TPICOS

INTRODUO DO ARTIGO; TCNICAS E SEUS PRINCPIOS E EQUIPAMENTOS; MATERIAIS E MTODOS; RESULTADOS E DISCUSSO; CONCLUSO.

INTRODUO
OXIDAO LIPDICA
Espcies radicais de oxignio (radicais superxido, radicais hidroxila, radicais peroxila); Compostos no-radicais (perxido de hidrognio, oxignio singlete, oznio, etc.); Acelerada por ons metlicos (Fe2+, Cu1+, Co1+).

COMO EVITAR?

INTRODUO
COMPOSTOS FENLICOS
Grupo hidroxila ligado diretamente a um grupo hidrocarboneto aromtico; Podem ser pigmentos ou produtos de metabolismo secundrio das plantas.

Artigo: Catequina e Quercetina.

INTRODUO

CATEQUINA

QUERCETINA

INTRODUO
Catequina
Fontes: Folhas de ch preto e verde. Fontes: ma, cebolas, broclis, vinho tinto.

Quercetina

Propriedades:

antioxidantes, antiradicais, antiinflamatria, anticarcinognica, antibactericida, antiviral etc. Aplicaes: produtos farmacuticos e alimentcios. ENTO, QUAL O PROBLEMA?

INTRODUO
Entraves
Baixa solubilidade em gua; Instabilidade luz, temperatura, oxignio e pH.

Limitao das propriedades benficas

O QUE FAZER?
ENCAPSULAMENTO!

INTRODUO
Encapsulamento
Proteo; Liberao controlada; Melhoramento do efeito.

OBJETIVO DO ARTIGO
Encapsular quercetina e catequina em nanopartculas polimricas; Biopolmero PLGA (poli(D,L-lactdeo-co-glicoldeo)); Caracterizao das propriedades antioxidantes e fsicoqumicas.

INTRODUO
PLGA (poli(D,L-lactdeo-co-glicoldeo))
Copolmero;

Amorfo;
Alto peso molecular; Hidroflico.

TCNICAS E EQUIPAMENTOS
Difrao de Raios X (DRX);
Calorimetria Exploratria Diferencial (DSC).

Difrao de Raios X (DRX)

Aplicaes
Caracterizao de materiais cristalinos;

Determinao de dimenses de clulas unitrias;

Medida da pureza;

Etc.

DIFRAO DE RAIOS X
Raios X
Wilhelm Conrad Rntgen (1894);

Raios catdicos (fluxo de eltrons);

Radiao desconhecida; Luz invisvel.

DIFRAO DE RAIOS X Gerao de Raios X

Eltrons -> Emisso termo-inica; Voltagem: 20 a 60 Kv.

DIFRAO DE RAIOS X 2 fenmenos simultneos

Radiao Bremsstrahlung (frenamento);

Dependncia da Voltagem -> E = e V = h c / .

Radiao caracterstica. Unicamente do nodo.

DIFRAO DE RAIOS X
Radiao caracterstica

DIFRAO DE RAIOS X Laue (1912)

Conhecimento do trabalho de Rtgen;
Espaamento cristal e Raios X ordem grandeza compatvel; Cristal: grade ideal para difrao; Sulfato de cobre.

DIFRAO DE RAIOS X
Difrao
Superposio de ondas;
Interferncia construtiva.

DIFRAO DE RAIOS X Lei de Bragg

DIFRAO DE RAIOS X
Cristais
Estrutura repetida numa forma peridica tridimensional.

DIFRAO DE RAIOS X Representao dos planos

ndices de Miller (h, k e l).

DIFRAO DE RAIOS X Equipamento

Tubo de Raios X, Compartimento de amostra e Detector de Raios X.

DIFRAO DE RAIOS X Equipamento

Preparo da amostra
P fino e homogno -> orientao em todas direes possveis.

DIFRAO DE RAIOS X Equipamento

Passagem pela fenda

DIFRAO DE RAIOS X Equipamento

Radiao deve ser monocromtica para lei de Bragg;

Remoo radiao Kb e parte da radiao contnua.

Utilizao de filtros.

DIFRAO DE RAIOS X
Equipamento Antes de chegar amostra
Utilizao de monocromador (cristal de silcio); Princpio de Bragg; Passagem de Ka.

Aps passagem pela amostra

Espalhamento no coerente (Raio X com amostra).

DIFRAO DE RAIOS X
Equipamento

DIFRAO DE RAIOS X
Equipamento

DIFRAO DE RAIOS X Equipamento

Detector por Contagem de Ftons A intensidade do feixe registrada digitalmente como o nmero de contagens por unidade de tempo; Funcionam bem para fontes de radiao fracas; Intensidade das fontes disponveis, em Raios X, quase sempre baixa.

Transdutores a Gs
Produo de ons gasosos positivos e pares de ons. Correntes resultantes grandes e fceis de medir.

DIFRAO DE RAIOS X
Vantagens Preparo simples da amostra; Interpretao dos dados no complicada; Poderosa e rpida (20 min). Limitaes Sobreposio de picos; Determinao complicada dos ndices para cristais no isomtricos; Limite de deteco de 2% de amostra para mistura de materiais. Material deve ser modo.

Calorimetria Exploratria Diferencial (DSC)

O QUE DSC?
Mtodo de Anlise Trmica; Utiliza o Princpio de Transferncia de Calor; Anlise de propriedades fsicas da amostra; Controle de temperatura, atmosfera e tempo.

Instrumentao de Anlise Trmica

Aplicaes
Determinao de eventos endotrmicos e exotrmicos; Determinao de pureza;

Determinao da temperatura de transio vtrea em polmeros;

Determinao do calor de reao;

Determinao de calor especfico de slidos;

Anlise de transies de fase e mudana de estado; Anlise de transies de segunda ordem; Formao de compostos por reaes de estado slido; Cristalizao de materiais amorfos.

Princpio Funcional do DSC

Calormetro Exploratrio Diferencial Q10, TA Instruments

Origem dos Picos de DSC

Variaes trmicas da amostra que causam mudanas na curva, podem ser transies de primeira ou de segunda ordem.

Eventos de 1 Ordem Eventos de 2 Ordem

Geram picos na curva; Endotrmicos; Exotrmicos.

Variao de Cp; Geram deslocamento da linha de base.

Eventos de Primeira Ordem

Alteraes de temperatura
Ta

Variaes de Entalpia
Tf
Ta-Tr

Tf

Ta

Exotrmico (H<0)

Ti

Ti

Ta = Tamostra Tr = Treferncia

Tf Tempo

Ta-Tr

Tempo

Endotrmico (H>0)

Ta

Ti Ti

Tf Tempo

Eventos de Segunda Ordem

Deslocamento da Linha de Base

Variao da Capacidade Calorfica da Amostra

No apresentam variaes de entalpia

No geram picos nas curvas de DSC

Ex: Transio Vtrea

Curvas de DSC

MATERIAIS E MTODOS
Preparo das nanopartculas polimricas;
Difrao de Raios X; Calorimetria Exploratria Diferencial.

MATERIAIS E MTODOS
Preparo das nanopartculas polimricas PLGA isoladas
200 mg de PLGA dissolvidos em 20 mL de acetona (solvente); Agitao magntica 30 minutos a 25C; Adio de 40 mL de soluo aquosa de PVA (5%) seringa; Homogeneizao por 5 minutos 19.000 RPM; (Ultra Turrax IKA T25 , IKA / Works, Inc. , NC , EUA)

Evaporao a vcuo por 30 minutos do solvente e da gua

evaporador rotativo.

MATERIAIS E MTODOS
Nanopartculas formadas so lavadas com gua destilada; Ultracentrifugadas por 20 minutos a 5C 20.000 RPM; (Optima XL- 80K , Beckman Coulter , Inc. CA, EUA) Sedimento ressuspenso em gua destilada 24h;

Armazenamento em congelador por 12h a -20C;

Nanopartculas congeladas liofilizadas (-70C, 10-3 Torr) 48h;

( LabconcoFreezone 6 , Labconco Corp , MO , EUA )

Nanopartculas armazenadas em dessecador contendo sais desidratados 25C.

MATERIAIS E MTODOS
Preparo das nanopartculas polimricas com quercetina e catequina
Separadamente, 10 mg de quercetina ou catequina foram
adicionadas soluo de PLGA dissolvido em acetona; As demais etapas so iguais; Prepararam-se nanopartculas de PLGA isoladas, PLGAquercetina nanopartculas e PLGA-catequina nanopartculas. E, tambm, mistura fsica de PLGA com catequina ou quercetina.

MATERIAIS E MTODOS
Difrao de Raios X 15 mg das seguintes amostras
Quercetina livre; Catequina livre; Nanopartculas de PLGA-quercetina; Nanopartculas de PLGA-catequina; Mistura fsica de PLGA-quercetina;

Mistura fsica de PLGA-catequina.

Cobalto (Co) com l = 1.78899 A (0,178899 nm), 30 kV e 16 mA.

MATERIAIS E MTODOS

Difrao de Raios X (DRX)

MATERIAIS E MTODOS
Calorimetria Exploratria Diferencial (DSC) 2 mg das seguintes amostras
Quercetina livre; Catequina livre;

Nanopartculas de PLGA-quercetina;
Nanopartculas de PLGA-catequina; Mistura fsica de quercetina com PLGA; Mistura fsica de catequina com PLGA. .

MATERIAIS E MTODOS
Calorimetria Exploratrio Diferencial
Taxa de varredura: 10C/min; Intervalo de temperatura de 0 a 340C; Atmosfera de nitrognio: fluxo de 50mL/min;
Evitar oxidao da amostra.

Triplicata. .

RESULTADOS E DISCUSSO
Difrao de Raios X (DRX)

RESULTADOS E DISCUSSO
Calorimetria Exploratria de varredura (DSC)
Quercetina

RESULTADOS E DISCUSSO
Calorimetria Exploratria de varredura (DSC)
Catequina

RESULTADOS E DISCUSSO
Eficincia de Encapsulao (EE)
Quercetina: 79,84% ( 2,5); Catequina: 76,16% ( 6,13).

OUTRAS TCNICAS
DRIFT (Espectrofotmetro de Infravermelho);
Mostra interaes entre os grupos carbonila e carboxila do flavonide e do polimero. Confirma a encapsulao.

Tcnicas para avaliao da propriedade antioxidante.

Encapsulao melhorou a ao de inibio de radicais livres.

CONCLUSO
Catequina e Quercetina foram protegidas pelas matrizes polimricas das nanopartculas de PLGA, como mostraram os resultados das anlises de DSC e DRX. Duas tcnicas trabalham de maneiras independentes, porm os resultados foram similares e possveis de serem comparados.

DRX (utilizao complementar) confirmou resultados do DSC.

Nanopartculas de PLGA so adequadas para a encapsulao desses compostos bioativos (flavonides e vitaminas). Portanto, este mtodo pode ser adequado para aumentar o valor nutritivo e o prazo de validade dos alimentos.

REFERNCIAS
http://chasqueweb.ufrgs.br/~ruth.santana/analise_instrum ental/aulas.html http://www.if.ufrgs.br/tex/fis142/fismod/mod05/m_s03.html http://www.angelfire.com/crazy3/qfl2308/1_multipart_xF8FF _2_DIFRACAO.pdf http://www.youtube.com/results?search_query=x+ray+diffr actometer&sm=3

DVIDAS???

OBRIGADO!