Potenciais de uso forense do DNA mitocondrial

Ngela Rodrigues Carvalho1

Ian Marques Cndido2
Paulo Queiroz3
Biomdica. Aluna da Ps-Graduao em Biocincias Forenses pela Pontifcia Universidade Catlica de
Gois/IFAR. E-mail: nigelabiomed@hotmail.com
2
Farmacutico-bioqumico. Perito Criminal especialista em Gentica Forense pela UFPA e mestrando em
Gentica pela PUC-GO. E-mail: imarquescandido@gmail.com
3
Bilogo. PhD. Biologia Animal. UnB. Professor do IFAR/PUC-GO. Endereo: IFAR Instituto de Estudos
Farmacuticos. SHCGN 716 Bl B Lj 05 Braslia DF CEP: 70770-732. E-mail: pqsilva@uol.com.br

Resumo
O DNA mitocondrial ferramenta de grande potencial dentro da gentica forense, principalmente ao se tratar de
amostras degradadas e escassas em quantidade de DNA. O objetivo desta reviso foi descrever os potenciais de
uso do DNA mitocondrial no mbito forense. Para isso, foram utilizados artigos cientficos e livros relacionados
com o tema proposto. A literatura demonstra que a potencialidade do DNA mitocondrial no pode ser negada no
contexto forense, pois, em muitos casos, esta a nica alternativa vivel. Na identificao humana, apresenta-se
como ferramenta assistencial, sendo que estudos vm aprimorando seu poder de discriminao com a utilizao
de novos marcadores (SNPs) e com a explorao de sua regio codificante. J na identificao de espcies
animais, mostra-se bastante eficaz e menos laboriosa que a anlise autossmica.
Palavras Chave: Gentica Forense. DNA Mitocondrial.

Potencials forensic use of mitochondrial DNA

Abstract
Mitochondrial DNA is a tool of great potential in forensic genetics, especially when we deal with degraded
samples and scarce DNA quantity. The aim of this review was to describe the potential use of mitochondrial
DNA in forensics. For this, we used scientific articles and books related to the theme. The literature shows that
the potentiality of mitochondrial DNA can not be denied in the forensic context, because in many cases, this is
the only viable alternative. In human identification, is presented as an assistencial tool, and studies have been
honing their discriminative power with the use of new markers (SNPs) and the exploitation of its coding region.
In the identification of animal species, appears to be quite effective and less laborious than the autosomal
analysis.
Keywords: Forensic Genetics. Mitochondrial DNA.

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1 INTRODUO
A utilizao de tecnologias de biologia molecular vem se tornando ferramenta
essencial na rea forense. H mais de 15 anos a anlise de DNA (cido desoxirribonuclico)
tem sido utilizada na elucidao de crimes. O material gentico coletado na cena do crime
pode identificar pessoas, as colocando em cenas de crime (autores/vtimas), estabelecer
ligao entre objetos e pessoas (arma do crime por exemplo); alm disso, determinar a
identidade gentica de cadveres ignorados (BUDOWLE et al., 2003; BUTLER, 2010).
A clula eucaritica apresenta dois genomas distintos, o nuclear e o mitocondrial,
aquele se encontra no ncleo e este na organela citoplasmtica. O DNA mitocondrial
(mtDNA) uma molcula de DNA extra cromossomal haplide de herdabilidade uniparental
materna. Esta molcula encontrada em grande nmero de cpias, podendo ser maior que
1000 cpias por unidade celular. Ela se constitui em dupla cadeia circular, que devido
distribuio assimtrica de nucleotdeos, dividida em cadeia pesada (H) e cadeia leve (L),
apresenta aproximadamente 16.569 pb (pares de base), sendo que somente 10% de sua
totalidade no codificante (ANDERSON et al., 1981, ANDREWS et al.,1999; BLUTER,
2010).
A regio codificante do mtDNA apresenta 37 genes, os quais correspondem a 13
polipeptdios, 2 molculas de rRNA e 22 tipos de tRNA; sua regio no codificante
corresponde regio denominada regio controle ou D-Loop, a qual apresenta
aproximadamente 1122 pares de bases, sendo a mesma dividida em regies hipervariveis I,
II e III (HV I, II e III). Esta responsvel pela regulao da replicao e transcrio de todo o
mtDNA (ANDERSON et al., 1981; ANDREWS, et al.,1999; BLUTER, 2010).
A regio D-loop no codifica produtos gnicos e apresenta abundantes polimorfismos
entre indivduos, por se a regio onde se inicial o processo de duplicao do material
gentico, sendo portanto, mais suscetvel a ocorrncia de mutaes. Assim, esta a regio
alvo de anlises forenses, pois oferece maior potencial de discriminao (BINNI, 2003;
GRZYBOWSKI; ROGALLA, 2012). Essa variabilidade decorre da pobre atividade
reparadora da polimerase do DNA mitocondrial, ausncia de histonas, maior sensibilidade ao
dano oxidativo devido ao ambiente com grande nmero de radicais livres, e ausncia do
mecanismo de reparo por exciso de nucleotdeos, fatores que levam este genoma a apresentar

3
uma taxa de mutao de 5 a 10 vezes maior que o DNA nuclear (BINNI, 2003; YAKES;
VAN OUTEN, 1997; ALVAREZ et al., 2007).
O DNA mitocondrial apresenta ampla aplicabilidade dentro do contexto cientfico.
Vrios trabalhos correlacionam doenas a mutaes em sua sequncia (WALLACE, 1999,
2010; MAZZACCARA et al., 2012). Ainda, bilogos evolucionistas, atravs de anlises de
variaes do DNA mitocondrial, realizam estudos de ancestralidade, voltados para a
antropologia e evoluo, sendo estabelecidos, por exemplo, na espcie humana, grupos
especficos, os denominados haplogrupos. Assim, tornou-se possvel reconstruir rotas
migratrias e anlises filogenticas, sendo que a mulher na raiz de todos os haplogrupos ficou
conhecida como Eva mitocondrial (CARVALHO, 2005; ALLARD et al., 2006; ALVAREZ
et al., 2007; WONG et al., 2007).
Embora as vertentes de aplicabilidade do DNA mitocondrial estejam bem definidas,
estas se encontram compiladas de maneira dispersa na literatura. Por se tratar de rea forense,
em especial, devido ao questionamento de admissibilidade do DNA mitocondrial como prova
material e suas limitaes de anlise e interpretao (BUDOWLE, 2003; MARQUEZ, 2012),
descries de suas aplicabilidades e tendncias encontram-se em relatos de casos isolados,
sendo importante reunir estas informaes para auxiliar no desenvolvimento da utilizao da
tcnica no mbito forense.

2 OBJETIVOS
Descrever os potenciais de uso do DNA mitocondrial em mbito forense.

3 METODOLOGIA
Para o desenvolvimento do trabalho foi realizado um levantamento bibliogrfico sobre
o tema em questo. Os trabalhos cientficos foram pesquisados em bases de dados de
divulgao e publicao de artigos cientficos, como Pubmed, Scielo, Google Acadmico e
sites de Universidades, no perodo de maro a agosto de 2012.

4 DISCUSSO

4
4.1 Identificao humana
Dentro do cenrio criminalstico, o DNA mitocondrial vem ganhando maior espao
por apresentar caractersticas que o torna uma estratgia importante na rotina forense
(MARQUES, 2012), dentre elas, sua maior resistncia degradao devido sua natureza
circular e seu elevado nmero de cpias, fato este preponderante, j que por se tratar de
anlises forenses, a disponibilidade de vestgios geralmente pequena (ANDRASSON, et
al., 2006b; BUTLER, 2010).
A metodologia tradicional utilizada para anlises forenses de DNA mitocondrial
utiliza como marcadores genticos as regies hipervariveis HVI e HVII da regio controle ou
D-loop e compreende o sequenciamento destas com posterior anlise e interpretao
(BLUTER, 2010). Estas regies so utilizadas, pois, nelas que se encontram variabilidade e
polimorfismos entre indivduos. A regio hipervarivel HVIII tambm agrega polimorfismos,
entretanto, em menor proporo, sendo analisada, s vezes, para ajudar a solucionar amostras
que apresentam HVI e HVII indistinguveis, entretanto raramente utilizada em casos
forenses (BINNI et al., 2003; BLUTER, 2010).
A anlise do DNA mitocondrial, nos nucleotdeos de 16024 a 16365 (HVI) e de 73 a
340 (HVII) da amostra questionada determinada por sequenciamento e comparada com a
sequncia referncia CRS (Cambridge Reference Sequence) de Anderson e colaboradores
(1981) para pesquisa de polimorfismos, e, por conseguinte, comparada com a amostra
referncia (BLUTER, 2010).
De acordo com as diretrizes para interpretao da sequncia de nucleotdeos do DNA
mitocondrial, os resultados podem ser agregados em trs grupos: excluso, inconclusivo e
falha de excluso. Se as sequncias diferirem em dois ou mais nucleotdeos, uma excluso
pode ser feita. Se as sequncias corresponderem uma outra, as amostras no podem ser
excludas de serem da mesma pessoa ou da mesma linhagem materna (SWGDAM, 2003).
Ainda, se as sequncias apresentarem apenas um nucleotdeo diferente, o resultado
inconclusivo, j que, na literatura, h relatos de mutao observada entre mes e seus
progenitores (PARSON et al., 1997).
Segundo SWGDAM (Scientific working group DNA analysis methods) (2003) a
anlise das regies HV1 e HV2 no pode ser considerada uma identificao conclusiva, pois o
DNA mitocondrial no tem o poder de discernimento de um marcador autossmico por se
trata de marcador uniparental e consequentemente no sofrer recombinao. Assim, para se

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determinar a significncia dos resultados em que no se pode excluir a possibilidade das
amostras apresentarem mesma origem ou mesma linhagem matrilnea, necessrio verificar a
frequncia com que esse conjunto de polimorfismos ocorre na populao, ou seja, busca-se
determinar estatisticamente a raridade da sequncia, sendo estes clculos baseados em banco
de dados populacional de DNA mitocondrial (PARSONS et al., 2004).
Assim, para se determinar a significncia dos resultados em que no se pode excluir a
possibilidade das amostras apresentarem mesma origem ou mesma linhagem matrilnea
necessrio verificar a frequncia dos polimorfismos na populao, ou seja, busca-se
determinar estatisticamente a frequncia da sequncia, ou seja, a taxa de ocorrncia da
mesma, sendo estes clculos baseados em banco de dados populacional de DNA mitocondrial
(PARSONS et al., 2004).
Embora a regio controle apresente alta taxa de porlimorfismo, a gentica forense vem
buscando aperfeioar o poder de discriminao da anlise de DNA mitocondrial para a
identificao humana atravs da anlise de variaes (polimorfismos) na regio codificante do
DNA mitocondrial, sendo o foco a caracterizao de SNPs (single nucleotide polymorphisms),
que so definidos como a presena de diferentes bases nitrogenadas em uma mesma posio
na sequncia de DNA (LUTZ-BONENGEL et al., 2003; VALONE et al., 2004; SALAS et
al., 2007; NILSSON et al., 2008; KOHNEMANN; PFEIFFER, 2011; PANETO et al., 2011).
Vrios SNPs da regio codificante do DNA mitocondrial podem ser utilizados como
marcadores na rea forense, sendo que apresentam alto poder discriminante, principalmente
em casos em que a anlise de amostras revelam HVI e HVII idnticas (LUTZ-BONENGEL et
al., 2003; JUST et al., 2009; PANETO et al., 2011). Alm disso, por apresentarem
fragmentos de amplificaes pequenos, em geral menores que 200 pares de bases, os SNPs
so bastante teis para anlise de amostras degradadas (PANETO et al., 2011).
Uma excelente fonte de dados de SNPs so os prprios estudos filogenticos da
antropologia molecular, a qual estabelece haplogrupos, ou hapltipos, de acordo com
particularidades gentica na regio controle (D-Loop) e na regio codificante (TORRONI et
al., 1993). Assim, esses estudos filogenticos atuam como instrumentos reveladores de
possveis novos marcadores a serem aplicados no contexto forense (SALAS et al., 2007).
Salas e colaboradores (2007) definem as variaes de nucleotdeos de interesse
forense em dois grupos: (a) pontos de mutaes que permitem distinguir dois hapltipos que
possuem HVI e HVII idnticas; (b) pontos propensos a mutaes em qualquer hapltipo, por
exemplo alguns pontos da regio codificante: 709, 1438, 1598, 1719, 1888, 3010, 5147, 5460,

6
8251, 10398, 11914, 13105, 13368, 13708, 13928, 13966, 15217 e 15930 (KIVISILD et al.,
2006).
Os SNPs podem ser analisados em grande nmero em apenas um ensaio, atravs de
reaes

da

cadeia

da

polimerase

do

tipo

multiplex

seguida

de

SNaPshot

minissequenciamento-Applied Biosystems, que permite a identificao dos polimorfismos.

Paneto et al (2011) relatam a deteco de at 40 SNPs da regio codificante do DNA
mitocondrial em uma nica reao. E em estudo especfico de amostras forenses, Kohnemann
e Pfeiffer (2011) analisaram 32 SNPs da regio codificante do DNA mitocondrial em um
nico ensaio e obtiveram resultados satisfatrios onde as anlises de marcadores nucleares e a
anlise da regio HVI haviam falhado.
Alm dessa busca de otimizao do poder de discriminao da anlise de DNA
mitocondrial, modelos matemticos tm sido apresentados em busca de se inferir a origem
geogrfica e a etnia de um perfil de DNA mitocondrial, informao esta que auxiliaria nas
investigaes de crimes (ROHL et al., 2001; EGELAND et al., 2003; LEE; MANDOIU;
NELSON, 2010). Entretanto, o poder dessa inferncia depende do tamanho do banco de
dados populacional. A mxima resoluo seria obtida com a obteno de milhares de perfis de
DNA mitocondrial por uma pequena escala geogrfica (SALAS et al., 2007; IRWIN et al.,
2011).
Vrios bancos de dados de DNA mitocondrial esto disponveis virtualmente, como
mtDB - Human Mitochondrial Genome Database (http://www.mtdb.igp.uu.se/), MITOMAP
A human mitochondrial genome database (http://mitomap.org/MITOMAP), banco da dados
da SWGDAM (http://www.swgdam.org/) e EMPOP Mitochondrial DNA control region
database (http://empop.org/). Mas, segundo Salas e colaboradores (2007), os bancos de dados
de DNA mitocondrial existentes geralmente encontram-se em situaes subideais, no
havendo representabilidade e confiabilidade.
Uma das principiais dificuldades, em relao utilizao de banco de dados, que a
maioria dos laboratrios forenses no dispe de dados regionalizados. Geralmente, so
utilizados bancos de dados de populaes vizinhas ou de at outros pases (BUDOWLE et al.,
2003; SALAS et al., 2007).

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Outro fator que as plataformas de dados, em geral, no apresentam nmero amostral
elevado. Por no haver recombinao no DNA mitocondrial, logo, no se pode estimar a
frequncia de composio de gentipos mitocondriais, sendo, ento, necessrio banco de
dados mais robustos em relao quantidade de dados (BUDOWLE et al., 2003; SALAS et
al., 2007).
Entretanto, mesmo j havendo publicaes cientficas sobre clculos que buscam
estabelecer a raridade de um hapltipo de DNA mitocondrial, associados anlise de banco
de dados, no h consenso na rea forense de sua aplicao na emisso de laudos periciais
(BLUTER, 2010).

4.1.1 Metodologias de anlise de DNA mitocondrial

Na rotina forense, a metodologia utilizada para anlise de DNA mitocondrial a
extrao do DNA, amplificao via PCR (reao em cadeia da polimerase) seguida de
sequenciamento e eletroforese, sendo a tcnica de sequenciamento de Sanger a mais utilizada
(BLUTER, 2005). Warshauer et al, (2012) relata que o sequenciamento tradicional um
procedimento demorado, caro, pode apresentar artefatos e anomalias eletroforticas e
apresenta capacidade limitada de quantificar mistura de amostras. Assim, novas tcnicas de
sequenciamento e de anlise de DNA mitocondrial tm sido propostas em busca de superar
essas

dificuldades

limitaes

(HALL,

et

al.,

2005,

2009;

OBERACHER;

NIEDERSTATTER; PARSON, 2007; FERNNDEZ; ALONSO, 2012; WARSHAUER et

al., 2012) tais como: espectrometria de massas, principalmente associada ionizao por
eletrospray (ESI-MS), pirosequenciamento, cromatografia lquida de alto desempenho de
desnaturao (DHPLC), anlise de SNPs e resequenciamento baseado em micromatrizes
(microarray-based resequencing) (ANDRASSON, H. et al., 2002, 2006a; OBERACHER;
NIEDERSTATTER;

PARSON,

2007;

VALONE;

JAKUPCIAK;

COBLE,

2007;

KRISTINSSON; LEWIS; DANIELSON, 2009; THOMAS et al., 2005, 2009; WARSHAUER

et al., 2012).
Segundo Buetow et al (2001) a espectrometria de massas apresenta destaque, pois
permite total automao da anlise e sua associao ionizao por eletrospray e tempo de
voo (ESI-TOF-MS) e metodologia ouro para a anlise de SNPs.
Cada uma dessas novas tcnicas apresentam tambm desvantagens como: a pesquisa
de SNPs requer a caracterizao prvia desses polimorfismos; o pirosequenciamento, segundo

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Andrasson e colaboradores (2006), apresenta capacidade limitada para ensaios mltiplos
(multiplex) e os ensaios do tipo array-based so caros e requerem grandes quantidade de
DNA, o que incomum em amostras forenses (VALONE; JAKUPCIAK; COBLE, 2007;
HALL et al., 2009).

4.1.2 Limitaes de aplicabilidade

Apesar de sua empregabilidade na identificao humana, alguns aspectos atuam
limitando a utilizao do mtDNA na rea forense. A heteroplasmia a existncia de mais de
um tipo de DNA mitocondrial em um mesmo indivduo, ou seja, mais de um gentipo em
uma pessoa, fato que levanta questionamentos da admissibilidade e confiabilidade deste tipo
de evidncia durante a persecuo penal (GES, 2003; FORSTER et al., 2010; ROBERTS;
CALLOWAY, 2011). Contudo, a heteroplasmia pode tambm fortalecer a identificao e
deve ser considerada, pois pode representar um aumento do poder discriminatrio do teste
caso seja observada tanto na amostra referncia quanto na amostra questionada, atuando assim
como uma evidncia adicional (MELTON, 2004; PANETO, 2008).
Em busca de se evitar a presena de heteroplasmia, recomenda-se utilizar amostra
referncia da mesma natureza da amostra questionada, pois j pacfico na sociedade
cientfica que h variaes de taxas de heteroplasmia entre diferentes tecidos, dentro os quais
os cabelos e os msculos so os que apresentam os maiores ndices (BUDOWLE et al., 2003;
ROBERTS; CALLOWAY, 2011).
Outro ponto que levantado como uma possvel limitao de aplicabilidade do DNA
mitocondrial na identificao humana a possibilidade de contribuio paterna, ou seja, a
ocorrncia de recombinao. Ela j foi observada por Gyllensten e colaboradores (1991) em
ratos de laboratrio, entretanto na espcie humana as evidncias so raras (BLUTER, 2005,
2010). Segundo Budowle (2003), mesmo que haja a herana patrilnea, o impacto na rea
forense ser insignificante, pois a anlise forense busca apenas estimar a raridade do perfil do
mtDNA.

4.2 Identificao de espcies animais

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A identificao de espcies um aspecto de extrema importncia na anlise forense,
pois permite avaliar se a infrao penal envolve animais da fauna silvestre e se afeta espcies
raras ou em extino. A obteno dessas informaes valiosa, pois determina a tipificao
penal da infrao e auxilia na dosimetria da pena (CARVALHO, 2010; MARCO, 2011).
Essa investigao de identificao de espcies convencionalmente realizada atravs
de exames imunolgicos e morfolgicos, entretanto, nem sempre esses exames podem
fornecer subsdios eficazes para a elucidao de uma infrao penal (NAKAMURA et al.,
2009; CARVALHO, 2010;).
A identificao morfolgica, em certos momentos, no uma ferramenta eficaz, pois
s vezes, s se tem como vestgio ovos, pelos, fragmentos de tecidos, entre outros. Assim,
utiliza-se as tcnicas de anlise de DNA, nuclear ou mitocondrial (CARMO, 2008). A anlise
de DNA mitocondrial para identificao de espcies pode utilizar primers universais para
amplificao de uma mesma regio em diversos grupos de animais, no requerendo
conhecimento prvio da amostra a ser analisada (CARVALHO, 2010).
A metodologia para a identificao de espcies animais atravs do DNA mitocondrial
utiliza, em regra, como marcadores genticos diversos genes da regio codificante do DNA
mitocondrial, compreendendo o sequenciamento com conseguinte comparao com
sequncias referncias de bancos de dados (GenBank) (MAZZANTI et al., 2010).

Os

genes citocromo b (CYB), citocromo oxidase I, 12S e 16S so amplamente utilizados para
discriminar espcies animais, sendo o gene citocromo b o mais pesquisado (KITANO et al.,
2007; WELLS; WALL; STEVENS, 2007; CARMO, 2008; LEE et al., 2009; MAZZANTI et
al., 2010; GUO et al., 2011).
Nakamura e colaboradores (2009) desenvolveram sistemas de identificao de
espcies baseados na variao de comprimento da regio hipervarivel (D-Loop) do DNA
mitocondrial, neste estudo foram discriminadas espcies de mamferos, aves e peixes,
utilizando stios de primers especficos, altamente conservados entre vrias espcies de cada
grupo respectivamente, gerando produtos de PCR que variavam de 350 a 900 pares de base.
Essa metodologia torna a identificao mais rpida, pois nem sempre requer o
sequenciamento, sendo necessria apenas a anlise eletrofortica e pode ser utilizada em
misturas de DNA humano e animal.

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Outro sistema de identificao de espcies encontra-se em crescente progresso, tratase da tcnica de DNA barcoding, o qual foi proposto por Hebert e colaboradoes (2003). Essa
metodologia baseia a identificao de espcies eucariticas atravs de um pequeno trecho de
648 pares de bases do gene citocromo oxidase do DNA mitocondrial, estabelecendo um
cdigo de barras para cada espcie. O projeto Barcode of life desenvolvido atravs de
colaborao internacional, no qual as bibliotecas mais desenvolvidas so as de mamferos,
insetos e peixes. Recentemente, h mais de um milho de barcodes disponveis na base de
dados do projeto (ROE; SPERLING, 2007; UTSUGI; TOSHIHIDE; MOTOMI, 2011).
A anlise de DNA mitocondrial na identificao de espcies animais tem aplicao na
Entomologia forense, pois pode auxiliar na identificao de espcies necrfagas, como
espcies da ordem Diptera e consequentemente na determinao do Intervalo Ps-Morte
(IPM) (GUO et al., 2010, 2011; UTSUGI; TOSHIHIDE; MOTOMI, 2011). Espcies desta
ordem so as mais encontradas em carcaas em estado de decomposio e,
predominantemente, em suas formas imaturas, ou seja, estado larval ou puprio, estados estes
que nem sempre permitem a identificao morfolgica, sendo necessrio o cultivo em
laboratrio at a fase adulta e necessitando de um especialista em taxonomia e coleo de
insetos para realizar as comparaes (COSTA, 2011).

4.3 Tipos de amostras

4.3.1 Pelos
Pelos so vestgios comumente encontrados em locais de crimes (MELTON et al,
2005; PANETO et al., 2010). Estes podem ser utilizados para estudo de DNA nuclear, caso o
bulbo capilar esteja preservado, ou DNA mitocondrial nos demais casos (SILVA; PASSOS,
2006).
Diversos autores relatam a possibilidade de obteno de perfis pela anlise de mtDNA
com amostras de pelos (PFEIFFER et al, 1999; MELTON et al, 2005; PANETO et al., 2010;
ROBERTS; CALLOWAY, 2011). PFEIFFER e colaboradores (1999) revelam que a taxa
mdia de sucesso no sequenciamento de DNA mitocondrial maior ao se tratar de cabelos da
cabea, seguidos de pelos pubianos e axilares, sucessivamente. Dessa forma, ao se tratar de

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investigaes forenses que requerem coleta de pelos para anlise, deve-se dar preferncia para
pelos oriundos do couro cabeludo (ROBERTS; CALLOWAY, 2011).
Cabelos expostos ao ambiente durante meses ou anos raramente fornecem dados com
sucesso. Nestes casos, quando possvel, recomenda-se o uso preferencial de vestgios de
natureza ssea, mesmo havendo pelos disponveis (BLUTER, 2010; ROBERTS;
CALLOWAY, 2011).

4.3.2 Ossos e dentes

O DNA preservado nos dentes e nos ossos durante um perodo muito longo
e, portanto, uma fonte valiosa de informaes. Na rea forense, a anlise de amostras sseas
e dentrias est relacionada identificao de vtimas e de pessoas desaparecidas (BLUTER,
2010). Estas amostras so tambm, frequentemente, os nicos vestgios disponveis em
desastres em massa, sendo assim utilizadas na identificao de vtimas de desastre (DVI)
(MANJUNATH et al., 2011; ZIETKIEWICZ et al., 2012).
A capacidade de obter um perfil completo ou parcial de DNA mitocondrial em
amostras sseas geralmente correlacionada idade e ao estado das amostras (BLUTER,
2005). Entretanto, em estudo de Nelson e Melton (2007) de ossos bem conservados foram
obtidos pouco DNA mitocondrial ou de ossos em mal estado de conservao obteve-se DNA
mitocondrial abudante. A variedade ssea, ou seja, o tipo de osso influencia na qualidade e
quantidade de DNA mitocondrial a ser obtido, sendo que dos diferentes materiais do
esqueleto, os fmures e as costelas so os que apresentam melhores taxas de sucesso de
anlise de DNA mitocondrial por ter maior massa ssea, sendo assim os mais recomendados
para anlise quando passvel de escolha (EDSON et al., 2004; NELSON; MELTON, 2007;
MISNER, 2009).
Outros estudos revelam altas taxas de obteno de perfil de DNA mitocondrial com
amostras de osso e de dente (EDSON et al., 2004; EDSON et al., 2005; NELSON; MELTON,
2007). No se pode observar na literatura um consenso qual dessas classes de amostras,
sseas ou dentrias, a melhor. Isso se deve ao fator de qualidade das amostras disponveis
para anlise forense, pois, s vezes, s haver amostras de uma natureza, ssea ou dentria, ou
haver amostras das duas categorias, entretanto com condies de qualidade diferente,

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podendo assim, em alguns casos, uma categoria apresentar melhor desempenho e em outro ser
menos eficaz (ZIETKIEWICZ et al., 2012).

5 CONSIDERAES FINAIS
No se pode negar a potencialidade do DNA mitocondrial dentro da gentica forense
no contexto atual. Em situaes em que a quantidade de DNA extrado muito pequena,
como em tecidos sseos, dentes e cabelos e em amostras bastante degradadas ou antigas, a
anlise de DNA mitocondrial pode ser a nica alternativa. Para identificao humana a anlise
de DNA mitocondrial atua de forma assistencial, sendo que, a cada dia, seu poder de
discriminao tendo sido aprimorado com o avano dos estudos cientficos. E para a
identificao animal, esta anlise isoladamente obtm excelentes resultados e ainda aparece
como uma tcnica mais prtica e rpida do que a prpria anlise autossmica.
Embora haja discusses sobre limitaes de aplicabilidade do DNA mitocondrial, no
se pode deixar lado uma ferramenta to importante pelo simples fato de sua anlise e
interpretao ser mais complexa do que a de dados autossmicos. Apesar do que, embora a
anlise autossmica seja mais informativa melhor obter resultados com DNA mitocondrial
do que no ter resultado algum.

6 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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