I MUNOL OGI A CL NI CA

DI AGNS T I CO concluso dados clnicos, epidemiolgicos e laboratoriais imunolgicos anlise patolgica (biopsia) imagem (ultra-sonografia, raio-X, RM e T M)

I MUNOL OGI A CL NI CA (Humor al) - requer apenas dois elementos (Ag e Ac) e metodologias que permitam a visualizao do complexo Ag-Ac para o diagnstico

MAR CADOR ES I MUNOL GI COS (L AB OR AT OR I AI S )

deteco de Ac deteco de Ag circulantes deteco de imunocomplexos atividade celular especfica sistema complemento avaliao da imunidade celular: citometria de fluxo, blastognese, fagocitose avaliao da imunidade humoral: I g, resposta in vivo (pr e ps imunizao), contagem de LyB, I VI AP (in vitro antibodies induced production)

I MPOR T NCI A DOS T ES T ES I MUNOL GI COS

I MPOR T NCI A DA PES QUI S A DE ANT I COR POS NO DI AGNS T I CO I MUNOL GI CO elucidar processos patolgicos diferenciar a fase da doena diagnosticar doena congnita selecionar doadores de sangue selecionar doadores e receptores de rgos analisar o prognstico da doena avaliar a eficcia teraputica avaliar a imunidade naturalmente adquirida ou artificialmente induzida verificar o agravamento da doena

I MPOR T NCI A DA PES QUI S A DE ANT I COR POS EM I NQU R I T OS EPI DEMI OL GI COS estabelecer a prevalncia verificar a erradicao verificar a re-introduo de novos casos em reas consolidadas I MPOR T NCI A DA PES QUI S A DE ANT GENOS como critrio de cura na definio de etiologia da doena na seleo de doadores de sangue em inquritos epidemiolgicos

IInfeces: Diagnstico x status Imune, IImunizao soros imunes e vacinas Epidemiologia Imunohematologia, HLA, transplantes Pesquisa e Dosagem de Protenas plasmticas, Hormnios, Drogas marcadores de Inflamao (protenas de fase aguda, citocinas) marcadores tumorais Doenas Imunolgicas Alergias, auto-imunidades, imunodeficincias, Linfoproliferativas (mielomas)

APL I CAO DOS T ES T ES I MUNOL GI COS

I MUNOL OGI A B S I CA
R ES POS T A I MUNE I NAT A Barreiras fsicas Mediadores solveis: sistema complemento e citocinas Resposta inflamatria Eventos celulares: fagocitose e clulas NK ADAP T AT I VA Resposta imune humoral Resposta imune celular Car act er st ica W Wr espost a inespecfica

Car act er st icas W Wr espost a especfica W Wmemr ia imunolgica W Wself x nonself

R ES POS T A I MUNE ADAPT AT I VA R espost a I mune Celular L T R espost a I mune Humor al L B

S EL E O CL ONAL T eor ia de B ur net

MEMR I A I MUNOL GI CA

R ECONHECI MENT O ANT I GNI CO AT I VAO E R EGU L AAO DA R ES P OS T A I MUNE

RESPO STA IM U N E A D A PTA TIVA Resposta Im une Cel ar ul

M HC

Antigen recognition by T cells requires peptide antigens and presenting cells that express MHC molecules

Soluble native Ag Cell surface native Ag

Soluble peptides of Ag

No T cell response

No T cell response

No T cell response

MOLCULAS MHC RESTRIO ALOGNICA T

MHC II

LT CD4

Y
No T cell response

Cell surface peptides of Ag presented by cells that express MHC antigens Cell surface peptides of Ag

T cell response

MHC I LT CD8

APC

I MUNOGL OB UL I NAS
gr upo het er ogneo de pr ot enas com at ividade de Ac memr ia imunolgica e especif icidade

representam cerca de 20% do total de protenas plasmticas, com padro de migrao eletrofortica lenta nas zonas e -globulinas t ambm encont r adas em secr ees e f ludos ext r avascular es

As cadeias H e L possuem regies terminais amino variveis (Fab) e carboxilterminal constante (Fc) unidas por ligaes dissulfeto (S-S) e interaes moleculares (pontes de hidrognio) intra e inter cadeia

RESPO STA IM U N E A D A PTA TIVA Resposta Im une H um oral- A c

RESPO STA IM U N E A D A PTA TIVA Resposta Im une H um oral- A c

PR OPR I EDADES DAS I g

I gG PM (kD) 160 C oef. Sed. 7S % carbohidratos 8 Subclasses 4 [ ] plasma 800 (mg/ml) -1600 meia-vida (dias) 21

I gA 360 11S 7 2 150 -400 6

I gM 900 19S 12 50 -200 5

I gE 200 8S 12 0,002 -0,005 2

I gD 160 7S 12 -

I gG atravessa a placenta (I gG I gG I gG 1, 3, 4) resposta secundria fixa complemento (I gG I gG I gG 3> 2> 1) neutralizao, opsonizao, ligao a NK

I gA elevada concentrao nas secrees, saliva, colostro e leite materno Defesa de mucosas, inibindo aderncia

I gM primeiro anticorpo a ser formado na resposta primria (fase aguda) I gE liga-se a receptores especficos de mastcitos e basfilos baixas concentraes aumentada em alergias do tipo I e parasitoses I gD no detectada na circulao altamente sensvel lise aparece em Ly B maduros (aps a I gM)

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I g NA I NF NCI A 100% I gG I gM I gA

I gG materna 0 12 I dade (meses)

P ER F I S I MU NOL GI COS

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I gG E I gM NA I NFECO

[I g]

I gG

I gM 1
Resposta primria

Resposta secundria

T empo

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P ER F I S I MU NOL GI COS

Ant icor pos Monoclonais

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Ant icor pos Monoclonais

Clulas Mieloma: X63-Ag-8.653, SP2 No secretoras Hipoxantina fosforil transferase deficiente

Ac Quimr icos
B iespecf icos
Qumica
(cido dit ionit r obenzico + o-fenilenodimaleimida)

Fabs (bi- t r i-)

Humanizados
2Fab + Fc

T et r adomas/ T r iomas
Fuso de 2 hibr idomas Fuso hibr idoma + esplencit os

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I VI AP in vit r o inducedant ibody pr oduct ion

ANT GENOS
subst ncias est r anhas ao S I imunogenicidade: capacidade de induzir R I especfica ant igenicidade: capacidade de int er agir com o Ac ou L yT EP T OP O: menor por o da molcula ant ignica r esponsvel pela int er ao com o st io combinat r io do Ac ou do L yT R ECEP T OR DE Ag NOS L y L yB : uma I gM de superfcie (sI gM) R D3 H L yT : T C + C + MC classe I I + Ag NAT U R EZ A QU MI CA DOS Ag inorgnicas protenas* lipdeos carbohidratos cidos nucleicos

CL AS S I FI CAO natural fracionado recombinante sinttico

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FAT OR ES QUE I NFL UENCI AM A I MUNOGENI CI DADE relao filogentica entre o doador e o receptor degradabilidade complexidade molecular tamanho acessibilidade configurao espacial da molcula for mas, vias e fr eqncia de administ r ao do Ag hospedeiro respondedor

MT ODOS PARA DI AGNST I C I MUNOLG C O I O I NT ER AO Ag-Ac in vit r o

especfica, est vel (af inidade), r ever svel For mao do I munocomplexo ko Ag + Ac AgAc T EOR I A DA CHAVE-FE CHADUR A

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I NT ER AO Ag-Ac in vit r o
ka Ag + Ac CAR ACT ER S T I CAS Especificidade: o st io combinat r io da I g liga-se ao det er minant e ant ignico (ept opo)
R ever sibilidade: a ligao ent r e Ag e Ac r ever svel (f or as no-covalent es) Est abilidade: uma int er ao est vel (af inidade/ avidez), suf icient e par a pr oduzir efeit os biolgicos e ser det ect ada in vit r o pelos mt odos imunolgicos de det eco do imunocomplexo f or mado (Ag-Ac)

AgAc

AF I NI DADE o termo se refere afinidade do stio combinatrio do Ac pelo determinante antignico e define a estabilidade do imunocomplexo Ag-Ac > afinidade > complementaridade (nmero de interaes)

R EAO CR UZ ADA a interao de um Ac com um Ag (heterlogo) que no aquele que induziu sua formao (homlogo)

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DET ER MI NAO DA EF I CI NCI A DAS PR OVAS I MUNOL GI CAS

CONDI ES I DEAI S DE T R ABAL HO reagentes de boa qualidade (validados) tcnicas adequadas e padronizadas pessoal treinado equipamentos calibrados controle de qualidade adequado Amost r as soro plasma LC R urina saliva

Colet a puno venosa puno liqurica urina saliva sem estmulo

MT ODOS I MUNOL GI COS APL I CADOS CL NI CA

deteco e quantificao de Ag ou Ac reagentes no-marcados ou marcados

0Reaes de imunoprecipitao 0Reaes de aglutinao 0Reaes lticas 0Reaes imunolgicas reveladas com marcadores 0Provas funcionais de clulas imunocompetentes in vivo e in vitro

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