Anais do 9 Seminrio Anual de Iniciao Cientfica, 19 a 21 de outubro de 2011

ANLISE MICROQUMICA DE FOLHAS DE Jatropha curcas L. (PINHO-MANSO)

Edilson Freitas DA-SILVA1; Fernanda ILKIU-BORGES2; Denis DE-PINHO3 Resumo As espcies do gnero Jatropha L. (Euphorbiaceae) possuem considervel valor scio-econmico e ambiental, pois so utilizadas em diversas partes do mundo como espcies medicinais e ornamentais, tambm como cercas-vivas. O leo extrado de J. curcas L. utilizado como poderoso purgativo, alm de se destacar como uma espcie promissora na produo de biocombustvel. Considerando que so raros os estudos microqumicos da espcie, a pesquisa foi desenvolvida para contribuir com informaes teis a pesquisas farmacobtanicas, fisiolgicas e de melhoramento gentico. O material vegetal foi coletado no Horto de Plantas Medicinais da Embrapa Amaznia Oriental, seccionados, parte clarificado em hipoclorito de sdio e parte manipulado ao natural para que se processassem os testes microqumicos; com isto constatou-se que a maior parte das substncias estavam presentes, em maior quantidade, no parnquima palidico, tais como: alcalides, antraquinonas, flavonides e compostos fenlicos e na nervura central grupos isolados de gros de amido. Concluiu-se que nas folhas ocorrem importantes grupos de princpio ativo e que o tratamento dos cortes em hipoclorito de sdio pode interferir nos resultados. Palavras-chave: espcie medicinal, biocombustvel, princpio ativo.

Introduo O gnero Jatropha L. (Euphorbiaceae), pertence subfamlia Crotonoideae, tribo Jatropheae, encontra-se representado por cerca 170 espcies que se distribuem nas regies semiridas tropicais da frica e das Amricas (Webster, 1994). A delimitao mais recente do gnero baseou-se em dados morfolgicos, citolgicos e, principalmente, na morfologia da epiderme que a dividiu em dois subgneros, Jatropha e Curcas, com dez sees e dez subsees (Dehgan & Webster, 1997). O subgnero Jatropha o que possui maior distribuio, com espcies encontradas na frica, ndia, Amrica do Sul, Antilhas, Amrica Central e Caribe. O subgnero Curcas, com exceo de Jatropha curcas L. encontrado em outras regies, est restrito ao Mxico, desertos do Saara, Arizona e Texas (Dehgan & Webster, 1997). Os indivduos deste gnero possuem considervel valor scio-econmico e ambiental, pois so utilizadas em diversas partes do mundo como espcies medicinais e ornamentais, tambm como cercas-vivas, como J. gossypiifolia L., J. curcas e J. multifida L. J. gossypiifolia e J. curcas na frica, em especial, so utilizadas na horticultura, para ornamentao de jardins tropicais (Watt & Breyer-Brandwijk, 1962) e o leo extrado de J. curcas utilizado como

poderoso purgativo (Dehgan & Webster, 1997), alm de se destacar como uma espcie promissora na produo de biocombustvel (Silva, et al., 2008). Estudos preliminares podem orientar e localizar qualitativa e quantitativamente um ou vrios princpios ativos, o mtodo histolgico baseia-se na observao de cortes de tecidos frente a certos reativos que formam cores. Metablitos secundrios como: alcalides, terpenoides, flavonides, etc, podem, tambm, ser teis para determinar a posio hierarquia evolutiva, o que constitui a sistemtica qumica ou quimiotaxonomia (Domngez, 1973). Diante do valor ecolgico, econmico e social destas espcies a presente pesquisa foi desenvolvida para contribuir com informaes microqumicas que sejam teis a pesquisas farmacobtanicas, fisiolgicas e de melhoramento gentico, visto que estudos deste tipo so escassos para as espcies deste gnero. Material e Mtodos O material vegetal foi coletado no Horto de Plantas Medicinais da Embrapa Amaznia Oriental em indivduos com folhas completamente expandidas.

______________________ 1 Graduado em Cincias Biolgicas da Universidade Estadual Maranho; E-mail: freitasdasilva20@yahoo.com.br. 2 Pesquisadora da Embrapa Amaznia Oriental; Tv. Enas Pinheiro s/n. Belm/Par; Email: ilkiuf@cpatu.embrapa.br. 3 Graduando em Engenharia Agronomica da Universidade Federal Rural da Amaznia; E-mail: denisdepinho@agronomo.eng.br

Anais do 9 Seminrio Anual de Iniciao Cientfica, 19 a 21 de outubro de 2011 Foram processados cortes transversais das regies da nervura central, margem e regio intermediria da lmina foliar. Todo material foi submetido aos reagentes presentes na tabela 1, para deteco ou no das substancias listadas na referida tabela. Parte dos cortes foi tratada com hipoclorito de sdio comercial para clarificao e melhor observao e parte foram manipuladas ao natural, assim pode-se perceber a interferncia da clarificao nos testes microqumicos.

Tabela 1: Teste microqumico empregado nas folhas de J. curcas. SUBSTNCIA Aucares Redutores Alcalides Amido Antraquinonas Flavonides Compostos Fenlicos Substncias Graxas Resultados e Discusso O reagente dragendorff em contato com os cortes clarificados em hipoclorito de sdio conferiu cor castanha s clulas parenquimticas do tecido paliadico e do lacunoso destacando-se a colorao intensa do primeiro tecido, alm de corar as clulas parenquimticas da nervura central, em cortes ao natural corou a membrana interna das clulas epidrmicas, este tipo de reao indica a presena de alcalides nestes tecidos (Figura 1). Domngez (1973) informou que os alcalides em contato com esta substncia adquirem cor laranja ou marrom, acrescenta que este um grupo heterogneo e fisiologicamente ativo e que sua variabilidade possui considervel valor taxonmico. REAGENTE Fehling Dragendorff Lugol KOH 5% Cloreto Frrico 10% Sudan IV AUTOR Purvis et al., 1964 Costa, 1982 Kraus & Arduin, 1997 Costa, 1982 Johansen, 1940 Johansen, 1940

Figura 2: A-B: Cortes clarificados, nervura central; B: Detalhe dos gros de amido. ga: gros de amido

Figura 1: A: Corte clarificado, mesofilo; B: Corte ao natural, detalhe da epiderme.

O KOH 5% reagiu corando em vrias tonalidades o parnquima palidico as cores reveladas foram vermelho, amarelo e verde (Figura 3). Domngez (1973) relata que a cor violeta ou vermelha indica a presena de compostos antraquinnicos, j os flavonides coram-se de amarelo alaranjado ou escurecido, os referidos autores lembram que hetersidos flavnicos e compostos antraquinnicos localizam-se dissolvidos, principalmente, no citoplasma de clulas parenquimatosas e acrescentam que o mtodo de utilizao de KOH no especfico e pode originar outras coloraes referentes a outras substncias como taninos.

O teste com lugol apresentou-se positivo apenas na nervura central, a qual revelou grupos esparsos distribudos entre as clulas parenquimticas de gros de amido (Figura 2). De acordo com Meyer et al. (1965) e Costa (1994), os gros de amido embora variem em tamanho e nmero, apresentam forma praticamente constante a uma determinada espcie, sendo por isso importantes identificao da mesma.

Figura 3: A: Cortes clarificados. at: compostos antraquinnicos; cm: cumarinas; fl: flavonides.

O cloreto frrico reagiu apenas nos cortes que no passaram pelo processo de clarificao em hipoclorito de sdio nas clulas do parnquima palidico onde, em contato com o reagente, apresentaram-se enegrecidas (Figura 4) conforme a reao descrita como positiva por Kraus & Arduin (1997).

Referncias Bibliogrficas COSTA, A. F. Farmacognosia. 2 ed. Vol. III. Lisboa: Editora Fundao Calouste Gulbenkian, 1982. COSTA, A. F. Farmacognosia. 4 ed. Lisboa: Fundao Calouste Gulbenkian, 1994. v. 2, p. 191. DEHGAN, B. & Webster, G.L. Univ. California Publ. Botany 74: 1-73, 33, 1997. DOMNGUEZ J. Mtodos de investigacin en Fitoqumica. Mxico: Editorial Limusa; 1973. JOHANSEN, D. A. Plant microtechnique. Nova York: Mc-Graw-Hill Book Co. Inc, 1940. KRAUS, J. E.; ARDUIN, M. Manual bsico de mtodos em morfologia vegetal. Rio de Janeiro: EDUR, 1997. MEYER, B. S.; ANDERSON, D. B. & BHNING. Introduo fisiologia vegetal. Lisboa: Fundao Calouste Gulbenkian, 1965. PURVIS, M. J.; COLLIER, D. C. & WALLS, D. Laboratories techniques in botany. London: Butterwoths,1964. SILVA, H., NEVES, J., JUNIOR, D. & COSTA, C.Quantidade de gua do substrato na germinao e vigor de sementes de pinho-manso. Revista Caatinga, 21: 5, 178-184, 2008. WEBSTER, G. L. Classification of the Euphorbiaceae. Ann. Missouri Bot. Gard. 81: 3143, 1994. WATT, J.M. & BREYER-BRANDWIJK M.G. The medicinal and poisonous plants of southern and eastern Africa. 2 ed. Edinburgh and London: Livingstone, Ltd., 1962.

Figura 4: A-B: Corte ao natural; B: Detalhe. cf: compostos fenlicos.

Concluses Os testes permitiram confirmar a ocorrncia de alguns grupos ativos como demonstra tabela 2.
Tabela 2: Resultado do teste microqumico, empregado nas folhas de J. curcas, onde + = indica presena e - = indica ausncia.

SUBSTNCIA Aucares Redutores Alcalides Amido Antraquinonas Flavonides Compostos Fenlicos Substncias Graxas

RESULTADO + + + + + -

Os resultados obtidos so de extrema significncia, j que mostra que as folhas possuem importantes grupos ativos o que pode explicar a utilizao da espcie como medicinal. A manipulao de cortes tratados com hipoclorito de sdio e cortes ao natural demonstrou a vulnerabilidade dos compostos fenlicos ao reagente clarificador.