Características Gerais, Replicação e Cultivo dos Vírus
® Caracterís@cas gerais do genoma:
Definição
• São os menores micro-organismos e mais
simples que existem.
• Não possuem a maquinaria necessária para a
produção de energia metabólica e para a
síntese de proteínas e, por isso, necessitam das
funções e do metalismo celular para se
mul@plicar.
• Fora das células vivas, os vírus são estruturas
químicas, biologicamente inertes. A
sua a@vidade biológica só é adquirida no
interior de células vivas, por isso são parasitas
intracelulares obrigatórios.
Estrutura Básica do Vírus
• Um genoma de ácido nucleico feito de DNA ou
RNA, dobrado dentro do capsídeo; Obs: pode
ser linear (RNA ou DNA) ou circular (DNA);
• Uma cápsula proteica protetora ou capsídeo;
• Uma camada de membrada chamada
de envelope (alguns, mas não todos os vírus);
• Mul@plicam-se na célula do hospedeiro e
transferem genoma para outra célula.
® Variam entre as diversas famílias de vírus!
Material Genético
O empacotamento das informações gené@cas – con@das
no genoma – em envoltórios proteicos se cons@tui no
mecanismo de transporte destes agentes. Para tal,
u@lizam desde proteínas até lipídios para empacotar o
genoma, ser transportados e conhecer novos ambientes
e hospedeiros.
• Empacotar o genoma;
• Assegurar replicação;
• Subverter funções celulares.
O genoma viral – ácido ribonucleico (RNA) ou
desoxirribonucleico (DNA) – codifica apenas as
informações necessárias para assegurar a sua
mul@plicação, empacotamento do genoma e subversão
de funções celulares em beneWcio da sua mul@plicação.
Ao contrário de células eucariotas e procariotas, os vírus
não crescem ou se dividem, e sim são produzidos pela
associação dos seus componentes pré-formados no
interior da célula infectada.
Tipos de Vírions
Dois grupos principais de vírions são conhecidos: os
vírions sem envelope e os vírions com envelope, ou
envelopados. Os vírions mais simples são compostos
pelo genoma recoberto por uma camada de proteína,
denominada capsídeo (ou cápsula). As proteínas que
formam o capsídeo são sintetizadas pela maquinaria
celular, que obtém informações para a sua produção a
partir do código genético contido no genoma viral. Essas
proteínas interagem quimicamente entre elas, e
interagem também com o genoma, formando as
estruturas e formas de vírions existentes.
Os vírions mais complexos possuem moléculas longas
como genoma, as quais podem estar associadas com
proteínas, recobertas por capsídeos complexos,
revestidos externamente por uma membrana
lipoproteica de origem celular denominada envelope.
As camadas proteicas que recobrem o genoma
(capsídeo, envelope) são frequentemente denominadas
de envoltórios virais.
 comumente denominado nucleocapsídeo. Nos vírus
envelopados, o nucleocapsídeo é recoberto
externamente pela membrana lipoproteica que
constitui o envelope.

O Capsídeo

É a camada proteica que recobre externamente o

® A sobrevivência de um vírus envelopado é menor
que a de um não envelopado!
Composição do envelopado: lipídeos (é destruído com
água e sabão).
Composição do não envelopado: proteínas (é destruído
com um pH ácido e temperatura alta).
O que é mais fácil de ser destruído? O vírus envelopado.
O Genoma
O genoma dos vírus é constituído por moléculas de
ácido ribonucleico (RNA) ou desoxirribonucleico (DNA),
nunca pelos dois. Por isso, esses agentes são
denominados vírus RNA ou vírus DNA.
Em geral, o genoma dos vírus é muito compacto e
codifica apenas as proteínas essenciais para assegurar a
sua replicação e transmissão.
Resumidamente, essas funções compreendem:
• Assegurar a replicação do genoma;
• Subverter funções celulares em benefício da
replicação viral;
• Empacotar o genoma.
genoma. Nos vírus que não possuem envelope, o
capsídeo representa o único envoltório do ácido
nucleico viral. Ou seja, as partículas víricas são formadas
simplesmente pelo genoma + capsídeo.
A função do capsídeo é proteger o material genético e
proporcionar a transferência do vírus entre células e
entre hospedeiros. Nos vírions sem envelope,
estruturas localizadas na superfície externa do capsídeo
são responsáveis pelas interações iniciais dos vírions
com as células hospedeiras no processo de ligação e
penetração dos vírus. Nesses vírus, as regiões
superficiais das proteínas do capsídeo também
interagem com componentes do sistema imunológico e
são alvos importantes para anticorpos com atividades
neutralizantes.
® Proteção x Desintegração
• Simetria dos capsídeos (envelopados)
Independente do número de proteínas que compõem o
capsídeo, a associação entre essas proteínas pode
resultar em capsídeos com duas simetrias principais:
icosaédrica e helicoidal.

O tipo e estrutura do genoma de muitos vírus diferem

do padrão clássico observado nos ácidos nucleicos de
procariotas e eucariotas. Nestes organismos, o genoma
é constituído por moléculas de DNA de cadeia dupla (ds,
double-stranded), enquanto os RNA’s possuem fita
simples (ss, single-stranded). Os genomas dos vírus Icosaédrica Helicoidal
apresentam variações de tipo e estrutura, que incluem
desde genomas de DNA simples (ssDNA) até RNA’s de
fita dupla (dsRNA).

® A estrutura, geralmente compacta, formada pelo

genoma + proteínas associadas, é denominada
genericamente “core” ou núcleo. O conjunto formado
pelo core (ácido nucleico + proteínas) + capsídeo é
O Envelope
Os vírions de várias famílias possuem os
nucleocapsideos recobertos externamente por uma
membrana lipoproteica de origem celular denominada
envelope.
O envelope é formado por uma camada lipídica dupla,
derivada de membranas celulares, onde encontra-se
inserido um número variável de proteínas codificadas
pelo genoma viral. Na maioria dos vírus, o envelope está
justaposto externamente ao capsídeo.
® Brotamento:
O envelope viral, presente em vírus de algumas famílias,
origina-se de membranas da célula hospedeira através
de brotamento, que ocorre durante o egresso de vírions
maduros da célula hospedeira. Essa membrana
frequentemente é derivada de uma região da
membrana plasmática, mas pode originar-se também
das membranas do aparelho de Golgi, do retículo
endoplasmático ou da membrana nuclear, dependendo
do vírus e do compartimento celular onde ocorre a
replicação.
Matriz
Alguns vírus envelopados possuem proteínas
localizadas externamente ao nucleocapsídeo, mediando
a sua associação com a superfície interna do envelope.
Outros componentes
• Enzimas (não encontradas no hospedeiro);
• Lipídeos;
• Carboidratos;
• Ácidos nucleicos celulares;
• Proteínas celulares.
Introdução à replicação
A produção de progênie semelhante genética e
fenotipicamente se constitui no evento central da
existência e perpetuação dos vírus na natureza. Por isso,
por uma visão evolutiva simplista, a multiplicação dos
vírus possui uma finalidade única e objetiva: produzir
progênie viável. As alterações da fisiologia celular,
associadas com a multiplicação dos vírus – que podem
resultar em doença e até na morte do hospedeiro –, são
meras consequências das interações do vírus com as
células, interações absolutamente necessárias para o
agente atingir esse objetivo.
Os vírus são os organismos mais simples que existem:
são compostos fundamentalmente por uma molécula
de ácido nucleico envolta por uma ou mais camadas
proteicas. Quando estão fora de células vivas, os vírus
são estruturas químicas, desprovidas de qualquer
atividade biológica. Não possuem metabolismo próprio
nem são capazes de produzir os componentes mínimos
para a sua multiplicação. Por isso, necessitam utilizar as
organelas e o metabolismo celular para multiplicar o seu
genoma e produzir proteínas necessárias para a
construção de novas partículas víricas. Esses organismos
só adquirem atividade biológica dentro de células vivas.
Mesmo os vírus mais complexos e, em tese mais
evoluídos, são dependentes de processos biológicos
celulares para a sua reprodução.
Todos os vírus, sem exceção, necessitam funções
celulares para se multiplicar e produzir progênie viável.
Por isso, são ditos “parasitas intracelulares
obrigatórios”. O nível de dependência das funções
celulares, no entanto, é bastante variável entre os
diferentes vírus.
Assim, alguns vírus trazem consigo ou codificam
produtos que auxiliam nas diversas etapas da
replicação. Por isso, são menos dependentes da célula
hospedeira. Os poxvírus e herpesvírus se constituem em
exemplos desses vírus relativamente menos
dependentes das células hospedeiras. No outro
extremo, alguns vírus não trazem nem codificam fatores
auxiliares e, por isso, são extremamente dependentes
das funções celulares. Os pequenos vírus DNA
(poliomavírus e parvovírus) são exemplos de vírus
extremamente dependentes das funções celulares. No
entanto, independentemente do grau de dependência,
todos eles necessitam de funções celulares – em maior
ou menor grau – para completar seu processo de
multiplicação. A função celular da qual todos os vírus,
sem exceção, necessitam, é a síntese proteica.
O termo “replicação” – que, em sua origem biológica,
significa o ato de copiar, duplicar ou sintetizar moléculas
(de ácidos nucleicos) a partir de um molde – tem sido
universalmente utilizado para designar o processo de
multiplicação dos vírus como um todo.
Replicação viral (conceitos básicos) algumas etapas do ciclo, essas células são ditas
semipermissivas.

A palavra infecção deriva do latim infere, que significa

® Para fixar:
inserir, penetrar, introduzir. No entanto, embora a
penetração (ou infecção, no significado estrito da
Infecção: série de etapas que inicia com a penetração e
palavra) seja uma etapa indispensável à replicação viral,
culmina com a liberação da progênie viral (ciclo
por permitir a introdução do material genético na célula,
o termo infecção possui um significado mais amplo em replicativo).
virologia. A penetração do vírus na célula, por si só, não
assegura a produção de progênie viral, pois outras Infecção produtiva: infecção que resulta em produção
etapas intracelulares são necessárias. Por isso, o termo de progênie viral viável.
infecção tem sido utilizado para definir o processo de
multiplicação dos vírus como um todo, incluindo a Infecção abortiva: infecção em que o ciclo replicativo é
penetração e as etapas subsequentes da replicação. O interrompido em alguma etapa.
termo infecção pode ser usado para denotar o processo
de replicação viral em nível celular e de hospedeiro. A Susceptibilidade: capacidade das células serem
replicação viral ocorre em uma serie de etapas naturalmente infectadas pelo vírus, permitindo um ciclo
consecutivas e interdependentes – iniciando com a replicativo.
adsorção/penetração e culminando com a liberação de
progênie viral – denominada genericamente ciclo Permissividade: Condições intracelulares para
replicativo. ocorrência da multiplicação viral.

Se todas as etapas do ciclo replicativo forem ® Toda célula suscetível é permissiva?

completadas e resultarem na produção de progênie
viral viável, a infecção é dita produtiva. Não, mas toda célula permissiva é suscetível.

Se, após a penetração, o ciclo replicativo for

interrompido em alguma etapa, não resultando na Etapas da Replicação
produção de progênie, a infecção é dita abortiva.
1. Adsorção
Susceptibilidade e permissividade são propriedades 2. Penetração
complementares que definem a capacidade das células 3. Desnudamento
de suportar as etapas da multiplicação viral. 4. Expressão gênica
5. Replicação do genoma
Susceptibilidade refere-se à propriedade das células em 6. Maturação
serem infectadas pelo vírus, permitindo desde a 7. Egresso
penetração até a liberação de progênie; enquanto
permissividade refere-se às condições intracelulares ® Adsorção
para a ocorrência da multiplicação viral. Assim, as
células que suportam o ciclo replicativo completo, A ligação das partículas virais na superfície das células
desde a penetração viral, são simultaneamente hospedeiras – evento denominado adsorção – é a
susceptíveis (permitem a penetração) e permissivas primeira etapa da replicação viral. A interação entre a
(permitem a ocorrência das etapas intracelulares). Essas partícula viral e a superfície da célula hospedeira é
duas propriedades, no entanto, nem sempre ocorrem mediada por proteínas da superfície dos vírions,
concomitantemente em todas as células. Em algumas denominadas de proteínas de adsorção viral (VAPs), e
situações, células permissivas podem ser não moléculas da membrana plasmática. Nos vírus sem
susceptíveis à infecção, devido à falta de receptores envelope, as proteínas do capsídeo funcionam como
para a adsorção e penetração do vírus. Essas células VAPs; nos vírus envelopados, essas funções são
somente poderão ser alvo de uma replicação produtiva exercidas pelas glicoproteínas do envelope.
se o material genético viral for introduzido
artificialmente. Por outro lado, células susceptíveis à Os receptores celulares para vírus são moléculas de
infecção natural podem apresentar um bloqueio membrana que desempenham funções diversas na
intracelular em alguma etapa da replicação, sendo biologia celular e que, ocasionalmente, servem para os
assim, não permissivas. Se esse bloqueio ocorrer após vírus se ligarem e iniciarem a infecção.
Na maioria dos casos, a presença dos receptores
determina o espectro de hospedeiros e o tropismo do
vírus. Consequentemente, a presença e distribuição dos
receptores também são determinantes fundamentais
da patogenia da infecção.
® Conceitos:
Espectro de hospedeiros
• Normalmente restrito – poucos cruzam a
barreira de espécies;
• Ligação específica: proteína viral que se liga ao
receptor celular hospedeira.
• Fatores para multiplicação – tipo de genoma
(RNA ou DNA).
Tropismo
• Significa a propensão que um vírus tem em
infectar determinado tipo de célula ou tecido
em especial.
Patogenia da infecção
• A patogenia das infecções virais é determinada
pela combinação entre os efeitos diretos e
indiretos da replicação viral e as respostas do
hospedeiro à infecção.
Vírus envelopado
Vírus não envelopado
® Penetração
A penetração é a etapa subsequente à adsorção e
envolve a transposição da membrana plasmática,
permitindo a introdução do nucleocapsideo (genoma
viral + proteínas) no interior da célula, local onde
ocorrerão a expressão gênica e a replicação do genoma.
A transposição da membrana pode ocorrer na superfície
celular ou no interior do citoplasma, a partir de vesículas
produzidas por endocitose, fagocitose ou
macropinocitose.
Em geral, os vírus penetram nas células utilizando um
(ou alternativamente mais de um) dos seguintes
mecanismos: a) penetração por fusão na superfície
celular; b) penetração após endocitose (mediada por
clatrina, caveolina ou agrupamentos de lipídios); c)
fagocitose.
Penetração por fusão na superfície celular
• Alguns vírus com envelope penetram na célula
após fusão do envelope com a membrana
plasmática, evento que ocorre na superfície
celular. A fusão resulta em um canal entre o
interior da partícula e o compartilhamento
citoplasmático, através do qual o
nucleocapsídeo é liberado no citosol.
Penetração após endocitose
• Esse mecanismo de penetração é característico
de vários vírus envelopados e de alguns vírus
sem envelope.
• Do ponto de vista da biologia dos vírus, a via
endocítica parece ser o caminho mais
adequado para a sua internalização, pelos
seguintes aspectos: a) a endocitose é um
processo fisiológico comum à maioria das
células; b) somente ocorre em células com
transporte de membrana ativo; c) os vírions
podem se ligar em qualquer local da superfície
celular para serem internalizados; d) a
endocitose assegura a internalização e o
transporte dos vírions aos locais de expressão
gênica e replicação; e) a penetração a partir
dos endossomos reduz os riscos de detecção
pelo sistema imunológico, pois não deixa
proteínas virais expostas na superfície celular e
f) o ambiente endossomal se acidifica
gradativamente à medida que estas vesículas
se aprofundam no citoplasma, o que auxilia na
ativação dos mecanismos de fusão e
penetração.

® Desnudamento
O termo desnudamento refere-se à série de eventos
que ocorrem imediatamente após a penetração, em que
os componentes do nucleocapsídeo são parciais ou
totalmente removidos, resultando na exposição parcial
ou completa do genoma viral. A remoção das proteínas
do nucleocapsídeo é necessária para a exposição do
genoma às enzimas e fatores responsáveis pela
transcrição.
• Exposição do genoma: transcrição e tradução;
• Remoção: total (Flavivírus) ou parcial
(Rabdovírus).
® Expressão Gênica
A síntese de proteínas virais pela maquinaria celular é
um evento crucial na multiplicação dos vírus. O genoma
viral codifica diferentes proteínas, que devem
desempenhar pelo menos três funções básicas: a)
assegurar a replicação do genoma; b) subverter funções
celulares em seu benefício; e c) empacotar os genomas
recém-replicados em novas partículas víricas. Os vírus
não possuem metabolismo próprio e são inteiramente
dependentes da maquinaria celular para a produção de
suas proteínas. Ou seja, as informações genéticas
contidas no genoma dos vírus são decodificadas em
proteínas virais pelo aparato de síntese proteica da
célula hospedeira.
® Replicação do genoma
A replicação do genoma, ou seja, a síntese de milhares
de cópias idênticas ao genoma viral é o evento central
da multiplicação dos vírus. Este evento fornece milhares
de cópias genômicas que irão, eventualmente, se
constituir no genoma das novas partículas víricas. Estas,
por sua vez, darão continuidade ao ciclo de perpetuação
dos vírus, ao infectarem novas células e iniciarem novos
ciclos replicativos. Os mecanismos moleculares de
replicação dos genomas dos vírus variam de acordo com
o tipo de ácido nucleico (RNA ou DNA), topologia
(circulares ou lineares), número de cadeias (fita simples
ou dupla), de segmentos (segmentados ou não
segmentados) e polaridade de (negativa ou positiva). Da
mesma forma, a replicação dos diferentes genomas
varia em sua complexidade e na participação de fatores
virais e celulares. Em geral, a replicação do genoma vírus
DNA ocorre no núcleo das células hospedeiras (poxvírus
e asfarvírus são exceções), enquanto a replicação do
genoma dos vírus RNA, com exceção de orthomyxovírus
e bornavírus, ocorre no citoplasma celular.
® Maturação
Os vírus das diversas famílias apresentam uma ampla
diversidade estrutural, desde partículas simples,
formadas pelo genoma e uma única camada proteica
até vírions altamente complexos. No entanto,
independente da sua complexidade estrutural, uma
série de interações entre os seus constituintes são
necessárias para a montagem (morfogênese) das
partículas víricas e a conclusão do processo de
replicação. Essas interações incluem: a) formação das
unidades estruturais do capsídeo pela interação entre
as respectivas proteínas; b) incorporação do genoma ao
capsídeo pré-formado ou em formação; e c) transporte
e liberação da progênie viral da célula infectada. No caso
dos vírus envelopados, a montagem do nucleocapsídeo
é seguida pela aquisição do envelope a partir de
membranas celulares nas quais as proteínas virais
recentemente sintetizadas foram previamente
inseridas.
Diferentemente de células eucariotas e procariotas que
se multiplicam por fissão binária, os vírions são
formados pela associação de componentes pré-
formados (genoma + proteínas). O processo de
montagem das partículas víricas que ocorre ao final do
ciclo replicativo é denominado genericamente de
morfogênese ou reunião. A aquisição da capacidade
infecciosa pelas partículas víricas recém formadas – que
ocorre prévia ou concomitantemente com o seu egresso
da célula – denomina-se maturação.
 • Intracelular: INOCULAÇÃO EM ANIMAIS SUSCEPTIVEIS
Alguns vírus (desprovidos de envelope)
completam o processo de morfogênese das
partículas (e a consequente maturação) • Desvantagem: alto custo, condição
integralmente no citoplasma (vírus RNA) ou no imunológica prévia, questões biológicas.
núcleo (vírus DNA). Dessa forma, a progênie • Diagnóstico: raiva, peste suína africana,
viral infecciosa pode ser encontrada nesses influenza aviária.
compartilhamentos, mesmo com a célula ainda • Prova biológica – raiva.
íntegra, ou seja, a maturação ocorre
previamente ao egresso. Esses vírus INOCULAÇÃO EM OVOS EMBRIONADOS
geralmente são liberados quando ocorre a
destruição das células infectadas.
• Diagnóstico e amplificação viral.
• Brotamento:
No ciclo replicativo dos vírus envelopados, as
glicoproteínas do envelope recém-sintetizadas
são inseridas em membranas celulares, isto é,
na membrana do reticulo endoplasmático
rugoso, no aparelho de Golgi ou na membrana
plasmática.

INOCULAÇÃO EM CULTIVO CELULAR

Egresso

• Utilização: Isolamento e identificação

MULTIPLICAÇÃO VIRAL diagnóstica, obtenção de estoques virais,
produção de partículas para vacinas.

Sistemas
Biológicos

Animais Cul1vo
suscep;veis celular
Ovos
embrionados
de galinha