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18/03/2022
Cerca de metade da biomassa do planeta é constituída por
microrganismos, sendo os 50% restantes distribuídos entre plantas
(35%) e animais (15%).
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o s ( = ci ê ncia)
B io ( = vida) + log
s ( = pe queno) +
o bi ol o gia : Mikro
Micr
re a d a c iência
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AM
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(ba e s (vírus).
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b é m s e res ace
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O que se estuda na Microbiologia?
Classificação
Estrutura
Reprodução
Hereditariedade
Atividades bioquímicas
Nutrição
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História da Microbiologia
Maldição divina
Mau odores
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A descoberta dos microrganismos
As primeiras observações:
bios
O primeiro microrganismo foi observado há 300 anos, porém
recentemente foi encontrado o DNA de M. tuberculosis em
múmias egípcias de 3000 anos de idade!!
O MUNDO INVISÍVEL
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Louis Pasteur (1822-1895)
18/03/2022
Teoria microbiana das doenças
POSTULADOS DE KOCH
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DIVERSIDADE DOS MICRORGANISMOS
● BACTÉRIAS
● FUNGOS
● VÍRUS
● PROTOZOÁRIOS
● ALGAS
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Taxonomia
Sistemas de classificação dos seres vivos
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A sistemática é a ciência dedicada a inventariar e descrever a
biodiversidade e compreender as relações filogenéticas entre os
organismos.
CÉLULAS PROCARIONTES
(pro – primeiro, primitivo; cario – núcleo).
CÉLULAS EUCARIONTES
(eu – verdadeiro; cario – núcleo).
Streptococcus
pneunoniae
Salmonella
Escherichia coli
Presença de mesossomo.
Menores Maiores
Estruturalmente mais Complexas
simples Possuem organelas
Não possuem membranosas
organelas DNA envolto em
Possuem ribossomos membrana nuclear
DNA circular disperso
no citoplasma
Estrutura celular
BACTÉRIAS
• São microorganismos unicelulares, procariontes (desprovidos de
envoltório nuclear e organelas membranosas) e em geral possuem
um só cromossomo.
• Podem ser encontradas na forma isolada ou em colônias, podendo
viver na presença de ar( aeróbias) ou na ausência de ar
( anaeróbias) ou ainda serem anaeróbias facultativas.
Métodos fenotípicos
1. Morfologia
Vibrios Espiroqueta
Cocos
Bacilos ou Bastonetes
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Formas e arranjos das células
bacterianas
espirilo
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2. Propriedades tintoriais
•Gram-positivas
•Gram-negativas
•Bacilos álcool ácido resistentes - BAAR
•Não se coram pelo Gram
Gram-negativas BAAR
Gram-positivas
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3. Exigências nutricionais
Autotróficas x Heterotróficas
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4. Tipagem enzimática: enzimas do metabolismo
Enzimas respiratórias
• Pesquisa da Catalase
Metabolismo glicídico
A maioria das bactérias utiliza os hidratos de carbono hidrolizando-os
até à formação de ácidos com consequente alteração do pH do meio.
Em alguns casos essa hidrólise conduz à formação de gases.
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5. Enzimas extracelulares e toxinas
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6. Sorotipagem
Fins epidemiológicos
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Métodos genotípicos
1. Tamanho do DNA
2. Índice Crioscópico
3. Índice Citosina-Guanina (C+G)
4. Hibridização de DNA
5. Sondas moleculares: 50-100pb
6. Sequenciamento de DNA
7. Ribotipagem: RNAr 16S
8. Análise plasmidial
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Nomenclatura binomial
• Atribuição de nomes científicos às espécies.
Consistencia do meio
– Sólido ou líquido
…..
Diversidade metabólica
Fonte de energia Fonte de carbono
Autotróficos: CO2
Heterotróficos: compostos
orgânicos
arte
a p
Um Síntetizar compostos para
a sua sobrevivência
Nutrição microbiana – Elementos Químicos:
Macro ou Micronutrientes essenciais
• Macronutrientes – compostos químicos muito usado
• Micronutrientes – compostos químicos pouco usado
• Principais elementos são C, O, H, N, P, S. No entanto, + 50 elementos são
metabolizados pelas células
Compostos orgânicos necessários para alguns organismos. Ex: vitaminas (comumente requerido
Meio de Cultura
Condições nutricionais para o crescimento de um microrganismo
Adição precisa de compostos orgânicos Não se sabe a composição exata do meio de cultura.
e inorgânicos Exemplos:
• Caseína – proteína do leite
Composição química exata
• Extrato de levedura (células de levedura)
• Extrato de carne, soja
Fontes altamente nutricionais
Real composição é desconhecida
Prática – Técnica de Isolamento
Meio Complexo
Meio Definido
E.coli tem capacidade biossintética
maior que L. mesenteroides
Capacidade Biossintética:
quanto o organismo consegue
sintetizar fatores importantes
para o seu crescimento
Meio Seletivo ou Diferenciais
• Meio Seletivo
Contém compostos que inibem o crescimento de alguns
microrganismos mas de outros não
• Meio Diferenciado
Adiciona um indicador (corante, por exemplo), diferenciar reações
químicas que ocorrem durante o crescimento .
Distinção de espécies de bactérias
Tubos invertidos
Se tem formação de gás fica preso
Várias células
proveniente de uma
única célula (bilhões
de células)
Crescimento Bacteriano e Duplicação
Celular
• O processo de divisão celular envolve um conjunto de proteínas conhecidas
como Fts (Filamentous temperature Sensitive) (Todos os Procaríotos e
Archae, organelas - mitocondrias e cloroplastos).
Tempo de
geração
Fatores
genéticos
Fatores
Nutricionais
Fatores que afetam o Crescimento
microbiano
– Células Viáveis
• Turbidez – D.O.
Câmera de Contagem de Petroff-Hausser
• Contagem usando células secas coradas em lâminas
– Caminho ótico
– Comprimento de onda
• 480nm
• 540nm
• 600nm - OD 600 of 1.0 = 8 x
108 cells/mL
• 660nm
Medida da quantidade de células por D.O
• Problema:
– Agregados celulares
– Biofilme
Evitar problemas: amostras
devem crescer sob agitação
• Fatores Ambientais
– Temperatura
– pH
– Disponibilidade de Água
– Oxigênio
Efeito do Oxigênio
respirar usando
Ar tem 21% O2
Capazes de
O2
Intestino grosso
Microaerófilos
Respiração
sem O2
Sedimentos de lagos
anóxidos
Encontrada em 3 grupos:
1- Procariotos
bactérias anaeróbias – Clostridium
Archaea
2- Fungos
3- Protozoários
Efeito do Oxigênio no crescimento no
laboratório
• Aeróbios Teste do efeito do Oxigênio nos organismos
• Anaeróbios
– Remover o O através da adição de
2
agentes redutores como tioglicolato
(reduz o O2 a água)
– Casos de anaeróbios obrigatórios a
remoção total de O2 é complicada,
crescer em ambientes específicos
O2 consegue penetrar apenas
na superfície, o resto do meio A-Ob An-Ob A-Fa A-Micro An-Aero
é sem O2 por causa do
tioglicolato
Formas Tóxicas de O2 e as Enzimas
Compostos reativos de Oxigênio
8, 39 e 48 °C
Acidófilo
Alcalifílico
Barofílico
Halófilo
Microrganismos Psicrófilos
Antártida
• Organismos extremófilos
– vivem em condições extremas,
muito frio ou muito quente
fria
gelo (-12°C).
• Psychroflexus tem 4 a 5 lig. duplas – áci. graxos são mais flexíveis que ác. Graxos saturados
–Enzimas tem (observações)
• Maior α-hélices do que fita beta (maior flexibilidade)
• maior n. de aa polares
• Menor n. aa hidrofóbicos
• Menor quantidade de interações fracas
• Menos interações inter-domínios
Crescimento microbiano
em altas Temperaturas
Fontes termais
ferventes
150-500°C
Crescimento microbiano
em altas Temperaturas
Acidofílos
• Acidofílicos
– Maior quantidade de fungos (pH 5 ou
menos, como pH2)
– Estabilidade da membrana é
dependente de altas [] de H+
– Obrigatórios, não crescem em pH neutro
• Acidithiobacillus
• Vários gêneros de Archaea
Alcalifílicos
– pH intracelular 4.5
– Habita solos quentes, ácidos
com atividade vulcânica
Efeito do pH
• Alcalifílicos
– pH ótimo >9
– pH intracelular mais elevado
encontrado foi de 9.5
– DNA é instável em
condições ácidas e o RNA
em básicas
– Encontrados
• Lagos e solos ricos em
carbonato de sódio
– Exemplos
• Bacillus firmus cresce na
faixa de pH 7.5-11
• Crescimento em laboratório se
usa tampões
– Evita que o pH mude
Efeito Osmótico
• Osmose- Migração de moléculas de água de um ambiente menos
concentrado (hipotônico) para um ambiente mais concentrado
(hipertônico)– até chegar em um equilíbrio (isotônico)
• Aumenta a concentração do
soluto interno
• Bactérias prototróficas
• Necessita de sais minerais e uma fonte de carbono e energia para o crescimento.
• Bactérias auxotróficas
• Necessita de fatores de crescimento específicos (conhecidos ou não) para se
multiplicar.
• Metagênomica
Esterilização: é o processo de
extermínio de todos os
microorganismos com o uso de agentes
físicos ou químicos.
INTRODUÇÃO
Inflamações e supurações
Ausência de práticas
Infecções hospitalares
Esterilização e Antissepsia
Assepsia
ESTERILIZAÇÃO
Conceito
Limpeza
ESTERILIZAÇÃO
TIPOS DE ESTERILIZAÇÃO
Calor Seco
Estufas elétricas
180ºC / 30 min
Oxidação
Metais e vidrarias
Não estéril
ESTERILIZAÇÃO
CALOR SECO
OUTRAS FORMAS DE
ESTERILIZAÇÃO
ESTERILIZAÇÃO
RADIAÇÃO
Uso de antissépticos
ANTISSEPSIA
Espectro de ação
Ação imediata
↑ Efeito residual
↓ Toxicidade
↓ Custo
TIPOS DE ANTI-SÉPTICOS
Álcoois
Injetáveis
↓ Espectro de ação
↓ Efeito residual
Substituição
Aldeídos e Derivados
Germicida
Esporos
Uso prolongado
Irritação
Agentes Oxidantes
Sist. Enzimáticos
Peróxido de H
↓ Efeito residual
Desuso
Halogênios e Derivados
Cl e I
Espectro → esporos
Efeito → cirurgias
PVPI → lesões
Clorexidine
MICOLOGIA
Ciência que estuda os fungos
CARACTERÍSTICAS DO REINO FUNGI
SERES UNI OU
MULTICELULARES
ACLOROFILADOS pH: 4-7
FUNGOS
EUCARIONTES RESERVA
NITROGÊNIO
PAREDE CELULAR
RICA EM QUITINA
CARACTERÍSTICAS DO REINO FUNGI
Nutrem-se por
Heterotrótofos absorção
FUNGOS
Oxigênio
Aeróbios (maioria)
Temperatura de
Anaeróbios facultativos:
crescimento
fermentação.
Ótima: 25-30ºC
Anaeróbios obrigatórios:
Mínima: 10ºC
fermentativos obrigatórios.
Máxima: 40ºC
ESTRUTURA DOS FUNGOS
Hifas apocíticas: apresentam
FUNGOS paredes transversais que separam os
FUNGOS MULTICELULARES compartimentos celulares.
UNICELULARES Hifas cenocíticas: não possuem
septos e apresentam a possibilidade
Células longas: HIFAS da ocorrência de vários núcleos
dispersos em um citoplasma comum.
LEVEDURAS
MICÉLIO
Imagens : (A) fir0002 / GNU Free Documentation License / (B) David Brinicomb / Creative Commons Attribution-Share Alike 2.0 Generic / (C)
Jplauriente / Creative Commons Attribution 3.0 Unported / (D) Bernd Haynold / GNU Free Documentation License / Lea Maimone / Creative
Commons Attribution-Share Alike 2.0 Generic / (F) Author unknow / Uploaded by M.violante/Public Domain.
ONDE VIVEM OS FUNGOS?
Imagens : (A) Author unknow / Uploaded by TheAlphaWolf / GNU Free Documentation License / (B) Author unknow / Uploaded by Zvesoulis / U.S. Federal Government /
Public Domain / (C) W.J.Pilsak / GNU Free Documentation License / (D) Author unknow / Uploaded by André Tolentino / Creative Commons - Atribuição - Partilha nos Mesmos
Termos 3.0 Não Adaptada.
ZIGOMICETOS
Government/Public Domain.
Imagem : CDC/Dr. Lucille
K. Georg / U.S. Federal
Fungos terrestre
Parede quitinosa
Mucorales
Isolados são microscópicos em
conjunto podem assumir
formações macroscópicas
Imagens : (A) Henry Mühlpfordt / GNU Free Documentation License / (B) Algont / GNU Free Documentation License / (C) Kevin Payravi / GNU Free Documentation License.
ASCOMICETOS
Documentation License
Formam hifas septadas chamadas ascos,
nos quais estão os esporos –ascósporos.
Penicillium notatum
Penicilina
Beauveria bassiana
Imagens : (A) Sol Silverman / U.S. Federal Government/Public Domain / (B) Danny
Newman / Creative Commons Attribution-Share Alike 3.0 Unported.
ASCOMICETOS DE IMPORTÂNCIA ECONÔMICA
PRODUÇÃO DE ALIMENTOS
QUEIJOS TRUFAS
Refrigerantes
Ácido cítrico
Biotecnologia
Saccharomyces cerevisiae
Produção de cerveja,
pão, etanol...
Imagens : (A) PRA / GNU Free Documention License / (B) Bjarki
Sigursveinsson / Public Domain / (C) pic_p_ter / Public Domain /
(D) Masur / Public Domain.
ASCOMICETOS DE IMPORTÂNCIA ECONÔMICA
Decomposição da matéria orgânica
Trichoderma reesei
Celulolíticos e ligninolíticos
-decomposição em florestas
Micotoxinas
Aspergillus A. parasiticus
ochraceous Câncer do fígado
Cereais
Imagens : (A) US Department of Energy Office of Science / Public Domain / (B) CDC / Dr. Lucille K. Georg/U.S. Federal Government/Public Domain / (C) Author Unknow /
Uploaded by Zvesoulis / U.S. Federal Documentation/Public Domain.
BASIDIOMICETOS Amanita muscaria
São cosmopolitas.
Os mutualistas formam
micorrizas e liquens.
Comestíveis Fitopatogênicos
Agaricus Hemileia
campestris vastatrix
Causa ferrugem
no café
Vitamina B Medicinal
Pleurotus Agaricus blazei
ostreatus
Imagens : (A e D) Nathan Wilson / Creative Commons - Atribuição - Partilha nos Mesmos Termos 2.5 Genérica / (B) Carvalho et al. / Creative Commons Attribution 2.5 Generic /
(C) James Lindsey / Creative Commons Attribution-Share Alike 2.5 Generic 3.0 Unported.
Venenosos
Boletus satanas
areolatum
Amylostereum
Decompositores de madeira
Cryptococcus neoformans
Psilocybe mexicana
Anti-depressivos
Fungos de interesse médico
BASIDIOMICETOS DE IMPORTÂNCIA ECONÔMICA
Fungos
alucinógenos
Criptococose
São cosmopolitas.
Produção de alimentos
queijos, salsichas, pão, cerveja, bebidas, etc.
Biodegradação
Biotecnologia