Seo Aprendendo

Rev Med (So Paulo). 2006 out.-dez.;85(4) edio comemorativa:124-9.

Mecanismo de ao da insulina*
Isaias Raw(1);
Rev Med (So Paulo). 1948;32:199-210

H mais de sessenta anos, Von Mering e

Minkowsky fizeram suas primeiras experincias em
animais pancreatectomisados, trabalhos stes que
h vinte e cinco anos atrs culminaram com a
descoberta por Banting e Best,da Insulina.
At o aparecimento dos trabalhos sbre
metabolismo intermedirio, graas a Warburg,
Meyerhof, Cori, e outros hbeis pesquisadores, pouco
se pode progredir no estudo do modo de ao do
hormnio pancretico. Entretanto ainda hoje, em que
se registram na literatura milhares de trabalhos sbre
metabolismo dos glcidios, podemos dizer que quase
nada est assentado sbre este problema. Muitos
dados foram obtidos, mas todos les devem ser.
tomados com reservas. Primeiramente devemos
notar que o organismo animal um sistema muito
complexo, onde existe um sem nmero de
intercorrelaes, regulaes fisiolgicas e
mecanismos de defesa. Muito comumente, o
pesquisador procurando dar uma explicao simples
aos fenmenos ocorridos no decurso de suas
experincias, esquece-se que os seus resultados
representam uma soma de reaes isoladas, um
resultado final de muitos atos fisiolgicos. Assim
(durante muito tempo atribuia-se os sintomas da
pancreatectomia unicamente a falta de insulina (uma
vez que a nica leso era a falta do pncreas, e a
administrao de insulina reconduzia o animal ao
estado normal) deixando-se de levar em conta o
aumento relativo dos efeitos das glndulas de ao
oposta, isto , hipfise, supra-renal e tireide.
Por outro lado, no devemos deixar de
assinalar que a grande maioria de experincias in
vitro, so feitas em condies muito distantes das
fisiolgicas.
Os
mtodos
empregados,
particularmente os de rotina nos laboratrios de

pesquisa metablica, como o mtodo das lminas de

tecido de Warburg ou o homogeneizado de Rotter,
nos revelam apenas o que os tecidos podem fazer,
mas no o que fazem nas condies fisiolgicas.
Assim lembramos que Cori demonstrou que as
enzimas hepticas que normalmente sintetisam
glicognio, in vitro sintetisam uma espcie de amido.
O prprio esquema de metabolismo intermedirio dos
glcidos de Meyerhof, Parnas e Embden, atualmente
adotado at certo ponto apenas uma hiptese, pois
muitos pontos esto ainda por serem demonstrados
no organismo ntegro. Lembramos, tambm que nos,
estudos sbre o modo de ao da insulina usam, a
quase totalidade dos experimentadores a insulina do
comrcio, cuja composio e propriedades se
afastam da insulina natural.
Ao fisiolgica da insulina
Sabemos que as hexoses uma vez absorvidas,
so depositadas no fgado sob a forma de glicognio
que funciona como uma reserva, transformando-se
medida das necessidades em glicose, que passa
para a corrente sangunea. A glicose sangnea,
retirada pelos tecidos, principalmente o muscular,
depositando-se neste sob a forma de glicognio. O
glicognio muscular oxidado a cido pirvico, que
por uma srie de reaes chega a anidrido carbnico
e gua. No caso de uma relativa anxia, como num
trabalho excessivo, o cido pirvico armazena-se e
reduzido a cido ltico, que pode voltar a cido
pirvico, sendo ento metabolizado. No caso de um
maior excesso de cido ltico este passa para o
sangue, sendo dste retirado principalmente pelo
fgado reformando glicognio.

* Palestra inaugural dos Seminrios de Bioqumica de 1948, pronunciada em 19-3-48.

(1)
Acadmico.

124

Raw I. Mecanismo de ao da insulina.

Fig. 1

Os trabalhos de Cori demonstraram que a

passagem (reversvel no fgado mas irreversvel no
msculo) de glicose a glicognio se faz por vrias
reaes de que participa o cido fosfrico formandose steres fosfricos.
Glicognio

Glicose-1-Fosfato

Glicose-6-Fosfato

Glicose

Ltico

Pirvico

CO2 + H2O

Fig. 3
Normal: resultado aps a administrao de glicose.
Controle despancreatizado: manuteno da glicemia pela
administrao de uma injeo constante de insulina.
Despancreatizado: curva glicmica em animal com
administrao de injeo constante de insulina.
Soskin e Allweis, Am. J. Phys. 110:4(1934).

Fig.2

A injeo de insulina tem vrios efeitos:

hipoglicemia, glicognio, deposio, anticetogenese
e hipofosfatemia. lsto significa que uma injeo de
insulina determina uma diminuio da glicose do
sangue e um aumento do glicognio dos tcidos (no
indivduo normal a insulina determina uma diminuio
do glicognio heptico) uma menor formao de cido
aceto-actico, beta hidroxibutrico e acetona, bem
como uma diminuio do fsforo inorgnico do
sangue.
At 1938 no era conhecida a ao
gloicorreguladora autnoma do fgado, funo esta
que permite ao fgado regular a glicemia. Sabemos
que aps a injeo ou a administrao endovenosa
de uma dose de glicose, a glicemia aumenta voltando
ao normal duas ou trs horas mais tarde. Imaginavase antigamente que a volta da glicemia ao normal se
devia a uma descarga de insulina que determinava
uma deposio de glicognio, principalmente
heptica. Soskin demonstrou (fig. 3) que mesmo num
animal em que se retira o pncreas e se administra
uma injeo constante de insulina, a diminuio da
hiperglicemia alimentar, isto , a curva glicmica,
normal, indicando isto que a funo de
glicorregulao do fgado, ativamente, e no do
pncreas pela libertao de uma quantidade adicional
de insulina. Os trabalhos de Soskin e col. (1934-1938,
fig. 4), Bodo (1933), Mirsky(1937) e outros,
demonstraram que mesmo in vitro isto acontece.
Assim o acrscimo de glicose impede a glicogenolise.

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Fig. 4
Inibio da glicogenolise hepatica por glucose adicionada:
I: influncia de diferentes quantidades de glicose
adicionadas no aparecimento de glicose em polpa de
fgado, em 1 hora: 1 - sem glicose, 2-5mg 3-10mg 4- 20mg
5-40mg. II: comparao do aparecimento de glicose, em
diferentes intervalos de tempo, com e sem adio de
glicose: 6- sem adio 7- com 20mg.
Soskin e col., Proc. Soc. Proc. Soc. Exp. Biol. & Md. 42;689
(1939).

Estes resultados hoje bem assentados (mas

pouco citados na literatura, principalmente clnica)
afastaram definitivamente a idia de que a insulina
seja responsvel, por mecanismo direto, pela
manuteno da glicemia.
Teorias de diabete
Encontramos na literatura, conforme est bem
esquematizado no livro recente de Soskin e Levine,
duas teorias fundamentais de diabete. A primeira
conhecida por teoria da no utilizao, proposta por
Minkowski imagina que o diabetes represente uma

Rev Med (So Paulo). 2006 out.-dez.;85(4) edio comemorativa:124-9.

menor utilizao da glicose pelos tecidos. Como o

fgado estaria fornecendo uma quantidade constante
de glicose, esta, no sendo utilizada, determinaria
uma hiperglicemia e uma glicosria. Esta teoria, de
acrdo com os resultados que mais tarde citaremos,
caiu totalmente em desuso, e atualmente pouco
defendida. Soskin props uma segunda teoria que,
apesar de parecer mais correta que a anterior, sofre
fortes crticas principalmente dos clnicos. Pela teoria
de Soskin, conhecida pelo nome de teoria da superproduo, o diabete o resultado da desregulao
heptica, distrbio ste que determinaria ento uma
superproduo e consequente hiperglicemia e
glicosria.

Fig. 5
Diagrama mostrando as analogias mecnicas ilustrando
as teorias de diabete segundo Soskin e Levine,
Carbohydrate metabolism, 1946, Univ. Chicago Press.

Nos prprios trabalhos de Soskin encontramos

dados para defender uma outra teoria, que
denominaremos de teoria da no utilizao com
superproduo secundria. Imaginemos que a
utilizao dos tecidos esteja diminuida. Como tdas
as reaes (ou quase tdas) da glicognese e
glicogenlise so reversveis o fgado sendo dotado
de poder regulador determinaria um aumento de
glicemia, procurando ultrapassar a barreira
determinada pela menor utilizao dos tecidos, quando
falta o hormnio pancretico. Representaria assim,
como documentaremos adiante, a hiperglicemia, uma
mecanismo de defesa do organismo.

Fig. 6
Representao mecnica da teoria de no utilizao com
superproduo secundria.

Ao da insulina nas reaes glicose-glicognio

Trabalhos de Mann j em 1928 e trabalhos de
Cori e col. (1940-41) mostraram que o msculo pode
depositar glicognio na ausncia da insulina.
Entretanto a presena da insulina facilita e mesmo
acelera a retirada de glicose do meio ou do sangue,
como demostraram Dambrosi e Luckens (1933) e
mais recentemente Gemmil e col. (1940-41) e Soskin
(1941-42).

Fig. 7
Influncia da insulina na deposio de glicognio no
diafragma de rato in vitro Soskin e col., Proc. Soc. Exp.
Biol. & Md. 46: 390 (1941).

Mesmo no animal ntegro Soskin e Levine

demonstraram que a insulina facilita a utilizao de
glicose. Conforme notamos na figura 8, a insulina
permite que o organismo utilize uma dada quantidade
de glicose, que, na ausncia desta, precisaria de uma
glicemia, atravs da lei da ao de massas facilita as
reaes de utilizao.

Fig. 8
Utilizao de glicose em co normal e despancreatizado
Soskin e Levine, Am. Jour. Phys. 120: 761 (1937).

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Raw I. Mecanismo de ao da insulina.

Podemos pois afirmar que insulina facilita a

glicogeniognese e a utilizao da glicose. stes
dados concordes com Soskin (the lack of insulin
causes a diminuition in both utilisation and storage
of carbohydrate by the peripherical tissues at any
given blood sugar leveI,...) Soskin e Levine,
Carbohydrate Metabolism, p. 186), mostram
evidentemente que o diabtico utiliza glicose, mas,
tem esta utilizao dificultada. No podemos admitir
uma teoria de no utilizao to absoluta como
admitia Minkowski, entretanto podemos admitir que
na glicemia normal, o diabtico tem uma menor
utilizao(*).
Entretanto, se esta ao cataltica est
demonstrada para o tecido muscular no acontece
o mesmo com alguns outros tecidos. Hemcias,
tecido nervoso e testculo no so influenciveis pela
insulina. Particularmente, o tecido nervoso e testculo
constituem interessante problema, uma vez que
stes tecidos tm como nica fonte de energia a
glicose. O prprio corao do diabtico mais rico
em glicognio do que o corao normal.
A ao da insulina sbre o parenquima
heptico muito discutida. No diabtico a taxa de
glicognio no fgado menor do que no indivduo
normal. A administrao de insulina do diabtico
determinaria um aumento de glicognio heptico
(com concomitante diminuio de hipoglicemia). Isto
levou imediatamente os autores a pensarem que a
insulina tem ao na glicogeniognese heptica.
Entretanto esta no a funo da insulina no fgado.
Soskin e col. (1939) retira dois lobos de fgado, um
antes e outro depois da administrao de insulina
no animal. Coloca stes lobos de fgado in vitro e
determina a glicose que aparece devido a
glicogenlise. Verificou Soskin que a glicogerilise
menor no lobo retirado aps a administrao de
insulina. O mesmo fato j havia sido verificado antes
em experincias diferentes por Issekutz e Szende
(1934), Cori (1930) entre outros.
A prova mais interessante que demonstra que
a insulina inibe a glicogenlise heptica, foi-nos
fornecida por Kosterlitz e Wedder (1933} e Bollman
e Mann (1934). Sabemos que a administrao de
galactose num animal normal determina uma
galactemia transitria, pois a galactose deposita-se
no fgado sob a forma de glicognio. Os AA ao
administrarem a galactose a um animal diabtico
imaginaram que a galactemia seria mais prolongada,
pois supunham que a insulina fsse necessria para
a glicognese heptica. Entretanto verificaram que
ao invs de uma gaIactemia mais prolongada, havia
uma galactemia menos intensa e menos duradoura,

127

acompanhada de uma hiperglicemia. Isto significa

que na ausncia de insulina (animal diabtico) h
uma maior deposio da galactose, e maior
glicogenlise, resultante disto os fenmenos
observados. Conclue-se que no diabtico h maior
glicogenlise, o que seria devido a falta de insulina.
Estas experincias constituem a nosso ver uma das
mais demonstrativas provas (no ditadas por Soskin)
de que no diabetes h uma superproduo de
glicose a custa (primeiramente) de glicognio.
Entretanto poderiam explicar a inibio da
glicogenlise no diabtico pela ao da insulina no
msculo, determinando maior utilizao muscular,
podendo ento o fgado, por mecanismo autnomo
diminuir a glicemia, diminuindo a glicogenlise. Esta
explicao fascinante, para enquadrar estas
experincias na hiptese da menor utilizao com
superproduo secundria, no explica, ao menos
por enquanto as experincias in vitro.
J citamos antes, que no indivduo normal a
insulina determina uma diminuio do glicognio
heptico, conforme demonstraram Bodo e Nuerwrith
(1933), Cori (1925), Corkill (1930). Podemos explicar
ste fato como resultante da ao da insulina sbre
o msculo. O fgado, para manter a glicemia,
determinaria glicogenlise, o que ocasionaria a
diminuio do glicognio heptico.
No podemos deixar de citar as opinies de
Peters (1946), e as experincias de Lundsgaard
(1938) que levam um grande nmero de autores a
imaginar que a insulina no tem ao no fgado.
Fosforilao
Admitido que a insulina atua na glicogeniognese e na glicogenlise, procuram os autores
explicar esta dupla ao por uma nica hiptese, o
que deu origem de 1941 para c a idia de que a
insulina agiria nas reaes de fosforilao da glicose.
Muitos trabalhos foram feitos, dosando-se os
diversos compostos fosforilados do metabolismo
intermedirio; lanando mo de tcnicas de dosagem
de istopos radioativos, a maioria dos trabalhos
atualmente feitos lanando mo dos trabalhos so
atualmente feitos lanando mo do P32.
Sacks (1943) fez vrios trabalhos em que
demonstrou maior transformao de fsforo nas
fraes correspondentes a ATP, fosfocreatina e
frutose fosfato. A radioatividade da glicose 6-fosfato
s aumenta em estado post-absortivo, o que tem
sido de explicao difcil. Todavia apenas podemos

Rev Med (So Paulo). 2006 out.-dez.;85(4) edio comemorativa:124-9.

dizer que a insulina aumenta o metabolismo dos

derivados fosforilados(*). A dificuldade de se fazer
experincias com rgos isolados, com enzirnas
puros, tem dificultado muito os trabalhos.
Em 1945 Price Cori e Colowitz fizeram um
trabalho que teve enorme repercusso. Mostraram
estes autores que a insulina anula a inibio que o
hormnio da hipfise anterior efetua sobre a
fosforilase. stes dados vieram concordar com as
experincias de Houssay. ste autor demonstrou que
a hipofisectomia fazia desaparecer os sintomas de
diabte. stes resultados nos levam a concluso que
uma das aes da insulina anular a inibio do
hormnio da hipfise anterior sobre a fosforilao.
Entretanto no pode ser ste o nico modo de ao
da insulina uma vez que a insulina age mesmo in
vitro (**) independentemente de uma ao prvia do
hormnio da hipfise anterior. Por outro lado Price e
col. Demonstraram em seu trabalho (***) que o
hormnio da hipfise anterior inibe a oxidao de
glicose no fgado, mas permite a transformao de
glocognio em cido ltico no msculo.
Surge ainda outro problema: se as reaes de
glicose a glicognio so iguais no msculo e no
fgado, a insulina deveria agir de igual modo nos dois
tecidos. Entretanto vimos que no fgado, ou a insulina
impede a glicogenlise, ou no age, efeitos contrrios
a sua ao no msculo. De fato a fosforilase do fgado
e do msculo parecem ser diferentes, pois Cori no
conseguiu a sntese de amido com a fosforilase do
msculo, como conseguiu com a do fgado.
Esta rpida viso dos estudos de fosforilao que
apenas se iniciaram, nos mostram que existem
numerosos problemas at hoje insolveis, mas
evidente que um dos modos de ao da insulina
consiste em anular o efeito inibidor da hipfise
anterior. Parece todavia que ainda age a insulina em
outro ponto da glicognese e da glicogenlise.
Formao de cido pirvico
bastante difcil se obter uma resposta de
cido pirvico no animal. Esta resposta s evidente
quando alm da insulina damos uma dose de glicose,

como Bueding e Coldfard (1943). Entretanto conforme

demonstraram Leloir e Muoz (1938) a administrao
de glicose e insulina determina um rpido
desaparecimento de lcool do sangue de um
indivduo em coma alcolico. Esta reao estudada
por Stotz e col. (1942-43) a seguinte:
CH3CH.OH COOH + CH2COH CH3CO.COOH+C2H5.OH

ltico + acetaldeido pirvico + lcool

ste efeito da insulina-glicose, no indivduo em
coma alcolico, efeito utilizado em clnica, demonstra
que a insulina acelera a produo de cido pirvico.
Himwich e col. (1943) mostraram que a injeo de
glicose com insulina determina maior resposta de
cido pirvico, do que glicose s.
Oxignio
A insulina no determina aumento de consumo
de oxignio, como Gemmil e col. (1940-41)
demonstraram. Rice e Evans (1943), Krebs e Eggletin
(1938), Shor (1939), demonstraram aumento do
consumo de oxignio no msculo de pombo, mas
como assinalaram Soskin e Levine no podemos
raciocinar com as experincias em aves, pois elas
no tm diabetes.
Ao sobre outros metabolismos
Stadie (1940), Bach e Holmes (1937),
demonstraram que a insulina impede a desaminao
dos amino-cidos, impedindo assim a neoglicognese, a custa dstes no fgado. Stadie e col. (1940)
demonstraram ainda que a insulina impede, na lmina
de fgado, a cetognese.
Concluindo podemos dizer que a insulina atua
principalmente no msculo, facilitando o glicogeniognese e a glicogenlise. Atua no fgado, diminuindo
a glicognese a partir de aminocidos e a glicogenlise. A insulina age possivelmente nas reaes de
fosforilao, direta ou indiretamente, bem como
suprimindo a ao do hormnio da hipfise anterior.

(*) Em trabalho recente, Stadje e Zapp .(setembro de 1947, J. BioI. Chem. 70: 66 (1947), apresentam dados que parecem
no concordar com os grficos apresentados por Soskin e Levine (fig. 8), isto , demonstram que a insulina sempre facilita
a utilizao de glicose, mesmo nas mais altas glicemias, o que contradiz os resultados citados, mas apesar dissso Soskin
j havia emitido o mesmo conceito em 1946, como vemos na citao acima feita.
(**) Reservamos para outra ocasio a discusso mais detalhada sobre fosforilao.
(**) Corkill e Nelson (1947) no obtiveram o mesmo resultado que Cori e col., mas provavelmente isto se deve a no
penetrao da insulina no tecido, nas suas experincias.
(***) O trabalho de Price CCori e Colowirz (J. Biol. Chem. 160: 633 (1945) apenas uma nota prvia, no tendo ainda nos
chegado mo a descrio mais completa de suas experincias. Cori mais recentemente (1947) mostrou que o efeito
inibidor da hipfise atravs da suprarrenal, desaparecendo pela adrenalectomia.

128

Raw I. Mecanismo de ao da insulina.

BIBLIOGRAFIA RECOMENDADA

STOTZ Pyruvate metabolism, Adv. In Enzymology 5: 129

(1945).

SOSKIN and LEVINE Carbohydrate metabolism, 1946,

Chicago Univ. Press.

HEVESY Some applications of radioactive indicator in

turnover studies, Adv. In Enzymology 7: 11 (1947).

JENSEN and TENENBAUM The influence of hormones

on enzymatic reactions, Adv. In Enzymology 4: 257 (1944).

PETERS and VAN SLYKE Quantitative clinical chemistry

(Interpretations) 2d edition, 1946, Willians & Wilkins.

Agradeo ao colega Josef Feher os desenhos originais.

Respondendo a perguntas:
Nos vertebrados todos, com exceo das aves, encontramos os sintomas de diabetes, pela administrao do aloxano ou
ablao de tecidos contendo as ilhotas de Langerans. Nas aves o aloxano no determina sndrome diabtica, mas em
doses mais elevadas determina uma intoxicao com sua transformao em cido rico que se deposita nos tecidos,
constituindo a chamada gota visceral de Gomori e Golner. As clulas beta esto lesadas. interessante lembrar que
subindo a escada filogentica, nos rpteis encontramos uma bifurcao, evoluindo um ramo para as aves e outro para os
mamferos.

Comentrio
Prof. Paulo Hilrio Nascimento Saldiva (Departamento de Patologia/FMUSP)
O ano 1948. O jovem acadmico Isaias Raw profere a palestra inaugural dos Seminrios de Bioqumica do
Departamento de Qumica Fisiolgica. O tema abordado o Mecanismo de Ao da Insulina. H pouco mais de 20 anos,
mais precisamente no ano de 1922, o garoto Leonard Thompson, de 14 anos, havia sido o primeiro ser humano a receber
o novo tratamento para o diabetes mellitus. O sucesso do tratamento fez com que no ano seguinte fosse iniciada a produo
em larga escala da insulina. Quatro anos antes, em 1944, a primeira seringa de insulina havia sido desenvolvida. Neste
mesmo ano, 1944, era inaugurado em 19 de abril, o Hospital das Clnicas da Faculdade de Medicina da USP. Eram outros
tempos aqueles. Com a inaugurao do Hospital das Clnicas, a nossa Faculdade iniciava a sua marcha para modernizar
a Medicina de nosso Pas, papel exercido at os dias de hoje. Naquela poca, a Faculdade de Medicina da USP era o norte
de nosso Hospital, e no o inverso, como acontece presentemente. Havia um enorme interesse em pesquisa, seguindo o
preceito que a pesquisa e as atividades clnicas so aspectos inerentes a um Hospital Universitrio. Nos laboratrios da
Faculdade, o Professor Maurcio Rocha e Silva desvendava os mecanismos do primeiro sistema de ativao inflamatria
a partir de uma cascata de ativao de protenas plasmticas - sistema da bradicinina. Este era o cenrio, no mundo e na
nossa Faculdade, no limiar daquele que seria a era da Biologia Molecular.
A Bioqumica era a rea do conhecimento que apresentava o desenvolvimento mais explosivo na rea da Medicina.
Os mecanismos pelos quais o organismo humano funcionava, as vias metablicas eram o assunto do momento. Poucos
anos mais tarde, os bioqumicos desvendavam a estrutura do DNA, atravs dos estudos de Watson e Crick.
Este era o cenrio onde o jovem estudante Isaias Raw apresentava a sua palestra. Esta foi a motivao que fez a Revista
de Medicina publicar esta palestra, onde eram apresentados os conceitos mais modernos da Cincia Mdica, descrevendo os
mecanismos de ao de um hormnio cuja ao era muito mais complexa do que o controle dos nveis glicmicos.
Este artigo mostra claramente o papel da Revista de Medicina na divulgao da pesquisa mdica em nosso meio.
At hoje os conhecimentos dos mecanismos de ao da insulina apresentam novas facetas. O acadmico Isaias Raw tornouse um expoente da Bioqumica em nosso Pas, formando uma escola, que foi interrompida durante os tempos obscuros do
final dos anos 1960. Hoje, o acadmico Isaias Raw lidera um sistema de produo de novas solues para melhorar a
sade de nosso povo, atravs da pesquisa aplicada no Instituto Butantan. A Revista de Medicina mantm-se como
instrumento de divulgao de cincia entre os nossos acadmicos, papel exercido ao longo de 90 anos. Este artigo, a
Revista de Medicina e a figura do Professor Raw mostram claramente o potencial de nossa Faculdade e fazem com que
todos os que amam verdadeiramente a nossa Instituio possam apreciar a sua fora e dela tirar os ensinamentos para um
futuro melhor. Faz 58 anos que este artigo foi publicado. Tenho certeza que, passados mais 58 anos, haver um novo
nmero da Revista de Medicina onde os artigos hoje publicados sero comentados por um velho professor que procurar
mostrar aos estudantes de ento a fora e a tradio do Departamento Cientfico e da Revista de Medicina dos alunos da
Faculdade de Medicina da Universidade de So Paulo.

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