ASSOCIAO DE ENSINO E CULTURA PIO DCIMO

FACULDADE PIO DCIMO

FLVIO SILVINO DO CARMO SILVA

JALLIZY MARIA NUNES OLIVEIRA
JLIA FONSECA DA CRUZ
KATISCIA RIBEIRO SOUZA
MARLIA RAQUEL SILVA VARGO

ANLISE LABORATORIAL DE SANGUE BOVINO DOS ANIMAIS DA FAZENDA

TRS MARIAS E UMA CLARA

ARACAJU
2015

FLVIO SILVINO DO CARMO SILVA

JALLIZY MARIA NUNES OLIVEIRA
JLIA FONSECA DA CRUZ
KATISCIA RIBEIRO SOUZA
MARLIA RAQUEL SILVA VARGO

ANLISE LABORATORIAL DE SANGUE BOVINO DOS ANIMAIS DA FAZENDA

TRS MARIAS E UMA CLARA

Trabalho semestral apresentado como

requisito para obteno de avaliao da
disciplina de Estatstica. Sob a orientao
da prof.. Teresinha do Curso de
Licenciatura em Medicina Veterinria da
Faculdade Pio Dcimo.

ARACAJU
2015

1 INTRODUO
Segundo o BTFEPA (2011), para o diagnstico laboratorial ser realizado
com sucesso, importante uma boa anamnese, suspeita clnica fundamentada e
amostra coletada corretamente. A qualidade da amostra recebida essencial para o
diagnstico. A coleta e o transporte inadequados dificultam ou at inviabilizam o
isolamento do agente etiolgico e, por consequncia, o diagnstico da enfermidade.
Durante a coleta de material biolgico, h risco de exposio a agentes
potencialmente causadores de doenas ao ser humano, razo pela qual altamente
recomendvel que o profissional utilize avental ou macaco, luvas, botas de
borracha, culos de proteo e mscara no momento da coleta.
A coleta dever ser feita de modo a evitar a contaminao com produtos e
outros microrganismos presentes no ambiente ou no prprio animal. Por essa razo,
frascos, tubos, seringas, agulhas e demais instrumentais a serem utilizados devem
estar estreis. Quando no for possvel a utilizao de frascos estreis, recomendase lav-los com gua e desinfetante e ferv-los em gua limpa, no mnimo, durante
30 minutos. Amostras contaminadas por produtos ou microrganismos que no esto
envolvidos na etiologia da doena dificultam a realizao da prova e a interpretao
dos resultados.
A forma de conservao depende da amostra e do tipo de exame
requerido e ser descrita nos captulos posteriores do manual.
As amostras devero ser remetidas em condies de biossegurana
desde o transporte at a chegada ao Instituto. Para tal, devem ser acondicionadas
em um sistema de embalagem tripla:
a) Embalagem primria: compreende a embalagem que comporta a
amostra, entrando em contato direto com a mesma. Podem ser frascos, tubo de
ensaio ou embalagem plstica sem utilizao prvia (exemplo: embalagens para
congelamento de alimentos, com fecho).
b) Embalagem secundria: reveste a embalagem primria, deve ser
impermevel e vedada, de modo a evitar vazamentos, garantindo maior segurana.

c) Embalagem terciria: recebe o conjunto (embalagem primria dentro da

secundria) e deve ser um recipiente isotrmico prova de gua (exemplo: caixa de
isopor ntegra).
No caso de envio de amostras refrigeradas, no interior da embalagem
terciria deve ser colocado gelo reciclvel ou gua congelada dentro de garrafas
plsticas, para evitar acmulo de gua. Para aumentar a durabilidade do gelo,
adicionar sal gua na proporo de 5 colheres de sopa por litro de gua. O gelo
precisa estar em quantidade suficiente para garantir a refrigerao do material.
Gelo seco tambm pode ser utilizado e particularmente recomendado
para amostras visando o isolamento de vrus. Nesse caso, as amostras embaladas,
como acima descritas, devem ser dispostas em uma embalagem terciria (caixa de
isopor) ampla, para permitir a colocao de gelo seco suficiente para manter o
material congelado at a chegada ao laboratrio. Nitrognio lquido igualmente pode
ser utilizado, porm, nesse caso, faz-se necessrio um recipiente especial.
Folhas de jornal podem ser usadas para separar o gelo reciclvel dos
frascos de coleta e preencher espaos vazios. A tampa da embalagem terciria deve
ser lacrada com fita adesiva. Os recipientes e embalagens devem ser desinfetados
externamente com soluo antissptica, como lcool iodado ou hipoclorito de sdio,
a fim de evitar a contaminao de indivduos que iro manipular esses objetos
durante

transporte

recepo

do

material.

Amostras

acondicionadas

incorretamente e conservadas de forma inadequada inviabilizam o diagnstico.

Este trabalho tem o objetivo de colocar em prtica todo o conhecimento
adquirido atravs da disciplina Estatstica, evidenciando o quanto os parmetros so
importantes para termos a deciso correta e mais prxima do acerto sobre qualquer
assunto. Essa deciso pode ser tomada atravs de mdia, varincia e desvio
padro.

2 EXAMES LABORATORIAL EM BOVINOS

2.1 Exames de sangue
Para BTFEPA (2011), exames de sangue, so exames laboratoriais
realizados no sangue para adquirir informaes sobre doenas e funes dos
rgos. Como o sangue flui por todo o corpo, atuando como meio de obteno de
oxignio e nutrientes pelos tecidos, e levando de volta os produtos usados para os
sistemas excretrios, o estado do sangue afeta, ou afetado, por muitas doenas ou
condies mdicas. Por estas razes, os exames de sangue so os exames
mdicos mais comuns. O sangue obtido de um paciente humano ou animal
atravs de uma puno na veia ou um pequeno furo no dedo. O sangue til por ser
um meio relativamente no-invasivo se se obter clulas, fluido extracelular (plasma
sanguneo) do corpo para verificar sua sade.
2.2 Passos bsicos para uma boa coleta de sangue em bovinos
Figura 1. Coleta de sangue em bovinos

Fonte: O autor.

- Verificar sempre, antes da coleta, a necessidade ou no de

anticoagulante e o anticoagulante a ser utilizado
- Verifique sempre o volume recomendado de material, para realizao de
cada exame e procure enviar ema quantidade maior que a necessria, para
possveis repeties ou transtorno no transporte.
- Sempre que necessrio depilar a regio
- Realizar assepsia local
- Fazer garrote ou pressionar com o dedo sobre o vaso sanguneo que vai
ser puncionado. Este garrote no deve demorar
- Introduzir com firmeza a agulha na pele e depois no vaso sanguneo.
Deve-se tomar cuidado para no estourar a veia levando a formao de hematoma.
Imediatamente aps penetrar a agulha no vaso deve-se retirar o garrote e aspirar o
sangue:
- Retirar a agulha e pressionar com algodo embebido em anti-sptico
- A manipulao e o acondicionamento do sangue de acordo com o tipo
de exame que vai ser feito
- Realizar a identificao do material coletado
A ordem de coleta" recomenda segundo a BTFEPA (Boletim Tcnico de
Fundao de Pesquisa Agropecuria), quando h necessidade de se coletar vrias
amostras de um mesmo paciente, durante uma mesma puno a seguinte:
- Tubo para hemocultura (quando houver)
- Tubo sem aditivo (soro)
- Tubo com citrato (coagulao)
- Tubo com heparina (para plasma)
- Tubo com EDTA (hematologia)
- Tubo com fluoreto de sdio (glicemia)
O porqu importante realizar exame de sangue sempre que necessrio,
que as clulas do sangue so de fcil obteno em geral e seu estudo de grande
utilidade diagnstica em processos patolgicos. Por essa razo este exame uma
das anlises mais solicitadas pelo clnico. Vejamos na figura 2, a representao da
amostra de sangue que deu alterao.

Figura 2. Amostra de sangue apresentando clulas sanguneas.

Fonte: O autor.
Em Medicina Veterinria os estudos hematolgicos tm como
finalidade:
- confirmar a presena ou ausncia de anormalidades sanguneas
- delimitar a extenso e o local do processo
- estabelecer as causas de uma alterao sangunea
- servir de guia no prognstico de casos clnicos
Para realizar uma correta anlise hematolgica, o sangue tem que seguir
conservando suas caractersticas fsico-qumicas, para que no existam alteraes
ou artefatos na amostra extrada que possam levar a resultados errneos. Por isso
existem produtos qumicos denominados anticoagulantes, que mantm o sangue
coletado em seu estado lquido.

Exames realizados em sangue sem anticoagulante (tampa vermelha):

Fonte: O autor.
O soro a poro do sangue aps a separao do cogulo. indicado
para exames bioqumicos, sorolgicos e hormonais. Depois de colhido, o material
deve ser mantido em geladeira at sua manipulao (2 - 8C).
Exames realizados em sangue com anticoagulante:
Amostras com anticoagulantes so indicadas para hemograma completo
(contagem global de hemcias, leuccitos, plaquetas, determinao do hematcrito,
VCM; HCM; CHCM, e dosagem de hemoglobina), dosagem de pH e de metablitos
sanguneos (glicose, cido lctico, amnia), presena quantitativa de algum metal
(chumbo, zinco, mangans, molibdnio e cdmio), pesquisa de clulas LE, dosagem
de hemoglobina glicosilada para controle do diabetes, etc.
2.2.1Tipos de anticoagulantes
Dependendo do tipo do exame que se deseja realizar necessrio que o
sangue seja acondicionado em tubos com diferentes anticoagulantes.

EDTA (tampa Roxa)

Fonte: O autor.
Comercializado em forma de sal di-potssio, di-sdico e tri-potssico
sendo os dois ltimos os mais utilizados. o anticoagulante de eleio para
hematologia. A coagulao se evita pela eliminao do clcio do sangue. Podem ser
feitas contagens de 24 a 36 horas aps a coleta, se a amostra estiver mantida em
uma temperatura de refrigerao de 4 C. Nunca deve ser congelado e nem sofrer
temperaturas superiores a 37 C, nestes casos a amostra totalmente invivel.
Um tempo excessivo da amostra com anticoagulante leva a vacuolizao
dos moncitos, seguido do inchamento dos linfcitos, presena de vacolos nos
neutrfilos podendo ser facilmente confundidos com incluses txicas. Pode ocorrer
ainda a destruio das hemcias.

HEPARINA (Tampa Verde)

um anticoagulante natural. usada uma concentrao de 0,2 ml de

heparina saturada por cada ml de sangue. o anticoagulante de eleio para a
dosagem de chumbo.

CITRATO (tampa azul)

 o anticoagulante ideal para estudos de coagulao. Utiliza-se a

concentrao de uma parte de citrato de sdio para 9 partes de sangue total.
imprescindvel manter a relao anticoagulante/sangue para realizar as provas de
coagulao. Os valores obtidos sem esta relao no tm nenhum valor diagnstico.
Este anticoagulante atua quebrando o clcio, formando um complexo com o mesmo
e impedindo o processo de coagulao.

FLUORETO (tampa preta)

Recomendado especificamente para a dosagem de glicose, pois inibe o

processo de gliclise, que ocorre nas hemcias, mantendo os nveis in vitro deste
metablito por mais tempo. A dosagem dever ser feita em at 6 horas aps a
coleta, pois o processo de gliclise continua, mesmo com a presena de fluoreto de
sdio que apenas retarda este processo. Ficar sempre atento a:
- Deve-se sempre conservar a proporo entre o sangue e o
anticoagulante, pois o excesso ou a falta de anticoagulante leva a resultados
alterados.
- O sangue a ser transferido para o tubo com anticoagulante nunca
dever conter cogulos.
No deve ser utilizado material reciclado. Os produtos utilizados para
limpeza podem levar a uma destruio generalizada das hemcias e degenerao
de todas as formas sanguneas. Todas as amostras obtidas sob estas condies
deveriam ser descartadas j que se perde confiabilidade diagnstica, tempo e
dinheiro.
2.3 Passos bsicos para confeco de um esfregao e sanguneo
O esfregao sanguneo amplamente utilizado para pesquisa de
hemoparasitos, tais como: Anaplasmose, Babesiose, Filariose, Erliquiose ente
outros. Tambm importante para verificar as caractersticas morfolgicas dos
eritrcitos, contagem diferencial de leuccitos e de contagem de plaquetas por
campo.

Figura 8. Representao de esfregao sanguneo.

Fonte: O autor.
Para a realizao deste exame necessrio colher sangue e seguir os
seguintes passos:
- Manter a lmina horizontalmente entre o polegar e o indicador
- Colocar uma pequena gota de sangue na extremidade da lmina
- Com uma segunda lmina (extensora) colocar o seu rebordo livre contra
a superfcie da primeira, em frente gota de sangue, formando um ngulo de 45
- Realizar um movimento para trs de modo que entre em contato com a
gota de sangue, pressionando-a at que a gota se espalhe por toda a borda da
lmina
- Impelir a lmina, guardando sempre o mesmo ngulo, em um s
movimento, firme e uniforme, sem separar uma lmina da outra. Forma-se ento
uma delgada camada de sangue
- Secar rapidamente ao ar, e enviar em porta-lminas fornecidos pelo
laboratrio.

Figura 9. Passos dos esfregaos.

Fonte: BTFEPA.
Deve-se observar que:
- conveniente fazer, pelo menos, trs esfregaos
- O esfregao deve ser feito com sangue recm colhido sem
anticoagulante.
- A lmina tem que estar limpa e desengordurada
- A gota de sangue no deve ser muito grande. Quanto maior for a gota,
mais espesso ser o esfregao, dificultando a anlise
- A distenso deve ser feita rapidamente, antes que comece a coagulao
- O esfregao no deve cobrir toda a lmina, devendo apresentar cauda
ou franja
- O aspecto da distenso deve ser liso e nivelado, sem ondulaes, poros
ou salincias.
- A identificao pode ser feita diretamente na lmina a lpis ou em
etiquetas de papel.
- Os esfregaos no devem ser deixados expostos sem proteo,
evitando o contato dos mesmos com poeira, insetos e impresses digitais.

2.4 Materiais utilizados para a coleta de sangue

A qualidade da amostra recebida essencial para o diagnstico. A coleta
e o transporte inadequados dificultam ou at inviabilizam o isolamento do agente
etiolgico e, por consequncia, o diagnstico da enfermidade. Durante a coleta de
material biolgico, h risco de exposio a agentes potencialmente causadores de
doenas ao ser humano, razo pela qual altamente recomendvel que o
profissional utilize avental ou macaco, luvas, botas de borracha, culos de proteo
e mscara no momento da coleta. A coleta dever ser feita de modo a evitar a
contaminao com produtos e outros microrganismos presentes no ambiente ou no
prprio animal. Por essa razo, frascos, tubos, seringas, agulhas e demais
instrumentais a serem utilizados devem estar estreis. Quando no for possvel a
utilizao de frascos estreis, recomenda-se lav-los com gua e desinfetante e
ferv-los em gua limpa, no mnimo, durante 30 minutos. Amostras contaminadas
por produtos ou microrganismos que no esto envolvidos na etiologia da doena
dificultam a realizao da prova e a interpretao dos resultados. (BTFEPA, 2011).
Para a realizao deste trabalho foram utilizados na coleta de sangue os
seguintes materiais:
1) 4 Tubos para coleta de sangue EDTA 2 ml roxo.
2) 4 Tubos para coleta de sangue EDTA 5 ml vermelho.
3) 4 Agulhas 40x12.
4) 4 Pares de luvas descartveis.
5) 4 Seringas de 10 ml.
6) Isopor e gelo para acondicionar as amostras.
7) Algodo.
8) lcool.
No laboratrio, foram utilizados:
1) 8 Lminas de vidro.
2) 5 Toucas higinicas.
3) 6 Pares de luvas descartveis.

Figura 10. Materiais utilizados na coleta de sangue e no laboratrio.

Fonte: o autor.

3 COLETA DE SANGUE EM BOVINOS NA FAZENDA TRS MARIAS

E UMA CLARA
No dia 12 de novembro de 2015, foi realizada uma pesquisa de campo na
Fazenda Trs Marias e Uma Clara que fica localizada no municpio de Nossa
Senhora do Socorro. Com o objetivo de coletar amostras de sangue bovinos da raa
Holandesa mais especificamente gados leiteiros, para fazer comparaes com os
valores de referncias normais desses animais.
Essa experincia em campo foi orientada pela Prof.. Teresinha, assim
como a colaborao do Mdico Veterinrio Roniery Carlos Gonalves Galindo que
tem 15 anos trabalho em sua rea de atuao, nos concedendo algumas
informaes importantes sobre o gado leiteiro.
O intuito dessa comparao aplicar os conhecimentos em estatstica.
Atravs da anlise quantitativa utilizando os parmetros de observncia de cada
amostra. Sendo eles - Varincia e desvio padro, que so medidas de disperso que
indicam a regularidade de um conjunto de dados em funo da mdia aritmtica.
Foram coletadas amostras de sangue de quatro vacas da raa holandesa
Boneca, Bem Feita, Bem vista e Guanabara. Das amostras coletadas foram feitos
exames de Hemograma e Bioqumico. A seguir vejamos os quadros comparativos.
A partir dos dados coletados pela amostra de sangue tanto o hemograma
quanto o bioqumico iro nos d o norte que precisamos para definir os parmetros
estatsticos. Para fazer demonstrao estatstica sero utilizados os resultados de
exames de cada vaca, que ser identificado com o nome de cada uma, facilitando
uma melhor visualizao.
Em seguida, ser feita o clculo da mdia aritmtica de cada resultado,
da seguiro o clculo do desvio padro e da varincia.

Figura 11. Comparativo do resultado do hemograma das vacas.

Fonte: O autor.

Na figura 11, pode perceber nitidamente, que a maioria das vacas esto
dentro dos valores padres, porm notou-se que a vaca Boneca apresentou
alterao em seu nveis. Mas s poderemos ter uma real viso deste comparativo,
com dados mais apurados no coeficiente de variao.
Figura 12. Comparativo do resultado do bioqumico das vacas

Fonte: o Autor.

Na figura 12, diferentemente do que apresentou no Hemograma, Boneca

mostra no Bioqumico a confirmao da alterao existente nos seu exames, mas
teremos uma viso melhor na apurao dos dados.
3.1 Resultado
Esperava-se que a maioria das vacas estavam com seus valores normais
em relao aos valores de referncia. Porm podemos constatar que a ureia de
todas as vacas apresentou alterao.
Figura 13. A anlise quantitativa dos exames.

Fonte: O autor.
Varincia VG% - HEMOGRAMA
var (A) = (38 28,25) + (27 28,25) + (26 28,25) + (22 28,25)
4
var (A) = 46,92
Varincia Ureia - BIOQUMICO
var (A) = (7 7,75) + (12 7,75) + (5 7,75) + (7 7,75)
4
var (A) = 8,92
Desvio Padro VG% HEMOGRAMA

dp(A) = var (A)

dp(A) = 46,92
dp(A) 6,85
Desvio Padro Ureia BIOQUMICO
dp(B) = var (B)
dp(B) = 8,92
dp(B) 2,99

Coeficiente de varincia VG% HEMOGRAMA

CV(B) = _S_x 100
X
CV(B) = _6,85_x 100
28,25
CV(B) = 24,25%
Coeficiente de varincia Ureia BIOQUMICO
CV(B) = _S_x 100
X
CV(B) = _2,99_x 100
7,75
CV(B) = 38,53%
Observou-se que nas anlises dos exames hemograma e do bioqumico,
apresentaram alteraes. A alterao principalmente nos valores da ureia, pois em
todas as vacas deram alteraes em seus nveis em comparao com os nveis de
referncia. Por isso importante saber que atravs do desvio padro consegue-se
perceber essa sensibilidade da margem, assim como no coeficiente de varincia.

4 CONCLUSO

Para um entendimento melhor sobre o animais, nos quais fizemos a

coleta de sangue, entrevistamos um mdico veterinrio.
Mdico Veterinrio: Roniery Carlos Gonalves Galindo
CRMV: 0536
15 anos de formao (agosto de 2000)
1.

Qual a influncia do stress na produo de leite nos bovinos?

Influencia diretamente na reduo da produo de leite, a temperatura, alimentao,

o ambiente so os principais fatores. Como exemplo no Brasil gado holands teve
que realizar o cruzamento com Gir para ser o gado mais resistente o Girolando.
2.

Quais principais doenas que acomete o gado leiteiro?

Mastite que pode ser ambiental pelas fezes ou contagiosa pelas feridas,
brucelose, tuberculose e endometrite.
3.
Quais raas predominantes no estado de Sergipe?
Raa Europeia holandesa, Girolando e Gir leiteiro.
4.
Quantos anos uma novilha est pronta para sua primeira cria?
Na puberdade, que vai depender da raa as menores entram mais cedo, mais ou
menos 2 anos.
5.
Vida produtiva dos bovinos?
6 partos , em torno de 10 anos , com 1 ano de intervalo.
6.
Doenas que acometem a corrente sangunea dos animais?
Babesiose(doena parasitaria do plasma), trypanossoma vivax.
7.
Parasitas mais acometem os bovinos?
Clostridiose, leptospirose
8.
Como e quando realizar uma transfuso sangunea nos animais?
Quando ocorre: Geralmente quando apresenta hemorragia aguda, reduo de
protenas no sangue (no plasma), caso de doenas heptica, casos de anemia.
Como ocorre: pelo doador com o receptor. O doador tem que ter o peso ideal, em
caso de pequeno ruminante de 50 a 70 kg, se for bovino 300 kg, e aps calcular o
percentual que pode retirar do doador.
O diagnstico presuntivo de qualquer doena em animais, seja bovina
no caso do nosso trabalho, baseado na anlise da resposta dos exames
laboratoriais. O objetivo deste estudo foi realizar a comparao de exames
laboratoriais em bovinos, com o intuito de aplicar o conhecimento em estatsticas

para melhor compor e entender os dados coletados. Para cada integrante do grupo,
foi muito interessante e gratificante aprender mais sobre a nossa futura profisso.
Ver e sentir a emoo de tocar o animal, de retirar seu sangue, colocar o
aprendizado em prtica, nos fez crescer ainda mais. Se muitos profissionais
soubessem que ir a campo e vivenciar de perto o que ser uma rotina a partir da sua
formatura, teramos mais profissionais compromissados com a profisso. Atravs
dessa pesquisa podemos analisar com parmetros estatsticos que um dos exames
bioqumicos deram todos alterados nas vacas, que foi o nvel de ureia.
Aprendemos muito e gostaramos de sugerir que seja feitos mais
pesquisas e prticas de campo, no s com bovinos mais com outros animais
tambm.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

NOVAIS, A.A. Prevalncia do grupo sanguneo DEA 1 (subgrupos 1.1 e 1.2) em

ces. 1996. 49 f. Dissertao (mestrado em Medicina Veterinria) Universidade
Estadual Paulista Jaboticabal,1996.
BTFEPA, FINCO, D.R. Canine and feline nephrology and urology. Baltimore:
Williams & Willkins, 1995. 960 p. PEREIRA, P.M., REICHMANN, P. Transfuso de
sangue e seus derivados. In: ANDRADE, S. F. Manual de Terapeutica Veterinaria. 2.
ed., So Paulo: Roca, 2011. p. 491-503.
PEREIRA, P.M., RAMALHO, F.S. Transfuso Sangunea. Clnica Veterinria, v.34,
n6, p. 34- 39, 2001. VILLIERS, E., BLACKWOOD, L. BSAVA : Manual of Canine and
Feline Clinical Pathology. 2nd ed. Gloucester: BSAVA, 2005. 451 p. WILLARD, M.D.,
TVEDTEN, H., TURNWALD, G.H. Small animal clinical diagnosis by laboratory
methods. Philadelphia: W.B. Saunders, 1989. 380 p