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Atividade antimicrobiana e rendimento do óleo essencial de Pimenta

pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus (Gomes ) Landrum, Myrtaceae

YOKOMIZO, N.K.S1.; NAKAOKA-SAKITA, M.1*

1
Instituto Florestal - Secretaria do Meio Ambiente , Seção de Fitotecnia Parasitológica e Laboratório de Fitoquímica,
Caixa Postal 1322, 02377-000 São Paulo (SP).E-mail: massako_nakaoka@yahoo.com.br

RESUMO: Com o objetivo de verificar o potencial antimicrobiano de Pimenta pseudocaryophyllus

var. pseudocaryophyllus, foi avaliado em condições de laboratório o óleo essencial extraído de
suas folhas quanto à atividade nos microrganismos: Aspergillus niger, Penicillium verrucosum,
Escherichia coli, e Staphylococcus aureus. A metodologia utilizada foi o método do papel
de filtro embebido no óleo essencial a ser testado. A extração do óleo essencial foi feita por
hidrodestilação em aparelho Clevenger modificado por Wasicky em 1963. Testou-se o óleo
essencial de plantas provenientes de Campos do Jordão e de Itaquaquecetuba. Os resultados
obtidos mostraram que o óleo da planta procedente de Campos do Jordão apresentou atividade
antimicrobiana muito próxima à do citral, inibindo em 72,7 % e 71,5 %, respectivamente, o
crescimento dos microrganismos; porém, foi significativamente superior ao da planta procedente
de Itaquaquecetuba, que apresentou 38,8 % de inibição. Quanto aos microrganismos, a inibição
do crescimento foi maior para P. verrucosum (83,3%), seguido por A. niger (71,9%) e S. aureus
(70,3%), que não apresentaram diferença entre si. A menor inibição foi apresentada por E. coli
(18,4%). Com exceção de E. coli, que apresentou a mesma característica de inibição para os
dois óleos e o citral, todos os demais fatores apresentaram interação significativa, demonstrando
especificidade de reação para cada um dos níveis desses fatores e o potencial antimicrobiano,
do óleo essencial de Pimenta pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus. O rendimento
do óleo essencial da planta coletada em Campos do Jordão foi de 2,3% e da coletada em
Itaquaquecetuba foi de 1,9% (p/v).

Palavras chave: Pimenta pseudocaryophyllus, óleo essencial, rendimento, atividade

antimicrobiana.

ABSTRACT: Antimicrobial activity and essential oils yield of Pimenta pseudocaryophyllus

var. pseudocaryophyllus (Gomes) Landrum, Myrtaceae. The essential oils of Pimenta
pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus specimens from two distinct locations: Campos do
Jordão and Itaquaquecetuba, were tested to detect antimicrobial activity to the microorganisms
Aspergillus niger, Penicillium verrucosum, Escherichia coli and Staphylococcus aureus in
medium culture. The method utilized was impregnated filter paper in essential oils . The
essential oil extraction was made through method of Clevenger modified for Wasicky in 1963,
for the hydrodistilation. The monoterpene citral was tested under the same conditions of the
essential oils. The microorganisms development under these conditions presented the following
results: the oil of P. pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus from Campos do Jordão had
the same antimicrobial activity that citral, inhibiting in 72,7 % and 71,5%, the growth of the
microorganisms, significantly higher than the level of the oil originated from Itaquaquecetuba
that presented 38,8% of inhibition. About to the microorganisms, the growth inhibition was higher
for P. verrucosum (83,3%), followed by A. niger (71,9%) and S. aureus (70,3%). The minimal
inhibitory activity was presented by E. coli (18,4%). Except for E. coli, which presented the same
characteristic of inhibition for two oils and the citral, all the other factors presented significant
interaction, showing specificity of reaction for each one of the levels of these factors. These data
demonstrated the antimicrobial potential of the essential oil of the Pimenta pseudocaryophyllus
var. pseudocaryophyllus The yield of essential oil collected in Campos do Jordão was 2,3% and
the species collected in Itaquaquecetuba was 1,9% (w/v).

Keywords: Pimenta pseudocaryophyllus, essential oil, yield, microbial activity.

Recebido para publicação em 09/08/2012

Aceito para publicação em 12/03/2014 10.1590/1983-084X/12_097

Rev. Bras. Pl. Med., Campinas, v.16, n.3, p.513-520, 2014.

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INTRODUÇÃO
A produção de óleos essenciais no Brasil
é destacada por Bizzo et al. (2009), que, ao lado
da Índia, China e Indonésia são considerados os 4
grandes produtores mundiais. No período de 2005
a 2008, a exportação de óleos essenciais de cítricos
pelo Brasil foi de 287.799 t. Em 2004, as exportações
do Brasil em óleos essenciais registraram valor
recorde histórico de US$ 98 milhões, revelando-o
como 4º maior exportador de óleos essenciais do
mundo (Barata et al., 2005).
Os óleos essenciais constituem um
grupo variável e complexo, com necessidade
de se compreender e conhecer os mecanismos
que regulam a sua produção e sua expressão
na natureza. São substâncias integrantes das
engrenagens que constituem os ecossistemas e
estudos sobre esses óleos essenciais poderão
aprofundar o conhecimento da biodiversidade
odorífera brasileira e contribuir para o bem estar e
a saúde do povo (Gottlieb & Borin, 2003).
As substâncias voláteis produzidas pelo
metabolismo secundário, os fenilpropanóides e,
especialmente, os terpenóides são os principais
constituintes dos óleos essenciais. Grande parte dos
fenilpropanóides são voláteis com ação biológica e
é extraído, com arraste a vapor, substâncias com
baixo peso molecular (Craveiro & Machado, 1986).
A família Myrtaceae, apresenta espécies
com interesse medicinal, e, em destaque, o gênero
Pimenta (Paula et al., 2010)
P i m e n t a p s e u d o c a r y o p h y l l u s v a r.
pseudocaryophyllus (Gomes) Landrum, é uma
espécie arbórea conhecida como chá da terra,
louro, louro da terra. As folhas desta espécie são
utilizadas popularmente na forma de chá de efeito
calmante. Apresenta aroma semelhante ao da erva
cidreira. A família Myrtaceae compreende cerca de
4000 espécies (Landrum & Kawazaki, 1997), com
distribuições tropicais e subtropicais, e compreende
cerca de 130 gêneros (Barroso et al., 1984).
Inúmeras espécies da família Myrtaceae
são produtores de óleo essencial e apresentam
atividade biológica como Myrtus communis var.
italica estudada por Gauthier et al. (1989), que
detectaram cineol, a-pineno e linalol como principais
componentes, e que apresentam atividade contra
Pediculus humanus capitis.
No estudo da composição química e testes
de atividade antifúngica do óleo essencial das folhas
de Pimenta pseudocaryophyllus, coletada na região
de Telêmaco Borba, Estado do Paraná, Custódio
et al. (2007) obtiveram rendimento de 1,1% pelo
processo de hidrodestilação em aparelho Clevenger.
O óleo apresentou atividade antifúngica contra
Alternaria sp., Botryosphaeria ribis, Botryosphaeria
sp. e Aspergillus niger. Os autores encontraram
Rev. Bras. Pl. Med., Campinas, v.16, n.3, p.513-520, 2014.
o eugenol como principal constituinte do óleo
essencial, substância com comprovada ação
antifúngica.
Quanto à composição química do óleo
essencial de Pimenta pseudocaryophyllus var.
pseudocaryophyllus, procedente de Campos do
Jordão, Nakaoka Sakita et al. (1994) encontraram
como principais componentes o neral (27,847%)
e o geranial (34,256%) isômeros conhecido como
citral. O citral é amplamente utilizado na fabricação
de perfumes e de refrigerantes. Além deste isômero
foi encontrado também linalol (5,178%), geraniol
(4,82%), a-pineno (1,35%), b-pineno (2,67%),
terpinen-4-ol (0,308%), terpinoleno (0,308%), 1,8
cineol (0,104%), limoneno (0,150%), a-terpineol
(0,488).
Estudando o óleo essencial de Pimenta
pseudocaryophyllus coletadas na Ilha do Cardoso e
em Paranapiacaba, (Lima et al., 2006) encontraram
resultados semelhantes na atividade antimicrobiana
contra Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus
aureus. Quanto a Candida albicans, o melhor
resultado foi à espécie coletada em Paranapiacaba.
O principal componente do óleo essencial da espécie
coletada na Ilha do Cardoso foi o eugenol enquanto
que a espécie de Paranapiacaba apresentou como
principal componente o 4-metil-eugenol.
Utilizando extratos etanólicos brutos das
folhas de P. pseudocaryophyllus, coletadas em
Brasília, DF e São Gonçalo do Abaeté (MG), (Paula
et al., 2009) verificaram atividade antimicrobiana
contra bactérias Gram positivas Staphylococcus
aureus, Micrococcus luteus, M. roseus, Bacillus
cereus, B. atrophaeus, B. stearothermophilus e
frente as Gram negativas Pseudomonas aeruginosa,
P. stutzeri e frente a levedura Candida albicans.
Compostos fenólicos, taninos, flavonóides e óleos
essenciais foram identificados na planta e podem
estar envolvidos na ação antimicrobiana.
A atividade antibacteriana e antifúngica
de Pimenta racemosa var. racemosa P.Miller,
Myrtaceae, foram verificadas por Aurore et al.(1998)
que determinaram a concentração inibitória mínima
e máxima utilizando método de diluição em meio
sólido. Detectaram no óleo essencial de P. racemosa
a presença de neral (31,7%) e geranial (40,3%),
com atividade de inibição contra Mycobacterium
smegmatis, Candida albicans, Escherichia coli,
Staphylococcus aureus e Enterococcus faecium.
Quanto à atividade biológica de citral
(geranial – 45,9% e neral – 33,5%) obtido,
principalmente, de Cymbopogon citratus (DC)
Stapf, Chalchat et al. (1997) encontraram uma
elevada ação inibitória em Staphylococcus aureus e
Escherichia coli. Extraído de Cymbopogon citratus.
Pereira et al. (2004) verificaram a inibição de 89,9%

para bactéria Escherichia coli, 85,7% Klebisiella
pneumoniae, 16,6% para Proteus mirabilis, porém,
nenhuma atividade contra Klebsiella oxytoca e
Pseudomonas aeruginosa.
Dentre as espécies estudadas por Apel
et al. (1998), M. eugeniopsoides apresentou
maior atividade frente a todos os microrganismos
testados e M. cucullata, inibição total contra S.
cereviseae. Segundo os autores, as principais
substâncias encontradas nas espécies estudadas,
com reconhecida ação antimicrobiana, foram:
terpinen-4-ol, terpinoleno, l,8-cineol, linalol e
a-terpineol.
A composição química e atividade
antimicrobiana do óleo essencial de Marlierea
eugeniopsoides e M. obscura (Myrtaceae), foram
efetuadas por Limberger et al. (1998) pelo método
de difusão em agar, verificando excelente atividade
inibitória contra Staphylococcus epidermidis, S.
aureus, Micrococcus luteus e Sacharomyces
cerevisiae.
O estudo da composição química do óleo
essencial e a atividade antimicrobiana de Eugenia
speciosa CAMB. (Myrtaceae) contra bactérias
Staphylococcus aureus e Echerichia coli, Viane
et al. (1998) usando o método de difusão em agar
verificaram inibição, principalmente, a S. aureus
identificando os compostos: limoneno (33,7%),
terpineol (18,9%), e a-pineno (5,8%).
Considerando o potencial da espécie,
o interesse, e a utilização cada vez maior da
população por produtos naturais, este trabalho teve
como objetivo verificar a atividade antimicrobiana do
óleo essencial de Pimenta pseudocaryophyllus var.
pseudocaryophyllus (Gomes) Landrum.
MATERIAL E MÉTODOS
Coleta e identificação botânica
Amostras de Pimenta pseudocaryophyllus
var. pseudocaryophyllus (Gomes) Landrum foram
coletadas nas seguintes localidades:
a) Município de Campos do Jordão, Estado de
São Paulo, SP., coordenadas 22º44’19” S
e 45º35’31” W, especificamente no Parque
Estadual de Campos do Jordão, altitude
aproximada de 1.808 m, em relevo de
colinas e morros altos (Ross & Moroz, 1997).
Segundo Köppen, o clima é subtropical de
altitude, mesotérmico úmido sem estiagem,
com temperatura média anual mínima de
14,3ºC e máxima de 15,3ºC. Exsicatas
do material encontram-se depositadas no
Herbário D Bento Pickel sob o registro nº
13083
b) Município de Itaquaquecetuba, Estado de São
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Paulo, SP., coordenadas Lat. sul: 23°30
e longitude: W.Gr.46°22, cujas amostras
foram coletadas em um único indivíduo, em
altitude aproximada de 764 m, segundo a
classificação em relevo de Ross & Moroz
(1997) em região morros baixos. O clima,
segundo Köppen, é caracterizado pelo clima
tropical de altitude, com chuvas no verão e
seca no inverno, com a temperatura média do
mês mais quente superior a 22°C. Exsicatas
do material encontram-se depositadas no
Herbário D Bento Pickel sob o registro nº
33.370.
Obtenção dos óleos essenciais
O material coletado foi colocado em local
ventilado à temperatura ambiente para evitar a
fermentação. Foi seco e estabilizado à temperatura
de 40ºC em estufa com circulação de ar por 24
horas. O material estabilizado foi pulverizado em
um moinho de faca e martelo.
Para destilação do óleo essencial, utilizou-
se 400 g de folhas secas e pulverizadas. A extração
foi efetuada pelo método de CLEVENGER,
modificado por Wasicky (1963), pela hidrodestilação,
por um período de 3 (três) horas.
A título de comparação foi utilizado citral,
como tratamento padrão.
Microrganismos
Duas bactérias e dois fungos, abaixo
caracterizados, foram utilizados no presente ensaio.
•Escherichia coli, da coleção do Instituto
Biológico, SP;
•Staphylococcus aureus, da coleção do
Instituto Biológico, SP;
•Aspergillus niger, da coleção de fungos do
Instituto de Botânica, SP e
•Penicillium verrucosum, exemplar de
número 1712, da coleção de fungos do Instituto de
Botânica, SP.
Atividade Antimicrobiana
A atividade antimicrobiana foi realizada
através da utilização do método do papel embebido
com o óleo. Papel de filtro CAAL, 80 g, foi recortado
em discos com 1 cm de diâmetro e esterilizados em
estufa a 150ºC por 60 minutos e embebidos no óleo
essencial a ser testado. Para óleos essenciais mais
viscosos, foi utilizado álcool etílico para dissolver e
obter uma melhor impregnação dos discos de papel
de filtro.
Como controle absoluto, o disco de papel
de filtro apenas autoclavado, sem nenhuma
impregnação. Utilizando a metodologia do Plant
Pathologist’s Pocketbook (1968) as Placas de Petri
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contendo Agar Nutriente e Agar Sabouraud Dextrose
foi inoculado com uma suspensão de bactérias e
fungos respectivamente.
A suspensão foi obtida através da introdução
de uma solução de água destilada esterilizada e
Tween a 0,1% em tubos com colônias de dois dias
das bactérias e de 5 dias dos fungos.
Após agitação manual, a suspensão obtida
foi diluída em 50 mL água destilada esterilizada e 0,2
mL da suspensão resultante foram transferidos para
as placas de Petri e espalhados de maneira uniforme
na superfície do meio. Através do método da diluição
em série, seguido de plaqueamento, estimou-se que
cada placa de Petri foi inoculada com:
•227000 esporos de Staphylococcus
aureus,
•421500 esporos de Escherichia coli,
•56870 propágulos de Aspergillus niger, e
•317500 propágulos de Penicillium
verrucosum.
Um disco de papel de filtro impregnado
com o óleo essencial foi depositado no centro
de cada placa. Placas inoculadas com bactérias
foram incubadas em estufa a 34ºC por 48 horas
e placas com fungos a 25ºC por 70 horas. Após
este período foi realizada a avaliação dos efeitos
produzidos pelos óleos essenciais no crescimento
dos microrganismos, medindo-se o halo de inibição
em torno do papel de filtro.
A leitura em centímetros foi transformada
em Porcentagem de Inibição do Crescimento -
PIC, conforme metodologia de Edington & Khew
(1971). Para fins de processamento estatístico
esses dados em PIC foram transformados em
asen√(X+00,1/100), utilizando o programa ESTAT
- Sistema para Análises Estatísticas (V. 2.0), da
UNESP, Campus de Jaboticabal.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Rendimento
A extração do óleo essencial de folhas de
Pimenta pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus
apresentou rendimento da ordem de 2,3% e 1,9%
(p/v), para as procedências de Campos do Jordão
e Itaquaquecetuba, respectivamente. Pode ser
considerado um rendimento bom, conforme consta
na (Tabela 1).
Este elevado rendimento em óleos
essenciais torna a Pimenta pseudocaryophyllus
var. pseudocaryophyllus uma espécie interessante

Tabela 1. Comparação do rendimento de óleos essenciais de outras espécies e respectivos autores

Espécie Autor Rendimento

Peso/volume
P. pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus Neste experimento 2,3%
procedente de Campos do Jordão
P. pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus Neste experimento 1,9%
procedente de Itaquaquecetuba
P. pseudocaryophyllus Custodio et al. (2010) 1,0%
Pseudocaryophyllus pabstianus Legrand. Campos Correa & Gotllieb (1970) 0,8% a 1,2%
Pseudocaryophyllus jaccoudii Mattos Jardim & Jaccoud (1965) 2%
Pseudocaryophyllus guilli (Speg.). Burr. Fenik & Retamar (1972) 0,17 a 0,21%
Eugenia dysinterica Paula et al. 1998 0,15%,
Myrcia acuminatissima Henriques et al. (1997) 0,12%
Myrcia bombicina Henriques et al. (1997) 0,95%
Myrcia fallax Henriques et al. (1997) 0,35%
Myrcia glaba Henriques et al. (1997) 0,11%
Myrcia multiflora Henriques et al. (1997) 0,20%
Myrcia polyantha D. C. var. coriacea Bg De Alencar et al. (1971) 2%
Calyptranthes spruceana Berg Campos Corrêa et al (1972) 1,7%
Calyptranthes sp. Campos Corrêa et al (1972) 2%

Rev. Bras. Pl. Med., Campinas, v.16, n.3, p.513-520, 2014.


e promissora, não só quanto ao rendimento, como
também pelos seus principais constituintes químicos,
havendo necessidade de mais estudos, inclusive
filogenéticos, envolvendo outras procedências,
e mais variáveis, para explicar a variabilidade no
rendimento do óleo essencial.
Em trabalho anterior, Nakaoka-Sakita et al.
(1994) encontraram no óleo essencial das folhas de
P. pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus neral
(27,847%) e geranial (34,256%) isômeros conhecido
como citral. O citral é amplamente utilizado
na fabricação de perfumes e de refrigerantes.
Além deste isômero foi encontrado também
linalol (5,178%), geraniol (4,82%), a-pineno
(1,35%), b-pineno (2,67%), terpinen-4-ol (0,308%),
terpinoleno (0,308%), 1,8 cineol (0,104%), limoneno
(0,150%), a-terpineol (0,488).
Na Pimenta pseudocaryophyllus coletadas
em Paranapiacaba Lima et al. (2006) encontraram
4-metil-eugenol e eugenol na espécie coletada na
Ilha do Cardoso. Os autores encontraram melhores
resultados contra Escherichia colli, Pseudomonas
aeruginosa, e Staphyloccoccus aureus, com a
espécie coletada na Ilha do Cardoso. As espécies
coletadas de ambas as localidades apresentaram
resultados similares. Entretanto, contra Candida
albicans, o melhor resultado foi com a espécie
coletada em Paranapiacaba.
Verificou-se que tanto Lima et al. (2006)
como Custódio et al. (2007), que trabalharam com
a Pimenta pseudocaryophyllus encontraram eugenol
e 4-metil-eugenol como constituinte principal do
óleo essencial.
Quanto à atividade biológica do
citral presente no óleo essencial de Pimenta
pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus, os
resultados encontrados, são concordantes com os
trabalhos efetuados por Aurore et al. (1998), com
Pimenta racemosa, Myrtaceae, e de Chalchat et al.
(1997), com Cymbopogon citratus, ambas espécies
contendo neral e geranial (citral) como principais
componentes com atividade inibitória contra
Escherichia coli e Staphylococus aureus.
Os mesmos microorganismos foram
utilizados no presente trabalho verificando que a
atividade do óleo coletado em Campos do Jordão
foi igual ao óleo padrão de citral utilizado. A espécie
coletada em Campos do Jordão apresentou maior
atividade em comparação à espécie coletada em
Itaquaquecetuba.
A atividade antimicrobiana de terpinen-4-ol,
terpinoleno, 1,8-cineol, linalol, limoneno, a-pineno e
a-terpineol são encontradas em inúmeras espécies
da família Myrtaceae contra Staphylococcus
aureus e Echerichia coli Apel et al. (1998),
Limberger et al. (1998) e Viane et al. (1998). Os
mesmos componentes também foram encontrados
Rev. Bras. Pl. Med., Campinas, v.16, n.3, p.513-520, 2014.
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por Nakaoka Sakita et al. (1994) na Pimenta
pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus.
Estes componentes, presentes
no óleo essencial de P. pseudocaryophyllus
var. pseudocaryophyllus poderão ter atuado
juntamente com o citral na atividade inibitória dos
microorganismos utilizados no presente trabalho.
A (Tabela 2) apresenta os dados médios, em
porcentagem de inibição de crescimento das
bactérias e fungos submetidos a crescimento em
meio de cultura contendo óleo essencial de Pimenta
pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus.
Observam-se diferentes padrões de desenvolvimento
dos microrganismos, cuja diferença é comprovada
pela análise de variância apresentada.
Observa-se que entre os microrganismos,
os fungos apresentaram maior inibição aos óleos
essenciais testados, na seguinte seqüência:
Penicillium verrucosum apresentou o maior PIC
(Porcentagem de Inibição de Crescimento);
Aspergillus niger, que não foi significativamente
diferente da bactéria Staphylococcus aureus, e
Escherichia coli, com menor PIC.
Entre os óleos essenciais utilizados,
o diferencial de inibição de crescimento dos
microrganismos testados, ocorreu na seguinte
seqüência: citral com capacidade de inibição igual
a P. pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus
procedente de Campos do Jordão, da ordem de 72%,
e P. pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus
procedente de Itaquaquecetuba, com inibição da
ordem de 38%.
Com exceção dos tratamentos com
Escherichia coli, os demais microrganismos
apresentaram interação significativa com o óleo
essencial testado, conforme demonstrada na análise
de variância, cujo desdobramento é apresentado
na (Tabela 3).
A interação óleo e microrganismo
apresentou os dados colocados na (Tabela 3),
onde a inibição do fungo Aspergillus niger deu-se
na seguinte sequência: inibição total do crescimento
em citral e Pimenta pseudocaryophyllus var.
pseudocaryophyllus procedente de Campos
do Jordão, e reduzida inibição em óleo de P.
pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus
procedente de Itaquaquecetuba, na ordem de 35%.
A inibição do fungo Penicillium verrucosum
deu-se na seguinte sequência: inibição total do
crescimento em citral e P. pseudocaryophyllus de
Campos do Jordão, e reduzida inibição em óleo
de P. pseudocaryophyllus de Itaquaquecetuba, na
ordem de 70%.
A inibição do crescimento da bactéria
Escherichia coli ocorreu na mesma proporção nos
três tratamentos testados, com média de 18%.
A inibição da bactéria Staphylococcus
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Tabela 2. Análise de variância e valores de F e porcentagem de inibição de crescimento de microrganismos

em óleo essencial de Pimenta pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus e citral.
Microorganismo Escherichia Penicillium Staphylococcus Aspergillus Média
óleo essencial coli verrucosum aureus niger %
% % % %
P. pseudocaryophyllus, Campos do Jordão 15,9159 90,0000 90,0000 90,0000 71,4790
P. pseudocaryophyllus, Itaquaquecetuba 18,4579 70,0044 30,8436 35,7701 38,7690
Citral 20,7221 90,0000 90,0000 90,0000 72,6805
Média do microrganismo 18,3653 83,3348 70,2812 71,9234 60,9761
Óleo essencial 154,1598**
Fator Valor de F
Microrganismo 262,5354**
Interação óleo x microrganismo 27,9302**
Desdobramento de óleo em microrganismo
Aspergillus niger 102,0459**
Escherichia coli 0,6018**
Penicillium verrucosum 13,8735**
Staphylococcus aureus 121,4290**
Desdobramento de microrganismo em óleo
Citral 124,9017ns
Pimenta pseudocaryophyllus - C. Jordão 142,8333**
Pimenta pseudocaryophyllus - Itaquaquecetuba 50,6607**
Média Geral 60,9762%
Desvio Padrão 5,3684
Coeficiente de Variação 8,8040%

Tabela 3. Teste de Tukey e aplicado na porcentagem de inibição de crescimento e desdobramento das interações
Desdobramento dos óleos essenciais em microrganismo. Numa mesma coluna, médias seguidas pela mesma letra
não diferem entre si ao nível de 5%. Diferença Mínima Significativa = 10,9409%.
microrganismo Aspergillus Escherichia coli Penicillium Staphylococcus
Níger % verrucosum aureus
óleo essencial % % %
Citral 90,0000 a 20,7221 a 90,0000 a 90,0000 a
P.pseudocaryophyllus, 90,0000 a 15,9159 a 90,0000 a 90,0000 a
Campos do Jordão
P.pseudocaryophyllus, 35,7701 b 18,4579 a 70,0044 b 30,8436 b
Itaquaquecetuba
Desdobramento dos microrganismos nos óleos essenciais. Numa mesma coluna, médias seguidas pela mesma letra
não diferem entre si ao nível de 5%. Diferença Mínima Significativa = 12,0877.
óleo essencial Citral P. pseudocaryophyllus, P. pseudocaryophyllus
Campos do Jordão Itaquaquecetuba
microrganismo % % %
Aspergillus niger 90,0000 a 90,0000 a 35,7701 b
Escherichia coli 20,7221 b 15,9159 b 18,4579 c
Penicillium verrucosum 90,0000 a 90,0000 a 70,0044 a
Staphylococcus aureus 90,0000 a 90,0000 a 30,8436 b

Rev. Bras. Pl. Med., Campinas, v.16, n.3, p.513-520, 2014.


aureus deu-se na seguinte seqüência: inibição total
do crescimento em citral e P. pseudocaryophyllus
de Campos do Jordão, e reduzida inibição em P.
pseudocaryophyllus de Itaquaquecetuba, na ordem
de 30%.
A inibição do crescimento dos microrganismos
em óleo de P. pseudocaryophyllus de Campos do
Jordão deu-se na seguinte seqüência: inibição
total do crescimento de Penicillium verrucosum,
da mesma forma que em Staphylococcus aureus e
Aspergillus niger, e reduzida inibição de crescimento
de Escherichia coli.
A inibição do crescimento dos
microrganismos em óleo de P. pseudocaryophyllus
de Itaquaquecetuba deu-se na seguinte seqüência:
maior inibição do crescimento de Penicillium
verrucosum; reduzida inibição de crescimento de
Aspergillus niger, similar a Staphylococcus aureus,
e maior inibição de crescimento de Escherichia coli.
A inibição do crescimento dos microrganismos
em citral deu-se na seguinte sequência: inibição
total do crescimento de Penicillium verrucosum,
Aspergillus niger e Staphylococcus aureus, e
reduzida inibição de crescimento de Escherichia
coli, na ordem de 20%.
A atividade biológica do óleo essencial
de P. pseudocaryophyllus coletado tanto no
Parque Estadual de Campos do Jordão como em
Itaquaquecetuba, apresentou variações na inibição
do crescimento de acordo com os microorganismos
utilizados. Porém, o óleo essencial extraído de P.
pseudocaryophyllus procedente de Campos do
Jordão apresentou atividade biológica superior à
espécie coletada em Itaquaquecetuba.
Estes resultados demonstram que o
óleo essencial de P. pseudocaryophyllus var
pseudocaryophyllus, tem potencial de aproveitamento
como agente antimicrobiano, havendo necessidade
de efetuar estudos quanto à biologia da espécie,
a influência do ambiente e procedências, e a
determinação da atividade biológica de todos os
componentes químicos do óleo.
CONCLUSÕES
A atividade biológica do óleo essencial de
P. pseudocaryophyllus var. pseudocaryophyllus
coletado tanto no Parque Estadual de Campos
do Jordão como em Itaquaquecetuba, apresentou
variações na inibição do crescimento de acordo
com os microorganismos utilizados. Porém, o
óleo essencial extraído de P. pseudocaryophyllus
procedente de Campos do Jordão apresentou
atividade biológica superior à espécie coletada em
Itaquaquecetuba. O óleo essencial das folhas P.
pseudocaryophyllus mostrou uma boa atividade
contra os microrganismos testados, mostrando
Rev. Bras. Pl. Med., Campinas, v.16, n.3, p.513-520, 2014.
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tratar-se de uma espécie com potencial para
uso nas indústrias químico-farmaceutica, no
desenvolvimento de fármacos, uma vez que
a espécie contém componentes químicos de
conhecida atividade biológica no seu óleo essencial.
O rendimento do óleo essencial de P.
pseudocaryophyllus procedente de Campos do
Jordão (2,3%), foi superior ao de Itaquaquecetuba
(1,9%).
Este elevado rendimento em óleos
essenciais torna a Pimenta pseudocaryophyllus
var. pseudocaryophyllus uma espécie interessante
e promissora.
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