Instituto de Medicina Molecular

Faculdade de Medicina da Universidade de Lisboa

Hospital de Santa Maria

Prof. Doutora Ana Espada de Sousa

Av. Prof Egas Moniz, 1649-028 Lisboa
Tel: 21 7999525
asousa@fm.ul.pt

www.imm.ul.pt

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Estratgias de desenvolvimento de Vacina

VIH
Empirica
Testar antigenios candidatos em ensaios clnicos

Investigao Imunolgica

Para definir resposta protectora

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Questo fundamental na investigao de uma vacina

Definir
Resposta Imunitria Anti VIH Protectora

(correlatos de proteco)

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Imunopatognese da SIDA - principal questo:

Qual a causa da depleo progressiva

de linfcitos T CD4+ associada infeco HIV?

Equvocos
Reduo do nmero de linfcitos T helper (CD4+)
Vrus VIH tem como receptor Molcula CD4

Concluso:
O vrus destri Linfcitos CD4
e leva depleo destes

O n de linfcitos T helper infectados

muito baixo

< 1 : 1.000
Os linfcitos destrudos pelo vrus no
explicam o desaparecimento destas clulas

Imunopatognese
da SIDA:
porqu estudar a infeco HIV-2
Imunologia
Clnica

Imunopatognese da infeco HIV/SIDA

Viremia

Linfopnia
CD4

Activao
Crnica

Argumentos a favor do papel da hiperactivao

linfocitria na patognese da SIDA
Hospedeiros naturais do SIV (ex: Soothy Mangabeys)
virmia alta sem perda de CD4
VIH-2 depleo de CD4 correlaciona-se com
hiperactivao linfocitria e no com a virmia
Respostas discordantes ao HAART:
- dos CD4 na ausncia de controlo da virmia
- ausncia de dos CD4 com virmias indetectveis

Imunodeficiencia associada ao VIH

Diminuiao dos linfocitos T CD4

Alteraoes funcionais de linfocitos T

Hiperactivaao linfocitaria T

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Modelos Clnicos de Investigao da Infeco

HIV/SIDA
Infeco Aguda
Expostos no-infectados

Long-term non-progressors
Resposta terapia anti-retroviral
Infeco HIV2 - Uma doena HIV atenuada

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Science, 1986

The New England Journal of Medicine, 1987

viremia (RNA copies/ml)

HIV1 infected patients

HIV2 infected patients

100000

100000

10000

10000

1000

1000

cut-off

500

100

100

cut-off

50

10

10
0

250

500

750

1000

1250

1500

250

500

750

1000

1250

1500

50

***

CD4<200
200<CD4<500
CD4>500

***

40

healthy

30
***
20

***
***
*

10

***
***
***

* ***

% of cells within the CD8 T cell subset

% of cells within the CD4 T cell subset

CD4 counts cells/ml

100

***
***

CD4<200
200<CD4<500

80

***

***

*** ***

60

***
***

CD4>500
healthy

***
***
***

***
***

40

***

******

***

20

**

0
healthy

HIV2

HLADR +

HIV1

healthy

HIV2

CD69 +

HIV1

healthy

HIV2

HIV1

HLADR+

healthy

HIV2

HIV1

CD38+

healthy

HIV2

HLADR+CD38+

CD4 T Cell Depletion Is Linked Directly to Immune Activation

in the Pathogenesis of HIV-1 and HIV-2
but Only Indirectly to the Viral Load
Sousa A.E. et al. J Immunol 2002;169:3400 and Grossman et al. Nature Med 2002;8:319

HIV1

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Virmia

HIV-1

Replicao
viral

Clulas infectadas

Linfopoiese

Linfopnia CD4

Activao
Crnica
Virmia

HIV-2

Replicao
viral

Clulas infectadas

Linfopoiese

Linfopnia CD4

Activao
Crnica

HIV Immunopathogenesis
Cell targets and viral persistency
Soares et al J Virol 2006

Viremia

Viral
Production

Specific T cell responses

Foxall et al J Virol 2008

T-cell production

Infected cells

Albuquerque et al J Immunol 2007

Albuquerque et al Clin Immunol 2007
Gautier et al J Virol 2007

Env Immunomodulatory
Properties
Cavaleiro et al. AIDS 2000
Cavaleiro et al. Eur J Immunol 2007
Cavaleiro et al AIDS Res Hum Retrov 2009

Immune-activation

CD4 Lymphopenia

Role of T-cell activation

Sousa et al J Immunol 2002
Grossman et al Nat Med 2002
Foxall et al Clin Immunol 2008

Lymphopoiesis

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

A infeco HIV-2 associa-se a um menor compromisso da linfopoiese

1000,0
HIV-2+ Patients p<0.0001 r= -0.5929

100,0

HIV-1+ Patients p= 0.2256 r=-0.1574

35

Healthy Subjects p= 0.9963 r=0.0006

10,0

30

1,0

Serum IL-7 [pg/ml]

sj/beta TREC Ratio

10000,0

0,1
0,0
0,0
20

40

60

Age
Gautier D et al. J. Virol. 2007

80

25
20
15
10
5
0
0

500

1000

1500

2000

2500

CD4+ T cell counts cells/ml]

Albuquerque AS et al. J. Immunol. 2007

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Os doentes HIV-1+ com respostas discordantes ao tratamento anti-retroviral (ART)

exibem significativamente menor activao imunolgica do que os doentes HIV-2+ no tratados

com iguais nveis de CD4 e igualmente avirmicos

Albuqerque A et al. Clin Immunol 2007

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

HIV-1 / SIDA

Inviabilidade da suspenso da teraputica anti-retroviral

RNA-HIV no plasma (cpias/ml)

Incio
teraputica

Paragem
teraputica

1000000
100000

10000
1000

Limite de deteco dos testes clnicos

100
10
1
0,1

Vrus latente em reservatrios

0,01
0,001

Erradicao????

0,0001

Inibidores da
Integrase

Inibidores da
Entrada Viral

Futuro:
Modulao da resposta do sistema imunitrio +
Inibidores da
Protease

Inibidores da
Trancriptase
Reversa

Proviral DNA copies / 1x10e6PBMC

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

HIV2
HIV1

100000
10000
1000
100
10
1
0

500
1000
1500
2000
CD4 T cell count (cells/ml)

2500

Soares R et al. J. Virol. 2006

Nveis semelhantes de DNA Proviral na infeco HIV1 e HIV2,

sugerindo um nmero semelhante de clulas infectadas
apesar das diferenas na virmia
Como que os reservatrios virais do HIV-2 so controlados na ausncia de
teraputica antiretroviral?

HIV Immunopathogenesis
Viremia
Viral
Production

Infected cells

Lymphopenia
Lymphopoiesis

Immune-activation

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Relao HIV / Hospedeiro

Imunopatologia

Proteco

Hiper-activao crnica do sistema imunitrio

Compromisso da produo de linfcitos

Unidade de Imunologia Clnica

HIV / SIDA
HIV-2

Reconstituio Imunolgica
Transplante de medula ssea haploidntico
IL-7

Imunodeficincias Primrias

Imunoalergologia
Imunoterapia especifica
Reaces adversas a medicamentos de base imunolgia

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Publicaes Seleccionadas Recentes da Unidade de Imunologia Clnica
Albuquerque A.S., C.S. Corteso, R.B. Foxall, R.S. Soares, R.M.M. Victorino, A.E. Sousa. (2007) Rate of increase in
circulating IL-7 and loss of IL-7R expression differ in HIV-1 and HIV-2 infections: two lymphopenic diseases with
similar hyper immune-activation but distinct outcomes. J Immunol 178:3252-9.
Albuquerque A.S., R.B. Foxall, C.S. Corteso, R.S. Soares, M. Doroana, A. Ribeiro, M. Lucas, F. Antunes, R.M.M.
Victorino, A.E. Sousa. (2007) Low CD4 T-cell counts despite low levels of circulating HIV: Insights from the
comparison of HIV-1 infected patients with a discordant response to antiretroviral therapy to patients with untreated
advanced HIV-2 disease. Clin Immunol 125:6775.
Gautier D., S. Beq, C. S. Corteso, A. E. Sousa and R. Cheynier. (2007) Efficient thymopoiesis participates in the
maintenance of peripheral CD4 T-cells during chronic HIV-2 infection. J Virol 80:12425-9.
Cavaleiro R., G.J. Brunn, A.S. Albuquerque, R.M.M. Victorino, J.L. Platt, A.E. Sousa. Monocyte-mediated T-cell
suppression by HIV-2 envelope proteins. (2007) Eur J Immunol 37: 3435-44.
Soares R., R. Foxall, A. Albuquerque, C. Corteso, M. Garcia, R.M.M. Victorino, A.E. Sousa. (2006) Increased
Frequency of Circulating CCR5+ CD4+ T Cells in Human Immunodeficiency Virus Type 2 Infection. J. Virol. 80:
12425-12429.
Maria, V., Albuquerque, A., A. Loureiro, A. E. Sousa, R. M. M. Victorino (2004). Marked Drug-Specific T Helper Cell
Responses In Pyritinol Associated Cholestatic Hepatitis. British Med J 328; 572-4.
Sousa, A. E., J. Carneiro, M. Meier-Schellersheim, Z. Grossman, and R. M. Victorino (2002). CD4 T cell depletion is
linked directly to immune activation in the pathogenesis of HIV-1 and HIV-2 but only indirectly to the viral load. J
Immunol 169:3400-06.
Grossman, Z., M. Meier-Schellersheim, A. E. Sousa, R. M. Victorino, and W. E. Paul (2002). CD4+ T-cell depletion in
HIV infection: are we closer to understanding the cause? Nature Med 8:319-23.
Sousa, A. E., A. F. Chaves, A. Loureiro, and R. M. Victorino (2001). Comparison of the frequency of interleukin (IL)2-, interferon-gamma-, and IL-4-producing T cells in 2 diseases, human immunodeficiency virus types 1 and 2, with
distinct clinical outcomes. J Infect Dis 184:552-9.

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Geografia das publicaes na Unio Europeia:

Investigao em VIH/SIDA, 1996-1999
Country

N Publications /
100,000 million ECU/EUR

GDP/year

Publication/
100,000
habitants/year

Publication/
100 new cases
AIDS/year

Austria

141

18.82

43.75

30.12

Belgium

344

38.95

86.00

57.0

Denmark

180

29.43

90.0

43.5

Finland

77

17.27

38.0

106.94

France

1992

39.03

84.40

17.32

Germany

1064

18.43

32.44

32.45

Greece

67

15.55

15.45

9.15

Ireland

58

19.82

36.27

30.20

Italy

1597

38.36

68.74

11.53

Luxembourg

4.66

26.45

8.10

Netherlands

639

46.43

100.0

48.59

Portugal

36

9.31

9.0

0.98

Spain

703

34.42

45.12

3.29

Sweden

327

49.47

91.0

48.87

UK

2246

47.74

95.08

45.05

EU

9474

31.83

63.08

15.01

J.M. Ramos, C. Escolano, M. Masia, S. Padilla, F. Gutierrez, A. Martin

Hospital General Universitario de Elche, Elche, Spain
XIV Internacional AIDS Conference, Barcelona 2002
Abstract [TuPeD5054]
Fonte: http://www.aidsportugal.com/article.php?sid=1737

Vacinas
A nica vacina que levou erradicao de uma
das doenas mais generalizadas e mortais, a
varola, surgiu h 200 anos, quando no se
tinha a mnima ideia sobre as bases
moleculares/ celulares da resposta imunitria
protectora.
Histria de descoberta cientfica baseada num
acaso que no escapou observao de um
clnico atento e astuto Edward Jenner .

Limitaes ao desenvolvimento de uma

vacina profiltica para o VIH
Elevada taxa de mutao do VIH
Diferentes subtipos nas vrias
regies geogrficas.

In Weiss R. Nature Medicine, Jul 2004

Oren Cohen, Drew Weissman, and Anthony S. Fauci. The Immunopathogenesis of HIV Infection.
In: William Paul ed. Fundamental Immunology. 4th Edition on CD-ROM

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Relao HIV / Hospedeiro

Imunopatologia

Proteco

Hiper-activao crnica do sistema imunitrio

Compromisso da produo de linfcitos

Imunopatognese HIV/SIDA
Virmia
Replicao
viral

Clulas infectadas

Activao imunolgica
crnica

Linfopnia CD4

Linfopoiese

Razes para optimismo no desenvolvimento

de uma vacina contra o HIV

Alguns indivduos infectados pelo HIV tm baixos nveis de replicao

viral e no apresentam deteriorao do sistema imunitrio durante
longos perodos de tempo, mesmo na ausncia de teraputica
antiretroviral long term nonprogressors.

Indivduos expostos ao HIV

permanecem no infectados.

No decurso normal da infeco pelo HIV, a imunidade celular suprime

a virmia durante um longo perodo de tempo.

Algumas vacinas experimentais em modelos animais de SIDA

conferiram imunidade protectora.

Em alguns ensaios clnicos de fase I/II, as vacinas candidatas tm sido

bem toleradas e imunognicas.

sujeitos

mltiplas

exposies

Razes para optimismo no desenvolvimento

de uma vacina contra o HIV

Alguns indivduos infectados pelo HIV tm baixos nveis de replicao

viral e no apresentam deteriorao do sistema imunitrio durante
longos perodos de tempo, mesmo na ausncia de teraputica
antiretroviral long term nonprogressors.

Indivduos expostos ao HIV

permanecem no infectados.

No decurso normal da infeco pelo HIV, a imunidade celular suprime

a virmia durante um longo perodo de tempo.

Algumas vacinas experimentais em modelos animais de SIDA

conferiram imunidade protectora.

Em alguns ensaios clnicos de fase I/II, as vacinas candidatas tm sido

bem toleradas e imunognicas.

sujeitos

mltiplas

exposies

Ana Espada de Sousa

Instituto de Medicina Molecular
Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa

Imunopatognese
da SIDA:
porqu estudar a infeco HIV-2
Imunologia
Clnica

HIV-2 / SIDA

Reduzida quantidade de virus em circulao

Muito lenta progresso para SIDA
Sem impacto significativo na mortalidade na ausncia de tratamento

5% dos casos notificados de infeco

pelo HIV em Portugal so por HIV-2

HIV-2

Identificao da resposta imunitria protectora contra o HIV

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Eastern Europe
Western &
Central Europe & Central Asia

760 000

North America

1.3 million

[480 000 1.9 million]

Caribbean

[600 000 1.1 million]

1.6 million

[1.2 2.1 million]

Middle East & North Africa

230 000

[210 000 270 000]

380 000

1.6 million

[1.4 1.9 million]

22.5 million

800 000

[620 000 960 000]

South & South-East Asia

[270 000 500 000]

Sub-Saharan Africa
Latin America

East Asia

[20.9 24.3 million]

4.0 million

[3.3 5.1 million]

Oceania

75 000

[53 000 120 000]

People living with HIV

33.2 million [30.6 36.1 million]

New HIV infections in 2007

2.5 million [1.8 4.1 million]

Deaths due to AIDS in 2007

2.1 million [1.9 2.4 million]

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Histria natural da infeco HIV-1

Teraputica anti-retroviral Reduo drstica da mortalidade e morbilidade

Problemas:
No possvel suspender a teraputica
Desenvolvimento de resistncias virais aos frmacos
Reaces adversas aos frmacos

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

HIV/SIDA: infeco HIV-1 em Portugal

HIV-1 Diagnosis Europe 2002
(cases per 100,000 population)

Hamers FF, Downs AM. Lancet 2004;364;83-94

J. Gonalves, J. Pereira, N. Taveira, and J. Moniz Pereira

Faculdade de Farmcia, Lisboa

Principais Colaboradores Clnicos

F. Antunes, E. Valadas, M. Doroana
Clnica de Doenas Infecciosas, HSM/FML
M. Lucas, R. Dutchman, R. Maral
Medicina 2, HSM/FML

R. Cheynier
Institut Pasteur, Paris
M. Cascalho and J. Platt
Mayo Clinic, Rochester, MN
J. Carneiro
Instituto Gulbenkian de Cincia, Oeiras

Quantificao da virmia HIV-2

P. Gomes
Hospital Egas Moniz, Lisboa

Zvi Grossman
NIH, Bethesda

Unidade de Imunologia Clnica

Imunopatognese da SIDA: porqu estudar a infeco HIV-2

Reconstituio Imunolgica aps terapia anti-retroviral na infeco HIV-1

PRODUO DE NOVO de LINFCITOS T

N Linfcitos T CD4

TIMOPOIESE?
PROLIFERAO
LINFOCITRIA
REDISTRIBUIO
e
APOPTOSIS

8/12 semanas

24/32 semanas

Tempo aps incio do tratamento anti-retroviral

Sousa A.E. et al. J Immunol 1999;162:3718
Sousa A.E. et al. Clin Exp Immunol 1999;116:307

Mas 15% dos doentes HIV-1+ exibem

Respontas Discordantes : sem recuperao das contagens CD4 apesar da supresso da virmia.
Porqu?
Como que estes doentes se comparam com os doentes HIV-2+ no tratados
em fases avanadas com baixas contagens CD4?