Escola Secundária de Seomara da Costa Primo

Biologia e Geologia
Ficha Informativa - Introdução às técnicas de microscopia ótica

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____ºº ano turma ……. nº…………….

MICROSCÓPIO

A invenção do microscópio, em 1591 pelos holandeses Hans Janssen e Zacarias, permitiu descobrir um
mundo nunca antes conhecido e de cuja existência nem sequer se suspeitava – o mundo dos
microorganismos. Assim, ao microscópio ótico composto é possível observar estruturas que olho humano
não consegue atingir, como por exemplo as células de pequenas dimensões e os seus organelos.
Embora a descoberta do microscópio tenho sido no final do séc. XVI, pelos holandeses que trabalhavam
em lentes (óculos), só em 1665, Robert Hook, ao observar um pedaç
pedaçoo de cortiça, por um microscópio que
ele desenvolveu, reparou que aquele material era constituído por compartimentos a que deu o nome de
células.. Desta notável descoberta até à formulação da Teoria Celular levou mais de um século (formulada
em 1839).

Teoria
ia Celular assenta nos seguintes princípios:
- Todas as células provém de células pré
pré-existentes;
- A célula é a unidade básica de todos os seres vivos;
- A célula é a unidade de reprodução, des
desenvolvimento e hereditariedade.

O microscópio mais utilizado nos laboratórios escolares é o microscópio ótico composto (MOC), assim
designado por possuir dois sistemas de lentes, de vidro ou de cristal. O funcionamento do MOC baseia-se
baseia
no facto de a estrutura (objeto) que pretendemos observar ser atravessada por um feixe de luz, que será
refratada ou absorvida pelo objeto, criando contraste entre si e o meio envolvente. Deste contraste
resulta a imagem que se observa no campo do MOC. Assim, quanto mais fino for o objeto a observar,
melhor é a qualidade da imagem obti
obtida.

O limite de resolução é a menor distância que separa dois pontos muito próximos de forma a poderem
ser distinguidos com clareza.

Nas aulas de microscopia poderá observar preparações frescas e/ou preparações definitivas. Ambas têm
vantagens e desvantagens.
Preparações frescas – são feitas no momento, com material colocado no meio de montagem, entre a
lâmina e lamela. O material pode estar vivo ou morto. Podem usar
usar-se
se alguns corantes para destacar
estruturas específicas a observar.
Preparações definitivas – são feitas por técnicos de microscopia, em laboratórios sofisticados, recorrendo
a técnicas de corte muito precisas e ao uso de múltiplos corantes que salientam diferentes estruturas
com cores distintas. O material biológico usado está sempre morto. São preparações seladas com resinas
sintéticas, não permitindo qualquer contacto com o objeto a observar.

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Constituintes do microscópio
Componente óptica - Fonte de luz,
condensador, objetivas (ampliam a
imagem) e oculares (capta a imagem
ampliada pela objectiva).. Estes
componentes formam a imagem
ampliada da estrutura observada.

Componentes mecânicas - Base ou pé,

braço, platina, parafusos macro e
micrométrico,
étrico, revólver e o canhão da
ocular. Estes componentes estabilizam
o sistema de lentes que produzirá a
imagem a partir da estrutura que
estamos a observar.

MODO DE PROCEDER:

1. Verificar se a objetiva de menor ampliação se encontra em posição de observação. Se tal não se

verificar, selecioná-la
la rodando o revólver. Quando se ouve um estalido é sinal de que a objetiva está
em posição. Descer a platina.

2. Iluminar o campo do microscópio: verificar se o diafragma está aberto e ligar a fonte luminosa. Se o
microscópio não tiver luz incorporada, utilizar o espelho: virar a face plana para cima se se usar luz
natural, ou a face côncava se se usar luz artificial
artificial.. Regular o espelho em busca de uma boa captação
de luz.

3. Colocar
locar a preparação na platina, centrando o objeto a observar no orifício por onde passa o feixe de
luz; prender a preparação com as pinças.

4. Observando através da ocular, rodar lentamente o parafuso

o macrométrico, para fazer a focagem
grosseira do objeto.

5. Verificar a abertura do diafragma e a posição do condensador para ajustar a iluminação do

d campo do
microscópio de acordodo com o material que se está a observar.

6. Utilizando apenas o parafuso micromét

micrométrico,
rico, corrigir a focagem até se obter uma imagem nítida.

7. Colocar a objetiva de ampliação imediatamente superior àquela que se estava a usar e ajustar a
nitidez da imagem apenas com o parafuso micrométrico.