Determinação de lipídeos totais pelo Método de Bligh Dyer

Deve-se tarar 3 béqueres (identificados) de 50mL em estufa ventilada

regulada à 70°C por 4 horas. Após esse intervalo deve-se retirar os mesmo
com auxílio de uma pinça e colocar em dessecador por 5 minutos. Pesar em
balança analítica com 4 casas decimais.

A reação será desenvolvida em tubos com rosca que será realizada em

duas etapas.

1°Etapa  10mL de clorofórmio, 20mL de metanol e 8mL de água destilada.

Agitar os tubos por 30 minutos.

2°Etapa  10mL de clorofórmio e 10mL de sulfato de sódio 1,5% (Na2SO4)

Agitar os tubos por 2 minutos.

Deixar ocorrer a separação das fases, com uma pipeta retirar o excesso
da camada superior e descartar, penetrar com uma pipeta de 10mL até a
camada inferior, coletar aproximadamente 15-18mL dessa camada
(clorofórmio+gordura solúvel) e transferir em tubo de ensaio com filtro+ 1g de
Na2SO4 para remover os traços de água. Retirar uma alíquota de 5 mL (pipeta
volumétrica) desse extrato e transferir para o béquer tarado. Levar em estufa
por mais 4 horas, retirar e pesar.

Descartar Solvente contendo os lipídeos.

Amostra

Colocar filtro e
1 g de Na2SO4
anidro

Béquer
tarado

Colocar em estufa ventilada à 70°C por 4

horas, retirar em dessecador por 7 minutos e
pesar.

Coletar a fração com pipeta de

10mL e com cuidado
Coletar a fração com pipeta e volumétrica e
transferir para béquer tarado.