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INSTITUTO DE QUMICA
DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA DE PROCESSOS BIOQUMICOS
BIOTECNOLOGIA EXPERIMENTAL
1. OBJETIVO
Elaborar uma curva padro para determinao da concentrao de glicdios redutores presentes
numa amostra.
Determinar a concentrao de GR e GTRT presentes no caldo de cana de acar e a concentrao
de GRT na soluo padro de sacarose.
2. MATERIAL UTILIZADO
Vidraria: Balo volumtrico, erlenmeyer, becher, pipetas de 1mL, Tubos de Folin Wu.
Reagentes: Nelson A, Nelson B, Nelson C.
Solues: Padro de glicose (1%), padro de sacarose (20%) e caldo de casa de acar.
Espectrofotmetro
3. PROCEDIMENTOS
Nelson A:
Na2CO3 anidro ......................25 g/L
Tartarato de K .......................25 g/L
NaHCO3 ...............................20 g/L
Na2SO4 .................................200 g/L
Nelson B:
CuSO4 . 5 H2O ......................150 g/L (em gua destilada acidificada com H2SO4 20 gotas)
Nelson C:
Molibdato de Amnio ..........50 g/L
H2SO4 concentrado................42 mL/L
NaHAsO4 . 7 H2O .................6 g/L
4. RESULTADOS
Clculos da diluio:
Na tabela 01, encontram-se a leitura das absorbncias em relao a cada concentrao feita aps a
diluio a 540 nm a partir de uma soluo padro de glicose 20 mg/100mL.
Tabela 01: Leitura das absorbncias - glicose
[glicose] (mg/mL) Absorbncias em 540 nm
0 0
0,04 0,035
0,08 0,060
0,12 0,100
0,16 0,145
0,20 0,165
A partir dos valores da tabela 01, pode-se construir o grfico 01: absorbncia x Concentrao, uma
curva padro de comprimento de onda 570 nm.
Na tabela 02, encontram-se a leitura das absorbncias em relao a cada concentrao feita aps a
diluio da cana de acar a 540 nm.
27,97 mg ------ 1 mL
x mg ------ 100 mL x = 2797 mg/100 mL
Diluio 1:100
16,52 mg ----- 1 mL
x mg ----- 100 mL x = 1652 mg/100mL
Diluio 1:250
13,775 mg ----- 1 mL
x mg ----- 100 mL x = 1377,5 mg/mL
Tabela 03: Leitura das absorbncias padro sacarose e caldo de cana natural e hidrolisado
402,17 mg ----- 1 mL
x mg ----- 100 mL x = 40217 mg/100mL = 40,22 g/100 mL
20 g ----- 100%
37 g ----- x x = 185 %
31,88 mg ----- 1 mL
x mg ----- 100 mL x = 3188 mg/100mL = 3,19 g/100mL
423,91 mg ----- 1 mL
x mg ----- 100 mL x = 42391 mg/100mL = 42,39 g/100mL
5. CONCLUSES
Atravs do mtodo de Nelson obtivemos a concentrao de glicdios redutores no caldo de cana. O
valor de GR no caldo de cana obtido atravs das trs diluies era para ser o mesmo, mas devido a
erros experimentais no preparo das diluies, erros de pipetagem, entre outros, houve variao nos
resultados obtidos.
A porcentagem da eficincia da hidrlise cida da soluo padro de sacarose encontrada, de
acordo com os clculos, foi de 1855%, um valor estranho, porque no seria possvel hidrolisar
alm de 100%. No entanto, no havia sacarose disponvel na aula para efetuar tal reao, logo,
acredito que tal erro tenha ocorrido de acordo com algum problema na soluo que j se
encontrava pronta na aula que foi a utilizada para a leitura no espectrofotmetro (ao invs de ser
uma soluo de 20% de sacarose, poderia ser uma de 40% aparentemente). A concentrao de GRT
na soluo padro de sacarose encontrada foi de 40,22 g/100mL. O uso dos reagentes Nelson A, B
e C diferentes do que foram utilizados para a curva padro tambm pode ser uma explicao para o
valor de 185%. A concentrao de GRT obtida no caldo de cana foi de 42,39 g/100mL. A
concentrao de GR no mesmo foi de 3,19 g/100mL. Logo, a concentrao de sacarose no caldo de
cana foi de 37,24 g/100mL.