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Avaliando a Estequiometria do
Crescimento Microbiano

No final dos estudos propostos neste tópico, você deve:

1. Ser capaz de compreender os termos básicos relacionados a
rendimentos estequiométricos envolvidos no crescimento celular;
2. Esboçar balanços elementares de massa (teóricos) considerando a
célula como um sistema aberto e contínuo;
3. Ser capaz de escrever equações apropriadas para conservação de
massa para processos com reação bioquímica;
4. Ser capaz de resolver problemas simples de balanço de massa com
reação;
5. Ser capaz de aplicar princípios estequiométricos para a análise
macroscópica do crescimento celular e formação de produto.

Sumário
PROBLEMA 1: Relações Estequiométricas no Crescimento Microbiano ....... 3
PROBLEMA 2: Demanda Teórica de Oxigênio e Formação de Produtos ..... 5
PROBLEMA 3: Rendimentos Teóricos Máximos no Crescimento Microbiano
e na Formação de Produtos Metabólicos ....................................................... 8
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ......................................................................... 10
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PROBLEMA 1: Relações Estequiométricas no Crescimento Microbiano

O termo Single-cell protein (SCP) ou simplesmente proteína

unicelular refere-se à biomassa obtida a partir cultivos de algas,
bactérias, leveduras e fungos filamentosos. No processo de obtenção de
SCP, as células são cultivadas em substratos baratos ou enriquecidos com
carbono, nitrogênio (seja ele de fontes orgânicas ou inorgânicas) e
fósforo, geralmente, sob condições apropriadas e controladas. Isto
garante uma taxa de crescimento celular adequada e proporciona o
uso destes microrganismos (mortos e secos) diretamente na alimentação
animal sem que seja necessário nenhum processo de extração ou
purificação do conteúdo proteico.
Esta biomassa microbiana (SCP) tem sido utilizada como fonte de
alimento há muito tempo em regiões como África e México.
Nos tempos modernos, o primeiro grande apogeu dos processos de
obtenção de SCP teve seu lugar na Alemanha, motivado pela escassez
de alimentos durante a duas grandes Guerras Mundiais.
Consideremos, então, uma única célula (CH1,66O0,27N0,20, como
delimitação do sistema em estudo) dentro do processo de produção de
SCP através da degradação de hexadecano (C16H34) residual e NH3
como fonte de nitrogênio.
Através do balanço de massa, podemos escrever a uma equação
geral para o crescimento de células em condições aeróbicas (RQ=0,43)
e, com base nesta equação estequiométrica, determinar a produção
relativa de Biomassa, CO2 e H2O, bem como o consumo de O2, NH3,
partindo de 1 mol de hexadecano. Para tanto, levaremos em
consideração a simplificação de que a) apenas há crescimento
microbiano; b) os compostos absorvidos ou produzidos estão presentes
em quantidades quantificáveis e c) os únicos produtos extracelulares
formados serão CO2 e H2O.
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Esta simplificação está sumarizada na figura 1.1 e pode ser

representada na forma da equação química 1.1.

SUBSTRATO BIOMASSA
() *+ ,- ./ ; (= *> ,? .@

OXIGÊNIO
dC,5
a,5

NITROGÊNIO e*5 ,
6*7 ,8 .9

▲
Figura 1.1. Modelo estequiométrico simplificado para o crescimento de
biomassa microbiana.

(1.1)
𝑪𝑾 𝑯𝑿 𝑶𝒀 𝑵𝒁 + a𝑶𝟐 + 𝒃𝑯𝒈 𝑶𝒉 𝑵𝒊 → 𝒄𝑪𝟏 𝑯𝜶 𝑶𝜷 𝑵𝜹 + d𝐂𝑶𝟐 + e𝑯𝟐 𝑶

A. Tomando por base as informações dadas e o modelo

estequiométrico simplificado (1.1) determine a produção relativa
(estequiométrica) de Biomassa, CO2 e H2O, bem como o consumo
de O2, NH3, partindo de 1 mol de hexadecano;
B. Considere a possibilidade de modificação genética do
microrganismo utilizado e que esta modificação foi empreendida
para alterar o seu metabolismo energético (que impactaria
diretamente no aproveitamento de oxigênio e no RQ) e, assim,
viabilizar maiores produções de biomassa (SCP). Considerando a
mesma simplificação, avalie também os impactos destas
modificações sobre a produção de biomassa (SCP).
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PROBLEMA 2: Demanda Teórica de Oxigênio e Formação de Produtos

Em muitos dos processos aeróbicos, o oxigênio é assimilado como

um substrato limitante, este fato categoriza a demanda de oxigênio
como um importante parâmetro nos cultivos microbianos aerados. Por
definição, a demanda de oxigênio é representada pelo coeficiente
estequiométrico a (ou Yo/s) nos modelos estequiométricos e está
relacionada diretamente aos elétrons disponíveis para transferência para
oxigênio, uma vez que este (O2) se comporta como um aceptor direto de
elétrons.
Nos casos onde há formação de produtos metabólicos, o modelo
estequiométrico deverá ser ampliado (figura 1.2), considerando a adição
de mais um termo (equação química 1.2).

SUBSTRATO BIOMASSA
() *+ ,- ./ ; (= *> ,? .@

dC,5
OXIGÊNIO
a,5 e*5 ,

NITROGÊNIO PRODUTO
6*7 ,8 .9 f(D *E ,F .G

▲
Figura 1.2. Modelo estequiométrico simplificado para o crescimento de
biomassa microbiana e formação de produtos metabólicos.

𝑪𝑾 𝑯𝑿 𝑶𝒀 𝑵𝒁 +a𝑶𝟐 +𝒃𝑯𝒈 𝑶𝒉 𝑵𝒊 → 𝒄𝑪𝟏 𝑯𝜶 𝑶𝜷 𝑵𝜹 +d𝐂𝑶𝟐+e𝑯𝟐 𝑶+f𝑪𝒋 𝑯𝒌 𝑶𝒍 𝑵𝒎

(1.2)
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Deste modo, a demanda de oxigênio pode, portanto, ser derivada

de um balanço de elétrons. Quando a síntese de produto ocorre
conforme representado pela Eq. (1.2), o balanço pode ser escrito,
literalmente, como:

[Número de elétrons disponíveis no substrato] + [número de elétrons

disponíveis no O2]= [Número de elétrons disponíveis na
biomassa]+[Número de elétrons disponíveis no produto]

Quando levamos em conta o grau de redução das substâncias (gi)

envolvidas, a equação de balanço poderá ser escrita da seguinte forma:

𝑤𝛾; − 4𝑎 = 𝑐𝛾A + 𝑓𝛾D (1.3)

Partindo da equação de balanço (1.3) poderemos escrever a

seguinte relação para a demanda teórica de oxigênio:

1
𝑎 = (𝑤𝛾; − 𝑐𝛾A − 𝑓𝛾D ) (1.4)
4

A equação (1.4) é uma ferramenta muito útil e seu uso possibilita, se

soubemos qual organismo (gB), substrato (w e gS) e produto (j e gP) que
estão envolvidos no cultivo e os rendimentos de biomassa (c) e produto
(f), podemos calcular rapidamente a demanda de oxigênio. Claro que
também poderíamos determinar através da resolução de todos os
coeficientes estequiométricos da Eq. (1.2) como descrito anteriormente,
no entanto, a Eq. (1.4) permite uma avaliação mais rápida e não exige
que as quantidades de NH3, CO2 e H2O envolvidas na reação sejam
conhecidas.
Consideremos, então, a equação (1.4), sem a formação de
produto, como a relação para obtenção da demanda teórica de
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oxigênio em um cultivo de Candida utilis (cuja composição é CH1,84O0,55N0,2 e

5% de cinzas), capaz de metabolizar glicose em uma reação aeróbica simples,
com produção de CO2 e H2O.

𝑪𝟔 𝑯𝟏𝟐 𝑶𝟔 +6𝑶𝟐 →6𝐂𝑶𝟐 +6𝑯𝟐 𝑶

(1.5)

▲
Figura 1.3. Morfologia de células de Candida utilis e o aspecto de um cultivo
superficial em placas de ágar.

A. Sabendo que o rendimento de biomassa em relação ao consumo de

substrato é de 0,5 g/g e que NH3 é utilizada como fonte de nitrogênio,
qual é a demanda de oxigênio considerando o crescimento
celular? Compare este valor ao obtido da equação (1.5).
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PROBLEMA 3:Rendimentos Teóricos Máximos no Crescimento

Microbiano e na Formação de Produtos Metabólicos

Partindo do balanço de elétrons, como descrito na Eq. (1.3),

podemos chegar na alocação fracional de elétrons, que, uma vez
disponíveis pelo substrato, serão carreados para formação de nova
biomassa e/ou produto (ou produtos). Obviamente, uma parcela destes
elétrons também será transferida para o O2 (aceptor). Todas estas frações
podem ser obtidas se manipularmos a eq. (1.3) para obtenção da Eq.
(1.6).

4𝑎 𝑐𝛾A 𝑓𝛾D
1= + + (1.6)
𝑤𝛾; 𝑤𝛾; 𝑤𝛾;

Assim, podemos definir cada termo como a fração de elétrons

(oriundos do substrato) disponível para formação de nova biomassa,
produtos e transferidos para o aceptor.

4𝑎
𝜁J = (𝑡𝑟𝑎𝑛𝑠𝑓𝑒𝑟𝑖𝑑𝑜𝑠 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝑂V )
𝑤𝛾;

𝑐𝛾A
𝜁A = (𝑡𝑟𝑎𝑛𝑠𝑓𝑒𝑟𝑖𝑑𝑜𝑠 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝑛𝑜𝑣𝑎 𝑏𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎)
𝑤𝛾;

𝑓𝛾D
𝜁D = (𝑡𝑟𝑎𝑛𝑠𝑓𝑒𝑟𝑖𝑑𝑜𝑠 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑟 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑡𝑜)
𝑤𝛾;

Partindo destas frações, se considerarmos que a totalidade de

elétrons disponibilizados pelo substrato poderá, hipoteticamente, ser
alocada em apenas biomassa ou produto, obtemos os rendimentos
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teóricos máximos para formação de produtos e biomassa, de acordo

com as eq. (1.7) e eq. (1.8).

𝑤𝛾;
𝑐[\] = (𝑅𝑒𝑛𝑑𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜 𝑡𝑒ó𝑟𝑖𝑐𝑜 𝑚á𝑥𝑖𝑚𝑜 𝑒𝑚 𝑏𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎)
𝛾A

𝑤𝛾;
𝑓[\] = (𝑅𝑒𝑛𝑑𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜 𝑡𝑒ó𝑟𝑖𝑐𝑜 𝑚á𝑥𝑖𝑚𝑜 𝑒𝑚 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑡𝑜)
𝑓𝛾D

Podemos, assim, levar em consideração que Candida utilis (cuja

composição é CH1,84O0,55N0,2 e 5% de cinzas) também é capaz de crescer

usando etanol como substrato, formando, como produto do

metabolismo, células cujo conteúdo composicional tem a mesma
característica da biomassa formada a partir de glicose (anteriormente
descrita).

A. Qual deverá ser o rendimento máximo possível de biomassa em

relação ao consumo de etanol. Compare com o rendimento
máximo possível em relação ao consumo de glicose.
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Pauline M. Doran, Bioprocess Engineering Principles, Academic

Press, 1995.

2. James Bailey e David Ollis, Biochemical Engineering Fundamentals,

2nd ed., McGraw-Hill Int. Ed., 1986