Quim. Nova, Vol. 25, No.

5, 772-776, 2002 BIOSSURFACTANTES: PROPRIEDADES E APLICAES

Reviso

Marcia Nitschke* e Glucia Maria Pastore Departamento de Cincia de Alimentos, Faculdade de Engenharia de Alimentos, Universidade Estadual de Campinas, CP 6121, 13083-970 Campinas - SP Recebido em 2/5/01; aceito em 11/3/02

BIOSURFACTANTS: PROPERTIES AND APPLICATIONS. Chemically synthesized surfactants are widely used for many purposes in almost every sector of modern industry. Surface-active compounds of biological origin (biosurfactants) have been gaining attention in recent years because of some advantages such as biodegradability, low toxicity, diversity of applications and functionality under extreme conditions. Microbial biosurfactants are useful in bioremediation of water and soil, enhanced oil recovery, and in many formulations of petrochemical, chemical, pharmaceutical, food, cosmetic and textile industries. The importance of biosurfactants, their characteristics and industrial applications are discussed. Keywords: biosurfactants; surfactants; surface-active compounds.

INTRODUO Os surfactantes constituem uma classe importante de compostos qumicos amplamente utilizados em diversos setores industriais. A grande maioria dos surfactantes disponveis comercialmente so sintetizados a partir de derivados de petrleo. Entretanto, o crescimento da preocupao ambiental entre os consumidores, combinado com novas legislaes de controle do meio ambiente levaram procura por surfactantes naturais como alternativa aos produtos existentes. Os surfactantes so molculas anfipticas constitudas de uma poro hidrofbica e uma poro hidroflica. A poro apolar freqentemente uma cadeia hidrocarbonada enquanto a poro polar pode ser inica (aninica ou catinica), no-inica ou anfotrica1. Alguns exemplos de surfactantes inicos utilizados comercialmente incluem steres sulfatados ou sulfatos de cidos graxos (aninicos) e sais de amnio quaternrio (catinico). Em funo da presena de grupos hidroflicos e hidrofbicos na mesma molcula, os surfactantes tendem a se distribuir nas interfaces entre fases fluidas com diferentes graus de polaridade (leo/gua e gua/leo). A formao de um filme molecular, ordenado nas interfaces, reduz a tenso interfacial e superficial, sendo responsvel pelas propriedades nicas dos surfactantes. Estas propriedades fazem os surfactantes serem adequados para uma ampla gama de aplicaes industriais envolvendo: detergncia, emulsificao, lubrificao, capacidade espumante, capacidade molhante, solubilizao e disperso de fases. A maior utilizao dos surfactantes se concentra na indstria de produtos de limpeza (sabes e detergentes), na indstria de petrleo e na indstria de cosmticos e produtos de higiene. A produo mundial de surfactantes excede 3 milhes de toneladas por ano2, sendo a maioria utilizada como matria-prima para fabricao de detergentes de uso domstico. Vrios compostos com propriedades tenso-ativas so sintetizados por organismos vivos, desde plantas (saponinas) at microrganismos (glicolipdios) e tambm no organismo humano (sais biliares), sendo considerados surfactantes naturais3. Atualmente, nos pases industrializados 70-75% dos surfactantes consumidos so de origem petroqumica, enquanto que nos pases em desenvolvimento os compostos de origem natural predominam3. En*e-mail: nitschke@bol.com.br

tretanto, nos pases industrializados existe uma tendncia para a substituio dos surfactantes sintticos pelos naturais. Esta tendncia movida pela necessidade de produtos mais brandos, pela necessidade de substituio de compostos no biodegradveis (alquil benzenos ramificados) e pelo aumento da especificidade dos produtos. Os compostos de origem microbiana que exibem propriedades surfactantes, isto , diminuem a tenso superficial e possuem alta capacidade emulsificante, so denominados biossurfactantes4 e consistem em subprodutos metablicos de bactrias, fungos e leveduras. Este trabalho tem por objetivo revisar os principais aspectos relacionados estrutura qumica, origem, propriedades e usos dos biossurfactantes. CLASSIFICAO E NATUREZA QUMICA DOS BIOSSURFACTANTES Os biossurfactantes constituem uma das principais classes de surfactantes naturais (Tabela 1), sendo classificados de acordo com a sua composio qumica e sua origem microbiana. As principais classes incluem glicolip dios, lipopept dios e lipoprote nas, fosfolipdios e cidos graxos, surfactantes polimricos e surfactantes particulados5. Tabela 1. Principais grupos de surfactantes de origem natural e sinttica Naturais Alquil poliglicosdeos Biossurfactantes Amidas de cidos graxos Aminas de cidos graxos Glucamidas Lecitinas Derivados de protenas Saponinas Sorbitol e steres de sorbitan steres de sacarose Sulfatos de lcoois graxos naturais Sintticos Alcanolaminas Alquil e aril ter carboxilatos Alquil aril sulfatos Alquil aril ter sulfatos Alquil etoxilados Alquil sulfonatos Alquil fenol etoxilados Aminoxidos Betanas Co-polmeros de xido de etil/propileno cidos graxos etoxilados

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Os biossurfactantes polimricos so constitudos por diversos grupos qumicos diferentes como, por exemplo, o emulsan (Figura 1), no qual cidos graxos est o ligados a um esqueleto de heteropolissacardeos6, ou o liposan de C. lipolytica, constitudo por carboidratos e protenas7.

Tabela 2. Principais classes de biossurfactantes e microrganismos envolvidos1 Tipo de Biossurfactante Glicolipdios - ramnolipdios - soforolipdios - trehalolipdios Lipopeptdios e lipoprotenas - Peptdio-lipdio - Viscosina - Serrawetina - Surfactina - Subtilisina - Gramicidina - Polimixina cidos graxos, lipdios neutros e fosfolipdios - cidos graxos - Lipdios neutros - Fosfolipdios Surfactantes polimricos - emulsan - biodispersan - liposan - carboidrato-lipdio-protena - manana-lipdio-protena Surfactantes particulados - vesculas - clulas Microrganismo Pseudomonas aeruginosa Torulopsis bombicola, T. apicola Rhodococcus erythropolis, Mycobacterium sp. Bacillus licheniformis Pseudomonas fluorescens Serratia marcescens Bacillus subtilis Bacillus subtilis Bacillus brevis Bacillus polymyxa

Corynebacterium lepus Nocardia erythropolis Thiobacillus thiooxidans Acinetobacter calcoaceticus Acinetobacter calcoaceticus Candida lipolytica Pseudomonas fluorescens Candida tropicalis Acinetobacter calcoaceticus Vrias bactrias

Figura 1. Estruturas qumicas de alguns biossurfactantes4

Algumas clulas microbianas apresentam elevada hidrofobicidade superficial, sendo consideradas por si s como biossurfactantes, como por exemplo, microrganismos degradadores de hidrocarbonetos, algumas espcies de Cyanobacteria e alguns patgenos como S. aureus e Serratia sp.. Bactrias do gnero Acinetobacter sp. produzem vesculas extracelulares que tem funo importante na captao de alcanos para a clula, possuindo elevada atividade surfactante8. As vesculas e clulas microbianas com atividade surfactante so classificadas como biossurfactantes particulados. Os biossurfactantes possuem uma estrutura comum: uma poro lipoflica usualmente composta por cadeia hidrocarbnica de um ou mais cidos graxos, que podem ser saturados, insaturados, hidroxilados ou ramificados, ligados uma poro hidroflica, que pode ser um ster, um grupo hidrxi, fosfato, carboxilato ou carboidrato 3,4. A maioria dos biossurfactantes so neutros, ou aninicos variando desde pequenos cidos graxos at grandes polmeros ( Tabela 2). FUNO FISIOLGICA DOS BIOSSURFACTANTES Embora a exata funo fisiolgica dos biossurfactantes ainda no tenha sido completamente elucidada, algumas funes tm sido atribudas: - emulsificao e solubilizao de hidrocarbonetos ou compostos insolveis em gua, facilitando o crescimento de microrganismos nestes substratos9. Porm, cepas de Bacillus subtilis produzem surfactantes apenas em substratos hidrossolveis10;

transporte de hidrocarbonetos: funo atribuda aos biossurfactantes ligados parede celular de Candida tropicalis11, onde um aumento significativo da poro lipdica do polissacardeo de membrana foi detectado quando o microrganismo crescia em alcanos, indicando que o complexo polissacardeo-cido-graxo presente na superfcie celular estaria envolvido no transporte de hidrocarbonetos; aderncia-liberao da clula a superfcies: uma das mais importantes estratgias de sobrevivncia dos microrganismos sua habilidade em colonizar um nicho ecolgico onde possa se multiplicar. O elemento chave nesta estratgia so estruturas da superfcie celular responsveis pela aderncia das clulas superfcies. Os microrganismos podem utilizar surfactantes ligados parede para regular as propriedades da superfcie celular, visando aderir ou se desligar de um determinado local de acordo com sua necessidade para encontrar novos habitats com maior disponibilidade de nutrientes ou se livrar de ambientes desfavorveis12; atividade antibitica: demonstrada por vrios biossurfactantes, principalmente da classe dos lipopeptdios e glicopeptdios. Os ramnolipdios de P. aeruginosa e a surfactina (Figura 1) de B. subtilis funcionam como antibiticos, solubilizando os principais componentes das membranas celulares microbianas. Atravs da excreo destes biossurfactantes no meio, os microrganismos adquirem maior chance de sobreviv ncia e maior competitividade na busca por nutrientes13.

PROPRIEDADES DOS BIOSSURFACTANTES Apesar da diversidade de composio qumica e propriedades, algumas caractersticas so comuns maioria dos biossurfactantes.

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Muitas destas caracter sticas representam vantagens sobre os surfactantes convencionais3: - atividade superficial e interfacial: os biossurfactantes so mais eficientes e mais efetivos do que os surfactantes convencionais (detergentes aninicos sulfatados) pois produzem menor tenso superficial em menores concentraes de biossurfactante14. A concentrao micelar crtica (CMC) dos biossurfactantes (medida de sua eficincia) varia entre 1-2000mg/L, enquanto que a tenso interfacial (leo/gua) e superficial fica em torno de 1 e 30 mN/m respectivamente3; - tolerncia temperatura, pH e fora inica: alguns biossurfactantes apresentam elevada estabilidade trmica e de pH podendo ser utilizados em ambientes com condies mais drsticas. O lipopeptdio de B. licheniformis JF-2 estvel a temperaturas em torno de 75 C por at 140 h e pH entre 5 e 1216. Os biossurfactantes suportam concentraes de 10% de NaCl enquanto que uma concentrao salina de 2-3% suficiente para inativar surfactantes convencionais3; - biodegradabilidade: diferentes dos surfactantes qumicos os biossurfactantes so facilmente degradveis na gua e no solo, o que os torna adequados para aplicaes como biorremediao e tratamento de resduos15; - baixa toxicidade: os biossurfactantes tm recebido maior ateno tambm devido crescente preocupao da populao com os efeitos alrgicos dos produtos artificiais4; alm disto, sua baixa toxicidade permite o uso em alimentos, cosmticos e produtos farmacuticos17. Os biossurfactantes tambm apresentam a vantagem de poderem ser sintetizados a partir de substratos renovveis e possurem grande diversidade qumica, possibilitando aplicaes especficas para cada caso particular1. Alm disto, possuem caractersticas estruturais e propriedades fsicas distintas, o que os torna comparveis ou superiores aos surfactantes sintticos em termos de eficincia18. Outra vantagem reside no fato de serem compostos que no so derivados de petrleo, fator importante medida que os preos do petrleo aumentam. A possibilidade de modificao da estrutura qumica e das propriedades fsicas dos biossurfactantes atravs de manipulaes genticas, biolgicas ou qumicas permite o desenvolvimento de produtos para necessidades especficas. APLICAES INDUSTRIAIS O maior mercado para os biossurfactantes a indstria petrolfera, onde so utilizados na produo de petrleo ou incorporados em formulaes de leos lubrificantes19. Outras aplicaes incluem biorremediao e disperso no derramamento de leos, remoo e mobilizao de resduos de leo em tanques de estocagem, e a recuperao melhorada de petrleo. Porm, atualmente, as aplicaes se distribuem entre os mais diversos setores industriais. Biorremediao Os acidentes com derramamento de leo se tornaram numerosos e tm causado muitos problemas ecolgicos e sociais. Como os biossurfactantes aumentam a interao superficial A/O, aceleram a degradao de vrios leos por microrganismos e promovem a biorremediao de guas e solos20. A capacidade dos biossurfactantes em emulsificar e dispersar hidrocarbonetos em gua aumenta a degradao destes compostos no ambiente. Uma vez que microrganismos degradadores esto presentes em oceanos, a biodegradao constitui um dos mtodos mais eficientes de remoo de poluentes; entretanto, os estudos ainda ocorrem n vel laboratorial e a biorremediao de oceanos utilizando biossurfactantes permanece

ainda como um desafio21. Os biossurfactantes podem ser usados diretamente para emulsificar e aumentar a solubilidade de contaminantes hidrofbicos no solo. Alternativamente, podem ser utilizados microrganismos produtores ou a adio de fatores de crescimento de microrganismos selvagens capazes de produzir estes compostos22. Alguns estudos demonstraram o aumento da biodisponibilidade de compostos aromticos pouco solveis como os aromticos policclicos (HPA) pelo uso de biossurfactantes. O tratamento de amostras contaminadas por fenantreno 23 e naftaleno 24 com biossurfactantes resultou em aumento nas suas taxas de mineralizao e solubilizao. O uso de biossurfactantes na biodegradao de pesticidas vem sendo objeto de investigao. A degradao de hexaclorociclohexano por surfactante produzido por Pseudomonas foi relatada, sendo que outros organoclorados como DDT e ciclodienos tambm foram emulsificados em menor grau25. Os biossurfactantes tambm so teis na biorremediao de locais contaminados com metais pesados txicos como urnio, cdmio e chumbo26. Surfactantes produzidos por Arthrobacter, Pseudomonas, Corynebacterium e B. subtilis demonstraram resultados promissores na remoo de piche em areias contaminadas3. Limpeza de reservatrios de leos Resduos e fraes de leos pesados que sedimentam no fundo de tanques de estocagem so altamente viscosos e podem se tornar depsitos slidos que no so removidos atravs de bombeamento convencional. A remoo requer lavagem com solventes ou limpeza manual, ambas perigosas, demoradas e caras. Um processo alternativo de limpeza o uso de biossurfactantes que promovem a diminuio na viscosidade e a formao de emulses O/A, facilitando o bombeamento dos resduos e a recuperao do leo cru aps quebra da emulso. Os slidos resultantes carregam uma quantidade limitada de leo residual pela ao detergente do biossurfactante, tornando o descarte destes resduos menos problemtico3. A utilizao de biossurfactantes para a limpeza de tanques, em substituio aos surfactantes convencionais, promoveu a limpeza e recuperao de 90% dos hidrocarbonetos presentes no resduo27. Recuperao melhorada do petrleo (MEOR) A MEOR consiste em uma tecnologia de recuperao terciria do petrleo que utiliza microrganismos ou produtos de seu metabolismo para a recuperao de leo residual28. Os microrganismos produzem polmeros e surfactantes que reduzem a tenso superficial leo-rocha, reduzindo as foras capilares que impedem a movimentao do leo atravs dos poros da rocha. Os biossurfactantes tambm auxiliam na emulsificao e na quebra dos filmes de leo das rochas28. O mecanismo de MEOR in situ deve-se provavelmente a mltiplos efeitos dos microrganismos no ambiente e no leo. Estes efeitos incluem: formao de gs e aumento da presso; produo de cido e degradao da matriz calcrea; reduo na viscosidade do leo e da tenso interfacial pela produo de biossurfactantes; produo de solventes; degradao de macromolculas do leo, resultando em diminuio da viscosidade; bloqueio seletivo da biomassa nas zonas de alta permeabilidade29,30. A utilizao de biossurfactantes em MEOR envolve vrias estratgias, como a injeo de microrganismos produtores de biossurfactantes no reservatrio e subseqente propagao in situ; ou a injeo de nutrientes no reservatrio, estimulando o crescimento de microrganismos selvagens produtores de surfactantes; ou, ainda, a produo de biossurfactantes em reatores e posterior injeo no reservat-

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rio28. A ltima estratgia mais cara devido necessidade de capital para produo, purificao e introduo do biossurfactante31. As outras requerem que o reservatrio contenha bactrias capazes de produzir quantidades suficientes de biossurfactantes32. Para ser til na MEOR in situ os microrganismos devem ser aptos a crescer em condies extremas, como alta temperatura, presso, salinidade e baixa tenso de oxignio25. Muitos microrganismos adaptados a condies extremas, com capacidade para recuperao de leo cru tm sido isolados e estudados33. Aplicaes teraputicas A surfactina, um dos mais conhecidos biossurfactantes, possui vrias aplicaes farmacuticas como a inibio da formao de cogulos; forma o de canais i nicos em membranas; atividade antibacteriana e antifngica; atividade antiviral e antitumoral34,35. O biossurfactante produzido por R. erythropolis inibiu o vrus do herpes simples e vrus parainfluenza36. A iturina, lipopeptdio produzido por B. subtilis, demonstrou atividade antifngica, afetando a morfologia e a estrutura da membrana celular de leveduras37. A inibio da adeso de bactrias entricas patognicas por biossurfactante produzido por Lactobacillus foi relatada. Os autores sugeriram o desenvolvimento de agentes antiadesivos para uso em cateteres visando diminuir a formao de biofilmes38. Biossurfactantes na agricultura Os biossurfactantes so usados na agricultura especialmente em formulaes de herbicidas e pesticidas. Os compostos ativos destas formulaes so geralmente hidrofbicos, sendo necessrios agentes emulsificantes para dispers -los em solu es aquosas 13. Surfactantes de Bacillus foram utilizados para emulsificar formulaes de pesticidas organofosforados imiscveis39. Os rhamnolipdios possuem potencial para o controle biolgico de fitopatgenos que produzem zosporos40. Biossurfactantes na minerao Compostos tenso-ativos produzidos por culturas de Pseudomonas sp. e Alcaligenes sp. foram utilizados para flotao e separao de calcita e eschelita. A recuperao foi de 95% para CaWO4 e 30% para CaCO3, ressaltando que reagentes qumicos convencionais so incapazes de separar estes dois minerais 41. O biodispersan, polissacardeo aninico, produzido por A. calcoaceticus A2, foi utilizado na preveno da floculao e disperso de misturas de pedra calcrea e gua42. Biossurfactantes de C. bombicola demonstraram eficincia na solubilizao de carvo43. Produtos de higiene e cosmticos Devido a sua compatibilidade com a pele, os biossurfactantes podem ser usados em produtos de higiene e cosmticos44. Um produto comercial que continha 1 mol de soforolipdios e 12 moles de propilenoglicol, apresentou excelente compatibilidade drmica, sendo utilizado como hidratante em cremes faciais45. Alguns soforolipdios (Figura 1) so utilizados como umectantes para incorporao em produtos de maquiagem. A KAO Co. Ltda desenvolveu um processo fermentativo para produo de soforolipdios, que posteriormente sofrem esterificao, resultando em um produto com aplicao em batons e como hidratante para pele e cabelos1. A preparao de biossurfactantes pela ao enzimtica (principalmente lipases) sobre molculas hidrofbicas promoveu um novo

direcionamento na produo destes compostos, principalmente para utilizao em produtos de higiene e cosmticos32. Indstria de alimentos A emulsificao tem um papel importante na formao da consistncia e textura, bem como na disperso de fase32 e na solubilizao de aromas2. Os biossurfactantes so utilizados como emulsionantes no processamento de matrias-primas. Os agentes tenso-ativos encontram aplicao em panificao e produtos derivados de carne, onde influenciam as caracter sticas reolgicas da farinha e a emulsificao de gorduras46. O bioemulsificante produzido por C. utilis tem sido utilizado em molhos prontos para saladas47. Outras aplicaes Outros campos de utilizao dos biossurfactantes incluem a indstria de papel, txtil e cermica. O biodispersan tem aplicao na indstria de tintas,12 pois gera maior espalhabilidade e aumenta as propriedades de mistura. As propriedades de estabilizao de espuma so necessrias na fabricao de extintores de incndio18. A Tabela 3 mostra um resumo das funes e aplicaes industriais dos biossurfactantes. Tabela 3. Principais aplicaes comerciais dos biossurfactantes 2,32 Funes Emulsionantes e dispersantes Campos de aplicao

Cosmticos, tintas, biorremediao, leos, alimentos Solubilizantes Produtos farmacuticos e de higiene Agentes molhantes e penetrantes Produtos farmacuticos, txteis e tintas Detergentes Produtos de limpeza, agricultura Agentes espumantes Produtos de higiene, cosmticos e flotao de minrios Agentes espessantes Tintas e alimentos Seqestrantes de metais Minerao Formadores de vesculas Cosmticos e sistemas de liberao de drogas Fator de crescimento microbiano Tratamento de resduos oleosos Demulsificantes Tratamento de resduos, recuperao de petrleo Redutores de viscosidade Transporte em tubulaes, oleodutos Dispersantes Misturas carvo-gua, calcreo-gua Fungicida Controle biolgico de fitopatgenos Agente de recuperao Recuperao terciria de petrleo (MEOR)

CONCLUSES Os biossurfactantes apresentam diversas vantagens em relao aos surfactantes sintticos, podendo ser utilizados em uma gama de aplicaes industriais; entretanto, ainda no so amplamente utilizados devido aos altos custos de produo, associados a mtodos ineficientes de recuperao do produto e ao uso de substratos caros.

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O problema econmico da produo de biossurfactantes pode ser significativamente reduzido atravs do uso de fontes alternativas de nutrientes, facilmente disponveis e de baixo custo. Uma possvel alternativa seria o uso de subprodutos agrcolas ou de processamento industrial. Com o aumento dos esforos no desenvolvimento de novas tecnologias de aplicao, no melhoramento das linhagens e dos processos de produo, e devido sua versatilidade, biodegradabilidade e baixa toxicidade, os biossurfactantes podero se tornar compostos de uso comum nas indstrias em um futuro prximo. REFERNCIAS
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