Profa. Dra.

Cledja Soares de Amorim Castro

 ndia (1300 a.C): proibio do casamentos de
pessoas com tuberculose;

Bblia: descrio da Lepra (Livro dos nmeros-

1000 aC) e proibio do consumo de certas
carnes (Deuteronmio-600 a.c.);

China (50 a. C.): uso de sandlias mofadas para

controle de infeces bacterianas nos ps.
Egipcios lavavam as mos antes de
comprimentarem os faraos
 Produo de alimentos e bebidas:

Vinhos e pes-data do surgimento das

primeiras civilizaes (Egito, Grcia e Roma).
Epidemias causadas por microrganismos
trouxeram mudana sociais e polticas,
at mesmo o caos e sofrimentos
humanos inenarrveis.
Microrganismos X Guerras
Peste bubnica: Yersinia petis
Peste bubnica varreu a Europa na Idade
Mdia (25 milhes morreram- 1/3 da
populao)-ainda existe em esquilos nos
EUA.
Requeima da batata- Phytophthora infestans
Fome da Irlanda no XIX (1,24 milhes morte
+ 1,2 milhes de emigrao )
1885-Requeima da
batata
Filmes O Fsico
HISTORIA DA
MICROBIOLOGIA
Conquista das Americas
Hernn Corts atracou no Mexico (1519), a
populao americana era de 25-30 milhes. Doenas
trazidas pelos europeus reduziram em 50 anos a
populao a 3 milhes (varola e sarampo)
Peru: as doenas europeias (varola) matou o rei Inca
e seu filho. Em 1525,o minsculo bando de
Francisco Pizzaro conquistou o imprio Inca devido
aos caos estabelecido pelas doenas.
HISTORIA DA
MICROBIOLOGIA
Em 1918, o mundo presenciava o fim da
Primeira Guerra Mundial, que matou pelo
menos 37 milhes de pessoas. Porm, logo
aps, agripe espanhola, ou gripe de 1918,
matou mais 20 milhes de pessoas, e isso
tudo em questo de meses.
HISTORIA DA
MICROBIOLOGIA
Quando o imperador da Frana,Napoleo Bonaparte ,
enviou um exrcito com 33 mil homens s terras
francesas na Amrica do Norte, a febre amarela
matou 29 mil deles. Napoleo ficou to chocado com
a quantidade de mortos que decidiu que o territrio
no valia o risco de mais perdas. A Frana vendeu
essas terras aos Estados Unidos em 1803.(Hoje
territrio de Louisiana)
1822: Napoleo invadiu a Rssia, ele perdeu
mais homens para o Tifo do que para todas as
outras causas juntas. Seu exercito morreu mais
de infeces bacterianas em ferimentos do que
o prprio ferimento
Febre Amarela
Febre Tifoide
Salmonella entricasorotipoTyphi.
 Embora a existncia de criaturas pequenas, invisveis a olho
nu, tenha sido especulada h muitos anos, sua descoberta
est associada a inveno do microscpio
AntonyVan Leewenhoek
Delph, Holanda
Primeiro a obervar os
microrganismos em detalhes.
Descrio detalhada de
animculos. Aumento de
300x

 A teoria da gerao espontnea de volta
ao debate
Francesco Redi (1626-1697): 1665-caldo

de carne e peixes no originavam larvas de

moscas quando tampados
A descoberta dos microrganismos

reaqueceu os debates, resultando em

Mais um sculo de controvrsias
 Rudolf Virchow: 1858;clulas vivas
poderiam surgir somente a partir de clulas
vivas preexistente- Conceito da Gerao
espontnea persistiu ate 1861 quando foi
resolvida por Loius Pasteur
 Needham versus Spallanzani
(1729-1799):
frascos com caldo
estril, se
permanecerem
fechados no
apresentam
microrganismos
Biognese X Abiognese
Pasteur demonstrou que os microrganismos
podem esta presente na matria no-viva-
sobre slidos, dentro de lquido e no ar e
so destrudos pelo calor. Essas
descobertas foram a base das tcnicas de
assepsia
 1850: Pasteur resolve problemas da
indstria francesa de vinhos e estabelece
a primeira teoria microbiana da fermentao
PASTEURIZAO
A demonstrao da relao entre a danificao de
comidas e microrganismos foi o passo mais importante
para o estabelecimento da relao entre doena e
micrbios
Teoria microbiana das fermentaes

Povos antigos usavam a fermentao para

a produo de:
vinhos: Grcia
kiu (cerveja de arroz): China (2300 a.C.)
saqu (vinho de arroz fermentado): Japo (500
a.C.)
shoyu (molho de soja)
leite fermentado

26
 Avanos liderados por Pasteur e Koch
Relao de microrganismos com doenas

como tambm o papel da imunidade

 Teoria microbiana das doenas
Doena era sinnimo de punio: conceito difcil

Pasteur (sc. XIX) - indstria da seda:

iniciou um estudo sobre a doena do bicho da seda que estava
dando prejuzos aos fabricantes de seda na Frana. Neste
estudo ele descobriu o agente infeccioso e tambm a maneira
como este agente era transmitido e inclusive como prevenir.
doena causada por um protozorio
sugere a seleo de insetos

28
Joseph Lister(1860): cirurgio ingls;
Aplicao de fenol em feridas cirrgicas: caso
James Greenlees (1865)

The Lancet Medical Journal (1867)-On the

antisseptic Principle in the Practice of
cirurgic

O decrscimo acentuado das infeces

bacterianas devido ao fenol permitiu
demonstrar INDIRETAMENTE que os
gnaz Semmelweiss Joseph Lister (1865,
(1847 em Veneza)- Esccia)-reduo das
Reduo da febre infeces via
puerperal com a esterilizao pelo calor
lavagem prvia das e fenol
mos
 1876; Robert Koch (Nobel, 1905)
Rival de Pasteur na descoberta da causa do antraz
(carbnculo) em gado e ovelhas na europa
Bacillus anthracis
Usou os mesmos mtodos para Mycobacterium
tuberculosis, agente da tuberculose
 Teoria microbiana das doenas

Robert Koch (1843-1910):

Concorrente de Pasteur na descoberta do agente do
carbnculo (antraz):
descobriu a bactria Bacillus anthracis em 1876.
uma doena infecto-contagiosa de origem animal.
Ataca principalmente animais ruminantes herbvoros que pastam em reas com solo
contaminado. O nome da doena faz referncia mancha negra formada na
pele, em caso de contaminaes cutneas. A palavra anthrax vem do
grego, que significa carvo.

Primeiro pesquisador a provar que um micro-

organismo era causador da doena, fazendo o
mesmo mais tarde com a tuberculose

32
Robert Koch-Nobel 1905
Alemes:
conceito de meio de cultura: colnias em batatas
isolamento
meios: caldos, leite, frutas etc.
Robert Koch:
gar-gar ( Despensa de Frau Hesse) e a cultura pura
Julius Petri: placa para cultura
Paul Erlich: colorao das clulas
Joseph Lister: fenol como primeiro desinfetante,
tcnicas asspticas
 A idade de ouro (1875-1915)

Ecologia Microbiana:
Sergei Winogradski

bactrias autotrficas
Bactrias-> fixao do N2
bactrias fotossintetizantes

37
 Martinus Beijerinck (1889)
Usa meios nitrogenados, para obter culturas puras de bactrias
Rhizobium que cresce em razes nodosas, demonstrando que as
culturas de enriquecimento criam condies timas de
crescimento de um determinado microrganismo
 Edward Jenner, em 04 de maio de 1796-
estudos para encontrar maneiras de
proteo contra a varola ( liquidou 90%
dos nativos na Costa Oeste norte-
americana-contaminao por europeus)

Jovem que no contraia varola pois j

tinha tido Vacinia

Inoculou amostras de feridas de vacinia

com uma agulha em aranhes de uma
criana saudvel de 8 anos

Surgiram bolhas no local da inoculao,

prostao porem recuparao em poucos
dias mas nunca mais contraiu a vacnia
ou varola

Mtodo aperfeioado da India (1100 a. C.)

 1880- Pasteur descobriu como funcionava
as vacinas
Cepas virulentas da bactria que causava a
clera tornavam-se avirulentas quando
mantidas por longos perodos nos laboratrios
Seres avirulentos eram capazes de induzir
imunidade contra seus semelhantes virulentos
Vacina termo usado por Pasteur constituda
por seres avirulentos
E no Brasil....
Oswaldo Cruz
Revolta da Vacina-Cena da
Novela Global LADO A LADO
Continuando no Brasil...
Onascimento da
quimioterapia
 Quinino-conquistadores espanhois para tratamento da
malria
1910- Paul Ehrlich descobiriu o tratamento da Sfilis com o
Salvarsan (arsnio)
Dcada de 30: Descoberta da Sulfa por cientistas da
Alemanha nazista
1929: Descoberta da Penicilina
1940-Penicilina produzida em escala industrial
Em 1943, o bioqumico russo naturalizado americano Selman
Waksman anunciou a descoberta da estreptomicina,-
tratamento da tuberculose e designou o temo antibiticos
EUA em 10anos conseguiram reduzir drasticamente a
mortalidade causada pela doena:
doena de 40 para 9/100 mil
habitantes.
Cerca de 80% dos antibiticos podem ser produzidos a partir dos fungos .
 1 antibiotico:
Penicilina. Alexander
Fleming, em 1929, em
um hospital londrino.

Penicillium
notatum.
1940- Escala industrial da Penicilina :
extensamente utilizada contra estafilococos e
estreptococos, grandes causadores de
pneumonias, infeces areas superiores,
septicemias etc
 Impacto dos
microrganismos
nas atividades dos seres
humanos
Microbiologia HOJE
Microbiologia Mdica: descobrindo o agente
etiolgico das doenas
Microbiologia Ambiental: produo de gua
potvel; reduo de resduos txicos
(biorremedio)
Microbiolgia Industrial: processamento de
alimentos, produo de vitaminas, antibiticos,
produtos farmacuticos
Microbiologia agrcula: microrganismos que
matam pragas, fertilidade do solo, produo de
suplementos alimentares
Diferenas em Eucariontes e Procariontes

Todos os organismos so formados por

Clulas, exceto os vrus.
Tipos de clulas: Procariontes e Eucariontes
Procariontes: arqueas e bactrias
Eucariontes: fungos, protozorios, algas,
vegetais e animais
 I. Introduo

Objetivos
Introduo de conceitos fundamentais de microbiologia
com nfase na sua relao com a sade do homem e
melhor compreeno das relaes entre patgeno e
hospedeiro. Introduo os vrios grupos de micrbios e
estratgias de estabelecimento da infeco. Introduo
aos mecanismos de defesa do organismo.
5 grupos de micrbios
a. bactrias
b. Fungos e leveduras
c. virus
d. protozorios
e. algas
Eucariota X Procariota
Diferenas e similaridades
Quimicamente semelhantes: cido nucleicos,
lipdios, protenas, carboidratos; mesmos
tipos de reaes qumicas para metabolizar o
alimento; formar protenas, armazenar
energia
Diferenas:
Estrutural: parede, membrana, ausncia de
organelas,
1. Ncleo/Nucleide

Clula eucaritica (ncleo)

Envolto em membrana nuclear contendo poros, se
conectam ao retculo endoplasmtico.
Cromossomos lineares (DNA) compactados
histonas.

Clula procaritica (nucleide)

No possui membrana nuclear.
Geralmente 1 nico cromossomo circular
No esta associado a Histonas
ORGANELAS
Procariontes: No possuem organelas revestidas por
membranas
Eucariontes: rico em organelas membranosas
PAREDE:
Eucarionte na sua maioria no possui parede, exceto fungos
(quitina) e vegetais (celulose)-relativamente simples
Procarionte possui uma parede a base de peptidioglicano
(polissacarideo complexo)
Archaebacteria tem parede composta de protena, carboidratos
complexos parecidos com o peptdeoglicano
CITOESQUELETO
Procarionte: no possui
Eucarionte : possui (microtbulos e
microfilamentos)e fuso mittico
2. Diviso celular

Clula eucaritica
mitose
meiose

Clula procaritica
fisso binria
no h meiose
Membrana Nuclear
PROCARIONTE: possui o DNA em contado direto
com o citoplasma, preso a membrana
plasmtica
EUCARIONTE: possui ncleo individualizado,
separado do citoplasma pela membrana
nuclear.
3. Membrana citoplasmtica

Clula eucaritica
Bicamada fosfolipdica contendo esteris(colesterol) e

carboidratos
Endocitose e exocitose

Clula Procaritica
Bicamada fosfolipdica sem carbiodratos e geralmente

sem esteris.
Sem endocitose ou exocitose
4. Estruturas Citoplasmticas: RIBOSSOMOS

PROCARIONTE:
Ribossomos (60S e 40S)
EUCARIONTE
RIBOSSOMOS (30 S e 70 S)
5. Enzimas respiratrias e cadeia transportadora
de eltrons
Clula eucaritica
Mitocndria

Clula procaritica
Membrana citoplasmtica
7. Organelas Locomotoras
Clula eucaritica
Flagelo ou clios, compostos por microtubulo

Clula procaritica
- Alguns tem flagelos contendo um nico fibrilo

Corte transversal do clio de uma

clula epitelial do sistema nervoso
Caractersticas Eucarioto Procarioto
principais
Grupos principais Algas, fungos, Bactrias
protozorios, animais
Tamanho aproximado > 5m 0,5 3,0m
Estruturas nucleares
Ncleo Membrana clssica Sem membrana nuclear
Cromossomos Filamentos do DNA - DNA nico e circular - H
D
Estruturas
citoplasmticas Presentes Ausentes
Mitocndrias Presentes Ausentes
Corpsculos de Golgi Presentes Ausentes
Retculo endoplasmtico 80s (60s + 40s) 70s (50s + 30s)
Ribossomos Contem esteris No contem esteris
Membrana citoplasmtica Presente s em fungos Presente e complexa
Parede celular Sexuada e assexuada Assexuada (fisso binria)
Reproduo Flagelo complexo, se Flagelo simples, se
Movimento presente presente
Respirao Via mitocndria Via membrana
Taxonomia
O MUNDO DAS BACTERIAS
Tamanho, forma, arranjo
Tamanho: 0,2 a 2,0 m e de 2 a 8 m de
comprimento
FORMAS E ARRANJOS:
Cocos

Streptococcus pneumoniae Neisseria gonorrhoeae

Diplococos Diplococos

Streptococcus pyogenes Staphylococcus aureus

Estreptococos Estafilococos
Ttrades: 4 cocos arranjados em 2 planos
Sarcina: 8 cocos arranjados em 3 planos
 Bacilos

Pseudomonas aeruginosa Estreptobacilos

Bacilo
 Espirais

Vibrio cholerae Espirilo

Vibrio

Leptospira interrogans Vibrio e espirilo: corpo rgido

Espiroqueta Espiroqueta: corpo flexvel
Formas

Estreladas: gnero Stella

Quadradas: arquibactrias halfilas gnero
Holoarcula sp
 C) ESTRUTURA DA CLULA BACTERIANA
Objetivo: estudo das vrias estrutura que compe a
clula bacteriana.
Membrana citoplasmtica envolta em parede celular

composta por peptdeoglicano e em alguns casos

membrana externa
Citoplasma contendo a regio nucleide e vrios

ribossomos
Frequentemente possui estruturas externa como

glicoclix, flagelos e pili.

Membrana citoplasmtica
septo Formao de septo

Parede celular
Corte longitudinal
Citoplasma
e glicoclix
ribossomos
Nucleide

Corte trasnversal
 Membrana citoplasmtica, membrana plasmtica ou
1)
membrana celular

Espessura de 7 nanometers (nm; 1/1,000,000,000 m).

Composio: dupla camada de fosfolipdeos (40%) e

protenas (60%).

Estrutura do fosfolipdeo: ANFIPTICO

poro polar (solvel em gua, hidroflica) composta de

fosfato e glicerol.
poro apolar (insolvel em gua, hidrofbica) composta

por lipdeos.
Estrutura da camada fosfolipdica

Camada externa

protena Protena formadora

de poro
Camada interna
Poro polar (hidroflica)
Molcula de Fosfato-glicerol
fosfolipdeo
Poro apolar lipdica (hidrofbica)
 Funo principal da membrana plasmtica
Separar o meio intracelular do extracelular. um
envoltrio permevel e seletivo que determina o que
entra e o que sai da clula.
Todas as clulas adquirem macromolculas do ambiente
necessrias para o seu metabolismo. Vrios mtodos de
transporte de macromolculas podem ser usados pela
clula:
Difuso atravs da membrana: gua, CO2, O2(osmose) e
molculas lipossolveis
ons solveis em gua atravessam a membrana por meio
de poros (<0.8 nm em dimetro)
Todas as demais molculas necessrias para o
metabolismo celular so transportadas por meio de
molculas carreadoras.
 TRANSPORTE ATRAVES DA MEMBRANA

A-Difuso facilitada: consiste no transporte de

pequenas molculas de um meio mais concentrado
para um meio menos concentrado

tomos e molculas possuem energia cintica.

Se estes no estiverem distribudos de maneira
homognea em ambos os lados da membrana a
diferena na concentrao cria um gradiente de
concentrao (energia potencial).
O movimento destas particulas do meio mais
concentrado para o menos concentrado equilibra o
gradiente.
Neste tipo de transporte no h gasto de energia
celular.
 TRANSPORTE ATRAVES DA
MEMBRANA
DIFUSO FACILITADA

Membrana
citoplasmtica
Pequenos ons Pequenos ons Membrana
e molculas e molculas citoplasmtica

A concentrao de pequenas molculas e ons A concentrao de pequenas molculas e ons

maior fora do que dentro da clula (gradiente a mesma fora e dentro da clula aps atingir
de concentrao) promovendo o fluxo de molculas o equilbrio de gradiente de concentrao.
para o interior celular.
B) Osmose: a difuso de gua atravs da membrana de um
meio com menor quantidade de soluto e maior quantidade de
gua para um meio de maior quantidade de soluto e menor
quantidade de gua.

Osmose ocorre em funo de um gradiente de concentrao e

portanto no h gasto de energia celular.

Molculas de H2O
ligadas ao aucar

Poro

Membrana
H2O livre citoplasmtica
 A clula pode encontrar diferentes ambientes osmticos

soluto Molcula de H2O soluto Molcula de H2O soluto Molcula de H2O

Ambiente isotnico: concentrao Ambiente hipertnico: concentrao Ambiente hipotnico: concentrao

do soluto e do solvente (H2O) igual. do soluto maior fora do que dentro de soluto e maior dentro da clula e a
O fluxo de gua o mesmo tanto para da clula, e a concentrao de concentrao de solvente maior fora
dentro quanto para fora solvente maior dentro da clula. da clula. Portanto, o fluxo de gua
da clula. O fluxo de gua maior para fora da clula maior para dentro da clula.
C) Transporte de substncias atravs da membrana por
meio de protenas de transporte ou carreadoras: a
maioria das substncias requerem transportadores. 3
tipos: e Transporte passivo
Uniporte Antiporte Simporte
sem gasto de energia Com gasto de energia Com gasto energtico

antiporte simporte
uniporte
citoplasma
citoplasma citoplasma

Transporte passivo Transporte ativo

 D) Transporte Passivo: usa protenas carreadoras, no
requer gasto de energia e dependente do gradiente de
concentrao. Por exemplo: uniporte

E) Transporte ativo: usa protenas carreadoras do tipo

antiporte e simporte, h gasto de energia para o transporte, e
pode ocorrer contra o gradiente de concentrao. Isso
possibilita clula acumular substncias intracelulares
mesmo quando a concentrao destas no meio baixa. A
energia usada proveniente da fora motriz de prtons e
quebra de ATP em fostato e energia. Por exemplo:
transportadores ABC, encontrados em bactrias Gram-
 1. Transportadores ABC (ATP-binding cassette)
Envolve uma protena com afinidade especfica ao substrato a ser
transportado, a protena de transporte (Transportador ABC), ATP
e uma enzima de hidrlise do ATP. A protena especfica do
substrato se liga ao mesmo e o leva at o transportador ligado
membrana. Quando a protena intracelular hidrolisa o ATP h
gerao de energia que usada para transportar a substncia
para o interior da clula. Muito usado para transporte de acares
e AA.
 2. Translocao de grupo: outra forma de transporte
dependente de protena carreadora com gasto de energia. A
substncia a ser transportada quimicamente modificada
durante o transporte. Por exemplo: a glicose convertida em
glicose 6-fosfato a partir de fosfoenolpiruvato (PEP).
 Outras funes da membrana plasmtica:

1. Produo de energia (abriga a cadeia trasnportadora de

eltrons e enzimas fotossintticas em bactrias capazes
de fazerem fotossntese;
2. Sntese de peptideoglicano (componente da parede
celular);
3. Sntese de fosfolipdeos da membrana;
4. Diviso do nucleide, replicao e separao do DNA
durante a diviso celular;
5. Forma a base do flagelo usado na motilidade celular;
6. Formao de endosporo (estrutura de sobrevivncia e
resistncia de algumas bactrias, permanece dormente
por longos perodos) .
 2) A PAREDE CELULAR

a estrutura semi-rgida que envolve a membrana plasmtica e

protege a clula de lise devido presso osmtica do ambiente
que a circunda.
Composio: composta por um polmero complexo, grosso e
semi-rgido: peptdeoglicano (PGN). Composto por monmeros
idnticos de cido N-acetil-glucosamnico (NAG) e N-acetil-
murmico (NAM) com um tetrapeptdeo ligado ao NAM. Estes
monmeros se ligam entre si por meio da cadeia tetrapeptdica.
( aa na forma D-STIO DE ANTIBIOTICOS-VANCO
 PAREDE
CELULAR

Manuteno da forma.
Primer para a prpria biossntese.
Funes:
evitar a ruptura das clulas bacterianas quando a presso
de gua dentro da clula maior que fora dela;
manter a forma de uma bactria;
ponto de ancoragem para os flagelos
Importncia clnica da parede celular: contribui para a
capacidade de algumas espcies causarem doena, sendo
o local de ao de alguns antibiticos
 Autolisinas vs. Transpeptidases
Durante a diviso celular, a bactria aumenta de tamanho,
portanto, o PGN tem que ser quebrado para que novas
monmeros sejam adicionadas e religados parece celular.
As autolisinas so enzimas bacterianas que fazem a quebra dos
monmeros do PGN e as transpeptidases religam os monmeros.
 PEPTIDEOGLICANO E OS ANTIBITICOS

Muitos antibiticos inibem a sntese do PGN causando lise

osmtica da bactria. Por exemplo: Penicilina e a Vancomicina
 BACTRIAS GRAM + E GRAM -
As bactrias podem ser classificadas pelo mtodo de Gram em dois
grandes grupos segundo a composio da parede celular.
O mtodo de Gram foi desenvolvido em 1884 por Hans Christian
Gram.
Mtodo de Gram:
1. esfregao bacteriano fixado por calor;
2. Colorao com cristal violeta-iodo (colorao primria, cor roxa);
3. Lava-se o esfregrao com lcool-acetona (descolorao);
4. Colorao com safranina ou fucsina (colorao vermelha).
Resultado:

Gram + Gram -
Gram +: mantm o corante primrio, tendo colorao roxa
quando observada ao microscpio. Exemplos: Streptococcus
pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus
aureus, Enterococcus faecalis, e spp. de Clostridium.
Composio da parede celular das Gram +:
1. 20 a 80nm de espessura;
2. Vrias camadas de peptideoglicano (60% a 90%);
3. Presena de cido teicico e lipoteicico entrelaado no
peptideoglicano. Composto por glicerol, fosfato e ribitol).
4. Camada mais externa rida em protenas.
Protenas cido teitico
cido lipoteitico

peptideoglicano
peptideoglicano

citoplasma tetrapeptdeo

Membrana plasmtica Membrana

citoplasmtica

fosfolipdeo
1.Acido teicoico
Funes da parede celular das Gram +:

1. Peptideoglicano d forma bactria e previne lise

osmtica e o cido teicico enrigesse a parede;
2. Peptideoglicano e o cido teicico so elementos
reconhecidos pelo sistema imune do hospedeiro
desencadeando a resposta imune, inflamao e a febre.
So considerados padres moleculares associados
patgeno (pathogen-associated molecular patterns).
3. As protenas de superfcie tem vrias funes: funcionam
como enzimas (quebra de macromolculas), adesinas
(aderncia ao hospedeiro), invasinas (penetrao celular),
resistncia fagocitose. Acido teicoico


Rede macromolecular = peptideoglicano (murena)

Peptideoglicano = dissacardeo repetitivo unido por polipeptdeos para formar uma rede que
circunda e protege toda a clula. A poro dissacardica composta de monossacardeos
denominados N-acetilglicosamina (NAG) e cido N-acetilmurmico (NAM) murus = parede,
que esto relacionados glicose.
O grupo carboxil de cada molcula de NAM liga-se a um tetrapeptdeo, composto por
aminocidos que alternam-se nas configuraes L e D. Destes aminocidos, o D-glutamato,
D-alanina e o cido mesodiaminopimlico no so encontrados em qualquer outra protena
conhecida. Acredita-se que sua presena confira maior resistncia da parede contra a
maioria das peptidases
Gram positivas
Peptidioglicano (90%) camada espessa
H duas classes de cidos teicicos:
cido lipoteicico: ligado frao lipdica da
membrana.
Funes dos cidos teicicos:
ligar e regular o movimento de ctions (devido sua carga
negativa) para dentro e para fora da clula
impedir ruptura extensa da parede e possvel lise celular
durante o crescimento da clula
fornecer especificidade antignica da parede identificao
de bactrias por testes laboratoriais
GRAM -: so descoloridas pelo tratamento lcool-acetona e
coloridas com a safranina, adquirido colorao vermelha.
Exemplos de Gram -: spp. de Salmonella, spp. de Shigella,
Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Hemophilus
influenzae, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, spp. de
Proteus e Pseudomonas aeruginosa.
Composio da parede celular:
1. Camadas interna (2 a 3) de peptideoglicano (2 a 3 nm, 10 a
20%)
2. Membrana externa (~ 7 nm) composta por duas camadas de
fosfolipdeos, lipoprotenas, lipopolissacardeos (LPS) e
protenas. O LPS constitudo de lipdeo A (parte lipdica do
LPS) e antgeno O (parte polissacardica do LPS), sendo
importante na identificao de spp. de bactrias.
3. A membrana externa tem permeabilidade seletiva. Muitas
molculas trafegam pela membrana externa atravs de poros
compostos por protenas chamadas porinas.
 Membrana externa
peptideoglicano

Membrana citoplasmtica
citoplasma

protena
protena LPS
porina Antgeno O
Lipdeo A

Membrana
externa

lipoprotena

peptideoglicano

Membrana
citoplasmtica

fosfolipdeo
Funes da parede celular das Gram - :
1. Impede a entrada de substncias txicas (Penicilina G e
lisozimas) no interior da clula (permeabilidade seletiva);
2. O LPS da membrana externa d maior rigidez parede
celular. De certa forma tem a mesma funo do
peptdeoglicano e do cido teitico nas Gram +;
3. LPS (endotoxina) um componente reconhecidos pelo
sistema imune do hospedeiro como um corpo invasor
desencadeando a resposta imune, inflamao e a febre. So
considerados padres moleculares associados patgeno
(pathogen-associated molecular patterns);
4. Protenas de superfcie: funcionam como enzimas (quebra de
macromolculas), adesinas (aderncia ao hospedeiro);
invasinas (penetrao celular) e resistncia fagocitose.
5. Periplasma: substncia gelatinosa depositada entre a
membrana plasmtica e a membrana externa. Contm
nutrientes, enzimas (quebram antibiticos) e protenas
carreadoras.
Lipopolissacrides
Antgeno O: poro polissacardica formada
por acares, polissacardeos O, que atuam
como antgenos e so teis para diferenciar
as espcies de bactrias gram-negativas.
Lipdeo A: endotoxina, a qual txica quando
na corrente sangnea ou no trato
gastrintestinal do hospedeiro.
LPS: evaso de fagocitose e S. complemento
 Gram
negativas
 Diferenas no PGN entre
Gram + e Gram -

Gram negativas (Ala- Glu-DAP-Ala), a ligao entre
os tetrapepdeos direta, ocorrendo entre o
grupamento amino do DAP subterminal
(posio 3) e o grupamento carboxi da D-Ala
terminal (posio 4).c
Gram positivas (Ala-Glu-Lys-Ala), a ligao
indireta, sendo mediada por uma ponte
interpeptdica de natureza varivel (cinco
glicinas em S. aureus)
 Mycoplasma-possui esterol na membrana,
mais estvel e no necessitam de parede
So resistentes intrsecos a antibioticos que

agem na parede de bacterias.

Micobacterias
BACTRIAS LCOOL-CIDOS RESISTENTES

Colorao: Ziehl-Neelsen ou corantes

fluorescentes (auramina-rodamina)
- Parede altamente hidrofbica
- Camada grossa de peptideoglicano
- Camada de glicolipdeos
- Camada grossa de lipdeos especiais
exclusivos, com cidos graxos muito longos
(60-90 C)
cidos miclicos
Cra D
Parede de Micobacterias
Colorao de Ziehl Neelsen
Atravs desta colorao, podemos visualizar as micobactrias, que
possuem na sua parede celular uma grande concentrao de
lipdeos, devido presena de ceras e cidos graxos (cidos
miclicos), o que dificulta a sua visualizao atravs das coloraes
tradicionais.
Aplicao:Busca de casos (incio rpido da quimioterapia);
Eficincia da quimioterapia
OBS: Este mtodo de colorao possui baixa sensibilidade
(mnimo de 10 bac/ml) e grande especificidade.
Para veterinria:
Mycobacterium bovis Tuberculose bovina. Tambm pode ser
transmitida ao homem, atravs do leite no pasteurizado.
 EXECUO
A colorao de Ziehl-Neelsen realizada utilizando os seguintes
mtodos:
lmina fixada pelo calor;
cobrir o esfregao com fucsina fenicada;
aquecer em chama at emitir vapores. A partir disto, iniciar a
contagem de cinco minutos;
lavar a lmina em gua, suavemente;
colocar lcool-cido clordrico, at que no se desprenda mais
corante (cerca de dois minutos);
lavar a lmina com gua;
cobrir o esfregao com azul-de-metileno (durante trinta segundos);
lavar a lmina com gua;
deixar secar e observar ao microscpio com a objetiva de imerso.
BAAR
 Danos a PAREDE
Lisozima: age na parede de Gram positiva e Gram
negativa por hidrlise
PROTOPLASTO: sem parede e sem metabolismo
(Gram +)
ESFEROPLASTO: sem parede, sofre a ao de
lisozima ficando sem PGN
Ambas se rompem na presena de gua puras
3) Glicoclix ou glicoclice: Cpsula e Camada S (viscosa)
uma substncia gelatinosa secretada pela prpria bactria que
envolve a parede celular. Quando firmemente agregado
parede celular chamado cpsula (detectada por colorao
negativa), quando mais desorganizado e solto chamado
Camada S ( ou slime ou polissacardeos extracelular-PSE).

Composio: muco viscoso composto polissacardeo e

polipeptdeos. Frequentemente a composio do glicoclix
dependente das condies ambientais.

Brucella

cpsula
 Importncia clnica
Adeso a vlvulas
Adeso em cateteres, lentes de contato
Adeso ao esmalte dentrio
Infeco pulmonar por Pseudomonas aeroginosa-
secreo de alginato (pssimo prognstico em
fibrose cistica)
Periodontite
Funes do Glicoclix e da camada S:
1. Protege a bactria contra o dessecamento;
2. Captura de nutrientes;
3. Resistncia fagocitose pelas clulas do sistema imune;
4. Aderncia superfcies favorecendo a formao de biofilmes
(PSE). Por exemplo: Streptococcus mutans que bactria
envolvida na formao da crie dental, quebra sacarose em
glicose e frutose, usando a glicosiltransferase para converter a
glicose em dextrana, a qual um componente do glicoclix e
permite ao S. mutans se aderir superfcie do esmalte dos
dentes e formar placa dental que pode levar carie.

Microscopia eletrnica de transmisso E. coli aderida superfcie

Microscopia eletrnica de varredura
mostrando a diversidade de espcies pela ao do glicoclix
da placa dental mostrando de S. mutans
da placa dental
 4) Flagelo:

um longo apndece na superfcie da bactria com funo

locomotora. (movimento pela taxia)
Composio:
1) Filamento rgido composto de protena (flagelina) que se
extende para fora da superfcie celular; Protena do flagelo
funcionam como Ag e podem identificar cepas:antigeno H com
cerca de 50 Ag de proteinas H diferentes, Ex: E. coli 0157:H7
(intoxicao alimentar)

1) Gancho: estrutura conectiva que liga o filamento ao corpo

basal;
2) Corpo basal: consiste em uma srie de anis que ancoram o
flagelo na membrana plasmtica e na parede celular. Funciona
como um motor molecular que promove a rotao do flagelo
e impele a locomoo da bactria no meio (E. coli = 270 rps)
 gancho filamento

Anel L

Membrana externa
peptideoglicano
Anel S Anel P

Membrana citoplasmtica
Anel M
Corpo basal
 ARRANJOS FLAGELARES

Vibrio colerae

MONOTRICO

Spirilum
LOFOTRICO

ANFITRICO

Salmonella
peritrico
 Filamentos axiais (endoflagelos)
Espiroquetas> Treponema pallidum
Feixes de fibrilas na extremidade da bactria
cobertos por uma bainha
 5) Pili ou Fimbria:

Protenas de estrutura tubular fina originria da membrana

plasmtica usada para adeso bacteriana superfcies.

Composio e caractersticas:
1. Protena denominada pilina;
2. Formado por uma aste contendo uma extremidade adesiva
que tem afinidade por receptores de superfcies
(glicoprotenas e glicolipdeos);
3. Encontrada em todas as Gram -, mas poucas Gram +;
4. 2 tipos: curtos e numerosos (fmbria) ou longos e escassos
(pili de conjugao, fator F)
 fmbria
Extremidade
adesiva

receptor

Superfcie hospedeira

Fmbria de E. Coli Pili (Fator F) E. coli

 6) Citoplasma

Refere-se a tudo o que est dentro contido pela membrana

plasmtica.

Composio, caractersticas e funes:

1. gua (80%); DNA, RNA, enzimas, aa, carboidratos, lipdeos,
ons inorgnicos, e compostos de baixo peso molecular.
2. O citoplasma contm um lquido chamado citosol. Algumas
bactrias produzem corpos de incluso que geralmente
carregam compostos orgnicos.
3. A principal funo do citoplasma abrigar o metabolismo
bacteriano. Incluindo as reaes de catabolismo (quebra de
macromolculas) e anabolismo (sntese de macromolculas a
partir de subunidades geradas durante o catabolismo);
4. As reaes qumicas que ocorrem no citoplasma esto sob
controle das endoenzimas.
 7) Nucleide

o corpo nuclear da bactria contendo um nico

cromossomo circular
Composio, caractersticas e funes:
1. cido desoxirribonucleico (DNA);
2. O DNA cromossomal uma fita longa (1000 m) super
espiralada atada membrana plasmtica;
3. No delimitado por membrana nuclear como nos eucariotos;
4. No se divide por mitose. A membrana citoplasmtica tem
papel importante na separao do cromossomo replicado;
5. So haplides (1 s cpia do cromossomo), portanto no h
meiose.
6. A funo do nucleide transmitir a informao gentica
durante a multiplicao celular e determina quais as protenas
e enzimas que so sintetizadas pela bactria, portanto
determinando quais as reaes qumicas e quais processos
biolgicos a bactria pode realizar.
 8) Plasmdios

Pequenas molculas crculares de DNA (extracromossomal)

com replicao autnoma que carregam um nmero
pequeno de genes.

Composio e caractersticas:

1. Compostos de DNA circular contendo origem de replicao;

2. Geralmente codificam protenas que conferem resistncia
drogas, endotoxinas, enterotoxinas, protenas do pili de
conjugao.
 9) Ribossomos
o local da sntese de protenas de todos os tipos celulares.
Composio, caractersticas e funes:

1. composto por cido ribonucleico (rRNA) organizado em 2

subunidades de tamanhos diferentes 50S e 30S (S refere-se a
unidade de densidade chamada unidade de Svedberg). O
ribossomo funcional tem as duas subunidades combinadas
resultando em um complexo de densidade 70S. Uma bactria
possui ~15.000 ribossomos
2. A funo dos ribossomos primordial, ou seja, realizam a
sntese de protenas. Eles recebem e traduzem o RNA
mensageiro (mRNA) o qual contm a informao gentica que
codifica a sequncia de aminocidos que compe as
protenas.
Subunidade
50S

Subunidade
30S
 10) Endosporos

So estruturas de resistncia e sobrevivncia que

permanecem dormentes por longos perodos garantindo a
sobrevivncia da sp. Bacteriana.

Composio, caractersticas e funes:

1. Presentes no gnero Bacillus, Clostridium, Desulfotomaculum,

Sporosarcina, Sporolactobacillus, Oscillospira, e
Thermoactinomyces.
2. Tem funo de resistncia, podem permanecer viveis durante
milhares de anos at encontrarem condies ideais de
germinao. So resistentes temperaturas altas (fervura),
resistentes aos desinfetantes e baixa radiao.
Endosposros
A funo primria da maioria dos endsporos garantir a
sobrevivncia da bactria por perodos de "stress"
ambiental. Eles so portanto resistentes a ultravioleta e
radiao gama, seca, lisozima, temperatura, fome e
desinfetantes qumicos. Endosporos so comumente
encontrados no solo e na gua, onde eles sobrevivem por
longos perodos de tempo.
At 15% do peso seco do endsporo consiste em dipicolinato
de clcio dentro do ncleo do esporo, que assim
estabilizaria oDNA. O cido dipicolnico seria responsvel
pela resistncia do esporo ao calor e oclcioauxiliaria na
resistncia ao calor e agentes oxidantes.
A posio do endsporo difere entreespciesbacterianas e
til na identificao. Os tipos principais de localizao do
endsporo na clula so: terminal, subterminal e central.
 Colorao do esporo:
Schaeffer-Fulton.
cultura bacteriana em meio slido
cultura de solo em meio lquido e slido
verde malaquita
safranina
lminas de vidro
ala de inoculao
PROCEDIMENTO (mtodo de Wirtz-Conklin)
Preparar esfregaos em lmina das culturas bacterianas.
Secar ao ar e fixar pelo calor.
Corar a quente, com soluo aquosa de verde malaquita, aquecendo at a emisso de
vapores, durante 6 minutos.
Lavar suavemente em gua corrente.
Corar com safranina, por 30 segundos.
Lavar suavemente em gua corrente.
Secar ao ar e observar ao microscpio.
Colorao para endosporos
 Bactrias, como outras clulas, so
composta por aproximadamente 90% gua
Composio tpica dos outros 10%:
Carbono - 40-50%
Hidrognio - 10-20%
Nitrognio, Oxignio, Fsforo - 10% cada
Enxofre - 5%
ons: Na + , K + , Ca +2 , Mg +2 , Mn +2 , Mo +2 , Zn +2 , Fe +3
Todos estes compostos devem ser obtidos
a partir do ambiente onde a clula se
encontra
 Fonte de Carboidratos. Ex: glicose, sacarose
Fonte de Nitrogenio.Ex:peptona, extrato de

leveduras
Fonte de sais minerais: Ex: Na, Ca, Mg, Mn,

etc
H2O
 Carbono: essencial para sntese de todos
componentes orgnicos. Principal fonte de energia.
Fonte: matria orgnica
Ex: carboidratos, lipdeos e protenas

Protenas:
- elemento mais abundante depois do C, cerca de 12%
(constituinte das protenas, cidos nuclicos, etc.)

Molculas orgnicas (aminocidos, protenas, etc.)

Molculas inorgnicas (NH3, NO3-, N 2 ).
Obs: existem bactrias que transformam nitrato em nitrito e so
uropatognicas. Ex E.coli
 Enxofre: Sintese de aa ( cistena) ; vitaminas: tiamina
e biotina

Fosforo: Sintese de cido nucleico; fosfolipdeos,

ATP

Micronutrientes
K, Mg, Ca: co-fatores enzimticos
Fe, Cu, Zn, etc

Obs: Sem ferro suficiente, o organismo tem maior dificuldade de formar

'biofilmes', revestimentos protetores que se formam em volta das colnias de
bactrias e as ajudam a manter infeces crnicas.
 P Snese de cidos nuclicos, ATP;
S Estabilidade de aminocidos, componente de vitaminas;
K Atividade de enzimas;
Mg Estabilidade dos ribossomos;
Ca Estabilidade da parede celular e termoestabilidade de
endsporos;
Na Requerido por microrganismos marinhos;
Fe Papel-chave na respirao, componente dos citocromos e das
protenas envolvidas no transporte de eltrons.
 Atmosfera
Oxignio
Aceptor final de eltrons da cadeia respiratria
Seres aerbios restritos produzem um maior
numero de ATPs a partir de uma mesma molcula
de glicose.
No dissolve bem em gua (O.D baixo)-surgimento
de bactrias anaerbios facultativos.
J anaerbios obrigatrios no utilizam oxignio
molecular para as reaes de produo de energia.
 Oxignio
O2 singet esta presente em clulas fagocitrias que ao ingerir
algumas bactrias essas morrem devido a exposio do
oxignio.
O2- radicais de superxido livre (toxicidade se da pela
instabilidade que roupa eletrons de molculas vizinhas)-
formados durante a respirao normal aerbia. neutralizada
pela enzima superxido dismutase (SOD)
O2- + O2- + 2H+ H 2O 2 + O 2

H2O2 contm nion perxido (O22-) que tambm txico

2H2O2 2H2O + O2
OH forma intermediaria do O2, o mais reativo, porm so
transitrios
A- aerbios
obrigatrios ( catalase
e SOD
B- anaerbios
obrigatrios
ausencia de enzimas
C- anaerbios
facultativos- (catalase
e SOD
D- microaerfilo
quantidade letais das
formas txicas de
oxignio quando
exposto a atmosfera
normal
E- anaerbio
aerotolerante( SOD)
 Termfilas
Crescimento Bacteriano

Mesfilas Termfilas
Psicrfilas Extremas

Bactrias
Patognicas

Very
Room Body Moderately Hot Boiling
Temp Temp Hot Water Water Water

0 4 20 37 55 80 100
 Acidfilas Moderate
Acidfilas
Crescimento Bacteriano

Extremas Alcalinfilas Alcalinfilas

Moderadas
Moderadas Extremas

Bactrias
Patognicas

1M Alk
Acetic Neutral ali
0 Acid
3 7
pH Poo
10 14
1 M HCl 1 M KOH
l
 Halfilas Halfilas
Moderadas
Crescimento Bacteriano

Extremas

Bactrias
Patognicas
Saltaras
Saline Dead Sea
0 gua gua do Mar Lagos Salgados
100
Salinidade, %
Destilada
 A fase exponencial reflete apenas uma parte do ciclo de crescimento de
uma populao microbiana
O crescimento de microrganismos em um recipiente fechado (batelada)
apresenta um ciclo tpico com todas as fases de crescimento.
1) Fase Lag
Perodo de adaptao da cultura
Mudana de meio, preparao do complexo enzimtico
Reparao das clulas com danos.

2) Fase exponencial
Fase mais saudvel das clulas onde todas esto se dividindo.
A maioria dos microrganismos unicelulares apresentam essa fase, mas
as velocidades de crescimento so bastante variveis:
- Procariticos crescem mais rapidamente que os eucariticos
- Eucariticos menores crescem mais rapidamente que os
maiores
3) Fase estacionria:
Num sistema fechado (tubo, frasco ou biorreator) o crescimento
exponencial no pode ocorrer indefinidamente.
Ocorre a limitao por depleo de nutrientes e acmulo de metablitos.

Diviso = morte crescimento lquido nulo

Ainda pode ocorrer: metabolismo energtico e produo de metablitos
secundrios

4) Fase de morte (declnio):

A manuteno de uma cultura no estado estacionrio por longo tempo conduz

as clulas ao processo de morte.

- A morte celular acompanhada da lise celular

 Fermentao: cadeia de produo de
energia (ATP) onde os eltrons so
transferidos de substrato orgnico doador
de carbono (p.ex. carboidrato) para
aceptores orgnicos, formando cidos
orgnicos, aldedos, lcool, etc.
O exemplo clssico a gliclise:

Lactato
Glicose Piruvato Acetato
Fermentao geralmente um processo anaerbico
Etanol
 Respirao: cadeia de produo de
energia (ATP) onde os eltrons so
transferidos a partir de um substrato
orgnico doador (p.ex. carboidrato) para
aceptores inorgnicos via uma cadeia de
transporte de eltrons (citocromos)

[citocromos]
BH2 + 0.5O2+ ADP, Pi B +H2O + ATP

Outros aceptores que no o O2 podem ser usados:

NO3-, NO2-, SO4--, etc.
 Meios lquidos: caldos
Meios slidos: gar
Agar um polissacarideo extraido de algas,

mas no metabolizado pelos

microrganismos. E utilizado para da
consistncia solida ao meio