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0004
1
Aluna do Curso de Farmcia da Universidade Estadual de Ponta Grossa (UEPG). TCC
do Curso de Farmcia.
2
Departamento de Anlises Clnicas, Laboratrio de Microbiologia Clnica,
Universidade Estadual de Ponta Grossa (UEPG), Avenida Carlos Cavalcanti, 4748,
Uvaranas, 84030-900, Ponta Grossa, PR, Brasil. E-mail: <esmerino@uepg.br>
RESUMO
ABSTRACT
This study evaluated the sanitary conditions of refrigerated chicken cuts sold
at five selling points in the city of Ponta Grossa-PR. Fifty samples from 10 lots
were analyzed from March to May 2008. The following microbiological analyses
were conducted: determination of the most probable number of total coliforms,
coliforms at 45C/g, Escherichia coli, and Enterococcus spp, plate counts of
aerobic mesophiles, Staphylococcus aureus, and fungi; survey for Salmonella spp
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and Pseudomonas spp. The results showed contamination of fecal origin ranging
from 0.31 to 655 MPN/g, therefore within the standards established by the current
law. The presence of Salmonella spp was negative in all samples. In general, the
results showed microorganism counts lower than those established by the current
law, which attests to the good sanitary quality of chicken meat sold in the city.
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Avaliao da qualidade microbiolgica da carne de frango comercializada no municpio de Ponta Grossa 39
indicao til de contaminao ps-sanitizao Ponta Grossa, atravs da pesquisa de microrganis-
ou ps-processo, evidenciando prticas de higiene mos indicadores.
e sanitizao aqum dos padres requeridos
para o processamento de alimento (SILVA et al., Material e Mtodos
2007).
Bactrias aerbias mesfilas so tambm As amostras de cortes comerciais de carcaas
usadas como indicadores de qualidade micro- de frangos (coxa, sobrecoxa, frango a passarinho
biolgica e de acordo com Cardoso et al. (2005) e asas) foram obtidas de cinco pontos de venda,
sua presena em grande nmero indica matria- localizados no municpio de Ponta Grossa, Paran.
-prima excessivamente contaminada, limpeza e Foram coletados cinco lotes de marcas diferentes
desinfeco das superfcies inadequadas, higiene e aps cinco semanas as mesmas marcas foram
insuficiente e condies inapropriadas de tempo e novamente coletadas nos respectivos pontos. No
temperatura durante a produo e conservao dos total, 10 lotes foram analisados, sendo que cada lote
alimentos. deveria estar refrigerado e embalado em bandejas de
Os enterococos so bactrias geralmente isopor, com no mnimo cinco unidades do produto.
isoladas do intestino grosso do homem e dos As unidades foram analisadas individualmente e
animais e, portanto, so consideradas agentes no total foram efetuadas 50 anlises em duplicata.
comensais. A presena dessas bactrias no trato A coleta seguiu as orientaes estabelecidas na
gastrointestinal da ave pode levar contaminao da Resoluo RDC ANVISA n 12, de 2 de janeiro de
carne durante o abate. As espcies de Enterococcus 2001 (BRASIL, 2001).
faecalis e Enterococcus faecium geralmente so A tcnica utilizada foi a da lavagem super-
predominantes (FOULQUI-MORENO et al., ficial com 300 mL de diluente (gua peptonada
2006). Outros microrganismos, como os fungos, tamponada estril). O caldo de lavagem ou caldo
podem ser encontrados juntamente com as de enxaguadura foi utilizado para as anlises mi-
leveduras do gnero Candida e Rhodoturola nas crobiolgicas e foi considerado como sendo sem
diferentes etapas do processamento (JAY, 2005). diluio (100). Na sequncia diluies decimais
Portanto, vrios grupos ou espcies de foram realizadas em gua peptonada tamponada
microrganismos podem ser utilizados na avaliao estril at a diluio 10-5 e as anlises microbio-
da qualidade dos alimentos. Esses microrganismos, lgicas foram realizadas segundo N. Silva et al.
conhecidos como microrganismos indicadores, (2007).
quando presentes, podem fornecer informaes A tcnica de semeadura em profundidade foi
sobre a ocorrncia de contaminao de origem fecal, utilizada para determinao de microrganismos
presena de patgenos ou deteriorao potencial do aerbios mesfilos, fungos e leveduras e
alimento, alm de indicarem condies sanitrias Staphylococcus aureus (confirmados depois
inadequadas durante o processamento, produo pela prova da coagulase). Os resultados foram
ou armazenamento (FRANCO; LANDGRAF, expressos em Unidades Formadoras de Colnias
2003). por grama (UFC/g).
Sendo assim, o presente trabalho, teve como Para a determinao de coliformes totais,
objetivo verificar a qualidade microbiolgica da coliformes fecais ou termotolerantes (45C) e
carne de frango comercializada no municpio de Enterococcus spp utilizou-se o mtodo do Nmero
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Mais Provvel (NMP). Para esses microrganismos contendo gar Bile Esculina e em caldo com 6,5%
foram realizados os testes presuntivo e confir- de NaCl. As placas e tubos foram incubados a 35C
matrio. Os resultados positivos geraram um durante 24 horas. Os enterococos so tolerantes
cdigo que foi consultado em uma tabela com ao sal e crescem no caldo com 6,5% NaCl. No
limite de confiana de 95% para a enumerao gar Bile Esculina o crescimento dos enterococos
do Nmero Mais Provvel por grama da amostra indica resistncia bile e o escurecimento do
(NMP/g). meio indica hidrlise da esculina (SILVA, et al.,
Na contagem de Escherichia coli os caldos 2007). Para identificao de Enterococcus faecalis
EC (incubados a 45C) positivos foram repicados foram realizadas provas bioqumicas especficas
em Agar Eosina Azul de Metileno (EMB) e a iden- (OPLUSTIL et al., 2004).
tificao foi realizada atravs de provas bioqumi- Na pesquisa de Pseudomonas spp utilizou-
cas com a utilizao do Manual de Identificao -se o gar Cetrimida. As colnias caractersticas
de Enterobactrias NEWPROV. Para identificao de Pseudomonas aeruginosa (verde-azulada e flu-
trabalhamos com uma probabilidade de 90%. orescente) e de Pseudomonas fluorescens (amare-
Para a pesquisa de Salmonella spp o la, esverdeada, fluorescente) foram consideradas
caldo de enxaguadura foi incubado em estufa como prova positiva presuntiva da presena.
a 35C por 24 horas para o pr-enriquecimento
(MACHADO et al., 1988). Aps a incubao, Resultados e Discusso
alquotas de 5,0 mL, em duplicata, foram
transferidas para 45 mL de Caldo Tetrationato e Inicialmente calculou-se o NMP ou UFC por
as misturas obtidas foram incubadas a 35C por mililitro de gua de lavagem (enxaguadura), em
18-24 horas, para enriquecimento seletivo. Aps funo das diluies inoculadas. Considerou-se a
incubao as culturas foram semeadas com ala, gua originria da lavagem, com a concentrao
por esgotamento em duplicata, nos meios de inicial de microrganismos recolhida da amostra
gar Salmonella-Shigella (SS) e gar Xilose sem diluio (100). Os resultados foram calculados
Lisina Desoxicolato (XLD). Colnias suspeitas e expressos em UFC/g, para contagens em placas
foram inoculadas em uma srie bioqumica para e em (NMP/g) para a enumerao em tubos. A Ta-
enterobactrias NEWPROV e no gar Trplice bela 1 mostra os resultados obtidos para os par-
Acar Ferro (TSI). Cepas com reaes sugestivas metros microbiolgicos e corresponde mdia de
foram submetidas confirmao atravs de prova cinco amostras em duplicata de cada lote.
de soro-aglutinao com soro polivalente somtico Considerando a Resoluo n12/2001 da
PROBAC (CARAMORI JNIOR et al., 2005). ANVISA, que exige a determinao de coliformes
Como controle de qualidade utilizou-se uma cepa a 45C (coliformes termotolerantes ou coliformes
de referncia: Salmonella typhimurium ATCC de origem fecal) em carnes resfriadas in natura de
14028. aves (carcaas inteiras, fracionadas ou cortes), os
Na pesquisa de Enterococcus spp seguiu-se lotes apresentaram contaminao de origem fecal
o mtodo dos tubos mltiplos ou NMP. Amostras variando de 0,31 a 655 NMP/g e a legislao es-
positivas no teste presuntivo foram submetidas tabelece o mximo de 104 NMP/g. Assim, todos
ao teste confirmatrio. Assim, cada tubo positivo os lotes analisados foram considerados aceitveis
em Caldo Dextrose Azida foi semeado em placa para o consumo (Tabela 1).
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Tabela 1 - Parmetros microbiolgicos para a mdia das amostras nos diferentes lotes analisados.
Parmetros microbiolgicos
Bolores e leveduras
Pseudomonas spp
Coliformes fecais
Enterococcus spp
Coliformes totais
Escherichia coli
Salmonella spp
S. aureus
(NMP/g)
(NMP/g)
(NMP/g)
(NMP/g)
(UFC/g)
(UFC/g)
LDE2 2,3x103 2,3x102 <10 8,7 1,0 1,0 1,9 P 1/5 A 5/5
L Lotes (A,B,C,D,E,F,G,H,I,J)
E Estabelecimentos (1,2,3,4,5)
P Presena (nmero de amostras positivas/nmero de amostras testadas).
A Ausncia (nmero de amostras negativas/nmero de amostras testadas).
< 10 UFC/g Ausncia de crescimento em todas as diluies inoculadas.
< 0,3 NMP/g Tubos mltiplos negativos (0-0-0).
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Pseudomonas spp esto entre as bactrias que so os principais veculos de transmisso, princi-
geralmente causam a deteriorao da carne de palmente os de origem animal, como ovos, aves,
aves (MIYAGUSKU et al., 2003) e desta forma carnes e produtos lcteos (SILVA et al., 2007).
sua presena deve ser vista com ateno.
As contagens de Enterococcus spp variaram Concluso
entre 0,3 a 16,6 NMP/g e foram detectadas
em 60% dos lotes analisados (Tabela 1). Esses Com base nos resultados obtidos e com-
microrganismos foram pesquisados atravs da parando-os com os parmetros estabelecidos na
tcnica do nmero mais provvel, por tubos Legislao Brasileira observamos que todas as
mltiplos, que detecta bactrias na ordem de 0,3 amostras estavam em conformidade com a RDC
NMP/g. Dessa forma, nos 40% em que no foram ANVISA 12/2001 para coliformes a 45C (coli-
detectados Enterococcus spp, a contagem foi de formes termotolerantes ou coliformes de origem
< 0,3 NMP/g o que equivale ao cdigo 0-0-0. A fecal) e para Salmonella spp.
pesquisa de Enterococcus spp no obrigatria Nossos resultados mostraram contagens dos
segundo a legislao em vigor e poucos trabalhos microrganismos indicadores da qualidade higini-
pesquisaram esses microrganismos. Gomes (2007) co-sanitria inferiores quelas estabelecidas na le-
relatou contagens de 3,8 UFC/g de Enterococcus gislao atualmente em vigor o que atesta uma boa
spp em peitos de frango, resultado semelhante aos qualidade para a carne de frango comercializada
nossos. na cidade de Ponta Grossa, Paran.
O interesse no uso de Enterococcus spp como
indicador de higiene e contaminao fecal pode ser REFERNCIAS
justificado pelo fato de que esse gnero geralmente
mais tolerante refrigerao quando comparado BRASIL. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria -
ANVISA. Resoluo RDC n 12, de 2 de janeiro de 2001.
com Escherichia coli e outros coliformes e parece Regulamento tcnico sobre os padres microbiolgicos
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SCHMIDT, 2000). Entretanto, ao contrrio do CARAMORI JUNIOR, J. G.; ROA, R. O.; PINTO, J.
grupo dos coliformes totais e fecais, no h um P. A.N.; ANDREATTI FILHO, R. L.; MENDES, A. A.;
PADOVANI, C. R.; MOSCARDI JR., E.; RAGHIANTI, F.
nvel estabelecido para relacionar a presena de Avaliao da presena de Salmonella spp em carcaas de
Enterococcus spp e a qualidade higinica de um frangos de corte, alimentados com raes com probiticos
determinado produto (GOMES, 2007). e prebiticos. Higiene Alimentar, v.19, n. 133, p. 72-78,
2005.
Nas anlises no detectamos contaminao
CARDOSO, A. L. S. P.; TESSARI, E. N. C.; CASTRO, A.
por Salmonella (Tabela 1). Nossos resultados fo- G. M.; KANASHIRO, A. M. I. Pesquisa de Salmonella spp
ram semelhantes aos relatados por Cardoso et al. coliformes totais, coliformes fecais, mesfilos, em carcaas
(2000) e Del et al. (2006). Nogueira et al. (2005) e produtos derivados de frango. Arquivos do Instituto
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encontraram 4,5% das carcaas resfriadas conta-
CARDOSO, A. L. S. P.; CASTRO, A. G. M.; TESSARI, E. N.
minadas por bactrias desse gnero. Carvalho et
C.; BALDASSI, L; PINEIRO, E. S. Pesquisa de Salmonella
al. (2005) detectaram em 13,5% e M. Silva et al. spp coliformes totais, coliformes fecais, mesfilos, em
(2004) relataram contaminao em 43% das car- carcaas e cortes de frango. Higiene Alimentar, v.19, n.128,
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caas analisadas. A Salmonella uma bactria que
pode atingir o homem e os animais. Os alimentos CARMO, L. S.; DIAS, R. S.; LINARDI, V. R. Food poisoning
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