Episkin

Episkin um in vitro da epiderme humana reconstruda a partir de ceratincitos (Queratincitos ou

ceratincitos so clulas diferenciadas do tecido epitelial (pele) e invaginaes da epiderme para a
derme (como os cabelos e unhas) de animais terrestres responsveis pela sntese da queratina. So as
clula mais presentes na epiderme (representa 80% das clulas epidrmicas). Os queratincitos
formam as quatro camadas da epiderme: camada basal, camada espinosa, camada granulosa e camada
crnea.) humanos normais cultivados sobre uma matriz de colagnio na interface ar-lquido (O cultivo
de queratincitos em interface ar-lquido gera uma estrutura epitelial mais bem formada, com clulas
mais diferenciadas e mais prximas das encontradas no tecido normal.). Este modelo histologicamente
semelhante epiderme humana in vivo.
Passos do processo:
- comeamos por aplicar a substancia no modelo de epiderme, com o controlo positivo e o negativo,
expondo durante 15 minutos.
- lava-se com uma soluo de fosfato salino dando um trmino exposio.
-incubao adicional da epiderme, a 37 C durante 42 1 horas (37 C, 5% de CO2, 95% humidade);
- Avaliao da viabilidade celular por incubao dos tecidos durante 3 horas, com soluo de MTT, aps
que o formazano precipitado extrado e quantificado por espectrofotometria a 570 nm.

Corrositex
um teste in vitro onde num frasco de vidro possuindo um fluido de deteco qumica coberto por uma
bio-barreira membranar, que concebido para imitar o efeito de substncias corrosivas em pele viva. Se
a nossa amostra for corrosiva destri a bio-barreira e o fluido abaixo muda de cor ou textura.
Serve como substituto a coelhos ou outros pequenos seres que antes eram torturados vivos.
BCOP (Bovine Corneal Opacity and Permeability):
um mtodo de ensaio de irritao ocular in vitro que utiliza tecido vivo na crnea de bovino, obtido
como um a partir de matadouros, sendo que no necessrio o sacrifcio dos animais para o teste, para
avaliar o potencial de irritao ocular dos nossos produtos. Os tipos de danos causados pela exposio
produto so medidos quantitativamente por alteraes na opacidade e de permeabilidade
fluorescena. A opacidade da crnea pode ser causada por desnaturao da protena, enquanto que a
permeabilidade da crnea reflecte a perda da funo de barreira da crnea.
Sensitiser Predictor: Os investigadores Teresa Cruz Rosete, Bruno Neves e Susana Rosa
desenvolveram um teste que permite avaliar o potencial alergnico cutneo e reduzir as experincias
com animais na indstria de cosmticos. O teste baseia-se na utilizao de uma linha celular de clulas
da pele que so cruciais para o desenvolvimento da alergia cutnea. Biomarcadores (protenas e genes)
no modelo celular que tm potencial preditivo bastante elevado e so utilizados na elaborao do teste
que permite detectar qumicos com propriedades alergnicas cutneas sem recorrer aos ensaios
animais.
Se o Sensitiser Predictor for validado pela ECVAM significa que o mesmo ser considerado teste de
referncia nos pases da OCDE, podendo esta validao ser posteriormente alargada aos EUA. Em
termos prticos, sempre que a indstria Qumica, Cosmtica ou Farmacutica quiserem testar o
potencial alergnico de um composto tero que obrigatoriamente utilizar o Sensitiser Predictor (ou
outro teste validado pela ECVAM) para assegurar a segurana toxicolgica do composto.