Preparo de Meios de Cultura

Discente:

Danilo Dos Santos
Oliveira





Docente:
Amanda Teixeira








Ilhus, BA

Agosto, 2014

Universidade Estadual de Santa Cruz UESC
Departamento de Cincias Agrrias e Ambientais-DCAA
Curso de Medicina Veterinria
Disciplina: Microbiologia Veterinria


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Sumrio


INTRODUO ...................................................................................... 03
OBJETIVO ............................................................................................. 03
OBJETIVO GERAL ................................................................................ 03
OBJETIVO ESPECFICO ...................................................................... 03
MATERIAIS E MTODOS ..................................................................... 04
MATERIAIS ........................................................................................ 04
REAGENTES ...................................................................................... 04
MTODOS .......................................................................................... 05
RESULTADOS ...................................................................................... 06
CONCLUSO ........................................................................................ 06
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ..................................................... 07
















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INTRODUO
Meio de cultura a associao qualitativa e quantitativa de substncias que
permitem o cultivo de microrganismos fora do meio natural. Para um
crescimento adequado, estes microrganismos necessitam de nutrientes e
condies ambientais favorveis (pH, presso osmtica, temperatura, oxignio,
umidade entre outros), (SOARES et al., 1987). Entre os principais
componentes de um meio de cultura esto as fontes de carbono e energia
como os aucares, nitrognio, fsforo e sais minerais. Os meios quanto a
origem podem ser naturais ou complexos, o estado fsico: slidos , lquidos e
semisslidos, quanto ao emprego podem ser seletivos, diferenciais,
enriquecimento, contagem, estocagem e identificao (SOARES et al., 1987).
Nesta aula prtica foi possvel trabalhar com trs tipos de produo de meios
de cultura, o TSA, TSB e TSI. E tambm o modo em que cada meio de cultura
foi preparado antes de ser autoclavado.

OBJETIVO
OBJETIVO GERAL

Aprender a utilizar materiais e preparar meios de cultura.

OBJETIVO ESPECFICO
Produzir meios de cultura.
Conhecer mtodos de preparo de meios de cultura.











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MATERIAL

Micro-ondas;
Seringa;
Bquer de 250 ml;
Tubos de tampas rosqueadas;
Estante para tubos;
Balana;
Papel madeira;
Algodo;
Fita adesiva;
Gaze;
Autoclave;
Placas de Petri;
Proveta;
Erlenmeyer;
Bico de Bunsen;
Basto de vidro;
Piseta;
Papel filme;
Geladeira;
Cronmetro;
Suporte de madeira.

REAGENTES

gua destilada;
Agar Triptona de Soja (TSA);
Caldo Triptona de Soja (TSB);
Agar Trplice Acar Ferro (TSI).


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MTODOS
O procedimento teve incio com uma pequena regra de trs simples para se
estabelecer as medidas em gramas e quais as quantidades de cada meio de
cultura: TSA, TSB e TSI seriam usadas.
TSB: seguindo as instrues do rtulo da embalagem onde em 30g de TSB se
produz 1000 mL de soluo, para este procedimento pediu-se quantidade em
gramas para se obter 50ml de soluo. Depois de obtida a quantidade em
gramas, utilizou-se uma balana analtica para se ter o peso preciso de TSB,
com um Erlenmeyer de 250 mL que foi colocado sobre a balana e est foi
zerada, foi adicionando-se com uma esptula o TSB em p, at chegar ao peso
determinado.
Depois, em uma proveta adicionou-se 50 mL de gua destilada e esta foi
vertida dentro do Erlenmeyer que foi misturado ao p do meio para completa
homogeneizao. Para se obter total diluio, colocou-se o Erlenmeyer dentro
de um micro-ondas e deixado por 30 segundos, onde observou-se a completa
diluio. Utilizando uma placa de petri, verteu-se todo o meio lquido do
Erlenmeyer dentro dela e depois com uma seringa foi adicionado cinco mL em
dez tubos com tampas rosqueveis, logo aps todos os tubos estarem com o
meio, eles foram fechados com tampa at a metade. Com um bquer que
coubesse todos os tubos, eles foram dispostos em p dentro do mesmo que foi
fechado com papel madeira e lacrado com fita adesiva e levado para a
autoclave por 15 minutos a 121C. Aps esse tempo os tubos foram tirados e
rosqueados e colocados em grade para tubos.
TSA: seguindo os mesmos passos do TSB, foi pesado em balana analtica a
quantidade necessria para se obter 100 mL de TSA, para isso usou-se um
Erlenmeyer que foi colocado sobre a balana e zerada, em seguida com uma
esptula pesou-se a quantidade em gramas de TSA. Em uma proveta,
adicionou-se 100 mL de gua destilada que foi colocado ao Erlenmeyer com o
p e depois levado ao micro-ondas para a diluio, evitando a fervura do meio,
ele foi posto por 60 segundos. Depois vedou-se com uma gaze e algodo por
cima (tampo), a boca do Erlenmeyer que foi amarrada com barbante e envolto
com papel madeira e amarrado novamente. Em seguida foi levado para a
autoclave por 15 minutos a 121C. Aps esse tempo o Erlenmeyer foi

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desamarrado e retirado o algodo, com o bico de Bunsen, flamou-se a boca do
tubo e seu contedo despejado em cinco placas de petri, aproximadamente 20
a 25 mL em cada placa e esperou solidificar.
TSI: Este meio foi pesado em balana analtica com um Erlenmeyer, para isso
antes zerou-se a balana. Neste procedimento foi utilizado 50 mL de gua, e
pela regra de trs simples foi necessrio 3,23 gramas do meio. Aps isso, com
a proveta contendo 50 mL de gua destilada, foi vertida no Erlenmeyer com o
p e depois levado ao micro-ondas para diluio por 60 segundos sempre
evitando a fervura. Depois de diludo o contedo foi despejado em uma placa
de petri, onde com uma seringa adicionou-se cinco mL do meio em dez tubos
com tampas rosqueveis fechados at a metade. Esses tubos foram colocados
em um bquer que foi envolto por papel madeira e lacrado com fita adesiva, e
depois levado para a autoclave por 15 minutos a 121C. Depois de retirado da
autoclave, os tubos foram dispostos em um suporte de madeira de forma que
eles ficassem inclinados at sua completa solidificao.

TSI TSB TSI
64g-----1000ml 30g-------1000ml 40g--------1000ml
x--------50ml x---------50ml x-----------100ml
x= 3,23g x= 1,5g x=4g



RESULTADOS

Feitos todos os procedimentos, os meios de cultura foram levados pela
Docente: Amanda, para a geladeira, onde no tivemos como saber se foram
encontrados os resultados de imediato, ficando para a prxima aula ela mostrar
a qualidade dos meios de cultura.

CONCLUSO

Pela aula prtica e todos os meios de cultura utilizados, pode-se concluir que a
tcnica de meio de cultura para crescimento bacteriano se mostra como um

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bom meio de obteno do tal, porem os tubos s precisaram ser autoclavados
j no final dos procedimentos e com suas tampas semiabertas parra a entrada
do vapor e total esterilizao e assim obter meios de cultura livres de
contaminao.


REFERENCIA BIBLIOGRFICA

RAPHAEL GONALVES NICSIO. Meios de Cultura. Disponvel em:<
http://www.biomedicinabrasil.com/2010/09/meios-de-cultura.html>. Acesso em:
28 Agosto, 2014.
Content Yud. Livro Microbiologia. Disponvel em:<
http://content.yudu.com/Library/A1w3tg/LIVROMICROBIOLOGIAWI/resources/
8.htm>. Acesso em: 29 Agosto, 2014.

SOARES, J.; CASIMIRO, A & AGUIAR, L. Colorao de Gram. Microbiologia
Bsica. Fortaleza: EUFC, 1987. 174p.

BLACK, Jacquelyn G. Microbiologia: fundamentos e perspectivas. 4. ed. Rio
de Janeiro: Guanabara Koogan, c2002. 829 p.