A UNIDADE DA VIDA E O DESENVOLVIMENTO BIOLÓGICO

90524- ETAPA: 1ª

PROTOCOLO 01/2023

OBJETIVOS:

• APRESENTAR O MICROSCÓPIO DE LUZ QUE SERÁ UTILIZADO AO LONGO

DO SEMESTRE

APRESENTAÇÃO DA MICROSCOPIA DE LUZ

Professor responsável

1. Introdução
A microscopia óptica ou de luz, como o próprio nome indica, possibilita o aumento de imagens através da
luz que, após incidir sobre determinada amostra, passa por um conjunto de lentes. O avanço deste tipo de
microscopia, portanto, ocorreu atrelado ao desenvolvimento da óptica, ou seja, o ramo da Física que estuda a luz e
sua interação com distintos meios e materiais.
Os primeiros microscópios foram criados a partir de 1590 e seus fabricantes foram Zacarias e Francis
Janssen (que fabricavam óculos na Holanda). Vários cientistas contribuíram para o desenvolvimento desta área,
dentre eles Galileu Galilei, Marcello Malpighi, Antoine van Leeuwenhoek e Robert Hooke. Este último popularizou o
uso do microscópio entre os biologistas e foi o primeiro a usar o termo célula no estudo dos seres vivos. Além de
1
ampliar a imagem de um objeto, o microscópio serve para aumentar o poder de resolução do olho humano . Poder
de resolução é a capacidade de distinguir dois pontos muito próximos um do outro. Os microscópios ópticos têm um
2
limite de resolução da ordem de 0,2 μm , ou seja, as lentes destes microscópios conseguem mostrar dois pontos
distintos se estes estiverem separados por distâncias de pelo menos 0,2 μm. É importante lembrar que para uma
estrutura ser observada através de um microscópio óptico, é necessário que ela seja suficientemente fina para
deixar que os raios luminosos a atravessem, além de ter índices de refração ou coloração diferentes do meio que a
circundam.

2. Objetivos

Identificar as partes componentes e treinar o manuseio de um microscópio óptico.

3. Partes componentes do microscópio óptico

3.1. Base: é o suporte do microscópio, peça que sustenta todas as outras.
3.2. Braço: é a peça que liga a base até a parte superior do microscópio e onde se deve segurar o microscópio para
ser transportado.
3.3. Mesa ou platina: é uma placa de metal com um orifício no centro, por onde passam os raios luminosos. O objeto
que vai ser observado é colocado sobre uma lâmina de vidro e esta, sobre a platina, exatamente em cima do orifício.
3.4. Charriot: localizado acessória e superficialmente à platina, é formado por uma presilha, dois botões giratórios e
dois trilhos que têm a função de movimentar a lâmina no plano horizontal (da frente para trás e da esquerda para a
direita, ou vice-versa) e assim permitir a observação de toda a sua área.
3.5. Canhão: parte mais superior do microscópio, contém um conjunto de espelhos que projetam a imagem em
direção às oculares nele encaixadas. A distância interpupilar, ou seja, a distância entre as oculares, pode ser
regulada por um mecanismo existente no canhão.
3.6. Revólver: peça encontrada abaixo do canhão na qual se inserem várias lentes objetivas. É dotado de um
movimento de rotação que permite posicionar a objetiva desejada para a observação do material a ser analisado.
3.7. Fonte de luz: normalmente uma lâmpada ou, em modelos mais antigos, um espelho, que se apóia na base do
microscópio. No caso da fonte de luz ser uma lâmpada, pode-se observar, ao lado Do braço ou da base do
microscópio, o interruptor da lâmpada e o regulador da intensidade luminosa.

1
Limite de resolução do olho humano – LR = 0,1 a 0,2 mm
2
micrômetro (μm) 10-6 m ou 10-3 mm (0,001 mm)
nanômetro (nm) 10-9 m ou 10-6 mm (0,000001 mm)
angström (Å) 10-10 m ou 10-7 mm (0,0000001 mm) 1

3.8. Condensador: de forma circular e situado entre a platina e a base, o condensador converge os raios luminosos
provindos da lâmpada e projeta-os como um cone de luz sobre o material que está sendo examinado.
3.9. Receptáculo do filtro: peça de forma circular, presa ao condensador, destinada à recepção de um filtro. Este é
uma placa de vidro colorida (azul, verde, etc.) que torna a luz adequada ao uso.
3.10. Diafragma ou íris: fica acima do receptáculo do filtro e se liga a uma alavanca que permite sua abertura ou
fechamento, levando ao controle da passagem total ou parcial da luz.
3.11. Objetivas: são lentes que projetam uma imagem aumentada e invertida do objeto nas oculares e inserem-se ao
revólver, através de rosca. Toda objetiva traz gravado o número do aumento que proporciona (ver figura 2). A
objetiva de 100x é também chamada objetiva de imersão e é somente utilizada com óleo especial, o qual permite
maior refração da luz para dentro da objetiva, corrigindo a pouca luminosidade nas observações feitas em grandes
aumentos. Após o uso, o óleo é removido com xilol, éter ou benzina, embebido em papel especial ou algodão.
3.12. Ocular: aumenta a imagem do objeto após o aumento já proporcionado pela objetiva. É através desta lente que
o observador vê a imagem do objeto (daí o nome ocular, uma vez que o olho do observador está colocado à frente
dela) como se ela estivesse situada a 25 cm da ocular. Toda ocular traz gravado o número de aumentos que
proporciona. Par saber-se em que aumento se está observando um objeto ao microscópio, basta multiplicar o
número do aumento dado pela objetiva pelo número do aumento dado pela ocular. Por exemplo, se a objetiva usada
aumenta 5 vezes e a ocular aumenta 10 vezes, o objeto está sendo observado com um aumento total de 50 vezes.
Em microscópios binoculares, normalmente há, na base de uma ou de ambas oculares, um anel de ajuste de
dioptria para equalizar possíveis diferenças no ponto de foco entre os olhos.
3.13. Parafusos macrométrico e micrométrico: na parte lateral do braço existem 2 parafusos encaixados um no
outro. O maior deles é o macrométrico, que permite grandes avanços ou recuos da platina em direção à objetiva,
enquanto o parafuso micrométrico permite pequenos avanços ou recuos. Esse movimento da platina leva à
focalização do material observado em diferentes aumentos.

4. Normas corretas de manuseio e focalização de imagens ao microscópio óptico

4.1. Descubra o microscópio, desenrole o cabo de força e conecte-o na voltagem correta.

4.2. Gire o revólver, encaixando a objetiva de menor aumento (4x ou 10x).
4.3. Coloque a lâmina sobre a platina, segurando-a com uma das mãos e abrindo a presilha com a outra.
4.4. Acenda a luz do microscópio (acione primeiramente o interruptor e em seguida o pontenciômetro de
intensidade) e centralize o material no orifício da platina utilizando os parafusos do charriot. Faça isso olhando
lateralmente, o que facilita a operação.
4.5. Movimentando o parafuso macrométrico, levante a platina até o ponto máximo, sem que a lâmina encoste na
objetiva.
4.6. Ajuste a distância interpupilar, olhe através das oculares e, ainda utilizando o parafuso macrométrico, desça
lentamente a platina até que se possa visualizar o material a ser analisado.
4.7. Acerte o ponto exato do foco com o parafuso micrométrico e, caso seja necessário, proceda ao ajuste de
dioptria: tape um dos olhos, focalize com o parafuso micrométrico, troque o olho tapado e ajuste o foco no anel
existente na base da ocular correspondente ao olho aberto.
4.8. Corrija a intensidade de luz e abertura do diafragma para evitar ofuscamento e permitir a percepção de
profundidade de campo e o contraste desejados. Atenção: o condensador deve ser mantido na sua posição mais
alta.
4.9. Observe o material atentamente trabalhando o foco fino com o parafuso micrométrico. Para percorrer outro
campo da lâmina, utilize o charriot.
4.10. Gire o revólver para passar para a próxima objetiva de maior aumento, lembrando sempre de regular a
intensidade de luz e a abertura do diafragma, bem como corrigir a focalização com o parafuso micrométrico.
4.11. Para utilizar a objetiva de 100X é imprescindível o emprego do óleo de imersão sobre a lâmina, o qual deverá
será removido da objetiva com os devidos cuidados logo após o uso.
4.12. Terminada a observação, encaixe a objetiva de menor aumento, abaixe um pouco a platina, deixe a
intensidade de luz no mínimo e desligue-a, retire a lâmina, limpe o microscópio, cubra-o com a capa e guarde-o.
5. Procedimento da aula
5.1. Identifique as partes componentes do microscópio disposto sobre a bancada, a partir das explicações dadas e
da descrição acima, e complete o esquema da figura 1.

Atividade prática – Identificar as partes do microscópio

Figura 1: Esquema de um microscópio óptico, indicando suas principais partes.

6. Bibliografia

a
JUNQUEIRA, L.C. & CARNEIRO, J. Biologia Celular e Molecular. 7 edição. Ed. Guanabara
Koogan, Rio de Janeiro. 2000. 339 p.
 12
1

11
3

10

4
13
5
9
6

8
7