Atividade 7

Kamila Rezzuto - 129851

Leia o artigo abaixo e responda:
1. Quais metodologias os autores utilizaram para conservar os fungos
filamentosos?
R: Repique periódico em meio BDA, Óleo mineral, Água destilada estéril
e Solo ou areia estéril.
2. Explique como foram realizadas as técnicas;
R: O repique periódico: inocula-se o microrganismo em meio apropriado,
incubando em ambiente propício à multiplicação e armazenamento em
baixas temperaturas. Meio: Agar Batata Dextrose (39g/L), ele foi
dissolvido em água destilada, fervido no micro-ondas e esterilizado em
autoclave. Depois adicionou-se 10 ml do meio nas placas de Petri, com
7 cm de diâmetro, nos tubos de ensaio com 15 cm de altura e 1,5 cm de
diâmetro. Os tubos foram mantidos inclinados. Depois de resfriar e
solidificar o meio, com o auxilio da alça de platina, Eles foram
realizados em intervalos de aproximadamente três meses, para que não
ocorra o consumo total do substrato e o acúmulo excessivo de substâncias
que se comportam como agentes mutagênicos.
Óleo mineral: Adiciona-se uma camada de óleo mineral esterilizado sobre a
cultura, a fim de limitar a quantidade de oxigênio disponível. Começa com
a adição de 5 ml do meio BDA aos vidros de penicilina de 10 ml, sendo
eles esterilizados em autoclave. Depois, os recipientes ficaram inclinados,
até o resfriar. Os esporos foram transferidos das placas para os vidros
com uma alça de platina. Os recipientes foram vedados com algodão e
incubados a temperatura ambiente durante 6 dias, para crescimento
dos fungos. Depois, sobre o fungo crescido, a camada de óleo foi inserida
até cobrir toda superfície do meio. Os vidros foram lacrados e
armazenados em refrigerador.
Água destilada estéreo: Armazena-se pequenos discos do fungo com meio
em frascos de vidro contendo água destilada esterilizada. Foram
adicionados 6ml de água destilada aos vidros de penicilina de10ml, e
depois eles foram levados para autoclave. Pequenos discos do fungo com

 meio foram acrescentados aos recipientes, foram lacrados e armazenados

em refrigerador.

Solo ou areia estéril: Adiciona-se a suspensão de células em solo

submetido à esterilização. Em um erlenmeyer, o solo foi esterilizado
durante 30 minutos a 121°C por quatro vezes consecutivas, com intervalos
de 48 horas. Depois, a areia foi adicionada aos tubos de ensaio, sendo
novamente esterilizada. Inicialmente, preparou-se a suspensão dos esporos,
adicionando água destilada, previamente esterilizada, aos cultivos. Com
uma alça de platina, foi realizada a mescla entre a água e os esporos.
Depois da formação da suspensão, acrescentou-se 0,5 mL dela, em cada
tubo. Então, adicionou-se uma pequena porção de areia estéril em outros
cultivos. Em seguida, a mistura (areia/esporos) foi colocada em novos
tubos. Todos os recipientes ficaram sob a temperatura ambiente.

3. Quais resultados obtiveram com as técnicas.

R: O repique periódico em placa de Petri mostrou resultados
satisfatórios para todos os fungos, e o repique em tubo de ensaio foi
ineficiente.
A conservação em areia estéril feita com a mescla entre areia e
esporos se mostrou eficaz, mas quando utilizado a suspensão de esporos,
os resultados não foram satisfatórios.
As conservações feitas em óleo mineral e água estéril foram eficientes. A
conservação em água estéril é rápida e de baixo custo.

TÉCNICAS DE CONSERVAÇÃO DE FUNGOS FILAMENTOSOS

PRODUTORES DE CELULASES

N. T. FEITOSA1, F. A. SANTOS1, P. M. V. de SENA1, A. L. C. CARDOSO1, D. J. N.

de MELO1 e S. F. M. SANTOS1

Apresentado no XXI Congresso Brasileiro de Engenharia Química (2016).

https://proceedings.science/cobeq/cobeq-2016/papers/tecnicas-de-conservacao-de-
fungos-filamentosos--produtores-de-celulases