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Clostridiums e Bacteroides
Alunas: Alana Borges de Oliveira Carolina Mattos de Arajo SantAnna Isabela Viol Valle Larissa Abraho da Cruz Mariana Vieira do N. Costa Thayssa Carneiro Campista
Gnero Clostridium: o conjunto de todos os bastonetes gram-positivos anaerbios capazes de formar endosporos (1) Presena de endosporos, (2) metabolismo anaerbio estrito,(3) incapacidade de reduzir sulfato a sulfito, (4) gram-positivo Alguns membros do gnero podem ser classificados erroneamente Exemplos: esporos s so demonstrados em algumas espcies (Clostridium perfringens); gram-negativos (Clostridium ramosum) Utilizao da organizao convencional destas bactrias no gnero Clostridium
Tabela 1:
Espcie C. difficile C. perfringens C. septicum C. botulinum C. tetani C. tertium C. baratti C. butyricum C. clostridioforme C. histolyticum C. innocuum C. novyi
Doena humana Diarreia associada a antibiticos, colite pseudomembranosa Infeces de tecidos moles, intoxicao alimentar, enterite necrosante, sepse Gangrena gasosa e sepse Botulismo Ttano Infeces oportunistas Botulismo Botulismo Infeces oportunistas Gangrena gasosa Infeces oportunistas Gangrena gasosa
Frequncia Comum Comum Incomum Incomum Incomum Incomum Incomum Rara Rara Rara Rara Rara
C. sordellii
C. sporogenes
Gangrena gasosa
Infeces oportunistas
Rara
Rara
CLOSTRIDIUM PERFRINGENS
Fisiologia e estrutura
Bastonete gram-positivo Esporos so raramente observados Imveis: rpido crescimento disseminao em meio de cultura Hemoltico Subdiviso em cinco tipos de acordo com a toxina letal que produzida: Alfa, beta, epsilon e iota (Tabela 2) Tabela 2:
Toxinas Letais Tipo A B C D E Alfa + + + + + Beta + + Epsilon + + Iota +
CLOSTRIDIUM PERFRINGENS
Patognese e imunidade
Pode estar associado a colonizaes simples (gastrointerite autolimitante) ou causar doenas com risco de vida (mionecrose)
Potencial patolgico atribudo a produo de toxinas (pelo menos 12) e enzimas (tabela 3)
Toxina alfa mais importante; nica produzida por todos os 5 tipos; lecitinase (fosfolipase C) que lisa eritrcitos, plaquetas, leuccitos e clulas epiteliais
Enterotoxina: insero da membrana intestinal (leo e jejuno) leva alterao da permeabilidade e perda de lquidos e ons; superantgenos
CLOSTRIDIUM PERFRINGENS
Tabela 3:
Fatores de Virulncia Toxina Atividade Biolgica
Toxina letal; fosfolipase C (lecitinase); aumenta a permeabilidade vascular; hemolisina; produz atividade necrosante, como na mionecrose Toxina letal; atividade necrosante Toxina letal; permease Toxina letal binria, atividade necrosante; ribosilao de ADP Hemolisina Hemolisina termolbil e sensvel ao oxignio; citoltica Cologenase; gelatinase; atividade necrosante Protease
Toxina
Toxina Enterotoxina Neuraminidase
Hialuronidase
Desoxirribonuclease; hemolisina; atividade necrosante Altera a permeabilidade da membrane no leo(citotxica, enterotxica); superantgeno Altera receptores de gangliosdeos de superfcie; promove a trombose capilar
CLOSTRIDIUM PERFRINGENS
Epidemiologia
De modo geral, habitam o trato intestinal de humanos e animais Amplamente distribudos na natureza: ubiquitrios
Doenas clnicas
Pele e feridas podem ser colonizadas por Clostridiums sem consequncias clnicas Infeco de tecidos moles: Celulite: Formao de gases nos tecidos moles; pode evoluir para miosite supurativa Fasciite ou miosite supurativa: acmulo de pus nos tecidos musculares; no h necrose muscular e sintomas sistmicos Mionecrose ou gangrena gasosa: Extensa necrose muscular, choque, insuficincia renal podendo levar a morte; hemlise extensa e hemorragia; outras espcies de Clostridiums podem causar esta doena (Ex: C. septicum)
CLOSTRIDIUM PERFRINGENS
Intoxicao alimentar: causada pela ingesto de carnes contaminadas C. perfringes tipo A contendo enterotoxinas; clicas abdominais, diarria
com
Enterite necrosante: causada pela toxina beta produzida por C. perfringens do tipo C; processo necrosante do jejuno causando dor abdominal, diarria, ulcerao do intestino e perfurao da parede intestinal levando a peritonite e choque
Diagnstico Laboratorial
Morfologia caracterstica: deteco de bastonetes gram-positivos em amostras clnicas Fcil cultivo em meios simples Isolamento de mais de 105 organismos por grama de comida ou 106 bactrias por grama de fezes coletadas Imunoensaio para deteco de enterotoxina em amostras fecais
Tratamento e preveno
Tratamento com antibiticos: penicilina Terapia antibitica contra intoxicao alimentar desnecessria: doena autolimitante Preveno: cuidados apropriados com feridas
CLOSTRIDIUM TETANI
Fisiologia e estrutura
Grande bastonete Mvel Esporulado; esporos terminais redondos aparncia: raquete Bactrias proteolticas, fermentar carboidratos incapazes de
Sensvel a toxidade do oxignio difcil de cultivar Meio de gar pelcula sobre a superfcie
CLOSTRIDIUM TETANI
Patognese e Imunidade
C. tetani produz duas toxinas: Hemolisina sensvel ao oxignio (tetanolisina) Neurotoxina termolbil codificada por plasmdeo (tetanospasmina) Cepa atxica no pode se converter a cepa toxignica plasmdeo no-conjugativo Produzida durante a fase estacionria de crescimento Liberada na lise celular
Tetanolisina:
Significado clnico da enzima desconhecido
Enzima inibida pelo colesterol plasmtico e pelo oxignio
CLOSTRIDIUM TETANI
Tetanospasmina
Responsvel pelas manifestaes clnicas do ttano Toxina A-B clivada em uma subunidade leve (cadeia A) e uma pesada (cadeia B) por uma protease endgena quando a clula libera a neurotoxina: Cadeia pesada: poro carboxiterminal liga-se a receptores de cido silico e glicoprotenas Cadeia leve: endopeptidase de zinco cliva protenas centrais envolvidas no trasporte e liberao neurotransmissores Inativa protenas que regulam a liberao de neurotransmissores glicina e GABA Resulta em paralisia espstica Ligao da toxina irreversvel
CLOSTRIDIUM TETANI
Epidemiologia
C. tetani ubiquitrio Encontrado em solo frtil e coloniza o trato gastrointestinal de animais
Doenas clnicas
O perodo de incubao (dias at semanas) est relacionada distncia da infeco primria em relao ao sistema nervoso central Ttano generalizado (mais comum): envolvimento dos msculos do masseter (trismo). Sinais: riso sardnico, sialorria, sudorese, irritabilidade, espasmos dorsais (opisttono)
Ttano localizado confinada musculatura no local da infeco primria, como por exemplo, o ttano ceflico
Ttano neonatal infeco inicial no coto umbilical
CLOSTRIDIUM TETANI
Diagnstico Laboratorial
diagnstico feito com base na apresentao clnica
CLOSTRIDIUM BOTULINUM
Fisiologia e Estrutura
o agente etiolgico do botulismo que compe um grupo heterogneo de bastonetes anaerbios e esporulados
CLOSTRIDIUM BOTULINUM
Patognese e Imunidade
A toxina C. botulinum uma protoxina de 150.000 Da que contm uma cadeia leve e uma pesada O quadro clnico resultante do botulismo consiste em uma paralisia flcida, pois a acetilcolina necessria para a excitao muscular no liberada devido inativao das protenas que regulam sua liberao A recuperao da funo aps o botulismo requer a regenerao das terminaes nervosas
CLOSTRIDIUM BOTULINUM
Epidemiologia
C. botulinum comumentemente isolado em amostras de solo e gua em todo o mundo (solos midos, neutros, alcalinos e orgnicos) Foram identificadas as seguintes formas de botulismo: BOTULISMO ALIMENTAR:
1.
Est associada, em sua maioria, ao consumo de alimentos enlatados em casa e, ocasionalmente, ao consumo de peixes em conserva
Os alimentos podem apresentar boa aparncia, porm mesmo uma pequena quantidade suficiente para provocar a doena Os sintomas iniciais so: fraqueza e tonteiras, viso borrada, boca seca e dores abdominais Pacientes com a doena progressiva apresentam paralisia flcida e podem vir a bito por paralisia respiratria A recuperao completa demorada, pois exige a regenerao das terminaes nervosas
2.
3.
4.
5.
CLOSTRIDIUM BOTULINUM
BOTULISMO INFANTIL:
a forma mais comum e est associada ao consumo de alimentos (particularmente mel) contaminados com esporos botulnicos A doena causada por neurotoxinas produzidas in vivo por C. botulinum que coloniza o trato gastrointestinal de crianas. Embora, adultos estejam expostos ao organismo em sua dieta, C. botulinum no capaz de proliferar em seus intestinos Os sintomas so inicialmente inespecficos (constipao, choro fraco e comprometimento no desenvolvimento). A doena progressiva pode apresentar a paralisia flcida e a parada respiratria, porm os ndices de mortalidade, neste caso, so muito baixos
1.
2.
3.
BOTULISMO DE LESO:
Desenvolve-se a partir da produo de toxinas por C. botulinum em leses contaminadas Os sintomas so idnticos aos da doena alimentar, porm o perodo de incubao mais longo e os sintomas gastrintestinais so menos proeminentes
1.
2.
CLOSTRIDIUM BOTULINUM
Diagnstico Laboratorial
O diagnstico clnico de botulismo confirmado se o organismo for isolado ou se for demonstrada a atividade da toxina. A toxina mais facilmente encontrada nos estgios iniciais da doena. C. botulinum deve ser cultivado a partir de fezes de pacientes com doena alimentar ou infantil. A amostra deve ser aquecida a 80C por 10 minutos para garantir a destruio de todas as bactrias que no so clostrdios e a germinao dos esporos de C. botulinum (resistentes ao calor) A demonstrao de produo da toxina deve ser realizada com um bioensaio em camundongos
Tratamento
Suporte ventilatrio adequado Eliminao do organismo do trato gastrintestinal (lavagem gstrica e terapia com penicilina por exemplo) Uso de antitoxina botulnica trivalente contra as toxinas A, B e E para neutralizar toxinas circulantes na corrente sangunea
CLOSTRIDIUM BOTULINUM
Preveno
Destruio dos esporos nos alimentos; praticamente impossvel por motivos prticos Impedir a germinao dos esporos; mantendo os alimentos em pH cido ou estocado a 4 C ou menos No caso do botulismo infantil, crianas com menos de 1 ano de idade no devem comer mel; pois podem conter esporos de C. botulinum
CLOSTRIDIUM DIFFICILE
At metade da dcada de 1970, a importncia clnica era desconhecida Estudos sistemticos comprovam claramente que C. difficile produtor de toxinas responsvel por doenas gastrointestinais associadas a antibiticos (desde diarrias benficas e autolimitante at colite pseudomembranosa grave) Produz duas toxinas:
Enterotoxina (Toxina A): quimiotxica para neutrfilos, estimulando a infiltrao destes no lio, com a liberao de citocinas. Tambm possui um efeito citoptico, resultando na destruio das junes oclusivas, aumentando a permeabilidade da parede intestinal e diarria subseqente
Citotoxina (Toxina B): provoca despolimerizao da actina, levando a destruio do citoesqueleto celular
CLOSTRIDIUM DIFFICILE
Tabela 4
Fator de Virulncia Atividade Biolgica
Provoca quimiotaxia; induz a produo de citocinas com hipersecreo de lquidos; provoca necrose hemorrgica Induz a despolimerizao de actina com perda do citoesqueleto celular
Possuir altos nveis de toxinas no parece ser determinante para o desenvolvimento da doena. Protenas da camada superficial (SLPs) bacterianas so importantes para a ligao do microorganismo ao epitlio intestinal, levando a produo localizada de toxinas e subseqente dano tecidual Por que essa doena relacionada a antibiticos? est
Enterotoxina (toxina A)
Citotoxina (toxina B)
Esse microorganismo faz parte da microbiota intestinal em um pequeno nmero. A administrao de antibiticos permite o desenvolvimento da doena pois altera a flora entrica normal, permitindo um supercrescimento destes organismos relativamente resistentes ou torna o paciente mais suscetvel aquisio exgena de C. difficile
Formao de esporos
CLOSTRIDIUM DIFFICILE
Diagnstico Laboratorial
Demonstrao das toxinas nas fezes do paciente com sintomas compatveis
Tratamento
Geralmente a interrupo do antibitico relacionado suficiente para aliviar a doena leve. Entretanto, terapia especfica com metronidazol ou vancomicina necessria para o tratamento para diarria grave ou colite. importante ressaltar que apenas as formas vegetativas so destrudas por antibiticos; os esporos so resistentes
Fisiologia e Estrutura
Bacteroides, Fusobacterium, Porphyromonas, Prevotella (bastonetes) e Veillonella (cocos): tratos respiratrio superior, gastrointestinal e genitourinrio humanos A diversidade de espcies anaerbias grande, mas poucas causam infeces Bacteroides fragilis o patgeno anaerbio endgeno mais importante: pleomrfico em tamanho e forma; Prevotella: bastonete muito pequeno; Fusobacterium: alongado
A camada de LPS dos bacteroides tem pouca ou nenhuma endotoxina, ao contrrio de outros bastonetes Gram-negativos anaerbios Componente lipdio A do LPS no tem grupos fosfato nos resduos glicosamina e nmero de cidos graxos ligados aos aminoacares reduzido: influenciam na perda de atividade pirognica Cocos Gram-negativos anaerbios so raramente isoladas em espcimes clnicas
Patognese e Imunidade
Bacteroides distasonis e Bacteroides thetaiotaomicron: espcies bacteroides predominantes do trato gastrointestinal Porm, B. fragilis que ocorre em menos quantidade na microbiota gastrointestinal o mais associado s infeces intraabdominais
Fatores de maior virulncia: aderncia ao tecido do hospedeiro, proteo da resposta imune e destruio tecidual
B. fragilis e Prevotella melaninogenica aderem mais efetivamente s superfcies peritoniais do que outros anaerbios, pois tem cpsula polissacardica B. fragilis, outros bacteroides e Porphyromonas gingivalis aderem s clulas epiteliais por fmbrias A cpsula polissacardica antifagoctica cidos graxos de cadeia curta (ex. cido succnico) produzidos no metabolismo anaerbio inibem a fagocitose e a morte intracelular Algumas Porphyromonas e Prevotella produzem proteases que degradam imunoglobulinas
Tabela 5
Normalmente os anaerbios causadores de doena toleram exposio ao oxignio. Catalase e superxido dismutase esto presentes em muitas amostras patognicas Muitas enzimas citotxicas so associadas a anaerbios Gramnegativos, virulentos ou no, e podem causar destruio tecidual
Infeco
Cabea e pescoo
As amostras de B. fragilis enterotoxignica que causam doena diarreica produzem uma toxina termolbil metaloprotease dependente de zinco (toxina BFT);
BFT altera a morfologia do epitlio intestinal por rearranjo da F-actina, aumentando a secreo de cloretos e perda de lquido
Intra-abdominal
Bacteremia
Bactrias Bacteroides ureolyticus Fusobacterium nucleatum Fusobacterium necrophorum Porphyromonas asaccharolytica Prophyromonas gingivalis Prevotella intermedia Prevotella melaninogenica Veillonella parvula Bacteroides fragilis Bacteroides thetaiotaomicron Prevotella melaninogenica Bacteroides fragilis Prevotella bivia Prevotella disiens Bacteroides fragilis Bacteroides fragilis Bacteroides thetaiotaomicron Fusobacterium spp.
Doenas Clnicas
Infeces do Trato Respiratrio (raramente associados ao trato respiratrio inferior):
Geralmente causas por misturas de anaerbios Gram-negativos . Sendo mais comumente isolados : Prevotella, Porphyromonas,Fusobacterium e Bacterides no flagillis
Abscesso Cerebral: Tipicamente associadas a uma histria de sinusite ou otite crnica. Infeces polimicrobianas que envolvem geralmente as seguintes epcies anaerbias : Prevotella, Porphyromonas,Fusobacterium Infeces Intra-Abdominais: Variada populao de bactrias colonizam o TGI, porm poucas esto envolvidas em infeces intra-abdominais Vrios anaerbios so isolados nessas infeces, sendo B. fagilis o microorganismo mais comum Infeces Ginecolgicas: Causadas freqentemente por misturas de anaerbios Embora demais anaerbios possam ser isolados nessas infeces, Prevotella bivia e Prevotella disiens so os mais importantes Exemplos de infeces : doena inflamatria plvica , abscessos, endometrite,infeco de ferida cirrgica
Infeces de pele e tecidos Moles: Bactrias Gram- negativas no fazem parte da microbiota da pele Introduzidas por mordidas ou contaminao ps trauma em qualquer parte da superfcie do corpo Essas bactrias podem apenas colonizar uma ferida como progredir para uma doena que pode levar a bito , como mionecrose B. fagilis um microorganismo importante nessas infeces
Bacteremia: A baixa incidncia de bacteremia no est completamente compreendida, mas provavelmente pode ser atribuda ao uso amplamente difundido de antibiticos de largo espectro Gastroenterite: B. fagilis produtoras de enterotoxinas que podem gerar uma diarria aquosa autolimitante Observadas em maior incidncia em crianas com menos de 5 anos de idade
Diagnstico Laboratorial
Microscopia: informao preliminar til Cultura: Amostras coletadas e transportadas em sistema livre de oxignio Inoculadas em meios especficos para isolamento de anaerbios
1. 2.
3.
A identificao definitiva (deste grupo e outros anaerbios Gram-negativos ): uso de sistemas bioqumicos comercialmente preparados que medem a atividade de enzimas pr-formadas.