Anticorpos

estrutura e função
anticorpos: componente sérico principal

A Tiselius and E A Kabat. J Exp Med 69:119

Imunização de coelhos com ovalbumina
Incubação soro com ovalbumina
Observação desaparecimento fracção gamaglobulina
Portanto, gamaglobulina=imunoglobulina!
 Estrutura geral de uma imunoglobulina

• Contém 2 cadeias pesadas (H) e 2

cadeia leve (L)
• H: ~50 kD, 5 classes (M, D, G, A, E)
• L: ~25 kD, 2 classes (kapa, lambda)
• Duas actividades:
• Ligação atg (H+L)
• Função biológica (H)
• Lig dissulfido formam domínios
globulares intra cadeia ( 2 na L, 4-5 H)
• Lig dissulfido entre cadeia HH e HL
• Cada cadeia tem 1 domínio variável (V)
e 1 ou mais domínios constantes (C)
• Flexibilidade providenciada pela região
charneira
• Cadeia pesada glicosilada (CHO)
 Caracterização enzimática das Ig’s

Digestão com proteases util para

caracterização estrutura:
Papaína (derivada papaia)
Pepsina (derivada intestino porco)

Papaína origina fragmentos F(ab) e Fc

F(ab) = “fragment, antigen binding”
Fc = “fragment, crystallizable”

Pepsina origina F(ab’)2 + outros

fragmentos pequenos

b-mercaptoetanol reduz as ligações

dissulfido e origina 2 cadeias
polipeptídicas (H e L)
Análise cristalográfica revela domínio estrutural
dos anticorpos

L. J. Harris et al.1992, Nature 360:369.

 A folha pregueada β

• Estabilização da estrutura
antiparalela da folha por
ligações hidrogénio entre
grupo amina e carbonil
adjacente

• Cada dobra contém

alternadamente sequência
radicais hidrofilico (virado
exterior) e hidrofobico
(virado para interior)
perpendiculares ao plano
da folha
 Cada domínio contém pelo menos uma porção
“globular”

Cada porção globular tem

duas camadas em estrutura
folha β pregueada

Cada folha β é composta por

voltas anti-paralelas (setas)
de várias dimensões
estabilizadas por ligações
hidrofóbicas e dissulfido

Três voltas encontradas no

domínio variável compõem
a CDR
 Análise da sequência aminoacídica das Ig’s revela
variabilidade no domínio V

Sequenciação foi apenas possível

usando anticorpo purificado de
células malignas produtoras de
anticorpo (plasmócitos): mieloma
(humano), plasmocitoma (outros
animais).

Cada linha de células B produz uma

espécie molecular de anticorpo e
frequentemente excesso de cadeias
leves (proteinúria de Bence-Jones)

Sequenciação revelou 3 regiões

hipervariáveis (Regiões
Determinantes de
Complementaridade) em cada
domínio variável

Kabat et al., 1977, Sequence of Immunoglobulin Chains, U.S. Dept. of Health, Education, and Welfare
 Alterações conformacionais Atb e no Atg
optimizam a complementaridade

A ligação Atg-Atc resulta em

alterações conformacionais
em ambos

As alterações aumentam a
afinidade

Portanto, o reconhecimento não

é “absolutamente rígido” mas
“induzível”
Forças não covalentes que mantém unido o
complexo antigénio:anticorpo
Os “braços” da Ig são unidos por uma região de
charneira flexível
 Imunidade humoral: 5 classes de anticorpos

IgM: cadeia pesada tem 4 dominios C

(sem charneira); pentamero: cadeia J
+ lig dissulfido

IgG: cadeia pesada tem 3 dominios C

(mais charneira); quatro subclasses
(IgG1, IgG2, IgG3, IgG4); monómero

IgA: cadeia pesada tem 3 dominios C

(mais charneira); monomero (sero), ou
dimero (segregada).

IgE: cadeia pesada tem 4 dominios C

(sem charneira); monomero (sero),

IgD: cadeia pesada tem 3 dominios C

(mais charneira); monomero (sero).
 Actividades biológicas da IgM

5-10% do total Ig’s séricas;

Pentâmero de valência 10 ;

Tamanho restringe distribuição ao soro

mas pode ser transportada até
mucosa;

Presente superfície cel B (mIgM);

Primeira Ig a ser produzida durante a

resposta imune, baixa afinidade
comparativamente à IgG;

Activa complemento;

Aglutina (agrega) atgs multivalentes;

NÃO atravessa a placenta

 Actividades biológicas da IgG

80% do total Ig’s séricas;

Monómero de valência 2

4 subclasses que diferem na região de charneira

Presente no soro e nos tecidos

Produzida mais tardiamente na resposta imune

Maior afinidade que a IgM

Liga-se aos receptores Fcγ na superfíofice células (IgG1=IgG3>IgG4>IgG2)

Atravessa placenta (IgG1=IgG3=IgG4>IgG2)

Activa complemento (IgG3>IgG1>IgG4>IgG2)

Desempenha papel primordial na imunidade neonatal

NÃO É segregada nas mucosas
NÃO está presente na superfície das células B maturas inactivadas
 Actividades biológicas da IgA

10-15% do total Ig’s séricas;

Monómero (soro) de valência 2;

Dímero (segregada) valência 4;

2 subclasses

Presente no soro e secreções

Produzida mais tardiamente na resposta imune

Maior afinidade que a IgM

Alguma evidência para receptores Fc

Forma secretada aglutina atg’s multivalentes

Papel imunidade das mucosas

NÃO Atravessa placenta

NÃO Activa complemento

A IgA dimérica é activamente secretada via
receptor polimérico Ig’s (Poly-Ig)
Figure 4-23
 Actividades biológicas da IgE

< 0.003% do total Ig’s séricas;

Monómero (soro) de valência 2;

Distribuição qs restrita à superfície mastócitos

e basófilos que exprimem receptores alta
afinidade;

Produzida mais tardiamente na resposta

imune

Papel alergia e protecção aos parasitas

NÃO Atravessa placenta

NÃO Activa complemento

NÃO está presente na superfície de cels B

maturas inactivas
Ligação cruzada IgE activa Mastócitos
 Actividades biológicas da IgD

< 0.2% do total Ig’s séricas;

Monómero de valência 2;

Distribuição qs restrita à superfície cels B

Função desconhecida (tolerância?)

NÃO Atravessa placenta

NÃO Activa complemento

Propriedades das Ig’s - resumo
Determinantes antigénicos nos anticorpos
Funções das imunoglobulinas…