Curso: Qumica Tecnolgica e Industrial
Disciplina: Laboratrio de Qumica Orgnica
Semestre Letivo: 2016.2
UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALAGOAS
INSTITUTO DE QUMICA E BIOTECNOLOGIA
Professora: Maria Ester de S Barreto Barros
Roteiro Experimento 5: Cromatografia Separao dos Pigmentos do Colorau.
1. Objetivos:
Separar por cromatografia lquida os
pigmentos do colorau, e analisar as fraes
obtidas por cromatografia em camada
delgada.
2. Procedimento Experimental
2.1. Cromatografia Lquida (CL)
Fixar numa garra fixada a um
suporte universal uma pipeta de
Pasteur na posio vertical;
Colocar um pouco de algodo no
fundo da pipeta (cuidado para no
colocar muito algodo no
pression-lo, isso poder tornar o
fluxo de solvente lento);
Com o auxlio de uma esptula,
adicionar gel de slica na pipeta at
uma altura de 5,0 cm. (OBS.: O
gel de slica preparado
adicionando-se hexano slica.
Este gel ser preparado para todos
os grupos pela professora.);
Empacotar a coluna dando leves
pancadas na pipeta;
Adicionar o colorau em p acima
da camada de gel de slica (em
torno de 0,5 cm);
Adicionar mais uma pequena
quantidade de algodo acima da
camada de colorau;
Com o auxlio de uma proveta,
medir 4,0 mL de hexano e
adicion-lo lentamente coluna;
Coletar todo o hexano em um tubo
de ensaio e rotul-lo como F1;
Sem deixar a coluna secar, quando
o hexano estiver terminando,
adicione 3,0 mL de diclorometano
coluna;
Coletar esta frao em um novo
tubo de ensaio rotulado como F2;
Sem deixar a coluna secar, quando
o diclorometano estiver
terminando, adicione 3,0 mL de
acetato de etila coluna;
Coletar esta frao em um novo
tubo de ensaio rotulado como F3.
2.2. Cromatografia em Camada Delgada
(CCD)
2.2.1. Preparao da Placa
Cortar duas placas de slica de
dimenses 5,5 x 2,5 cm (como
mostra a figura abaixo). Utilizar
estilete com lmina afiada para
fazer o corte;
Delimitar as linhas de aplicao
(inferior distanciada 1,0 cm da
extremidade da placa) e de fim da
eluio (superior distanciada 0,5
cm do topo da placa, como mostra
a figura abaixo);
Marcar na linha de aplicao as
posies onde sero aplicadas as
fraes (distanciadas a pelo menos
0,5 cm).
2.2.2. Aplicao das Fraes
A cada tubo de ensaio contendo as
fraes F1. F2 e F3, adicione 0,5
mL de diclorometano e agite o
tubo;
A um quarto tubo de ensaio
adicione uma pequena poro de
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colorau (ponta de esptula) e 3,0 clorofrmio:metanol como
mL de diclorometano. Identifique eluente.
esse tubo como M;
Encostar o capilar na soluo da
frao M para colet-la;
Toque rapidamente o capilar na
marca destinada frao M da
placa. Repita esse procedimento
por 10 vezes;
Lave o capilar 10 vezes em
diclorometano; 3. Referncias Bibliogrficas
Repita a aplicao com as fraes
ENGEL, R. G.; KRIZ, G. S.; LAMPMAN,
F1, F2 e F3 em suas respectivas
G. M.; PAVIA, D. L. Qumica Orgnica
marcas na placa. Lembre-se de Experimental Tcnicas de Pequena
sempre lavar o capilar entre a Escala. Cengage Learning, 3 ed. 2012.
aplicao de uma frao e outra.
COSTA, C. L. S.; CHAVES, M. H.
Extrao de Pigmentos das Sementes de
Bixa orellana L.: Uma Alternativa para as
Disciplinas Experimentais de Qumica
Orgnica. Qumica Nova, 28 (4), 149-152,
2005.

2.2.3. Eluio da Placa

Preparar 10 mL de uma mistura
8:2 de hexano:acetato de etila, e
colocar esta mistura em uma cuba
com uma tira de papel filtro em
seu interior (como mostra a figura
abaixo);
Colocar a placa na cuba, tamp-la,
e deixar o solvente eluir at a linha
delimitada na parte superior da
placa;
Quando o solvente atingir a linha
superior, retirar imediatamente a
placa com o auxlio de uma pina;
Deixar o solvente evaporar e
observar alguma colorao;
Observar a placa no UV;
Revelar a placa em cmara de
iodo;
Repetir todo o procedimento de
aplicao das amostras e eluio
da placa para a segunda CCD. Mas
agora, utilize uma mistura 9:1
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4. Materiais e Reagentes (06 grupos)

4.1. Vidrarias
01 Vidro de relgio
Proveta 50 mL
03 Bales de fundo redondo (50
mL)
01 Condensador (conectores)
01 Pipeta graduada de (1,0 mL)
01 Pipeta graduada de (5,0 mL)
06 Tubos de ensaio
01 Funil de extrao (100 mL)
02 Erlenmeyers (50mL)
01 Funil simples
06 Pipetas de Pasteur
Bquer (50 mL)

4.2. Reagentes e Solues

gua destilada
CH2Cl2 (bquer 50mL e proveta
10 mL, para medio)
Na2SO4 ou MgSO4
Soluo de Br2/CCl4
Soluo de KMnO4 (1-2%)
Soluo 2,5% de FeCl3
Soluo de NaOH 1,0M
Cloreto de benzola

4.3. Equipamentos
Manta de aquecimento
Chapa de aquecimento
Ponto de Fuso

4.4. Extras
04 Suportes universais (03 para
montar a destilao, e 01 para
filtrao e extrao)
Garras e argola
Termmetro
Esptula
Pedras de ebulio
Papel de Filtro
Algodo
Caneta para marcar vidro