Apostila Biomateriais PDF

APOSTILA
DE
BIOMATERIAIS
Marcelo Henrique Prado da Silva
I INTRODUO
A perda de um rgo ou de uma parte do corpo gera, alm da perda da funo,
transtornos sociais e psicolgicos. Os avanos alcanados na medicina e odontologia
modernas, aliados ao aumento da expectativa de vida, tm possibilitado o
desenvolvimento de tcnicas que geram uma melhor qualidade de vida.
disponibilizao dessas tcnicas tem oferecido novas opes aos pacientes mutilados,
como a substituio total ou parcial de ossos fraturados por implantes. Essa tendncia
tem sido observada principalmente na implantodontia, onde pacientes edntulos (com
perda de dentes) tm optado, cada vez mais, pela utilizao de implantes
odontolgicos, ao invs das antigas prteses removveis.
O desenvolvimento da implantologia tem dado incentivo pesquisa de biomateriais
para esse fim, bem como das reaes que ocorrem na interface tecido-implante.
Inicialmente utilizavam-se materiais inertes como os aos inoxidveis e a alumina.
Nos anos 70, Per-Ingvar Brnemark introduziu o conceito de osteointegrao como
sendo a ligao direta, estrutural e funcional entre osso ordenado e vivo e a superfcie
de um implante sujeito a cargas funcionais (BRANEMARK, 1985). Com a introduo
desse conceito, as pesquisas passaram a se concentrar em materiais e projetos,
visando acelerar a osteointegrao, ou seja, diminuir o tempo necessrio para a
aposio ssea.
Recentemente, a otimizao das propriedades de superfcie como grau de pureza,
acabamento superficial, rugosidade e molhabilidade tem sido explorado. Alteraes
na camada de xido de metais como o titnio tambm tm sido bastante investigadas
e, paralelamente, tcnicas de recobrimento com materiais bioativos tm sido
desenvolvidas.
Dentre os materiais bioativos, a hidroxiapatita, Ca10(PO4)6(OH)2 se
destaca pela sua semelhana com os fosfatos de clcio presentes na fase mineral do
osso.
Vrias tcnicas de avaliao da adequao de um novo material para aplicaes
biomdicas tm sido desenvolvidas numa tentativa de simular do desempenho do
material aps sua insero no corpo humano. Essas tcnicas compreendem testes in
vitro e testes in vivo.
Para testes in vitro, so utilizados normalmente testes de
bioatividade em lquido corporal simulado e estudos em cultura de clulas. Os estudos

em cultura de clulas normalmente compreendem testes de citotoxicidade, medies
bioqumicas de atividade celular, avaliao de proliferao, crescimento e morfologia

celular.
II REVISO BIBLIOGRFICA
II.1 BIOMATERIAIS
Os biomateriais so usados em dispositivos mdicos, sobretudo naqueles que so
temporria ou permanentemente implantados no corpo humano. O termo biomaterial
foi definido na Conferncia do Instituto Nacional de Desenvolvimento de Consenso em
Sade em 1982 como:
Qualquer substncia (outra que no droga) ou combinao de substncias,
sinttica ou natural em origem, que possa ser usada por um perodo de tempo,
completa ou parcialmente como parte de um sistema que trate, aumente ou substitua
qualquer tecido, rgo ou funo do corpo (HELMUS E TWEDEN, 1995).
O critrio de seleo de biomateriais baseado principalmente na aplicao a que se
destinam.
Por exemplo, para dispositivos que fiquem em contato com o sangue,
esses materiais so:
componentes de dispositivos extracorpreos que removem e retornam sangue do

corpo;
dispositivos que so inseridos em um vaso sanguneo;
dispositivos que ficam permanentemente implantados.
Para dispositivos de aplicaes em tecidos moles, os materiais se prope a aumentar

ou redefinir o tecido (ex.: implantes de seios e implantes faciais). Em aplicaes
ortopdicas e odontolgicas, os materiais so componentes de implantes estruturais
(ex.: prteses de juntas e implantes de raiz de dentes) ou so usados para reparar
defeitos sseos (ex.: parafusos e pinos inseridos em osso).
Quanto ao tipo de material, os biomateriais podem ser: polmeros sintticos, metais,
cermicas e macromolculas naturais (ex.: biopolmeros) que so manufaturados ou
processados para se adequarem utilizao em dispositivos mdicos que entram em
contato ntimo com protenas, clulas, tecidos, rgos e sistemas orgnicos.
Os biomateriais devem ser isentos de produzir qualquer resposta biolgica adversa
local ou sistmica, ou seja: o material deve ser no-txico, no-carcinognico, noantignico e no-mutagnico. Em aplicaes sangneas, eles devem tambm ser
no-trombognicos.
As complicaes oriundas dos dispositivos implantados iro
variar de acordo com a sua aplicao. Por exemplo, infeces e biodegradao iro
afetar dispositivos que tm aplicaes de longa durao como prteses permanentes
e vlvulas cardacas.
O termo biocompatibilidade foi redefinido em 1987 por Williams como sendo a
habilidade de um material desempenhar com uma resposta tecidual apropriada em
uma aplicao especfica (WILLIAMS, 1992A).
A Tabela 1 lista os tipos de biomateriais usados em diferentes aplicaes: sintticos,
bioreabsorvveis, derivados de materiais biolgicos, bioderivados de macromolculas,
modificaes de superfcies por passivao, recobrimentos bioativos, adesivos de
tecidos,
metais
ligas
metlicas,
cermicas/inorgnicos/vidros,
carbonos
compsitos.
Tabela 1 Biomateriais e Suas Aplicaes (HELMUS e TWEDEN, 1995).
MATERIAL
Sintticos No degradveis
APLICAES
Acrlicos
Epoxies
Fluorcarbonetos
Suportes para dispositivos extra-corpreos

Suportes, compsitos de fibras
Enxertos vasculares, camadas em catter, remendos
periodontais, remendos abdominais
Camadas para catter, antiadesivos
Estruturas para vlvula cardaca, partes estruturais
Suturas
Catter, curativos para ferimentos
Enxertos vasculares, bales para angioplastia
Catters
Componentes estruturais, dispositivos ortopdicos
Componentes estruturais, catters
Cimento sseo, lentes intra-oculares
Suturas, bales para angioplastia, catters
Tubos, coraes artificiais, catters
Bales para angioplastia
Componentes de sutura, dispositivos ortopdicos
Catters, coraes artificiais, curativos
Tubos, bolsas sangneas
Juntas para dedos, catters, vlvulas cardacas, curativos
Clice acetibular, tecidos de alta resistncia
Hidrogeis
Poli acetatos
Poli amidas
Poli amida elastomrica
Poli carbonatos
Poli steres
Poli sters elastomricos
Poli eteracetonas
Poli imidas
Poli (metacrilato de metila)
Poli metil-penteno
Poli olefinas
Poli olefina elastomricas
Filmes de poli olefina de alta cristalinidade
Poli sulfonas
Poliuretanos
Poli cloreto de vinila
Silicones
Polietileno de ultra alto peso molecular
Bioreabsorvveis
Poli aminocidos
- 4 -Poli anidridos
Poli caprolactonas
Copolmeros de poli cido ltico/cido
gliclico
Poli hidroxil butiratos
Poli ortosteres
Colgeno
Hidroxiapatita de baixa densidade
Peptdeos de adeso celular e liberao controlada

Liberao controlada
Suturas, liberao controlada
Suturas, liberao controlada, placas sseas
Liberao controlada, placas sseas
Liberao controlada
Camadas, reconstruo de tecidos moles
Implantes sseos, cirurgia reconstrutiva
MATERIAL
Materiais biologicamente
derivados
APLICAES
Artrias e veias bovinas

Pericrdio bovino
Ligamentos bovinos
Tendes bovinos
Osso bovino liofilizada
Osso bovino descalcificado
Cordo humbilical humano
Vlvula cardaca porcina
Enxertos vasculares
Substitutos de pericrdio, vlvulas cardacas
Ligamentos
Tendes
Implantes sseos
Implantes sseos
Enxertos vasculares
Vlvulas cardacas
Macromolculas bioderivadas
Albumina liofilizada
Camadas de enxerto vascular, agente de contraste

ultrasnico
Membranas para hemodilise
Membranas para hemodilise
Experimental, camadas, liberao controlada
Camadas, curativos, rgos hbridos
Camadas
Camadas para coraes artificiais
Camadas, antiadesivo, anti-inflamatrio ocular e de junta
Lipossomos, camadas experimentais tromboresistentes
Suturas, camadas experimentais de protenas do tipo seda
Acetatos de celulose
Celulose de cupramnia
Quitosana
Colgeno
Elastina
Gelatina liofilizada
cido hialurnico
Fosfolipdios
Seda
Recobrimentos passivos
Albumina
Cadeias de alcanos
Fluorcarbonos
Hidrogels
Silicones livres de slica
leos de silicone
Tromboresistncia
Adsorve albumina para tromboresistncia
Arraste reduzido para catters
Arraste reduzido para catters
Tromboresistncia
Lubrificante para agulhas e catters
Recobrimentos Bioativos
Hidroxiapatita
Angicoagulantes (ex.: heparina e hirudina)
Antimicrobianas
Peptdeos aderentes a clulas
Protenas aderentes a clulas
Superfcies carregadas negativamente
Camadas polimerizadas por plasma
Trombolticos
Recobrimentos em implantes edsseos

Tromboresistncia
Resistncia infeco
Adeso celular melhorada
Tromboresistncia
Tromboresistncia
Tecidos adesivos
Cianoacrilatos
Cola de fibrina
Cola de molusco
Microcirurgia para anastomose de vasos

Camada de enxerto vascular, microcirurgia
Metais e Ligas Metlicas

Ligas cobalto-cromo, ligas nquel-cromo, Arames guias, vlvulas de corao mecnico, orifcios e
ligas nitinol, (ligas efeito memria de forma), braos, vlvula de corao biolgico implantes ortopdicos e
aos inoxidveis, tntalo, titnio e suas ligas odontolgicos, placas para fraturas, pregos e parafusos para
reparo sseo, coberturas para veia cava, suportes para
coraes artificiais, comandos para marca-passos e para
estimuladores eltricos implantveis
Cermicas, inorgnicos e vidros

Vidros bioativos
Vitro-cermicas bioativas
Alumina de alta densidade
Hidroxiapatita
Alumina monocristalina
Fosfatos triclcios
Zircnia
Ligao ssea, cirurgia reconstrutiva

Implantes odontolgicos e ortopdicos
Implantes ortopdicos e odontolgicos
Reparo sseo
Implantes ortopdicos e odontolgicos
Carbonos
Carbono piroltico
temperatura)
(isotrpico
de
baixa Vlvulas cardacas, camadas cardiovasculares
MATERIAL
APLICAES
Carbono
isotrpico
temperatura
de
ultra-baixa Camadas em polmeros sensveis temperatura
Compsitos
Compsitos de fibra de carbono baseados
em uma matriz de epoxi, poli eteracetonas,
poli imida, poli sulfona
Radiopacificadores (BaSO4; BaCl2;TiO2)
misturados em polmeros de poli olefinas,
poliuretanos, silicones
Radiopacificadores em polimetimetacrilato
Materiais potenciais para orifcios, discos e implantes

ortopdicos
Radiopaco em raios-X para identificao e localizao do
dispositivo
Cimento sseo radiopaco
A seleo do material a ser utilizado deve levar em considerao as propriedades

fsicas, qumicas e mecnicas do material. As principais propriedades que devem ser
levadas em conta so:
Resistncia: aplicaes que requerem alta resistncia incluem enxertos de veia

aorta, vlvulas cardacas, bales de angioplastia e implantes odontolgicos e
ortopdicos.
Alguns desses dispositivos requerem propriedades bastante
especficas;
Mdulo (elasticidade, torso ou flexo: o mdulo de torso e de flexo de

interesse para materiais como catteres, que podem sofrer torque e fazer
percursos tortuosos dentro dos vasos. Muitos elastmeros devem ter capacidade
de se alongar com baixa carga, logo, devem ter baixo mdulo de torso, flexo ou
elasticidade.
Fadiga: os dispositivos que devem suportar esforos cclicos sem permitir

propagao de trinca so em sua maioria feitos de poliuretano, polister e metais
em geral.
Esses dispositivos funcionam em sua maioria como implantes
ortopdicos, odontolgicos e cardiovasculares.
Rugosidade: em aplicaes onde desejado baixo atrito, como em implantes de

juntas ortopdicas, utilizam-se materiais com acabamentos espelhados. Quando
se deseja uma integrao tecido-implante, como em implantes endosseos,
desejada uma alta rugosidade.
Taxa de permeao: dispositivos como lentes de contato requerem uma alta taxa
de permeao de gases. Geralmente a permeao decresce com a cristalinidade
do material. Os hidrogels so permeveis a gua e so muito utilizados como
liberadores de drogas.
Absoro de gua: alguns materiais sofrem mudanas dramticas em sua

resistncia a trao, fadiga, fluncia, em seu mdulo de elasticidade, torso ou
flexo quando ligeiramente umedecidos. A degradao tambm afetada pela
absoro de gua: materiais hidroflicos tendem a se degradar do interior para a
superfcie enquanto materiais hidrofbicos tendem a ter primeiramente suas
superfcies degradadas.
Bioestabilidade: dispositivos como fios de sutura e liberadores de drogas devem ter

sua degradao controlada, enquanto implantes permanentes devem ser estveis.
Bioatividade: a bioatividade se refere propriedade inerente a alguns materiais de

participarem em reaes biolgicas especficas. Camadas bioativas podem ser
formadas a partir de molculas que previnem cogulo sangneo ou iniciam a
degradao enzimtica de um trombo.
Algumas superfcies negativamente
carregadas iniciam a degradao de componentes complementares com o

potencial para menores efeitos colaterais para tratamentos como dilise.
hidroxiapatita muito utilizada como recobrimento para implantes endosseos.

Essa camada constitui uma superfcie bioativa para o ancoramento de osso
neoformado.
Esterilizao: o mtodo de esterilizao utilizado pode alterar o estado energtico

da superfcie de um implante, alterando a resposta celular. Os polmeros podem
ter suas propriedades negativamente alteradas quando esterilizados por irradiao
com raios gama.
II.4.1 HISTRICO DA OSTEOINTEGRAO

O termo osteointegrao foi definido pelo Professor Per-Ingvar Brnemark como
sendo a ligao direta, estrutural e funcional entre osso ordenado e vivo e a superfcie
de um implante sujeito a cargas funcionais. A osteointegrao foi observada enquanto
o Prof. Brnemark estava realizando estudos clnicos in situ e in vivo de osso medular
em fbula de coelhos.
Esses estudos foram realizados com uma tcnica de
microscopia vital que consistia em uma leve insero de uma cmara de titnio
contendo um sistema tico na fbula do coelho. As cmaras ticas no podiam ser
retiradas do osso ao redor aps um perodo de tempo j que a retirada resultava em
osso aderido s cmaras (BRANEMARK, 1985).
Em estudos usando microscopia eletrnica de varredura, observou-se a existncia de

uma camada de lipoprotenas entre o implante e o tecido sseo.
O conceito de
osteointegrao foi ento redefinido com nfase no implante estar em funo, j que a
observao do contato direto osso-implante depende da escala de aumentos que
estiver sendo utilizada.
A definio aceita atualmente a de Zarb e Albrektsson
Osteointegrao o processo pelo qual a fixao rgida e assintomtica de um

material aloplstico no osso obtida e mantida durante a funo (HOBKIRK e
WATSON, 1996).
A aplicao mais bvia da osteointegrao em implantes endosseos. No caso de
pacientes edntulos, pode-se argumentar que uma prtese preencheria o papel do
implante. No entanto, a perda contnua de osso alveolar resultante de estmulo de
carregamento para remodelamento inadequado geralmente causa a instabilidade da
prtese, gerando problemas funcionais e psicolgicos ao paciente.
Inicialmente, tentou-se interpor uma camada amortecedora entre o implante e o tecido
sseo, simulando o ligamento periodontal. Aps 30 anos de trabalho experimental e
20 anos de resultados clnicos, Branemark e sua equipe desenvolveram um implante
rosqueado que inserido na mandbula ou maxila e conectado prtese atravs de
um abutment e um parafuso central, como mostrado na Figura 1.
Figura 1
Representao esquemtica da unidade de ancoragem de Branemark,
composta de: implante rosqueado (i); abutment (a); parafuso central (pc) e prtese
dentria (pd) (BRANEMARK, 1985).
A tcnica cirrgica foi empiricamente definida como sendo feita em duas etapas: na
primeira, o implante inserido e deixado at que o osso se regenere e remodele
durante um perodo que varia de trs a seis meses, sem carregamento; na segunda
etapa, a prtese inserida atravs da conexo do abutment e do parafuso central ao
implante. Durante a fase de regenerao, formado osso novo prximo ao implante,
que est imvel.
Quando o implante entra em funo, o osso neo-formado se
remodela segundo a magnitude, direo e frequncia do esforo aplicado. Aps cerca

de 18 meses, um estado estacionrio alcanado, o que significa que foi alcanado
um equilbrio entre as foras atuantes sobre o implante e as capacidades de
remodelamento do osso ancorado.
As etapas de regenerao e remodelamento
podem ser vistas na Figura 2 onde a rea hachurada no topo ilustra a reduo em
altura de osso ancorado, expressa em percentagem do nvel original de osso
mandibular embutido, que ocorre durante as fases de regenerao e remodelamento
(BRANEMARK, 1985).
Figura 2 Relao dinmica entre implante e osso mandibular (BRANEMARK,

1985).
O sucesso da osteointegrao depende de seis fatores (BRANEMARK, 1985):
i. Biocompatibilidade do implante;
Titnio comercialmente puro, o nibio e o tntalo so conhecidos por serem
bioreativos. As ligas Co-Cr-Mo e os aos inoxidveis tm demonstrado menor
aceitabilidade no leito sseo. De um modo geral, as ligas metlicas so menos
aceitas devido possibilidade de liberao de ons, que podem causar efeitos
colaterais locais ou sistmicos.
ii. Caractersticas do desenho;

Existe atualmente extensa documentao sobre implantes rosqueados, que
demonstraram funcionar durante dcadas sem problemas clnicos. Os outros
projetos de implantes como implantes cilndricos lisos, em formato de cunha ou
raiz dentria, cnicos e outros requerem mais informaes clnicas.
iii. Caractersticas de superfcie;
De um modo geral, as superfcies rugosas so preferidas. No entanto, existe um
nvel timo de rugosidade ainda no muito bem estabelecido.
Superfcies
completamente lisas no resultam em boa adeso celular e acabam sendo

ancoradas em tecido mole, seja qual for o material utilizado. Superfcies com
rugosidade em uma escala que permita a vascularizao so desejadas. Outros
parmetros de superfcie que esto sendo investigados so: estado energtico,
molhabilidade, pureza, dentre outros.
iv. Estado do leito hospedeiro;
necessria presena de leito receptor saudvel e com quantidade ssea
suficiente.
No entanto, pode ser que esses requisitos no sejam satisfeitos.
Nesse caso, alternativas so adotadas a fim de se criar as condies favorveis.

Uma das tcnicas mais utilizadas a regenerao tecidual guiada, que uma
tcnica de enxerto autgeno que reconstitui a perda ssea ocorrida.
v. Tcnica cirrgica;
A tcnica cirrgica deve impor o menor trauma e o menor sobreaquecimento
possveis.
Para tanto, utiliza-se baixa velocidade de rotao da broca e
refrigerao abundante. O sobreaquecimento pode causar denaturao de uma

das enzimas sseas, a fosfatase alcalina, alm da destruio das clulas que
participariam na reparao ssea.
O torque muito elevado no momento da
insero do implante tambm pode causar tenso no osso e uma resposta de

reabsoro ssea.
vi. Condies de aplicao das cargas.
De acordo com a tcnica estabelecida por Branemark, utiliza-se uma espera de 3
meses para a aplicao de cargas a implantes inseridos em mandbula e de 4 a 6
meses para aqueles inseridos em maxila.
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CLASSIFICAO DOS BIOMATERIAIS QUANTO RESPOSTA BIOLGICA

Existem vrias classificaes para os materiais quanto resposta biolgicas. Quando
se consideram os materiais de maneira genrica (no se restringindo aos
biomateriais), os materiais podem ser classificados em txicos e no txicos. Quando
se coniderando apenas os biomateriais, estes podem ser classificados em materiais
bioinertes, bioreativos e bioativos.
DESCOUTS et al. (1995) incluem ainda a categoria de materiais bioartificiais. Esses
materiais podem ser definidos como sendo uma combinao de materiais sintticos e
clulas vivas.
A Figura 3 divide os materiais em trs zonas: na zona vermelha ficam os materiais
txicos, na zona amarela, os bioinertes e na zona verde, os materiais que interagem
positivamente com o corpo humano.
Figura 3
Biocompatibilidade de implantes odontolgicos (HOBKIRK E WATSON,
1996).
Os materiais aos quais o tecido sseo tem demonstrado maior tolerncia esto na
zona verde e so exemplificados pelo titnio, nibio, tntalo e hidroxiapatita (HA).
Outros materiais como os aos inoxidveis, ligas Cr-Co-Mo, xidos de alumnio e
zircnio, ligas de titnio, dentre outros, so questionveis quanto a funo a longo
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prazo. Os materiais posicionados na zona vermelha so aqueles que apresentam

resposta adversa do tecido sseo.
A MATERIAIS BIOINERTES
So materiais menos suscetveis a causar uma reao biolgica adversa devido a sua
estabilidade qumica em comparao com outros materiais. Como exemplos, pode-se
citar: carbono, alumina e zircnia (DUCHEYNE E KOHN, 1992).
A alumina e a
zircnia so mais usadas em superfcies de juntas artificiais sujeitas frico por

causa da sua boa resistncia ao desgaste.
As cermicas so quimicamente muito estveis e, portanto, muito pouco provveis de
ter uma resposta biolgica adversa. As cermicas bioinertes mais empregadas como
biomateriais so: cermicas base de carbono, alumina e zircnia.
A1 CERMICAS BASE DE CARBONO
O carbono possui similaridades com o osso em relao rigidez e resistncia. O
grafite possui um arranjo hexagonal planar com alta energia de ligao entre tomos
no mesmo plano e baixa energia de ligao entre os planos. Essa baixa ligao entre
os planos confere um baixo mdulo, prximo quele do osso.
H trs tipos isotrpicos de carbono: piroltico, vtreo e depositado por vapor.
carbono piroltico obtido atravs da deposio de carbono, a partir de um leito

fluidizado, em um substrato. O leito fluidizado formado a partir da pirlise de gs
hidrocarbnico em temperaturas na faixa de 1000-2500C. Carbonos isotrpicos de
baixa temperatura so formados em temperaturas abaixo de 1500C.
O carbono
isotrpico de baixa temperatura possui boas resistncia frico e ao desgaste. Tem

sido feitas vrias tentativas de recobrimento de metais com carbonos isotrpicos de
baixa temperatura. O fator limitante a propenso fratura da camada e a decoeso
da mesma do substrato. O carbono depositado por vapor evaporado sobre um
substrato a partir de uma fonte de alta temperatura, obtendo-se camadas de at 1m
de espessura (DAUSKARDT, 1993).
A2 ALUMINA
As aluminas policristalinas de alta densidade e alta pureza so utilizadas em cabea
de fmur e componentes acetabulares.
Alm da estabilidade qumica e inrcia
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biolgica, uma importante caracterstica a resistncia frico e ao desgaste.

Geralmente a cabea do fmur confeccionada em alumina e a articulao em
polietileno ou alumina. A Figura 4 mostra uma prtese de fmur.
Figura 4 Prtese de fmur de titnio com cabea de alumina.

As propriedades fsicas e mecnicas da alumina densa so uma funo da pureza,
tamanho e distribuio dos gros, das porosidades e das incluses. A maior limitao
da alumina que ela possui baixa tenacidade, baixa resistncia trao e flexo.
H ainda uma limitao dimensional quanto ao raio timo. Raios de curvatura muito
grandes criam uma superfcie de contato muito grande, aumentando muito a presso
de contato. Raios muito pequenos no permitem o escape de partculas de alumina.
A3 ZIRCNIA
A zircnia surgiu como alternativa alumina por possuir maior tenacidade. A zircnia
tem estrutura monoclnica temperatura ambiente e sofre uma transformao
isotrpica para estrutura tetragonal. Adies de xido de trio (Y2O3) servem para
estabilizar a fase tetragonal temperatura ambiente. A propagao de trincas induz a
transfomao da fase tetragonal, que metaestvel, na fase monoclnica. Como os
gros monoclnicos so maiores, gerado um campo de tenso compressivo na ponta
da trinca. Esse efeito causa uma imobilizao da trinca. As melhores propriedades
mecnicas em relao alumina pemitem uma maior liberdade dimensional na
confeco dos implantes (HULBERT, 1993).
B MATERIAIS BIOREATIVOS
Materiais bioreativos: os metais utilizados em ortopedia e em implantodontia
dominam essa classe de materiais. No entanto, a maioria dos biomateriais metlicos
no bioreativa, ficando mais prxima classe dos materiais bioinertes.
biocompatibilidade dos metais e ligas baseada na formao de uma camada fina e
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aderente de xido estvel. Cada classe de metal deve ter sua composio qumica
bem controlada a fim de que no haja degradao qumica da camada de xido nem
das propriedades mecnicas do metal ou liga metlica. Os principais metais utilizados
como biomateriais so divididos em trs classes: ligas ferrosas (aos inoxidveis),
ligas base de cobalto e ligas base de titnio.
Os metais classificados como
bioreativos ficam no limite entre os materiais bioinertes e os bioativos. Esses metais

adquirem bioatividade aps um tratamento de ativao de superfcie do seu xido.
So eles o tinio, o nibio e o tntalo.
B1 AOS INOXIDVEIS
O ao inoxidvel mais utilizado o ao inox 316L, que um ao austentico
endurecvel por encruamento.
Esse tipo de ao inox tem baixo teor de carbono
(0,03% mx.), o que confere maior resistncia corroso em meios salinos e ricos em
cloreto. O nquel em sua composio responsvel pela estabilizao da austenita e
resistncia corroso. Sua inoxidabilidade dada pelo teor de cromo. Teores deste
elemento acima de 28% possibilitam a precipitao de Cr23C6 nos contornos de gro,
que seriam stios preferenciais para corroso intergranular.
O sobreaquecimento
durante o processo de soldagem de componentes tambm pode produzir corroso

intergranular.
As princiapais limitaes da utilizao de implantes de ao inox so corroso e troca
inica. Os aos inoxidveis sofrem corroso in vivo e liberam ons do tipo Ni2+, Cr3+ e
Cr6+, que podem causar efeitos locais (irritao, inflamao nas reas adjacentes
interface implante-tecido) e sistmicos (efeito txico sobre o organismo).
B2 LIGAS BASE DE COBALTO
As ligas de cobalto mais utilzadas como implantes ortopdicos so: a liga fundida CoCr-Mo (ASTM F75, 1982) e a liga forjada Co-Cr-W-Ni (ASTM F90, 1982). O alto limite
de resistncia e a alta resistncia em fadiga fazem dessas ligas uma boa alternativa
para utilizao em reconstruo de juntas.
B3 TITNIO E LIGAS BASE DE TITNIO
O titnio possui uma combinao de alta resistncia mecnica, alta resistncia
corroso eletroqumica e resposta biolgica favorvel, que fazem com que ele seja o
metal mais utilizado como biomaterial. Dentre as ligas de titnio, a liga Ti-6Al-4V
(ASTM F136, 1984) a mais utilizada em vrias aplicaes, incluindo aplicaes
biomdicas.
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O titnio um metal especial dentre os metais leves como alumnio e magnsio por
sua elevada razo resistncia/peso. O titnio tambm um metal bastante reativo e
em contato com ppm (parte por milho) de O2 ou gua, forma xido de titnio que
pode ser TiO, Ti2O3 ou TiO2, que o mais comum. O TiO2 pode apresentar diferentes
estruturas cristalogrficas, dentre elas, rutilo e anatsio, podendo tambm ser amorfo.
Uma contribuio para a biocompatibilidade do titnio a grande resistncia
corroso que conferida por seu xido, que forma uma pelcula contnua e aderente.
Uma outra contribuio a sua alta constante dieltrica quando comparada com a de
outros xidos. KASEMO E LAUSMAA (1985) atribuem a alta constante dieltrica do
TiO2 biocompatibilidade do titnio, j que as interaes entre os xidos e as
biomolculas so eltricas e o TiO2 cataltico para um nmero de reaes orgnicas
e inorgnicas.
O TiO2 promove foras de Van der Waals maiores do que as dos outros xidos, logo
apresentando propriedades catalticas em diversas reaes qumicas.
WILLMANN
(1999) classifica o titnio como bioinerte. Por outro lado, vrios autores (KOKUBO et
al., 1996; SOARES et al.,1997; KIM et al., 1996; YAN et al., 1996) tm demonstrado o
efeito das modificaes de superfcie sobre a bioatividade do titnio.
Nesses
substratos, a precipitao de fosfatos de clcio ocorre por adsoro de ons fosfato

hidratados, liberao de prtons dos ons fosfato e adsoro de clcio pelo fosfato. O
TiO2 no pode se recompor em meio anidro, causando a corroso do metal.
natureza, bem como a composio e espessura da camada do xido depende das

condies do meio circunvizinho. Geralmente, em meio aquoso, o xido presente o
TiO2.
No entanto, pode have uma mistura de xidos outros como Ti2O3 e TiO.
Observaes experimentais da interface tecido sseo-Ti mostra um contato ntimo

osso-implante.
O titnio comercialmente puro no to resistente fadiga quanto certos aos e ligas
de titnio. O titnio tem um mdulo de elasticidade intermedirio entre o do aos e o
do osso.
Sua resistncia ao impacto comparvel aos aos baixo carbono
temperados e revenidos (METALS HANDBOOK, 1990A). A seleo do parmetro de

propriedades mecnicas mais relevante depende da temperatura de trabalho.
A Tabela 2 mostra comparativamente as propriedades mecnicas do titnio
comercialment puro, da liga de titnio Ti-6Al-4V e do osso cortical. Observa-se que o
mdulo de elasticidade do titnio em torno de 5 vezes o do osso cortical.
15
Tabela 2 Propriedades mecnicas de titnio comercialmente puro, Ti-6Al-4V e osso

cortical (METALS HANDBOOK, 1990A; METALS HANDBOOK, 1990B).
MATERIAL
PROPRIEDADES MECNICAS
s (Mpa)
E (Gpa)
TITNIO GRAU 4
550
110
Ti6Al4V RECOZIDA
895
124
OSSO CORTICAL
70
20
A primeira aplicao industrial do titnio foi no incio dos anos 50, na indstria
aeroespacial. Para essa aplicao, a alta resistncia mecnica e baixa densidade
(55% da densidade do ao) foi um fator atraente. Embora a indstria aeronutica
ainda continue a utilizar titnio e suas ligas, a excelente resistncia corroso em
diversos meios incluindo os meios oxidantes ricos em cloretos tem levado aplicao
em outras reas como na medicina e odontologia, em prteses e implantes
endosseos osteointegrados.
A resistncia corroso caracterstica do titnio
baseada na formao superficial de um filme de xido aderente e estvel que protege

o interior do material do meio circunvizinho (METALS HANDBOOK, 1990A).
As aplicaes do titnio e suas ligas na rea biomdica incluem desde bombas e
dispositivos de coraes artificiais a aplicaes mais estruturais como parafusos e
pinos em implantes odontolgicos e prteses sseas para braos, pernas e juntas
(METALS HANDBOOK, 1990A).
Diversos autores (DE REZENDE et al., 1993;
MOHAMEDI et al., 1995; ROBERTS et al., 1986; ORON, 1995) tm demonstrado a

superioridade do titnio como biomaterial sobre outros metais.
Muitos esforos tm sido concentrados no aprimoramento da osteointegrao. Nesse
sentido, os implantes com superfcies porosas especialmente preparadas tm sido
utilizados para promover o crescimento sseo em direo aos pros do implante.
Dessa forma, obtm-se uma aposio ssea mais forte e mais duradoura. Aplicaes
recentes incluem a utilizao da liga Ti-15Mo-5Zr-3Al como fio para suturas e fixao
de implantes, bem como a explorao do efeito memria-de-forma em ligas Ni-Ti para
criar tenses compressivas a fim de forar a reconstituio de ossos fraturados ou
alargar vasos sanguneos (METALS HANDBOOK, 1990B).
Apesar do carter inerte, casos de dissoluo da camada de xido tm sido
reportados.
Estudos
recentes esto concentrados no desenvolvimento de
16
propriedades de superfcie anteriormente insero no corpo humano.
Como
consequncia, vrias tcnicas de recobrimento tm sido desenvolvidas. Tcnicas de

recobrimento com materiais bioativos como a hidroxiapatita, que um fosfato de clcio
tm sido exaustivamente estudadas. As propriedades fsicas do recobrimento como
tamanho, morfologia, fases presentes, cristalinidade e espessura da camada devem
ser avaliadas.
Alteraes introduzidas na camada durante o processo de
recobrimento podem afetar o desempenho do implante.

B4 NIBIO
O nibio, como o tntalo e o titnio, um metal bioreativo.
Estudos recentes,
(OGASAWARA et al. 1999A; OGASAWARA et al. 1999B) tm demonstrado o

potencial desse metal em aplicaes biomdicas. Esse potencial pode ser explorado
tanto para aplicaes como substituto ao vandio na liga Ti6Al4V quanto na utilizao
de nibio puro.
Estudos complementares ainda so necessrios para que se
caracterize esse metal in vitro e in vivo.

C MATERIAIS BIOATIVOS
O termo bioatividade definido como sendo a propriedade de formar tecido sobre a
superfcie de um biomaterial e estabelecer uma interface capaz de suportar cargas
funcionais (DUCHEYNE E KOHN, 1992). O conceito de bioatividade foi introduzido
com respeito aos biovidros atravs da seguinte hiptese: A biocompatibilidade de um
material para implante tima se o material proporciona a formao de tecidos
normais na sua superfcie e, adicionalmente, se ele estabelece uma interface contnua
capaz de suportar as cargas que normalmente ocorrem no local da implantao
(KOHN E DUCHEYNE, 1992). Trs classes de materiais cermicos parecem cumprir
esse papel: vidros bioativos e vitro-cermicas, cermicas de fosfato de clcio e
compsitos desses vidros e cermicas com fases inertes.
C1 VIDROS BIOATIVOS (BIOGLASS) E VITRO-CERMICAS

Os vidros bioativos foram desenvolvidos pelo Prof. Larry L. Hench, que sintetizou
vrios vidros contendo misturas de slica, fosfato, xido de clcio e soda.
Esses
materiais foram desenvolvidos para utilizao como implantes e como recobrimento.

Quando imersa em um meio aquoso, a superfcie dos biovidros libera ons Na+, K+ e
Ca2+. Essas espcies so repostas com ons H3O+ da soluo atravs de uma reao
de troca inica que produz uma camada superficial de slica-gel. Uma camada de
17
apatita amorfa se forma no topo da camada de slica gel. Essa hidroxiapatita amorfa
evolui para hidroxiapatita cristalina (KOKUBO, 1993).
C2 FOSFATOS DE CLCIO
Os fosfatos de clcio so materiais cermicos com razes Ca/P variadas. Dentre elas,
as cermicas de apatita so as mais estudadas. Apatita o nome de uma vasta srie
de minerais isomorfos.
O nome apatites, do grego, enganadora, justifica as
dificuldades envolvidas na sua identificao devido sua falta de estequiometria. As

apatitas so formadas sob condies variadas, mas comumente ocorrem como
minerais agregados a rochas gneas. Elas tambm ocorrem em rochas sedimentares
marinhas formadas por deposio qumica, em fsseis e em rochas metamrficas.
Variam amplamente em tonalidade, desde o transparente, passando pelo amarelo,
verde, marrom, vermelho e azul. Algumas apatitas exibem um fluorescncia amarela
sob luz ultravioleta.
Os cristais so hexagonais, prismticos e podem se tornar
alongados sempre terminando em faces dipiramidais.

As apatitas so definidas pela frmula qumica M10(Y)6Z2 e formam uma gama variada
de solues slidas como resultado da substituio de stios M2+, XO43- ou Z-. As
espcies M2+ so tipicamente ctions metlicos divalentes como Ca2+, Sr2+, Ba2+, Pb2+
ou Cd2+. As espcies Y3- so tipicamente um dos seguintes nions trivalentes: PO43-,
AsO43-, VO43-, CrO43- ou MnO43-. Os nions monovalentes Z- so geralmente F-, OH-,
Br- ou Cl-(KOHN E DUCHEYNE, 1992). O nion divalente CO32- no lugar de Z2 d
origem s carbonatoapatitas.
Os fosfatos de clcio de relevncia biolgica so: fosfato de clcio amorfo, brushita,
monetita, fosfato de clcio octaclcio, fosfato de clcio triclcio, pirofosfato de clcio e
apatita. Dentre as fases minerais presentes em calcificaes normais, ou seja, no
patolgicas, as apatitas so as mais comumente encontradas. Estudos de difrao de
Raios-X e anlise qumica em 1926 identificaram a fase mineral da dentina, esmalte e
osso como sendo fosfato de clcio com uma estrutura de apatita, idealizada como
(Ca)10(PO4)6(OH)2, ou seja: hidroxiapatita.
No entanto, tem sido discutida a no
estequiometria bem como a presena de elementos substitutivos na fase mineral do

esmalte, dentina e osso.
Os membros do grupo das apatitas so diferenciados com base nos seus nions
predominantes, isto : fluorapatita (F), hidroxiapatita (OH) ou cloroapatita (Cl), dentre
outros. A hidroxiapatita pura um sal duplo de fosfato triclcio e hidrxido de clcio e
18
tem estequiometria Ca2Ca3(PO4)3OH ou (Ca)10(PO4)6(OH)2. Cada membro pode fazer

uma srie de substituies isomrficas catinicas ou aninicas, levando formao
dos correspondentes isomorfos ou solues slidas. Estas substituies podem ser
isoinicas ou heteroinicas (LEGEROS e LEGEROS, 1993). A Tabela 3 mostra a
frmula molecular e os parmetros de rede dos principais membros da famlia das
apatitas.
Hidroxiapatita (HA), especificamente hidroxiapatita de clcio, um composto de

composio, estequiometria - (Ca)10(PO4)6(OH)2 - e cristalografia definidas.
hidroxiapatita de clcio pertence ao sistema hexagonal, com grupo espacial P63/m,

que caracterizado por uma simetria perpendicular a trs eixos a equivalentes (a1,
a2, a3), formando ngulos de 120 entre si.
A sua clula unitria contm uma
representao completa do cristal de apatita, consistindo em grupos de Ca, PO4 e OH

empacotados juntos em um arranjo como visto na Figura 5.
Os arranjos atmicos da fluorapatita, Ca10(PO4)6F2 e da cloroapatita, Ca10(PO4)6Cl2,
onde o fluoreto (F) e o cloreto (Cl), respectivamente, substituem o grupo (OH) na
estrutura da apatita so similares.
As substituies na estrutura das apatitas nos
grupos (Ca), (PO4) ou (OH) resultam em alteraes nos parmetros de rede e em

algumas propriedades como solubilidade e morfologia, sem mudana significativa na
simetria hexagonal.
A maior estabilidade da fluorapatita relacionada a uma
dificuldade de difuso mssica atravs do canal formado pelos ons Z-.
Esta
estabilidade refletida na observao da menor solubilidade destas apatitas em

relao s apatitas sintticas sem flor e tambm em relao s apatitas biolgicas.
No caso das cloroapatitas, ocorre perda da simetria hexagonal, exibindo simetria
monoclnica (LEGEROS e LEGEROS, 1993).
TABELA 3 Principais membros da famlia das apatitas (NARASARAJU e PHEBE,

1996).
No.
Nome
Frmula Molecular
1
2
Hidroxiapatita de Brio
Cloroapatita
CdmioArsnico
Hidroxiapatita de Cdmio
Cloroapatita de Cdmio
Hidroxiapatita de Clcio
Carbonato Apatitaa
Ba10(PO4)6(OH)2
Cd10(AsO4)6Cl2
Parmetros de rede
(nm)
a
c
1,019
0,770
1,007
0,726
Cd10(PO4)6(OH)2
Cd10(PO4)6Cl2
Ca10(PO4)6(OH)2
Ca10(PO4)6CO3
0,901
0,962
0,942
0,956
3
4
5
6
19
0,661
0,649
0,688
0,687
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
Cloroapatita
Fermorita
Fluorapatita
Hidroxivanadinita
Hidroxiapatita de Chumbo
Magnsio Apatita
Mimetitab
Piromorfitab
Hidroxiapatita de Estrncio
Vanadinita
Ca10(PO4)6Cl2
Ca10(AsO4)6F2
Ca10(PO4)6F2
Ba10(VO4)6(OH)2
Pb10(PO4)6(OH)2
Mg10(PO4)6(OH)2
Pb10(AsO4)6Cl2
Pb10(PO4)6Cl2
Sr10(PO4)6(OH)2
Pb10(PO4)6Cl2
0,963
0,975
0,935
0,982
0,990
0,930
1,036
0,995
0,976
1,047
0,678
0,692
0,658
0,698
0,729
0,689
0,752
0,732
0,728
0,743
Existe ambiguidade a respeito da frmula molecular

Tambm reportados como membros da srie piromorfita
Figura 5 Arranjo atmico da hidroxiapatita (McGREGOR, 1998).
O carbonato, CO32-, pode fazer substituies tanto no grupo da hidroxila OHquanto no do fosfato PO43-, designadas como substituies do tipo A ou B,
respectivamente. Estes dois tipos de substituies tm efeitos opostos nos
parmetros de rede (eixos a e c): A substituio do tipo A causa uma
expanso no eixo a e uma contrao no eixo c, ao passo que a substituio
do tipo B causa uma contrao no eixo a e uma expanso no eixo c. As
substituies do tipo B associadas a substituies de Ca2+ por Na+ causam
mudanas morfolgicas nos cristais de apatita: de acicular para bastes e para
20
equiaxiais com aumento do teor de carbonato (LEGEROS E LEGEROS,

1996B). A existncia de cavidades na estrutura cristalina responde pela porosidade e
consequente atividade superficial das apatitas (BRANEMARK, 1985).
Vrias
substituies que tambm alteram as propriedades das apatitas ocorrem, alm

daquelas mencionadas at aqui. So elas: Ca2+ por Sr2+ e Ca2+ por Mg2+, que causam
uma maior solubilidade das apatitas; quando presentes simultaneamente, os
substituintes podem ter efeitos sinrgicos ou antagnicos nas suas propriedades. O
magnsio e o carbonato tm efeitos sinrgicos sobre a cristalinidade e sobre as
propriedades de dissoluo das apatitas sintticas; magnsio e fluoreto ou carbonato e
fluoreto tm efeitos antagnicos, o efeito do fluoreto sendo o mais dominante
(LEGEROS E LEGEROS, 1996B). A parte inorgnica do tecido sseo consiste em
uma fase amorfa e uma fase cristalina, a primeira sendo fosfato triclcio enquanto que
a ltima hidroxiapatita. A fase amorfa predomina em ossos novos e parcialmente
transformada em fase cristalina com a idade (BRANEMARK, 1985).
As apatitas biolgicas, que compem as fases minerais dos tecidos calcificados
(esmalte, dentina e ossos) e algumas calcificaes patolgicas (clculo dentrio
humano, pedras salivares e urinrias) so geralmente referidas a hidroxiapatitas de
clcio, HA. Porm, diferem da hidroxiapatita pura em estequiometria, composio,
cristalinidade e em outras propriedades fsicas e mecnicas. As apatitas biolgicas
so deficientes em clcio e apresentam substituio pelo carbonato. Estas apatitas
apresentam substituies do tipo B associadas a substituies do Ca2+ por Na+. Esta
dupla substituio necessria para que haja um balano de cargas. Em algumas
espcies de peixe e tubaro, as substituies so do tipo B associada a OH- por F(LEGEROS E LEGEROS, 1996B). A Tabela 4 mostra a ocorrncia dos fosfatos de
clcio em sistemas biolgicos.
As apatitas biolgicas do esmalte diferem em
cristalinidade e concentrao de elementos minoritrios (principalmente CO32- e Mg2+)

daquelas da dentina e das dos ossos. A apatita do esmalte dentrio a que possui as
menores solubilidade e concentrao de carbonato e magnsio, alm de apresentar o
maior tamanho de cristais (LEGEROS E LEGEROS, 1996B).
21
Tabela 4 Fosfatos de clcio em sistemas biolgicos (LEGEROS, 1991)
Fosfato de clcio
Apatita
Frmula qumica
(Ca,M)10(PO4,Y)6Z2
Octaclcio fosfato, OCP
Ca8H2(PO4)6.5H2O
Brushita, fosfato diclcio CaHPO4.2H2O
di-hidratado, DCPD
Whitlockita,
triclcio, -TCP
fosfato (Ca, Mg)9(PO4)6
Pirofosfato de clcio di- Ca2P2O7.2H2O

hidratado
Ocorrncia
Esmalte, dentina, osso,

clculo dental, rochas,
clculo
urinrio,
calcificaes em tecido
mole
Clculo dental e urinrio
Clculo
dental,
condrocalcinose,
crystalluria,
ossos
decompostos
Clculo
dental
e
urinrio,
pedras
salivrias, cries em
dentina,
cartilagem
artrtica,
calcificaes
em tecido mole
Pseudo depsitos de
em fluidos sinoviais
J que as apatitas biolgicas no so hidroxiapatitas puras, a estrutura exata destes

compostos permanece no identificada, sendo necessria a investigao de apatitas
sintticas para se aproximar das apatitas naturais, mais complexas.
A ligao da hidroxiapatita com o tecido sseo tem se mostrado satisfatria a longo
prazo. No entanto, suas propriedades mecnicas aliadas alta fadiga dos implantes
no permitem que seja usada como forma de ancoragem para implante submetidos a
carregamentos.
Desta forma, o recobrimento em materiais de alta resistncia
mecnica tem sido feito atravs de implantes com meios de transferncia de esforos
como poros, lacunas, ranhuras ou superfcies rugosas. Alguns autores tm observado
trincas na interface metal-cermica (KASEMO E LAUSMAA, 1985). A hidroxiapatita
pode ser utilizada como material slido para preenchimento sseo ou como
recobrimento para qualquer tipo de metal.
II.1.2 ESTABILIDADE DOS FOSFATOS DE CLCIO
A insero de um implante no corpo humano causa interaes entre a superfcie do
implante e os lquidos corporais.
Na interface, acontecem reaes em escala
molecular do tipo dissoluo de ons do material, desoro, adsoro e desnaturao

de protenas (KLEIN et al., 1993). No caso da superfcie em contato com os fluidos
22
corporais ser um fosfato de clcio, pode ocorrer reabsoro do mesmo ou

transformao em outro fosfato de clcio mais estvel. Os materiais biodegradveis
so utilizados para promover o crescimento de osso. Sua taxa de reabsoro deve
ser igual taxa de crescimento sseo.
Os mecanismos de biodegradao dos
fosfatos de clcio permanecem no estabelecidos completamente. A solubilidade dos

fosfatos de clcio geralmente medida em solues tampo. A dissoluo in vitro
depende, dentre outros fatores, do pH, do tipo, da concentrao e do grau de
saturao da soluo tampo, da composio e cristalinidade dos fosfatos de clcio.
A ordem de solubilidade de alguns dos fosfatos de clcio a seguinte: ACP>TTCP>TCP>-TCP>AP>HA (HELMUS E TWEDEN, 1995).
Essa diferena reflete a
influncia da composio e das e propriedades cristalogrficas dos fosfatos de clcio.
J que as aplicaes dos fosfatos de clcio envolvem contato com gua e outros
componentes presentes nos lquidos corporais, importante se conhecer a
estabilidade dos mesmos em soluo aquosa.
A. FASES EM EQUILBRIO EM ALTA TEMPERATURA
As condies onde a sinterizao ocorre, envolvem temperaturas entre 1000 e

1500C. A Figura 6 mostra as fases em equilbrio presso atmosfrica, na ausncia
de gua: fosfato tetraclcio (C4P), alfa-fosfato triclcio (-C3P), monetita (C2P) e
misturas de xido de clcio (CaO) e -fosfato triclcio.
Observa-se que a
hidroxiapatita no estvel nessas condies. Se a presso de vapor for aumentada

de 0 para 500mmHg, o diagrama de equilbrio ser o mostrado na Figura 7, onde
observam-se uma grande variedade de misturas contendo apatita (Ap) (DE GROOT
et al., 1990).
difcil prever quais fases estaro presentes temperatura ambiente, j que os
diagramas termodinmicos no levam em considerao a cintica.
23
Figura 6
Diagrama de fases do sistema CaO-P2O5 em altas temperatura com
ausncia de gua (DE GROOT et al., 1990).
Figura 7
Diagrama de fases do sistema CaO-P2O5 em altas temperaturas.
pH2O=500mmHg (DE GROOT et al., 1990).

A estabilidade dos fosfatos de clcio temperatura ambiente e em solues aquosas
determinada pelo pH, como ilustrado na Figura 8.
24
Observa-se que em pHs
inferiores a 4,8 a fase mais estvel (nas condies da Figura 8) fosfato diclcio,
monetita (CaHPO4), ao passo que em pHs superiores a 4,8 a fase mais estvel a
hidroxiapatita. Fatores como temperatura e potencial aplicado entre eletrodos podem
alterar esses valores de pH.
As fases termodinamicamente instveis que so
formadas em altas temperaturas mantm sua composio em temperatura ambiente

graas baixa cintica de reaes de estado slido em baixas temperaturas. Essas
fases reagem somente em sua superfcie, causando o aparecimento de uma fina
camada superficial sobre a fase instvel.
As fases instveis mais relevantes so
Ca3(PO4)2 (-fosfato triclcio) e Ca4P2O9 (fosfato tetraclcio). Essas reaes podem

ser descritas como (DE GROOT et al., 1990):
4Ca3(PO4)2(s) Ca10(PO4)6(OH)2(s) + 2Ca2+ + 2HPO423Ca4P2(O)9(s) + 3H2O Ca10(PO4)6(OH)2(s) + 2Ca2+ 4OH-
Figura 8 Solubilidade de vrias fases no sistema CaO-P2O5-H2O em funo do pH

(CERAMTEC, 1997).
Vrios ons presentes no meio fisiolgico podem ser incorporados rede da
hidroxiapatita, dando origem s carbonato apatitas, fluorapatitas, apatitas com
substituies parciais de sdio, apatitas com substituies parciais de potssio, dentre
25
outras. Essa incorporao pode dar origem a substituio parcial dos ons. Frmulas
genricas para essas substituies so como (DE GROOT et al., 1990):
Ca10(PO4)6(OH)2-xFx
0<x<2
Ca10(PO4)6(OH)2-2x(CO3)X
Ca10-x+y(PO4)6-x(CO3)X(OH)2-x+2y
0<x<2
0<y<(1/2)x
Como se pode observar, a substituio parcial pode se dar somente no grupo OH- ou
em ambos os grupos, OH- e PO43-.
As incorporaes de magnsio acontecem
tambm no fosfato triclcio, gerando fosfato triclcio contendo magnsio, sendo essa
fase mais estvel do que o fosfato triclcio puro.
Ca3-xMgx(PO4)2
0<x<2/3
BIOVIDROS
Os vidros bioativos foram desenvolvidos pelo Prof. Larry L. Hench, que sintetizou
vrios vidros contendo misturas de slica, fosfato, xido de clcio e soda.
Esses
materiais foram desenvolvidos para utilizao como implantes e como recobrimento.

Quando imersa em um meio aquoso, a superfcie dos biovidros libera ons Na+, K+ e
Ca2+. Essas espcies so repostas com ons H3O+ da soluo atravs de uma reao
de troca inica que produz uma camada superficial de slica-gel. Uma camada de
apatita amorfa se forma no topo da camada de slica gel. Essa hidroxiapatita amorfa
evolui para hidroxiapatita cristalina [1].
O material denominado por bioglass corresponde a um biovidro patenteado pelo Prof.
Larry Hench, do sistema CaO-P2O5-SiO2-Na2O. De acordo com o diagrama mostrado
na Figura 9, os vidros com composies relativas regio A so bioativos. Os vidros
da regio B so inertes e os da regio C so bioreabsorvveis.
Vrias outras composies de biovidros foram desenvolvidas posteriormente,
algumas patenteadas. Outras, divulgadas em artigos cientficos, caram em domnio
pblico.
26
BIOVIDROS PARA PREENCHIMENTO DE DEFEITOS SSEOS

Vidros bioativos e cermicas podem ser usados sob a forma de grnulos ou corpos
porosos em aplicaes onde seja necessrio o crescimento sseo ou como
recobrimentos bioativos em aplicaes como implantes onde uma boa adeso ossobiomaterial requerida. [2-7] Essa classe de materiais destinada a report tecido
sseo perdido ou guiar o crescimento desse tecido por atravs de uma rea emm um
defeito sseo. Quando um vidro do sistema CaO-P2O5 adicionado hidroxiapatita
(HA) e o material conjugado sinterizado, a fase vtrea reage com a HA. As fases
presentes aps a sinterizao dependero da temperatura de sinterizao, da
composio do biovidro e das fraes HA-biovidro. [7-8]
particularmente
interessante haver fases reabsorvveis como os fosfatos triclcios do tipo beta (-TCP)
e alfa (-TCP), uma vez que essas fases so mais solveis do que a HA. [7-8]
Os materiais porosos cermicos, vtreos e vitro-cermicos podem ser produzidos
atravs de vrias tcnicas como a tcnica da esponja polimrica, processo de agents
espumantes e tcnicas que utilizam aditivos orgnicos. [9-11] O principal requisito
quanto morfologia dos materiais porosos a existncia de porosidade aberta
(inteconectiva) com dimetros de poros superiores a 100 m para permitir
vascularizao adequada. [12] Essa interconectividade pode ser alcanada com a
adio de agents porognicos, como aditivos orgnicos ou matrizes porosas.
No
entanto, h um compromisso entre porosidade e resistncia mecnica. [9]

Um material compsito denominado hidroxiapatita reforada com vidro, glassreinforced hydroxyapatite, GR-HA, produzido pela adio de biovidros HA. As
fases presentes sero funo da composio do biovidro, da frao de biovidro
utilizada e da temperatura de sinterizao. A bibliografia de biovidros e hidroxiapatitas
reforadas com biovidros vasta e aponta a utilizao de materiais com vrias
composies [11-17].
PESQUISA DESENVOLVIDA EM PORTUGAL
O biovidro de frao molar 0.75P2O5-0.15CaO-0.10CaF2 foi produzido atravs da
fuso dos reagentes em cadinho de platina a 1450C durante 1 h. O vidro foi vertido
para gua fria e modo em um almofariz de gata. A moagem final ocorreu em um
moinho de bolas do tipo planetrio, em etanol, durante 12 horas. Aps moagem o p
foi seco a 100C durante uma noite e, posteriormente, desagregado em almofariz de
gata e crivado (peneirado) at tamanho inferior a 75m.
27
O biovidro assim produzido serviu de material de base para a produo de

hidroxiapatitas reforadas com biovidro. Os compsitos foram produzidos utilizandose hidroxiapatita (Ca10(PO4)6(OH)2) comercial (batch P201, Plasma Biotal; Tideswell,
U.K.) e produzindo-se mistura em etanol em moinho do tipo planetrio durante 12
horas para se homogeneizar a mistura.
O compsito denominado GRHA (glass reinforced hydroxyapatite) foi utilizado para a
produo de biocermicas porosas para preenchimento de defeitos sseos [16-17].
Figura 9 Diagrama para biovidros do sistema CaO-Na2O-SiO2 (L.L.HENCH).
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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M. H.Prado da Silva, Ph. D. Thesis, Universidade Federal do Rio de Janeiro,
Brazil (1999), 166.
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[10] O. Lyckfeldt, J.M.F. Ferreira, J. Eur. Ceram. Soc. 18 (1998) 131.
[11] J. Saggio-Woyansky, C.E. Scott, W.P. Minnear, Am. Cer. Soc. Bull. 71 (1992)
1674.
[12] K. De Groot; C.P.A.T. Klein; J.G.C. Wolke, J.M.A. De Blieck-Hogervorst, in:
Hand. Bioact. Cer. Vol. 2 CRC Press Boca Raton FL (1990) 3.
[13] J.C. Knowles, J.D. Santos, G.W. Hastings, Patent number WO0068164, 2000.
[14]
M. H. Prado da Silva, A. F. Lemos, J. M. F. Ferreira and J. D. Santos, Journal of
Non-Crystalline Solids, 304 (2002), 286.

[15]
HENCH, L.L.; ANDERSSON, ., 1993, Bioactive Glass Coatings. In: HENCH,
L.L., WILSON, J. (eds), An Introduction to Bioceramics, 1 ed., chapter 13, Gainesville,

USA, World Scientific.
[16]
M. H. Prado da Silva, A. F. Lemos, J. M. F. Ferreira and J. D. Santos, Key
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[17]
M. H. Prado da Silva, A. F. Lemos, J. M. F. Ferreira and J. D. Santos,
Proceedings of the European Society for Biomaterials Conference, (2001), T68.
II.2 TCNICAS DE RECOBRIMENTO

Os recobrimentos nos implantes osteointegrados so feitos com duas finalidades
principais: criar uma superfcie bioativa ou aumentar a rugosidade superficial. No caso
da nfase na rugosidade, so feitos recobrimentos com p de titnio por asperso
trmica. Quando o objetivo o aumento da bioatividade, feito o recobrimento com
cermicas bioativas e biovidros. Uma outra aplicao para os recobrimentos com
fosfatos de clcio o recobrimento como transportador de protenas sseas
morfogenticas (DASARATHY et al., 1996).
II.2.1 RECOBRIMENTO COM VIDROS BIOATIVOS
Os recobrimentos com vidros bioativos tm trs objetivos principais:
29
Proteger o substrato de corroso;

Proteger os tecidos de produtos de corroso;
Fornecer uma ligao interfacial boa com o tecido sseo.
Quatro mtodos so utilizados no processo de recobrimento com vidros bioativos
(HENCH e ANDERSON, 1993):
A. Esmaltagem: nesse processo, o vidro fundido, homogeneizado e resfriado
bruscamente e modo at se transformar em p. Esse p aplicado sobre o metal
atravs de pintura, asperso ou imerso. A camada aplicada aquecida a uma
temperatura acima do ponto de amolecimento do vidro (400-600C) onde o vidro
se funde a uma camada de xido do metal formando uma ligao mecnicoqumica na interface.
A superfcie externa do p sinterizada e forma uma
camada coerente de vidro fundida ao metal.
A fim de se obter essa camada
aderente, utilizada uma camada intermediria chamada camada de base,

composta por uma mistura de vidro com xido de Co ou Ni, que reage com o
metal, geralmente ao.
HENCH e colaboradores falharam na tentativa de
conseguir uma camada de biovidro sobre uma camada de base. Essa falha se
deveu difuso de ons pela camada do biovidro, destruindo sua bioatividade. A
soluo encontrada tem sido a aplicao de duas camadas de vidro no substrato.
A primeira prov ligao interfacial, enquanto a segunda, mantm sua bioatividade.
B. Vitrificao: utilizada principalmente no recobrimento de alumina com biovidros.
Um problema a ser superado a diferena de coeficiente de expanso trmica.
feito um ajuste da composio qumica do vidro, o que destri a bioatividade do
vidro. A soluo aplicar duas camadas: a primeira camada, bastante delgada,
misturada a um solvente orgnico. Aps a queima desse solvente a 650C, o vidro
fundido alumina a 1350C durante 15 minutos.
O resfriamento causa a
formao de ilhas de vidro fundido alumina com um gradiente de Al2O3

difundido para dentro do vidro. Uma segunda camada aplicada e aquecida a
1150C durante 30 minutos seguida de um resfriamento lento para aliviar as
tenses entre as duas camadas.
A segunda camada tem difuso de alumina
limitada devido temperatura de tratamento mais baixa.
Logo, essa camada
mantm sua bioatividade. A limitao desse processo reside na possibilidade de

ocorrncia de trincas, o que causa o desprendimento de lascas do recobrimento.
30
C. Asperso trmica chama: o aparato para esse processo consiste basicamente de

uma tocha da mistura oxignio-hidrognio ligada a um alimentador de p, que
passa por uma tocha na faixa de 3000C. O p rapidamente aquecido e fundido
se choca contra o substrato onde se vitrifica. O controle das variveis de faixa de
amolecimento do vidro, taxa de tmpera e viscosidade do vidro produzem uma
camada lisa e livre de bolhas.
D. Imerso rpida: o substrato aquecido para formar uma camada espessa de
xido. A seguir, o metal imerso em um recipiente com biovidro fundido. O xido
dissolvido no vidro formando uma ligao aderente entre o substrato e o biovidro.
Nesse processo, possvel o ajuste da contrao do substrato metlico
contrao do vidro. O problema do recobrimento com biovidros que a estrutura
do biovidro permite o transporte de ons. Essa peculiaridade permite que se forme
uma camada de carbonato apatita, criando stios de ligao para o colgeno. Essa
rede aberta tambm permite a liberao de ons de Fe, Mo, Cr, Co, Ni, Ti ou Ta.
Se esses ctions estiverem presentes, eles reagem rapidamente com a superfcie
e previnem a formao da camada de fosfato de clcio e sua recristalizao em
carbonato apatita, o que inibe ou elimina a bioatividade do vidro.
II.2.2 RECOBRIMENTOS COM FOSFATOS DE CLCIO
O termo recobrimento com hidroxiapatita deve ser utilizado somente quando se tem
certeza da composio exata do fosfato de clcio em questo. Mesmo considerandose uma nica tcnica, por exemplo, asperso trmica, camadas com propriedades
bastante distintas podem ser obtidas. Isso vai depender dos parmetros operacionais
do processo e essa heterogeneidade pode influenciar as propriedades de dissoluo
das camadas (PASCHALIS et al., 1995).
Outros autores reportaram tcnicas de
recobrimento que produzem camadas mais homogneas e menos espessas do que as

produzidas por asperso trmica (ZHOU et al., 1996; DEPTULA et al., 1996;
MIZUSHIMA et al., 1996; ANDERSON et al., 1997).
As propriedades mecnicas das biocermicas so limitadas em relao a solicitaes
em trao.
Para superar essa limitao, so feitos recobrimentos de metais com
biocermicas, ao invs de confeccionar-se o implante com a biocermica.
Esses
recobrimentos so feitos atravs de vrias tcnicas, dentre elas: banho do metal em

cermica fundida, asperso trmica, deposio por eletroforese, deposio por
presso isosttica a quente e deposio por bombardeio inico assistido (KLEIN et al.,
31
1993; DE GROOT, 1998, DE ANDRADE et al., 1998A, DE ANDRADE et al., 1998B;

DE ANDRADE et al., 1999).
A. DEPOSIO POR LASER PULSADO
A deposio por laser pulsado feita irradiando-se um um pedao de hidroxiapatita
colocado em uma cmara de vcuo com pulsos de uma fonte de laser. A cmara
evacuada a 10-6mbar e preenchida com vapor dgua at que se alcance a presso de
trabalho (0,45mbar).
O feixe de laser, (ArF, =193nm), operando a uma taxa de
repetio de 20Hz, focado sobre o pedao de hidroxiapatita, alcanando uma

densidade de energia de 0,8mJcm-2.
As placas de titnio so colocadas a uma
distncia de 5mm da hidroxiapatita e mantido a 455C durante a deposio por meio

de uma lmpada de halognio.
O substrato desengordurado com acetona e
passivado com cido ntrico em soluo aquosa em banho ultra-snico.
hidroxiapatita depositada sobre o implante de titnio seguindo os contornos do

implante (GARCA-SANZ et al., 1997).
B. BANHO DE METAL EM CERMICA FUNDIDA
O banho em cermica fundida envolve a fuso da cermica e a imerso do implante
nesse banho. Como desvantagem, tem-se as altas temperaturas envolvidas, o que
pode causar a degradao da cermica e alteraes no metal base.
Uma outra
desvantagem a dificuldade em se recobrir pequenos poros no metal.

C. DEPOSIO POR PROCESSOS ELETROQUMICOS
Exitem vrios processos eletroqumicos de deposio que oferecem uma alternativa
aos processos que envolvem altas temperaturas e equipamentos caros. Os principais
processos eletrolticos so:
C.1 DEPOSIO POR ELETROFORESE
A deposio por eletroforese envolve a aplicao de um campo eltrico a uma
suspenso de partculas de hidroxiapatita em lcool ou gua.
alterao do material de partida mnima.
Nesse mtodo, a
Uma aplicao desse mtodo em
implantes com superfcies irregulares ou porosas, onde outros processos no

alcanariam. No entanto, como as partculas so depositadas individualmente, sem
ligao umas com as outras, necessrio que se faa a sinterizao do implante
32
recoberto. A ligao com o implante fraca. Logo, esse mtodo mais aplicado a
implantes onde a presena do recobrimento necessria somente durante um curto
perodo de tempo, como implantes porosos.
Vrios autores (MODGIL e
DAMODARAN, 1993; ASAOKA, 1996; ASAOKA et al., 1996) reportaram a obteno

de depsitos uniformes sobre substrato de titnio. No entanto, a adeso aparece
como fator limitante desse processo. Em trabalho recente, (PRADO DA SILVA et al.
1998; GIBSON et al., 1999), foi desenvolvida uma tcnica eletroltica de recobrimento
com hidroxiapatita que promove camadas com maior aderncia ao substrato do que
aquelas obtidas pelo processo de eletroforese.
C.2 DEPOSIO ELETROLTICA
Os processos eletrolticos de deposio de fosfatos de clcio so relativamente
simples, rpidos e envolvem baixos custos. O substrato, geralmente titnio, utilizado
como catodo ao passo que utiliza-se como anodo geralmente platina.
Os dois
eletrodos so imersos em um eletrlito contendo ons Ca2+ e PO43- e ligados a uma

fonte que aplica uma diferena de potencial entre eles.
O processo pode ser
conduzido com ou sem agitao mecnica e a vrias temperaturas. A boa adeso do

depsito ao substrato aparece como uma das principais vantagens dos processos
eletrolticos (DASARATHY et al., 1996; PRADO DA SILVA et al., 1998; GIBSON et al.,
1999).
REDEPENNING et al. (1996) obteve um depsito de brushita sobre titnio puro que foi
posteriormente convertido em hidroxiapatita. Esse resultado serviu de base para o
desenvolvimento da tcnica de deposio de hidroxiapatita em substrato de titnio
pelo processo eletroltico utilizada nesse trabalho (PRADO DA SILVA et al., 1998;
GIBSON et al., 1999; DA SILVA et al., 1999A). A composio qumica, morfologia e
adeso dos fosfatos de clcios depositados pelos processos eletrolticos so
dependentes
de
vrios
fatores,
dentre
eles
valor
de
pH
da
soluo
(SHIRKHANZADEH, 1998; ASAOKA, 1996; ASAOKA et al., 1997).

D. DEPOSIO BIOMIMTICA
O processo de deposio biomimtica se baseia na precipitao heterognea sobre
substratos de titnio ativados.
alcalina,
geralmente
NaOH,
A superfcie do titnio tratada em uma soluo

e
posteriormente
tratada
termicamente.
Esse
procedimento ativa a superfcie do metal, acelerando a nucleao e crescimento de

fosfatos de clcio (SOARES et al., 1997; DE ANDRADE et al., 1998A). A nucleao e
33
crescimento do recobrimento de apatita se d aps imerso em uma soluo salina

balanceada (soluo de Hanks ou SBF), a 37C por vrios dias (DE GROOT, 1998).
Esse processo se assemelha ao processo de biomineralizao ssea (LAYROLLE et
al., 1998).
E. DEPOSIO POR PRESSO ISOSTTICA A QUENTE
Nesse mtodo, o p do material que vai recobrir o metal prensado a quente para se
densificar. Para garantir uma presso uniforme sobre a superfcie do metal, utilizado
um material para encapsular, geralmente um metal nobre.
Uma vantagem desse
mtodo a utilizao de temperaturas inferiores s temperaturas utilizadas na

sinterizao, j que as temperaturas nesse processo so inferiores a 900C. Esse fato
contribui para que as propriedades do substrato metlico e do p prensado no sejam
alteradas. WIE et al. (1995), comparando implantes recobertos por esse processo e
por asperso trmica, reportou a ausncia de decomposio da hidroxiapatita em
fases secundrias.
F. DEPOSIO POR BOMBARDEIO INICO

Os mtodos de deposio por bombardeio de feixe inico e bombardeio por
radiofrequncia consistem no bombardeio de um metal alvo por um feixe inico em
uma cmara de vcuo. Os alvos do material a recobrir so bombardeados formando
um filme fino sobre o metal. No caso do recobrimento com hidroxiapatita, os tomos
individuais de Ca, P, O e H so depositados formando um material amorfo.
requerido um tratamento trmico para fornecer energia suficiente para que haja
formao da hidroxiapatita cristalina. Essas camadas geralmente tm melhor adeso
e melhores propriedades mecnicas do que as camadas mais espessas. No entanto,
ainda so necessrios estudos indicativos da durabilidade de camadas com
espessuras inferiores a 1m no corpo humano (LACEFIELD, 1993). Vrios mtodos
alternativos tm sido testados no sentido de reproduzir as apatitas biolgicas. Em
estudo recente, Yamashita et al. (1996) reportaram o desenvolvimento de um mtodo
de deposio de apatita carbonatada do Tipo B, que bastante semelhante s
apatitas encontradas no esmalte dentrio e no osso cortical.
34
G. ASPERSO TRMICA
As tcnicas de asperso trmica consistem em aspergir p de um material sobre o
substrato metlico. Uma tocha utilizada para acelerar as partculas em direo ao
alvo. O processo pode ser feito com a utilizao de uma tocha de oxignio a alta
velocidade ou com uma tocha de plasma (gs ionizado).
No primeiro processo,
temperaturas mais baixas so utilizadas, o que evita a degradao da camada. Uma

outra vantagem que a maior velocidade permite que as partculas penetrem em
irregularidades do implante.
O processo de asperso trmica a plasma (plasma
spraying) o mais estabelecido e o mais utilizado comercialmente de todos os

mtodos citados. Nesse processo, uma tocha de gs ionizado empregada. A Figura
10 ilustra esquematicamente o processo de asperso trmica a plasma.
O gs
utilizado geralmente argnio que ionizado ao passar pela zona de descarga de alta
temperatura.
Um plasma mais quente pode ser produzido atravs de pequenas
adies de hidrognio ou outros gases. A zona de descarga gerada por um arco de

corrente que formado entre um anodo de cobre e um catodo de tungstnio. O bico
do canho de plasma mantido refrigerado a gua j que as temperaturas so da
ordem de 10000C. Como o perodo em que as partculas ficam na zona quente
muito curto, a fuso das partculas somente parcial (LACEFIELD, 1993).
Figura 10 Esquema de recobrimento por asperso trmica a plasma.
35
As principais variveis no recobrimento por plasma so:

distncia do substrato tocha de plasma;
corrente;
distncia entre anodo e catodo;
mistura gasosa empregada;
posio em que as partculas entram no plasma.
Apesar da alta temperatura do processo, o substrato fica a uma temperatura
relativamente baixa, da ordem de 300C, o que representa uma vantagem j que o
substrato metlico no sofre alteraes mecnicas. O recobrimento com hidroxiapatita
feito geralmente sob presso atmosfrica, ao passo que recobrimentos com ps
metlicos so feitos sob vcuo ou em atmosferas inertes.
No recobrimento com
hidroxiapatita, as partculas so 100% cristalinas, na faixa de 20-40m. Quando estas

colidem com o substrato, so deformadas em um formato caracterstico chamado
splats, que consistem em partculas espraiadas sobre a superfcie. A espessura final
do recobrimento costuma ser da faixa de 40-60m. Essa camada geralmente contm
pores considerveis de fosfatos de clcio amorfos e uma pequena poro de fases
cristalinas como hidroxiapatita. possvel aumentar-se a cristalinidade e a resistncia
da ligao da camada ao substrato atravs de tratamentos trmicos. No entanto, esse
tratamento nem sempre vivel por vrias razes: efeitos adversos no substrato,
custos adicionais ao processo e possibilidade de contaminao da hidroxiapatita
(LACEFIELD, 1993).
O recobrimento resultante no sofre delaminao porque a
mesma composta de uma infinidade de microtrincas.
Microscopicamente, o
recobrimento por asperso trmica consiste em vrias reas aderidas ao substrato.

Logo, quando o mesmo se deforma, no ocorre delaminao da camada como um
todo (WILLMANN e WIMMER, 1993).
No processo de plasma, no h restries quanto natureza do metal a ser recoberto;
o nico requisito que a superfcie metlica seja rugosa. Para materiais polimricos,
no entanto, h restries quanto temperatura do processo, j que altas temperaturas
podem acarretar degradao das propriedades do polmero e estas podem
comprometer a biocompatibilidade (WILLMANN, 1997).
Os recobrimentos com hidroxiapatita so, de maneira geral, regidos pela norma ASTM
F 1185-88, que estabelece a faixa de 50-250m para a espessura da camada
36
depositada. No entanto, ainda h muita discusso sobre normalizao (LEMONS e

GREENSPAN, 1993).
WILLMANN e WIMMER (1993) estabeleceram que quanto
maior a espessura, menor ser a resistncia da camada. Esses autores encontraram

valores superiores a 35MPa para camadas de espessura de 200m e superiores a
90Mpa para espessuras de 50m, confirmando a tendncia do aumento da resistncia
mecnica das camadas com a diminuio da espessura das mesmas. Se o processo
de asperso trmica for bem controlado, a camada de hidroxiapatita deve exibir as
seguintes propriedades:
A percentagem de fases minerais deve ser superior a 98%;
A camada dever exibir uma porosidade aberta;
A resistncia ao cisalhamento dever ser superior a 35MPa para espessura de
200m.
A Tabela 5 lista algumas propriedades importantes dos recobrimentos de
hidroxiapatita produzidos por asperso trmica.
Tabela 5 Propriedades tpicas da hidroxiapatita cermica (WILLMANN e WIMMER,
1993).
Propriedades
Valores Padro Observaes
Densidade terica
3,16g/cm3
Valor ideal, raramente obtido na prtica
Resistncia compresso
100-200MPa
Considerando-se a densidade terica de
Resistncia flexo
100MPa mx.
3,16g/cm3
Tenacidade fratura
1MPa m1/2
Frgil como vidro de janela
Mdulo de Young
100GPa mx.
Sob alta densidade
Dureza
500 HV
(valor padro)
-6
-1
Expanso trmica
11x10 K
Ponto de fuso
1650C
Decomposio!
Resistncia corroso
Aumenta em pHs altos
37
II.3 IMPLANTES ODONTOLGICOS

As razes pelas quais so empregados procedimentos cirrgicos reconstrutivos
que envolvem implantes variam consideravelmente mas podem ser identificadas como
(WILLIAMS, 1992B):
substituio de um dente perdido por crie, doena periodontal ou trauma;
substituio de osso perdido por um processo de reabsoro relacionado a
distrbios nos campos de tenso ou periodontite induzida por bactria;
perda tecidual devido a tumores;
Trs tipos principais de implantes tm sido usados: totalmente sepultos, subperisticos
e endosseos (DE GROOT, et al. 1990).
Implantes totalmente sepultos: a no existncia de evidncias cientficas que

justificassem essa tcnica fez com que cassem em desuso;
Implantes justa-sseo ou subperisticos: Consistem em uma estrutura fundida

moldada ao osso maxilar, com projees na cavidade oral, onde fixada a
prtese.
So utilizados principalmente em mandbula atrfica.
Essa tcnica
permite bons resultados a curto prazo. A interface osso-implante do tipo fibrosa,

o que faz com que em perodos acima de 15 anos, a ocorrncia de fracasso seja
grande;
Implantes endsseos: os implantes osteointegrados so inseridos no osso maxilar

ou mandibular.
Esses implantes podem ser recobertos ou no com materiais
bioativos e a cirurgia de implantao pode ser feita em uma ou duas etapas.

Esses implantes foram desenvolvidos por P. I. BRANEMARK e colaboradores e
levou ao desenvolvimento de diferentes geometrias (DE GROOT, et al. 1990). A
maior quantidade de informaes clnicas slidas est relacionada ao sistema
sueco Branemark de implantes osteointegrados.
II.3.1 CLASSIFICAO DOS IMPLANTES ENDOSSEOS:
A. QUANTO GEOMETRIA E AO ACABAMENTO DA SUPERFCIE
Os implantes endosseos do tipo osteointegrados oferecem um alto ndice de
sucesso, de forma que existe no mercado um grande nmero, que continua
38
crescendo, de sistemas de implantes. Esses implantes podem ter a forma de cilindros,

lminas, parafusos, cones, ou at mesmo imitar a geometria da raiz de um dente.
Os primeiros implantes utilizados tinham o formato de lminas com furos ou
reentrncias
para
promover
aposio
mecnica
do
tecido
sseo
eram
genericamente conhecidos como blade vent. Esses implantes eram inseridos em

cavidades cuidadosamente preparadas no osso do paciente. Aps o fracasso dos
implantes blade-vent, surgiram os implantes transsseos (atravessavam a mandbula),
que se assemelhavam a um grampo mandibular. Esse tipo de implante era restrito
mandbula e requeria espessura ssea adequada. Uma grande desvantagem era o
alto risco de infeco.
O implante de desenho cilndrico ou cnico atualmente sinnimo de implante
odontolgico.
O implante cilndrico pode ser rosqueado ou no.
Quanto ao
acabamento superficial, os implantes podem ser de titnio puro ou recobertos, sendo

que os implantes de titnio puro podem ser lisos ou rugosos. Os recobrimentos so
geralmente feitos com material bioativo, principalmente hidroxiapatita. No entanto, so
encontrados tambm implantes recobertos com p de titnio por asperso trmica a
plasma, visando o aumento da rugosidade superficial. Os implantes de titnio puro
rugosos recebem vrios tipos de tratamentos de superfcie para criar essa rugosidade,
como jateamento com partculas duras de xidos e ataques qumicos com cido. Os
xidos mais utilizados no jateamento so Al2O3, SiO2 e TiO2. A Figura 11 apresenta
algumas das vrias geometrias de implantes disponveis atualmente.
Figura 11 Principais geometrias e acabamentos superficiais de implantes disponveis

(SPIEKERMANN, 1995).
39
B. QUANTO FIXAO AO OSSO

Quanto fixao ao osso, os implantes odontolgicos do tipo osteointegrados
podem ser classificados em quatro categorias principais: implantes do tipo 1, que so
aqueles feitos de material inerte e que no fazem nenhuma ligao com o osso;
implantes do tipo 2 so os implantes porosos, onde o osso cresce por entre as
reentrncias, promovendo uma fixao mecnica.
Os implantes do tipo 3 so
bioativos e formam ligao com o osso atravs de reaes qumicas na interface. No

tipo 4 recaem os implantes reabsorvveis, que aps algum tempo de insero, so
substitudos pelo osso (HENCH e WILSON 1993).
Implantes do tipo 1: esses implantes so feitos de materiais inertes e no fazem
nenhuma ligao com o osso. A interface osso-implante consiste em tecido fibroso e
esse tipo de implanta no apresente estabilidade a longo prazo.
Implantes do tipo 2: essa categoria abrange implantes feitos de materiais bioinertes e
implantes feitos de materiais bioativos. Nessa categoria de implantes, se enquadram
os implantes de cermicas porosas e recobertos com hidroxiapatita sobre metais
porosos.
Neste caso, a ligao com o osso mais complexa e envolve fatores
mecnicos e de bioatividade. Esse tipo de ligao comumente chamado de fixao

biolgica. Uma limitao desse tipo de implantes quanto ao tamanho mnimo dos
pros. Estes devem possuir dimetro superior a 100m, que o tamanho de pro
mnimo necessrio para que os capilares supram o tecido que crescer dentro dos
pros.
Implantes do tipo 3: esses implantes fazem um tipo de fixao que intermediria
entre os implantes reabsorvveis e os bioinertes. Nesses implantes, formada uma
camada de carbonato apatita que equivalente em composio e estrutura fase
mineral do osso. Essa camada cresce como aglomerados policristalinos e fibras de
colgenos so incorporadas estrutura, ligando o implante inorgnico aos tecidos. A
interface gerada bastante semelhante quela que ocorre entre o osso e os tendes e
osso e ligamentos, tanto em termos de constituintes quanto em termos de distribuio
de tenses.
Implantes reabsorvveis do tipo 4: os implantes reabsorvveis so projetados para
se degradarem a uma taxa igual taxa de reparao do organismo. O resultado final
deve ser uma camada muito fina ou inexistente do material reabsorvvel. A limitao
40
desse tipo de implante a obteno de um bom desempenho mecnico durante o

perodo de regenerao, ou seja: bom desempenho mecnico a curto prazo.
Os
melhores materiais para implantes reabsorvveis so: fios de sutura compostos de poli
(cido ltico) ou poli (cido gliclico), que so metabolizados em dixido de carbono e
gua; fosfato triclcio, que decomposto em sais de clcio e fosfato e podem ser
usados para preenchimento sseo.
C. QUANTO CIRURGIA
Os implantes odontolgicos podem ser classificados, quanto aos estgios de cirurgia,
em implantes de 1 ou 2 estgios cirrgicos.
Implantes de 1 estgio: os implantes de 1 estgio so inseridos no leito receptor e de
l emerge para a cavidade oral. O tecido gengival que recebeu a inciso para se ter
acesso ao osso suturado cuidadosamente ao redor do implante.
O implante
permanece sem carregamento durante o perodo de regenerao ssea at que seja

inserida a prtese sobre a poro do implante que est exposta. Um exemplo de
implante de um estgio o implante Tbingen, que feito de alumina pura e tem a
geometria de cones que do ao implante um aspecto de degraus decrescentes. A sua
superfcie contm ranhuras longitudinais e pros circulares, para promover aposio
mecnica de osso.
Esse sistema de implantes utilizado principalmente em
substituies de dentes unitrios. A maioria dos implantes cilndricos feita de titnio

puro ou de liga de titnio, especialmente a liga Ti-6Al-4V. Um exemplo de implante
cilndrico de 1 estgio o sitema ITI, que de titnio puro de superfcie porosa
(WILLIAMS, 1992B).
Implantes de 2 estgios: os implantes desse tipo so inseridos no leito receptor,
porm ficam totalmente submersos na mucosa. Esses implantes permanecem assim,
protegidos de solicitaes mecnicas e de interaes com o meio exterior enquanto o
tecido sseo se regenera.
Esse perodo varia de 16 a 18 semanas para osso
mandibular e 20 a 24 semanas para maxila. Aps esse perodo, a mucosa reaberta

e a prtese fixada sobre o implante.
O exemplo mais notrio de sistema de implante de dois estgios e o sistema
Nobelpharma (Branemark). Esse implante um cilindro rosqueado confeccionado em
titnio comercialmente puro. Esse sistema de implante recomendado para pacientes
totalmente edntulos. Para cada arcada, so indicados em torno de seis implantes,
41
dependendo da anatomia de cada paciente. O acesso ao osso feito com uma broca,
sob baixa rotao e irrigao farta, para evitar sobreaquecimento e subsequente
necrose do tecido sseo. O furo ento rosqueado com o auxlio de um macho e os
implantes so inseridos.
O torque utilizado na insero dos implantes deve ser
minimizado e uma pequena cobertura colocada sobre as terminaes de cada

implante. A cavidade fechada e o implante permanece protegido durante o perodo
de regenerao. Aps o perodo de regenerao, as coberturas so removidas e so
colocados abutments, que so os componentes que fazem a ligao do implante com
a prtese. A mucosa suturada ao redor dos abutments e o tratamento prottico
comeado poucas semanas mais tarde.
A Figura 12 apresenta os componentes
bsicos do sistema Branemark
Figura 12 Componentes de um sistema Branemark: (a) implante, (b) pilar prolongador,

(c) parafuso do pilar, (d) cilindro de ouro, (e) parafuso de ouro (SPIEKERMANN,
1995).
O sistema Core-Vent, projetado tanto para substituies de dentes unitrios quanto
para pacientes totalmente edntulos, confeccionado com uma liga de titnio com
superfcie porosa. A Figura 13 apresenta alguns sistemas de implantes do tipo corevent.
42
Figura 13 Sistema de implantes Biolox e Oraltronics (SPIEKERMANN, 1995).

O sistema IMZ tambm emprega implantes cilndricos para substituies unitrias ou
mltiplas.
Porm, esse sistema possui algumas caractersticas peculiares: esses
implantes so multi-componentes e possuem um componente polimrico que

projetado para conferir ao conjunto um grau de resilincia.
O sistema Calcitek
Omnilock possui implantes cilndricos recobertos com hidroxiapatita. Esses implantes

apresentam perfuraes na extremidade para promover fixao mecnica. As Figuras
14 e 15 apresentam vrios sistemas de implantes que utilizam cilindros lisos e
rosqueados.
Figura 14
Implantes cilndricos: (a) IMZ, (b) Calcitek, (c) Frialit-1, (e) Frialit-2
Figura 15 Implantes cilndricos rosqueados: (a) antigo ITI de pea nica, recoberto por
plasma de titnio, (b) implante de Ledermann, jateado e posteriormente atacado com
cido,
(c)
Branemark,
(d)
implante
ITI,
43
recoberto
por
plasma
de
titnio
II.4 INTERAES OSSO-IMPLANTE

O primeiro tecido a entrar em contato com o implante o sangue, cujo volume
envolvendo o implante vai variar em funo da geometria do implante e do stio
cirrgico.
O cogulo sofrer uma srie de eventos biolgicos que terminaro na
formao de tecido sseo ao redor do implante. O implante entrar em contato com

percentagens variveis de osso cortical, osso trabecular e medula ssea. Algumas
reas estaro comprimindo o tecido sseo enquanto outras estaro em contato com
sangue e uma variedade de clulas. Essa caracterstica aponta para o fato de haver
na verdade vrias interfaces com o implante(MASUDA et. al., 1997).
As clulas no vem um material nu in vivo ou in vitro. A todo momento, o material
est condicionado pelos componentes do fluido onde est inserido, seja soro, saliva,
ou meio de cultura de clulas. A superfcie do biomaterial estar coberta com uma
mistura de lipdios, acares, ons e protenas especficos para a composio qumica,
topografia e a densidade de carga do substrato.
As caractersticas da superfcie
determinaro quais molculas iro adsorver, ao passo que a natureza e orientao

dessas biomolculas tero consequncias diretas no recrutamento, ancoragem,
proliferao e diferenciao das clulas. A ancoragem das clulas requer a presena
de protenas de ligao especficas, enquanto a proliferao e diferenciao requerem
que fatores de crescimento e citocinas estejam presentes (BOYAN et al., 1996).
Para um entendimento das interaes dos diferentes biomateriais com os tecidos
hospedeiros, necessrio um estudo do fenmeno da osteointegrao, da fisiologia
do osso e das propriedades que regulam a ligao osso-implante.
II.4.1.1 EMBASAMENTO CELULAR DA OSTEOINTEGRAO

Foi destacado que uma das condies indispensveis ao sucesso da osteointegrao
a presena de tecido sseo vivel. portanto necessria a presena das clulas
que tomam parte nesse processo. So elas: osteoblastos, osteoclastos, ostecitos e
clulas indiferenciadas, precursoras dos osteoblastos.
Estas ltimas sero
estimuladas para a induzir formao de tecido sseo (osteognese).
44
Quando o osso traumatizado por ocasio da insero do implante, ocorre a

formao de um cogulo. Portanto, necessrio tambm a formao de uma certa
quantidade de tecido mole (capilares). O trauma operatrio ir sensibilizar clulas que
iro liberar determinados fatores de crescimento que estimularo novas clulas. O
equilbrio entre a formao de tecidos moles e de novo osso influenciado pelos
mediadores liberados por estas clulas. Esse equilbrio entre os elementos teciduais
envolvidos que dita o sucesso ou no da reparao. Influncias externas como
aplicao de carregamento antes do tempo, alteraes de pH ou da saturao de O2
podem perturbar a reparao ssea (MASUDA et al., 1998).
Ao mesmo tempo em que a injria estimula a resposta reparao, um trauma muito
severo pode levar a danos permanentes nos tecidos, impedindo a reparao.
Existem trs diferentes linhas que postulam que o estmulo adequado reparao
ssea baseia-se no contato: clula-clula, molculas solveis da matriz ou potenciais
eltricos gerados por tenses.
No primeiro caso, acredita-se que as clulas so
capazes de emitir um sinal qumico que ir influenciar as clulas adjacentes

indiferenciadas a se diferenciarem em pr-osteoblastos.
Portanto, segundo essa
teoria, haveria uma competio entre os fatores de reparao dos tecidos envolvidos.
No segundo caso, a substncia bsica enfatizada.
Dessa maneira, as clulas
indiferenciadas seriam estimuladas pelos componentes da matriz. A terceira teoria a

de que o sinal eltrico liberado pelo efeito piezoeltrico do osso v deflagrar a resposta
reparao (HOBKIRK e WATSON, 1996).
Para uma compreenso mais ampla do fenmeno da osteointegrao bem como dos
fatores que podem favorec-la, preciso um estudo dos materiais em questo, que
so: tecido sseo, lquidos corporais e o material da superfcie de implantes. Esse
estudo
abrange
reas
multidisciplinares
que
envolvem
biologia,
odontologia
engenharia de materiais, qumica, engenharia mecnica, entre outras. Os captulos

subsequentes abordaro mais detalhadamente a fisiologia do osso, os materiais
usados em implantes e suas propriedades de superfcie, a natureza da ligao ossoimplante e as tcnicas de avaliao in vivo e in vitro de implantes.
45
II.4.2 FISIOLOGIA DO OSSO

A. INTRODUO
O osso cortical uma forma densa e especializada de tecido conectivo onde clulas
chamadas ostecitos se encontram inseridas. As clulas vivas respondem por 15% do
peso do osso e so responsveis pelo processo incessante de remodelamento:
enquanto uma classe de clulas chamadas osteoclastos erode o osso velho, outra
chamada de osteoblastos deposita matriz ssea recm-formada. A matriz ssea
composta de fibras de colgeno, cristais de um fosfato de clcio complexo e uma
substncia de base ou cimento, que compreende um nmero de componentes
incluindo mucopolissacardeos. Esta matriz permeada por uma rede de cavidades e
canais onde ficam os ostecitos (ALBERTS et al., 1989).
Como o osso uma mistura de fibras tenazes (fibrilas de colgeno do tipo I) e
partculas slidas (cristais de fosfato de clcio), ele apresenta boa resistncia tanto a
cargas compressivas quanto a cargas trativas.
O osso pode assumir diferentes
morfologias e funes, de acordo com sua localizao no esqueleto humano.

O osso cortical, tambm chamado osso compacto, duro e forte e pode ser
encontrado na superfcie de ossos planos ou entre as duas extremidades de ossos
longos em mamferos, onde caracterstico do crtex sseo. Logo, o nome osso
cortical. No osso cortical, os canais vasculares so muito estreitos de forma que o
osso cortical macroscopicamente slido.
Por outro lado, no osso trabecular grosseiro, esses canais so muito mais largos,
variando de um milmetro a um centmetro ou mais de dimetro. No osso trabecular
fino, o componente vascular tambm dominante, mas a textura bem mais fina e
este somente pode ser observado com um microscpio.
Alm da funo de
sustentao, uma outra funo que os diferentes tipos de osso possuem a de

proteger o tecido vital.
Exemplos so: o crnio protegendo o crebro; a coluna
vertebral protegendo o sistema nervoso central e o osso trabecular protegendo a

medula ssea onde novas clulas sseas podem migrar a partir do tecido
hematopoitico para os vasos sanguneos de paredes finas e tomar parte na
circulao do corpo.
46
Os constituintes do osso esto em equilbrio dinmico, j que h clulas morrendo e

sendo repostas; adicionalmente, a fase mineral e o colgeno esto sempre sendo
reabsorvidos e depositados durante a vida adulta saudvel. Esse processo permite a
manuteno da forma e volume dos ossos e chamado de remodelamento. A fase
mineral do osso compreende 70% de seu peso e consiste basicamente de cristais de
apatita.
O osso representa o maior reservatrio de clcio do corpo humano.
Consequentemente, alm das funes de sustentao e proteo de tecido vital, ele

desempenha um terceiro papel, no metabolismo, realizando a troca de minerais com o
sangue.
A quarta funo do osso como um filtro para uma variedade de ons
gerados no sangue que podem substituir ons de clcio ou ser incorporados rede dos
cristais de apatita, ou ainda serem aderidos matriz orgnica (SOMCHAI, 1992). As
propriedades mecnicas do osso cortical esto apresentadas na Tabela 6.
Tabela 6 Propriedades Mecnicas do Osso Cortical (SOMCHAI, 1992).
PROPRIEDADES MECNICAS
LONGITUDINAL (L)
TRANSVERSAL (T)
Lim. Res. a compresso (MPa)
70-280
53
Lim. Res. a trao (MPa)
70-160
50-53
Mdulo de Young (GPa)
11-21
5-13
microdureza (VPN)
30-60
Tenacidade fratura (MPa.m)
2-5
B. MACROESTRUTURA DO OSSO
A macroestrutura do osso consiste em osso cortical, osso trabecular, medula ssea e
vasos sanguneos. O osso cortical composto de sistemas Haversianos ou osteons,
onde as lamelas esto arranjadas concentricamente em torno de canais contendo um
ou mais vasos sanguneos (Canais de Haversianos).
Essas estruturas tubulares
correm longitudinalmente e esto empacotadas juntas, tendo os interstcios

preenchidos com o restante dos osteons velhos.
Os limites dos osteons so
demarcados por linhas de cemento da mesma forma que o so algumas lamelas em

osso trabecular e algumas lamelas circunferenciais. As fibras de colgeno tambm
podem estar orientadas randomicamente formando uma estrutura entrelaada. Isso
ocorre em osso imaturo e em algumas comndies patolgicas.
Ossos recm-
formados tm um depsito de colgeno no mineralizado sobre as suas superfcies.

Este depsito uma camada bastante fina e est ausente quando ocorre reabsoro.
47
Na maioria dos mamferos, o osso cortical formado de fibras finas, mas nos
invertebrados inferiores, ele pode ser composto principalmente de fibras grosseiras.
A formao de osso compacto novo obtida por trs mecanismos ocorrendo
simultaneamente (BOURNE, 1972):
a) parcialmente pela consolidao de osso trabecular fino, onde cilindros de osso
novo chamados de osteons so formados nos tneis vasculares;
b) parcialmente como uma formao direta de osso slido no peristeo e medula de
qualquer osso plano existente;
c) parcialmente no processo de remodelamento de osso compacto existente, onde os
tneis so erodidos e preenchidos novamente com cilindros de osso chamados de
osteons secundrios.
Osso trabecular, tambm chamado de osso esponjoso ou medular, encontrado nas
extremidades e cavidades medulares de ossos longos, bem como nas vrtebras e no
centro de ossos planos. Embora tenha baixa resistncia mecnica, o osso trabecular
tem um arranjo que funciona muito bem como uma estrutura de amortecimento de
peso.
O osso trabecular pode ser dividido em duas variedades principais: osso
trabecular fino e osso trabecular grosseiro. O osso trabecular fino encontrado no

esqueleto de fetos ou em ossos novos patologicamente induzidos. O osso trabecular
grosseiro encontrado no esqueleto adulto de mamferos. Ele tem uma estrutura de
colmia com vasos sanguneos e gordura no interior das trabculas. A medula
permeada com vasos sanguneos, sendo uma fonte de nutrientes que viajam para as
lacunas localizadas no osso trabecular.
C. MICROESTRUTURA DO OSSO
Nos seres humanos e mamferos superiores, o arranjo dos constituintes do osso do
origem a duas microestruturas sseas principais: osso entrelaado ou de fibras
grosseiras e osso lamelar ou de fibras finas (HANCOX, 1972).
A microestrutura do osso composta de osso primrio ou entrelaado, osso
secundrio ou lamelar e clulas sseas.
O osso entrelaado apresenta espaos
grandes contendo gordura, vasos sanguneos e tecido conectivo. Esses espaos so

envolvidos por matriz ssea, onde os ostecitos esto randomicamente distribudos. A
48
estrutura que observada quando amostras histolgicas so preparadas conhecida

como trabcula e corresponde vista plana da matriz ssea circundante.
Embora o osso entrelaado seja um material efmero e seja reabsorvido e substitudo
por osso lamelar, ele tambm encontrado em locais de ligao de tendes e
ligamentos, em raiz de dentes e nas margens de sutura dos ossos do crnio. Nos
ossculos da orelha, algum osso entrelaado dito persistir por toda a vida. Osso
trabecular entrelaado formado em calos em torno de uma fratura e em alguns ossos
em desenvolvimento. Osso compacto entrelaado formado em reas de difise de
ossos em desenvolvimento. O osso lamelar tem lamelas Haversianas ou concntricas
com vasos sanguneos em canais vasculares localizados no seu centro. Esses canais
vasculares juntamente com suas lamelas associadas constituem os sistemas
Haversianos, onde os ostecitos so arranjados concentricamente com os canais.
Cada lamela contm fibras finas de colgeno aproximadamente paralelas umas s
outras. Entre essas fibras, h substncia de base amorfas e cristais de apatita.
Ambos os ossos entrelaado e lamelar podem conter canais vasculares esparsos,
dando origem a osso compacto ou denso ou podem conter canais largos, formando
osso trabecular ou esponjoso. A Figura 16 mostra a microestrutura do osso cortical.
Figura 16 Vista esquemtica do osso cortical (JUNQUEIRA et. al., 1995).

Clulas sseas: h trs tipos de cluas sseas distintas das clulas medulares que
pertencem ao sistema hematopoitico. Elas so (HANCOX, 1972; JUNQUEIRA et. al.,
1995):
49
Osteoblastos: so clulas completamente diferenciadas que tm a funo da formao

de osso (osteognese).
Elas so as responsveis pela sntese dos componentes
orgnicos matriz ssea (colgeno do tipo I, proteoglicanos e glicoprotenas), bem

como dos componentes inorgnicos. Estas clulas so vistas na superfcie de ossos
em formao, constituindo uma espcie de epitlio. Elas tm citoplasma basoflico e
ncleo ecntrico, distal em relao superfcie do osso. Os basfilos so devidos
presena de cido ribonucleico.
A atividade de sntese pode ser medida pela
morfologia destas clulas: quando empenhadas na produo de matriz, elas tm

citoplasma basoflico e um formato cuboidal a colunar, ao passo que quando a
atividade de sntese diminui, elas se tornam planas e os basfilos citoplasmticos
diminuem. Estes processos citoplasmticos se tornam mais evidentes quando essas
clulas envolvem-se a si mesmas em matriz sintetizada nova. Quando isto ocorre,
estas clulas so chamadas de ostecitos. A cavidade onde elas se encontram
chamada de lacuna e o espao ocupado pelas extenses citoplasmticas chamado
canalculo.
A matriz nova que depositada na superfcie de ossos mais velhos chamada
osteide, e fica entre a superfcie do osso mais velho e a camada de osteoblastos.
Esta nova matriz no calcificada ainda e a aposio de osso completada quando
os sais de clcio so depositados nesta nova matriz.
Ostecitos: so clulas maduras (anteriormente osteoblastos) que se tornaram
inclusas na matriz que eles formaram.
lacunas dentro do osso.
Eles residem em pequenos espaos ou
Essas lacunas esto conectadas umas s outras e aos
espaos vasculares por canalculos, pequenos canais dentro dos quais processos
citoplasmticos dos ostecitos se projetam. Atravs dos canalculos, passam fluidos e
substncias dissolvidas usadas e produzidas pelo metabolismo celular.
Osteoclastos: so clulas gigantes multinucleares cujos citoplasmas contm
numerosas mitocndrias. Estas clulas agem como destruidoras do osso e podem ser
vistas em pequenos grupos ou isoladamente em superfcies que esto sendo erodidas
ou reabsorvidas. Elas so geralmente encontradas em cavidades na superfcie do
osso (lacunas de Howship). sugerido que ou osteoclasto pode remover o que
depositado por 100 a 1000 osteoblastos. A Figura 17 mostra esquematicamente as
clulas sseas.
50
Figura 17 Diagrama das clulas sseas(JUNQUEIRA et al., 1995).
II.4.3 NATUREZA DA LIGAO OSSO-IMPLANTE

Na regio que fica em contato com a medula ssea, a resoluo do cogulo
sanguneo e a infiltrao de glbulos brancos ser seguida pela invaso do stio
cirrgico, atravs de uma rede tridimensional de fibrina e colgeno do tipo III (matriz
tridimensional),
de
clulas
endosseas
de
fentipo
osteognico
clulas
mesenquimais indiferenciadas com capacidade para se diferenciarem em clulas

osteognicas, o que ser concomitante com a nova vascularizao (DAVIES, 1996).
Essas clulas so pluripotenciais quanto a sua diferenciao em osteoblastos,
condroblastos, clulas musculares ou clulas de gordura.
O caminho seguido
depender de fatores sistmicos e locais (REDEPENNING, 1996).

As clulas interagem com o meio atravs de protenas de adeso especficas. As
clulas mesenquimais tendem a usar fibronectina para ancor-las ao colgeno de sua
matriz extracelular. A fibronectina sintetizada pelas clulas de origem mesenquimal
e est presente no soro do local do trauma cirrgico. A energia de superfcie do
material pode influenciar o tipo de protena que sero aderidas ao material mas o
potencial para a protena sofrer um rearranjo estrutural tambm uma varivel
importante. medida que a orientao da ligao dos ons, minerais, gua, protenas
e outras molculas alterada, h uma correspondente mudana na ancoragem de
clulas superfcie via adeso de molculas celulares, resultando em uma mudana
na morfologia e, finalmente, no comportamento das clulas (REDEPENNING, 1996).
51
A arquitetura cortical vascular ser destruda pelo trauma cirrgico independentemente

da geometria do implante. No crtex, ocorrer a princpio a necrose do tecido sseo.
Somente atravs de remodelamento sseo ocorrer posteriormente uma substituio
do osso peri-implante com a possibilidade de formao de novo tecido sseo na
superfcie do implante (DAVIES, 1996).
Existem duas possveis formas pelas quais as clulas sseas migram para a superfcie
do implante: no primeiro, elas vm diretamente da trabcula vizinha; no segundo, as
clulas migram atravs da matriz tridimensional.
O primeiro mtodo o menos
provvel, j que a trabcula vai estar danificada pelo trauma cirrgico e a superfcie
estar coberta com protenas adsorvidas. No segundo mtodo, ou seja, migrao
atravs da rede tridimensional, preciso que a superfcie do implante ancore a rede
tridimensional. A ancoragem necessria para suportar as contraes de tecido que
ocorrem quando do remodelamento.
Em implantes metlicos, a ancoragem
mecnica, ao passo que acredita-se que ocorra ligao qumica em implantes

recobertos com materiais bioativos, que so vidos na adsoro de protenas.
conceito de ligao qumica no est ainda estabelecido porque difcil isolar-se o

efeito da rugosidade do efeito da composio qumica das camadas de fosfatos de
clcio (DAVIES, 1996).
Testes in vitro mostraram uma ligao ntima dos produtos da matriz extracelular e os
substratos de carbonatoapatita, ao passo que observou-se uma interface abrupta entre
substrato de hidroxiapatita e esses produtos (DE BRUJIN, 1996).
Acredita-se que a densidade ssea tem um fator preponderante sobre a dissoluo da
hidroxiapatita (GROSS, 1996). Um dos princiapais fatores para o sucesso de uma
cirurgia de implante a integridade interface osso-implante. Isso significa boa ligao
e transferncia de tenses adequada na interface. Vrios elementos contribuem para
a integridade da interface, como nvel e distribuio de tenses, reaes teciduais,
remodelamento, trauma e cirurgia e movimento relativo entre osso e implante.
Uma anlise desses fatores abrange conhecimentos interdisciplinares envolvendo
materiais e superfcies, engenharia qumica e mecnica, aspectos biolgicos do meio
circunvizinho.
Dentre os elementos responsveis pela obteno de resultados
satisfatrios em uma cirurgia de implante, pode-se citar (KOHN e DUCHEYNE, 1992):
seleo do material do implante;
52
propriedades mecnicas do recobrimento;
mecanismo de ligao do tecido ao implante;
o estado superficial do material e/ou recobrimento;
adeso do recobrimento ao implante;
tamanho, forma e distribuio da porosidade superficial;
viabilidade e propriedades mecnicas do tecido circunvizinho;
estabilidade inicial e estmulo ao tecido que est se formando;
propriedades elsticas do substrato e do tecido;
tipo de carregamento;
geometria do implante;
resposta biolgica do material.
A resposta biolgica, no caso de metais, est associada com a posio na tabela

peridica e com o peso atmico. Os elementos do Grupo II (Be, Mg, Ca, Cd, Sr, Ba,
Zn e Hg) mostram acentuada citotoxicidade, ao passo que os elementos dos Grupos
IV (Si, Ti, Zr e Sn) e VI (Cr, Mo e W) no mostram toxicidade nem irritao. Os metais
de baixo peso atmico dentro de um grupo possuem alta citotoxicidade, irritabilidade e
potencial carcinognico, ao passo que os metais de mais alto peso atmico dentro do
mesmo grupo so inertes. Exemplo: Cu (Grupo I), V, As e Sb (Grupo V) e Fe, Co e Ni
(Grupo VIII) so txicos, ao passo que Au (Grupo I), Ta (Grupo V) e Pd e Pt (Grupo
VIII) so inertes (KAWAHARA, 1995).
Para exercer um efeito negativo sobre as clulas, o metal deve estar ionizado. Os
metais que se ionizam facilmente, como o titnio, so tolerados porque ocorre a
formao de um filme estvel de xido. Os metais preciosos no so adequados para
utilizao como biomateriais porque geralmente so muito dcteis e os metais
preciosos duros contm metais txicos como Cu, Cd e Zn. A tendncia a ionizao
no corresponde totalmente com a citotoxicidade porque o padro de resposta celular
a metais varia dependendo do tipo de on e do filme passivo sobre a superfcie do
metal.
Quanto mais a estrutura molecular de um material se assemelhar ao tecido
hospedeiro, mais facilmente ele ser dissolvido pelo organismo. Logo, materiais com
estruturas moleculares semelhantes a protenas ou polisacardeos so facilmente
reabsorvveis. Em estudos de cultura de clulas em meios de cultura contendo soro,
foi observado que as clulas tm maior molhabilidade em superfcies hidroflicas do
53
que em superfcies hidrofbicas. Esse fato foi atribudo a uma casca de hidrogel que
formada ao redor do citoplasma das clulas.
Esse hidrogel formado por
glicosaminoglicanos, e proteoglicanos. Essa camada deve agir como um material de

ligao com a incorporao de uma camada de conformao modificada por lipdios e
protenas do meio que so adsorvidos superfcies hidroflicas. Essa forte adeso
atribuda a mudanas que ocorrem na camada sanduche, que composta pela
camada de conformao e pela matriz extracelular (KAWAHARA, 1995). A Figura 18
ilustra esquematicamente a ligao de uma clula a uma superfcie hidroflica.
Figura 18
Camada de ligao de uma clula a uma superfcie hidroflica
(KAWAHARA, 1995).
A avaliao do contato de clulas com filmes metlicos em MET revelou que o contato
com filmes de titnio se deu de forma direta, ao contrrio do que foi observado com
outros metais como Au, Pt e Pd, onde observou-se evidncia de um espao entre o
citoplasma das clulas e o metal (KAWAHARA, 1995). Uma explicao para essa
observao que o xido de titnio adsorve molculas de gua. Essa camada de
xido hidratada (MOOH) adsorve protenas, lipdios, polisacardeos proteoglicanos e
outras macromolculas, que so associadas a ons metlicos e no metlicos e so a
base para a formao da camada de conformao.
Segundo KAWAHARA (1995), o xido de titnio est em equilbrio dinmico com o
tecido sseo e a ligao desse metal com o tecido do tipo bioreativa, e no bioativa.
Logo, segundo esse autor, a inteface Ti-osso produz uma ligao qumica, situando o
54
titnio entre os materiais bioinertes e os bioativos. Essa bioreatividade faz com que,
em contato com soro sangneo, o xido de titnio sofra uma srie de reaes. Uma
oxidao adicional ocorre, envolvendo a difuso de tomos do metal para a interface
xido/biolquido.
Concomitantemente, a dissoluo do xido controlada pelos
seguintes fatores (BROWNE e McGREGSON, 1994):

Natureza e resistncia da ligao metal-xido;
Espessura do xido;
Estrutura de defeitos da camada de xido (lacunas, elementos intersticiais, etc.);
Grau de ordenao no interior da camada de xido;
Comportamento anisotrpico devido a stios de dissoluo preferencial nos planos
cristalogrficos especficos.
O xido de titnio altamente polar, o que causa a adsoro de molculas de gua e
de molculas solveis em gua. A adsoro dessas molculas causa a criao de um
campo eltrico formado por uma diferena de potencial ao longo da espessura do
xido.
Esse campo eltrico encoraja a oxidao do titnio e medida que a
espessura da camada de xido aumenta, a diferena de potencial diminui, diminuindo

tambm a fora motriz para a sua dissoluo. Outros eventos envolvem a difuso de
ons minerais ou tomos (Ca, P) do biolquido para o xido. Ocorre ainda adsoro e
desoro de molculas, sendo que o grau de desoro dependente da geometria,
rugosidade, e do tipo de molcula envolvida (BROWNE e McGREGSON, 1994).
Quando a interface em questo a de uma liga de titnio, outras espcies envolvidas
devem ser consideradas. No caso da liga Ti-6Al-4V, estudos indicam a presena de
Al2O3 na camada externa do xido dessa liga. Estudos termodinmicos mostram que,
em meio aquoso com baixas concentraes de Ca e P, como o soro humano o
alumnio instvel, tendendo a se dissolver (SOARES et al., 1999).
Quando inserido no corpo humano, acredita-se que a interao interfacial do titnio
com os fluidos corporais ocorre em trs passos (KAWAHARA, 1995):
Passo 1: imediatamente aps a insero, formado um cogulo ao redor do implante
e os tecidos epiteliais e conectivo so ligados camada hidratada do implante atravs
da camada sanduche (camada de conformao + matriz extracelular). Essa camada
deve estabelecer uma forte ligao entre a superfcie do implante e o tecido
neoformado.
55
Passo 2: aproximadamente 1 ms aps a insero do implante em osso alveolar, o

cogulo reorganizado e os osteoblastos entram em contato direto com a superfcie
via extenses citoplasmticas.
Passo 3: aproximadamente 3 meses depois, h maior contato direto do tecido sseo
com o implante e as fibras colgenas se ligam intimamente superfcie do implante.
Estudos recentes apontam um contato ntimo do tecido sseo com a superfcie de
titnio atravs de uma camada nanomtrica que consiste de Ti, Ca, P e
macromolculas.
No caso dos implantes recobertos com cermicas bioativas, formada uma ligao
orgnica com o osso neoformado, seguida de osteognese.
Esse fenmeno no
ocorre sempre devido complexidade do fenmeno interfacial de osteognese. As

cermicas bioativas sofrem um processo de dissoluo resultando na cristalizao de
apatita in vivo.
A engenharia de tecidos pode ser conceituada como a utilizao de materiais para
promover a formao de novo tecido, tanto in vitro quanto in vivo. Atualmente, tem-se
concentrado estudos na biodegradao do material, j que esse fator influenciar a
resposta celular imediata.
A engenharia de tecidos requer no somente o
recrutamento de clulas progenitoras adequadas, mas tambm sua subsequente

diferenciao em tecido maduro e funcional.
Esses eventos envolvem interaes
complexas de fatores sistmicos (hormnios) e locais (citocinas e fatores de

crescimento). O campo dos fatores de crescimento tem recebido ateno especial
(BOYAN et al., 1996).
II.4.4 TRATAMENTOS DE SUPEFCIES

O objetivo dos tratamentos de superfcies o estabelecimento de uma ligao qumica
e mecnica do osso ao material do implante. Geralmente objetiva-se a criao de
uma superfcie rugosa onde feita a aposio mecnica do osso.
A maioria dos implantes sem recobrimento feita de titnio puro. O metal usinado
at adquirir o formato adequado. Aps a usinagem, feita a limpeza das superfcies
para deix-las livres de resduos dos processos de fabricao. Esses resduos podem
ser desde lubrificantes de usinagem at partculas de xido no caso de implantes
56
jateados. A limpeza feita com detergentes e banhos ultra-snicos. KAWAHARA

(1995) verificou que o desengorduramento feito com detergente produzia superfcies
com alto ngulo de molhamento e baixa tenso superficial crtica, mesmo quando era
feita posterior esterilizao em autoclave. Por outro lado, tratamentos com cido e
H2O2 produziram superfcies com baixo ngulo de molhamento e altos valores de
tenso superficial crtica.
Atualmente, uma infinidade de tratamentos de superfcies tm sido aplicados aos
implantes de titnio.
Esses tratamentos envolvem desde tratamentos puramente
mecnicos que visam o aumento da rugosidade superficial at tratamentos qumicos

que envolvem mudanas estruturais na camada de xido.
Os trs principais mtodos de modificao das superfcies dos implantes so
(KAWAHARA, 1995):
1. Aplicao de recobrimentos por diferentes mtodos: os recobrimentos
geralmente so feitos para a criao de uma superfcie bioativa. No entanto, outras
finalidades como a preveno da liberao de ons, o mascaramento das
contaminaes das superfcies causadas pelos processos de fabricao e a produo
de uma supefcie rugosa e porosa tambm so objetivados.
2. Tratamentos qumicos com cidos, anodizao ou implantao inica: os
tratamentos qumicos tm por objetivos principais a limpeza da superfcie, criao de
rugosidade e ativao da superfcie atravs da alterao estrutural da camada de
xido. Os principais tratamentos qumicos so:
Ataque cido: os cidos mais utilizados so HF e HNO3. Aps o ataque cido,
feita imerso em soluo HF + H2O2. O papel do H2O2 a formao de uma
camada estvel de xido, aps a exposio do metal ao cido. Tambm so
aplicados na limpeza aps os tratamentos de jateamento para retirar partculas
inclusas.
Anodizao: esse tratamento feito atravs da utilizao de um anodo de titnio e
um catodo de platina, prata, ao inoxidvel, etc. feita a reao eletroqumica em
um meio eletroltico e obtm-se superfcies com diferentes coloraes. Em estudo
recente, (ISHIZAWA et al., 1995; ISHIZAWA et al., 1996) utilizaram uma soluo
de acetato de clcio e -fosfato de glicerol. Aps um tratamento hidrotrmico em
57
atmosfera de vapor sob alta presso, foi formada uma camada de hidroxiapatita de
aproximadamente 1m de espessura. Observou-se que essa camada bastante
efetiva na promoo da osteocondutividade, principalmente em implantes rugosos.
Os tratamentos de superfcie que envolvem altas temperaturas tm a vantagem de
aumentar a espessura da camada de xido, bem como de estabilizar a mesma.
BROWNE e GREGSON (1994) avaliaram a liberao de ons em implantes de liga de
titnio com diferentes tratamentos de superfcies. Foi observado que o tratamento
trmico a 400C resultou na formao de uma estrutura rutlica ordenada e densa, que
foi efetiva na reduo da liberao de ons.
A cristalinidade e a microestrutura do xido de titnio tambm influenciam a induo
de precipitao de apatita. ISHIZAWA et al. (1995) demostraram a existncia de uma
dupla camada intermediria entre o substrato de titnio e a camada de apatita
precipitada aps modificao de uma superfcie anodizada.
KOKUBO e colaboradores (KOKUBO et al., 1996; KIM et al., 1996A; YAN et al., 1996;
MIYAZAKI et al, 1996; KIM et al., 1996B) definiram um tratamento hidrotrmico em
soluo de NaOH como forma de ativao da superfcie do titnio. Dessa forma,
criada uma superfcie bioativa intermediria entre a camada de apatita precipitada e a
camada de xido do substrato metlico.
O tratamento mais usual consiste na
exposio a uma soluo alcalina seguido de tratamento trmico. Esse tratamento

produz uma camada de um titanato alcalino que, em contato com os lquidos
corporais, incorpora ons clcio e fosfato. A resistncia ao cisalhamento da interface
metal-apatita em amostras de titnio submetidas a tratamento alcalino seguido de
tratamento trmico se mostrou bem superior dos processos fsicos de deposio de
hidroxiapatita (KIM et al., 1996B).
A Figura 19 apresenta esquematicamente as etapas da ativao da superfcie do
titnio atravs de tratamento qumico em soluo de NaOH. As etapas de mudana
estrutural consistem em:
(a) formao de uma camada de titanato alcalino hidrogel;
(b) densificao do gel e transformao em uma fase vtrea de titanato alcalino;
(c) nucleao de apatita sobre a superfcie aps insero em SBF (simulated body
fluid).
58
Apatita
Titanato alcalino
hidrogel
Figura 19
Titanato alcalino
Representao esquemtica da evoluo estrutural da ativao da
superfcie do titnio obtida atravs de tratamento qumico em soluo de NaOH

(SALAYTER e SLAYTER, 1992).
Uma variao do tratamento com NaOH, proposta por WEN et al. (1998), consiste em
um ataque cido com HCl e H2SO4 seguido de tratamento alcalino com NaOH em
ebulio. O ataque cido tem a funo de criar micropros na superfcie do implante.
Os autores postulam que o tratamento alcalino tem duas funes: formao de mais
micropros e aumento da camada de xido.
FUJISHIRO et al. (1996) utilizaram um tratamento hidrotrmico para precipitar uma
camada de monetita entre o substrato de titnio e o recobrimento de hidroxiapatita. A
camada de monetita serviu de intermediria entre a camada de xido de titnio e a
camada de apatita precipitada sobre o implante.
Nitrificao: h dois mtodos para se fazer a nitrificao das superfcies de titnio:
implantao inica ou aquecimento a 750C-900C em atmosfera de nitrognio
gasoso. No mtodo de implantao inica, so usados nitrognio gasoso e titnio
metlico em uma cmara de vcuo para formar TiN. Esse composto intermetlico
implantado sobre a superfcie do titnio. O tratamento trmico em atmosfera
gasosa tambm produz uma camada de TiN.
3. Tratamento mecnico por jateamento ou usinagem: os implantes sem
recobrimento so submetidos a tratamentos mecnicos que visam a aposio
mecnica do tecido sseo ao implante.
Geralmente essa finalidade alcanada
atravs da criao de detalhes usinados na superfcie dos implantes ou atravs do

aumento da rugosidade das superfcies.
Os detalhes usinados podem ser desde
59
superfcies rosqueadas at a criao de furos ou reentrncias para que o osso cresa

por entre esses detalhes. O aumento da rugosidade das superfcies. feito geralmente
como o jateamento com partculas duras de xido. Os xidos mais usados so xido
de Ti, Al ou Si. Aps o jateamento, recomendado um tratamento com cido para
retirar possveis incrustaes de partculas de xido e tambm para uniformizar a
rugosidade criada pelo processo de jateamento.
A necessidade do desenvolvimento e manuteno de uma interface osso-implante em
funo para reteno mecnica e transmisso de foras oclusais tem levado diversos
autores a estudar a influncia da rugosidade das superfcies de implantes
odontolgicos
na
resposta
ssea
in
vivo
(WENNERBERG
et
al.,
1993;
WENNERBERG et al., 1997; WONG et al., 1995; SUZUKI et al., 1997; O,

GOTFREDSEN et al., 1995; BRANEMARK et al., 1997) e in vitro (KELLER et al. 1990;
BOYAN et al., 1996; OSHIDA et al., 1993; KIESWETTER et al., 1996; FUJIMORI,
1995). As caractersticas de superfcie como macro e micro topografia e composio
qumica das superfcies afetam as respostas celulares a curto prazo (migrao e
ancoragem) e a longo prazo (diferenciao e expresso da matriz) (KELLER, 1998).
Aps a limpeza, feita a esterilizao. Esses tratamentos podem afetar a resposta
celular.
O estado energtico das superfcies depende do tipo de material, do
manuseio do implante durante o processo de manufatura, do modo de limpeza e de

esterilizao. Tanto contaminantes orgnicos quanto os inorgnicos podem modificar
as propriedades qumicas e a energia da superfcie (CARLSSON et al., 1989).
Esterilizao definida como a eliminao ou destruio total de toda vida microbiana
ou viral. Desinfeco a reduo dos microorganismos patognicos a nveis seguros
atravs da inibio dos processos celulares (SINGH e SCHAAF, 1989).
O mtodo de esterilizao mais utilizado o de autoclave, que consiste na exposio
da superfcie a uma atmosfera de vapor aquecido.
Esse mtodo promove um
aumento da espessura da camada de xido do titnio. No entanto, a esterilizao em

autoclave pode promover a adsorso de contaminantes.
Segundo KELLER et al.
(1990), os implantes esterilizados com autoclave apresentaram superfcies mais

hidrofbicas do que os implantes esterilizados com gs xido de etileno a 130C ou
imerso em etanol absoluto por 20 minutos.
60
Mtodos alternativos tm sido propostos. Dentre eles, irradiao com Raios Gama,
esterilizao dinmica com Raios Ultra-Violeta, esterilizao por descarga de
radiofrequncia a plasma e imerso em etanol absoluto, dentre outros.
Estudos laboratoriais indicam que a exposio a fontes de Raios Ultra-Violeta
promovem uma inativao de 90% de vrus e bactrias, causando uma desinfeco e
no uma esterilizao (SINGH e SCHAAF, 1989). O mtodo de esterilizao dinmica
consiste na exposio da superfcie a ser esterilizada a uma lmpada germicida
especial Ultra-Violeta. Essa lmpada capaz de penetrar nos materiais orgnicos,
irradiar todas as irregularidades da superfcie a ser tratada, causar uma excitao da
superfcie do titnio e microcombusto de microarestas provenientes do processo de
fabricao (DELGADO e SCHAAF, 1990).
A esterilizao por descarga de radiofrequncia feita atravs do bombardeio da
superfcie com ons formados no plasma. Nesse tratamento, so removidos tomos e
molculas da superfcie. Ocorre uma reduo da espessura de xido bem como uma
maior limpeza quando comparado com a esterilizao em autoclave (CARLSSON et
al., 1989; WENNERBERG et al., 1993; BINON et al., 1992).
61
II.5 TCNICAS DE CARACTERIZAO METALRGICA

As superfcies dos implantes devem ser caracterizadas quanto a sua composio
qumica, quanto topografia e quanto bioatividade. As tcnicas de caracterizao
de composio qumica avaliam o grau de pureza do metal bem como a presena de
contaminantes provenientes dos processos de fabricao, limpeza e esterilizao. A
caracterizao da topografia envolve a anlise das superfcies com o emprego de
vrias tcnicas de microscopia e perfilometria.
A energia da superfcie tambm um ponto a ser analisado. Para essa anlise, so
utilizados gonimetros para medir o ngulo de contato de um lquido colocado sobre a
superfcie a ser analisada. A energia na superfcie de um biomaterial definida pela
densidade geral e pela polaridade das cargas. Assim, superfcies com polaridade
positiva ou negativa podem ser hidroflicas, ao passo que superfcies com cargas
neutras podem ser mais hidrofbicas. O efeito global das cargas nas superfcies
aumentar a tenso superficial local, a energia livre de superfcie e a energia de adeso
(BOYAN et al., 1996).
II.5.1 TCNICAS DE CARACTERIZAO TOPOGRFICA
WENNERBERG et al. (1992) estabeleceram que os detalhes de topografia em escala
micromtrica podem ter uma influncia sobre as propriedades mecnicas, e de
superfcie. Para descrever a topografia das superfcies de implantes, vrias tcnicas
so empregadas. As mais utilizadas so (DA SILVA et al., 1998A):
A. MICROSCOPIA ELETRNICA DE VARREDURA
Nessa tcnica, um feixe colimado de eltrons varre a superfcie da amostra.
Os
eltrons espalhados so coletados, gerando um sinal que amplificado e usado para

modular o brilho de um tubo de raios catdicos que varrido simultaneamente ao feixe
de eltrons. A imagem gerada uma imagem ponto a ponto. Como a profundidade
de campo muito grande, essa tcnica muito utilizada em estudos topogrficos.
Vrios tipos de contrastes podem ser utilizados de acordo com a finalidade da anlise.
Na anlise com contraste por eltrons secundrios, so captados eltrons com baixa
energia, oriundos da superfcie da amostra. Essa particularidade permite a anlise de
detalhes topogrficos com elevada definio. Na anlise com contraste por eltrons
62
retroespalhados, so coletados eltrons de maior energia, oriundos de uma

profundidade maior da amostra.
Esse contraste fortemente dependente das
espcies atmicas envolvidas. Isso faz com que essa tcnica seja potencialmente
usada na identificao de fases que no apresentam significantes diferenas
morfolgicas.
B. MICROSCOPIA TICA CONFOCAL A LASER
Os microscpios confocais, em contraste com as outras tcnicas de microscopia tica,
removem a luz no refletida do plano focal. Isso conseguido atravs de dois filtros
bloqueadores. Se a superfcie est em foco, a luz refletida passar pelo filtro e uma
alta intensidade ser registrada. Em caso contrrio, a intensidade registrada ser
muito baixa. As contribuies de regies fora de foco para a formao da imagem so
efetivamente suprimidas, resultando em uma imagem de alta resoluo e alta preciso
no plano vertical (WENNERBERG, 1996). No microscpio confocal, podem ser feitas
sees confocais, ou seja: imagens de vrios planos e atravs de um software
adequado, esses planos podem ser montados dando origem a um mapa de alturas
tridimensionais.
Quando so analisadas amostras transparentes, como amostras
biolgicas, podem ser analisadas profundidades de alguns dcimos de milmetros.

C. MICROSCOPIAS DE VARREDURA COM PONTA DE PROVA
Microscopias de varredura com ponta de prova um nome genrico para as tcnicas
de microscopia de varredura que utilizam uma pequena ponta de prova posicionada
muito prxima amostra sob investigao. Essa ponta de prova usada para medir
alguma grandeza que fortemente dependente da separao amostra-ponta de prova.
A ponta de prova varre a amostra e uma imagem do relevo da superfcie analisada
gerada.
Os principais tipos de microscopias de ponta de prova so microscopia de varredura
por tunelamento e microscopia de fora atmica. Outras tcnicas so: microscopia de
fora de frico, microscopia de varredura por condutncia inica, microscopia de
varredura por tunelamento de ftons e microscopia de ressonncia magntica.
A topografia dos biomateriais na escala em que ocorrem as interaes com clulas e
protenas (de m a nm) possui informaes que so essenciais na avaliao do
desempenho do material em contato com os fluidos corporais.
63
Por exemplo, as
mudanas nas propriedades eletrnicas resultantes de defeitos podem afetar a

capacidade de adsoro de protenas e pequenas molculas. Na escala das clulas,
a topografia pode afetar a migrao, diferenciao e aderncia de clulas.
investigao dos biomateriais com microscopia de ponta de prova bastante til na

caracterizao em escalas nanomtricas.
C1. MICROSCOPIA DE VARREDURA POR TUNELAMENTO
O microscpio de varredura por tunelamento foi o primeiro da famlia dos microscpios
de ponta de prova. Seu princpio baseado no efeito tnel, ou seja: uma ponta de
prova muito aguda colocada a uma distncia muito pequena (da ordem de nm) de
uma amostra e uma diferena de potencial entre elas aplicada. A grandeza medida
o fluxo de corrente entre a amostra e a ponta de prova pelo tunelamento quntico. A
corrente de tunelamento fortemente dependente da separao amostra-ponta de
prova (DESCOUTS et al., 1995).
Essa tcnica revela detalhes atmicos como defeitos e processos de adsoro. Essa
tcnica tem a vantagem sobre as tcnicas de difrao de permitir uma observao
mais local. No campo de biomateriais, as tcnicas de microscopia de varredura por
ponta de prova oferecem a vantagem de operarem presso ambiente e possibilitar
anlise em lquidos.
A ponta de prova montada em um atuador piezoeltrico que guiado por um mdulo
de alta voltagem. A ponta de prova pode se deslocar sobre a superfcie da amostra
fazendo varredura lateral e perpendicular, permitindo um deslocamento tridimensional.
A corrente coletada em um pr amplificador, gerando um sinal de entrada. O sinal
de sada proporcional diferena entre a corrente medida e um valor de referncia.
Esse sinal de sada amplificado e enviado para os eletrodos dos tubos
piezoeltricos. Os tubos de cermica piezoeltrica se retraem quando a corrente de
tunelamento maior do que o valor de referncia, ao passo que esses tubos se
alongam quando a corrente medida menor do que a referncia.
A corrente de
tunelamento ento mantida constante durante a varredura, assim como a distncia

da ponta de prova superfcie da amostra. Uma imagem tridimensional gerada
atravs das alturas da ponta de prova em funo de sua posio lateral (xy).
64
C2. MICROSCOPIA DE FORA ATMICA

O microscpio de fora atmica permite ao usurio superar a limitao que a
microscopia de tunelamento impe em relao a amostras no condutoras. Tambm
pode-se analisar amostras em ambientes midos. Uma ponta de prova posicionada
em uma haste de material macio, que varre a amostra analisada. Um feixe laser
incide sobre a parte posterior da haste e, aps sofrer reflexo, defletido em um
fotodiodo com dois setores. A diferena de intensidade da luz que alcana os dois
setores uma medida da deflexo do suporte e fornece um sinal que enviado ao
circuito eletrnico. A deflexo ento mantida constante durante a varredura. A
varredura feita com fora constante entre a amostra e o suporte. A medida da fora
de arraste da ponta de prova sobre o substrato pode ser associada, por exemplo, com
a fora de adeso de clulas ao substrato. A aproximao da ponta superfcie
analisada menos delicada j que a ponta suportada por um material macio e
evitar dano amostra (DESCOUTS et al., 1995).
D. PERFILOMETRIA
As anlises em perfilometria permitem a quantificao de parmetros de rugosidade.
Essa quantificao geralmente feta atravs da utilizao de rugosmetros ou de
equipamentos desenvolvidos especificamente para esse fim. Os rugosmetros podem
fazer a varredura da superfcie com uma agulha semelhante s agulhas utilizadas nas
tcnicas de microscopia de sonda (probe microscopy) ou pode tambm ser feita uma
varredura a laser.
WENNERBERG et al. (1992) desenvolveram um mtodo de anlise de rugosidade que
descreve a topografia de superfcies. Esse mtodo emprega uma varredura confocal a
laser sobre a superfcie de uma amostra que fica a uma distncia de trabalho grande.
Os principais parmetros obtidos so:
Ra, rugosidade mdia tambm chamada de mdia aritmtica. a conveno mais
utilizada para rugosidade, especialmente para controle de qualidade e definida
como o desvio mdio absoluto da linha mdia sobre o comprimento varrido. No
entanto, Ra insensvel a comprimento de onda ou picos e vales muito altos.
Rq, rugosidade mdia quadrtica, o desvio mdio sobre o perfil medido no
comprimento varrido.
geralmente usado para dar significncia terica extra
sobre a distribuio de alturas.

Rt o mximo valor medido de distncia entre pico e vale sobre o perfil analisado.
65
II.5.2 TCNICAS DE MICROANLISE E DE QUMICA ANALTICA

Quando uma amostra observada em MEV, as interaes do feixe de eltrons com a
superfcie da amostra geram ftons, eltrons Auger, eltrons secundrios, eltrons
retroespalhados e emisso de Raios-X caractersticos. As tcnicas de microanlise
empregam um detector de Raios-X acoplado ao MEV que os diferencia em termos de
energia (EDS) ou comprimento de onda (WDS), sendo mais empregada a
espectroscopia por energia dispersiva (EDS). Os Raios-X detectados so comparados
aos padres existentes e os elementos constituintes so identificados. A comparao
com padres pode fornecer uma anlise qumica semi-quantitativa, embora as
tcnicas de microanlise sejam mais usadas em anlise qualitativa.
B.
ESPECTROSCOPIA
DE
FOTOELTRONS
POR
RAIOS-X
(XPS)
OU
ESPECTROSCOPIA DE ELTRONS PARA ANLISE QUMICA (ESCA)

Dois termos gerais que englobam todas as tcnicas que envolvem luz so
espectroscopia e espectrometria.
O instrumento designado espectrmetro.
Qualquer espectrmetro que utilize um fotomultiplicador como detector chamado

espectrofotmetro e a tcnica desiganada como espectrofotometria.
Na tcnica de XPS, a amostra atingida por um feixe de Raios-X que ejeta eltrons
das camadas de valncia. O aparelho, que opera sob alto vcuo, detecta e quantifica
a energia associada transio dos eltrons das camadas mais internas que iro
ocupar os lugares vagos. Assim, essa anlise se restringe a camadas da ordem de
0,5 a 10nm, podendo fornecer informaes a respeito da interao da superfcie com o
meio, identificando por exemplo os filmes de xido presentes (DA SILVA et al.,
1998A). O eltron ejetado possui energia cintica dada por
Ecin = h Eb - , onde:
h a energia do fton incidente;
Eb a energia de ligao do eltron emitido;
a funo de trabalho.
66
Como tanto h quanto so conhecidos, pode-se deteminar Eb atravs da medio da

energia cintica, identificando-se, assim, os elementos presentes nas supercies
analisadas (MUSTER e DEMRI, 1995).
A espectroscopia de fotoeltrons por Raios-X uma ferramenta til na avaliao das
mudanas estruturais ocorridas na camada de xido de titnio quando feito o
tratamento de ativao da superfcie (TAKADAMA, 1998).
A espectroscopia de eltrons para anlise qumica uma ferramenta importante na
compreenso das interaes entre as protenas e as superfcies (CHITUR, et al,
1998).
C.
ESPECTROMETRIA DE EMISSO ATMICA COM FONTE DE PLASMA
ACOPLADO INDUTIVAMENTE (ICP-MS)

H vrios mtodos atravs dos quais so gerados tomos a partir de ons. O mais
usual a utlizao de uma chama.
Quando uma soluo de ons metlicos
colocada em uma chama, o solvente evapora deixando cristais do sal anteriormente

dissolvidos. A chama usada para essa atomizao na maioria dos instrumentos de
absoro atmica, em todas as fotometrias por chama e em todos os instrumentos por
fluorescncia atmica. Todos os atomizadores so fontes de energia similares. Um
tipo de atomizador utiliza uma fonte de plasma acoplada indutivamente. Nesse caso,
alm da atomizao, tambm ocorre a excitao dos tomos (KENKEL, 1992).
A espectrometria de emisso atmica com fonte de plasma acoplado indutivamente
uma tcnica de emisso estritamente atmica onde uma suspenso da amostra e os
padres, so introduzidas em um fluxo de argnio que ir se ionizar gerando o plasma.
Uma intensa emisso ocorrer levando possibilidade de deteco e medio de
pequenas concentraes de ons metlicos com preciso. Essa tcnica muito mais
sensvel do que todas as outras tcnicas atmicas (KENKEL, 1992).
D. DIFRAO DE RAIOS-X
A difrao de Raios-X pela rede cristalina ocorre sobre uma larga faixa angular quando
o comprimento de onda dos Raios-X da ordem do espaamento entre planos de
tomos. Os Raios-X com uma faixa estreita de comprimento de onda, em uma regio
adequada para anlise por difrao, so obtidos nos espectros K dos metais leves,
67
cromo, cobalto, cobre, ferro, mangans, molibdnio e nquel e cobre uma faixa de 0,7
a 2,2 A. Os espectros so obtidos pelo bombardeio dos tomos do elemento com
eltrons de energia entre 25 e 50 kV.
Os Raios-X nessa regio so facilmente
absorvidos e janelas especiais de berlio ou mica so usadas na porta dos tubos e

detectores de Raios-X (MITCHELL, 1996).
O espectro K contm trs linhas fortes: 1, 2 e , sendo que 1 e 2 formam uma
dupla com estreita separao de comprimento de onda.
Os Raios-X podem ser
detectados por filme, por um contador ou por um cintilador. Podem ser usados filtros
para eliminar efeitos de fluorescncia das radiaes K e L da amostra analisada.
A difrao de Raios-X identificar as linhas de difrao correspondentes aos
espaamentos interplanares dos materiais cristalinos. O padro resultante (espectro),
que composto de espaamentos planares (no eixo x) e intensidades (no eixo y),
pode ser comparado a padres do Comit da Junta de Padres de Difrao de Ps
(JCPDS) da ASTM para os vrios fosfatos de clcio.
Logo, a localizao e a
intensidade dos picos fornecero um espectro caracterstico que ser utilizado na

anlise qualitativa. Essa anlise identificar a presena de fases cristalinas mas no
de fases amorfas nem de baixa cristalinidade (TOTH et al., 1995).
A identificao dos espectros obtidos normalmente feita usando-se um ndice de
padres (espectros), publicado pela ASTM (American Society for Testing and
Materials). Nesse sistema, cada p caracterizado pelas distncias interplanares, d,
e pelas intensidades, I, das trs linhas mais intensas no espectro. So fornecidas a
lista completa distncias interplanares, suas intensidades relativas, ndices dos planos
cristalogrficos, parmetros de rede e constantes fsicas do composto analisado.
A difrao de Raios-X tambm permite que se faa anlise quantitativa das fases
presentes em uma amostra. No entanto, essa anlise no trivial e vai depender da
cristalinidade e da diferena dos coeficientes de absoro das espcies envolvidas.
Uma outra limitao que devem ser preparadas curvas de calibrao das espcies
em questo, com os cristais distribudos em direes aleatrias, sem orientao
preferencial.
A anlise por difrao de Raios-X serve, dentre outras razes, para medir a
dissoluo, composio e estabilidade de recobrimentos com cermicas bioativas.
Uma outra apliacao a medio de parmetro de rede, particularmente importante
68
quando se est estudando as apatitas com substituies inicas, j que muitas vezes
essas substituices causam variaes nos parmetros de rede.
Para uma anlise de rotina do p a difrao de raios-x nos d a seguinte informao
sobre o composto:
identidade: cada composio estrutura cristalina tem seu conjunto de picos de difrao
prprios para ngulos de difrao especficos;
pureza: se o composto consiste de uma nica fase ou mistura de fases;
cristalinidade refletindo o tamanho ou perfeio do cristalito derivado do alargamento
do pico de difrao;
tamanho e forma aproximados: a forma qualitativa, se longo ou equiaxial, podem ser
deduzidas;
parmetros de rede: que juntos com anlise qumica indica o tipo e soma de
substituio na estrutura;
orientao.
Embora muitas informaes possam ser obtidas pela difrao de raios-X, a
combinao com outros tipos de tcnicas apresenta uma viso mais ampla das
propriedades fsico-qumica da hidroxiapatita biolgica ou sinttica. As propriedades
de vrias hidroxiapatitas, biolgicas como sintticas, tm sido obtidas utilizando-se a
difrao de raios-X e a espectroscopia no infravermelho.
Mtodo Rietveld
O mtodo Rietveld um mtodo de refinamento estrutural e no um mtodo de
determinao estrutural embora constituindo, no entanto, uma parte importante no
contexto da caracterizao estrutural.
O mtodo Rietveld utiliza os espectros de difrao e tem como caracterstica
fundamental a adoo de um modelo adequado ao estudo a realizar, permitindo extrair
dos espectros de difrao informaes detalhadas da estrutura cristalina e
informaes analticas dos materiais.
O difratograma de determinada substncia constitudo por um conjunto de reflexes
individuais, funo intrnseca do seu agrupamento atmico, possuindo determinado
perfil, cujas caractersticas so: altura, posio, largura, forma e rea, sendo esta
ltima proporcional intensidade de Bragg, Ik, em que k representa os ndices de
Miller (h, k, l), e I proporcional ao quadrado do valor absoluto do fator de estrutura |
Fk |, dependente da natureza dos tomos.
69
O modelo estrutural adotado por Rietveld inclui vrios tipos de parmetros (Park,
1980):
Parmetros da estrutura cristalina: coordenadas (x,y,z) da posio dos tomos na
clula unitria, deslocamentos vibratrios dos tomos, densidade ocupacional das
posies atmicas, dimenses (a,b,c) da clula unitria e ngulos (,,) entre os
vetores.
Parmetros do perfil das reflexes: largura das reflexes, assimetria e forma.
Parmetros globais: funo do fundo que engloba o comprimento de onda (1, 2) e o
zero da escala 2.
Parmetros da intensidade: inclui o fator de escala, que ajusta a altura de todas as
reflexes do espectro calculado s do espectro observado.
Parmetro de correo da orientao preferencial dos cristalitos da amostra.
Estes parmetros, permitem calcular, atravs do algoritmo, um espectro modelo
adequado fase que pretendemos estudar, o qual comparado com o espectro
observado e a diferena entre ambos minimizada fazendo variar os parmetros no
modelo estabelecido, utilizando o processo de minimizao baseado no princpio dos
mnimos quadrados at que o melhor ajuste seja obtido entre o padro de difrao
observado experimentalmente e o clculo de acordo com um modelo que envolve a
estrutura cristalina, fatores instrumentais e caractersticas da amostra. A quantidade
minimizada no refinamento por mnimos quadrados o resduo Sy (AOKI, 1988):
Sy =
i
( yi yci ) 2
yi
(2.1)
onde i representa todos os passos em 2 e yi e yci so as intensidades observadas e

calculadas no passo i, respectivamente. Esta operao chama-se refinamento
estrutural. O clculo de yci resultado da soma de contribuies calculadas a partir
das reflexes individuais de Bragg, mais a linha de base. As reflexes individuais so
calculadas levando-se em considerao um perfil de reflexes , que aproxima os
efeitos das caractersticas do instrumento e da amostra (alargamento dos picos por
diminuio dos tamanho de gro) no padro de difrao. O perfil mais indicado para o
refinamento de difratogramas de materias nanocristalinos o chamado Thomas-CoxHastings (TCH), resultando de uma mistura dos perfis gaussiano e lorentziano. As
larguras das componetes gaussiana e lorentziana do perfil TCH so dadas,
respectivamente, pelas expresses:
2
1/ 2
G = ( U tan + V tan + W + cos 2 )
(2.2)
70
L = X tan +
Y
cos
(2.3)
onde U, V, W, X, Y e Z so coeficientes a serem ajustados de acordo com padro de

difrao observado experimentalmente.
Em geral, alargamento da linha de difrao em razo de microdeformaes residuais
tem uma dependncia angular da forma tan , enquanto a correspondente
dependncia angular do tamanho de gro dada pela frmula de Scherrer e da
forma 1 / cos (HENCH e POLAK, 2002).
O refinamento simultneo de fases mltiplas mas um passo para derivar medidas
quantitativas das quantidades relativas presentes. Este o melhor mtodo disponvel
para anlise de fase quantitativa que pode refinar, no processo, um bom modelo
estrutural para cada fase. As vantagens principais so que todas as reflexes, e no
s um subconjunto, so consideradas e h avaliao entre a melhor quantificao e a
melhor das estimativas da contribuio de cada reflexo de Bragg a cada ponto dos
dados observados.
Hill e Howard (1987) publicaram a primeira demonstrao completa de anlise
quantitativa de fases com o mtodo Rietveld. No caso deles, estavam com os dados
de difrao de nutron. Eles mostraram que existe uma relao simples entre os
fatores de escala determinados em refinamento de Rietveld de amostras de mltipla
fase e a quantidade de fase:
Wp =
S p ( ZMV ) p
[ Si ( ZMV )i ]
(2.4)
onde:
Wp a frao molar de cada fase;
S o fator de escala;
Z o numero de unidades da frmula por clula unitria;
M a massa de clula unitria;
V o volume da clula unitria.
E. ESPECTROSCOPIA DE ELTRONS AUGER
A incidncia de um feixe de eltrons sobre a superfcie de um metal gera uma srie de
interaes. Dentre elas, a absoro de Raios-X, que pode decair como fluorescncia
(ftons de mais baixa energia) ou eltrons Auger, na faixa de 50eV. Esses eltrons
so retirados de regies prximas superfcie da amostra, tornando a tcnica
particularmente aplicvel a anlises de superfcies (SLAYTER e SLAYTER, 1992).
71
Nessa tcnica, feito um bombardeamento inico prvio a fim de limpar a superfcie

antes da anlise ser realizada.
Uma outra vantagem desse bombardeio que
sucessivas camadas atmicas podem ser arrancadas permitindo uma anlise em

diferentes profundidades.
F. ESPECTROMETRIA DE TRANSFORMADA DE FOURIER POR RAIOS INFRAVERMELHOS (FTIR) e Raman (FT-Raman)
A absoro de radiao Infra-vermelha causa transies de nveis vibratrios de
energia das molculas. A utilizao dessa tcnica reside no fato de que somente
comprimentos de onda muito especficos de luz Infra-vermelha podem ser absorvidos
quando um determinado tipo de molcula est no caminho da radiao.
absorbncia versus o comprimento de onda fornece uma impresso digital da

molcula. As bandas, na regio das radiaes Infra-vermelhas, so bastante estreitas
e so associadas a uma ligao covalente particular na molcula (KENKEL, 1992).
Os instrumentos modernos so projetados para desempenhar a mesma funo dos
instrumentos dispersivos. No entanto, no utilizam monocromador dispersor de luz e o
espectro obtido muito mais rapidamente. O feixe de luz no-dispersa passa pela
amostra e todos os comprimentos de onda e seus correspondentes dados de
absoro so recebidos no detector simultaneamente.
feita uma manipulao
matemtica (transformada de Fourier) nesses dados para se obter os dados de

absoro para cada comprimento de onda individual.
As espectroscopias de transformada de Fourier por Raios infra-vermelhos (FTIR)e
transformada de Fourier Raman (FT-Raman) fornecem um detalhamento espectral
devido eliminao da fluorescncia dos tecidos naturais e dos materiais sintticos.
Essa eliminao conseguida com um laser prximo do espectro do infra-vermelho
(Nd:YVO4). A utilizao de interfermetros e de tranformada de Fourier permite a
obteno dos espectros em tempos mais curtos, aumento do sinal e maior preciso.
Ambas as tcnicas fornecem informaes sobre as vibraes moleculares e so
tcnicas complementares (REHMAN, 1995A). As tcnicas de FTIR e FT-Raman so
reconhecidas como tcnicas analticas para aplicaes biomdicas porque requerem
uma preparao de amostras mnima e porque so tcnicas no destrutivas.
Os espectros Raman de amostras de osso revelam picos bem definidos associados a
fases orgnicas e inorgnicas. Esses resultados permitem a confirmao de que o
osso formado por uma matriz mineral e uma matriz orgnica.
72
Na tcnica de
espectroscopia Raman convencional, necessrio fazer-se a desproteinizao do

osso para aumentar-se as informaes da fase mineral do osso (REHMAN, 1995B).
As pesquisas no sentido de se associar as fases minerais do osso com hidroxiapatita
sinttica esto em andamento. Em estudo recente, REHMAN e BONFIELD (1995)
demonstraram a possibilidade de obteno de bons detalhes de espectros de infravermelho usando a tcnica de espectometria FTIR fotoacstica. Nesse estudo, foram
analisados os espectros da fase inorgnica do osso cortical, de hidroxiapatita sinttica
implantvel e de carbonato-apatita sinttica. Dos espectros, foram obtidos os dados
mostrados na Tabela 7.
Tabela 7
Posies das bandas de infra-vermelho observadas para as amostras
analisadas (REHMAN e BONFIELD, 1995).

Localizao dos
picos cm-1
Osso humano
Osso de
carneiro
Carbonato
apatita
Extenso de hidroxila
Carbonato v3
----(m)
----(m)
----(m)
Fosfato v3
(vs)
(s)
(m)
(vs)
(w)
Fosfato v1 (m)
Carbonato v2 (ms)
Fosfato v4
(m)
(vs)
(vs)
Fosfato v2 (w)
----(vw)
-1650-1300
1609
1473
1420
1190-976
---1046
-961
874
660-520
-605
565
467
445
-1650-1300
1609
1471
1419
1190-976
1096
1085
1056
-1012
960
873
660-520
-601
579
470
454
3569
1650-1300
1649
1470
1190-976
----960
873
660-520
-603
567
469
--
Hidroxiapatita
comercial
(P120)
3568
1650-1300
1648
1454
1419
1190-976
1092
--1042
-962
874
660-520
633
602
566
472
--
Pela Tabela 7, pode-se observar que o osso humano e o osso de carneiro apresentam
resultados quase idnticos. A carbonato apatita sinttica tem um espectro prximo ao
do osso humano, ao passo que h uma srie de diferenas entre os espectros da
hidroxiapatita pura e o da carbonato apatita.
A diferena mais marcante o
decrscimo no pico de hidroxila localizado em 3568 cm-1, enquanto a hidroxiapatita

pura tem picos bem definidos nessa posio. A hidroxiapatita pura possui uma banda
de hidroxila em 624 cm-1, que est ausente na carbonato apatita (REHMAN e
BONFIELD, 1995).
73
II.6 TCNICAS DE CARACTERIZAO BIOLGICA

A identificao de caractersticas das superfcies que influenciam as interaes com as
clulas e com os microconstituintes dos fluidos corporais tem sido realizada atravs
dos testes in vitro. Embora a avaliao de como um implante ir se comportar in vivo
no possa ser completamente realizada atravs dos resultados de uma anlise in vitro,
essas tcnicas fornecem informaes valiosas e apresentam algumas vantagens
como a possibilidade de se isolar a varivel de superfcie especfica, rapidez,
simplicidade, reprodutibilidade, quantificao e custo.
A limitao principal que
nunca se consegue reproduzir a biodiversidade que um implante fica sujeito quando

inserido dentro de um organismo vivo.
MASUDA et al. (1998) listou algumas
vantagens e desvantagens oferecidas por estes testes:

VANTAGENS:
O sistema reprodutivel e existe uma sequncia de eventos bem determinada;
possibilidade de isolamento de variveis;
Possibilidade de utilizao de mtodos de avaliao da adeso, proliferao e
diferenciao;
As clulas podem crescer em reas relativamente extensas, fornecendo bastante
material para anlise.
DESVANTAGENS:
Dificuldades de se analisar materiais opacos;
Os meios de cultura requerem suplementos, que podem alterar o comportamento
das clulas, mascarando os resultados;
Ausncia das foras biomecnicas existentes in vivo;
Ausncia da resposta inflamatria, neovascularizao e interao com outros tipos
de clulas.
Dependendo do tipo de investigao que se tem em mente, existem vrios modelos de
testes in vitro para se estudar as propriedades biolgicas dos materiais.
As
informaes obtidas sero particularmente teis como uma etapa preliminar

realizao dos testes in vivo.
Os teste in vitro so, em geral, estticos e no levam em considerao a dinmica do
implante in vivo. Esses fatores tais como posio anatmica do material (por exemplo,
maxila versus mandbula ou tbia versus crnio), comprimento do dispositivo, carga
74
(direo e intensidade), fadiga e desgaste do material, alteraes no meio e no

material e idade do paciente, so todos consideraes importantes que no podem ser
feitas in vitro. Adicionalmente, os modelos de cultura de clulas tendem a examinar a
resposta de tipos simples de clulas, geralmente linhagens transformadas e, portanto,
devem ser interpretados com cautela.
Os principais testes in vitro so os testes em lquido corporal simulado (SBF) e os
testes de cultura de clulas. Os testes de cultura de clulas podem avaliar o efeito do
material sobre as clulas no que se refere multiplicao, funo, toxicidade e
adeso. H uma variedade de mtodos de avaliao de toxicidade. No entanto, os
materiais no txicos no so necessariamente biocompatveis, o que torna
necessria a realizao de outros testes.
Nos testes de cultura de clulas,
observado como clulas mantidas em cultura interagem com as superfcies. Esses

testes tm a vantagem de indicarem no somente a bioatividade, mas tambm a
toxidade das superfcies analisadas.
II.6.1 TESTES EM LQUIDO CORPORAL SIMULADO
Esse tipo de teste consiste em submeter a superfcie de um implante ao contato com
um lquido que simula os lquidos corporais. A principal soluo utilizada a soluo
de KOKUBO. (SBF, SBF (K-9), KOKUBO SOLUTION)
Aps imerso em SBF, a
superfcie do implante analisada por tcncias de anlise de superfcie como MEV,

difrao de Raios-X em baixo ngulo, AFM e FTIR.
Esses testes so chamados testes de bioatividade porque avalia-se a precipitao ou
no de carbonato apatita a partir da soluo SBF. Quando ocorre essa precipitao, o
material considerado bioativo.
OHGUSHI et al. (1996A) e OHGUSHI et al. (1996B) reportaram a influncia da
precipitao de apatita in vitro sobre a diferenciao de clulas em osteoblastos.
Segundo esses autores, estudando a precipitao de apatita sobre superfcies vitrocermicas, a transformao da superfcie um fenmeno essencial para o
estabelecimento de uma ligao ssea satisfatria. Esse efeito foi tambm reportado
por vrios autores estudando modificaes em superfcie de de titnio (LIVIN e
KAPLAN, 1996; ISHIZAWA et al., 1996; FUJISHIRO et al., 1996; WEN et al., 1998) ou
tntalo (MYIAZAKI et al., 1996).
75
II.6.2 CULTURA DE CLULAS

O processo de formao de osso novo complexo e envolve a interao de uma
grande variedade de clulas e condies de superfcies. As clulas mesenquimais
so capazes de se diferenciar em osteoblastos quando em presena de
concentraes de fatores de crescimento. Logo, a presena e a concentrao desses
fatores de crescimento nos primeiros estgios da recuperao do cogulo pode
desempenhar um papel importante no tipo de clulas recrutadas para o local,
influenciando a resposta biolgica a longo prazo (KIESWETTER et ali, 1996).
Dependendo do local de implantao, outros fatores locais ajudam a determinar a
diferenciao das clulas mesenquimais em osteoblastos, condroblastos ou
fibroblastos. Por exemplo, se o local for bem oxigenado, a osteognese favorecida,
ao passo que baixa oxigenao favorece a condrognese.
A presena de
micromovimentos pode levar a formao de fibrocartilagem. Quando a topografia da

supefcie favorece a vascularizao, a osteognese pode ocorrer, ao passo que em
locais onde difcil o crescimento de vasos, a condrognese mais provvel. O tipo
de rugosidade tambm determinar o nmero e tipos de ancoragens focais das clulas
com seu substrato.
Observa-se que em supefcies rugosas, as clulas formam
camadas que cobrem os vales entre os picos (BOYAN et al., 1996).
As clulas
osteognicas so os osteoblastos e os condroblastos. Uma medida da capacidade

osteoindutora dos materiais bioativos a diferenciao de clulas precursoras nessas
clulas (OHGUSHI et al., 1996B).
Segundo MASUDA et al. (1998), os materiais cermicos e metlicos no so
verdadeiramente osteognicos, isto : no so capazes de induzir a formao de osso
novo pelo recrutamento ou estmulo de clulas precursoras dos osteoblastos. Esses
materiais no so, portanto, osteoindutores, ou seja, no tm a capacidade de induzir
a formao de osso novo. As superfcies podem ser osteocondutoras, ou seja, podem
ser favorveis ao crescimento de capilares e clulas precursoras dos osteoblastos.
Ainda necessrio um maior detalhamento no estudo das interaes moleculares e
celulares que ocorrem nas superfcies dos implantes in vivo.
As clulas usam a morfologia do substrato para a migrao e orientao. Clulas
epiteliais e fibroblastos se alinham ao longo de ranhuras que podem ser feitas
propositalmente nas superfcies.
Esse processo de alinhamento chamado de
orientao por contato. O espaamento e a profundidade das ranhuras tm um papel
76
importante sobre a orientao por contato. Como as clulas epiteliais, os osteoblastos

tambm tm sensibilidade morfologia das ranhuras de um material. Os osteoblastos
tm preferncia por pros de 200 a 400mm para encorajar a migrao, ancoragem e
proliferao (BOYAN et al., 1996).
KELLER (1998) associou diferenas na morfologia e adeso de osteoblastos a
substratos metlicos diferena de rugosidade de uma ordem de grandeza.
KIESWETTER et al. (1996) estudaram a modulao da rugosidade sobre a produo
local de fatores de crescimento e citocinas por clulas MG-63.
Esses autores
observaram que a rugosidade afeta a proliferao, diferenciao e produo da matriz

de clulas MG-63, bem como a produo de citocinas e fatores de crescimento. Foi
observada uma menor proliferao celular nas superfcies mais rugosas bem como
diferenas na morfologia quando comparada a superfcies lisas. Esse resultado foi
associado a um estgio mais avanado de diferenciao, que precedido por uma
queda na proliferao.
As interaes entre as clulas e os biomateriais favorecida pela adsoro de
protenas s superfcies. Os recobrimentos com fosfatos de clcio tm a vantagem de
facilitar esse processo de adsoro. Dentre os fosfatos de clcio, a hidroxiapatita
(Ca/P=1,67) o que tem maior capacidade de adsorver protenas a sua superfcie
(TAKASHIMA et al., 1996).
Dentre as protenas no colgenas produzidas pelos osteoblastos, a osteocalcina,
tambm chamada de protena Gla ssea (BGP), a protena mais abundante da
matriz ssea. A fosfatase alcalina (ALP) se localiza na membrana celular das clulas
osteognicas.
Esses marcadores bioqumicos so indicadores da capacidade de
diferenciao in vitro em osteoblastos (OHGUSHI et al., 1996B).

A. AVALIAO DE CITOTOXICIDADE IN VITRO
Os testes de citotoxicidade utilizam a resposta celular ao material a ser testado
inserido em um meio de cultura. O contato das clulas com o material pode ser de
trs tipos: direto, indireto ou extrao.
A1. CONTATO POR EXTRAO
77
No mtodo por extrao, so utilizados veculos de extrao para retirar amostras do

material a ser testado. Os veculos utilizados so: gua destiladas, soluo salina,
saliva artificial, lquido corporal simulado e meio de cultura com soro. Tambm so
usados soluao de cloreto de sdio, leos vegetais, de acordo com a norma ASTM
F619-79. Solventes, reagentes qumicos, gua e leo no podem ser utilizados em
meio de cultura.
No existe um nico mtodo de extrao que simule o aspecto real do material no
organismo. Segundo NAKAMURA et ali (1995) , o mtodo de extrao mais eficiente
o mtodo dinmico que utiliza esferas girantes de alumina. Os mtodos dinmicos
de extrao so uma boa alternativa. Esses mtodos tm as seguintes vantagens:
Uma carga dinmica pode ser aplicada sobre um material que usado sob tenso
como carga oclusal ou atrito;
A extrao contnua previne o decrscimo da taxa de extrao causado pelo
acmulo de produtos na interface;
O processo de extrao pode ser acelerado;
Uma extenso do processo permite o estudo de aspectos detalhados do material
ao longo do tempo.
A2. CONTATO INDIRETO

Nesse mtodo, utilizada uma camada intermediria entre uma monocamada de
clulas cultivada no fundo de um frasco de cultura de clulas e o material testado.
Essa camada funciona como uma tela, sendo o material mais comumente utilizado o
Agar fluido.
Pode-se usar ainda um gel de colgeno ou um filto de acetato.
(NAKAMURA et ali, 1995)

A3. CONTATO DIRETO
O mtodo de contato direto consiste em colocar amostras do material no topo de uma
monocamada de clulas ou em semear as clulas sobre a superfcie da amostra.
Uma variao consiste em se colocar um gradiente de concentrao da amostra no
meio de cultura. A intensidade da toxicidade do material avaliada observando-se o
78
aspecto das clulas ao longo do gradiente de concentrao da amostra. Um material

de alta toxicidade afetar clulas em regies de baixa concentrao.
Dentre as desvantagens do mtodos de contato direto esto:
Oos materiais solveis em gua tendem a se dissolver muito;
Quando o equilbrio for estabelecido, haver um decrscimo na liberao de
substncias, havendo um aumento da concentrao adjacente amostra. Essa
caracterstica inerente aos mtodos estticos;
O efeito do meio de cultura no representa a realidade. Dessa forma, as clulas
incubadas sobre teflon no aparecem bem aderidas.
No entanto, isso um
problema da superfcie do material, no indicando que este seja txico.

B. AVALIAO DA MORFOLOGIA
A microscopia eletrnica de varredura tem sido utilizada rotineiramente para avaliao
da morfologia das clulas sobre as superfcies dos biomateriais.
As primeiras observaes das interaes de clulas com substratos indicaram que
estas se do atravs de membranas franzidas, adeses focais, placas de adeso e,
mais recentemente, contatos focais.
Os contatos focais so microestruturas
especializadas apoiadas dentro das clulas que se projetam para os microfilamentos

que ficam sob a membrana citoplasmtica.
Originalmente, foi proposto que os
contatos focais deveriam ter um certo comprimento para garantir adeso e contato
mximo das clulas com o substrato.
espraiamento
no
sempre
Mais recentemente, se sugere que o
compatvel
com
diferenciao
das
clulas
mesenquimais, particularmente no caso da condrognese (BOYAN et al., 1996).

C. AVALIAO DA ADESO
Existem vrios mtodos de avaliao da adeso de clulas aos substratos.
Um
mtodo utiliza a observao em MEV da morfologia dos processos celulares

ancorados s superfcies (HING et ali, 1999;
NAKAMURA, et ali, 1995).
Outros
mtodos empregam a medio das foras requeridas para retirar as clulas do

substrato. Isso pode ser obtido atravs da utilizao de um micromanipulador, de uma
centrfuga, ou de um fluxo hidrodinmico (flow cell).
79
D. AVALIAO DE CRESCIMENTO E PROLIFERAO

Durante a replicao celular, o cido desoxi-ribonucleico (DNA) replicado. A sntese
do DNA pode ser marcada com timedina tritiada ([3H]-RdR), que seletivamente
incorporada ao ncleo celular durante o ciclo celular. No entanto, tanto o DNA quanto
a incorporao de [3H]-RdR podem ser medidas para monitorar a proliferao celular
(HUANG, 1997).
E. AVALIAO DA ATIVIDADE CELULAR
A deteco bioqumica da atividade de fosfatase alcalina um indicador sensvel da
atividade dos osteoblastos. Tanto a produo quanto a liberao da fosfatase alcalina
podem ser medidas nos lisados celulares e/ou no meio de cultura.
A razo ALP/DNA um indicativo da quantidade de atividade de fosfatase alcalina por
clula. Segundo HUANG (1997), a variao causada pelas diferenas de formato das
amostras pode ser eliminada por essa aproximao.
80

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APOSTILA

Marcelo Henrique Prado da Silva

Dentre os materiais bioativos, a hidroxiapatita, Ca10(PO4)6(OH)2 se

Para testes in vitro, so utilizados normalmente testes de

bioatividade em lquido corporal simulado e estudos em cultura de clulas. Os estudos

bioqumicas de atividade celular, avaliao de proliferao, crescimento e morfologia

Por exemplo, para dispositivos que fiquem em contato com o sangue,

esses materiais so:

componentes de dispositivos extracorpreos que removem e retornam sangue do

dispositivos que so inseridos em um vaso sanguneo;

dispositivos que ficam permanentemente implantados.

Para dispositivos de aplicaes em tecidos moles, os materiais se prope a aumentar

As complicaes oriundas dos dispositivos implantados iro

Suportes para dispositivos extra-corpreos

Peptdeos de adeso celular e liberao controlada

Artrias e veias bovinas

Camadas de enxerto vascular, agente de contraste

Recobrimentos em implantes edsseos

Microcirurgia para anastomose de vasos

Metais e Ligas Metlicas

Cermicas, inorgnicos e vidros

Ligao ssea, cirurgia reconstrutiva

baixa Vlvulas cardacas, camadas cardiovasculares

ultra-baixa Camadas em polmeros sensveis temperatura

Materiais potenciais para orifcios, discos e implantes

A seleo do material a ser utilizado deve levar em considerao as propriedades

Resistncia: aplicaes que requerem alta resistncia incluem enxertos de veia

Alguns desses dispositivos requerem propriedades bastante

Mdulo (elasticidade, torso ou flexo: o mdulo de torso e de flexo de

Fadiga: os dispositivos que devem suportar esforos cclicos sem permitir

Esses dispositivos funcionam em sua maioria como implantes

ortopdicos, odontolgicos e cardiovasculares.

Rugosidade: em aplicaes onde desejado baixo atrito, como em implantes de

Absoro de gua: alguns materiais sofrem mudanas dramticas em sua

Bioestabilidade: dispositivos como fios de sutura e liberadores de drogas devem ter

Bioatividade: a bioatividade se refere propriedade inerente a alguns materiais de

Algumas superfcies negativamente

carregadas iniciam a degradao de componentes complementares com o

hidroxiapatita muito utilizada como recobrimento para implantes endosseos.

Esterilizao: o mtodo de esterilizao utilizado pode alterar o estado energtico

II.4.1 HISTRICO DA OSTEOINTEGRAO

Esses estudos foram realizados com uma tcnica de

Em estudos usando microscopia eletrnica de varredura, observou-se a existncia de

A definio aceita atualmente a de Zarb e Albrektsson

Osteointegrao o processo pelo qual a fixao rgida e assintomtica de um

Representao esquemtica da unidade de ancoragem de Branemark,

Quando o implante entra em funo, o osso neo-formado se

remodela segundo a magnitude, direo e frequncia do esforo aplicado. Aps cerca

As etapas de regenerao e remodelamento

Figura 2 Relao dinmica entre implante e osso mandibular (BRANEMARK,

ii. Caractersticas do desenho;

completamente lisas no resultam em boa adeso celular e acabam sendo

No entanto, pode ser que esses requisitos no sejam satisfeitos.

Nesse caso, alternativas so adotadas a fim de se criar as condies favorveis.

Para tanto, utiliza-se baixa velocidade de rotao da broca e

refrigerao abundante. O sobreaquecimento pode causar denaturao de uma

O torque muito elevado no momento da

insero do implante tambm pode causar tenso no osso e uma resposta de