EXAME DE FEZES A maioria dos parasitos intestinais diagnosticada pelo exame de fezes.

s. Os estgios usuais de diagnstico so ovos e larvas de helmintos e os cistos, trofozotos e oocistos dos protozorios.

 O bolo fecal:
Composio;
Sangue Muco Tecido morto.

Estas caractersticas evidenciam uma infeco parasitria, que pode ou no ser confirmada pelo exame de fezes.

Por isso o exame macroscpico deve sempre proceder ao microscpico.

 Cada amostra deve conter no mnimo as seguintes informaes: nome do paciente, nmero de identificao, nome do mdico, data e horrio de coleta. O recipiente deve ser limpo e seco, com a boca larga, de capacidade aproximada de 50 a 250ml para que possa conter uma amostra significativa e que tenha vedao hermtica.

COLETA

 Fezes obtidas de vaso sanitrio no podem ser aproveitadas, porque a gua e a urina poderiam destruir as formas trofozoticas. Fezes excretadas no solo no podem ser aproveitadas, porque larvas de vida livre e outros contaminantes do solo poderiam confundir o diagnstico (principalmente veterinrio). Os recipientes com amostras fecais de pacientes com AIDS devem ser protegidos por um invlucro de plstico e identificados com etiqueta vermelha ou HIV positivo.

ESTABILIDADE DAS AMOSTRAS

Os trofozotos de protozorios morrem e se degeneram fora do corpo humano.
O tempo recomendado para amostras lquidas 30 minutos, enquanto das amostras pastosas o de uma hora aps a evacuao. Fezes formadas podem ser examinadas aps um dia.

PRESERVAO
Para preservar a morfologia dos protozorios e prevenir desenvolvimento de alguns ovos e larvas de helmintos, as amostras fecais que no forem entregues no laboratrio imediatamente aps a passagem devero ser fixadas. A preservao temporria poder ser feita atravs da refrigerao (3-5oC) em recipiente hermticamente fechado para evitar a dessecao. A preservao permanente de trofozotos, cistos, ovos e larvas realizada atravs de fixadores.

FORMOL A 10%
Utilizado para protozorios e helmintos, embora no seja recomendada para fixao de trofozotas. A concentrao de 5% indicada para protozorios e a de 10% para helmintos; Vantagens: Fcil de preparar;.

Apropriado para procedimentos de concentrao.

FIXADOR DE SCHAUDINN
Usado na preservao de fezes frescas ou amostras da superfcie da mucosa intestinal;
Esta soluo fixadora usada para a preparao de esfregaos permanentes corados para demonstrao de protozorios intestinais;

 Vantagens: Boa preservao de cistos e trofozotos; Fcil preparao para lminas permanentes. Desvantagens: Inadequado para mtodos de concentrao; Contm mercrio, que txico.

Inadequado para preservao de ovos e larvas de helmintos.

SOLUO MERTIOLATO-IODOFORMALDEDO (MIF)

Este mtodo permite obter ao mesmo tempo a preservao e a colorao de quase todos os estgios dos protozorios, de ovos e larvas de helmintos que se encontram nas fezes.
Este procedimento tambm permite o exame direto a fresco do material fecal ou depois de vrias semanas, sem a necessidade de outra colorao.

 Vantagens: Alm de fixador, corante;

Fcil preparo;
til em trabalhos de campo;

Adequado para os mtodos de concentrao.

 Desvantagens: Inadequado para a preservao da morfologia de trofozotos de protozorios. O iodeto interfere com outros mtodos de colorao;

O iodeto pode causar distoro em protozorios.

Mtodos diagnsticos em parasitologia

Exame parasitolgico de fezes (EPF)

Grande importncia para o diagnstico de parasitoses

intestinais, causadas por helmintos e protozorios EPF no o nome de uma tcnica, e sim do pedido para a realizao de um exame de fezes em busca de parasitos Grande desafio do diagnstico na parasitologia a baixa sensibilidade das tcnicas quando no realizadas corretamente Falta de conhecimento sobre a coleta da amostra, os fundamentos de conservao e da execuo do mtodo, levam frequentemente a resultados falso-negativos!!!

Exame parasitolgico de fezes (EPF)

Outro erro indicao de anti-helmnticos sem

solicitar EPF para verificar a real necessidade O profissional responsvel por escolher a tcnica deve ter claramente delimitado o objetivo do exame Pacientes assintomticos tcnica capaz de detectar o maior nmero possvel de espcies Existem tcnicas preferenciais para a busca de determinadas estruturas fundamental que o mdico indique a suspeita clnica e, se possvel, a tcnica desejada

Exame parasitolgico de fezes (EPF)

Tem como objetivo diagnosticar os parasitos

intestinais, por meio da pesquisa das diferentes formas parasitrias que so eliminadas nas fezes. O exame macroscpico permite a verificao da consistncia das fezes, do odor, da presena de elementos anormais, como muco ou sangue, e de vermes adultos ou partes deles. O exame microscpico permite a visualizao dos ovos ou larvas de helmintos, cistos, trofozotos ou oocistos de protozorios. Pode ser quantitativo ou qualitativo.

Exame parasitolgico de fezes (EPF)

A grande maioria dos mtodos apenas QUALITATIVO

= apenas indica a presena do parasita ou no Existem mtodos QUANTITATIVOS (Kato-Katz) = se faz a contagem dos ovos nas fezes, permitindo, assim, avaliar a intensidade do parasitismo.
Mtodos QUALI rotina Mtodos QUANTI pouco utilizados, pois a dose dos

medicamentos antiparasitria no leva em conta a carga parasitria e sim o peso corporal do paciente. Estudos epidemiolgicos e/ou controle de cura

Coleta da amostra
Deve ser colhida sem contato com o vaso sanitrio Utilizar recipientes limpos, isentos de gua (pode conter

microorganismos de vida livre), urina (destri a mobilidade e os trofozoitas) ou outro material que possa contaminar pinico fim de no contaminar laboratrio

Jornais e outros tipos de papis tambm devem ser evitados a

Transferir a amostra para o frasco coletor cedido pelo

Coleta da amostra
Identificar o frasco com letra legvel, indicando nome

do paciente, data e hora da coleta lpis (no borrar com o conservante) Tempo de entrega do material depende da suspeita clnica

Fezes diarreicas Giardia 30 min estrongiloidase com exame de larvas vivas imediatamente aps a emisso das fezes

De preferncia coleta pela manh no laboratrio

ou enviada rapidamente Caso no seja possvel enviar imediatamente o material ser necessrio conservar o material

Conservantes
MIF (mercrio, iodo e formol) mais

popular Formol 10% - proibio do mercrio Formol tamponado SAF (acetado de sdio, cido actico glacial, formol e gua destilada) bom para trofozotos em fezes diarreicas Embrulhar em papel e armazenar na geladeira (5-10C) ou isopor com gelo at 48hs

Semanas

Conservantes
Colocar o conservante, a amostra, homogeneizar

bem e colocar mais conservante

Quando so feitas vrias coletas em dias alternados,

elas podem ser misturadas no mesmo recipiente

Cuidados fundamentais
Usar luvas

Trabalhar com calma, identificando corretamente

Usar material descartvel evita falso-positivos

Escolha do mtodo
No existe um mtodo capaz de diagnosticar, ao mesmo tempo, todas as

formas parasitrias.

Alguns mtodos so mais gerais, permitindo o diagnstico de vrios

parasitos intestinais, outros so mtodos especficos, indicados para um parasito em especial. centrifugao (MIFC, Ritchie e Coprotest).

Mtodos gerais mtodo de Hoffman, Pons e Janer e o os mtodos de

Na maioria dos pedidos de EPF, a suspeita clnica no relatada, e o exame

feito por um dos mtodos gerais, acima citados.

Quando solicitada a pesquisa de um parasito que exige a execuo de um

mtodo especfico mtodo especfico e mtodo geral devem ser executados o EPF ficar mais completo, pois ser feita a pesquisa dos vrios parasitos intestinais e no apenas daquele solicitado.

Escolha do mtodo
Execuo de vrios mtodos com cada amostra fecal

um mtodo geral um especfico para larvas de helmintos um especfico para cistos de protozorios.

Procedimento invivel - quantidade insuficiente de

fezes, ou pelo elevado nmero de exames a serem realizados por dia Interao mdico-laboratrio contribuiria para que o EPF fosse o mais exato possvel. Automao ainda no uma realidade na parasitologia Testes imunolgicos Testes moleculares

Escolha do mtodo
Imunoenzimticos - EIA ou ELISA Entamoeba histolytica/ dispar Giardia lamblia Cryptosporidium Imunofluorescentes-IFAs Cyclospora Isospora PCR deteco e subtipagem Cryptosporidium

Escolha do mtodo
A fim de obter mais qualidade no EFP, devemos

sempre ter em mente que 1. algumas espcies de parasitos s so evidenciadas por tcnicas especiais; 2. um exame isolado, onde o resultado negativo, no deve ser conclusivo, sendo recomendvel a sua repetio com outra amostra; 3. a produo de cistos, ovos ou larvas no uniforme ao longo do dia ou do ciclo do parasito.

Mtodos
Exame de fezes direto a fresco Tcnicas de concentrao - Muitas vezes o nmero de formas

parasitrias eliminadas com as fezes pequeno, havendo necessidade de recorrer a processos de enriquecimento para concentr-las.

Espontnea ou por centrifugao Flutuao ou sedimentao

Tcnicas para buscas de larvas Existem diversas tcnicas semelhantes, baseadas no mesmo

fundamento, com nome diferente Um mtodo ser mais ou menos utilizado na rotina do EPF, quando, alm de permitir o diagnstico de vrios parasitos intestinais, tambm de fcil execuo e pouco dispendioso.

Helmintos - Formas evolutivas eliminadas via anal

OVOS

LARVAS

Ascaris lumbricoides Trichuris trichiura Enterobius vermicularis Ancylostoma duodenale Necator americanus Taenia solium Taenia saginata Hymenolepis nana Schistosoma mansoni

Strongyloides stercoralis

VERMES ADULTOS

Ascaris lumbricoides Taenia sp. (proglotes) Enterobius vermicularis

Protozorios - Formas evolutivas eliminadas via anal

CISTOS/TROFOZOTOS Giardia lamblia Entamoeba histolytica/E. dispar Entamoeba coli Endolimax nana Iodamoeba btschlii Chilomastix mesnili Blastocystis hominis (apenas cisto)

Mtodo direto
Procedimento simples Permite visualizar trofozotos vivos

Obtida diretamente da amostra fecal, sem

conservante, pouco material (falso-negativo)

Mtodos de concentrao so melhores mais

amostra, maior sensibilidade

Mtodo direto
Recolhe-se uma poro bem pequena (cabea do

palito de fsforo) e coloca-se sobre a lmina Adiciona-se salina Homogeiniza Coloca lamnula Anlise em microscpio em 10 e 40X