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PQI-3404 FUNDAMENTOS DE BIOPROCESSOS

Prova 2 – 14.04.2021

OBS: favor apagar esta folha de questões após entregar suas respostas.

Nome do aluno: _______________________________________________________

QUESTÃO 1

Glicose e frutose são monossacarídeos com a mesma fórmula química (C6H12O6). No


entanto, um microrganismo como a bactéria Escherichia coli não se desenvolve
(multiplica) com a mesma velocidade quando glicose ou frutose são usadas como única
fonte de carbono em meios de cultura. Com base nos conhecimentos apresentados
nesta disciplina sobre as macromoléculas e seus papéis biológicos, apresente e discuta
sobre ao menos uma explicação para este fenômeno (use um máximo de 10 linhas
para sua resposta).

QUESTÃO 2

Observe abaixo os resultados obtidos para a velocidade de reação em função da


concentração de substrato, para uma reação catalisada por enzima. Sabe-se que a
concentração inicial de enzima utilizada foi de 0,5 x 10-3 M. Com base nos dados, e
assumindo que a reação segue o modelo de Michaelis e Menten, determine:

a) Os valores da velocidade máxima (Vm) e da constante Km; (1,0 pontos)

b) O valor de kcat; (0,5 pontos)

c) Qual o significado físico de kcat? (0,5 pontos)

Concentração de substrato Velocidade inicial de reação


(M) (M/min)
0,005 0,56
0,010 0,96
0,020 1,47
0,033 1,92
0,100 2,63

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QUESTÃO 3

Uma enzima de aplicação industrial utilizada na hidrólise de biomassa lignocelulósica


possui Vmax = 12,3 M.s-1 e Km = 0,5 M quando os parâmetros são determinados
utilizando-se celulose padrão analítico (PA) como substrato. No entanto, quando o
substrato utilizado é o bagasso de cana pré-tratado (biomassa "real" que sofreu
processo de pré-tratamento a alta temperatura), os parâmetros obtidos são Vmax´ =
12,3 M.s-1 e Km´ = 0,2 M. Qual poderia ser a explicação para essa diferença? Comente
(explique sua resposta em um máximo de 10 linhas).

QUESTÃO 4

A clonagem molecular é uma técnica amplamente utilizada visando a produção de


proteínas recombinantes. Sobre a clonagem e a expressão de proteínas
recombinantes, responda:

a) O que são plasmídeos e por que são farramentas valiosas para a tecnologia de
DNA recombinante? (max. 10 linhas)
b) Por que a técnica de PCR (reação em cadeia da polimerase) é amplamente
usada em clonagens visando a expressão de proteínas recombinantes? (max.
10 linhas)

QUESTÃO 5

Dentre as aplicações da moderna Biotecnologia Industrial destaca-se a produção de


enzimas ou proteínas recombinantes. Um ponto importante nesse contexto diz
respeito à glicosilação dessas proteínas.

a) Defina o que é glicosilação e comente sobre sua importância no contexto da


aplicação final dessas proteínas. (max. 10 linhas)

b) Que implicações a produção de uma proteína glicosilada acarreta na escolha


do microrganismo/organismo hospedeiro a ser usado em sua produção? (max.
10 linhas)

Boa Prova!

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