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espécies de estafilococos que conseguem crescer Alternativa E: INCORRETA. Apesar de ser um meio rico,
em altas concentrações de sais, e indicador porque algumas cepas de Neisseria não crescem no Agar
além da caseína e do extrato de carne, possui em Sangue sem estar achocolatado e sem estar suple-
sua composição manitol e vermelho de fenol. O mentado com os fatores de crescimento X e V, po-
Staphylococcus aureus é diferenciado por fermentar dendo gerar culturas falso-negativas. 14,17,20,22,26
o manitol acidificando o meio, produzindo colônias
amarelas pela presença do indicador de pH verme-
lho de fenol. 14,20,22
03 (FARMACÊUTICO - MAPA - CONSULPLAN - 2014) Du-
rante a análise de qualidade microbiana de
produtos não estéreis, é comum pesquisar alguns
E. faecalis e E. faecium, as que apresentam maior im- investigado também a Yersinia spp e o Vibrio spp,
portância clínica. 17,22,26 para os quais o médico deve especificar na requi-
Alternativa B: CORRETA. Conforme comentado acima, sição médica, para que a pesquisa destes dois últi-
dentre as características fenotípicas do gênero mos gêneros seja realizada.
Enterococcus, uma delas é ser um coco gram-po- Alternativa A: INCORRETA. O gênero Acinetobacter faz
sitivo por possuir ácido teicoico associado à sua parte da família Moraxellaceae e morfologicamen-
membrana citoplasmática rica em peptídeogli- te é visualizado ao microscópio como coco-bacilos
cano e geralmente apresentam-se dispostos aos ou diplococos gram-negativos e não produzem en-
pares e em cadeias curtas. Outra característica é zima oxidase. 17,22,26
não produzir a enzima catalase. Além destas, eles Alternativa B: CORRETA. Na microscopia, corados pelo
possuem como características básicas que os dife- Gram, o Campylobacter jejuni apresenta-se como
renciam de outros cocos gram-positivos, catalase- bacilos gram-negativos pequenos, em forma de
-negativa, a capacidade de crescerem em elevadas vírgula, S ou asa de gaivota, crescem bem em am-
concentrações de NaCl (meio hipertônico conheci- biente de microaerofilia, à temperatura de 42oC e
do como caldo BHI hipercloretado) e em altas con- são oxidase positiva.17,22,26
centrações de sais biliares (conhecida como prova Alternativa C: INCORRETA. Embora se pareça com o
da bile-esculina).17,22,26 Campylobacter em alguns aspectos, como por
exemplo a morfologia espiralada, a prova da oxi-
dase positiva e o crescimento em microaerofilia, o
Ⓓ cocos gram-negativos.
Ⓔ espirilos gram-positivos. 10 (FARMACÊUTICO - ANVISA - CETRO - 2013) A resis-
tência bacteriana aos mais variados antimi-
crobianos pode ser classificada, simplificadamente,
GRAU DE DIFICULDADE em resistência intrínseca e resistência adquirida.
A resistência intrínseca é resultado, naturalmente,
▶ DICA DO AUTOR: O gênero Staphylococcus é carac- do estado fisiológico bacteriano, bem como de sua
terizado por células bacterianas com morfologia estrutura celular. Assinale a alternativa que exem-
de cocos, com reação positiva frente a coloração plifica um caso de resistência intrínseca bacteriana.
de Gram e que crescem de forma característica,
agrupados em cachos, sugerindo cachos de uvas. Ⓐ Resistência ao aztreonam entre cocos gram-po-
Em esfregaços preparados de amostras clínicas, po- sitivos.
dem ser observados também como cocos isolados, Ⓑ Resistência à vancomicina entre cocos gram-po-
e arrumados aos pares ou cadeias curtas. sitivos.
Derivação histórica da palavra Staphylococcus: “sta- Ⓒ Resistência à vancomicina entre bastonetes
phylé” = cachos de uvas; “coccus” = grão ou semen- gram-positivos.
te (cocos semelhantes a uvas) Ⓓ Resistência ao aztreonam em bastonetes gram-
Alternativa A: INCORRETA. Exemplos de gêneros com -negativos.
morfologia de bastonetes gram-positivos: Coryne- Ⓔ Resistência ao aztreonam em cocos gram-nega-
bacterium, Lysteria.17,18,22 tivos.
Alternativa B: CORRETA. Exemplos de gêneros com
morfologia de cocos gram-positivos: Staphylococ- GRAU DE DIFICULDADE
cus, Micrococcus, Streptococcus, Kocuria. 17,18,22
Alternativa C: INCORRETA. Exemplos de gêneros com Alternativa A: CORRETA. Os cocos gram-positivos têm re-
morfologia de bastonetes gram-negativos: Esche- sistência intrínseca ao aztreonam, que é um mono-
richia, Klebsiella, Pseudomonas, Salmonella. 17,18,22 bactam ativo contra bastonetes gram-negativos.30
Alternativa D: INCORRETA. Exemplos de gêneros com Alternativa B: INCORRETA. A resistência da maioria dos
morfologia de cocos gram-negativos: Neisseria, cocos gram-positivos à vancomicina é adquirida e
Moraxella, Veilonella 17,18,22 transferida por diferentes complexos de genes.17,26
Alternativa E: INCORRETA. Os espirilos ou espiroquetas Alternativa C: INCORRETA. A vancomicina é ativa con-
são bactérias espiraladas gram-negativas. Os gê- tra vários gêneros de bastonetes gram-positivos,
neros de importância para a microbiologia médica como por exemplo: Corynebacterium, Bacillus, Lis-
são: Treponema, Borrelia e Leptospira. 17,18,22 teria e Lactobacillus.17
Alternativas D e E: INCORRETA. O aztreonam é ativo con-
tra diversos gêneros de bastonetes gram-negativos
Ⓐ Hafnia.
Ⓑ Proteus.
Ⓒ Klebsiella.
11 (FARMACÊUTICO - PREFEITURA DE FORTALEZA - IM-
PARH – 2014) A utilização de antimicrobianos
requer uma série de cuidados, dentre eles, o mais
Ⓓ Salmonella. importante, sob o ponto de vista de uso racional e
sucesso terapêutico em termos de resistência, se
GRAU DE DIFICULDADE relaciona a:
Ⓐ Investigação da função renal do paciente, para
Alternativas A, B e D: CORRETAS. O teste de motilidade é garantir a eliminação correta do fármaco aplicado,
positivo para maioria das espécies e sorotipos de propiciando a manutenção da dose adequada e o
Hafnia, Proteus e Salmonella.17 sucesso do tratamento.
Alternativa C: CORRETA.Todas as espécies do gênero Ⓑ Avaliação da função hepática, garantindo a me-
Klebsiella apresentam teste de motilidade nega- tabolização adequada em que o fármaco alcançará
tivo. 17 concentrações efetivas para debelar a infecção.
Ⓒ Dosagem da carga de microrganismos para
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RESUMO PRÁTICO
Algumas bactérias não podem ser classificadas Agar). Como já foi dito no início deste capítulo (dica
pela coloração de Gram por não possuírem parede do autor – questão 1), os meios de cultura podem
celular, portanto são impossíveis de serem coradas ser classificados baseando-se nas características
por este método (Micoplasmas e Clamidias, por dos seus constituintes e da sua capacidade de pro-
exemplo), ou por possuírem parede celular dife- mover ou inibir o crescimento dos diversos tipos de
renciada, com uma rica camada lipídica, como as microrganismos, dependendo das suas caracterís-
Micobactérias. Estas últimas são classificadas como ticas metabólicas.
bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR) e são cora-
das pela coloração de Ziehl-Nielsen. Exemplos de alguns meios de cultura comu-
mente usados nos laboratórios de microbiolo-
1.3 - MEIOS DE CULTURA gia clínica:
• Agar Sangue Columbia: meio de uso geral, indi-
Além das características microscópicas, as bac- cado para cultivo de microrganismos fastidiosos
térias podem ser diferenciadas pelas características e permite a observação da hemólise provocada
macroscópicas de suas colônias em meios de cul- por algumas bactérias.
tura sólido. É possível observar colônias de dife- • Agar Thayer-Martin VCAT: meio base com san-
rentes tamanhos, morfologia (convexa ou plana), gue achocolatado, suplementado com antibió-
superfície (lisa ou rugosa), aspecto (brilhante ou ticos (vancomicina, colistina, anfotericina b e
fosca, transparente ou opaca), borda (regular ou trimetoprima) indicado para o isolamento de
irregular). A depender dos constituintes e suple- Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis.
mentos adicionados aos meios de cultura, pode-se • Agar Sangue Azida: meio seletivo para isola-
observar se a colônia é hemolítica ou não hemolíti- mento de estreptococos e estafilococos de
ca, pigmentada ou não pigmentada. amostras polimicrobianas especialmente com
A produção de meios de cultivo para microrga- presença de bactérias gram-negativas devido
nismos iniciou-se em 1860 com Pasteur, e em 1876 ao efeito bacteriostático da azida sobre este
Koch propagou pela primeira vez o cultivo de um grupo de bactérias.
microrganismo patogênico fora do organismo hos- • Agar EMB: meio seletivo, indicado principal-
pedeiro. Desde então, a variedade e a qualidade mente para o isolamento de Enterobacteriaceae.
destes produtos têm aumentado, acompanhando Auxilia na identificação presuntiva de Escheri-
o desenvolvimento da ciência Microbiologia. Para chia coli, que geralmente apresenta colônias
atender às necessidades dos diversos microrganis- com brilho metálico esverdeado.
mos, os meios de cultura apresentam uma grande • Agar Mac Conkey: é um meio seletivo devido
diversidade de compostos, incluindo: nutrientes à adição de sais biliares e cristal violeta. Inibe
(peptona, proteínas hidrolisadas, infusões e extra- o crescimento de cocos gram-positivos e é in-
tos); energéticos (açúcares, alcoóis, carbohidratos); dicado para o isolamento de bastonetes gram-
metais e minerais essenciais (fósforo, magnésio, cál- -negativos, permitindo a diferenciação entre
cio, ferro); agentes tamponantes (fosfatos, acetatos fermentadores e não-fermentadores de lactose
e citratos); indicadores de pH (vermelho de fenol, pela presença do neutral red.
vermelho neutro e púrpura de bromocresol); agen- • Agar CLED: meio não seletivo, utilizado espe-
tes seletivos (químicos e antibióticos); indicadores cialmente para cultura de urina. A sigla CLED
cromogênicos e agente gelificante (geralmente o
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ratia e Proteus são naturalmente resistentes a Po- um gen de resistência que estava latente e a partir
limixina; Pseudomonas aeruginosa e Acinetobacter daí a bactéria passa a produzir a enzima inativadora
baumannii são naturalmente resistentes a ampici- do antibiótico, sendo neste caso considerada uma
lina; os Enterococcus são naturalmente resistentes enzima induzível.
às cefalosporinas. • Exemplos de enzimas constitutivas: beta-lacta-
mase de espectro estendido ESBLCTX-M, car-
Principais Classes de Antimicrobianos x Mecanismos de bapenemase blaKPC;
Ação • Exemplo de enzima induzível: beta-lactamase
Antimicrobianos Ação AMPc;
Beta-lactâmicos, Carbape- Efeito sobre a síntese • Exemplo de alteração da permeabilidade de mem-
nêmicos e Glicopeptídeos. da parede celular brana: Alteração dos canais de porina da Pseudo-
Macrolídeos, Aminogli- monas ocasionando resistência ao imipenem;
cosídeos, Lincosamidas, • Exemplo de efluxo ativo de antibióticos: bomba
Tetraciclinas, Oxazolidinona, Inibição da Síntese de de efluxo que expulsa as tetraciclinas para fora
Estreptogramina, Cloranfe- Proteica da célula bacteriana;
nicol, Ketolídeos, Glicici- • Exemplo de alteração do sítio de ligação do an-
clinas tibiótico: alteração das proteínas ligadoras de
Efeitos sobre a membrana (PBPs) impedindo a ligação da dro-
Polimixinas estrutura e função da ga à parede celular bacteriana, como ocorre no
membrana celular MRSA – Staphylococcus aureus resistente a Meti-
Quinolonas e Fluoroquino- Interferência na síntese cilina ou Oxacilina.
lonas do ácido nucléico
Sulfonamidas Inibidor do ácido fólico Atualmente, dentre os diversos microrganismos
multi-drogarresistentes, as Enterobacteriaceae
Já na resistência adquirida, os microrganismos produtoras de carbapenemases são as que têm
originalmente não são resistentes a determinados causado mais mortes nas instituições de saúde no
grupos de antimicrobianos, mas por diversos me- Brasil e em outras partes do mundo, com taxas de
canismos genéticos, podem adquirir estas caracte- mortalidade de 40 a 50%. Dentre as carpenemases,
rísticas. Estes mecanismos podem ser por mutação a blaKPC e a blaNDM são as que têm maior impacto
cromossômica (menos comuns) ou por transfe- epidemiológico devido a sua rápida disseminação.
rência de DNA de um microrganismo para outro
(mais comuns). A transferência de material gené- 1.6 - ESTERILIZAÇÃO (ADAPTADO DE ANVISA/2010)
tico pode ser através de plasmídios (“conjugação”);
através da transferência de genes por intermédio Endende-se por esterilização, processos físicos
de vírus/bacteriófagos (“transdução”); através da ou químicos adequadamente validados que ga-
transferência entre células bacterianas sem haver rantem a ausência de microrganismos viáveis nos
contato entre elas (“transformação”); e finalmente materiais tratados por estes processos. O nível de
a transferência do gen de resistência através de um garantia de esterilidade de um processo de este-
transposon, que pode transferir de um plasmídio rilização é o grau de garantia que o processo em
para outro, ou para o cromossomo ou para o bacte- questão esteriliza uma população de itens, sendo
riófago (“transposição”). expresso como a probabilidade de um item não es-
Principais mecanismos de resistência bacteria- téril naquela população. O procedimento selecio-
na: inativação enzimática, alteração da permeabi- nado para atingir o nível de garantia de esterilidade
lidade da membrana, efluxo ativo de antibióticos e depende do conhecimento da natureza do material
alteração do sítio de ligação do antibiótico. a ser esterilizado, do processo de esterilização a ser
Na inativação enzimática, as bactérias produ- empregado e das alterações que podem ocorrer no
zem enzimas que inativam a molécula do medica- material, em função da esterilização.
mento, inibindo o seu efeito antimicrobiano. Estas
enzimas podem ser produzidas independente do 1.6.1 - Principais Métodos de Esterilização
microrganismo ter sido exposto ou não ao contato
com o medicamento, e neste caso são consideradas Métodos Físicos:
enzimas constitutivas, ou podem ser enzimas que • Esterilização pelo calor: A eficiência na inati-
são produzidas pelos microrganismos ao entrarem vação dos microrganismos é dependente da
em contato com alguns antimicrobianos, ativando temperatura, tempo de exposição e presença