Questão de aula 1

Nome Turma _____ N. ___ Data ___ /___ /____

o

Em cada item de escolha múltipla, selecione a opção correta.

Efeitos de erros de síntese proteica no desenvolvimento do peixe-zebra

O stresse proteotóxico nas células, resultante da acumulação de proteínas com enovelamento
errado, é responsável pela degeneração celular frequentemente associada ao envelhecimento
e a doenças degenerativas, como a doença de Alzheimer.
Para clarificar como é que o stresse proteotóxico contribui para a degeneração celular, foram
utilizados embriões de peixes-zebra transgénicos que expressam genes de RNA de
transferência (tRNA) mutantes em todas as suas células e tecidos. Os tRNA, com mutações no
seu anticodão, introduzem erradamente o aminoácido serina quando reconhecem o codão do
aminoácido leucina (CUG), contribuindo para a síntese de proteínas defeituosas e,
consequentemente, para a indução de stresse proteotóxico. O peixe-zebra apresenta alta
fecundidade, isto é, produz um elevado número de gâmetas, o que permite a obtenção de
muitos descendentes, reprodução e desenvolvimento rápidos, e o seu genoma possui cerca de
70% dos seus genes com respetivo equivalente no genoma humano. A transparência dos
embriões deste peixe permite o fácil acompanhamento do seu desenvolvimento.
Foram usadas duas linhagens de peixes-zebra, criadas no laboratório em diferentes aquários
sujeitos a limpeza frequente, a temperatura constante de 28° C e a um ciclo de 14 h de luz /
10 h de escuridão: a primeira linhagem contém apenas peixes não sujeitos a mutações no
tRNA; na segunda linhagem, os peixes apresentam uma mutação no anticodão do tRNA para a
serina, permitindo a ligação deste anticodão ao codão de leucina (Ser-tRNA Leu). No anticodão
Ser-tRNALeu, o anticodão CGA de serina foi substituído pelo anticodão CAG de leucina,
resultando na inserção de serina no polipéptido, ao emparelhar o anticodão mutado num
codão de leucina (Fig. 1). Este facto leva à síntese de proteínas anómalas. Enquanto o
aminoácido serina é polar e hidrofílico, encontrando-se na superfície proteica, o aminoácido
leucina é apolar e hidrofóbico, localizando-se no centro das proteínas hidrofóbicas, diferença
que, aquando da errada incorporação, interfere no respetivo processo de enovelamento.

Os gráficos das figuras 2, 3 e 4

registam os resultados obtidos em
resposta à acumulação de erros de
síntese proteica nos peixes-zebra.
Para verificar se esses erros
induziam stresse proteotóxico e
ativavam os mecanismos de
controlo da qualidade proteica, foi
estudada a expressão das ubiqui-
tinas. As ubiquitinas são proteínas
que reconhecem proteínas
anómalas não eliminadas, ligando-
-se-lhes e marcando-as para
degradação pelo proteossoma, no
citoplasma. O proteossoma
degrada as proteínas ubiquitinadas Fig. 1 Comparação entre o tRNA para a serina,
e deixa as moléculas de ubiquitina sem mutação e com mutação.
livres, de modo a serem recicladas.

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 Fig. 2 Células mortas em embriões
de duas linhagens de peixes-zebra,
24 horas após a fertilização.
A morte celular no controlo
corresponde a 100%.
Fig. 3 Malformações fenotípicas Fig. 4 Proteínas marcadas com
em duas linhagens de peixes-zebra, ubiquitina em duas linhagens
5 dias após a fertilização. de peixes-zebra, 5 dias após
a fertilização
Adaptado de ria.ua.pt/handle/10773/14106 (consultado em 12/10/2021)

1. O objetivo do estudo foi

(A) avaliar a importância da temperatura no surgimento de mutações génicas no peixe-zebra.
(B) determinar os efeitos de erros de replicação no desenvolvimento do peixe-zebra.
(C) determinar os efeitos de erros de tradução no desenvolvimento do peixe-zebra.
(D) avaliar a importância da luminosidade na ativação de mecanismos de proteção celular.

2. Pode considerar-se como variável dependente neste estudo

(A) a luminosidade.
(B) as proteínas anómalas.
(C) os tRNA mutantes.
(D) a temperatura.

3. De entre as afirmações seguintes, relacionadas com os resultados experimentais, selecione as

três que são verdadeiras.
I. A sequência de aminoácidos de uma proteína determina a sua função, mas nunca a sua
forma.
II. O aumento de células mortas nos embriões que contêm o Ser-tRNA CAGLEU foi de cerca de
63% em relação ao controlo.
III. É possível que a taxa de morte celular nos peixes com tRNA mutantes resulte da
acumulação de proteínas com enovelamento errado.
IV. Não existe uma relação entre o stresse proteotóxico e o desenvolvimento ósseo dos
peixes.
V. A acumulação de proteínas disfuncionais no retículo endoplasmático ativa mecanismos de
proteção celular.

4. Neste estudo, a utilização do peixe-zebra como modelo vertebrado é vantajosa, pois

(A) apresenta uma baixa fecundidade, tal como no ser humano.
(B) possui genoma igual ao dos restantes vertebrados.
(C) não apresenta fenótipos de degeneração celular associados ao envelhecimento.
(D) possui genes envolvidos na expressão e regulação génica idênticos aos do ser humano.

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5. Atendendo ao objetivo do estudo, a mutação que permite a ligação do Ser-tRNA ao codão
codificante de leucina (CUG) foi necessária porque
(A) no peixe-zebra, o codão CUG não codifica nenhum aminoácido.
(B) nos peixes não mutantes, o Ser-tRNA apresenta o anticodão complementar do codão CUG.
(C) o codão CUG codifica vários aminoácidos.
(D) ao codão CUG apenas corresponde um anticodão e um aminoácido.

6. Neste estudo foram utilizados peixes-zebra que expressam genes de tRNA mutantes em todas
as suas células e tecidos. Tal justifica-se porque a mutação foi incorporada no ________ de
células embrionárias de peixe-zebra que, antes da divisão celular, promovem a ________,
possibilitando a transmissão da mutação a todas as células do organismo.
(A) DNA … replicação semiconservativa
(B) mRNA … transcrição
(C) DNA … transcrição
(D) mRNA … replicação semiconservativa

7. Considere a sequência dos aminoácidos 21 a 24 do peptídeo β-amiloide encontrado em

aglomerados proteicos, em consequência de stresse proteotóxico nas células cerebrais de
doentes de Alzheimer, e resultante da clivagem anormal da proteína β-amiloide:

… – Ala21 – Glu22 – Asp23 – Val24 – …

Fonte: www.maxwell.vrac.puc-rio.br/16186/16186_2.PDF (consultado em 12/10/2021)

7.1 Selecione a opção que avalia corretamente as afirmações.

I. O ácido nucleico que contém o gene da proteína β-amiloide apresenta ribose.
II. A síntese da proteína β-amiloide implica a remoção de intrões.
III. A tradução da sequência dos codões que codifica a proteína β-amiloide implica a
formação de ligações peptídicas, com consumo de ATP.
(A) II é verdadeira; I e III são falsas. (C) II e III são verdadeiras; I é falsa.
(B) III é verdadeira; I e II são falsas. (D) I e II são verdadeiras; III é falsa.

7.2 A sequência de nucleótidos

da cadeia-molde que
determina os aminoácidos 21
a 24 da proteína β-amiloide é
(A) CGA CTT CTA CAA
(B) CGA CUU CUA CAA
(C) GCU GAA GAU GUU
(D) GCT GAA GAT GTT

Fig. 5 Código genético.

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8. Explique em que medida os resultados do estudo permitem verificar a importância do papel
das ubiquitinas no controlo dos efeitos do stresse proteotóxico associado a doenças
neurodegenerativas e ao envelhecimento.
Item
Cotação (em pontos)
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.1 7.2 8. Total
10 10 10 10 10 10 10 10 20 100

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Propostas de solução

1. (C)

2. (B)

3. II, III, V

4. (D)

5. (D)

6. (A)

7.1 (C)

7.2 (A)

8. O aumento de proteínas ubiquitinadas nos peixes-zebra com tRNA mutantes é indicador de que o
aumento do stresse proteotóxico ativa o complexo ubiquitinas-proteossoma, promovendo a destruição
das proteínas anómalas acumuladas.
A ubiquitinação é um mecanismo de regulação da expressão génica que visa combater o stresse
proteotóxico devido à acumulação de erros de tradução e a consequente degeneração celular associada
a doenças e ao envelhecimento.

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