Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
ARTIGO
Jos Miguel Mller, Renata Lopes dos Santos, Riveli Vieira Brigido
Departamento de Engenharia Qumica e Engenharia de Alimentos, UFSC
TCNICO
e aplicaes inovadoras nas quais este material vem sendo utilizado.
Palavras-chave: Azotobacter, Pseudomonas, alginato, alginato bacteriano, biopolmero.
CIENTFICO
Introduo
O alginato foi caracterizado no final do sculo19 e atualmente isolada de pacientes portadores de fibrose cstica submetidos a
obtido de algas marrons coletadas em regies costeiras no mar. tratamento com antibiticos[1]. Posteriormente foram identificadas
O alginato pode constituir at 40% da massa seca destas algas. bactrias do gnero Azotobacter e Pseudomonas como produtoras
Devido a suas propriedades nicas, para gelificar e espessar deste biopolmero.
solues e atuar como suporte de imobilizao, o material tornou- A descrio da produo por Azotobacter foi realizada em
se um produto de importncia comercial. 1966[2]. No incio dos anos80 foram identificados microrganismos
O alginato amplamente utilizado em alimentos, cosmticos e do gnero Pseudomonas que no apresentaram patogenicidade e
medicamentos e tambm encontra aplicao na indstria txtil e de possuam a capacidade de sintetizar alginato. Os microrganismos
papel. Atualmente vem sendo utilizado em aplicaes inovadoras reportados foram P.florencens, P.mendocina e P.putida[3].
na rea mdica e farmacutica. Em funo de suas caractersticas
A produo de alginato por microrganismos est associada
utilizado como espessante, estabilizante de emulses e de espuma,
ao desenvolvimento de uma caracterstica mucidefenotpica
agente de encapsulao, agente de gelificao, agente de formao
de filmes e de fibras sintticas entre outras possibilidades. O associada formao de extensas colnias denominadas
alginato utilizado atualmente extrado de algas, entretanto a biofilmes[4]. O alginato produzido por microrganismos apresenta
sua produo por microrganismos ir permitir uma explorao caractersticas semelhantes ao extrado de algas e pode tambm ser
controlada de suas fontes naturais. Adicionalmente, a produo utilizado como biomaterial em funo de sua biocompatibilidade[5].
por microrganismos pode ser realizada sob condies controladas, O alginato bacteriano pode substituir o material extrado de algas
usando substratos de qualidade constante e permitindo assim a em suas aplicaes tradicionais e sua utilizao na rea mdica
obteno de materiais especficos com caractersticas uniformes. e farmacutica vem sendo extensamente estudada devido
O alginato bacteriano foi descoberto em 1964, quando foi possibilidade de produzir materiais de alta pureza e tambm
isolado a partir de uma cepamucide de Pseudomonas aeruginosa materiais que apresentem estruturas polimricas especificas[6].
Autor para correspondncia: Jos Miguel Mller, Departamento de Engenharia Qumica, Centro Tecnolgico, Universidade Federal de Santa Catarina,
Campus Universitrio, Crrego Grande, CEP 87020-900, Florianpolis, SC, Brasil, e-mail: jmu@enq.ufsc.br
Estrutura e Propriedades Fsicas do Alginato precursor do cido manurnico que a unidade monomrica do
biopolmero[6,11].
O alginato um copolmero linear constitudo de cidosa-L- A etapa de polimerizao ocorre pela ao de um conjunto de
gulurnicos e b-D-manurnicos com ligaes1-4. O material protenas localizadas na membrana citoplasmtica. As enzimas
varia extensamente em termos de sua proporo entre os resduos
que alteram a estrutura do alginato, como acetilases e epimerases,
manurnicos(M) e gulurnicos(G) bem como em sua estrutura
so encontradas no espao periplsmico destes microrganismos[6].
sequencial e grau de polimerizao. Desta forma, o material
As enzimas denominadas C-5epimerases convertem os resduos
pode apresentar sequncias alternadas de resduosMG e blocos
manurnicos em gulurnicos e as acetilases ligam o grupo acetil
constitudos de dois ou mais resduosMouG[7].
ao bloco manurnico[12]. A sequncia de etapas de biossntese
Para vrias aplicaes nas quais o material utilizado
apresentada na Figura2.
fundamental sua capacidade de formar gis, cujas caractersticas
A cadeia polimrica formada constituda inicialmente de
dependem da proporoM/G e do nmero de ligaes cruzadas
resduos manurnicos. Sequencialmente o polimanuronato
entre as cadeias polimricas. Os gis so formados na presena de
acetilado e epimerizado. Na etapa de acetilao, grupos acetil so
ctions divalentes como Ca++ ou Mg++ e a presena de sequncias
ligados aos carbonos2e/ou3 dos resduos manurnicos[9,13]. Os
de resduosgulurnicos necessria para que apresentem esta
fatores que a afetam esta etapa de biossntese, no esto definidos
capacidade[6]. A interao entre os ons divalentes e os blocos
para ambos os gneros e a presena de grupos acetil sugere uma
gulurnicos forma a estrutura denominada modelocaixade
proteo da ao de epimerases[5,14].
ovos[8].
A ao de epimerases converte o cidoa-L-manurnico
No alginato produzido por bactrias esto presentes tanto os
em seu C-5epmero, cidob-D-gulurnico. Para o gnero
resduos manurnicos como os gulurnicos. Os resduosmanurnicos
Azotobacter foram identificadas sete epimerases que apresentam
podem estar ligados com grupos acetil, no carbono2e/ou3, o que
diferentes padres para converso destes resduos, cuja atividade
os torna parcialmente acetilados (Figura1)[9]. Uma caracterstica
est associada a concentrao de clcio no meio de cultura. Para
apresentada por alginatos produzidos por Pseudomonas a ausncia
Pseudomonas foi somente identificada uma epimerase e os
de resduos ou de blocos constitudos de cidos gulurnicos[7].
fatores que afetam sua atividade ainda no foram definidos[15].
As caractersticas estruturais do material afetam
As epimerases podem ser divididas em dois grupos: um que gera
significativamente seu comportamento reolgico. Assim, as
somente blocos alternados(MG) e outro que forma blocos de
propriedades reolgicas do biopolmero sintetizado por bactrias
resduos gulurnicos(GG). A ao destas enzimas possibilita a
esto associadas ao grau de polimerizao, s complexas interaes
elaborao de alginatos que no apresentam blocos de resduos
entre ons e os resduosgulurnicose manurnicos e ao grau de
manurnicos(MM)[16].
acetilao. A fora do gel formado ir depender do nmero e da
Os genes necessrios para biossntese de alginato, denominados
extenso dos blocos de resduosgulurnicos ao longo da cadeia
alg, esto distribudos no GrupoI de homologia de Pseudomonas
polimrica e da concentrao de ons presentes[7]. A presena de
da linhagem Azotobacter-Azomonas[17]. Estudos realizados com
grupos acetil confere ao material biossintetizado caractersticas
estas bactrias indicam que o controle da biossntese de alginato
viscoelsticas mais pronunciadas[10].
em Pseudomonas aeruginosa, envolve pelo menos 24 genes, sendo
que dois, alg8 e alg44, apresentam papel fundamental no processo
Biossntese do Alginato por Microrganismos
de polimerizao. A ordem fsica e a distribuio dos genesalg
Na literatura, somente os gnerosPseudomonase Azotobacter em Pseudomonas e A.vinelandii so idnticas as encontradas em
so reportados como produtores de alginato, que para sua sntese Pseudomonas aeruginosa[5,17].
utilizam diferentes fontes de carbono. A metabolizao dos acares Modificaes genticas indicam que a ausncia de um nico
que formam sua estrutura segue a via de Entner-Doudurof, onde destes genes suficiente para que o microrganismo produza
frutose ou frutose1-6 bifosfato so convertidas em Frutose6-fosfato somente cidos urnicos[18]. Estudos observaram tambm que em
que metabolizada ao nucleotdeo manose1-fosfato. O nuclotdeo Pseudomonas a ausncia do genealgG faz com que o alginato
convertido em guanosina difosfato manose(GDPmanose) produzido possua somente resduos manurnicos[19].
Figura 1. Alginato sintetizado por micro-organismos. MOAc: resduo manurnico acetilado; M: resduo manurnico; e G: resduo gulornico.
Na indstria txtil a utilizao do alginato melhora o Novas possibilidades de aplicao de alginatos de alta
desempenho das tintas utilizadas nos processos de impresso qualidade envolvem sua utilizao no transplante de clulas. Entre
favorecendo a aderncia e a deposio destes materiais sobre os os estudos apresentados na literatura reportada sua utilizao
tecidos. Na indstria de papel a adio de alginato permite que as para imobilizar clulas produtoras de insulina para reverso de
propriedades para impresso destes materiais tambm melhorem[6]. diabetestipoI e para elaborar cpsulas de alginato/poli-L-lisina
Algumas aplicaes promissoras do alginato incluem sua contendo Ilhotasde Langerhans, que so avaliadas atualmente como
utilizao em filmes bioativos para cobertura de alimentos e na pncreas endcrinobioartificial[6,26]. Um gel formado por alginato
elaborao de alimentos reestruturados onde pode ser utilizado em modificado com peptdeos para permitir sua ligao com heparina,
polpas de frutas, de vegetais e em carnes. A adio de alginato em tambm reportado como suporte para liberao controlada
massas proporciona um melhoramento das propriedades de pasta, de fatores angiognicos. Os estudos demonstraram o potencial
modifica as caractersticas reolgicas e a textura do material, retarda teraputico deste material na promoo da angiognese, bem como
a retrogradao e aumenta a capacidade de hidratao do amido[25]. na engenharia tecidual[36].
O alginato utilizado em aplicaes na rea mdica. Vrios Para o conjunto de aplicaes do alginato, os materiais extrados
produtos farmacuticos so imobilizados em alginato. Sua de diferentes partes das algas, ou submetidos a fracionamento,
utilizao como excipiente de liberao de medicamentos, curativos atendem a maioria das necessidades. Entretanto, algumas aplicaes
inteligentes, em formulaes para preveno de refluxo gstrico, na rea mdica e farmacutica necessitam de materiais homogneos
bem como materiais de impresso dental, j conhecida. com caractersticas especficas, que somente podem ser obtidos pela
Estudos recentes avaliam o potencial de estruturas produo do material por microrganismos.
homopolimricas de alginato. Entre aplicaes reportadas na O entendimento de fatores que determinam as propriedades do
literatura para estes materiais, est o estmulo a clulas do sistema alginato bacteriano, como a distribuio e sequncia dos blocos que
imune, como citoquinas, interleucina1, interleucina6 e fator o constituem, grau de acetilao e a possibilidade de modificar sua
de necrose tumoralalfa, cuja resposta est associada estrutura estrutura, ir ampliar as possibilidades de projetar alginatos para
sequencial de biopolmeros constitudos exclusivamente de aplicaes especficas[5].
grupos manurnicos[6]. Estruturas constitudas somente de grupos
gulurnicos foram propostas para o tratamento de pacientes Aspectos Econmicos e Produo Industrial
portadores de fibrose cstica em funo de sua capacidade de
modificar as caractersticas reolgicas da mucina[26]. O alginato extrado de algas comercializado por US$5-20kg1,
O alginato apresenta boas caractersticas para formao de para suas aplicaes usuais[5]. A produo de alginato bacteriano,
nanocpsulas e tem sido extensamente avaliado para formao de pode ter por referncia outros biopolmeros j comercializados,
partculas com tamanhos na faixa de 100a2mm para liberao entre os quais se encontram xantana e gelana.
de diferentes materiais[27]. Nanopartculas contendo alginato, Os custos de produo de biopolmeros dependem do
usadas na liberao controlada de inibidores de proteases[28] rendimento obtido da fonte de carbono utilizada, dos custos relativos
e na liberao de insulina[29], apresentaram bom desempenho ao processo de produo e de etapas posteriores de separao. A
na liberao destes medicamentos. Algumas proposies so possibilidade de usar fontes de carbono de resduos de processos
inovadoras, como, por exemplo, seu uso em partculas inalveis ou industriais, como glicerol, melaos ou soro de queijo, apresenta-se
em partculas magnticas. A avaliao de nanopartculas inalveis tambm como uma opo interessante para reduo de custos.
de alginato indicou que o material pode ser um carreador ideal A aplicao final do biopolmero tambm determinante nos
para medicamentos no tratamento de doenas respiratrias[30]. A custos do material, pois os processos de purificao, conhecidos
combinao das propriedades magnticas de nanopartculas de ferro como processosdedownstream, so os que mais contribuem no
com a biocompatibilidade do alginato resultou em um material que preo de comercializao do produto.
pode ser usado como suporte de medicamentos cuja liberao pode Para produo industrial deste biopolmero importante
ser controlada atravs de estmulos externos[31]. otimizar o processo de produo, de forma a alcanar rendimentos
O biopolmero usado na elaborao de hidrogel de alginato, apresentados por biopolmeros como a xantana, cuja concentrao
material utilizado em engenharia tecidual. Trata-se de um suporte chega a 30g.L1 no meio de fermentao[5]. Estudos realizados com
tridimensional para clulas, tambm conhecidocomo scaffold, cujas Azotobacter vinelandii ou Pseudomonas reportam concentraes
caractersticas de firmeza, ligao e liberao de molculas bioativas menores do biopolmero ao final do processo fermentativo para
e de dissoluo podem ser controladas a partir de modificaes ambos os gneros. Os melhores parmetros de concentrao
fsico-qumicas do biopolmero ou mesmo sobre os gis formados de biopolmero, rendimento de bioconverso e produtividade,
a partir do alginato[32]. Um exemplo desta possibilidade a reportados em processos de produo de alginato so mostrados na
imobilizao de clulas tronco em scaffolds construdos com Tabela1.
alginato, onde observou-se que materiais com maiores propores Os resultados referem-se a experimentos realizados em
de resduos gulurnicos so mais adequados para este fim[33]. laboratrio em fermentadores cujo volume til de at 5L. A
O alginato tem sido tambm utilizado em combinao produo de alginato em escala piloto, com Pseudomonassp.
com outros materiais principalmente nas reas biotecnolgica modificada geneticamente, foi recentemente iniciada pela empresa
e biomdica. Compsitos de alginato como alginato-
ProgenesisTechnologiesLLC incubada na Universidade de
PEGAc(alginato de polietilenoglicolacrilato), um gel que combina
Marshall nos EUA, entretanto no so informados detalhes do
as propriedades do alginato com as caractersticas mucoadesivas
processo no site da empresa.
do polietilenoglicol, demonstram que o material no apresenta
citotoxicidade[34]. Compsitos de colgeno, contendo albumina Perspectivas Futuras para Produo de Alginato Bacteriano
encapsulada em esferas de alginato foram utilizados como suporte
para o crescimento de clulas epiteliais da crnea; o material obtido As principais fontes para produo comercial de alginato so
apresentou biocompatibilidade e excelentes caractersticas de algas marinhas. As algas das quais extrado, Laminaria hyperborea
claridade tica e resistncia mecnica[35]. e Macrocystis pyrifera, fazem parte de um exuberante ecossistema
25. Lee, S.; Bae, I. N.; Jung, J.; Jang, K.; Kim, Y. W. & Lee, H. G. - J. 35. Liu, W.; Griffith, M. & Li, F. - J. Mater. Sci: Mater. Med.,19, p.3365
Text. Stud.,39, p.393 (2008). http://dx.doi.org/10.1111/j.1745- (2008). http://dx.doi.org/10.1007/s10856-008-3486-2
4603.2008.00149.x 36. Lee, K. Y.; Nishishita, N.; Hirano, Y. & Mooney, D. - Key Eng.
26. Draget, K. & Taylor, C. - Food Hydrocoll.,23, p.1 (2009). Mat.,342-343, p.517 (2007). http://dx.doi.org/10.4028/www.scientific.
27. Lertsutthiwong, P.; Noomun, K.; Jongaroonngamsang, N.; Rojsitthisak, net/KEM.342-343.517
P. & Nimmannit, U. - Carbohy. Pol.,74, p.209 (2008). http://dx.doi. 37. Chen, W. P.; Chen, J. Y.; Chang, S. C. & Su, C. L. - App. Env.
org/10.1016/j.carbpol.2008.02.009
Microb.,49, p.543 (1985).
28. Angshuman, B.; Bhadttacharjee, S. K.; Mahanta, R.; Biswanath, M.
38. Hacking, A. J.; Taylor, W. F.; Jarman, T. R. & Govan, J. R. W. - J. Gen.
&Bandyopadhayay, S. K. - J. Glob. Pharma. Techn.,2, p.126 (2010).
Microbiol.,129, p.3473 (1983).
29. Sarmento, B.; Ribeiro, A. J.; Veiga, F.; Ferreira, D. C. & Neufeld, R.
39. Conti, E.; Flaibani, A. ORegan, M. & Sutherland, I. W. -
J. - J. Nanosc. Nanotech.,7, p.2833 (2007). http://dx.doi.org/10.1166/
jnn.2007.609 Microbiol., 140, p.1125 (1994). http://dx.doi.org/10.1099/13500872-
140-5-1125
30. Ahmad, Z.; Sharma, S. & Khuller, G. K. - Int. J. Antimicrob. Agents.,4,
p.298 (2005). 40. Linga, S. D.; Johnson, C. R.;Frusherb, S. D.; Ridgway, K. R.; Purcell,
31. Finotelli, P. V.; Sampaio, D. A.; Morales, M. A.; Rossi, A. M. & Rocha- E. K.; Singh, A. & Kipke, D. R. - PNAS,106, p.22341 (2009).
Leo, M. H. - Braz. J. Chem. Eng.,25, p.443 (2008). 41. Steneck, R. S.; Vavrinec, J. & Leland, A.V. - Ecosyst.,7, p.323 (2004).
32. Augst, A. D.; Kong, H. J. & Mooney, D. J. - Macromol. Biosci.,6, p.623 42. Rehm, B. H. A.- Nature,8, p.578 (2010).
(2006). http://dx.doi.org/10.1002/mabi.200600069 Enviado: 23/08/10
33. Purcell, E. K.; Singh, A. &Kipke, D. R. - Tissue Eng.,15, p.541 (2009). Reenviado: 25/01/11
34. Davidovich-Pinhas, M. & Bianco-Peled, H. - Acta Biomat.,7, p.625 Aceito: 07/02/11
(2011). http://dx.doi.org/10.1016/j.actbio.2010.09.021 DDOI: 10.1590/S0104-14282011005000051