Artigo

Identificação de Bactérias Causadoras de Infecção Hospitalar e Avaliação da Tolerância a Antibióticos
Lílian C. Carneiro 1, Thyana T. Carvalhares 1, Marcos Antônio Pesquero2, Rosangela Coelho Quintana 1, Sarah Borges Feitosa1, Jales Elias Filho 2, Marcos André Costa Oliveira2 1 - Laboratório de Microbiologia, Universidade Estadual de Goiás, GO 2 - Laboratório de Ecologia, Universidade Estadual de Goiás, GO

Resumo
Em função da abrangência sobre enteropatogenicidade e ação de antimicrobianos, decidiu-se focar um aspecto ligado ao tema. Este trabalho isola e identifica bactérias carreadas por formiga em vários pontos de um ambiente hospitalar e analisa a tolerância dessas bactérias enteropatogênicas isoladas aos seguintes antimicrobianos: ampicilina, penicilina, ceftriaxona, eritromicina e ceftazidima, em relação a seis gêneros bacterianos isolados. Foram realizadas seis coletas de formigas a cada dois meses no Hospital Regional de Morrinhos, GO, desde o mês de setembro de 2005. Utilizou-se uma isca de carboidrato e uma de proteína por ambiente em período diurno. Somente uma espécie de formiga do gênero Pheidole foi identificada ao longo das coletas. Previamente as formigas foram imersas em caldo BHI, depois procedeu-se ao semeio em ágar, MacConckey, cled, salmonella shigella – SS, ágar sangue, PCA (ágar para contagem) e foram realizadas provas bioquímicas: lactose, glicose, H2S, uréase, L-TDª, motilidade indol, lisina, oxidase e citrato de Simmons, sensíveis para identificação bacteriana. Os resultados apontam uma maior prevalência de Escherichia coli em todos os pontos estudados, salientando que durante a pesquisa foram encontrados carreadores contaminados em todos os ambientes hospitalares pesquisados. Também foi feito antibiograma e a espécie Staphylococcus sp apresentou resistências para todos os antibióticos testados e o antibiótico eritromicina não inibiu o crescimento de nenhum microrganismo. Os resultados alertam para a necessidade de implantação de um sistema de controle microbiológico no hospital. Palavras-chave: Análise microbiológica, resistência antimicrobiana e saúde pública

Summary
Identification of bacteria that cause hospital infections and evaluation of tolerance to antibiotics Because of the enteropathogenicity and antimicrobial actions, we decided to focus an aspect related to this subject. This work isolates and identifies bacteria carried for ant in many points of a hospital and analyzes the tolerance of these enteropathogens bacteria isolated to the antimicrobial: ampicilin, penicillin, ceftriaxone, eritromicine and ceftazidime, regarding six isolated bacterial species. Since September 2005 were had been accomplished six ants’ collections every two months in the public Hospital of Morrinhos city - GO. We used one carbohydrate and one protein baits per area in diurnal period. Only Pheidole gender ant was identified along the collections. Previously the ants were immersed in BHI broth, and after that was then sowed: MacConckey agar, cled agar, salmonella shigella agar – SS, blood agar, ACP (countains to agar) and it was realized some biochemistry tests: lactose, glicose, H2S, urease, L-TDª, motility, indol, lysine, oxidase and Simmons citrate, sensitive tests for bacterial identification. The results show a larger prevalence of Escherichia coli in all studied points, pointing out that during the research was found contaminated carrier in all searched hospitable environments. Antimicrobial tests were realized and the Staphylococcus sp bacteria introduced resistances for all of the antibiotics tried and the eritromicine antibiotic didn’t inhibit the growth of no microorganism. The results appoint to the need of implantation of a system for hospital microbiological control. Keywords: Microbiological analysis, antimicrobial resistance and public health

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NewsLab - edição 86 - 2008

coli são muito mais freqüentes em crianças pobres dos grandes centros urbanos. Podem surgir surtos de infecções hospitalares e as espécies de maior A freqüência podem geralmente ser encontradas como membros da microbiota normal. embora seja mais comum a sua implicação em infecções hospitares (aparelho urinário e feridas). Um aspecto de extrema importância tem sido o aumento expressivo da ocorrência de amostras multirresistentes aos antimicrobianos. Antibióticos são amplamente usados para tratamento e profilaxia de infecções. principalmente devido à escolha incorreta do medicamento. associados. A emergência de patógenos resistentes a antibióticos é um fenômeno de preocupação na área clínica e na farmacêutica. Há espécies que são oportunistas. acarretando em doença diarréica de curta duração. ampliando a descoberta e comercialização de demais antibióticos (1). a ponto de corresponderem de 30% a 50% dos gastos hospitalares com medicamentos (4). expressão da atividade nos compartimentos infectados. 108 NewsLab . Entre os fatores predisponentes dessas infecções estão o próprio doente. Em função da abrangência sobre enteropatogenicidade e ação de antimicrobianos. distribuição subcelular. Alguns microorganismos envolvidos em infecções tornam-se resistentes às drogas antimicrobianas comumente usadas nos ambientes hospitalares (2). Os Staphylococcus também são membros da microbiota normal da pele e mucosas. em particular em doente imunologicamente deprimido (13). estamos agora enfrentando um prospecto preocupante: a evolução acelerada de resistência para com os antibióticos de importantes patógenos humanos (8). dose ou tempo de tratamento (12). decidiu-se focalizar um aspecto ligado ao tema. em geral. Outra bactéria isolada foi a Salmonella. Os Enterococcus constituem um importante grupo de microorganismos que se destacam como patógenos oportunistas. constatando que de 25% a 50% das prescrições eram inadequadas. mas podem causar infecção em diferentes órgãos e tecidos. pois sua resistência pode comprometer o tratamento de infecções alimentares severas (9). As infecções por E. A Klebsiella pode causar pneumonia.Introdução s infecções entéricas constituem um dos problemas mais graves na maioria dos países em desenvolvimento. incluindo entrada. Certas espécies bacterianas têm conseguido adaptar-se aos antibióticos mediante seleção progressiva de clones resistentes. Há propensão elevada de crianças adquirirem a infecção em hospitais públicos.edição 86 . Constata-se que pacientes hospitalizados ou indivíduos cujas defesas foram enfraquecidas por doenças ou terapias estão susceptíveis também a patógenos oportunistas. A Escherichia coli foi a primeira categoria diarreiogênica identificada. Este trabalho isola e identifica bactérias carreadas por formiga em vários pontos de um ambiente hospitalar e analisa a tolerância dessas bactérias enteropatogênicas isoladas aos seguintes antimicrobianos: ampicilina. Vários estudos analisaram o padrão de prescrição em hospitais de ensino e assistenciais. penicilina. A resistência é transmitida a seus descendentes e a outras bactérias da mesma espécie e de espécies distintas (1). retenção. assim como a morbimortalidade. verificando-se um aumento do seu isolamento nos últimos anos. sobretudo do trato intestinal de seres humanos. A alta incidência de casos. As Aeromonas também têm emergido como importantes patógenos humanos e o trato gastrointestinal parece ser a principal fonte de infecção. Determinadas bactérias enteropatogênicas são isoladas freqüentemente em infecções ocorridas em enfermarias e pediatrias de unidades hospitalares (15). O descobrimento da penicilina abriu o campo da terapia antibiótica. Um dado antibiótico tem que satisfazer muitos critérios de seleção para sua ótima ativida- de. susceptibilidade da bactéria nos sítios de infecção com atenção para a sua fase de crescimento (11).2008 . As bactérias encontradas neste trabalho possuem ação entérica no organismo humano e estão relacionadas a infecções hospitalares. refletem as condições de saneamento e um nível sociocultural e econômico precários (14). com infecções hospitalares. os microrganismos determinantes de tais infecções e o meio ambiente hospitalar (15). Depois de várias décadas de antibioticoterapia continuamente bem-sucedida contra infecções bacterianas.

em relação aos gêneros bacterianos isolados. permanecendo por 24 horas para análise inicial da presença de cultura positiva e prosseguimento da identificação. Bactérias carreadas por formigas isoladas no hospital 110 NewsLab . A determinação da resistência ou sensibilidade foi realizada utilizando-se discos de antibióticos de concentrações estabelecidas. Aeromonas e Staphylococcus. recomendado pelo National Comittee for Clinical Laboratory Standards. Os pontos de corte dos halos de sensibilidade e resistência foram aqueles publicados pelo National Comittee for Clinical Laboratory (10). GO. urease. glicose. provas bioquímicas foram realizadas para concluir o diagnóstico: lactose. oxidase e citrato de Simmons. Após identificar as espécies de bactérias que estavam sendo carreadas pelas formigas. No Gráfico 1 observamos quais bactérias foram mais isoladas e identificadas nos vários ambientes hospitalares ao serem transportadas pelos vetores. eritromicina e ceftazidima. As coletas foram realizadas com luvas esterilizadas e manipuladas no laboratório de biologia da Universidade Estadual de Goiás. ágar PCA (ágar para contagem) foi utilizado como estimativa quantitativa do crescimento bacteriano. Resultados Este trabalho determinou o potencial das espécies de formigas Pheidole como vetores de bactérias em ambiente hospitalar no município de Morrinhos. coli e Klebsiella.2008 . motilidade indol. representado 68% (49) das espécies isoladas. ágar Cled foi usado para selecionar fermentadores de lactose e coloração de gram para ajudar na identificação. Procedeuse então à semeadura em ágar sangue. Foi realizado também um estudo de dados para determinar a ocorrência dos agentes bacterianos por ambiente hospitalar – os Gráfico 1. L-TDª. verifica-se que não houve uma freqüência de positividade em todas as coletas realizadas. analisando as espécies bacterianas isoladas e a tolerância dessas bactérias a determinados antibióticos. considerando todos os ambientes do hospital e os resultados são representados no Gráfico 2.cefatriaxona. através da diluição da amostra nas concentrações de 101 a 107 e inoculação das amostras em ágar Mueller Hinton. Após a amostra do caldo BHI turvar. foram analisados os pontos mais acometidos. As pesquisas se iniciaram em setembro de 2005 com a coleta de formigas. Notamos que a espécie Escheria coli foi a mais encontrada. onde cresceram colônias sugestivas para E.edição 86 . onde foram identificadas colônias sugestivas para as espécies Enterococcus. sensíveis para identificação das bactérias (7). lisina. Metodologia O trabalho foi desenvolvido inicialmente no Hospital Regional de Morrinhos – GO e a escolha do local se justifica pelo maior fluxo de pacientes. o semeio era procedido em ágar Mac Conckey. Considerando que foram realizadas seis coletas (uma a cada dois meses). O semeio em ágar salmonella shigella (SS) propiciou resultados sugestivos para a espécie Salmonella. Previamente as formigas foram imersas em caldo BHI. As formigas foram coletadas com pinça de ponta fina esterilizada e acondicionadas em sacos plásticos esterilizados e etiquetados segundo o ambiente hospitalar. realizada a cada dois meses durante um ano em 48 ambientes do hospital através de iscas de carboidrato (doce de leite) e proteína (salsicha) em período diurno. Ao analisar o gráfico nota-se que na maioria dos pontos estudados foi encontrado apenas um isolado durante toda a pesquisa. H 2S.

laboratórios. o antibiótico ceftriaxona apresentou maior eficiência ao inibir o crescimento de quatro espécies.2008 . Perfil de resistência a antimicrobianos de bactérias isoladas no hospital regional do município de Morrinhos – GO Espécies/antibióticos Escherichia coli Salmonella Staphylococcus sp Klebsiella sp Enterococcus sp Aeromonas Caz S R R S R S Amp R s R R S R Eri R R R R r R Cro S S r R R S Pen r S r r S R Caz: ceftazidima. Por outro lado. O antibiótico eritromicina foi o menos eficiente e todos os isolados apresentaram resistência quando testados. Cinco antimicrobianos foram testados em seis espécies de bactérias identificadas. coli (dados não mostrados). Frequência de área pesquisadas por número de bactérias encontradas dados estão demonstrados no Gráfico 3. Pen: penicilina R: resistência. Frequência absoluta 12 10 8 6 4 2 0 11 9 8 7 6 5 4 2 1 4 4 3 2 2 1 3 5 Gráfico 3.Tabela 1. O Staphylococcus sp foi a única espécie isolada que não apresentou sensibilidade a nenhum dos antibióticos testados. r: resistência intermediária Gráfico 2. A Tabela 1 mostra o resultado do antibiograma referente às bactérias isoladas por meio do vetor Pheidole. Amp: ampicilina. Ao observar os resultados percebe-se que os ambientes do banheiro. S: sensibilidade. Eri: eiritromicina. s: sensibilidade intermediária. clínicas (masculina e feminina) e isolamento foram os quatro pontos mais acometidos. O banheiro teve maior acometimento de Staphylococcus sp e os demais ambientes da bactéria E.edição 86 . Foram pesquisadas 48 áreas diferentes. Ocorrência de bactérias encontradas por ambiente hospitalar 112 a ul tó ri o s C oz in En ha fe rm ar Es ia te s ri l iz aç Is ão ol am e la b o n to ra tó ri o La s Po ct ár st o Pe i o de di en at ri fe rm a Sa ag la em de ae Sa ro la so de l Sa ci ru rg la ia de Sa ge s la d e so su R tu ea ra ni m aç ão ár io rç s nh e Ba Be C on s C lí n ic iro Espécies de Bactérias NewsLab . Cro: ceftriaxona.

seguida de Staphylococcus sp. coli foi a mais freqüente..25%).Discussão Em nosso trabalho a espécie E. A infecção hospitalar (IH). sendo essa uma das etapas básicas para o estabelecimento de estratégias particularizadas de controle de infecção hospitalar (3). Houve casos de sensibilidade intermediária como a Salmonella com relação ao antibiótico ampicilina e casos NewsLab . Enterococcus e posteriormente Klebsiella e Aeromonas sp. para que venham a ser medidas que contribuam para o melhor controle da infecção hospitalar (6). em três ambientes (6. Blatt e Miranda.4%) dos ambientes estudados houve a ocorrência de apenas uma espécie. A Tabela 1 apresenta que a bactéria E. conforme a disponibilidade de pias bem posicionadas.2008 113 . apareceram quatro isolados. o que reforça a falta de higienização pessoal. em 11 (22. No Gráfico 3 os resultados demonstram que os banheiros e laboratórios foram as áreas mais acometidas. não só em decorrência da substancial contribuição para a morbimortalidade dos pacientes. 2005. Pode surgir uma divergência de ocorrência devido à diversidade de microorganismos isolados. mas também devido à relativa simplicidade do procedimento mais importante para o seu controle: a higiene manual (HM). atualmente. sendo que em 29 (60. aliada à programas de informação sobre a importância da IH e da HM. coli mostrou maior resistência à ampicilina (60. tem despertado grande interesse no meio científico. coli foi predominante. realizaram uma análise do perfil de microorganismos causados de infecções do trato urinário em pacientes hospitalizados e detectaram que a bactéria E. (2002) foi relatada a importância de intervenções educativas de modo concomitante à disponibilidade do álcool gel para a satisfatória adesão ao seu uso e a combinação da lavagem das mãos com água e sabão.9%) ocorreu a presença de dois isolados por ambiente.4%). Ao analisar o Gráfico 2 notamos que em todos os ambientes houve isolamento de microorganismos. seguida da espécie Klebsiella. entre o profissional de saúde e o paciente. Baseados em estudos anteriores podemos sugerir que o cuidado com a higienização é a primeira opção para a diminuição desses resultados..edição 86 . No estudo realizado por Harbarth et al.4%) apareceram três isolados e. em cinco (10.

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