Caderno de Atividades Experimentais

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1. PARTES DO MICROSCPIO Mecnicas a) P: feito de ligas de metais pesados para impedir que o aparelho tombe. b) Estativo: haste ou suporte que se articula com o p, sustenta o tubo, a platina, o condensador, o aparelho e os mecanismos macromicromtricos. c) Platina ou mesa: de forma redonda ou retangular, fixa, mvel ou giratria no plano horizontal ou ento apresenta uma parte inferior fixa ao estativo e outra superior, deslizante. As platinas fixas geralmente compensam sua Imobilidade por meio de peas deslizantes, chamadas "charriot". Entre as garras do ltimo se encaixa a lmina com o material a ser estudado: pode ser deslocado para frente, para trs, direita ou esquerda, sempre no mesmo plano, por meio de cremalheiras laterais. No centro h uma abertura para a passagem dos raios luminosos, coletados pelo espelho, e dirigidos pelo condensador e o diafragma sobre a preparao entre lmina e a lamnula, projetando da atravs do tubo e da ocular at a retina do observador. d) Tubo: no microscpio monocular o tubo representa um cilindro metlico, com um encaixe posterior, da preciso para sua adaptao a outro encaixe, porm de corte investido na cremalheira. e) Dispositivos macro e micromtrico: entre o tubo e o estativo h uma pea deslizante em sentido vertical, acionada por dois tipos de "botes" os "macromtricos" e "micro-mtricos". Com o mecanismo macromtrico obtm-se focalizao tica grosseira da pea a ser examinada, enquanto que, com o dispositivo micromtrico obtm-se deslocamentos do tubo at de dois milsimos de milmetro ou menos ainda, dando desta forma nitidez imagem. f) Revlver: colocado na extremidade inferior do tubo nos modelos mais antigos ou dos dispositivos macro e micro-mtricos nos instrumentos modernos de tubo bipartido. munido de 3 ou 4 vos circulares, providos de matrizes para roscas. Nestas matrizes se enroscam as 3 ou 4 objetivas, sempre na ordem de seu aumento progressivo. Basta, ento, durante os trabalhos microscpicos, fazer girar mecanismos de cmbio de objetivas ou revlver em um s sentido, para obter-se aumentos sucessivos ou vice-versa, j focalizados, pelo menos, macrometricamente.

ticas
a) Oculares: so encaixadas nas extremidades superiores do tubo. Podem ser retiradas e substitudas facilmente segundo a necessidade do momento. importante saber que as oculares ampliam apenas a imagem formada pela objetiva. No tornam mais ntidas as estruturas do objeto a ser estudado. Seria ilgico, portanto, empregarem-se nos trabalhos microscpicos objetivas de pouco aumento prprio e oculares de grande poder de ampliao. Tambm no se pode aconselhar o uso simultneo de objetivas e oculares de forte aumento. O campo visual seria pouco ntido nas estruturas das clulas. Por exemplo, se apresentariam apagadas, quase no haveria luminosidade e o campo tico seria mnimo. No estudo geral das clulas ou dos tecidos e no controle dos processos de colorao e diferenciao dos cortes so suficientes oculares com aumento prprio pequeno ou mdio. H, assim, satisfatria nitidez das estruturas, campo visual grande bem uniformemente iluminado e poupana de nossa vida. Na escolha das oculares para um microscpio h um princpio importante a observar: que as qualidades ticas das mesmas somente atingem seu grau mximo de aproveitamento quando esto combina-

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das com as objetivas certas. b) Objetivas: so sistemas ticos, construdos com 4 a 6 ou mais lentes superpostas. Alm de fornecerem uma imagem ampliada de um objeto qualquer, procuram corrigir tambm os defeitos cromticos dos raios luminosos e de esfericidade. c) Condensador com diafragma: o condensador est colocado por baixo da platina. Sua funo fornecer bastante luz. Para tanto provido de um sistema de lentes convergentes, que concentram e jogam o maior nmero de feixes luminosos pela lente frontal da objetiva. indispensvel quando se empregam grandes aumentos. O condensador, idealizado por Abee e aperfeioado cada vez mais, permite ao pesquisador obter a iluminao desejvel para cada caso. H condensadores para o "campo claro" e contrastes de fases para campo escuro. No campo claro a lente frontal geralmente "desvivel", o que permite iluminarem-se rapidamente grandes campos claros, quando os trabalhos so executados com aumentos pequenos. Todos os condensadores para o campo claro e contrastes de fases esto equipados com um diafragma do sistema ris, cuja abertura regulvel para perfeito ajuste a cada caso. Alm disso, h uma cremalheira, que permite o afastamento total do diafragma. Fecha-se o diafragma, quando se usa objetivas de pouco aumento, para eliminar os raios laterais. Abrese o diafragma na medida em que se vo aumentando as ampliaes. d) Espelho: encaixado por baixo do condensador, num vo do p do microscpio. redondo e articula-se entre duas laterais. Uma de suas faces plana e a outra cncava. A primeira colhe e projeta os raios paralelos e divergentes e a segunda os convergentes. O espelho cncavo usado nas ampliaes pequenas; o plano, juntamente com o condensador, nas grandes e nas imerses. 2. AUMENTO DE UM MICROSCPIO calculado atravs da multiplicao do aumento da ocular pelo aumento da objetiva. 3. FOCALIZAO DE UM MICROSCPIO Objetivas e distncias focais a) procurar a objetiva de menor aumento. b) acertar a iluminao do microscpio de acordo com a objetiva a ser usada. c) olhando por fora da ocular, ir movendo o canho para baixo por meio do parafuso macromtrico at que a objetiva se aproxime o mais possvel da lmina sem tocar nela. d) olhando agora atravs da ocular, girar o parafuso macromtrico em sentido inverso (elevando o canho) at perceber o foco (enxergar alguma coisa). e) dar nitidez imagem com o parafuso micromtrico. 4. CUIDADOS COM O MICROSCPIO a) no deve ficar exposto luz ou ao calor. b) aps o uso limpar as objetivas com um papel prprio ou pano macio. c) para transportar o microscpio, segur-lo pelo estativo e pela base. d) s girar os parafusos macromtrico e micromtrico quando houver real necessidade. 5. MANEJO DO MICROSCPIO Para manejar corretamente um microscpio deve-se obedecer aos seguintes passos: Iluminao - Regular o espelho em direo fonte de luz, observando com a ocular e a objetiva de menor aumento, mover espelho de tal forma que o campo fique uniformemente iluminado Regular a quantidade de luz do diafragma. Observao: O material a ser observado estar sobre uma lmina de vidro e recoberto por uma lamnula . Deve se colocada sobre o centro de abertura da platina. No esquecer que o material a ser observado

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deve ser suficientemente delgado a fim de permitir a passagem de luz. Foco: Procure colocar a objetiva de menor aumento em posio de observao. Olhando lateralmente o microscpio, girar o macromtrico aproximando a objetiva at mais ou menos meio centmetro de lmina de vidro. Olhando agora atravs da ocular afastar lentamente a objetiva do preparado at o aparecimento das estruturas. Ajustar o foco em auxlio do micromtrico. Para observar com maior aumento, gira-se o revolver ajustando a objetiva selecionada sem desfocar. Melhorar o foco com o micromtrico e realizar as atividades propostas; retirar as lminas do microscpio, voltar a objetiva de menor nmero, afastar o canho da platina. As lminas de vidro devem ser limpas com gua e detergente, ou ainda, preferencialmente com xilol. As oculares e objetivas com o auxlio de um papel bem suave, absorvente. Nas observaes, com objetivas de imerso, usado leo de cedro ou nupol e a limpeza dever ser feita com o auxlio de ter. 6. CUIDADOS COM O MICROSCPIO - O microscpio, quando no estiver em uso dever ser resguardado da poeira. - Como transport-lo: Use as duas mos, uma segurando o brao do microscpio e a outra sustentando-o pela base. - Nunca carregue o aparelho usando apenas uma das mos; - No gire o micromtrico indefinidamente para mover o canho, pois poder estragar o seu delicado mecanismo. Use-o somente para ajustar o foco e para as observaes de profundidade; - No passe os dedos nas lentes para limp-las. O vidro das lentes facilmente arranhvel, por isso s podemos usar um papel especial bem macio, para limp-las; - Evite molhar o microscpio quando estiver trabalhando, se isto ocorrer, seque-o com um paninho macio. - No desmonte qualquer parte do microscpio. Este um instrumento muito caro, portanto, todo cuidado pouco. 7. PRTICA: Ttulo: MICROSCOPIA Material: microscpio; lminas; lamnulas; lpis marcador; iluminadores; conta-gotas; gua; jornal; fios de cabelo Procedimento: Atividade (1) - Inverso de imagens 1. Com auxlio de um lpis marcador faa um F na lmina, conforme o esquema:

F
2 - Observar no microscpio deslocando lentamente a lmina de uma extremidade a outra. Use a objetiva de menos aumento.

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3 - O que aconteceu?......................................................................................................................................... .............................................................................................................................................................................

4-- Esquema:

PRTICA 2 - OBSERVAO DAS CLULAS DA MUCOSA BUCAL Material: microscpio; lmina; lamnulas; iluminadores; lpis-marcador; conta-gotas, gua; palito de fsforo; corante: azul de metileno ou tinta de caneta; papel filtro; - mucosa bucal. Procedimento: I - Com a ponta mais grossa de um palito, raspe, cuidadosamente, a parte interna de sua boca (bochecha). 2 - Coloque a massa esbranquiada que esto na ponta do palito numa lmina com um pouco de gua e cubra com uma lamnula. 3 - Observe ao microscpio e procure identificar as clulas. 4 - Se voc no conseguir identificar as clulas, coloque junto lamnula uma gotinha de um corante (azulde-metileno, ou mesmo tinta de caneta, no lado 'oposto da lmina encoste um pedao de papel filtro para chupar a gua que esta sob a lamnula. Desta maneira voc poder substituir o lquido que esta embaixo da lamnula sem necessidade de desmontar a lmina. LMINA DE MUCOSA BUCAL Preparao da lmina a) usando-se um cotonete, retirar clulas da mucosa da face interna da bochecha; fazer um pequeno esfregao em uma lmina; colocar uma lamnula sobre o esfregao; corar com azul de metileno, colocando uma gota do corante; e) no lado oposto da lamnula, encoste um pedao de papel de filtro para tirar o excesso de corante.

Prepare outra lmina pelo mesmo processo, utilizando o corante lugol. - Focalizao da lmina Seguir as instrues descritas nos fundamentos tericos. - Conseguiu observar as clulas?............................................................... - Qual o seu aspecto geral?.......................................................................... - Observou o ncleo? Faa um esquema da clula..............................................

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PRTICA :3 - OBSERVAO DE CLULAS DE CEBOLA Material: microscpio; lminas e lamnulas; iluminadores; pinas; lmina de barbear; corante: azul-demetileno; Vermelho neutro (corante vital); cebola. Procedimento: 1 - Com o auxlio de uma lmina de barbear corte uma cebola (sentido longitudinal), em 4 pores; 2 - Pegue uma das escamas e faa na parte cncava um leve cor te transversal e com o auxlio de uma pina, ou mesmo a unha, tente retirar uma finssima pelcula, que reveste internamente a escama (epiderme de escama); 3 - Com o pedacinho da epiderme, prepare uma lmina para observar ao microscpio; 4 - Se voc tiver dificuldades em observar as estruturas das clulas, poder usar um dos corantes. Observao: Se usar o vermelho neutro, corar as clulas sem mat-las. Procure observar o ncleo e o nuclolo;

Tente localizar o citoplasma e o vacolo; Observe que as clulas esto limitadas por paredes bem ntidas e definidas. Responda: - Qual o formato das clulas?........................................................................................................... - O citoplasma homogneo?.......................................................................................................................... - O ncleo ocupa uma posio central?........................................................................................................... - Como atua um corante vital?..........................................................................................................................

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