PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADR&O ' POP

(REA EMITENTE) Se#or de B!o*+,%! a ASSUNTO) Do$a-e% de Tr!-.! er,deo$ 1.OBJETIVO A determinao dos Triglicrides em amostras de sangue empregada na abordagem laboratorial das hiperlipidemias. 2.PRINCPIO Os Triglicrides so determinados de acordo com as seguintes reaes: Lipase da lipoprotena Triglicrides Glicerol + cidos Gra!os Glicerol$%$&os'ato + A(# Glicerol"uinase Glicerol + AT# )g +*

Glicerol$%$'os'ato Glicerol$%$&os'ato + O* O!idase

(ihidro!iacetona + +*O*

#ero!idase * +*O* + , Aminoantipirina + ,$-loro'enol .uinoneimina + , +*O A intensidade da cor /ermelha 'ormada diretamente proporcional 0 concentrao dos Triglicrides na amostra. 3. MATERIAL UTILIZADO 1spectro'ot2metro. 3anho$maria mantido 0 temperatura constante 4%5 6-7. #ipetas para medir amostras e reagentes. -ron2metro. 8it de Triglicerdeos 4.AMOSTRA Preparo do pa !e"#e O paciente de/e estar com peso e dieta est9/eis por tr:s semanas e em ;e;um de <* a <, horas. A abstin:ncia alco=lica dese;9/el nas 5* horas "ue antecedem o teste. Obter a amostra com o paciente assentado. O torni"uete no de/e ser mantido por tempo maior "ue um minuto e de/e$se obter a amostra de sangue ap=s liberar o torni"uete. T!po$ de a%o$#ra >sar soro. O analito est9/el por dois dias entre * $ ? 6-. Arma@enamento prolongado da amostra no recomendadoA por"ue /9rias substBncias podem

ser hidrolisadas liberando glicerolA le/ando 0 obteno de resultados 'alsamente ele/ados. A heparina promo/e a ati/ao in /i/o ou in /itro da lipase da lipoprotenaA 'a@endo com "ue a concentrao dos triglicrides se redu@a gradati/amente em amostras contendo heparina. 1ste 'en2meno ocorre tambm em amostras de soro obtidas em pacientes recebendo doses terap:uticas de heparina. Ar%a/e"a%e"#o e e$#a0!.!dade da a%o$#ra O analito est9/el por * dias entre * C ? 6-. 1. PROCEDIMENTO Pro ed!%e"#o %a"+a. <. Tomar % tubos de ensaio e proceder como a seguir: Amostra #adro 4n6 *7 Eeagente < 4n6 <7 3ranco $$$$$ $$$$$ *AD mL Teste DAD* mL $$$$$ *AD mL #adro $$$$$ DAD* mL *AD mL

*. )isturar e colocar no banho$maria %5 6- por <D minutos. O n/el da 9gua no banho de/e ser superior ao n/el do reagente nos tubos de ensaio. %. (eterminar as absorbBncias do teste e padro em FDF nm acertando o @ero com o branco. A cor est9/el por GD minutos. C2. +.o AbsorbBncia do teste Triglicrides 4mgHdL7 I ! *DD AbsorbBncia do padro

3. RESULTADOS U"!dade de %ed!da mgHdL Va.ore$ de$e425e!$ o+ re o%e"dado$ Tr!-.! er,deo$ %-6dL (ese;9/el Limtro'e Alto )uito Alto A#7 18 a"o$ J <DD <DD $<*K > <*K $$$ A !%a de 29 a"o$ J <FD <FD C *DD *DD C ,KK > ,KK

:.LIMITA;&O DO TESTE

L!"ear!dade A reao linear at <<DD mgHdL. #ara /alores maioresA diluir a amostra com La-lA reali@ar no/a determinao e multiplicar o resultado obtido pelo 'ator de diluio. (iluir a amostra de tal modo "ue o /alor encontrado se situe entre <DD e *FD mgHdL. I"#er<er=" !a$ L/eis ele/ados de asc=rbico 4/itamina -7 produ@em inter'er:ncias negati/as por competio com o cromog:nio na reao da pero!idase. Me hou/er suspeita da presena de 9cido asc=rbico dei!ar o soro em repouso durante KD minutos antes de iniciar a dosagem para no obter resultados 'alsamente diminudos.