Questões de “laboratório”

Questão 1: Uma prática de laboratório prevê a análise de ácido ascórbico (AA) em um

comprimido efervescente que nominalmente contém 1 g de AA. As seguintes instruções
foram transmitidas pelo guia:

1 - Prepare 50,00 mL de uma solução estoque de ácido ascórbico 10 -2 mol L-1 em tampão
fosfato pH 7,4;

2 - Prepare 5 padrões de ácido ascórbico com concentração variando de 2 a 10 x 10 -4 mol -1

com tampão fosfato pH 7,4;

3 - Prepare a amostra de comprimido de vitamina C fazendo uma diluição em 100 mL de água.

A seguir, pipete 10,00 mL desta solução para um balão de 100 mL e complete com tampão
fosfato

4 - Injete cada um dos padrões de ácido ascórbico preparados no sistema em fluxo;

5 - Injete a amostra diluída de vitamina C no sistema em fluxo;

6 - Meça a corrente de oxidação do ácido ascórbico presente nos padrões e na amostra

aplicando um potencial de + 0,65 V;

7 Construa a curva analítica para a determinação do ácido ascórbico;

8 - Determine a concentração do ácido ascórbico na amostra. Lembre-se de levar em

consideração a diluição na amostra.

A tabela abaixo mostra as correntes obtidas para os 5 padrões preparados:

Solução [AA] Corrente de oxidação

1 2.0 x 10-4 mol L-1 32,1 µA
2 4.0 x 10-4 mol L-1 63,9 µA
3 6.0 x 10-4 mol L-1 96,2 µA
4 8.0 x 10-4 mol L-1 127,9 µA
5 1.0 x 10-3 mol L-1 159,8 µA
Amostra 5,678 x 10-4 mol L-1 90,84 µA

Com base no
Curva analítica procedimento
165 realizado,
estime a
Corrente de oxidação (µA)

145 f(x) = 159700 x + 0.16

R² = 1 concentração
125
de ácido
105
ascórbico da
85
amostra e qual
65 a corrente que
45 seria esperada.
25
0.0001 0.0002 0.0003 0.0004 0.0005 0.0006 0.0007 0.0008 0.0009 0.0010 0.0011
Concentração de ácido ascórbico (mol L-1)
 A concentração foi estimada de acordo com 1 g de ácido ascórbico por
comprimido e a corrente de oxidação estimada pela equação da reta (Corrente de
oxidação = 159700[AA] + 0,16), resultados estimados na tabela.

Questão 2: A integração das correntes que fluíram durante uma injeção de um dos picos
corresponde a uma corrente de aproximadamente 32,1 µA x 30/2 = 481,5 µC.

Com base nesta informação, calcule qual é o percentual de ácido ascórbico que foi oxidado
durante a injeção, sabendo que o volume injetado foi de 100 µL.

1 F -- 98485 C 1 mol AA
2F
x 481,5×10-6 C --
x = 4,89×10-9 F y 4,89×10-9 F
y = 2,445×10-9 mol
5,678×10-4 mols AA -- 1L 5,678×10-8 -- 100 %
z 100×10-6 L 2,445×10-9 a
z = 5,678×10-8 mol a = 4,30

O percentual de ácido ascórbico oxidado durante a injeção de 100 µL de amostra

foi 95,7%.

Questão 2: A carga que flui durante uma injeção de um dos picos pode ser
estimada com o auxílio da geometria. Suponha que o pico ao lado
corresponda a uma corrente de aproximadamente 32,1 µA e que o tempo
de cada pico seja aproximadamente 20 s. 32,1 x 20/2 = 321 µC.
Com base nesta informação, calcule qual é o percentual de ácido ascórbico
que foi oxidado durante a injeção, sabendo que o volume injetado foi de
100 µL e que o processo envolve 2 elétrons.

20 s

1F 1 mol AA
98485 C 2F
-- --
x 321×10-6 C y 3,26×10-9 F
x = 3,26×10-9 F y = 1,63×10-9 mol
5,678×10-4 mols AA -- 1L 5,678×10-8 -- 100 %
z 100×10-6 L 1,63×10-9 a
z = 5,678×10-8 mol a = 2,87

O percentual de ácido ascórbico oxidado durante a injeção de 100 µL de amostra

foi 97,13%.

Questão 3: No artigo desta semana, há um gráfico com cerca de 40 injeções em sequência.

Pergunta-se: Trata-se de um estudo de reprodutibilidade ou de repetibilidade? Explique o que
é cada caso e justifique a sua resposta com exemplos práticos.

O gráfico, do artigo, com 40 injeções em sequência é um estudo de

repetibilidade, pois neste estudo fazemos a mesma medida diversas vezes nas mesmas
condições (procedimento de medição, analista, amostra, sistema de medição, condições
de operação, local). Já no estudo de reprodutibilidade o objetivo é medir a capacidade
do sistema de medição em reproduzir o mesmo resultado nas medições, com isso as
condições de medida são variadas (diferentes amostras, analista, condições de operação,
local, etc.)

Questão 4: Tente responder, justificando a sua resposta:

a) Porque a distância da ponta da pipeta em relação ao eletrodo tem influência no sinal

medido?

Porque a distância entre a ponta da pipeta e o eletrodo está diretamente relacionada

com a corrente do sistema. Em distancias pequenas a corrente inicialmente é pequena e
depois aumenta conforme o fluxo. Já em distâncias maiores a corrente diminui,
ocorrendo maior dispersão da zona de amostra.
b) Porque a velocidade de injeção altera o sinal, mesmo que o volume injetado seja o
mesmo?

Porque a medida que a velocidade de injeção aumenta a dispersão da zona de

amostra também aumenta, diminuindo assim o sinal analítico, pois a zona de amostra
fica menos “retida” na superfície do eletrodo. E conforme velocidade de injeção
diminui, menor a dispersão, deixando a amostra retida por mais tempo na superfície do
eletrodo, aumentando o sinal analítico.

c) Como é escolhido o potencial de trabalho?

O potencial de trabalho é escolhido com o ciclovoltamograma (potencial em função

da corrente (µA)), no qual observamos o potencial em que a substância de interesse é
oxidada e/ou reduzida.