. O pessoal deve usar luvas, botas e outros equipamentos para
proteo pessoal. Materiais como farinha de osso e carne no devem ser administradas aos
animais.
A imunizao dos animais deve ser realizada em reas de ocorrncia da
enfermidade. A vacina viva, produzida a partir da cepa Stern. Esta contm esporos
suspensos em saponina ou adsorvidos em hidrxido de alumino. Esta cepa toxignica e
acapsulada sendo rapidamente eliminada pelo organismo. Por isto, o uso de adjuvantes. A
cepa Stern pode ser aplicada a outras espcies animais, como os eqinos, entretanto
reaes adversas, geralmente associadas a forte edema localizado so descritas. A vacina
no e recomendada para eqinos rotineiramente. Nos seres humanos, a vacina no segura,
podendo induzir fortes reaes. A pesquisa de novas vacinas tem levado ao surgimento de
novas opes como o uso de protenas recombinantes no caso o protetor de antgeno.
O leite de animais infectados, mesmo em tratamento deve ser desprezado at a
recuperao dos animais. Para tal, estas devem ser fervidas de 15 a 20 minutos e ento
dissolvendo em soda caustica at a concentrao de 5%. A soda deve agir no leite quente
por 10 minutos.

76

As medidas para controle da enfermidade envolvem:

- Notificao de casos
- Estabelecimento de quarentena
- Incinerao ou enterro de carcaas, fmites e dejetos
- Isolamento de animais doentes
- Uso de repelentes e inseticidas
- Controle de carniceiros
- Pessoas devem tomar cuidados sanitrios

Tratamento

O B. anthracis muito sensvel a penicilina (1000UI/Kg/2x ao dia). O uso

preferencial recomendado o da penicilina benzatina. Alm da penicilina estreptomicina
tambm pode ser empregada (8-10g, diariamente em duas doses) ou oxitetraciclina
(9mg/Kg/dia). Animais de grande valor podem ser tratados preventivamente com
tetraciclina (20mg/Kg/dia) na gua de bebida.

CLOSTRIDIOSES

As clostridioses so importantes enfermidades, na sua maioria letais, ocasionadas

pelo gnero Clostridium sp. Estes so bacilos gram positivos, anaerbicos e formadores de
esporos. Existem mais de 80 espcies de Clostridium sp., contudo poucas apresentem
importncia em medicina veterinria. As clostridioses so muito importantes em pases
tropicais. A invasividade e toxigenicidade destas bactrias variam muito e permitem a
classificao destas bactrias em dois grandes grupos:

77

Toxicidade

Invasividade

C. septicum
C. chauvoei
C. perfringens
C. novyi
C. tetani
C. botulinum

O cultivo bacteriano muitas vezes complicado pela grande exigncia de

anaerobiose. Estas enfermidade so de grande importncia para pases de clima tropical e
subtropical. Abaixo demonstrada comparando as principais clostridioses.

Entrada

Porta de Stio de

Sndrome/Doena

replicao bacteriana

Espcies

Etiologia

susceptveis

toxinas

ou produo de toxina
Ingesto

Msculo

Principais

produzidas
Carbnculo

Bovinos,

C. chauvoei

beta, gama e

caprinos

alfa

delta,
sintomtico e
ovinos

Fgado

Hemoglobinria

Bovino,

C.

blecitinase

bacilar

ovino

haemolyticum

Hepatite

Bovino,

C. novyi tipo

necrtica

ovino

Enterotoxemia

Bovino,

C.

beta e psilon

ovino e

perfringens

tipos B, C e D

C. botulinum

neurotoxinas

blecitinase

caprino
Ossos e carcaas em

Botulismo

Bovino,

decomposio, gua

ovino e

tipos C e D,

parada e fonte de

caprino,

botulnicas C1 e

alimentao

eqino,

aves e ces
Feridas

Feridas

Edema maligno

Bovino,

C. septicum,

alfa, beta,gama

ou gangrena

ovino e

C. chauvoei,

e delta

gasosa

caprino

C. sordellii,
C.
perfringens,

78

C. novyi
Ttano

Todas as

C. tetani

espcies de

tetanospasmina
e tetanolisina

mamferos

Lobato e Assis (2005)

BOTULISMO (Clostridium botulinum)

Etiologia

O botulismo uma neurointoxicao, causada por sete tipos (A-G) diferentes de

toxina. No Brasil as toxinas mais importantes so C e D. O C. botulinum se caracteriza por
no ser invasivo, contudo produz potentes toxinas que atuam sobre sistema nervoso e levam
a morte do animal. No caso do botulismo a toxina pr-formada durante a putrefao da
carcaa. Os animais ao ingerirem gua, alimentos (silagem) e ossos contaminados pela
toxina desenvolvem o botulismo. A toxina botulnica atua bloqueando de modo irreversvel
a liberao de acetilcolina na fenda sinptica. Esta possui uma ao proteoltica sobre
protenas (VAMP) que auxiliam na exocitose dos grnulos de acetilcolina na fenda
sinptica. Estas protenas se fixam na T-SNARE uma protena da membrana citoplasmtica
dos neurnios, com isto ocorre a fuso de membranas e a liberao do contedo das
vesculas (acetilcolina) na fenda sintpica. Com isto ocorre a flacidez muscular
caracterstica da enfermidade.
As espcies mais sensveis so bovinos, aves domsticas (ciscam) e caninos,
entretanto a gravidade dos sinais clnicos e diretamente proporcional a quantidade de toxina
absorvida. Tanto a bactria quanto as suas toxinas so sensveis ao calor (120oC por 5
minutos).

79

Epidemiologia

As espcies mais susceptveis so bovinos, aves e carnvoros. O reservatrio para o

C. botulinum so o solo e o meio aqutico. Quando um animal morre, os esporos
bacterianos presentes, principalmente no intestino e produzem as potentes toxinas. A
transmisso se d pela ingesto da toxina.
No Brasil, a regio CO grandemente afetada, pela carncia nutricional do solo e
pastagens de brachiria fraca em P, que estimula os animais a osteofagia. Neste sentido
importante considerara a correta suplementao mineral dos animais. Na regio sul, foi
descrito um surto em bovinos confinados alimentados com silagem contaminada. A
mobidade da enfermidade de 10%, enquanto que a mortalidade de 100%.

Sinais Clnicos

Os sinais clnicos caractersticos da enfermidade so a paralisia dos msculos que

inicia nos membros posteriores e em seguida dos membros anteriores at a parada
respiratria por paralisia do diafragma. Outros sinais verificados so hipotonia ruminal,
anorexia e decbito. Pode haver diminuio do reflexo pupilar. A morte pode ocorrer de
dois dias at semanas, dependendo da susceptibilidade do animal e da quantidade de toxina
ingerida. A paralisia de lngua bem caracterstica, especialmente nos bovinos. Nas aves, o
sinal caracterstico a perda de tnus no pescoo. O botulismo deve ser diferenciadas de
outras enfermidades neurolgicas, como a raiva e infeco pelo HBV 5.

Diagnstico

O diagnstico do botulismo baseado na anamnese, sinais clnicos, isolamento, que

raramente possvel e deve ser realizado no alimento e nunca no animal. Entretanto o mais
importante. As amostras de eleio so: soro, contedo intestinal, ossos e alimentos
suspeitos. A tcnica mais utilizada a soroneutralizao em camundongos. Uma vez que
haja suspeita da presena da(s) toxina(s), o que verificado pela morte dos camundongos,

80

que apresentam a cintura de vespa, caracterstica da dificuldade respiratria dos animais

ocorre uma primeira confirmao. Contudo o diagnstico definitivo realizado com antisoros especficos. Atualmente, tem-se utilizado a tcnica de reao em cadeia da polimerase
(PCR), que permite por meio de primers de oligonucleotdeos, detectar os genes
responsveis por codificar as neurotoxinas.

Controle e Profilaxia

No existe tratamento eficaz e a preveno deve ser feita com o uso de vacinas,
destino adequado de carcaas e mineralizao balanceada dos animais. As silagens e fenos
devem ser preparados de maneira que no haja a contaminao com animais mortos (aves,
ratos, etc.).
Nos caninos e felinos, alm da terapia suporte e uso de antibiticos (penicilina,
melhor ampicilina, para evitar as infeces secundrias) pode ser administrado antisoro
(10.000 a 15.000UI, IV ou IM, 4-4h). Evitar sempre o uso de aminoglicosdeos, tetraciclina
e penicilina procanica. A vacinao dos bovinos e suplementao com P uma das
importantes formas de preveno do botulismo.Vacinas podem ser aplicadas com 4 meses e
aps reaplicadas em 14-21 dias. A revacinao anual ou semestral indicada em
propriedades com surtos freqentes.

TTANO

Etiologia

O C. tetani o agente do ttano. Esta bactria apresenta um esporo caracterstico

subterminal, que confere a clula um forma de raquete.

A infeco ocorre pela

contaminao de feridas com solo e fezes. Aps a cicatrizao prvia e contaminao por
bactrias anaerbicas ocorre a reduo da tenso de oxignio e vegetao dos esporos. A
bactria fica presente no local da ferida, produzindo as toxinas que so a tetanolisina

81

responsvel pela necrose tecidual e a tetanoespasmina, neurotxica, que vai por via nervosa
at a placa motora e bloqueiam a liberao do GABA na fenda sinptica. Este
neurotrasmissor inibitrio, atua impedindo a contrao exagerada dos msculos. Sem este
inibidor ocorre a forte contratura muscular, que pode levar o hospedeiro a morte por parada
respiratria. A adoo de postura de cavalete e o opisttono so caractersticos. A
localizao da ferida contaminada pode ser difcil, devido cicatrizao. Em humanos
recm nascidos e idosos so os mais atingidos devido baixa na imunidade. Todos somos
vacinados contra o ttano na infncia.

Epidemiologia

Os animais mais susceptveis so os eqinos (solpedes), ovinos, sunos, bovinos e

caninos. As aves so muito resistentes, pois no possuem gangliosdeos que servem como
receptores para as toxinas.

A bactria distribuda mundialmente e encontrada

facilmente no solos e fezes, bem como no intestino dos animais. A transmisso ocorre por
cortes, seja eles acidentais cirrgicos, em decorrncia do parto ou umbilicais. A letalidade
em bovinos jovens superior a 80%, mas a taxa de recuperao alta em bovinos adultos.
Em eqinos a letalidade varia muito entre reas, sendo que em algumas, quase todos os
animais morrem de forma aguda, enquanto que em outras, a taxa de letalidade est em
torno de 50%.

Sinais Clnicos
Na maioria dos animais susceptveis os sintomas ocorrem entre 2 semanas e um ms
aps a inoculao bacteriana. O perodo de incubao do ttano varivel e depende das
dimenses do ferimento, grau de anaerobiose, nmero de bactrias inoculadas e ttulo de
antitoxina do hospedeiro. Os casos de ovinos e cordeiros ocorrem 3 a 10 dias aps a tosa ou
remoo da cauda. O quadro clnico similar quele de todas as espcies animais. Os
primeiros sinais clnicos em alguns animais podem ser vaga rigidez e claudicao, postura
de extenso da cabea, postura de cavalo de pau, orelhas e lbios retrados em direo a
nuca, cauda levantada, saliva espumosa acumulando-se na comissura labial, estrabismo
82

ventrolateral, pupilas fixas e dilatadas e normalmente morrem durante convulso terminal.

Um aumento generalizado da rigidez muscular observado e se acompanha por
tremor muscular. H trismo com restrio dos movimentos mandibulares e prolapso da
terceira plpebra, alm da rigidez dos membros posteriores que causa um andar errante e
instvel. O prolapso da terceira plpebra fica exagerado pelo levantar do focinho ou abaixar
a face. Os sinais adicionais incluem uma expresso ansiosa e alerta, crispada pela ereo
das orelhas, retrao das plpebras e dilatao das narinas, e por respostas exageradas aos
estmulos normais. A constipao usual e a urina fica retida, em parte pela incapacidade
de assumir a posio normal para urinar. medida que a doena progride, a tetania
muscular

aumenta.

As

contraes

musculares

desiguais

podem

ocasionar

desenvolvimento de uma curvatura da coluna e desvio lateral da cauda. A marcha

dificultada e o animal fica propenso a cair. A queda ocorre com os membros ainda no
estado de tetania e o animal pode se autotraumatizar. O opisttono acentuado, os
membros posteriores esto paralisados em abduo, com as pernas traseiras estendidas para
trs e as dianteiras para frente. As convulses ocorrem e, inicialmente, so estimuladas pelo
som ou toque, mas logo ocorrem espontaneamente. Em casos fatais, quase sempre h um
perodo transitrio de melhora por algumas horas, antes de um espasmo tetnico grave,
final, durante o qual a respirao fica suprimida, podendo levar o animal a morte.
Diagnstico

No ttano, o diagnstico laboratorial semelhante ao botulismo, sendo a

demonstrao da neurotoxina o mais empregado. Entretanto, na maioria dos casos, o
diagnstico est baseado apenas na anamnese e na sintomatologia clnica, sem referncia a
testes laboratoriais. A cultura, quando possvel (em AS, sobre condies de anaerobiose)
deve ser realizada e a morfologia do C. tetani caracterizado pela produo de um esporo
terminal dando ao bacilo um formato de raquete de tnis.

83

Tratamento e Controle

O tratamento do ttano realizado pela terapia suporte, transporte do animal num

local escuro. O uso de antitoxina (eqinos: 1.500-3.000 UI, SC; bovinos: 3.000-9.000UI no
local da ferida; caninos: 1.000 U, IM; ovinos: 200U, no corte da cauda em propriedades
enzoticas), uso de sedativos e antibiticos so recomendados. A vacinao (2, 3 e 6 meses
com reforo um ano aps) e uso de antisoro so recomendados antes de procedimentos que
possam levar ao desenvolvimento da enfermidade.
O relaxamento da tetania muscular pode ser propiciado pela sedao e manuteno
do paciente em local tranqilo e obscuro. A terapia medicamentosa que pode reduzir os
espasmos musculares consiste de clorpromazina (0,4 mg/kg de peso vivo), promazina (0,51mg/kg) ou acetilpromazina 0,05-0,1 mg/kg), duas vezes ao dia, durante 8-10 dias, at que
os sinais graves desapaream.
Nas reas enzoticas, todos os animais suscetveis devem ser imunizados
ativamente com toxide, uma toxina precipitada pelo alumnio e tratada pela formalina.
Uma injeo confere proteo em 10 a 14 dias, persistindo por um ano, e a revacinao em
12 meses confere uma slida imunidade por toda a vida. Um programa mais intensivo de 2
vacinaes com seis a oito semanas de intervalo seguidas por vacinao anual de reforo
preferido.

Comparao entre as toxinas do C. tetani e C. botulinum

C. tetani

C. botulinum

Produo da toxina

ferida

ingesto

Ao

Bloqueio

da

inibio

da Inibio

da

sinapse-

sinapse- central

perifrica

paralisia

espstica

flcida

Tipos de toxina

tetanosespamina

8 tipos (especialmente C e D)

84

CLOSTRIDIOS HISTOTXICOS

CARBNCULO SINTOMTICO, EDEMA MALGNO E GANGRENA GASOSA

(MANQUEIRA, BLACK LEG)

Etiologia

Este complexo de enfermidades ocasionado por vrias bactrias do gnero

Clostrdium. Todas apresentam um mecanismo de patogenicidade parecidos, sendo
diferenciados apenas do ponto de vista didtico e por algumas caractersticas peculiares. As
toxinas produzidas por estas bactrias no so muito potentes, mas servem para reduzir as
condies de aerobiose dos tecidos e desta forma permitir a invaso dos tecidos. A origem
das bactrias pode ser endgena e exgena ou endgena. A infeco endgena
caracterstica do carbnculo sintomtico, onde os endsporos ingeridos nas pastagens vo
ao intestino e so absorvidos indo se depositar nos msculos. Quando o animal sofre uma
leso esta leva a uma necrose muscular reduzindo a tenso de oxignio e permitindo a
disseminao bacteriana. Na infeco exgena, caracterstica do edema maligno, a bactria
presente no solo fezes contamina feridas que por suas caractersticas necrticas permitem a
multiplicao dos bacilos e produo de toxinas. Entre as toxinas bacterianas podemos citar
hemolisinas (aspecto escuro) e lecitinases, sendo observados os produtos da fermentao
como cido butrico (manteiga ranosa) e gs.

Epidemiologia

Os ruminantes so grandemente afetados, embora surtos espordicos em sunos

tambm sejam reportados. No caso do edema maligno a infeco muito comum em
fmeas que pariram em solo contaminado por fezes e nos ovinos aps a descola. Situaes
de estresse levam a uma reduo na oxigenao dos tecidos perifricos, o que pode
precipitados surtos de carbnculo sitomtico. Geralmente acomete animais em excelente

85

estado nutricional, logo com uma grande taxa de deposio muscular o que reduz a
oxigenao dos tecidos.
Sinais Clnicos
Comea com uma manqueira, em virtude da mionecrose acentuada e de feridas
infetadas da pele e dos ps que podem estar presentes no edema maligno. H perda de
apetite, febre alta, clicas, parada ruminal, respirao acelerada, apatia, dispnia e os
caractersticos tumores crepitantes (tumefaes gasosas), quentes e dolorosas. Os tumores
parecem mais freqentemente no pescoo, paletas, peito e flancos. O interior da boca
apresenta colorao escura. A morte pode ser superaguda (8-12h) ou aguda (36-72h).
Clostridios causadores de gangrena
Espcie

Hospedeiro

C. chauvoei

Terneiros

Doena
3- C. sintomtico

24 meses

Entrada

Sinais clnicos e ps mortem

endgena

Morte

Gangrena gasosa

subida,

necrose

muscular, especialmente no
msculo cardaco

ovinos

feridas

Odor

ranoso,

msculos

enegrecidos, crepitao
C. septicum

Bovinos

Edema malgno

Ovinos

Exgena por Febre,

feridas

Sunos
detodas

edema

mido

com

edema e gs
Msculos enegrecidos

as

idades
ovinos
C. novyi A

Braxy

ovinos
Bovinos

Gangrena gasosa

endgena

Leses localizadas no abomaso

feridas

Edema na cabea e pescoo

feridas

Leses semelhantes ao edema

ovinos

maligno
Morte sbita pode ocorrer

C. sordelli

Bovinos

Gangrena gasosa

feridas

Similar ao edema malgno

Gangrena gasosa

feridas

Edema, necrose tecidual e

ovinos
C.

Humanos

perfringens

caninos

gangrena

tipo A

86

Diagnstico

Alm da anamnese e sinais clnicos, os achados de necropsia e isolamento dos

agentes envolvidos muito importante. As principais manifestaes patolgicas observadas
nos animais so: rigidez cadavrica, necrose e enfisema em grandes massas musculares,
lquido sanguinolento, sangue escuro e coagulado, fgado congesto, endocardite. O
isolamento bacteriano realizado em meios como AS (cultivo em anaerobiose) e em meios
especiais como CMM. O material indicado para o diagnstico so os metacarpianos e
metatarsianos, que por sua localizao so livres da contaminao por clostridios do
intestino que no so responsveis pela doena e sim pela putrefao da carcaa. A
bactria caracterizada pela sua morfologia, sendo que o C. chauvoei e C. septicum
apresentam a mesma morfologia, contudo quando inoculados em camundongos o C.
septicum torna-se filamentoso em esfregaos do fgado dos animais inoculados. A
inoculao em camundongo importante para confirmar a etioltogia da enfermidade.

C.. chauvoei e C. septicum

Em CMM

C. septicum
fgado de camundongos inoculados

Alm disto, podem ser empregadas outras tcnicas como a imunofluorescncia

direta (IFD) que permite a deteco dos agentes em esfregaos de cultivo e em impresses
obtidas diretamente dos tecidos durante a necropsia; a imunohistoqumica (IHQ), em cortes
histolgicos e/ou esfregaos de cultivo e a PCR, que amplifica seqncias conservadas da
subunidade do rDNA 16S.

Controle

Para o controle desta enfermidade so necessrios vrios cuidados. Estes tanto a

prticas de manejo e higiene. Os animais mortos devem preferencialmente ser enterrados

87

ou queimados. Estes procedimentos devem ser bem executados, ou seja, os animais devem
ser completamente queimados (cinzas) e enterrados a uma profundidade correta. Estas
tcnicas implicam em custos.
Uma tcnica eficiente para reduzir a clostridiose em uma propriedade a vacinao
dos animais. Esta muito importante e deve ser feita a partir dos 4-6 meses de idade,
revacinao aps 21 dias e anual. Um aspecto importante a ressaltar so os cuidados na
aplicao e escolha das vacinas.

CLOSTRIDIUM HISTOTXICOS QUE AFETAM O FGADO

Etiologia

O Clostridium novyi tipo A, B e C e o C. haemolyticum (C. novyi tipo D) so as espcies

envolvidas no comprometimento heptico dos animais infetados. Nestas enfermidades as
bactrias saem do intestino e se mantm no fgado (interior das clulas de Kupffer).
Quando de uma leso heptica (dano traumtico, parasitrio-fasciolose) ocorrem s
condies de anaerobiose especficas para a germinao dos esporos e bacteremia. As
bactrias produzem toxinas Alfa e Beta, que so codificadas por plasmdeos e produzem
efeitos necrotizantes e letais.

88

C. novyi e C. haemolyticum
bactria

toxina A toxina B hospedeiro

entrada

Sinais clnicos e ps
mortem

C. novyi A

C. novyi B

Ovinos

endgena

Morte sbita

Bovinos 1-

Leses

focais

4 anos

amareladas no fgado
Congesto venosa
Pele negra

C. novyi C

C. haemolyticum -

+++

Bovinos

endgena

Morte

sbita,

dor

abdominal, infartos no
fgado, urina escura

Epidemiologia

Os agentes so encontrados mundialmente e a enfermidade grandemente

encontrada em associao com a infestao por Fasciola hepatica. So afetados ovinos e
bovinos maiores de 2 anos de idade, com morbidade de 0,25% a 18% e letalidade,
geralmente, em torno de 100%. Em SC os surtos so observados geralmente aps cheias.
Sinais Clnicos
A hemoglobinria bacilar uma enfermidade que mata em 12-24 horas, sendo que, de
modo geral, os animais so encontrados mortos sem observao dos sinais clnicos.
Ocasionalmente observa-se um estabelecimento sbito, com parada completa da
ruminao, da alimentao e da defecao. A dor abdominal evidenciada pela dificuldade
de se movimentar e por uma posio com dorso arqueado. O gemido evidente ao se
locomover. A respirao superficial e forada, o pulso fraco e rpido. A febre est
presente nos estgios iniciais. O edema do peito um achado comum. Hemoglobinria com

89

urina vermelha escura e as fezes so marrom-escuras, podendo haver diarria com muco e
algum sangue. A ictercia est presente, mas pouco evidenciada. Vacas prenhes quase
sempre abortam.

Diagnstico

O diagnstico baseado nos achados clnicos e patolgicos. O isolamento bacteriano

muito complicado. Os principais achados de necropsia so: A cor avermelhada da urina,
que esta associada presena de hemoglobina e no h eritrcitos livres. O rigor mortis se
desenvolve rapidamente. Na necropsia observa-se edema subcutneo, gelatinoso que tende
a se tornar crepitante em poucas horas, e hemorragias petequiais ou difusas no subcutneo.
Hemorragias generalizadas em todas as serosas e no endocrdio esto, constantemente
presentes. A leso caracterstica da hemoglobinria bacilar um infarto anmico no fgado.
Este est aumentado de tamanho, amarelado e com presena de focos necrticos. A rea
afetada plida, rodeado por uma zona de hiperemia e tem aspecto geral de uma necrose
localizada. Urina vermelha est presente nos rins e bexiga e a presena de petquias
evidente no rim. Observa-se ainda vescula biliar aumentada de tamanho, esplenomegalia e
contedo intestinal hemorrgico. Histologicamente observam-se necrose de coagulao no
fgado, com numerosas formas bacilares na leso.
Controle e profilaxia

Se possvel, drenagem dos terrenos de pastagem, combate Fascola heptica e outros

possveis fatores de injrias hepticas. Para imunizao dos bovinos e ovinos so utilizadas
vacinas, contendo cultivos bacterianos formalizados e precipitados em hidrxido de
alumnio, que permitem uma boa proteo por um perodo de um ano. A vacinao deve ser
feita 4-5 meses antes da previso da ocorrncia dos surtos, e nas reas endmicas deve ser
feita uma revacinao semestral em todos os animais acima de 6 meses de idade.

90

Embora seja uma doena altamente fatal, o uso macio de penicilina ou tetraciclina nos
estgios iniciais pode dar bons resultados com o desaparecimento da hemoglobinria em 12
horas.

ENTEROTOXEMIA

So intoxicaes agudas e altamente letais, que afetam ovinos, cordeiros, terneiros,

leites e potros. A doena ocasionada pelas toxinas principais de C. perfringens dos tipos
B, C e D e ocasionalmente A e E. O C. perfringens relativamente aerotolerante. Os cinco
tipos de C. perfringens possuem diferentes combinaes de toxinas. O tipo A acomete o
homem e as aves. O tipo B produz comumente enterites necrtico hemorrgica em potros e
cordeiros. O tipo C ocasiona diarria em leites de 1 semana e o tipo D ocasiona os casos
clssicos de enterotoxemia em ovinos e bovinos. A doena est normalmente associada a
animais alimentados com grandes quantidades de concentrado.

Tipos de C. perfringens e suas toxinas produzidas.

Ao da toxina

alfa

beta

Lecitinase,

Letal

ataca

sensvel

Iota

e Protoxina ativada Protoxina

a necrotizante,

membrana
das

epsilon

pela

de

tripsina, ao no bem

a ocasiona

a carcaterizada

clulas tripsina-

afeta doena do rim

causando sua neonatos

polposo,aumenta

morte-

hemoltica

toxinas

absoro

de
pelo

intestino e dano
ao endotlio
Tipo C. perfringens
A

91

Patogenia
Ao das toxinas de C. perfringens

- Infeco em animais jovens.

Toxina Beta: Tripsinolbil (destruda pela tripsina intestinal)

Colostro: fatores inibidores da tripsina

Favorece o desenvolvimento da enfermidade em animais jovens

- Enterotoxemia:
Animal suplementado alto teor de energia alimento sem ser degradado
Carboidratos no digeridos no intestino

92

ESTASE INTESTINAL

C. perfringens multiplicao

Protoxina alfa

Protoxina epsilon

ativada pela tripsina

Aumento da permeabilidade

Mucosa intestinal

Endotelio

Pulmo

EDEMA

SNC

EDEMA

SNP

RIM

liberao de

dano tubular

catecolaminas

Incordenaes
Convulses

glicogenlise

HEMORRAGIA

glicosria

Encefalite simtrica focal

OBS.: Os ovinos so mais susceptveis devido a baixa ingesto de gua, fgado pequeno,
superfcie de absoro intestinal maior.

Epidemiologia

Embora a enterotoxemia seja mais comum em cordeiros, tambm ocorre em ovinos

adultos, bezerros, caprinos e em camelos domesticados. Na maioria, seno em todas as

93

circunstncias os animais acometidos esto em dietas altamente nutritivas e condies

excelentes. Existe tambm uma predileo sazonal, nos perodos de maior oferta de
aliemtno no campo. A prevalncia maior da doena nos cordeiros lactentes entre 3 e 10
semanas de idade. Os cordeiros de engorda costumam ser acometidos com maior
freqncia quando so introduzidos nos grupos (no adaptaos).
A enterotoxemia causada pelo C. perfringens tipo D possui distribuio mundial. As
taxas de morbidade variam muito, mas raramente excedem 10%. A taxa de mortalidade se
aproxima de 100%.

Sinais Clnicos
Tipos e sinais clnicos da enterotoxemia
C. perfringes toxina

hospedeiro

doena

Sinais clnicos e ps
mortem

enterotoxina homem

e Intoxicao alimentar Diarria, dor abdominal,

aves

nusea,

vmito,

raramente fatal.
alfa

cordeiros

enterotoxemia

Depresso

anemia

ictercia, morte de 6-12hs

B

Beta

Cordeiros

Desinteria

Epsilon

com menos cordeiros

alfa

de

dos Enterotoxemia rpida e

fatal

semanas
Terneiros e

No muito comum

potros
C

Beta

Cordeiros

Enterotoxemia

alfa

Sunos 1-3 hemorrgica

morte

dias

Depresso

Enterite necrtica

Terneiros

Desinteria,

colapso

diarria,

morte em poucas horas

potros
Ovinos

enterotoxemia

Morte sbita

94

Caprinos
adultos
D

Epsilon

Ovinos

de Doena

do

rim Edema

no

alfa

todas idades polposo

glicosria, morte sbita,

exceto

fuiods

neonatos

corporais,

Casos raros

encefalomalcia

em

simtrica focal

nas

crebro,

cavidades

terneiros e
cabras
E

Iota

Terneiros e enterotoxemia

alfa

cordeiros

No bem caracterizada

Diagnstico

Existe uma baixa freqncia de diagnstico laboratorial de enterotoxemia bovina no

Brasil. Pelo fato do C. perfringens ser um comensal do trato gastrointestinal, apenas o
isolamento do microrganismo no suficiente para o diagnstico. O diagnstico da
enterotoxemia realizado pelos sinais clnicos e achados patolgicos. O material a ser
remetido para o laboratrio contedo intestinal, lquido de ascite, fgado e rins.
No laboratrio, a inoculao do contedo intestinal purificado em camundongos
importante para a confirmao da enfermidade pelo teste de soroneutralizao em
camundongos. Entretanto, devido a discusses ticas por parte de grupos humanitrios, est
sendo gradualmente substituda por metodologias in vitro, como por exemplo a tcnica de
ELISA e PCR. A presena das toxinas beta e psilon no contedo intestinal o diagnstico
de certeza das enterotoxemias. Entretanto, recomendvel associar este achado com o
histrico, sinais clnicos e achados de necropsia.
Nos ovinos, a toxina psilon de C. perfringens tipo D produz alteraes nas clulas
endoteliais do crebro que levam ao aumento da permeabilidade vascular, produzindo

95

edema cerebral. Entre os achados de necropsia mais importantes para confirmao do

diganstico esto: edema cerebral, petquias e equimoses no endocrdio, alteraes
hemorragias no crtex renal (rim polposo), fluido nas cavidades corporais, hemorragias no
intestino e a encefalopatia simtrica focal.

Tratamento e Controle

A maior parte dos casos de enterotoxemia so superagudas e no permitem o

tratamento. A correo na alimentao dos animais e a reduo nas mudanas bruscas de
alimentao so muito importantes. Para profilaxia deve-se vacinar as ovelhas a cada seis
meses. Os cordeiros estaro protegidos por at 4-8 semanas aps o nascimento.

USO DE VACINAS PARA CONTROLE DA CLOSTRIDIOSES

As

vacinas

clostridiais

devem

ser

adminsitradas

por

via

subcutnea,

preferencialmente, em duas doses intervaladas de 4-6 semanas na primovacinao e reforo

anual, com exceo de C. haemolyticum, que dever ser semestral. Quando o rebanho
sistematicamente vacinado, os anticorpos colostrais protegem os animais por at 3-4 meses
aps o nascimento, devendo ento a primovacinao ser realizada aps este perodo. Para
que o controle das clostridioses seja eficiente, deve-se aliar, pratica de vacinaes,
medidas de manejo que visem reduzir os fatores que podero predispor a ocorrncia dessas
enfermidades.
Abaixo so representados os componentes das principais vacinas utilizadas no controle das
clostridioses.

96

Tipo de vacina
Doena

Agentes envolvidos

Bacterina Toxide

Carbnculo Sintomtico

C. chauvoei

Gangrena gasosa

C. Septicum

C. perfringens tipo A

.+

C. Sordellii

C. novyi tipo A

Enterotoxemia

C. Perfringens tipos B, C e D

Botulismo

C. botulinum tipos C e D

Ttano

C. tetani

Hemoglobinria bacilar

C. haemolyticum

Hepatite necrtica

C. novyi tipo B

Fonte: Lobato e Assis (2005)

CERATOCONJUNTIVITE INFECCIOSA DOS BOVINOS

PROFESSORA AGUEDA CASTAGNA DE VARGAS

ACADMICA ANDREIA FOLETTO PEDROZO
DISC. DOENAS INFECTO-CONTAGIOSAS DOS NA. DOMSTICOS

INTRODUO:

A Ceratoconjuntivite Infecciosa dos Bovinos (CIB) uma doena infecciosa que

ataca

principalmente

bovinos,

caracterizada

por

blefaroespasmo,

conjuntivite,

lacrimejamento e diferentes graus de opacidade de crnea e ulceraes; podendo tambm

ser encontrada em ovinos e caprinos

(MERCK, 1991).

tambm conhecida como

97

Pinkeye (olho rosa), (TROUTT & SCHURIG, 1985); "New Forest Disease", Ophtalmia
Infecciosa e Ceratite Infecciosa (PUNCH & SLATTER, 1984).
O primeiro relato da ocorrncia da CIB foi feito por BILLINGS (1889) e MITTER
(1915) descreve a Moraxella bovis como sendo o agente causador.

IMPORTNCIA ECONMICA:
Severas perdas econmicas so associadas a CIB em gado. Foi estimado que nos
EUA, esta determina perdas anuais prximo dos US$ 150 milhes, onde aproximadamente
10 milhes de cabeas de gado so afetadas causando a perda de US$ 13/ bezerro e um
total de US$ 120 milhes (TROUTT & SCHURIG, 1985).
As perdas sofridas no perodo de infeco, mais o tempo necessrio para recuperar o
peso perdido (bovino de corte); reduo na produo de leite (bovino de leite) e a
possibilidade de complicaes da infeco (cegueira permanente e morte) j justificariam
medidas de controle e profilaxia.

ETIOLOGIA:
A Moraxella bovis uma bactria gram negativa, imvel, em forma de pequeno
coco-bacilo arredondado, geralmente arranjado aos pares ou em cadeias curtas (BISPING
& AMTSBERG, 1988).
Os fatores de virulncia incluem pili, uma toxina dermonecrtica e uma hemolisina.
A pili (fmbria) provavelmente promove a aderncia da M. bovis no epitlio corneal,
impedindo a eliminao da bactria do olho. Clulas beta hemolticas so mais virulentas
que as no hemolticas (GEORGE, 1984). A perda da hemlise resulta na perda da
virulncia, mas a bactria pode reverter a forma virulenta. Cepas hemolticas e fimbriadas
de M. bovis so virulentas e geralmente so isoladas de casos agudos da CIB. A perda da
hemlise parece no estar relacionada com a perda das fmbrias, assim, pode se isolar cepa
de M. bovis no hemoltica e fimbriada. Uma frao da clula tem sido demonstrada como
uma toxina dermonecrtica que quando injetada, produz leso localizada. (PUNCH &
SLATTER, 1984).

98

EPIDEMIOLOGIA:
A CIB altamente contagiosa e pode infectar 80% de um rebanho em apenas 3
semanas (PUNCH & SLATTER, 1984). A doena provavelmente introduzida no rebanho
por um animal portador ou um que sofreu um episdio agudo ou crnico da doena. A M.
bovis pode ser introduzida por insetos carregadores da bactria. Uma vez a bactria
presente no rebanho a transmisso ocorre pelo contato direto ou via vetores mecnicos
(TROUTT & SCHURING, 1985). Estes autores citam ainda que razovel supor que a
disseminao possa ocorrer tambm pelo contato com objetos recentemente contaminados
com descargas nasais e oculares de bovinos infectados.
Fatores fsicos, incluindo luz U.V., plen de plantas, insetos e agentes infecciosos
como vrus ou Mycoplasma podem potencializar os sinais clnicos da CIB (GEORGE,
1984). PUNCH & SLATTER, 1984 relatam que a incidncia da CIB mais alta durante
os meses quentes e tem sido atribuda a inmeros fatores:

1) Luz Ultra Violeta: Estes autores citam que a luz U.V. um dos fatores predisponentes
mais importante. Causa danos na crnea facilitando a infeco por M. bovis, mas o
mecanismo especfico do efeito patognico na crnea desconhecido. GEORGE, 1984 diz
que a luz U.V. pode propiciar stios adicionais para a bactria se ligar e crescer, que pode
resultar numa disseminao pela crnea.

Tambm tem sido relatada a capacidade da luz

ultra-violeta produzir alteraes genticas em cepas avirulentas de M.bovis transformando

estas em cepas virulentas.

2) Susceptibilidade Racial: Raas zebuinas so mais resistentes que as europias. A raa

Hereford mais suscetvel e est relacionado com a pigmentao das plpebras. Entretanto,
apesar da raa Jersey apresentar uma alta pigmentao, ela muito sensvel a CIB,
possivelmente por possuir uma proeminncia do olho, levando a uma maior exposio
Luz U.V. (PUNCH & SLATTER, 1984).

99

3) Populao de Insetos: O aumento da populao de insetos, especialmente a mosca da

face (Musca autummalis), tem correlao com o aumento da incidncia de CIB. TROUTT
& SCHURING, 1985 relatam que esta mosca se alimenta de fluidos oculares que so ricos
em protenas. PUNCH & SLATTER, 1984 relatam que a mosca da face produz uma
irritao mecnica na conjuntiva que provavelmente aumenta a susceptibilidade do olho
para a M. bovis e que esta mosca serve ainda de vetor mecnico podendo disseminar o
agente de um rebanho para outro.

4) Deficincia de Vitamina A: A vit. A tem funo bioqumica especfica na preveno da

cegueira noturna atravs da produo de um pigmento sensitivo luz chamado de Prpura
Visual (Rodopsina), localizado na parte posterior da retina do olho. Ela tambm tem
importncia no funcionamento e manuteno do tecido epitelial, inclusive do olho. Os
sinais clnicos associados com a deficincia de vit. A so variveis e incluem excessiva
lacrimejao, evidenciada cegueira e crnea opaca. Estes sinais so semelhantes aos
presentes na CIB. Por causa da deficincia da vit. A conveniente dizer que esta
deficincia tem relao com a produo de CIB, mas na grande maioria dos casos de CIB
ocorrem independentemente de uma deficincia de vit. A (TROUTT & SCHURING,
1985).

5) Agentes Infecciosos: Agentes citados por GEORGE, 1984 como o adenovirus e o vrus
da Rinotraquete Infecciosa Bovina (IBR) tem sido associado com o aparecimento de
doena ocular em gado. Alm destes acima citados, PUNCH & SLATTER, 1984 citam
tambm o Mycoplasma, espcies de Neisseria e Thelazia, que aumentam os efeitos
patognicos da M. bovis. TROUTT & SCHURING, 1985 citam que o Mycoplasma no o
principal fator para o desenvolvimento da CIB, mas pode aumentar a susceptibilidade do
olho para a infeco da M. bovis.

6) Idade: Os terneiros tendem a ser mais infectados com CIB do que animais mais velhos.
O mecanismo da resistncia de animais mais velhos no bem claro, mas possivemente se

100

deva ao desenvolvimento de imunidade com uma exposio prvia ao agente (PUNCH &
SLATTER, 1984).

7) Outros Fatores: Inmeros irritantes mecnicos da conjuntiva e cornea tais como poeira,
pastagens altas, sementes e plen so associados com a patogenia da CIB (PUNCH &
SLATTER, 1984). TROUTT & SCHURING, 1985 relatam que p, plen e pasto alto
causam traumas direto no tecido ocular favorecendo a penetrao da M. bovis, e o vento
causa ressecamento da cornea especialmente no centro aumentando a susceptibilidade da
regio facilitando a penetrao do agente.

PATOGENIA:
ANIMAL PORTADOR

ORGANISMOS + LESO NO OLHO (luz U.V.,

irritantes)
outros agentes infecciosos

ADERNCIA (COLONIZAO - FMBRIAS)

MULTIPLICAO

PRODUO DE TOXINA

DOENA

101

Segundo GEORGE, 1984 a possvel seqncia dos principais eventos da ulcerao

da cornea esto representados na figura abaixo:

V - vrus

E - epitlio

EST - estroma

M - membrana

N - neutrfilos

I-

ris

1) Cornea normal que sofre exposio a luz U.V. ou vrus da IBR e M. bovis. O resultado
uma leso e separao das clulas do epitlio.
2) A M. bovis coloniza o epitlio.
3) A bactria invade o estroma da cornea e neutrfilos so atrados para a rea infectada. Os
neutrfilos liberam colagenase aumentando assim o tamanho e a profundidade da ulcera.
4) Perfurao profunda da crnea, resulta em prolapso de ris atravs do defeito.

SINAIS CLNICOS:
Os sinais clnicos da CIB so observados entre 3 a 5 dias aps a infeco com M.
bovis e inclui epfora (secreo lacrimal contnua), blefaroespasmo (movimento espstico
da plpebra) e fotofobia. Neste tempo, pode aparecer uma ou mais lceras superficiais na
crnea medindo de 1 a 4 mm (GEORGE, 1984). Inicialmente a crnea clara ao redor da
leso aparecendo depois uma pequena rea de opacidade e depois mais densa. No comeo
estas leses podem progredir ou regredir. Aps 48-72 horas o caso grave, o centro da

102

crnea pode ficar opaco e o animal cego. Perto de 1 semana aps a primeira leso aparecer,
vasos sangneos comeam a invadir a crnea (vascularizao adventcia) do limbo para a
lcera (MERCK, 1991).
Sinais de fotofobia so usualmente evidentes ao mesmo tempo em que ocorre
excessivo lacrimejamento sendo provavelmente sinais de severa inflamao presente na
conjuntiva e aps, na crnea (TROUTT & SCHURING, 1985). Outros sinais clnicos a
partir de 5 a 7 dias so edema de crnea, eritema conjuntival e quemose (edema com
conjuntiva espessa e edemaciada) (GEORGE, 1984).
Segundo PUNCH & SLATTER, 1984 so descritos 5 tipos de infeces da CIB:
1) FORMA AGUDA: Uma conjuntivite e ceratite comparativamente leve.
2) FORMA SUBAGUDA: Forma mais severa com alguma ulcerao corneal.
3) FORMA CRNICA: Severa conjuntivite com formao de uma decemetocele e possvel
perda do olho pela ruptura da cmara anterior.
4) FORMA FULMINANTE: Severa ulcerao, panoftalmia, geralmente bilateral, cegueira,
ocasionalmente morte devido a infeco ascendente.
5) FORMA DE CARREADOR, PORTADOR: Lacrimejamento persistente em alguns
casos, mas a maioria no mostra sinais de infeco.

DIAGNSTICO:
Usualmente a primeira indicao da CIB a evidncia de excessivo lacrimejamento
em bovinos afetados. Para isolamento do agente, a secreo lacrimal (fase de
lacrimejamento) coletada em swab estril que colocado em 1 a 2 ml de gua destilada
estril e levado no mximo em 2 hs ao laboratrio. A colheita pode tambm ser realizada
em swab e enviada em meio de transporte Stuart modificado conservado resfriado o que
possibilita a chegada do material ao laboratrio at 48 horas aps a colheita. O swab
lacrimal semeado gar Sangue e seu melhor crescimento ocorre aerobicamente a 37C.
Aps 24 hs, as colnias so cinzas e pequenas medindo entre 3 a 4 mm de dimetro
(GEORGE, 1984).

103

A identificao desta bactria realizada atravs de testes bioqumicos onde no

reduz nitratos, no fermenta carboidratos e no cresce em gar Mac Conkey e oxidase
positiva (FRASER & GILMOUR, 1979).

DIAGNSTICO DIFERENCIAL:
A infeco por M. bovis tem sido considerada sempre que aparece uma doena
ocular no rebanho e o diagnstico visa diferenciar de corpos estranhos na crnea e saco
conjuntival, infeco ocular pelo vrus da IBR ou da Febre Catarral Maligna (GEORGE,
1984). Na IBR h sinais no trato respiratrio superior e conjuntivite predominante que
poder estar acompanhada de ulcerao. Na IBR no h leso de crnea; na Febre Catarral
Maligna em bovinos, h sinais respiratrios, digestivos e ceratite com resoluo no centro
da crnea; em casos de CIB a leso tem resoluo do limbo para o centro (MERCK, 1991).

VACINAO:
PUNCH & SLATTER (1984) relatam que existe dvida se a imunidade para a CIB
devido resposta imune generalizada ou local. A severidade da doena e o
desenvolvimento de uma resposta imune varia de acordo com o tipo de cepa causadora da
infeco e mtodos para deteco de anticorpos incluem vrias tcnicas de aglutinao em
tubo e em placa, teste de imuno difuso em gar gel e o teste de ELISA, que j classificou
em 7 sorotipos. A IgA uma imunoglobulina produzida localmente nos tecidos como
lacrimal, salivar, prosttico e glndula mamria, alm de mucosa nasal e intestinal dos
bovinos; relatada a sua presena no fluido lacrimal juntamente com IgG e IgM em
menores quantidades.
H inmeras preparaes de vacinas de M. bovis incluindo de clulas vivas, mortas
com formalina e de pili que foram testadas e que a maioria das preparaes so ineficientes
ou produzem reaes adversas (GEORGE, 1984). Vacinas preparadas com antgeno de M.
bovis parecem oferecer alguma proteo, mas no possuem ainda comprovada segurana;
vacinas contra IBR conferem imunidade ocular (MERCK, 1991). H

uma

dificuldade

104

experimental em produzir uma vacina efetiva e o tratamento com antibiticos pode oferecer
melhor alternativa no controle da CIB do que vacinao (PUNCH & SLATTER, 1984).
No entanto as vacinas autgenas tem se mostrado efetivas em produzir ou amenizar
surtos uma vez que produzem anticorpos contra cepas homlogas. A recomendao para
vacinao no final de agosto (duas doses para animais primovacinados) visa prevenir os
surtos da primavera e 4meses aps (uma segunda ou terceira dose)para prevenir os surtos
de outono.

TRATAMENTO:
Aconselha-se coletar secrees do olho de 5 animais afetados na fase de
lacrimejamento com swab e encaminhar ao laboratrio de microbiologia para identificao
do agente para determinar a susceptibilidade bacteriana e seleo apropriada dos agentes
antimicrobianos (TROUTT & SCHURING, 1985). Infelizmente, poucos programas de
tratamento eficientes e econmicos esto disponveis. A falta de tratamentos adequados se
deve em parte curta meia vida da maioria das drogas antimicrobianas aplicadas
topicamente, a limitada distribuio ocular das drogas parenterais, e as dificuldades de se
testar a eficincia das drogas.
A eficincia na administrao de drogas parenterais depende do nvel de
droga que passa para as secrees lacrimais. As drogas lipoflicas so mais eficientes em
penetrar a barreira sangue/lgrima, como o trimetoprim e eritromicina. Uma droga que tem
apresentado uma boa eficcia em injees parenterais a oxitetraciclina (oxit. LA 20
mg/kg/2 doses/72 hs de intervalo). Para todos antibiticos, o tratamento mais efetivo
quando administrado antes das lceras atingirem dimetro de 0,5 cm. O custo do tratamento
de R$ 10,00/cabea (droga e servio).
Teoricamente a droga para ser efetiva deveria atingir 5x Concentrao
Inibitria Mnima (MIC) nos tecidos oculares. Aps

a administrao parenteral de

formulao de longa-ao de oxitetraciclina, sua concentrao < 1g/ml na lgrima, mas

nveis na conjuntiva (teciduais) so > 2g/ml por 72 hs, embora limitada distribuio
(baixos nveis lacrimais e altos nveis conjuntivais) (GEORGE, 1990).

105

Estudos realizados demonstram que a M. bovis sensvel ao Cloranfenicol,

Tetraciclina, Neomicina (PUNCH & SLATTER, 1984; GEORGE, 1984; SAMEA et al.,
1994), Penicilina (PUNCH & SLATTER, 1984; GEORGE, 1984) Eritromicina (PUNCH &
SLATTER, 1984), Canamicina e Polimixina B (GEORGE, 1984) e resistente a Cloxacilina
(PUNCH & SLATTER, 1984; GEORGE, 1984), Sulfonamida e Lincomicina (PUNCH &
SLATTER, 1984), Tilosina e Estreptomicina (GEORGE, 1984). GEORGE (1990) cita que
a canamicina, embora atinja altos nveis, possui elevado custo e necessidade de repetidas
doses, bem como dificuldade de administrao e longo perodo de resduo no leite.
Segundo TROUTT & SCHURING (1985) o curso agudo da CIB usualmente
responde muito bem com uma variada preparao antibacteriana incluindo antibiticos
como Neomicina, Tetraciclina, Pencilina, estreptomicina, Nitrofurantona, Sulfonamida,
Gentamicina e Cloranfenicol. Atualmente com a proibio do uso de cloranfenicol para
animais de produo, tem sido demonstrada a eficincia da utilizao do fluorfenicol em
infeces naturais e experimentais (DUEGER et al., 1999 e ANGELOS et al, 2000).
Segundo GEORGE (1990), as vantagens do tratamento subconjuntival sobre a
terapia parenteral so: dosagens totais inferiores de droga administrada, menor custo de
tratamento e alta concentrao ocular da droga. Este mesmo autor cita uma dosagem de
Penicilina Procanica ou Benzatnica quando aplicada via subconjuntival de 100.000 600.000 UI (mantem nveis por 40 hs) e na pele (nveis 67,6 hs). A Cloxacilina benzatina
de uso tpico em veculo aquoso 250 mg/ dose 2 vezes com 72 hs de intervalo to
eficiente quanto oxitetraciclina.
SAMEA et al. (1994) revela que no tratamento campo de bovinos doentes com
oftalmia foram utilizados Oxitetraciclina, Cloranfenicol, Neomicina ou Gentamicina com
resultados efetivos com completa reverso 5 a 10 dias aps o tratamento e nos casos mais
avanados, levando at 21 dias.
A utilizao de Corticosteride junto com o tratamento antibacteriano, flapes de
membrana nictitante e sutura das plpebras so citados por GEORGE (1984); TROUTT &
SCHURING (1985). PUNCH & SLATTER (1984 ) citam estes mtodos como auxiliares
na regresso da lcera de crnea. Os sprays de furazolidona (aplicao diria por 3 dias)
tm demonstrado boa eficincia, porm inferior da oxitetraciclina longa ao

106

administrada por via parenteral. A utilizao de dexametazona em combinao com

antibitico tem demonstrado uma boa eficcia.
Sulfato de Zinco, Perclorato e cianato de mercrio, nitrato de prata, sulfato de cobre
e cido brico tambm so citados como benficos no tratamento da CIB (PUNCH &
SLATTER, 1984).

Frmula para administrao tpica: Aplicaes dirias por 3 dias:

Ingredientes

Quantidade

azul de metileno

2g

Nitrato de prata

1g

Cloranfenicol

1g

gua destilada q.s.p

100 ml

CONTROLE E PROFILAXIA:
TROUTT & SCHURING (1985) sugerem um programa de controle a CIB:
- Vacinao contra CIB.
- Vacinao contra IBR.
- Controle de insetos, especialmente a mosca da face e de poeira.
- Fornecer um excelente plano nutricional durante os perodos de seca prolongados ou de
inverno, suplementando com vitamina A.
- Monitorar os bovinos diariamente na procura de sinais da CIB, coleta de material em
casos agudos e fazer isolamento dos animais suspeitos.
- Alternativa: tratar todos os animais durante e aps ocorrncia de CIB, ou mesmo
profilaticamente, em regies de ocorrncia.
- Fornecer locais sombreados e evitar pastagens muito altas para os animais.

107

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS:

BISPING, W. & AMTSBERG, G. Colour atlas for the diagnosis of bacterial pathogens
in animals. Berlin, Paul Parey Scientific Publishers, 1988. 339 p.

FRASER, C.M. The merck veterinary manual. 7. ed. Pahway: Merck & CO, 1991. 1832
p.

FRASER, J., GILMOUR. N.J.L. The identification of Moraxella bovis and Neisseria ovis
from the eyes of cattle and sheep. Research in veterinary science. n. 27, p. 127 - 128,
1979

GEORGE, L.W. Clinical infectious bovine keratoconjunctivitis. The compendium

collection. v. 6, n. 12, p. 159 - 168, 1984

GEORGE, L.W. Antibiotic treatment of infectious bovine keratoconjunctivitis. Cornell

Veterinary. v. 80, n. 3, p. 229 - 235, 1990

PUNCH, P.I.,

SLATTER, D.H. A review of infectious bovine keratoconjunctivitis.

Veterinary bulletin. v. 54, n. 4, p. 193 - 207, 1984

SAMEA, A.E., ZAID, A., BAKR, A. et al. Study of infectious keratoconjunctivitis in cattle
and buffaloes. Assiut veterinary medical journal. v. 30, n. 59, p. 178 - 187, 1994

TROUTT, F.H., SCHURING, G. Pinkeye facts and figures. Norden news. v. 60, n. 2, p. 28
- 35, 1985

108

OFTALMIA CONTAGIOSA DOS OVINOS

Etiologia

A oftalmia contagiosa dos ovinos ocasionada por bactrias como, Mycoplasma

conjuntivae, M. oculi, Clamidia psitacci e Branhamella ovis. Todas com exceo da ltima,
so bactrias no facilmente cultivveis, o que muitas vezes dificulta o isolamento. Os
agentes podem acometer os animais tanto isoladamente, como em associao.

Epidemiologia

A transmisso da enfermidade se d principalmente pelo contato direto com

portadores, embora devamos sempre considerar a participao de vetores e da mo dos
tratadores. Assim como na CIB, a prevalncia maior da enfermidade se d nos meses de
vero. Animais de todas as idades so acometidos. Em especial animais adultos. A
enfermidade torna-se preocupante, quanto fmeas prenhes so infectadas. A prevalncia da
enfermidade fica em torno de 25%. A imunidade adquirida aps a infeco geralmente
fraca e no protetora.

Sinais Clnicos

Os sinais clnicos iniciam por lacrimejamento, que pode ser uni ou bilateral. Alguns
animais se recuperam neste ponto, contudo outros evoluem para sinais severos, como
conjuntivite, opacidade de crnea, secreo mucupurulenta e formao de lceras de
crnea. A recuperao normalmente ocorre desde que no haja contaminao da cmara
ocular por agentes secundrios. Os animais apresentam, muita dor.

109

Diagnstico

Realizado principalmente pelos sinais clnicos. O isolamento da B. ovis facilmente

realizado pelo cultivo em AS. Colnias pequenas e hemolticas so caractersticas da
bactria.

Tratamento

O tratamento pode ser realizado com tetracilina localmente ou sistmico

(Terramicina LA 20mg, Kg), cloxacilina (1/2 bisnaga) e brometo de etdeo (0.5 a 1,0 %)
tambm podem ser utilizados. Caso o tratamento no seja prontamente a cegueira dos
animais pode se tornar permanete.

FOOT ROT (PODRIDO DOS CASCOS, Fusobacterium necrophroum,

Dichelobacter nodosus)

Etiologia

O foot rot, tambm conhecido como pododermatite infecciosa ou podrido do

casco, uma doena caracterizada pela inflamao da pele interdigital na juno da pele
com o estojo crneo, levando destruio da matriz do casco com secreo e odores
ptridos. Afeta bovinos, ovinos e caprinos. Esta uma enfermidade crnica descrita pela
primeira vez em 1892, contudo os agentes etiolgicos somente foram descobertos em 1941.
A doena pode levar a grandes prejuzos reduzindo o peso corporal dos animais em at
11% e a produo de l em 8%. Alm disto, os animais tornam-se mais susceptveis a
verminoses e miases. Esta enfermidade o resultado da interao de trs bactrias:

110

- Fusobacterium necrophorum:

bastonete

altamente filamentoso, gram-negativo,

anaerbico, trs biovares (A, B, C), comum do trato gastrointestinal de bovinos, ovinos e
sunos, entre outros. uma bactria oportunista.
- Dichelobacter nodosus: bastonete gram-negativo, anaerbico, fimbriado. Anteriormente
denominado Bacteroides. um parasita obrigatrio dos tecidos epidermais do casto de
ruminantes. Possui 9 sorotipos (A-I). Cepas virulentas podem ser diferenciadas de cepas de
menor patogenicidade a nvel laboratorial.
- Actinomyces pyogenes: um organismo comensal das superfcies mucosas de bovinos,
ovinos e sunos, entre outros, pequeno bastonete gram-positivo, e aerbicos, que causa
infeces secundrias.

Ateno:
O organismo essencial o Dichelobacter nodosus, e leses de foot rot no ocorrem na
sua ausncia.

Epidemiologia

As principais espcies acometidas so os ovinos e caprinos. Os animais portadores

introduzidos na propriedade so a principal fonte de contaminao. No entanto, existem
relatos de que veculos tambm possam disseminar a enfermidade. Outros fatores so muito
importantes para o desenvolvimento do foot rot ,como: clima quente (temperado, acima de
10C) e muito mido; leses de casco: penetrao da forma larvria de parasitas
(Strongyloides), terrenos acidentados, pedregosos; pastagens altas, solos cultivados.
Todas as idades so suscetveis, mas animais menores de 2 anos apresentam
quadro mais ameno. Aparentemente, existem linhagens mais sensveis, bem como raas,
como as de casco branco (Merino a mais suscetvel)
O aspecto epidemiolgico mais importante para o controle do foot rot que o D.
nodosus, o principal agente, no permanece mais do que duas semanas na pastagem. Um
fator importante na manuteno do agente no ambiente so os chamados carreadores, que
podem ser acometidos por perodos de at trs anos. A maioria destes animais possui a

111

infeco crnica com um dos cascos deformado e um foco de infeco sob o estojo crneo
pode ser encontrado se o casco for aparado.

Patogenia
A base precisa do sinergismo dos agentes no est bem determinado. Entretanto, a
patogenia do foot rot parece seguir os seguintes passos:
- inicia com a presena dos agentes e dos fatores predisponentes;
- o excesso de umidade, por exemplo, leva a uma hiperqueratose, com macerao e
espessamento da pele interdigital;
- o F. necrophorum, presente nas fezes, se instala e produz uma leucocidina;
- o D. nodosus, presente no casco, produzem proteases (hidrolisam a elastina, colgeno tipo
II, queratina, entre outras) que, sinergicamente com o F. necrophorum, levam ao
"apodrecimento" do casco e seu descolamento.
A pili muito importante para patogenia do D. nodosus e diferencia a bactria em
vrios sorotipos.

Sinais Clnicos

O sinal caracterstico do Foot Rot a claudicao (manqueira). Descreve-se duas

formas: uma virulenta e uma benigna. A forma virulenta se caracteriza inicialmente por
uma tumefao (edema) e umidade da pele interdigital, que progride a uma necrose que vai
invadindo o casco, levando a secreo sem abcedao, o casco parece soltar-se. A
contaminao secundria pode levar inflamao em todo o membro. A claudicao, em
graus variados, est sempre presente, podendo chegar a caminhar de joelhos ou permanecer
em decbito. Pode ser ainda observadas anorexia e febre. A forma benigna no
progressiva.

112

Diagnstico
O diagnstico feito baseado nas manifestaes clnicas e no isolamento,
principalmente, de D. nodosus a partir secrees da regio interdigital. Freqentemente
isolam-se muitos agentes contaminantes. Os agentes exigem meios especiais, como gar
casco, para o isolamento. Deve-se fazer um diagnstico diferencial de dermatofilose, febre
aftosa, ectima contagioso e lngua azul.

Tratamento

O tratamento envolve o exame com apara dos cascos e uso de pedilvios. Vrios
tratamentos foram utilizados, mas o que apresenta os melhores resultados o que utiliza
sulfato de zinco associado a um detergente aninico (facilita a penetrao do agente).
- Sulfato de Zinco 10% + Lauril Sulfato de Sdio a 1% + apara de casco em pedilvio.
- Sulfato de Zinco 20% + Lauril Sulfato de Sdio a 1% em imerso (5 cm) por 1 hora.
O tratamento parenteral feito por meio de antibiticos, cujos indicados so a
penicilina e a eritromicina.

Preveno e Controle

A preveno da enfermidade baseia-se na atuao em diferentes pontos:

(1) Reduo do nvel de D. nodosus no ambiente - faz-se, ao nvel de animais portadores,
pelo tratamento dos afetados e carreadores, pela vacinao, segregao e descarte; e, ao
nvel de pastagem, pelo uso de pastagens limpas e rodzio.
(2) Aumentando a resistncia dos indivduos, pela vacinao e seleo.
(3) Diminuindo a suscetibilidade dos cascos, pela apara dos cascos.
(4) Fornecendo condies ambientais que limite o desenvolvimento e disseminao da
doena, usando terrenos bem drenados, e camas adequadas.

As vacinas devem ser utilizadas visando prevenir a ocorrncia, nas pocas em que
a doena mais observada: Primavera: 1 dose em julho, 2 dose em agosto; Outono: 1

113

dose em fevereiro, 2 dose em maro. O uso de vacinas pode reduzir em at 91% os casos
da enfermidade. Um aspecto importante das vacinas que contenham os sorotipos de D.
nodosus com relevncia em nosso pas, sendo A, B, D, E e F.

As caractersticas epidemiolgicas da enfermidade permitiram que medidas

teraputicas pudessem levar sua erradicao, como os desenvolvidos por MORGAN
(1987) e HINTON (1991).

Programa de erradicao do foot rot (MORGAN, 1987):

a.

. examinar todos os ovinos

. parar cascos afetados
. tratar parenteralmente casos severos
. pedilvio em todos os animais com solues e prazos apropriados
. manter animais por 1 hora em piso de concreto aps imerso
. retorno para pastagens limpas

b.

. repetir o tratamento - 1 vez aps 5 dias (sulfato de zinco + lauril sulfato de sdio) e 1

vez por semana por 4 semanas.

c.

. reexaminar todos os animais como em a., aps 1 ms.

d.

. repetir 1 ms aps e descartar animais com infeco persistente.

e.

. continuar as medidas at obter criao livre.

d.

. manter exames regulares dos cascos.

Medidas de erradicao (HINTON, 1991)

a.

. tratar todos animais com imerso por 1 hora em sulfato de zinco e lauril sulfato de

sdio.
b.

. colocar animal em rea limpa.

c.

. aps 21 dias, inspeo individual dos cascos.

d.

. tratar todo o rebanho, separando doentes para tratar ou sacrificar.

e.

. colocar em nova rea.

f.

. aps 21 dias, nova inspeo.

g.

. repetir banho e inspeo at que no sejam registrados novos casos.

114

Sugesto para pedilvio:

257,5cm
27,5cm

30cm

12cm

16cm

25cm

200cm

Capacidade: 75 litros.

LEPTOSPIROSE
(Chirles Araujo Frana e Mateus Matiuzzi da Costa)

INTRODUO

A leptospirose, tambm conhecida como mal de de Weil ou sndrome de Weil

uma zoonose bacteriana causada por espiroquetas do gnero Leptospira que afeta humanos
e um amplo espectro de animais incluindo mamferos, aves, anfbios e rpteis. A doena foi
descrita pela primeira vez por Alfred Weil em 1886 quando relatou uma doena infeciosa
aguda com inchao do bao, ictercia e nefrite. A bactria foi observada pela primeira vez
em 1907 em uma lmina de tecido renal post mortem. Em 1908, Inanda e Ito as
identificaram pela primeira vez como sendo o agente causador e em 1916 sua presena foi
notada em ratos (Inanda e Ito, 1916). A leptospirose a zoonose mais disseminada em todo
o mundo, estando presente em todos os continentes com exceo da Antrtica e existe
evidncia de que virtualmente todos os mamferos so portadores potenciais.

115

ETIOLOGIA
As leptospiras so bactrias Gram-negativas, alongadas e finas de 6-20m de
comprimento e 0,1m de dimetro. A presena de ganchos nas extremidades auxilia na
diferenciao de outras espiroquetas (figura 1). Estes microrganismos podem viver em vida
livre ou infectando mamferos.

Figura 1: Micrografia eletrnica (a) e de campo escuro (b) de Leptospira spp.

Fonte: Adler e Moctezuma, 2010.

Existem 17 espcies e 4 genomospecies (NCBI, 2010) sendo pelo menos 12

patognicas e 4 saprfitas (Adler e Moctezuma, 2010). Requerem ambiente de alta
humidade e temperaturas superiores a 22C para sobrevivncia. O habitat mais comum so
as fontes de guas represadas (lagos lagoas, poos, poas de gua, etc). Tambm
sobrevivem em lamaais por vrios meses, entretanto, resistem apenas algumas horas na
gua salgada. Os membros do gnero Leptospira tambm so agrupados em sorovares, de
acordo com a sua relao antignica. Existem atualmente mais de 250 sorovares conhecidos
(NCBI, 2010 e Adler e Moctezuma, 2010), classificados em 25 sorogrupos (WHO, 2003).

116

Leptospira interrogans a espcie mais associada leptospirose e possui o maior nmero

de sorovares.
A leptospira capaz de infectar e colonizar uma ampla variedade de animais
domsticos e selvagens (Tabela 1), entretanto os ratos so os reservatrios tpicos.

Tabela 1: Lista dos hospedeiros de Leptospira spp. e sorovares mais comuns:

Hospedeiros

Sorovares

Hospedeiros

Sorovares

Porcos

Pomona, Tarassovi

Ratos

Gado

Hardjo, Pomona

Camundongos

Ballum, Arborea

Cavalos

Bratislava

Marsupiais

Grippotyphosa

Ces

Canicola

Morcegos

Cyropteri, Wolffi

Ovinos

Grippotyphosa

Icterohaemorrhagiae,
Copenhageni

EPIDEMIOLOGIA

Estima-se que 20% dos ratos carregam leptospiras capazes de infectar humanos,
porm este nmero bastante varivel para cada regio e est diretamente relacionado com
condies sanitrias e econmicas (Izurieta et al., 2008).
O contgio ocorre atravs do contato com o solo ou gua contaminados (inclui-se
tambm o consumo de gua e alimentos). Contudo, animais podem se infectar tambm pela
via congnita ou neonatal e pelo contato sexual (ratos, gado, porcos e ces) (Izurieta et al.,
2008). Animais que so carreadores crnicos (reservatrios) podem eliminar leptospiras
contnua ou intermitentemente, por alguns meses at vrios anos e a concentrao pode ser
de at 108 clulas/ml. As bactrias do gnero Leptospira no sobrevivem bem em urina
cida, porm permanecem viveis em urina alcalina. Consequentemente, herbvoros e
animais cuja dieta produza urina alcalina so relativamente mais importantes como
disseminadores do que produtores de urina alcalina (adler e Moctezuma, 2010). Leptospiras
117

habitam os tbulos renais proximais (Figura 3), todavia outros rgos e tecidos podem
servir como fonte de infeco Roedores infectados so a fonte tpica das infeces em
humanos e deve-se ao contato com gua ou superfcies contaminadas com a urina infectada
do rato. Outros fluidos corporais de roedores (excluindo a saliva) tambm so fontes
potenciais de transmisso da doena. Humanos no se tornam portadores crnicos e a
transmisso entre os mesmos inexistente.
considerada endmica em muitos pases tropicais e a maioria dos casos ocorre
nas temporadas quentes e midas nos trpicos e durante o fim do vero e incio do outono
nos pases orientais tanto nas zonas urbanas quantos nas zonas rurais. A mortalidade
significativa e est relacionada com a falta de estrutura e diagnstico clnico adequado.
Estima-se que ocorram entre 300.000-500.000 casos severos no mundo com fatalidade
variando entre <5% at 30% dependendo da regio (Izurieta et al., 2008 e Lau et al.,
2010). A estimativa total de casos humanos de 0,1-1 por 100.000 habitantes nas zonas
temperadas (regies mais desenvolvidas) e de mais de 10 por 100.000 habitantes nas zonas
tropicais (regies mais pobres e menos desenvolvidas). As reas de risco incluem a ndia,
Sri-Lanka, Tailndia, Vietn, Malsia, China, Seicheles, Caribe, Brasil e Ilhas do Pacfico.
Queensland, Nova Zelndia e Hava tm as taxas mais elevadas dentre os pases
desenvolvidos (Lau et al., 2010).
As exposies ocupacionais e recreativas (Tabela 2) correspondem entre 30-50%
dos casos. Tipicamente os indivduos que trabalham em campo e/ou em contato com
animais so os mais propensos a adquirir leptospirose. Desde a identificao pelo Dr. Weil
(1886) os surtos de leptospirose ocorreram esporadicamente no mundo. Os caos mais
notveis incluem a Tailndia de 1995 -2000, Nicargua em 1995, Per e Equador durante
as fortes enchentes da primavera de 1998 e mais recentemente em 2009 nas enchentes nas
Filipinas com mais de 2000 casos relatados e mais de 100 mortes. No Brasil, de acordo
com dados fornecidos pelo Ministrio da Sade e pela Secretaria de Vigilncia em Sade
foram notificados 38.711 casos de leptospirose entre os anos de 1997-2008, sendo 2006 o
ano com maior nmero de casos relatados e os anos de 1998-99 com a maior taxa de
mortalidade. A maioria dos casos foi de homens (80,4%) entre 30-49 anos (38,2%) na zona
urbana (58,1%) se concentrando nas regies Sul e Sudeste.

118

PATOGENIA

Durante o curso da infeco a bactria invade todos os rgos internos e tecidos e

danificam o endotlio dos vasos sanguneos menores. A toxina glicoprotica produzida
pela leptospira causa vazamentos nos capilares, o que pode levar a hemorragia severa.
Com a progresso do dano as leses se desenvolvem nos rgos levando a: 1) leso nos
tbulos proximais convolutos (causando nefrite intersticial), 2) dano nos capilares
hepticos com dano nas clulas hepticas levando a ictercia, problemas de coagulao e
possvel falncia renal, 3) inflamao das meninges. (Izureita et al., 2008 e Adler e
Moctezuma, 2010). A leso nos tecidos pode ser reversvel seguida de regenerao
completa (rins e fgado), contudo danos de longa durao (miocardite) podem ser uma
complicao e levar a formao de cicatrizes melhor reconhecidas nos rins de porcos e
ces onde podem ser observadas macroscopicamente como pontos brancos (Boqvist et
al., 2003). A leptospirose apresenta sintomas que podem mimetizar doenas mais
conhecidas e acaba sendo negligenciada em detrimento de uma enfermidade mais comum.
Caso a leptospirose seja desconsiderada nos exames clnicos as seguintes doenas devem
ser includas no diagnstico diferencial: influenza, dengue e dengue hemorrgica, infeco
por hantavrus incluindo sndrome pulmonar por hantavrus e outras sndromes de
desconforto respiratrio, rickettsiose, borreliose, brucelose, malria, pielonefrite,
meningite assptica, envenenamento qumico ou alimentar, febre tifide, hepatite viral,
pirexia de origem desconhecida, soroconverso primria por HIV, doena do legionrio,
toxoplasmose, mononucleose e faringite (WHO, 2003).
Aps a infeco os macrfagos comeam a ingerir as bactrias e so auxiliados pela
produo de anticorpos, a medida que a infeco progride. Normalmente a produo de
anticorpos comea entre 5-7 dias aps a infeco e pode levar 10 ou mais dias em
indivduos imunocomprometidos. IgM surge antes de IgG. A concentrao de IgM pode
permanecer baixa por meses e possivelmente anos aps a infeco. Em contraste, a
concentrao de IgG pode permanecer apenas de maneira transiente ou por anos.
Simultaneamente, IgA comea a aparecer a partir do 5 dia e pode perdurar por at 9 meses.

119

Por fim, a imunidade celular auxilia na preveno da colonizao dos tbulos renais
(Adler e Moctezuma, 2010).

SINAIS CLNICOS

HOMEM
A doena caracterizada por febre, insuficincia renal e heptica, manifestaes
pulmonares e falncia reprodutiva. Em ces possvel observar febre, ictercia, vmitos,
diarria, coagulao intravascular disseminada, uremia causada por falncia renal,
hemorragia e morte. No gado e em porcos os sinais incluem falncia reprodutiva, abortos,
natimortos, mumificao fetal, fraqueza dos filhotes e agalaxia. Aproximadamente 1520% dos abortos em ovelhas e cabras so creditados infeces por leptospiras (Izurieta et
al., 2008). A leptospirose pode ocorrer nas formas superaguda, aguda, subaguda ou
crnica (Langston e Heuter, 2003). As infeces superagudas podem se manifestar por
leptospiremia aguda e morte com poucos sinais clnicos. Os sinais iniciais de uma infeco
aguda incluem febre (39,5 40C), tremores e sensibilidade muscular seguidos de
vmitos, desidratao e choque. Taquipnia, pulso rpido e irregular e perfuso capilar
deficiente tambm j foram observados. Defeitos de coagulao e dano vascular como, por
exemplo, hematmese, hematoquesia, melena, epistaxe e petquias generalizadas so
aparentes (Langston e Heuter, 2003). Os sintomas se agravam mais rapidamente na forma
mais severa da doena e a falncia renal pode ocorrer dentro de 7-10 dias, em alguns casos
acompanhada ou seguida de hemorragias na pele e mucosas, ictercia, hemoptise,
hemorragias pulmonares levando a morte se no tratada.
Na ltima dcada a leptospirose emergiu como uma doena infecciosa de
importncia global (Figura 5) (Bharti, 2003).

120

ANIMAIS

Nos bovinos, o aborto ocorrem geralmente no tero final da gestao e na maioria

das vezes no so vistos outros sinais alm da reteno de placenta. Natimortos e
nascimento de animais fracos tambm so descritos. Os bezerros fracos so encontrados
mortos ou com profunda depresso e hipertermia. So observadas profunda anemia,
hemlise, hemoglobinria e icetercia. O sangue tem cor achocolatada. As mastites por
L.interrogans sorovar hardjo podem afetar 50% do rebanho. O leite fica amarelo e contm
cogulos, embora no exista dor ou endurecimento do bere.
Nos equinos o aborto no acompanhado de sinais clnicos e podem ocorrer no
terceiro tero da gestao. Nos cavalos a oftalmite se caracteriza por fotofobia,
lacrimejamento, conjuntivite, ceratite, proliferao pericorneal dos vasos sanguneos e
uvete. As leses podem progredir para a cegueira.
Nos ces a enfermidade pode ser subclnica (frequentemente sorovar canicola) com
leptospiuria, ou aguda e hemorrgica, com febre, vmito, prostrao e frequentemente
com morte aguda. A sndrome urmica pode ocorrer devido aos danos renais e estomatite
ulcerativa com alta porcentagem de morte. Estes sinais so observados em animais com
infeco crnica.
Nos sunos podem ser observadas infeces subclnica (frequentemente sorovar
Pomona) acompanhada de leptospiuria. Tambm podem ser observadas mastites abortos e
infertilidade. Febre, anorexia hemoglobinria e mortalidade em leites podem ser
descritas.
Em ovinos infeces subclnica acompanhada de leptospiuria so frequentemente
associadas ao sorovar hardjo. Depresso, dispneia, hemoglobinria e anemia em cordeiros
so normalmente associados ao sorotipo Pomona.

DIAGNSTICO

Vrias tcnicas sorolgicas so utilizadas no diagnstico da leptospirose e

frequentemente necessrio utilizar mais de um para obter um diagnstico confivel. Os

121

testes de imunoensaio enzimtico (ELISA) e o teste de aglutinao microscpica (MAT)

so os mais utilizados. Entretanto, o MAT o mtodo de diagnstico de referncia. O teste
de aglutinao microscpica simples consiste em misturar o soro de teste com uma
cultura de leptospiras e ento avaliar o grau de aglutinao utilizando microscopia de
campo escuro. O ponto de corte definido como a diluio do soro que mostra 50% de
aglutinao quando comparado com um controle diludo na proporo de 1:2 em PBS
(Figura 7). O teste normalmente positivo aps 10-12 dias aps o surgimento dos
primeiros sintomas clnicos porm, algumas vezes a soroconverso pode ocorrer entre 5-7
dias aps o incio da doena. O teste altamente especifico, entretanto requer a manuteno
no laboratrio de um painel de leptospiras vivas pertencendo a diferentes sorovares para
serem utilizadas como antgenos no MAT. A coleo deve conter, no mnimo, todos os
sorovares locais. Se a coleo estiver incompleta os anticorpos para o sorovar que estiver
faltando pode no ser detectado gerando um falso negativo. impossvel padronizar o teste
porque so utilizadas clulas vivas como antgenos e os resultados podem variar de um dia
para o outro. Outra desvantagem o tempo de espera para realizao do exame e garantir
um resultado real

122

Figura 7: Microscopia de campo escuro do teste de aglutinao

microscpica para leptospirose. Fonte: Centers of Desease Control
(CDC).

O ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) tambm bastante utilizado,

porm detecta apenas determinantes de gnero que so compartilhados por espcies
patognicas e saprfitas, logo no possvel identificar o sorogrupo/sorovar. O ELISA
capaz de detectar IgM dos estgios iniciais da infeco e pode ser padronizado e no requer
a manuteno de culturas de leptospiras caso seja utilizado um kit comercial. Metodologias
diretas de diagnstico como a cultura, microscopia de campo escuro e PCR (Reao em
Cadeia da Polimerase). A cultura de clulas muito lenta, com tempo de gerao ente 6-8
na melhor das hipteses. O crescimento pode ser ocasionalmente detectado aps uma
semana, porm geralmente o tempo maior. Recomenda-se observar o meio de cultura em
intervalos regulares por um perodo de at 4 meses. A leptospira pode ser observada em
fluidos (sangue e urina)em microscopia de campo escuro, como clulas finas, espiraladas e
de movimentao rpida, porm o reconhecimento difcil. Artefatos como fibras de
fibrinas do sangue podem ser facilmente confundidas com leptospiras. A PCR pode ser
utilizada para a confirmao rpida do diagnstico nos primeiros estgios da doena antes

123

que os anticorpos tenham atingido nveis detectveis. Esta ainda uma tcnica cara que
demanda pessoal altamente especializado. Tambm possvel obter falsos positivos devido
a contaminao cruzada com DNA exgeno na rea de trabalho e pela presena de
inibidores nos materiais que esto sendo examinados.

TRATAMENTO E CONTROLE

Os casos mais severos devem ser tratados com altas doses de penicilina intravenosa.
Casos mais amenos podem ser combatidos com antibiticos orais como a amoxicicilina,
ampicilina, doxiciclina ou eritromicina, cefalosporinas de 3 gerao, ceftriaxona,
cefotaxima e quinolonas tambm so eficazes (WHO, 2003).
Bezerros bovinos e adultos devem ser tratados com estreptomicina e
diidroestreptomicina na dose de 12mg/Kg duas vezes aos dia, durante 3 dias. No caso do
sorotipo Pomona doses de 25mg/Kg so necessrias para eliminar as bactrias dos rins.
Neste caso se recomenda a vacinao simultnea.
A vacinao muito importante com reforo de 3-5 semanas em animais
primovacinados.

REFERNCIAS
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Microbiology, 140: 287-296.
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World Health Organization (WHO) e International Leptospirosis Society (ILS), (2003).
Humana Leptospirosis: Guidance for diagnosis, surveillance and control.

TUBERCULOSE BOVINA

Introduo
A tuberculose uma enfermidade muito antiga, existente em todo mundo e com
grandes variaes de uma regio ou pas para outro. O Mycobacterium e os animais
levaram milhares de anos adaptando-se um ao outro.
A tuberculose foi reconhecida primeiramente como doena causada por um agente
infeccioso em animais e historicamente a transmissibilidade da doena de humanos para
animais foi descrita pela primeira vez por Villemin, em 1865. Porm foi Robert Koch, em
1882, que descobriu o agente infeccioso, corando-o pela fuccina-anilina e isolando-o em
125

meio de cultura, em 1884. A diferenciao entre o bacilo humano, o bovino e o avirio, foi
primeiramente descrito nos EUA por Smith, em 1897.
uma zoonose que acarreta srias conseqncias econmicas e de Sade Pblica.
Crescentes so as perdas econmicas com baixa na produtividade do rebanho e condenao
de carcaas em matadouros. Sua presena um fator limitante para o desenvolvimento da
indstria, pecuria, comrcio internacional de animais e subprodutos destes.
Embora seja comumente definida como uma doena crnica e debilitante, a
Tuberculose ocasionalmente assume um curso agudo e rapidamente progressivo. A doena
afeta praticamente todas as espcies de vertebrados. Os sinais e leses so geralmente
semelhantes nas vrias espcies.

Etiologia

O agente causador da tuberculose pertence ordem Actinomycetales, famlia

Mycobacteriaceae e ao gnero Mycobacterium. O gnero Mycobacterium uma bactria
em forma de bacilo gram positivo, aerbio, no formador de esporos, imveis e de
crescimento lento. Uma colorao comum de Gram ou de Giemsa no possibilita a
identificao deste gnero, porm ao se utilizar corantes lcool-cidos torna-se possvel sua
identificao, pois ele resistente a este tipo de corante. Diante deste fato, denominamos de
bacilo lcool cido resistente (BAAR). Esta particularidade deve-se sua ampla e
complexa camada lipdica da parede celular. A identificao feita atravs da tcnica de
Ziehl-Neelsen. Quando corado, adquire um aspecto granular, medindo de 2 a 5 micras de
comprimento por 0,2 a 0,3 de espessura.
O bacilo moderadamente resistente ao calor, dissecao e diversos desinfetantes.
Permanece vivel em estbulos, pasto e esterco por at 2 anos, at 1 ano na gua e por at
10 meses nos produtos de origem animal contaminados. Agentes desinfetantes como
fenlicos, formlicos, lcool e em especial o hipoclorito de sdio so bastante eficientes no
combate ao bacilo, contudo sua ao pode ser afetada pela concentrao do produto, o
tempo de exposio, a temperatura e a presena de matria orgnica. Compostos de amnio
quaternrios e clorexidine no destroem o bacilo. O calor mido a 60C mata o bacilo
126

rapidamente. A pasteurizao, consistindo no tratamento do leite a 62,8-65,6C por 30 min

ou 71,7C por 15 segundos mata alm das micobactrias, a maioria dos microrganismos
no-esporulados. rapidamente destrudo pela luz solar direta em ambiente seco. Em
condies de umidade, temperatura e ao abrigo da luz solar, se mantm vivel por longos
perodos, como at 2 anos no interior dos estbulos.
Reconhecem-se trs tipos principais de bacilos tuberculosos: o humano, o bovino e
o avirio, respectivamente, M. tuberculosis, M. bovis e o complexo da M. avium (M. aviumintracellulare-scrofulaceum). Est grupo bacteriano possui grande distribuio na natureza.
Nele encontramos micobactrias patgenas tuberculosas, patgenas atpicas e saprfitas.
Mycobacterium bovis a causa mais comum de tuberculose em bovinos e caprinos,
que so bastante suscetveis. As outras espcies de Mycobacterium, especialmente M.
avium

M. tuberculosis, ocasionalmente causam a molstia clnica, mas sua principal importncia

repousa nos problemas que criam nos programas de erradicao, por causa da
sensibilizao cruzada para a tuberculina dos mamferos.
O agente da tuberculose bovina possui uma adaptabilidade maior que o M.
tuberculosis e o M. avium, pois se apresenta como agente infeccioso no s para o bovino,
mas tambm para o homem, co, gato, porco, ovelha, cabra e cavalo. O principal agente da
tuberculose zoontica o M. bovis.
O agente causal da tuberculose aviria, o M. avium, apresenta grande resistncia ao
meio ambiente. Assim, o agente conserva, ainda, sua capacidade infectante para as aves ao
cabo de 2 anos em solos propcios; em tecidos infectados sobrevive at 1 ano (MATHIAS,
1988).

Epidemiologia

A tuberculose ocorre em todos os pases do mundo e da maior importncia em

bovinos leiteiros. A doena pode ocorrer em todas as espcies, incluindo o homem, e
de importncia por razes de sade pblica, bem como por seus efeitos prejudiciais na

127

produo animal. Os animais infectados so a fonte usual, e o microorganismo ocorre

em gotculas exaladas: no escarro, fezes , leite, urina, corrimento vaginal, smen, e
ndulos drenantes. As leses tuberculosas ocorrem nos linfonodos respiratrios em cerca
de 90% dos reatores com infeco confirmada. Contudo, as leses pulmonares so
detectadas em apenas 1 a 2% destes animais, nos exames feitos no abatedouro. Recentes
estudos demonstraram que , se forem realizados cuidadosos exames laboratoriais, mais
de 70% dos bovinos com leses nos linfonodos respiratrios apresentaro M. bovis no
muco traqueal. Todos os bovinos com leses tuberculosas so, portanto, disseminadores
em potencial.
As fezes podem permanecer infectivas durante 6 a 8 semanas, e a gua estagnada,
durante 18 dias. O leite a via de infeco comum em animis jovens. A estabulao e a
aglomerao aumentam a disseminao. Supe-se que bovinos do tipo Brahman sejam mais
resistente que as raas europias. A tuberculose bovina uma importante zoonose, por
causa da disseminao pelo leite. Ruminantes selvagens, e outras espcies, como texugo e
gambs da Nova Zelndia podem servir como reservatrios. A incidncia de tuberculose foi
grandemente reduzida por programas de controle em muitos pases, inclusive os Estados
Unidos. Contudo, os casos residuais so os mais difceis e custosos, em termos de deteco
e remoo, e consequentemente ainda ocorrem surtos. Surtos em escala bastante grande
foram descritos recentemente em fazendas leiteiras que estavam anteriormente livres da
molstia, e a proporo de animais em ponto de engorda que redundam em casos de
abatedouro aumentou nos ltimos anos. No sudoeste do Estados Unidos, a importao de
gado para engorda do Mxico uma importante fonte de molstia (SMITH, 1993).
A principal espcie infectada pelo M. bovis o bovino, que pode transmitir a
infeco a muitas espcies de mamferos, incluindo o homem, que adquire a infeco
principalmente por via digestiva e secundariamente por via aergena. A fonte mais
freqente de infeco o homem que elimina, principalmente, do trato respiratrio grande
quantidade de bacilos da tuberculose. A transmisso interhumana de M. bovis ainda
objeto de controvrsia e as campanhas de erradicao de tuberculose bovina reduzem
enormemente a incidncia humana desta origem.

128

A tuberculose entre os bovinos se transmite principalmente por via aergena,

principalmente em animais estabulados. Em terneiros alimentados com leite proveniente de
vacas com tuberculose ou em bovinos que bebem guas paradas contaminadas, pode
ocorrer infeco pela via digestiva

TABELA 1 - Prevalncia de reatores positivos tuberculose em animais comercializados

no Rio Grande do Sul no perodo de 1939-1997*.
Perodo

Bovinos Tuberculinizados (n)

Reatores Positivos (%)

1939-1949

32.996

7,58

1950-1959

199.496

4,41

1960-1969

375.603

3,54

1970-1979

518.068

3,05

1980-1989

638.909

1,67

1990-1997**

315.573

1,54

* Fonte: Secretaria da Agricultura do Rio Grande do Sul, Seo de epidemiologia e

estatstica.
** Dados de janeiro a agosto de 1997.

Sinais Clnicos

Nos animais o Mycobacterium provoca tambm tuberculose. De maneira geral

podemos dizer que todos os rgos podem ser atacados por este gnero, e assim pode-se ter
vrias formas da doena: tuberculose pulmonar, tuberculose ganglionar, tuberculose do
aparelho genital, tuberculose intestinal. A espcie mais acometida a bovina seguida pelos
sunos e, mais raramente, aves, ces, gatos e eqinos.
A tuberculose bovina uma doena granulomatosa causada, principalmente, por
Mycobacterium bovis e com menor freqncia, Mycobacterium tuberculosis e
Mycobacterium avium.

129

Nos bovinos, a forma pulmonar a mais freqente, com evoluo lenta, de forma
crnica e, muitas vezes, a doena contrada s vai ser identificada bem mais tarde;
comum tambm um bom estado geral por muito tempo, e no raro presenciar-se, nos
matadouros, bovinos abatidos com leses generalizadas provocadas pelo Mycobacterium.
Embora na maioria dos animais infectados a enfermidade seja subclnica, perdas de 10 a
20% na produo de carne ou leite so observadas.
O bovino, uma vez infectado, j capaz de transmitir a doena a outros, mesmo
antes do desenvolvimento de leses teciduais, podem excretar micobactrias viveis no
muco nasal e traqueal. O agente pode ser eliminado pela respirao, no escarro, corrimento
nasal, leite, fezes (tanto a partir de leses intestinais como de escarro deglutido e de leses
pulmonares), urina, secrees vaginais e uterinas, corrimentos de linfonodos perifricos
abertos e pelo smen.
Comumente a entrada ocorre por inalao ou ingesto. A inalao quase sempre a
porta de entrada em bovinos confinados e, mesmo naqueles no pasto, est considerada
como a principal forma de transmisso. A infeco por ingesto obviamente mais
provvel na pastagem , onde as fezes contaminam o alimento, a gua de bebida comum e o
cocho. Em condies naturais , a gua de bebida estagnada pode causar infeco at 18 dias
aps seu ltimo uso por um animal tuberculoso, enquanto a gua corrente no representa
uma fonte importante de infeco para bovinos em campos mais baixos. Mycobacterium
tuberculosis viveis podem ser isolados das fezes de bovinos infectados e do solo em
contato com as fezes por seis a oito semanas aps as mesmas terem sido depositadas, mas a
durao da infectividade da pastagem para bovinos suscetveis varia amplamente. O
perodo pode ser to curto como uma semana se o clima for seco e a pastagem estiver
arada, mas ser muito longo no perodo mido. A separao dos animais infectados dos
suscetveis por uma cerca promove uma proteo prtica contra a disseminao da doena.
A ingesto de leite infectado por animais jovens uma das formas mais comuns atravs da
qual a tuberculose se dissemina. Vias de infeco menos comuns incluem a infeco intrauterina no coito, pelo uso de smen infectado ou de pipetas de inseminao infectadas,
alm de infeco intramamria pelo uso de sifes contaminados ou pelos recipientes de
ordenhadeira infectados. O fornecimento de carcaas de bovinos tuberculosos a sunos

130

tambm tem causado surtos graves da doena. Fontes de infeces incomuns so gatos
,caprinos ou tratadores portadores da doena.
A leso inicial localiza-se no chamado complexo primrio, que nos animais
infectados pela via respiratria encontra-se nos linfonodos bronquiais e mediastnicos e
parnquima pulmonar. Quando os animais so infectados pela via digestiva, o complexo
primrio localiza-se, preferencialmente, nos linfonodos mesentricos. A leso primria
pode permanecer localizada, estender-se dentro do pulmo ou disseminar-se atravs dos
vasos linfticos ou sangneos, afetando outros rgos ou membranas serosas. Quando se
dissemina pela via sangnea causa a denominada tuberculose miliar.
Diversos fatores podem acelerar o quadro clnico, tais como: stress, frio, doenas
intercorrentes, parto, trabalho excessivo. Infelizmente, os sinais clnicos da infeco por
Mycobacterium bovis so inespecficos. Em sua maioria, os animais infectados no exibem
anormalidades clnicas; ainda assim, estes animais representam riscos para a sade de
outros animais, e tambm para os humanos. Os pacientes podem ser apresentados com uma
perda de peso crnica, apetite varivel, e febre flutuantes, que podem ser acentuadas aps o
parto. Outro sinais dependem dos rgos envolvidos. Visto que a via de penetrao para os
ruminantes geralmente a respiratria, os sinais referveis a este sistema so relativamente
comuns, embora de modo geral brandos. Os sinais clnicos mais freqentes so: febre
intermitente, tosse que vai se agravando com a evoluo (e mais observvel durante a
ingesto da rao), dispnia e corrimento nasal seroso ou purulento, agravamento do estado
geral, perda de peso; tambm pode ocorrer a forma ganglionar (com disseminao de leses
nos gnglios), a forma intestinal (com diarria crnica, de difcil tratamento), e a forma
cutnea (com Ieses no bere de difcil cicatrizao), tambm a forma congnita ou
transplacentria. A mastite tuberculosa caracteriza-se por hipertrofia nas paredes superiores
das glndulas e presena de flculos finos em lquido mbar nos ltimos jatos. A
tuberculose no bere assume uma importncia especial devido contaminao do leite com
bacilos tuberculosos viveis. A mastite tuberculosa de maior importncia devido ao
perigo para a sade pblica , pela disseminao da doena para bezerros e pela dificuldade
de diferenci-la de outras formas de mastite.

131

Patogenia

M. bovis no elabora toxina ou outro fator de virulncia extracelular. Aps a

inalao, o Mycobacterium depositado em um saco, onde englobado por um macrfago
alveolar. Ocorre multiplicao lenta, e, eventualmente, destruio do fagcito e ento este
reingerido por macrfagos de origem hematgena que so atrados por uma resposta
inflamatria produzida devido infeco local primria. Os microorganismos que escapam
so filtrados para a circulao linftica por macrfagos, e depositados nos linfonodos
regionais. A multiplicao intracelular do Mycobacterium continua, com subsequente
transporte para a circulao sangnea atravs dos ductos linfticos eferentes e ductos
torcicos. Deste modo, a infeco pode ser disseminada para outras partes do organismo e
voltar aos pulmes. Ao contrrio da maioria das bactrias, o M. bovis pode sobreviver e
crescer intracelularmente nos macrfagos. A bactria tem a capacidade de evitar a fuso das
clulas lisossomais como o fagossomo e assim impede a digesto e morte intracelular. Essa
anti-fuso evita o acesso das enzimas lisossomais ao Mycobacterium localizado no
fagossomo, ocorrendo posteriormente a formao de tubrculos constitudos de agregados
de macrfagos, linfcitos e outros leuccitos, localizando-se nos linfonodos regionais.
No local onde se fixam no organismo do hospedeiro, os bacilos da tuberculose
propriamente ditos

so englobados

pelos

macrfagos

e produzem

inflamao

granulomatosa composta de clulas e lquido. O tubrculo formado principalmente por

proliferao de clulas no local e tambm nos gnglios satlites. Estes ndulos iniciais
podem permanecer estacionrios, s vezes difceis de serem visveis aos raios X, mas
podem conter micobactrias vivas para o resto da vida do indivduo; o complexo
primrio.
Em alguns casos, particularmente quando se trata de lactantes ou indivduos mal
nutridos ou debilitados, a disseminao hematgena da infeco d lugar a uma tuberculose
miliar aguda ou a uma meningite tuberculosa. O diagnstico destes estados, que raras vezes
possvel baseando-se somente no exame clnico, se confirma em primeiro lugar pelas
imagens radiogrficas caractersticas e em ltimo pelas tpicas alteraes da composio
qumica do lquido cefalorraquidiano.
132

A infeco primria curada costuma conferir um alto grau de imunidade. No

obstante, as leses latentes podem ser reativadas pela mal nutrio, no tratamento com
corticides ou em enfermidades com efeito imunossupressivo, entre elas a infeco por
HIV. Tambm pode produzir-se tuberculose ps-primria por reinfeco exgena nas zonas
com elevada prevalncia da enfermidade. Neste caso predominam os sintomas
constitucionais: mal estar, perda de peso, febrcula e suores noturnos, que se acentuam a
medida que avana a enfermidade.

Diagnstico

1. Tuberculinizao

O diagnstico clnico da tuberculose difcil devido ao fato de que os sinais

respiratrios, o emagrecimento e o aumento de tamanho de alguns linfonodos ocorrem,
somente, em casos avanados da enfermidade e podem ser confundidos com outras
doenas. A maioria dos animais infectados se torna eliminadora dos bacilos tuberculosos
nesse momento e se constituem em uma ameaa outros animais.
A nica forma eficiente de diagnosticar a enfermidade em animais vivos atravs
da tuberculinizao. A tuberculinizao , sem dvida nenhuma, o mtodo mais prtico e
rpido para auxiliar no diagnstico de tuberculose. Este mtodo consiste na inoculao
intradrmica de tuberculina PPD (derivado protico purificado) bovina e aviria, na qual
avaliado se ocorreu ou no uma reao local com o auxlio de um cutmetro Hauptner. Se o
animal est infectado se produz uma reao de hipersensibilidade do tipo IV (reao tardia
mediada por linfcitos T sensibilizados) no local da inoculao, evidenciada por edema e
aumento de volume da pele. Geralmente, aplica-se este mtodo para detectar as
micobactrias infectantes nos bovinos, sunos e, menos freqente, nas demais espcies.
Alguns fatores interferem na sensibilidade do teste tuberculnico, como a dose de
tuberculina utilizada, os critrios de interpretao do teste, intervalo ps-infeco e psparto, variaes impostas pelo operador, entre outros. Existem vrias tcnicas de

133

tuberculinizao: Prova tuberculnica ano-caudal, prova tuberculnica cervical simples e

prova tuberculnica cervical comparada.
Na prova comparada so inoculados o PPD avirio e o bovino, o primeiro em local
distante aproximadamente 10 cm abaixo da crista do pescoo e o PPD bovino
aproximadamente
12 cm abaixo do avirio. Os locais de inoculao so marcados por depilao e as medidas
da pele so anotadas. A dose recomendada para bovinos de 0,1 ml. A leitura feita 72
horas aps, quando so medidas as reaes e estabelecidos os aumentos de espessura da
pele para as duas tuberculinas. O resultado obtido confrontando os aumentos de espessura
da pele nos dois locais de inoculao. Os critrios de interpretao encontram-se na tabela
abaixo.
TABELA 2 Chave de interpretao da tuberculinizao intradrmica comparativa em
bovinos
TESTE COMPARATIVO

DIFERENA de AEDP

RESULTADO

TA<TB

3 mm

D, C, E, E, N positivo

TA>TB

Negativo

TA<TB

2 - 3 mm

Suspeito

TA=TB

Suspeito

AEDP Aumento da Espessura de Dobra de Pele (expresso em milmetros); TA

Tuberculina aviria; TB Tuberculina bovina; D = dor; C = calor; E = edema; E =
exsudato; N = necrose.

A tuberculina aviria usada na prova comparativa para detectar infeces por

outras micobactrias e reaes paraespecficas que em um teste simples com PPD bovino
poderiam ser consideradas positivas ou mais freqentemente duvidosas. O teste
intradrmico comparativo tem se mostrado mais especfico que o teste simples,
aconselhando-se o uso do ltimo como rotina e o comparativo para elucidar casos
duvidosos como segundo teste, sendo observado um intervalo de 50 a 60 dias, num mesmo

134

animal para evitar o fenmeno de anergia que consiste na ausncia de reao cutnea em
animal infectado.
Algus cuidados especiais para a realizao da prova da tuberculina:
- Deve ser realizada somente por veterinrio com equipamento adequado;
- Tuberculina refrigerada, nunca congelada;
- Tuberculina sempre intradrmica. Deve-se repetir quando for subcutnea;
- No realizar 30 dias antes ou depois do parto;
- A intensidade da reao no indica gravidade.
Nos sunos, a pele da base da orelha a mais usada, inoculando-se PPD bovino na
orelha direita e PPD avirio na outra orelha. A leitura realizada aps 48 hs. Os critrios de
interpretao encontram-se na tabela abaixo

135

TABELA 3 Chave de interpretao da tuberculinizao intradrmica comparativo em

sunos.
TESTE COMPARATIVO

DIFERENA de AEDP

RESULTADO

TA<TB

------

D, C, E ,E ,N positivo M.t.; M.b.

TA>TB

2 mm

Negativo

TA>TB

2.1 4.9 mm

Suspeito

TA>TB

5mm ou mais

D, C, E, E, N positivo M.a.; M.i.

AEDP Aumento da Espessura de Dobra de Pele (expresso em milmetros); TA

Tuberculina aviaria; TB Tuberculina bovina; D = dor; C = calor; E = edema; E =
exsudato; N = necrose.

Em humanos, dentre as vrias tcnicas de aplicao de PPD, a intradermorreao de

Mantoux que permite a aplicao de uma quantidade conhecida de tuberculina e provoca
uma reao de fcil mensurao, est consagrada. Ela consiste na injeo intradrmica de
0,1 ml de soluo de tubrculo-protena na superfcie anterior do antebrao. Ao final de 48
a 72 horas surge uma reao edematosa formando um ndulo duro (indurao), s vezes
cercado por um halo de eritema, e s vezes coberto por pequenas vesculas. O tamanho da
reao medido em milmetros, sobre o dimetro transverso do ndulo. De acordo com o
tamanho

deste,

os

indivduos

so

divididos

em

no

reatores

(0-4 mm), reatores fracos (5-9 mm) e reatores fortes (mais de 10 mm).
O indivduo previamente sensibilizado pode apresentar uma perda temporria da
resposta tuberculnica na vigncia de certos estados patolgicos, como nas viroses, nas
neoplasias, e nas micoses. Da mesma maneira, a gravidez pode reduzir esta resposta. No
se pode discernir entre a reao produzida por uma infeco virulenta daquela produzida
por uma boa vacinao com BCG, porque a sensibilidade induzida por uma boa vacina
pode ser to forte quanto aquela induzida pelo bacilo virulento tuberculoso. Assim, nos
indivduos vacinados pelo BCG, o teste tuberculnico ser positivo.

136

2. Bacterioscopia e Histologia

Na

inspeo

realizada

em

frigorficos

diversas

doenas

(actinobacilose,

piogranuloma estafiloccico, mucormicose, coccidioido-micose, pentastomase, hidatidose

policstica e alguns tumores) apresentam leses macroscpicas similares tuberculose. Para
diferenciar essas leses da tuberculose necessrio o exame histolgico.
No escarro, sedimento de lavado gstrico, urina, exsudatos ou outros materiais so
pesquisados BAAR, aps colorao pelo mtodo de Ziehl-Neelsen ou por uma tcnica
similar ou, ainda, atravs de microscopia de fluorescncia.

3. Cultura:
Identificao definitiva
A identificao definitiva da maioria das micobactrias requer o uso de testes
bioqumicos selecionados. Os testes-chave para identificao do M. tuberculosis e M. bovis
incluem produo de niacina, nitrato-redutase e catalase termoestvel. Infelizmente, a
identificao bioqumica das micobactrias requer trs semanas ou mais, antes que haja
resultados disponveis.

137

TABELA 4 Relao entre material biolgico e identificao das

culturas de micobactrias do HUSM no ano de 1996
Material

M. tuberculosis (%)

M. bovis (%)

MOTT (%)

Abcesso cervical 3 (7,15%)

Escarro

19 (45,23%)

2 (4,76%)

Lavado

8 (19,06%)

Lquido pleural

4 (9,53%)

Liquor

1 (2,38%)

Puno

1 (2,38%)

1 (2,38%)

Urina

3 (7,14%)

Total

39 (92,86%)

1 (2,38%)

2 (4,76%)

biolgico

bronquial

pulmonar

Preparo da amostra
s amostras devem ser descontaminadas utilizando solues a base de NaOH ou
HCl e em seguida semeadas em meio de Lowenstein-Jensen. A Incubao pode ser
realizada por at 60 dias a 35/37 C em atmosfera de aerobiose, devido ao crescimento
fastidioso da bactria.

4.Sondas de cidos nuclicos

Vrias sondas foram desenvolvidas para a deteco de seqncias de cido

nucleico especficas para micobactrias. Esta conduta foi muito bem sucedida para a
identificao

do

M. tuberculosis e M. avium-intracellulare isolados em cultura. Embora estas sondas

138

tenham sucesso limitado com a deteco direta das micobactrias em amostras clnicas,
prev-se que as tcnicas de ampliao do gene resolveriam este problema.

5. Sorologia
Vrios testes (ELISA, aglutinao em ltex, ...) foram desenvolvidos para o
diagnstico sorolgico de doena micobacteriana ativa. Infelizmente, os testes para a
deteco de antgenos micobacterianos ou anticorpos especficos so insensveis e
inespecficos.

Tratamento e Controle

A maior parte dos pases desenvolvidos e em desenvolvimento j se

conscientizaram de que a infeco por M. bovis em bovinos deve ser controlada para
evitar perdas econmicas significativas e infeco em outras espcies animais e no
homem. Os mtodos usados para o controle e erradicao da infeco pelo bacilo
bovino consistem em:
- teste com tuberculina e sacrifcio dos positivos. Depende da existncia de um
plano de indenizaes aos criadores e uma prova tuberculnica eficiente;
- estabelecimento de barreiras sanitrias;
- eliminao de outras espcies que sejam reservatrios;
- acompanhamento em frigorficos, isolamento e identificao de micobactrias
no laboratrio, determinando reas geogrficas de maior prevalncia e reas onde a
enfermidade espordica;
- no trazer leite e nem produtos lcteos de granjas para alimentar animais, a
menos que os mesmos provenham de rebanhos livres de tuberculose ou estes produtos
tenham sido pasteurizados ou fervidos.
O estabelecimento de reas livres de infeco por M. bovis importante para a
substituio de animais positivos ao teste intradrmico, eliminados dos rebanhos. A
nvel de rebanho bovino, o M. bovis pode ser eliminado:
- atravs da remoo de animais infectados;
- uso de medidas para evitar a disseminao com Fenol a 5% ou outros
desinfetantes a base de Cresol, usados em estbulos, bebedouros e comedouros,
isolamento de animais positivos ao teste tuberculnico;

139

- evitando a introduo de animais infectados no rebanho;

A eliminao da tuberculose muito difcil, pois esta pode ser reintroduzida na
propriedade, atravs da aquisio de bovinos infectados, ou pela presena de
reservatrios selvagens.
Espcies selvagens possivelmente infectadas tambm dificultam a erradicao
da tuberculose.
A vacinao pode ajudar a interromper o ciclo da transmisso, mas o
desenvolvimento de uma boa vacina pode levar alguns anos.
Para que um programa de controle e posterior erradicao da tuberculose tenha
xito, necessrio garantir que os animais reagentes tuberculina sejam sacrificados.
Para isso necessrio que o Governo estabelea uma poltica de indenizao para os
animais que devem ser sacrificados e/ou de estmulo (melhores preos do leite por
exemplo) aos produtores cujos rebanhos sejam livres da enfermidade.
O tratamento para animais tuberculosos desaconselhado pois, alm de ser
invivel economicamente devido ao tempo prolongado (aproximadamente 4 a 6 meses),
o animal pode, durante o tratamento,

infectar outros animais do rebanho;

aconselhvel realizar o sacrifcio do animal tuberculoso.

140

Dados oficiais sobre a tuberculose bovina no Brasil.

Item

Fonte

1990

1994

1997

Mdia

Rebanho bovino brasileiro (milhes de

IBGE

140

150

158

149

Vacas ordenhadas (milhes de cab.)

IBGE

13,6

13,7

13,8

13,7

Tuberculina produzida (milhes de doses)

LARA

1,00

0,84

1,10

1,05

% dose tuberculina/rebanho brasileiro

IBGE/LARA

0,7

0,6

0,7

0,7

% dose tuberculina/vacas ordenhadas

IBGE/LARA

7,4

6,1

8,0

7,7

SDA

0,39

0,41

0,36

0,42

DAS/LARA

39

49

32

40

% Tuberculinas positivas ou suspeitas

SDA

1,15

1,22

1,40

1,30

Nmero de cabeas positivas ou suspeitas

SDA

3.332

5.071

5.011

5.352

Animais oficialmente abatidos

SDA

668

511

207

451

cab.)

Tuberculinas notificadas
% Tuberculinas notificadas

Animais

positivos

ou

suspeitos

SDA

20

10

para

rebanho

IBGE/SDA

1,4

1,5

1,6

1,5

abatidos
Estimativa

oficial

brasileiro: milhes de cabeas positivas

ou suspeitas

BRUCELOSE BOVINA

Etiologia
A brucelose bovina uma enfermidade causada pela infeo pela Brucellla
abortus. Esta enfermidade tem grandes implicaes econmicas, principlamente por se
tratar de uma importante zoonose dos animais domsticos em especial dos ruminantes.

141

As Brucella sp. so pequenas (0,5-0,7 x 0,6-1

como cocobacilos, podendo ser aerbicos e capnoflicos. As brucelas apresentam a
capacidade se corar de rosa pela colorao de Ziehl Neelsen, catalase e oxidase
positivas (exceto B. ovis e B. neotomae), urease positiva (exceto B. ovis). Estas bactrias
so intracelulares e resistem a fagocitose, induzindo a formao de uma leso
piogranulomatosa que provoca o aborto. A transmisso ocorre pelo contato e ingesto
de secrees, envoltrios fetais e urina (B. canis). Estas bactrias resistem bem no meio
ambiente, contudo so facilmente destrudas pelos desinfetantes, com exceo dos
amoniacais.
A infeco por Brucella sp. desenvolve aborto nos animais, devido a grande
atrao das bactrias pelo eritritol placentrio. Este componente produzido em grande
quantidade no tero final da gestao. As brucelas utilizam este composto como
substrato para sua multiplicao levando a necrose placentria e aborto.

Epidemiolologia
A infeco acomente principalmente bovinos adultos. A principal fonte de
infeco para os bovinos so os prprios bovinos. No Brasil, ao contrrio de outros
pases os animais silvestres no possuem nenhum papel na disseminao da
enfermidade. Os bulbalinos devem ser considerados em especial quando criados em
consrcio com os bovinos. Os animais normalmente se contaminam aps a exposio a
membranas fetais, secrees do tero grvido e prprio feto abortado.
A via venrea de nenhuma importncia para disseminao da enfermidade,
especialmente por que o touro geralmente fica estril aps a infeco. Por outro lado a
inoculao intrauterina de smen (inseminao artificial) pode levar a disseminao da
enfermidade. A presena de fmeas infetadas fundamental a disseminao da
enfermidade em um rebanho, principalmente quando os animais no so vacinados.
Terneiros infectados podem disseminar a doena.
A penetrao da bactria ocorre normalmente pelo contato com a pele dos
animais (onjutivas em especial). A bactria necessita microleses para poder penetrar. A
inalao e ingesto tambm so consideradas importantes formas de infeco pela
bactria.
Sinais Clnicos

142

A brucelose no possui sinais clnicos especficos. O principal sinal observado

o aborto. Contudo, do ao sistema de criao extensiva este pode no ser observado pelo
produtor. Nos macho podem ser observados orquite e epidimite nos machos e higromas
nas articulaes e inflamaes no ligamento da nuca, tanto em machos, como fmeas.
Nos machos a orquite aguda pode levar a esterilao, que pode ser unilateral.
Neste sentido muito importante verificar o uso do animal para colheita de smen.
No ser humano, o principal sinal da brucelose so febres ondulantes, que
repetem o seu padro ao longo de 24hs. Alm disto, so obsrevadas fadiga, suores
noturnos, dor de cabea, dor muscular e em articulaes, depresso e preda de peso.
Diagnstico
O diagnstico da brucelose pode ser feito pelo envio de amostras colhidas dos
fetos abortados, como contedo estomacal, leses fetais, cotildones, descargas uterinas
e soro pareado dos animais suspeitos. Contudo, o isolamento fica muitas vezes
prejudicado pelo desaparecimento do feto e envoltrios fetais por animais carniceiros. O
isolamento bacteriano pode ser realizado em AS, desde que no existam contaminantes.
A Brucella sp. pode ser isolada dos mesmos meios de cultura utilizados para cultura de
Campylobacter fetus.
OBS.: Devemos tomar muito cuidado na colheita de amostras de animais suspeitos de
brucelose, uma vez que muitas destas bactrias podem causar ZOONOSE importante,
principalmente em mdicos veterinrios (doena do trabalho).

O diagnstico sorolgico da brucelose pode ser feito por diversos testes:

Espcie

Teste

Interpretao

Obs.

B. abortus

Teste de anel do leite

Formao de um

Subjetivo- deve ser

anel na superfcie

acompanhado de

do leite do animal

testes sorolgicos dos

143

Teste rpido em placa

suspeito

animais positivos

Aglutinao na

til como teste de

mistura do soro e

screening, utiliza

antgeno especfico

antgeno acidificado a
3,65-4,0 detecta IGG e
IGM

Teste do antgeno
acidificado tamponado

Aglutinao na

utiliza antgeno

mistura de soro e

acidificado tamponado

antgeno especfico

a 3,63 e corante rosa

de bengala, inibe
respostas inespecficas
IGG e IGM

Aglutinao em

Podem haver

tubo

resultados falsos

Teste lento em tubo

negativos,
principalmente em
animais cronicamente
infectados

Aglutinaoem tubo Destri IgM,

Tratamento com

anticropo de animais

mercaptoetanol

vacinados.

B.melitensis
Fixao do complemento

Hemlise em

Melhor teste, mas de

eritrcitos

difcil execuo

ELISA
IDGA
B. ovis

Fixao do complemento

144

B. suis

ELISA

B. canis

IDGA

Um aspecto importante que soro de fmeas que apresentaram aborto deve ser
colhido no mnimo 15 dias aps o aborto.

Tratamento e Controle

Embora vaias drogas tenham sido utilizadas no tratamento da brucelose no

existe um esquema adequado. As bactrias so intracelulares o que dificulta muito a
resposta nos bovinos. O tratamento de animais com brucelose proibido no Brasil.
Para controle da brucelose, a vacinao empregada utilizando uma amostra lisa
de B. abortus B19, esta cepa utilizada viva e atenuada, contudo para seres humanos
ainda apresenta patogenicidade, logo a vacinao deve ser realizada com cuidados.
Touros no devem ser vacinados, bem como vacas adultas uma vez que estes podem
apresentar a infeco, sinais clnicos, bem como apresentarem anticorpos quando da
realizao dos testes diferenciais. A vacinao deve ser realizada em fmeas dos 3- 6
meses de idade.
Existem alguns testes para diferenciar a cepa vacinal das que ocasionam
infeces, porm testes sorolgicos ainda esto em desenvolvimento. Os prinicpais so
o teste de rosa de bangala, que detecta tanto animais infectados, como vacinados,
seguido do teste de reduo do mercaptoetanol, que detecta somente animais infectados.

Interpretao dos testes de aglutinao para brucelose:

Ttulo

bovinos no vacinados

bovinos vacinados com + de 24 caninos

meses
(vacina entre 3-8 sem.)

25

Negativo

Negativo

Negativo

50

Suspeito

Negativo

Negativo

145

100

Positivo

Suspeito

Suspeito

200

positivo

Positivo

positivo

No RS: O teste de aglutinao rpida em placa no recomendado no RS.

Outra vacina, que vem sendo testada com grande sucesso para preveno da
brucelose a vacina RB51, est produzida por uma cepa viva, atenuada de morfologia
rugosa. Esta amostra de B. abortus foi obtida aps sucessivos cultivos em meio de
cultivo, contendo rifampicina. Este cultivo fez com que a cepa patogcnia perde-se o
antgeno o do LPS, o que lhe traz uma grande vantagem, uma vez que esta no produz
anticorpos detectveis nos testes convencionais.
O controle da brucelose somente possvel, pela vacinao, identificao de
animais positivos e descarte. O transporte de animais positivos entre propriedades deve
ser evitado, pois constitui-se numa importante via de disseminao da doena. O descarte
de filhas de animais infectados, em especial em rebanhos de baixo valor comercial e
zootcnico deve ser considerada tendo em vista os raros casos de transmisso congnita.

Enfermidades do Trato Reprodutivo de Ovinos: Etiologia, Diagnstico e

Teraputica
Valdenice Flix da Silva1, Mateus Matiuzzi da Costa1

1. Introduo
A criao de pequenos ruminantes uma atividade de grande importncia
econmico-social, particularmente na maioria dos pases que possuem regies de climas
ridos e semiridos. Nestas regies, o segmento da sociedade que tradicionalmente est
envolvido na produo de pequenos ruminantes diverso, com distintos graus de
escolaridade, idade, e multiplicidade de objetivos, como o tipo de explorao tradicional
para subsistncia e/ou complemento de renda, e a minoria que compreendida por
criaes tecnificadas voltadas para o mercado de carne, leite, peles e gentica
(SIMPLICIO et al. 2003). O nordeste possui aproximadamente 58,55% do rebanho ovino
brasileiro, sendo este constitudo principalmente por animais deslanados, destinados
produo de carne e pele. Nas regies sul e sudeste, a ovinocultura de corte tem

146

apresentado um grande crescimento nas exploraes tecnificadas (RODRIGUES et al.

2009).
Um importante fator relacionado ao insucesso da produo de ovinos, que se
reflete no rendimento econmico da propriedade est relacionado s perdas decorrentes
de falhas no manejo sanitrio do rebanho. A alta frequncia de doenas nessas espcies
devida basicamente falta de acesso a orientao tcnica adequada e pela dificuldade
de acesso a locais que efetuem o diagnstico laboratorial (OLIVEIRA et al. 2008).
Dentre as doenas que maiores prejuzos trazem produtividade em rebanhos
esto as doenas do sistema reprodutor, com ndices de perda econmica variando de
0,4 a 10,6% (FORAR et al. 1995). Na maioria das vezes, os problemas de ordem
reprodutiva como abortamentos, natimortalidade e infertilidade so os nicos e
expressivos sinais de doena no rebanho. A suspeita diagnstica para qualquer doena
reprodutiva recai na observao do desempenho de produtividade do rebanho,
juntamente com as informaes clnicas (AIELLO, 2001).

2. Enfermidades causadas por bactrias

2.1.

Infeces especficas

Alguns fatores so predisponentes aos processos infecciosos bacterianos do

sistema reprodutivo, como manejo pr-parto inadequado, distrbios endcrinos e
nutricionais, condies sanitrias precrias, fatores ambientais de estresse, infeces
ps-pario, entre outros (BRUUN et al. 2002, MEJA; LACAU-MENGIDO, 2005).
Algumas doenas infecciosas se destacam por acometer o sistema reprodutivo
dos ovinos. A brucelose uma doena infectocontagiosa considerada de grande
importncia devido ao seu potencial zoontico. Em caprinos e ovinos a enfermidade
causada pela Brucella mellitensis e Brucella ovis (FERREIRA et al. 2003), sendo
transmitida para o ser humano por meio do contato direto ou consumo de produtos de
origem animal. Brucella spp. causa aborto geralmente no tero final da gestao
provocando placentite necrtica e morte fetal (NASCIMENTO; SANTOS, 2003). RIZZO et
al. (2009) observaram uma incidncia de 1,96% de ovinos com histrico de distrbios
reprodutivos sororeativos a B. ovis, sendo que os quatro ovinos positivos pela prova de
IDGA para pesquisa de anticorpos anti- Brucella ovis eram fmeas e trs delas com
histrico de abortos e repetio de cio nos seis meses antecedentes ao estudo. Pinheiro
Jnior et al. (2009), pela tcnica de imunodifuso em gel de gar, confirmaram a
147

presena de ovinos reatores para B. ovis em rebanhos do Estado de Alagoas, obtendo

3,1% (18/579) de amostras positivas distribudas em dez propriedades e dez municpios.
A ocorrncia de soro-reagentes para B. abortus em caprinos e ovinos foi descrita pela
primeira vez no Estado de Pernambuco por Pinheiro Jnior et al. (2008), sendo 2,5%
(9/360) dos ovinos reagentes. O autor ainda destaca a importncia dos achados para o
Programa Nacional de Controle e Erradicao da Brucelose, visto que na regio do
estudo comum o consrcio de bovinos e pequenos ruminantes.
Os micoplasmas e ureaplasmas pertencentes classe Mollicutes so causas de
transtornos reprodutivos em ovinos, sendo relatados em diversos estudos (JONES et al.
1983). Mycoplasma ovine/caprine sorotipo 11 ainda no classificado como espcie foi
relacionado a casos de vulvovaginite e problemas reprodutivos em ovinos na Austrlia,
Estados Unidos, Inglaterra, ndia, Frana e Nigria (NICHOLAS et al. 1999). OLIVEIRA
(2008) por meio da tcnica de Eletroforese em Gel de Campo Pulsado (PGFE) isolou
Mycoplasma spp. do trato reprodutivo de ovino, SENDO QUE este apresentando 98% de
similaridade para Mycoplasma bovigenitalium e Mycoplasma sorogrupo 11. M.
fermentans foi isolado pela primeira vez em leses vaginais de uma ovelha, entretanto
isolamentos posteriores ocorreram em swabs vaginais de fmeas clinicamente sadias
(NICHOLAS et al. 1998). Ureaplasmas isolados de ovinos foram estudados por BALL et
al. (1985), que associaram o sorotipo IX infertilidade e aborto em fmeas ovinas.
OLIVEIRA (2008) realizando verificando a prevalncia de Ureaplasma spp. no sistema
reprodutivo de ovinos verificou prevalncia de 68% (17/25) nas amostras oriundas da
mucosa vulvovaginal das fmeas e 27% (3/11) em amostras de smen.
Aborto espordico em ovelhas pode ser causado por Campylobacter fetus
subespcie fetus ou por C. jejuni (QUINN et al., 2005), podendo C. fetus fetus ser
encontrado tambm no trato intestinal. VARGAS et al. (2005) relataram pela primeira
vez no Brasil o isolamento de C. jejuni em um feto de ovino abortado, sendo a
identificao realizada por meio da anlise bacteriolgica e caracterizao molecular
pela PCR. Os autores evidenciaram ainda a importncia desse microrganismo como
causa de abortos em ovelhas, sendo necessria implantao de medidas de controle.
SAHIN et al. (2008) estudando a distribuio de espcies de Campylobacter spp.
associados ao aborto ovino verificaram predominncia de C. jejuni sendo a maioria dos
isolados associados a este transtorno reprodutivo pertencentes a um mesmo clone
gentico.
148

Os ovinos so considerados menos susceptveis leptospirose, entretanto podem

ocorrer surtos da doena causando abortamentos e morte de cordeiros (CICERONI et al.,
2000). O sorovar hardjo considerado o principal agente envolvido nestes transtornos,
porm os sorovares pomona, ballum, bratislava e grippotyphosa tambm so descritos,
porm em menor frequncia (ELLIS, 1983). HERRMANN et al. (2004) verificaram a
presena de aglutininas anti-Leptospira spp. em 34,24% (466/1.360) dos soros ovinos
testados, sendo o sorovar hardjo o mais prevalente onde foi realizado o estudo???.
LILENBAUM et al. (2008) verificaram a presena dos sorovares hardjo, shermani e
grippotyphosa em amostras de fluidos vaginais e de smen de ovinos, destacando o
potencial de transmisso venrea da enfermidade nessa espcie.
Salmonella

abortusovis

uma

enterobactria

considerada

como

um

microrganismo especfico de ovinos, entretanto tem sido ocasionalmente isolado em

outras espcies. Infeces causadas por esse agente desencadeia quadros de aborto,
principalmente em fmeas recm introduzidas no rebanho. HABRUN et al. (2006)
identificaram, por meio da reao em cadeia da polimerase (PCR) S. abortusovis como
principal microrganismo envolvido em surtos de abortos em ovinos no sul da Crocia.
Abortos no final da prenhez na espcie ovina podem estar associados a bactrias
da famlia Chlamydiaceae.

A nova espcie Chlamydophila abortus, anteriomente

classificada como C. psittaci, frequentemente associada a distrbios reprodutivos em

ovinos, caprinos, bovinos e esporadicamente em sunos e equinos (EVERETT, 2000).
PEREIRA, et al. (2009) estudando os fatores de risco para C.abortus em ovinos e
caprinos no estado de Pernambuco verificaram que a frequncia de animais sororeagentes para Chlamydophila sp. foi de 10,3% (30/290 animais), sendo 12,0% (20/167)
para caprinos e 8,1% (10/123) para ovinos.

2.2.

Infeces inespecficas (oportunistas)???

Entre os agentes infecciosos relacionados s infeces uterinas, incluem-se

microrganismos considerados oportunistas como Streptococcus spp., Staphylococcus
spp., Escherichia coli, Enterobacter spp., Bacillus spp e Proteus spp. que produzem
infeces isoladas ou mistas

(DOHMEN et al. 1995, SILVA;

LOBATO,

1999). Estes

microrganismos so responsveis por endometrites puerperais agudas, septicemia, e

geralmente causam aborto espordico sendo a via hematgena a principal rota de
infeco (CORBELLINI et al. 2006). A vaginite considerada uma infeco comum do
149

sistema genital da fmea e pode ser ocasionada por microrganismos que atuam como
invasores oportunistas (SUREZ et al. 2006). Segundo MAVROGIANNI et al. (2007)
Staphylococcus spp. o agente comumente isolado de vaginite em ovelhas, estando
associado secreo purulenta e grande quantidade de leuccitos na vagina. MARTINS
et al. (2009) verificaram prevalncia de 9,25% (2/22) de S. aureus em ovelhas com
vaginite, entretanto 90,8% dos isolados foram constitudos de coliformes. Em uma
avaliao microbiolgica de um dispositivo vaginal para sincronizao de cio em
ovelhas, MARTINS et al. (2010) identificaram Staphylococcus spp., e coliformes como
Klebsiella spp., E. coli, e Shigella spp. como causa de vaginites decorrentes do uso do
instrumento. A importncia dos coliformes, principalmente E. coli, na etiologia das
vaginites foram verificadas em diversas pesquisas, demonstrando o potencial
oportunista desses agentes (VASCONCELOS, 2009; SARGISON et al. 2007). SOKKAR et al.
(1980) em um estudo sobre endometrite natural e experimental em ovelhas verificaram
que E. coli, Corynebacterium pyogenes e S. aureus foram os principais microrganismos
isolados, entretanto, quando inoculados em teros de fmeas normais, estes agentes no
foram capazes de causar leses. Tzora et al. (2002) em uma pesquisa bacteriolgica em
contedo uterino, verificaram que as principais bactrias isoladas de ovelhas com
reteno de placenta foram Arcanobacterium pyogenes e E.coli.

3. Doenas causadas por vrus

Os sistemas de produo so diretamente influenciados pela eficincia
reprodutiva dos rebanhos. Enfermidades virais que acometem o aparelho reprodutivo
como os pestivrus, quando disseminadas no rebanho resultam em perdas e transtornos
econmicos (PINHEIRO et al. 2003).
A lngua azul uma doena infecciosa, causada por um orbivrus e transmitida
por mosquitos Culicoides (PUGH, 2004). Ruminantes so susceptveis ao vrus causador
da lngua azul e em geral a infeco ocorre de forma inaparente, com exceo dos
ovinos, que manifestam sinais evidentes, com diminuio na produo, mortalidade
elevada (LOBATO, 1999) e abortamento de ocorrncia sazonal (PUGH, 2004). Um estudo
realizado na regio de Araatuba- SP avaliou um total de 1.002 amostras de soro ovino.
Por meio da tcnica de Imunoensaio enzimtico de competio de fase slida (ELISA
CFS), 74,1% dos ovinos testados apresentaram anticorpos para lngua azul, enquanto
que pela tcnica de imunodifuso dupla em gel de gar (IDGA) foram observados 65%
150

positivos para Orbivirus. Isto indica que a alta frequncia obtida nos estudos
sorolgicos, sem sinais clnicos da doena no campo, significa que a doena espalha-se
pelos animais no pas de forma silenciosa, sendo as condies climticas facilitadores
da multiplicao e manuteno dos vetores, mantendo a endemicidade da enfermidade
(NOGUEIRA, et al. 2009).
Pestivrus so capazes de infectar uma grande variedade de espcies animais e
inclui enfermidades como Diarria Viral Bovina e vrus da doena da fronteira. Os
ovinos so susceptveis infeco natural e experimental com o BVD (LOKEN, 1995).
Inoculao experimental de ovelhas prenhes resulta em transmisso do vrus ao feto,
podendo resultar em mortalidade embrionria ou fetal, abortos, mumificaes,
malformaes e natimortalidade (SCHERER et al. 2001). JULI et al. (2009) verificaram
uma prevalncia de 46,6% (25/54) de amostras soropositivas para BVDV-1 e 13%(7/54)
para BVDV-2 em ovelhas saudveis criadas na Argentina, sendo ainda algumas
amostras confirmadas por meio de PCR. OGUZOGLU et al. (2009) relataram

pela

primeira vez a ocorrncia e parcial caracterizao da infeco do vrus da doena das

fronteiras em ovinos na Turquia. Por meio da anlise filogentica verificou-se que o
vrus formou um grupo separado dos conhecidos BDV-1 e BDV-6, sugerindo a
representao de um novo subgrupo.
Os herpesvrus so caracterizados por permanecerem em estado de latncia,
podendo ser reativados quando os animais so expostos a fatores estressantes que
diminuem sua imunidade, sendo excretado e transmitido a outros animais susceptveis
(JONES et al. 2003). ALMEIDA et al. (2008), demonstraram que ovelhas so susceptveis
infeco experimental pelo herpesvrus bovino tipo 2 e desenvolvem leses
semelhantes s observadas em casos naturais. O herpesvirus caprino, conhecido como
herpesvirus bovino tipo 6, pode causar surtos de abortos em cabras, em que os fetos
abortados apresentam microscopicamente focos de necrose no fgado, pulmo e no
bao. (NASCIMENTO; SANTOS, 2004).

4. Doenas causadas por fungos

O papel dos fungos no desenvolvimento de doenas reprodutivas no est
totalmente elucidado. Em conseqncia, antifngicos so usados de forma errnea
eliminando microrganismos que so naturalmente encontrados no ambiente vaginal,
desencadeando a proliferao de fungos patognicos. Abortos causados por Aspergillus
151

spp. e Candida spp. j foram descritos em bovinos e bubalinos (PUGH, 2004) sendo
dados referentes a ovinos limitados.
A. fumigatus o fungo isolado com maior freqncia em rebanhos com
distrbios reprodutivos, alm de A. flavus, A. nidulans, A. niger, A. terreus, e Absidia
corymbifera (LACAZ et al. 1991). CORBELLINI et al. (2003), verificou a prevalncia de
infeco mictica em fetos bovinos abortados de 3,4% , sendo o A.fumigatus o fungo
isolado de quatro casos. Infeces micticas foram diagnsticadas em 6,8% de 6.858
casos de abortos bovinos avaliados durante um perodo de 9 anos, sendo o Aspergillus
sp associado com aproximadamente 5%, tendo A. fumigatus uma freqncia de 62%
(KNUDTSON; KIRKBRIDE, 1992). DRIEMEIER et al. (1998) descreveu caso de aborto e
placentite mictica em fmea eqina causado pelo mesmo agente.
Aflatoxinas so metablitos produzidos por Aspergillus flavus var. parasiticus
associados a diferentes manifestaes clinicas e variada toxicidade. Estas so
encontradas comumente em alimentos fornecidos para animais de produo, se
destacando gros como milho, sorgo e amendoim (MILLER et al. 1981; MALLMANN et
al. 1994). A espcie fngica Claviceps purpurea produz alcalides ergopeptdeos, sendo
os principais a ergotamina e ergometrina, que se ingerido a nveis txicos provocam
transtornos reprodutivos, como desenvolvimento deficiente das glndulas mamrias,
partos prematuros, mortalidade neonatal e ainda exercer efeito semelhante ocitocina
em teros prenhes (QUINN, 2004).
O gnero Candida composto por leveduras que vivem como comensais na
microbiota de seres humanos e animais. Geralmente no causam danos aos seus
hospedeiros, todavia quando no desequilbrio das protees fsica, qumica e
imunolgica, podem se tornar patognicos desencadeando enfermidades (GARCIA et al.
2007; MORETTI et al. 2009). Infeces por Candida spp. em medicina veterinria so
pouco freqentes, entretanto nos ltimos anos tem sido observado um aumento no
nmero de relatos, acometendo vrias espcies animais (DUARTE et al. 2001; PRESSLER
et al. 2003; LINEK, 2004; MORETTI et al. 2004; FULLERINGER et al. 2006). SANTOS;
MARIN (2005) em um estudo envolvendo agentes de mastite bovina verificaram a
prevalncia de 17,3% (45/260) para o gnero Candida. YENIEHIRLI et al. (2010)
demonstraram que a atividade de proteinase, fosfolipase e atividade hemoltica de C.
albicans podem desempenhar um papel importante para as infeces, no entanto o papel
gentico destes fatores devem ser avaliados em outros estudos.
152

5. Doenas causadas por protozorios

Enfermidades causadas por protozorios tm distribuio mundial e so
associadas a manifestaes como aborto, nascimentos prematuros e morte fetal nas
espcies domsticas (PESCADOR et al. 2007).
A tricomonose, doena venrea causada pelo Tritrichomonas foetus uma
importante causa de morte embrionria e aborto em bovinos, sendo os machos
reprodutores assintomticos a doena (NASCIMENTO; SANTOS, 2003). JESUS et al. (2004)
em um estudo da prevalncia da tricomonose em bovinos, verificou diferenas entre a
presena do agente entre machos e fmeas, sendo encontrado nos reprodutores a maior
prevalncia, confirmando sua importncia na disseminao da doena no rebanho.
Neospora caninum um parasita intracelular obrigatrio, sendo frequentemente
diagnosticado como causa de aborto em diversas espcies animais (DUBEY et al. 2003).
A soroprevalncia de N. caninum em ovelhas foi observada por HOWE et al. (2008), que
verificaram 26% (10/38) amostras positivas, sendo demonstrado o potencial de infeco
do parasito por via genital e ingesto de oocistos (DUBEY; LINDSAY,1990). Com o
objetivo de se avaliar a freqncia de soropositivos para Neospora caninum em
rebanhos caprinos leiteiros no estado de So Paulo, e ainda verificar possveis
associaes com idade, sexo, infeces reprodutivas e presena de ces nos capris,
MODOLO et al. (2008) encontrou uma freqncia de 19,77% de animais positivos para
N. caninum no sendo verificadas diferenas significativas quanto s variveis
avaliadas, exceto pela presena dos ces ser associada a um maior percentual de animais
soropositivos. Anticorpos contra o agente foram detectados por meio da tcnica de
ELISA em rebanhos do Rio Grande do Sul, obtendo percentual de 3,2%(2/62) ovinos
(VOGEL et al. 2006). FARIA et al. (2010) estudando os fatores de risco associados
neosporose ovina, verificaram uma alta frequncia de rebanhos soropositivos no Estado
de Alagoas, indicando que a infeco generalizada. Os autores ainda ressaltam a
importncia de medidas sanitrias preventivas para o controle da doena.
A toxoplasmose, zoonose cosmopolita causada pelo Toxoplasma gondii,
acomete diversas espcies domsticas. Infeces durante a prenhez podem ocasionar
transtornos reprodutivos em ruminantes. Estudos sorolgicos vm demonstrando a
prevalncia da enfermidade em rebanhos brasileiros (MOTTA et al. 2008; LIMA et al.
2008; COSTA et al. 2001). Soros de caprinos e ovinos de propriedades localizadas em
153

Pernambuco foram testados para deteco de anticorpos anti- T. gondii, de 173 soros
ovinos 35,3% positivos, enquanto 40,4% dos 213 soros caprinos apresentaram
anticorpos. Em ambas as espcies houve associaes significativas entre sexo e raa
(SILVA et al. 2003). Em uma infeco experimental, quarenta e uma ovelhas foram
inseminadas com smen contaminado com T. gondii. Por meio da tcnica de PCR, foi
demonstrado que 93,3% das fmeas de ambos os grupos do estudo apresentaram
resultados positivos para o agente, alm disso, a ultrassonografia revelou que as ovelhas
infectadas apresentaram reabsoro embrionria. O estudo evidencia ainda a
importncia da inseminao artificial como forma de disseminao da doena, quando
realizada com smen fresco contaminado (MORAES et al. 2010). PINHEIRO et al. (2009)
avaliando a prevalncia e fatores de risco associados infeco por T.gondii em ovinos
no estado de Alagoas, verificaram uma taxa de prevalncia de 32,9% e uma associao
significativa entre idade dos animais, tamanho da propriedade, sistema de criao, fonte
de gua e presena de gatos, concluindo que os ovinos do estado esto expostos
infeco e medidas profilticas devem ser tomadas.

6. Diagnstico das enfermidades reprodutivas

A anamnese componente essencial na avaliao diagnstica de enfermidades
reprodutivas, principalmente em cabras e ovelhas, em decorrncia da inacessibilidade da
maior parte do trato reprodutor palpao ou inspeo (PUGH, 2004).
Os mtodos de diagnsticos laboratoriais incluem exame microbiolgico,
citolgico e histopatolgico. As amostras a serem colhidas para o diagnstico de
enfermidades reprodutivas podem ser obtidas por meio de coleta de amostras de muco
crvico-vaginal, lavados prepuciais, contedos de fetos abortados, lquidos fetais,
sangue com anticoagulante, plasma, soro, smen, placenta, contedo de vesculas,
mucosas, contedo abomasal, fezes e urina (AIELLO, 2001) Diagnsticos referentes
etiologia bacteriana podem ser realizados por meio de caractersticas culturais e
bioqumicas, exames de esfregaos corados, deteco por mtodos imunolgicos
(colorao com anticorpos fluorescentes, ELISA), fagotipagem e tcnicas moleculares
(QUINN, 2004). Os vrus podem ser identificados por meio de imunofluorescncia e
imuno-histoqumica, teste de fixao do complemento e hemaglutinao. Amostras de
sangue podem ser submetidas a testes sorolgicos como soroneutralizao viral,
154

imunodifuso em gel de gar e ELISA (QUINN, 2004). Atualmente, a tcnica da reao

em cadeia pela polimerase est sendo universalmente adotada no diagnstico de
diversas viroses, apresentando como principais vantagens a no exigncia da viabilidade
da partcula viral, alta sensibilidade e especificidade, alm da rapidez na obteno dos
resultados (TAKIUCHI et al. 2001). Infeces por protozorios podem ser evidenciadas
pela presena do parasito principalmente em amostras de crebro e medula, por tcnicas
de imuno-histoqumica ou PCR. Pode ser realizado o isolamento por cultivo celular e
exames sorolgicos por testes de imunofluorescncia indireta, teste de aglutinao e
ELISA.
A suspeita clnica importante para determinar o tipo de material clnico a ser
coletado, sendo o sucesso do diagnstico laboratorial dependente da escolha correta,
forma de acondicionamento e conservao da amostra clinica, instrues que
geralmente so disponibilizadas em manuais de procedimentos (DEL FAVA, 2007).

7. Terapia convencional

Doenas infecto-contagiosas especficas de ovinos no possuem uma conduta

teraputica instituda, tendo principalmente estabelecidas medidas voltadas para o
controle e preveno. O Ministrio da agricultura Pecuria e Abastecimento (MAPA)
instituiu o Plano Nacional de Sanidade dos Caprinos e Ovinos (PNSCO), que prev
aes para prevenir, controlar ou erradicar doenas que comprometam o rebanho
caprino e ovino nacional (MAPA, 2010). O controle e profilaxia de algumas
enfermidades constituem do uso de vacinas e mudanas no sistema de manejo (Quinn et
al. 2005).
Nos animais de produo a conduta teraputica de enfermidades como infeces
decorrentes de reteno de placenta, metrites e endometrites compreende geralmente a
utilizao de agentes farmacolgicos e correo de problemas de manejo (SILVA, 1999).
Nas ltimas dcadas, apesar das pesquisas referentes descoberta de novos antibiticos
serem crescentes, a resistncia dos microrganismos tambm aumentou. Em geral os
microrganismos possuem a capacidade gentica de obter e transmitir a outros indivduos
resistncia s drogas que so utilizadas em tratamentos (NASCIMENTO et al. 2000).
Coliformes constituem um grupo de bactrias que apresentam um padro altamente
155

varivel de susceptibilidade aos antimicrobianos, o que pode comprometer a eficcia da

terapia antimicrobiana inicialmente instituda (SUREZ et al. 2006). Testes in vitro de
susceptibilidade a antibiticos realizados regularmente so importantes para o estudo e
monitoramento da resistncia da droga ao longo do tempo. Vrios artigos descrevem a
prevalncia e desenvolvimento da resistncia aos antibiticos em bovinos de agentes
associados a enfermidades reprodutivas ao longo do tempo (ERSKINE et al. 2002;
MAKOVEC; RUEGG, 2003), enquanto informaes semelhantes de ovinos so limitadas.
As freqncias de agentes etiolgicos que afetam o aparelho reprodutivo so variveis,
assim como sua interao com os antimicrobianos, sendo de grande importncia a
correlao peridica de dados clnicos e microbiolgicos a fim de direcionar o
tratamento adequado (MARTINEZ et al. 1996).
Alternativas no-antibiticas, como utilizao de agentes hormonais tais como
ocitocina, PGF2 podem ser teis no tratamento de enfermidades do trato reprodutivo.
Estes hormnios permitem a contratilidade do aparelho genital, assim como o efeito
positivo nas defesas locais celulares e humorais. Desinfetantes a base de agentes como
lugol, clorexidine e perxido de hidrognio tambm so comumente utilizados em
infeces uterinas (AIELLO, 2001). Segundo LEWIS et al. (2004) a progesterona pode ser
um fator predisponente para infeces uterinas, por produzir substncias que inibem os
mecanismos de defesa do tero. O autor ainda relata que a utilizao de anlogos da
prostaglandina estimula diretamente a produo de PGF2, assim como Leucotrieno
B4, responsvel por funes leucocitrias. Em um estudo com animais em fase
puerperal, FERNANDES et al. (2002) verificaram uma diminuio na prevalncia de
infeces uterinas em vacas que receberam aplicao de duas doses de cloprostenol na
primeira semana ps-parto, demonstrando o efeito dessa substncia no mecanismo de
defesa uterino.

8. Potencial da fitoterapia para tratamento de enfermidades do trato

reprodutivo
Resultados insatisfatrios frente antibioticoterapia, o aumento na preocupao
com a resistncia bacteriana e os resduos teciduais deixados pelas drogas nos animais
de produo alimentar enfatizam a necessidade de alternativas para o tratamento das
enfermidades do trato reprodutivo (AIELLO, 2001).

156

Durante milnios o homem aprofundou seus conhecimentos de forma emprica

com o intuito de melhorar sua alimentao e tratar de suas enfermidades, criando uma
inter-relao entre sua evoluo e o uso de plantas (MIGUEL; MIGUEL, 2000). A busca
por tratamentos a base de fitoterpicos intensificou-se nas ltimas dcadas. O Brasil
apresenta uma extensa e diversificada flora, sendo grande o nmero de pesquisadores
que tm contribudo para a caracterizao da qumica de produtos naturais de plantas.
No entanto, nosso pas no tem uma atuao destacada no mercado mundial de
fitoterpicos, ficando atrs de pases menos desenvolvidos tecnologicamente (YUNIS et
al. 2001).
Atualmente, as vantagens que justificam a utilizao dos fitoterpicos, so: o
efeito sinrgico, ou seja, as plantas apresentam vrios compostos com efeitos similares;
associao de mecanismos por compostos agindo em alvos moleculares diferentes;
menores riscos de efeitos colaterais, uma vez que os compostos ativos se apresentam em
concentraes reduzidas nas plantas; e, menores custos de pesquisa (YUNIS et al. 2001).
Os compostos isolados de plantas so substncias cuja estrutura qumica, com raras
excees, apresentam grandes diferenas estruturais em relao aos antibiticos
derivados de microrganismos. Estes agentes antimicrobianos isolados de plantas
superiores podem agir como reguladores do metabolismo intermedirio, ativando ou
bloqueando reaes enzimticas, afetando diretamente uma sntese enzimtica seja em
nvel nuclear ou ribossomal, ou mesmo alterando estruturas de membranas (SINGH;
SHUKLA, 1984).
A Organizao Mundial de Sade considera fundamental que se realizem
investigaes experimentais acerca das plantas utilizadas para fins medicinais e de seus
princpios ativos, para garantir sua eficcia e segurana teraputica (SANTOS, 2004). A
legislao brasileira para medicamentos fitoterpicos tem sofrido modificaes. A
Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA) elabora normas para a
regulamentao destes medicamentos, tendo a Portaria n 6 de 1995 estabelecido prazos
para apresentao de dados de eficcia e segurana dos produtos pelas indstrias
farmacuticas, e a Resoluo RDC n. 48 de 16 de maro de 2004, em vigor atualmente,
dispe sobre o registro de medicamentos fitoterpicos. Essa preocupao por parte das
autoridades reguladoras para normatizao dos fitoterpicos incita pesquisas visando
avaliao de fatores relacionados segurana e eficcia do uso desses produtos.
TUROLLA et al. (2006) avaliaram alguns fitoterpicos utilizados no Brasil (Passiflora
157

incarnata L., Ginkgo biloba L., Aesculus hippocastanum L., Plantago ovata Forsk.,
Panax ginseng C. A Meyer, Piper methysticum G. Forst., Valeriana officinalis L.,
Hypericum perforatum L., Cimicifuga racemosa (L.) Nutt. e Rhamnus purshiana D.C.)
e relataram informaes toxicolgicas. Os autores concluram que de maneira geral as
dez plantas avaliadas apresentaram baixa toxicidade e no demonstraram atividade
mutagnica ou teratognica.
Em um levantamento de espcies de plantas medicinais que so utilizadas no
nordeste brasileiro realizado por AGRA et al. (2008), revelou-se que um total de 650
espcies e 407 gneros pertencentes a 111 famlias. A autora ainda descreve que destes,
126 espcies so exticas e cultivadas na regio. Estudo semelhante foi realizado no
norte do pas, onde foram identificadas 63 espcies de plantas medicinais, distribudas
em 38 famlias, que so utilizadas pela populao do estado de Rondnia (SANTOS et al.
2008).
O uso de plantas medicinais em medicina veterinria j foi descrito numa
reviso realizada por VIEGI et al. (2003), em que foram identificadas 256 espcies que
so utilizadas na teraputica de enfermidades do sistema respiratrio, diarrias,
inflamaes e feridas, sendo includas as espcies bovina, eqina, ovina, suna, aves,
ces e coelhos. O tratamento constitui principalmente da decoco de folhas, razes,
cascas e frutos para aplicao tpica ou como complementos alimentares (VIEGI et al.
2003).
A atividade antimicrobiana exercida por extratos de plantas verificada por
meio da determinao da Concentrao Mnima Inibitria (CIM), que se refere menor
quantidade da substncia que inibe o crescimento do microrganismo testado, sendo um
aspecto relevante a preocupao em relao a propriedades toxicolgicas e legais
pertinentes aos compostos naturais (PINTO et al. 2003). Variaes inerentes definio
da CIM (Concentrao Mnima Inibitria) de extratos de plantas podem ser causadas
por fatores como: a tcnica aplicada, o microrganismo e a cepa utilizada, origem e
poca de coleta da matria prima e preparao do extrato (FENNEL et al. 2004).
Alguns trabalhos demonstram a atividade antimicrobiana de extratos etanlicos
de plantas encontradas na flora nordestina. Pode-se citar a Amburana cearensis (BRAVO
et al. 1999), Hymenaea courbaril, (NOGUEIRA et al. 2001), Borreria verticillata
(PEIXOTO-NETO et al. 2002; MAYNART et al. 1980), Croton sonderianus (MCCHESNEY,
1991), Hyptis suaveolens (IWU et al. 1990), Maytenus rigida (KLOUCEK et al. 2005),
158

Pithecellobium cochliacarpum (ARAJO et al. 2002), Plumbago scandens (PAIVA et al.

2003), Ximenia americana (KON et al. 2004; MAIGA et al, 2005; OMER; ELNINA,
2003), Guazuma ulmifolia (CACERES et al. 1993).
Amostras de S. aureus, E. coli, P. aeruginosa e C. albicans foram testadas frente
ao extrato de Azadirachta indica A. Juss (meliaceae), em diferentes diluies e intervalo
de tempo de incubao. Verificou-se que todos os isolados de S. aureus foram sensveis
em concentraes de 1mg/ml em 8 horas, em contrapartida o extrato no inibiu o
crescimento das bactrias gram negativas em nenhuma concentrao mesmo aps 24
horas de incubao (OKEMO, et al. 2001). VALETIM, (2006) em um estudo fitoquimico e
de atividade antimicrobiana da Hymenaea stigonocarpa Mart. Ex. Hayne (jatob)
verificou alta sensibilidade de Staphylococcus aureus, enquanto as bactrias gram
negativas obtiveram resultados insignificantes. O percentual do uso de plantas para fins
preventivos muito baixo comparado a outras utilizaes, porm existem relatos do uso
de partes areas de Artemisia absinthium na preveno de transtornos digestivos em
bezerros lactantes (GUARRERA et al. 1981 apud VIEGI et al. 2003). Estudos sobre a
medicina natural utilizada em ruminantes revelaram espcies de plantas que so
utilizadas na teraputica de mastites, doenas oculares, reteno de placenta e artrite
encefalite caprina. As plantas apresentaram alta eficcia no controle destas
enfermidades, incluindo ainda, ao contra a dor e parasitoses (LANS et al. 2007).
Extratos etanlicos de substncias como a prpolis tm sido utilizadas no
tratamento de diversas afeces no organismo. Ela se caracteriza com uma substncia
resinosa ou cerosa, que coletada por abelhas melferas de diferentes exsudatos
vegetais. Sua aplicao se baseia em seu amplo espectro de atividade biolgica como
anti-inflamatrio, antibacteriano, antifngico e anti-oxidante (SFORCIN et al. 2000;
MARCUCCI et al. 2001).
VARGAS et al. (2004) avaliaram a atividade antimicrobiana in vitro do extrato
alcolico de prpolis sobre as bactrias Staphylococcus sp., Streptococcus sp., Nocardia
asteroides Rhodococcus equi, E. coli, Salmonella sp., Proteus mirabilis e Pseudomonas
aeruginosa e verificaram que 67% das amostras testadas apresentaram inibio de
crescimento, sendo que 92,6% dos isolados gram positivos e 42,5% gram negativos
foram sensveis aos extratos.

159

9. Consideraes finais
As enfermidades reprodutivas significam grandes prejuzos explorao das
espcies domsticas. A etiologia dessas doenas multifatorial, podendo ser causada
por agentes infecciosos ou no, sendo ainda de relevncia os microrganismos de carter
oportunista, que tornam o diagnstico mais difcil.
A terapia e profilaxia de infeces genitais nas espcies domsticas possuem um
complicador associado ao uso indiscriminado e incorreto de drogas e falhas no manejo
sanitrio. Dessa forma, considerando o baixo custo e grande disponibilidade de matria
prima, tornam-se necessrios estudos acerca da atividade in vitro de extratos de plantas,
a fim de se produzir alternativas de tratamento e controle.

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